Структурно-цитохимические критерии активации нейтрофильных лейкоцитов у больных инфарктом миокарда

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

АВТОРЕФЕРАТ

Структурно-цитохимические критерии активации нейтрофильных лейкоцитов у больных инфарктом миокарда

14.00.15 - патологическая анатомия

14.00.06 - кардиология

Лищенко Оксана

Волгоград - 2006

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию нейтрофил кровь лейкоцит компьютерный

Научные руководители: доктор биологических наук профессор

Славинский Александр Александрович

доктор медицинских наук профессор

Скибицкий Виталий Викентьевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор

Новочадов Валерий Валерьевич

доктор медицинских наук профессор

Лямина Надежда Павловна

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Инфаркт миокарда - наиболее распространенное сердечно-сосудистое заболевание и одна из главных причин смерти больных (Беленков Ю.Н., Мареев В.Ю., Агеев Ф.Т., 2005). Роль ишемически-реперфузионного повреждения при инфаркте миокарда, когда в ишемизированной сердечной мышце происходит восстановление кровотока, недостаточно выяснена. Реперфузия приводит миокард в состояние "оглушения", при этом ишемическое повреждение часто сменяется реперфузионным. Большую роль в развитии этого состояния играет "окислительный стресс" (Lefer D.J., Granger D.N., 2000). Основной источник свободных радикалов в постишемическом реперфузионном периоде - нейтрофильные лейкоциты (Duilio C. et al., 2001). Активированные нейтрофилы и вырабатываемые ими свободные радикалы кислорода являются одним из основных факторов реперфузионного повреждения миокарда (Chakraborti T. et al., 2000; Zhao Z.Q. et al., 2000), вызывают эндотелиальную дисфункцию (Laude K. et al., 2001; Das U.N., 2000), ведут к развитию реперфузионных желудочковых аритмий (Hoffmeyer M.R., et al., 2000).

Реперфузия инфарктной зоны увеличивает воспалительный ответ, ведущий к выработке медиаторов, которые вызывают появление в зоне некроза активированных нейтрофилов (Kharbanda R.K. et al., 2001; Frangogiannis N.G. et al., 2002). Установлено, что прогноз ишемической болезни сердца связан с увеличением их функциональной активности (Маянская С.Д. и соавт., 1999). Размер популяции активированных нейтрофильных лейкоцитов при инфаркте миокарда коррелирует с обширностью поражения сердечной мышцы (Kassirer M. et al., 1999).

Зрелые нейтрофильные лейкоциты имеют высокоорганизованную внутреннюю структуру и обладают мощными ферментными системами. По распределению в гранулах и в интергранулярной цитоплазме цитохимических маркеров активации (НАДФН-оксидазы, щелочной фосфатазы, миелопероксидазы, нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы) можно судить о функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов (Славинский А.А., 2000). Использование компьютерного анализа клеточного изображения позволяет получить более достоверные, чем при обычной световой микроскопии, сведения о состоянии нейтрофилов, которые во многом соответствуют данным электронно-цитохимических исследований (Левин Г.Г., Козинец Г.И., 1997).

Таким образом, определение функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов у больных с различной тяжестью заболевания имеет несомненное значение для разработки новых подходов к диагностике, лечению и прогнозированию исходов при инфаркте миокарда.

Цель исследования. Выявить характерные для инфаркта миокарда структурно-цитохимические признаки активации нейтрофильных лейкоцитов при различной тяжести заболевания для определения их повреждающего действия на миокард.

Задачи исследования:

1. Определить состояние циркулирующих нейтрофилов у больных инфарктом миокарда по цитохимическим маркерам активации клеток и установить количественные показатели активации по активности и распределению в цитоплазме НАДФН-оксидазы и щелочной фосфатазы.

2. На основе компьютерного анализа клеточного изображения определить состояние азурофильной зернистости циркулирующих нейтрофилов в динамике инфаркта миокарда по геометрическим и оптическим параметрам гранул миелопероксидазы и нафтол-АS-D-хлорацетат эстеразы.

3. Выявить особенности активации нейтрофилов крови у больных инфарктом миокарда с разными классами острой сердечной недостаточности.

4. Установить изменение активности нейтрофилов крови у больных инфарктом миокарда после проведения тромболитической терапии в зависимости от наличия реперфузионных нарушений ритма сердца.

5. Оценить информативность определения функционального состояния нейтрофильных лейкоцитов при помощи компьютерного анализа клеточного изображения у больных с различной тяжестью заболевания.

Научная новизна работы:

Установлены основанные на компьютерном анализе клеточного изображения цитохимические признаки активации циркулирующих нейтрофильных лейкоцитов в динамике инфаркта миокарда. Активация нейтрофилов крови, связанная с увеличением активности НАДФН-оксидазы и щелочной фосфатазы клеток, сохраняется в течение первых 3-х недель заболевания.

Получены новые данные о количественных показателях активации нейтрофильных лейкоцитов у больных с различными классами острой сердечной недостаточности. К концу первой недели инфаркта миокарда выявлено уменьшение активации нейтрофилов у больных с I и II классом острой сердечной недостаточности и повышение активности клеток у пациентов с отеком легких или кардиогенным шоком.

Выявлены неизвестные ранее особенности внутриклеточного распределения цитохимических маркеров активации нейтрофилов у больных инфарктом миокарда с реперфузионными аритмиями, развившимися после проведения тромболитической терапии. Высокая активность НАДФН-оксидазы нейтрофильных лейкоцитов в первые сутки заболевания может быть использована в качестве предвестника развития реперфузионных нарушений ритма.

Научно-практическая значимость. Выявленные изменения цитохимических показателей нейтрофильных лейкоцитов являются дополнительным критерием для суждения о тяжести инфаркта миокарда. Результаты исследования углубляют представление об особенностях патологического процесса в миокарде и могут быть использованы в клинической лабораторной диагностике. Высокая активность НАДФН-оксидазы нейтрофилов у больных в первые сутки инфаркта миокарда при наличии показаний к проведению тромболитической терапии является предвестником развития реперфузионных аритмий.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Активация циркулирующих нейтрофильных лейкоцитов при инфаркте миокарда проявляется увеличением активности щелочной фосфатазы и НАДФН-оксидазы, которая сохраняется на высоком уровне в течение первых 3-х недель заболевания. В активированных нейтрофилах происходит увеличение активности миелопероксидазы и нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы в гранулах и снижение их активности в интергранулярной цитоплазме, что является структурно-цитохимическими признаками активации азурофильной зернистости нейтрофилов при инфаркте миокарда.

2. Повышение активности щелочной фосфатазы в гранулах и интергранулярной цитоплазме нейтрофилов у больных с отеком легких или кардиогенным шоком к концу первой недели инфаркта миокарда отражает тяжесть заболевания.

3. Высокая активность НАДФН-оксидазы нейтрофильных лейкоцитов в первые сутки заболевания у больных с наличием показаний к тромболитической терапии является цитохимическим предвестником развития реперфузионных нарушений ритма сердца.

Внедрение результатов исследования. По материалам исследования опубликовано 13 печатных работ, из них 6 в центральной печати. Основные положения диссертации представлены на XXIX научной конференции студентов и молодых ученых вузов Юга России (Краснодар, 2002), на I Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине (Тула, 2002), на научно-практической конференции терапевтов ЮФО "Формулярная система, стандарты России в клинике внутренних болезней" (Ростов-на-Дону, 2003), на I Всероссийской конференции по иммунотерапии с международным участием (Сочи, 2003), на II Съезде Российского общества патологоанатомов (Москва, 2006).

Способ прогнозирования развития реперфузионных аритмий сердца при проведении тромболитической терапии у больных инфарктом миокарда внедрен в практику работы МУЗ КГКБСМП, в Городской больнице № 1 г. Краснодара. Полученные данные об участии нейтрофильных лейкоцитов крови в патогенезе инфаркта миокарда внедрены в учебный процесс на кафедрах патологической анатомии, госпитальной терапии, пропедевтики внутренних болезней Кубанского государственного медицинского университета.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 166 машинописных страницах, содержит 20 таблиц, 26 рисунков (гистограммы, компьютерные изображения нейтрофильных лейкоцитов). Работа состоит из введения, 6 глав, выводов, указателя использованной литературы и приложений. Библиография включает 275 источников, из них 75 на русском языке и 200 - на иностранных языках.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обследовано 96 пациентов с инфарктом миокарда (75 мужчин и 21 женщина), госпитализированных в реанимационный блок в первые 12 часов от начала ангинозного приступа. Средний возраст больных составил 59,7±2,9 года. Контрольная группа состояла из 52 практически здоровых человек, средний возраст которых - 50,4±3,6 года.

В зависимости от класса острой сердечной недостаточности (ОСН) все больные были распределены на две группы: в 1-ю группу включены пациенты с I и II классом ОСН (33 и 21 человека), во 2-ю группу - с III и IV классом ОСН (23 и 19 пациентов). Тромболитическую терапию внутривенным введением стрептокиназы проводили 36 пациентам, которых разделили на 2 группы: 1-ю группу составили больные, у которых возникли нарушения ритма сердца (17 человек), во 2-ю группу включены пациенты без реперфузионных аритмий (19 человек).

Кроме общеклинического обследования, применяли комплекс лабораторно-инструментальных методов, необходимый для исключения тяжелых сопутствующих заболеваний. Все больные обследованы в 1-е сутки заболевания, через 1 и через 3 недели. Электрокардиограмму регистрировали в 12 отведениях на аппарате «Hellige EK 56» (Германия). Эхокардиографическое исследование на 2-й неделе болезни проводили на ультразвуковом аппарате "Combizon 420" (Австрия).

Для цитохимического исследования нейтрофильных лейкоцитов кровь брали из промежуточной вены локтя. Степень активации нейтрофилов определяли с помощью НСТ-теста в модификации И.В. Нестеровой (1980). Активность миелопероксидазы выявляли бензидиновым методом (Sato A., 1928), щелочной фосфатазы - реакцией азосочетания (Шубич М.Г., 1965), нафтол-АS-D-хлорацетат зстеразы - методом А.А. Славинского и Г.В. Никитиной (2000). Проводили визуальную оценку цитохимических реакций с определением среднего цитохимического коэффициента (СЦК).

Компьютерный анализ изображения нейтрофилов проводили с помощью цветной телевизионной системы для микроскопических исследований "MagiScop", изготовленной в НИИ Телевидения (Санкт-Петербург), с использованием пакетов прикладных программ "Magisoft" и "Видеотест". Компьютерному анализу подвергнуты изображения 39600 нейтрофильных лейкоцитов больных и 7800 - лиц контрольной группы.

Анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов производили по следующему алгоритму. При помощи иммерсионной системы микроскопа формировали изображение нейтрофила, которое вводили через телекамеру в видеопамять компьютера. С помощью программной линейной аппроксимации увеличивали изображение клетки, выполняли медианную фильтрацию и контрастирование изображения по гистограмме яркости. Делали бинаризацию изображения по яркости или цвету цитохимической реакции (рис. 1). Последовательно выделяли клетку в целом, гранулы вещества, зону его диффузно-гранулярного распределения (ДГ-зона).

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

В автоматическом режиме измеряли параметры бинарных изображений: средний диаметр Фере, площадь, количество измеренных структур, средняя оптическая плотность. Для характеристики общей активности фермента или общего содержания вещества в клетке вычисляли интегральный цитохимический показатель (ИЦП) - произведение суммарной площади продукта цитохимической реакции в клетке и его оптической плотности.

Статистическая обработка результатов проводилась с использованием программы SPSS. Статистические данные представлены в виде средних величин () и ошибки средней (m). Достоверность различий оценивали по парному t-критерию Стьюдента. При множественных парных сравнениях использовали поправку Бонфферони с установлением уровня значимости p?0,025. Корреляционный анализ проводили с применением метода Пирсона.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Цитохимическая характеристика нейтрофильных лейкоцитов крови в различные периоды инфаркта миокарда

Цитохимические маркеры активации нейтрофильных лейкоцитов наряду с гранулами локализуются в интергранулярной цитоплазме, образуя зону диффузного цитозольного распределения (Славинский А.А., 2000). В связи с этим, для оценки уровня активации нейтрофилов крови активность ферментов мы определяли как в гранулах, так и в диффузной зоне цитоплазмы.

Содержание активированных нейтрофилов в крови в первые сутки инфаркта миокарда составляет 53,0±4,0%, что в 9,6 раза (p<0,001) превышает аналогичный показатель у здоровых людей - 5,5±0,6% (рис. 2). Через 1 неделю количество активированных клеток снижается в 1,4 раза (p<0,05) до 37,6±4,2%, к концу 3-й недели существенно не изменяется, но остается достоверно выше, чем у здоровых людей. Активность НАДФН-оксидазы в первый день заболевания увеличена в 3,2 раза (p<0,001) и составляет 1,68±0,06 отн. ед., через 1 неделю снижается в 1,4 раза (p<0,05) и остается без значимых изменений (p>0,05) к концу 3-й недели болезни (рис. 3А).

Рис. 2. Содержание активированных нейтрофильных лейкоцитов в периферической крови у больных инфарктом миокарда. % - процент активированных клеток, К - контрольная группа.

Активность щелочной фосфатазы в первые сутки инфаркта миокарда в ДГ-зоне цитоплазмы нейтрофилов увеличивается в 2,1 раза (p<0,001) и составляет 6,56±0,14 отн. ед. (рис. 3Б). Активность фермента в гранулах в этот период увеличена в 4,0 раза (p<0,001), а в диффузной зоне цитоплазмы - в 1,4 раза (р<0,05). Через 1 и через 3 недели активность щелочной фосфатазы существенно не меняется и остается достоверно выше аналогичных показателей у здоровых людей.

Активность миелопероксидазы в первые сутки инфаркта миокарда в ДГ-зоне уменьшается до 3,02±0,04 отн. ед., что в 1,7 раза меньше, чем у здоровых людей (р<0,05), и остается без существенных изменений на протяжении 3-х недель болезни (рис. 3В). Активность фермента в гранулах в первые сутки увеличена в 1,3 раза (р<0,05), достигает наибольшего значения через 1 неделю болезни (р>0,05), а к концу 3-ей недели снижается и становится сопоставимой с аналогичным показателем здоровых людей. Активность миелопероксидазы в диффузной зоне цитоплазмы нейтрофилов снижена в 4,2 раза (р<0,01) без достоверных различий в течение первых 3-х недель болезни.

Активность нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы в ДГ-зоне цитоплазме нейтрофилов в первые сутки инфаркта миокарда уменьшается в 2,1 раза (р<0,001) по сравнению с показателями здоровых людей и составляет 7,97±0,16 отн. ед. (рис. 3Г). Через 1 неделю активность фермента становится меньше в 1,4 раза (р<0,01) и существенно не изменяется к концу 3-й недели болезни (р>0,05). В гранулах активность нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы в острый период увеличена в 1,6 раза (p<0,01) и составляет 6,39±0,14 отн. ед., а через 1 неделю данный показатель снижается до нормальных значений. В диффузной зоне цитоплазмы активность фермента уменьшается до 1,58±0,14 отн. ед., что в 8,2 раза (р<0,001) меньше аналогичного показателя у здоровых людей, без существенных отличий в течение первых 3-х недель заболевания (р>0,05).

Рис. 3. Активность ферментов нейтрофильных лейкоцитов у больных инфарктом миокарда (отн. ед.).

А - НАДФН-оксидаза, Б - щелочная фосфатаза,

В - миелопероксидаза, Г - нафтол-AS-D-хлорацетат эстераза;

К - контрольная группа.

Таким образом, с первого дня инфаркта миокарда значительно повышается содержание активированных нейтрофилов в периферической крови. Активация нейтрофилов сопровождается увеличением активности НАДФН-оксидазы и щелочной фосфатазы в цитоплазме клеток. Активность миелопероксидазы и нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы - цитохимических маркеров азурофильной зернистости - увеличивается в гранулах и снижается в диффузной зоне цитоплазмы. Особенности внутриклеточного распределения цитохимических маркеров клеток отражают увеличение функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов в течение первых трех недель инфаркта миокарда.

Характеристика нейтрофилов при инфаркте миокарда с разными классами острой сердечной недостаточности

Сопоставление цитохимической характеристики циркулирующих нейтрофильных лейкоцитов у больных инфарктом миокарда с ОСН I и II класса (1-я группа) и пациентов с ОСН III и IV класса (2-я группа) выявило следующие различия.

У всех больных высокая активность НАДФН-оксидазы в нейтрофилах сохраняется в течение первых 3-х недель заболевания (рис. 4). К концу первой недели от начала инфаркта миокарда у больных первой группы оксидазная активность нейтрофилов остается выше, чем у пациентов 2-й группы (р>0,01) - 1,46±0,05 отн. ед. и 1,02±0,03 отн. ед. соответственно. В остальные периоды активность НАДФН-оксидазы сопоставима в обеих группах.

Активность щелочной фосфатазы нейтрофилов у больных 1-й группы (ОСН I и II класса) достигает наибольшего значения в первый день инфаркта миокарда (7,70±0,27 отн. ед.), а у пациентов 2-й группы (ОСН III и IV класса) активность фермента становится максимальной к концу 1-й недели болезни и составляет 7,24±0,15 отн. ед. (рис. 5). Повышение активности щелочной фосфатазы в каждой из групп больных обусловлено увеличением активности фермента как в гранулах, так и в диффузной зоне цитоплазмы нейтрофилов. Высокая фосфатазная активность клеток у всех пациентов сохраняется в течение 3-х недель болезни.

Рис. 5. Активность щелочной фосфатазы нейтрофилов (отн. ед.) у больных инфарктом миокарда с разными классами острой сердечной недостаточности. К - контрольная группа.

Активность маркеров азурофильных гранул нейтрофилов у больных обеих групп достоверно не различалась. Снижение активности миелопероксидазы и нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы у всех пациентов обусловлено значительным уменьшением активности ферментов в диффузной зоне. В гранулах нейтрофилов наибольшая активность миелопероксидазы у больных 1-й группы выявлена в первые сутки заболевания (2,41±0,10 отн. ед.) и сопровождается увеличением количества гранул фермента. При ОСН III и IV класса активность миелопероксидазы в гранулах (2,98±0,10 отн. ед.) и их количество достигают максимальных значений через 1 неделю от начала заболевания. Активность нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы в гранулах у 1-й группы больных становится сопоставимой с показателем здоровых людей к концу первой недели, а у пациентов с ОСН III и IV класса остается достоверно выше на протяжении 3-х недель болезни.

Таким образом, активность щелочной фосфатазы нейтрофилов является наиболее характерным показателем при суждении о тяжести течения заболевания. Увеличение активности щелочной фосфатазы в нейтрофилах к концу первой недели болезни свидетельствует о неблагоприятном течении инфаркта миокарда.

Характеристика нейтрофильных лейкоцитов больных инфарктом миокарда при тромболитической терапии

У пациентов с реперфузионными аритмиями в первые сутки инфаркта миокарда активность НАДФН-оксидазы нейтрофилов увеличена в 3,8 раза (р>0,001) по сравнению в показателями здоровых людей и составляет 1,97±0,06 отн. ед. (рис. 6), что достоверно выше, чем у больных без нарушений ритма (1,48±0,03 отн. ед.). К концу 1-й недели заболевания в группе пациентов с аритмиями происходит более выраженное снижение активности фер мента. У всех больных сохраняется высокая оксидазная активность нейтрофилов в течение первых 3-х недель заболевания.

Рис. 6. Активность НАДФН-оксидазы нейтрофилов (отн. ед.) у больных инфарктом миокарда в зависимости от наличия (А) или отсутствия (Б) реперфузионных аритмий после тромболитической терапии. К - контрольная группа.

Активность щелочной фосфатазы в ДГ-зоне цитоплазмы нейтрофилов здоровых людей составляет 3,17±0,04 отн. ед, миелопероксидазы - 5,25±0,06 отн. ед., нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы - 16,84±0,19 отн. ед.

При инфаркте миокарда активность щелочной фосфатазы в гранулах нейтрофилов и их количество у всех больных, получавших тромболитическую терапию, значительно превышает показатели здоровых людей на протяжении 3-х недель заболевания. Активность фермента в обеих группах существенно не различается и достигает наибольшего значения к концу 1-й недели болезни (табл. 1).

Активность миелопероксидазы и нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы в нейтрофилах значительно снижается у всех больных за счет уменьшения активности фермента в диффузной зоне цитоплазмы. Активность миелопероксидазы в гранулах в обеих группах остается сопоставимой с аналогичным показателем здоровых людей. Активность нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы в гранулах и их количество у всех больных в первые сутки болезни увеличивается.

Таблица 1.

Активность ферментов в нейтрофилах больных инфарктом миокарда после тромболитической терапии (отн. ед.)

ДГ - диффузно-гранулярная зона, Гр - гранулы, Д - диффузная зона

ИЦП интегральный цитохимический показатель.

У больных с реперфузионными аритмиями активность фермента в гранулярной зоне становится сопоставимой с показателем здоровых людей к концу 3-ей недели заболевания, а у пациентов без нарушений ритма этот показатель нормализуется через 1 неделю от начала болезни и сопровождается уменьшением количества гранул.

У больных с реперфузионными аритмиями найдена высокая корреляционная связь между активностью щелочной фосфатазы и количеством лейкоцитов (r=0,75, р<0,05), а также с уровнем креатинфосфокиназы (r=0,88, р<0,01). Обнаружена прямая связь активности НАДФН-оксидазы в первые сутки у больных с реперфузионными аритмиям с количеством лейкоцитов (r=0,87, р<0,01) и максимальным уровнем креатинфосфокиназы (r=0,82, р<0,05).

Для клинической практики важен поиск предикторов развития реперфузионных аритмий у больных инфарктом миокарда при проведении тромболитической терапии. По результатам исследования, одним из таких критериев является существенное увеличение активности НАДФН-оксидазы нейтрофилов в первые сутки инфаркта миокарда. Данный показатель свидетельствует о высоком уровне активации нейтрофилов у больных с реперфузионными аритмиями и подтверждает участие активированных нейтрофилов в ишемически-реперфузионном повреждении миокарда при проведении тромболитической терапии.

Использование в клинической практике структурно-цитохимических признаков активации нейтрофилов периферической крови у больных инфарктом миокарда целесообразно для оценки тяжести заболевания и риска развития осложнений, при оценке эффективности лечения, а также для прогнозирования течения и исхода инфаркта миокарда.

ВЫВОДЫ

1. При инфаркте миокарда содержание активированных нейтрофильных лейкоцитов в периферической крови увеличивается в 9 раз в первые сутки заболевания. Активация нейтрофилов сопровождается увеличением активности НАДФН-оксидазы и щелочной фосфатазы в цитоплазме. Высокая функционально-метаболическая активность клеток сохраняется на протяжении первых трех недель заболевания и свидетельствует о повышенном кислородзависимом метаболизме нейтрофилов крови.

2. Активация нейтрофилов при инфаркте миокарда характеризуется структурно-цитохимическими изменениями азурофильной зернистости, о чем свидетельствует увеличение активности миелопероксидазы и нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы в гранулах и снижение их активности в интергранулярной цитоплазме. Высокий потенциал миелопероксидазной системы способствует повреждающему действию нейтрофилов на миокард.

3. При инфаркте миокарда с отеком легких или кардиогенным шоком (III и IV классы острой сердечной недостаточности) происходит увеличение активности щелочной фосфатазы в нейтрофилах к концу первой недели заболевания. У пациентов с острой сердечной недостаточностью I и II класса активность фермента в этот период, наоборот, снижается. Высокая активность щелочной фосфатазы нейтрофильных лейкоцитов свидетельствует о неблагоприятном течении инфаркта миокарда.

4. У больных инфарктом миокарда с развитием нарушений ритма сердца после тромболитической терапии увеличена активность НАДФН-оксидазы нейтрофилов в 3,8 раза в первые сутки заболевания. Выраженное повышение активности фермента с увеличением циркулирующего пула активированных нейтрофильных лейкоцитов является цитохимическим предвестником развития реперфузионных аритмий при проведении системного тромболизиса.

5. Определение параметров гранулярного и интергранулярного распределения в цитоплазме нейтрофилов НАДФН-оксидазы, щелочной фосфатазы, миелопероксидазы и нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы при помощи компьютерного анализа клеточного изображения служит дополнительным и информативным критерием в оценке тяжести инфаркта миокарда.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки функционально-метаболического состояния нейтрофильных лейкоцитов и предупреждения их неблагоприятного влияния на течение инфаркта миокарда целесообразно определение содержания в крови активированных нейтрофилов с первых суток заболевания.

2. Повышение активности щелочной фосфатазы нейтрофилов к концу первой недели инфаркта миокарда у больных с отеком легких или кардиогенным шоком свидетельствует о тяжелых функциональных нарушениях сердечной деятельности.

3. Увеличение активности НАДФН-оксидазы нейтрофилов в первые сутки инфаркта миокарда более чем в 3,5 раза при наличии показаний к проведению тромболитической терапии является цитохимическим предвестником развития реперфузионных аритмий.

РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лищенко О.В. Гиперактивация нейтрофилов крови в остром периоде инфаркта миокарда // Материалы XXIX конф. молодых ученых ВУЗов юга России. - Краснодар, 2002. - С. 93.

2. Лищенко О.В. Применение компьютерного анализа изображения для оценки активации нейтрофильных лейкоцитов при инфаркте миокарда // Материалы I конф. молодых ученых. - Тула, 2002. - С. 122-123.

3. Лищенко О.В., Никитина Г.В., Славинский А.А. Активность щелочной фосфатазы и ее распределение в нейтрофилах крови при инфаркте миокарда // Клиническая лаб. диагностика. - 2002. - № 10. - С. 12-13.

4. Лищенко О.В., Скибицкий В.В., Славинский А.А. Возможности определения активности НАДФН-оксидазы нейтрофилов у больных инфарктом миокарда в качестве предиктора развития реперфузионных аритмий // Вестник аритмологии. - 2005. - № 39, приложение А. - С. 125-126.

5. Лищенко О.В., Славинский А.А. Нафтол-AS-D-хлорацетат эстераза в нейтрофилах крови при инфаркте миокарда. Компьютерный анализ клеточного изображения // Кубанский научный мед. вестник. - 2003. - № 6 (67). - С. 35-36.

6. Лищенко О.В., Славинский А.А. Щелочная фосфатаза в нейтрофильных лейкоцитах больных инфарктом миокарда. Компьютерный анализ клеточного изображения // Кубанский научный мед. вестник. - 2003. - № 1-2 (62-63). - С. 98-99.

7. Лищенко О.В., Славинский А.А. Щелочная фосфатаза нейтрофильных лейкоцитов у больных инфарктом миокарда с различными классами острой сердечной недостаточности // Кубанский научный мед. вестник. - 2005. - N 5-6. - С. 17-19.

8. Лищенко О.В., Славинский А.А., Скибицкий В.В. Активность щелочной фосфатазы как показатель гиперактивации нейтрофилов в разные периоды инфаркта миокарда // Материалы конф. терапевтов ЮФО "Формулярная система, стандарты России в клинике внутренних болезней". - Ростов-на-Дону, 2003. - С. 124-126.

9. Славинский А.А., Лищенко О.В. Компьютерное тестирование зернистости нейтрофильных лейкоцитов у больных инфарктом миокарда // Клиническая лаб. диагностика. - 2004. - № 9. - С. 55.

10. Славинский А.А., Никитина Г.В., Лищенко О.В. Цитохимические признаки активации нейтрофилов крови в начальном периоде инфаркта миокарда // Проблемы гематологии и переливания крови. - 2002. - № 1. - С. 81.

11. Славинский А.А., Никитина Г.В., Лищенко О.В. Структурно-цитохимические признаки участия нейтрофильных лейкоцитов в патогенезе инфаркта миокарда // Труды II Съезда Российского общества патологоанатомов. - 2006. - Том II. - С. 171-174.

12. Славинский А.А., Скибицкий В.В., Лищенко О.В. Функционально-метаболические изменения нейтрофилов крови при остром инфаркте миокарда // Материалы конф. "Теоретические и прикладные аспекты проблемы здоровья населения Северного Кавказа". - Майкоп, 2002. - С. 245-247.

13. Славинский А.А., Скибицкий В.В., Лищенко О.В. Активированные нейтрофилы крови у больных инфарктом миокарда // Int. Journal on Immunorehabilitation. - 2003. -Том 5. - № 2. - С. 256.

Размещено на Allbest.ru