Розробка складу та технології супозиторіїв андрогенної дії

Размещено на http://www.allbest.ru/

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРАЇНИ

НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

УДК: 615.014.22 :615.454.2

15.00.01 - технологія ліків, організація фармацевтичної справи та судова фармація

АВТОРЕФЕРАТ

дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук

РОЗРОБКА СКЛАДУ ТА ТЕХНОЛОГІЇ СУПОЗИТОРІЇВ АНДРОГЕННОЇ ДІЇ

ОЛМЕСЕКОВА АДЕМА ТУРСИНБАЇВНА

Харків - 2013

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана на кафедрі аптечної технології ліків ім. Д. П. Сала Національного фармацевтичного університету Міністерства охорони здоров'я України (м. Харків).

Науковий керівник:

заслужений діяч науки і техніки України, академік Української академії наук, доктор фармацевтичних наук, професор ТИХОНОВ ОЛЕКСАНДР ІВАНОВИЧ, Національний фармацевтичний університет, професор кафедри технології парфумерно-косметичних засобів.

Офіційні опоненти:

доктор фармацевтичних наук, професор ГЛАДУХ ЄВГЕН ВОЛОДИМИРОВИЧ, Національний фармацевтичний університет, завідувач кафедри промислової фармації;

доктор фармацевтичних наук, професор ДАВТЯН ЛЕНА ЛЕВОНІВНА,

Національна медична академія післядипломної освіти імені П. Л. Шупика, завідувач кафедри фармацевтичної технології і біофармації.

Захист відбудеться «_____» ________________2013 р. о ____ годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 64.605.02 у Національному фармацевтичному університеті за адресою: 61002, м. Харків, вул. Пушкінська, 53.

З дисертацією можна ознайомитись в бібліотеці Національного фармацевтичного університету (61168, м. Харків, вул. Блюхера, 4).

Автореферат розісланий «_____» ______________ 2013 р.

В. о. вченого секретаря спеціалізованої вченої ради, доктор фармацевтичних наук, професор О. І. Зайцев

1. ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. Безпліддя - серйозна проблема репродуктології, при якому спостерігається поєднання соціального і психічного неблагополуччя, в тому числі й фізичне нездоров'я в сім'ї. Тривалий час вважалося, що народження дитини залежить лише від жінки, проте в даний час, в половини безплідних пар, виявляються порушення репродуктивної функції у чоловіків.

Сьогодні в Європі безплідні приблизно 15 % подружніх пар, а в США безплідні браки складають 20 %. В Україні проблема безпліддя також стоїть досить гостро. За різними оцінками, в Україні з 15 млн. пар від 1 до 3 млн. є безплідними. У Казахстані - кожна п'ята пара стикається з проблемою безпліддя.

Різноманіття чинників, що обумовлюють чоловіче безпліддя (ЧБ), складність його розвитку, функціональний взаємозв'язок чоловічих статевих залоз зі всіма системами органів створюють великі труднощі у виборі певної тактики лікування, що не дозволяє скоротити число лікарських засобів, використовуваних в терапії.

На даний час фармацевтичний ринок як України так і Казахстану представлений переважно лікарськими препаратами синтетичного походження, які мають ряд побічних ефектів. Поєднання природних та синтетичних субстанцій в препараті дозволить отримати достатній терапевтичний ефект і мінімальний відсоток побічних реакцій.

Тому перспективними лікарськими засобами для лікування чоловічого безпліддя є комбінація субстанції природного походження - ліпофільного екстракту обніжжя бджолиного, що має андрогенну дію, та амінокислоти (аргінін), що регулює процес сперматогенезу, і мікроелементу (цинка сульфата гептагідрат), який регулює рівень чоловічих статевих гормонів.

Таким чином, створення комбінованого лікарського препарату андрогенної дії на основі ліпофільного екстракту обніжжя бджолиного, аргініну і цинку сульфату гептагідрату є актуальним та перспективним напрямком вітчизняної фармації.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота виконана відповідно до плану науково-дослідних робіт Національного фармацевтичного університету (НФаУ) ("Технологія одержання оригінальних та комбінованих фармацевтичних засобів у різних лікарських формах", номер державної реєстрації 0108U009174) та проблемної комісії «Фармація» МОЗ і НАМН України.

Мета і завдання дослідження. Метою роботи є розробка складу і технології супозиторіїв андрогенної дії для лікування розладів статевої функції у чоловіків.

Для досягнення поставленої мети необхідно було вирішити наступні завдання:

- провести аналіз даних літератури з питань етіології, патогенезу і медикаментозного лікування чоловічого безпліддя;

- теоретично та експериментально обґрунтувати склад лікарського препарату андрогенної дії;

- експериментально обґрунтувати та розробити раціональну технологію комбінованого препарату;

- вивчити фізико-хімічні і фармако-технологічні властивості та встановити показники якості розробленого препарату;

- розробити проекти технологічного регламенту (ТР) та методик контролю якості (МКЯ) та провести їх апробацію в умовах промислового виробництва;

- проаналізувати результати фармакологічних і мікробіологічних досліджень розробленого препарату та визначити умови і термін зберігання.

Об'єкти дослідження: ліпофільний екстракт обніжжя бджолиного, аргінін, цинку сульфату гептагідрат, супозиторні основи, супозиторії «Ліпаргін».

Предметом дослідження є наукове-обґрунтування складу та раціональної технології супозиторіїв андрогенної дії для лікування порушень репродуктивної функції у чоловіків. Визначення оптимальної концентрації діючих та допоміжних речовин, дослідження фармако-технологічних та фізико-хімічних властивостей розробленого складу, обґрунтування критеріїв якості препарату та методик їх визначення. Встановлення умов та термінів зберігання. Розробка проектів методик контролю якості та технологічного регламенту на препарат.

Методи дослідження. При вирішенні поставлених в роботі завдань були використані загальноприйняті фізико-хімічні, фармако-технологічні, біофармацевтичні, мікробіологічні та фармакологічні методи досліджень, що дозволяють об'єктивно і повно оцінити якісні та кількісні показники розробленого лікарського засобу на підставі експериментально отриманих результатів.

Наукова новизна одержаних результатів. Вперше розроблено науково-методичний підхід до створення комбінованого лікарського засобу у формі супозиторіїв для лікування чоловічого безпліддя.

Вперше на підставі результатів фізико-хімічних, фармако-технологічних, біофармацевтичних та біологічних досліджень науково та експериментально обґрунтовано склад і технологію супозиторіїв андрогенної дії з ліпофільним екстрактом обніжжя бджолиного, аргініном та цинку сульфатом гептагідратом.

Досліджено вплив допоміжних речовин на технологічні властивості супозиторної основи та активність діючих компонентів препарату. Вивчені властивості розроблених супозиторіїв. Розроблені і відпрацьовані методики ідентифікації та кількісного визначення діючих речовин препарату, встановлено умови зберігання та термін придатності супозиторіїв.

За результатами досліджень отримано інноваційний патент Республіки Казахстан № 26350 від 29.10.2012 р. на винахід «Лекарственный препарат - суппозиторий андрогенного действия» і патент України на корисну модель № 77597, бюлетень № 4 від 25.02.2013 року.

Практичне значення отриманих результатів. Створено та запропоновано для практичної медицини новий оригінальний вітчизняний препарат у формі супозиторіїв андрогенної дії, що містить ліпофільний екстракт обніжжя бджолиного, аргінін, цинку сульфату гептагідрат під умовною назвою «Ліпаргін» для профілактики та лікування чоловічого безпліддя.

Розроблено проект МКЯ на запропонований препарат та проект ТР на виробництво супозиторіїв «Ліпаргін». Технологія приготування та методики аналізу супозиторіїв апробовані на підприємстві АТ «Лекхим-Харків» (акт апробації від 16.01.2013 р.).

За результатами досліджень розроблено інформаційний лист «Технологія приготування супозиторіїв андрогенної дії «Ліпаргін» в умовах аптеки»; впроваджено в роботу аптеки «Студентська» (акт впровадження від 10.12.2012 р.).

Фрагменти роботи впроваджені в учбовий процес кафедри фармації Вінницького національного медичного університету ім. М. І. Пірогова (акт впровадження від 05.04.2012 р.), кафедри фармації ДУ «Кримський державний медичний університет ім. С. І. Георгієвського» (акт впровадження від 15.11.2012 р.), кафедри технології ліків Тернопільського державного медичного університету ім. І. Я. Горбачевського (акт впровадження від 07.12.2012 р.), кафедри технології лікарських засобів Одеського національного медичного університету (акт впровадження від 11.01.2013 р.), кафедри промислової фармації Національного фармацевтичного університету (акт впровадження від 17.01.2013 р.).

Особистий внесок здобувача. Автором проаналізовано та узагальнено сучасні дані літератури з питань етіології, патогенезу та фармакотерапії чоловічого безпліддя. Теоретично та експериментально розроблено склад та технологію нового лікарського препарату у вигляді супозиторіїв андрогенної дії. Проведено експериментальні дослідження з вивчення фізико-хімічних й фармако-технологічних властивостей розробленого препарату.

Розроблено методики контролю якості препарату «Ліпаргін», що увійшли до проекту МКЯ. Розроблено технологію приготування супозиторіїв андрогенної дії в умовах аптеки. Розроблено проект ТР на виробництво препарату «Ліпаргін». Проведено апробацію технології та методів аналізу супозиторіїв «Ліпаргін» в промислових умовах. Вивчено стабільність, обґрунтовані умови та терміни зберігання препарату.

Проаналізовано результати мікробіологічних, токсикологічних та фармакологічних досліджень. Результати проведених випробувань статистично оброблено, систематизовано та проаналізовано.

Наукові праці опубліковано в співавторстві з О. І. Тихоновим та В. В. Михайленко, Г. В. Зайченко. Особистий вклад автора вказується за текстом дисертації, а також в авторефераті в списку фахових публікацій (№ 1-7).

Апробація результатів дисертації. Окремі фрагменти дисертаційної роботи викладено та обговорено на: IV з'їзді апітерапевтів України «Апітерапія сьогодення і майбутнє фармації» (2011 р., м. Київ); Всеукраїнській науково-практичній конференції студентів і молодих вчених, присвяченій 140-річчю з дня народження проф. М. О. Валяшко «Актуальність питань створення нових лікарських засобів» (2011 р., м. Харків); Всероссийская научно-практическая интернет-конференция с международным участием «Современные аспекты разработки и совершенствования состава и технологи лекарственных форм» (2011 г, г. Курск); науково-практичній конференції «Досягнення клінічної і експериментальної медицини» (2011 г, м. Тернопіль); II науково-практичній конференції з міжнародною участю «Сучасні досягнення фармацевтичної технології» (2011 р., м. Харків); VIII Міжнародній науково-практичній конференції «Досудове слідство, фармацевтичне і медичне право, як складові державної політики України протидії наркозлочинності: від поліцейської хімії і судової фармації до фармацевтичного і медичного законодавства, соціальної, доказової медицини і фармаціі»» (2011 р., м. Харків); I Міжнародній інтернет-конференції молодих вчених «Сучасні досягнення медичної і фармацевтичної науки» (2012 р., м. Запоріжжя); ІІІ науково-практичній конференції з міжнародною участю «Сучасні досягнення фармацевтичної технологи» (2012 р., м. Харків).

Публікації: За матеріалами дисертаційної роботи опубліковано 18 наукових робіт, у тому числі 7 статей у фахових виданнях, 2 патенти, 1 інформаційний лист та 8 тез доповідей.

Об'єм і структура дисертації. Дисертаційна робота викладена на 139 сторінці друкованого тексту, основний текст дисертації становить 111 сторінки; складається зі вступу, огляду літератури, експериментальної частини, загальних висновків, списку використаної літератури (включає 165 джерел, з яких 64 - іноземних авторів) та додатків. Робота ілюстрована 28 таблицями і 27 рисунками.

2. ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

У вступі наведена актуальність теми, мета та основні завдання досліджень, визначено наукову новизну та практичне значення отриманих результатів.

У розділі 1 «Сучасний стан лікування чоловічого безпліддя та перспективи створення лікарських засобів у формі супозиторіїв для його фармакотерапії» приведені узагальнені сучасні дані літератури відносно класифікації, етіології, патогенезу, клінічних проявів, діагностичних критеріїв та можливих методів лікування ЧБ. Проаналізовано фармацевтичний ринок андрогенних препаратів України та Казахстану для лікування ЧБ та визначена перспективність їх розвитку. Доведено актуальність створення нового вітчизняного препарату андрогенної дії.

Показано перспективність використання природної сировини - ліпофільного екстракту обніжжя бджолиного (ЛЕОБ), амінокислоти аргініну та цинку сульфату гептагідрату при створенні супозиторіїв для профілактики та лікування порушень статевої функції і репродуктивної системи чоловіків.

У розділі 2 «Обґрунтування загальної концепції та методів досліджень» представлена загальна методологія досліджень, яка враховує особливості підходу до експериментального обґрунтування складу та технології супозиторіїв андрогенної дії. Приведені характеристики діючих субстанцій та допоміжних речовин, які були використані в процесі розробки складу препарату «Ліпаргін».

Обґрунтовано вибір методик для проведення фізичних, фізико-хімічних, фармако-технологічних, біофармацевтичних, мікробіологічних і фармакологічних досліджень, використання яких дозволить об'єктивно оцінити якість дослідних зразків та готового лікарського засобу на підставі експериментально отриманих і статистично оброблених результатів.

У розділі 3 «Розробка складу та технології супозиторіїв на основі ЛЕОБ, аргініну, цинку сульфату гептагідрату» представлено результати експериментальних досліджень з обґрунтування складу та технології супозиторіїв «Ліпаргін» в аптечних та промислових умовах.

Як діючі речовини у складі препарату, на підставі даних літературних джерел та власних експериментальних досліджень, обґрунтовано доцільність введення ЛЕОБ, що проявляє андрогенну та протизапальну дії, а також амінокислоту - аргінін, що покращує еректильну функцію за рахунок підсилення кровонаповнення статевих органів та цинку сульфату гептагідрату, який відіграє позитивну роль на всіх етапах сперматогенезу.

Проведені фармакологічні дослідження дозволили обґрунтувати терапевтичну дозу діючих речовин, при ректальному введенні супозиторіїв. Необхідну андрогенну активність у складі препарату забезпечують 0,05 г ЛЕОБ, 0,25 г аргініну та 0,1 г цинку сульфату гептагідрату.

Для визначення способу введення діючих речовин в супозиторні основи була вивчена їх розчинність у ряді допоміжних речовин (таблиця 1).

Таблиця 1 Розчинність ЛЕОБ, аргініну та цинку сульфату гептагідрату в супозиторних основах та допоміжних рідинах

Розчинник	Розчинність
	ЛЕОБ	Аргінін	Цинку сульфату гептагідрат
Вода очищена	-	+	+
Гліцерин	-	-	+
Спирт етиловий 96 %	-	-	-
Поліетиленоксидна основа (ПЕО-400 та ПЕО-1500) (1:9)	-	+	+
Твердий жир типу А	+	-	-

Як видно з отриманих даних, ЛЕОБ розчинний в жировій основі, субстанція аргініну - у воді очищеній, а цинку сульфату гептагідрат, як у воді, так і в гліцерині. При використанні в якості розчинника води очищеної для аргініну та цинку сульфату гептагідрату нами були отримани супозиторії, що не відповідають вимогам ДФУ за стійкістю до руйнування. Тому в якості розчинника для аргініну була обрана вода очищена, а для цинку сульфату гептагідрату - гідрофільний розчинник - гліцерин.

З метою вибору раціонального носія були вивчені фізико-хімічні та структурно-механічні властивості модельних супозиторних основ, які отримували методом виливання за стандартними методиками. В ролі носіїв (основ) супозиторіїв застосовували: твердий кондитерський жир типу А, вітепсол Н32, поліетиленоксид-1500 та поліетиленоксид-400 (ПЕО), взяті у співвідношенні 9:1.

За результатами експерименту встановлено, що гідрофільна ПЕО основа, несумісна з біологічно активними речовинами, що переважають в активній субстанції ЛЕОБ. При гомогенізації гідрофільного концентрату (до складу якого входять водний розчин аргініну та розчин цинку сульфату гептагідрату в гліцерині) з гідрофобними основами з часом відбувається коалесценція дисперсної фази та її подальша седиментація. Тому наступним етапом став вибір поверхнево-активних речовин для стабілізації та поліпшення структурно-механічних властивостей системи.

Для цього до складу супозиторних основ додавались твін 80, цетостеариловий спирт і емульгатор Т-2. В процесі досліджень встановлено, що при додаванні до супозиторної основи емульгатора Т-2 в результаті його взаємодії з діючими речовинами утворюється важко розчинний осад. Тому даний емульгатор було виключено із подальших досліджень.

З метою обґрунтування вибору поверхнево-активних речовин (ПАР) нами було вивчено їх вплив на швидкість вивільнення діючих речовин із супозиторіїв. Склад досліджуємих основ наведено в табл. 2.

Таблиця 2 Склади досліджуваних основ

Склад	Концентрація в зразках, %
	№ 1	№ 2	№ 3	№ 4
Вітепсол Н32	-	-	99,0	99,0
Твердий жир типу А	99,0	99,0	-	-
Твін-80	1,0	-	1,0	-
Цетостеариловий спирт	-	1,0	-	1,0

Для вивчення біодоступності супозиторіїв використовували тест «Розпадання» з наступним визначенням концентрації активного інгредієнту який вивільняється із розплавленої основи у рідке середовище (вода очищена) (ДФУ, п. 2.9.2., с. 152). Забір проб здійснювали через кожні 2 хвилини. Проби фільтрували, визначали в них кількісний вміст цинку сульфату гептагідрату, який у данному дослідженні виконував роль маркера. Вміст цього компонента визначали методом комплексонометричного титрування і розраховували відсоток вивільнення з супозиторіїв (рис. 1).

Виходячи з отриманих результатів, наведених на рис. 1 перевагу має супозиторна основа вітепсол Н32 з цетостеариловим спиртом (зразок № 4), вивільнення цинку сульфату гептагідрату з даної основи за 6 хв. дорівнює 29 %.



Рис. 1. Діаграма вивільнення цинку сульфату гептагідрату з супозиторіїв залежно від супозиторної основи

Вітепсол Н32 забезпечує оптимальні фізико-хімічні властивості основи для супозиторіїв при відносно вузькому інтервалі температур плавлення та застигання. Це створює найбільш сприятливі умови для розплавлення супозиторіїв в організмі людини, сприяє максимальному вивільненню лікарської речовини та покращує технологічні властивості основи. Крім того, отримані супозіторії мають необхідну твердість та консистенцію.

Наступним етапом став вибір оптимальної концентрації ПАР - цетостеарилового спирту. Для цього були приготовлені зразки супозиторіїв з різною концентрацією емульгатора від 1 % до 4 % (табл. 3).

Таблиця 3 Склад досліджуваних зразків

Речовини	Концентрація в г
	Зразок № 1	Зразок № 2	Зразок № 3	Зразок № 4
ЛЕОБ	0,05	0,05	0,05	0,05
Аргінін	0,25	0,25	0,25	0,25
Цинку сульфату гептагідрат	0,1	0,1	0,1	0,1
Вода очищена	0,15	0,15	0,15	0,15
Гліцерин	0,12	0,12	0,12	0,12
Вітепсол Н 32	до 3,0	до 3,0	до 3,0	до 3,0
Цетостеариловий спирт	0,03	0,06	0,1	0,12

Вплив концентрації емульгатора на швидкість вивільнення діючих речовин (аргініну та цинку сульфату гептагідрату) із супозиторіїв оцінювали за допомогою метода рівноважного діалізу кріз напівпроникну мембрану.

При кількісному визначенні активних компонентів в діалізаті використовували метод кислотно-основного титрування для аргініну та комплексонометричного титрування для цинку сульфату гептагідрату. Результати досліджень наведені на рис. 2 та 3.

Рис. 2. Залежність ступеня вивільнення аргініну від концентрації цетостеарилового спирту в супозиторній основі

Рис. 3. Залежність ступеня вивільнення цинку сульфату гептагідрату від концентрації цетостеарилового спирту в супозиторній основі

Як показують отримані дані швидкість вивільнення діючих речовин з супозиторіїв, що досліджувались залежить від концентрації цетостеарилового спирту у їх складі. Як свідчать дані, наведені на рис. 2, 3 повніше та швидше вони вивільняються з супозиторіїв, під дію 4 % цетостеарилового спирту. Але при концентрації цетостеарилового спирту 3 % та 4 % результати вивільнення діючих речовин знаходяться в межі похибки методу дослідження. Отже, введення цетостеарилового спирту в кількості 3 % (0,1 г) на 1 супозиторій є оптимальним для отримання стабільної лікарської форми.

Враховуючи наявність у складі ЛЕОБ каротиноїдів, які під час зберігання можуть піддаватися окисненню встановлена необхідність введення до складу супозиторіїв антиоксиданту. Для обґрунтування вибору антиоксиданту та його оптимальної концентрації проведено дослідження стабілізуючої дії на каротиноїди ЛЕОБ двох синтетичних інгібіторів ланцюгових реакцій - бутилоксианізолу (БОА) і бутилокситолуолу (БОТ), що відображено на рис. 4. Для цього були приготовані дослідні зразки супозиторіїв, до складу яких вводили БОА і БОТ масою від 0,001 до 0,006 г. Контрольні зразки супозиторіїв приготовані без антиоксиданту.

Рис. 4. Залежність вмісту каротиноїдів при зберіганні від кількості антиоксиданту

Аналіз отриманих результатів з дослідження стабільності каротиноїдів ЛЕОБ свідчить, що необхідний ефект забезпечує БОА в концентрації 0,2 %, що складає 0,005 на один супозиторій.

Таким чином, в результаті проведених фізико-хімічних, фармако-технологічних та біофармацевтичних досліджень встановлено раціональний склад супозиторіїв під умовною назвою «Ліпаргін» в (г) на 1 супозиторій:

З метою вивчення сумісності та структурних характеристик лікарських та допоміжних речовин, що входять до складу супозиторіїв, а також для визначення температурних режимів приготування супозиторної маси та введення діючих речовин в основу був проведений термогравіметричний аналіз усіх складових супозиторіїв, а також вивчені реологічні властивості супозиторної маси при різних температурах.

Ліпофільний екстракт обніжжя бджолиного	0,05
Аргінін	0,25
Цинку сульфату гептагідрат	0,1
Гліцерин	0,12
Цетостеариловий спирт	0,1
Вода очищена	0,15
Бутилоксианізол	0,005
Вітепсол Н32	до 3,0

За результатами досліджень встановлено, що найменш стійким в температурному відношенні з вивчених компонентів супозиторіїв є ЛЕОБ, початкова стадія розкладання якого складає 50°С, інші речовини не змінюють свої фізико-хімічні властивості при даній температурі.

Аналіз результатів вивчення структурно-механічних властивостей супозиторної маси на основі вітепсол Н32 в інтервалі температур 37 - 45 0С виявив, що реологічні властивості супозиторних мас залежать від швидкості зсуву та температури (рис. 5).

Рис. 5. Реологічні характеристики супозиторної маси при різних температурах

Також встановлено, що введення діючих речовин в основу приводить до зниження значення структурної в'язкості майже в 2 рази при градієнті швидкості зсуву 40,5 с -1 (рис. 6).

Рис. 6. Залежність структурної в'язкості супозиторной маси та основи супозиторіїв від температурі при градієнті швидкості зсуву 40,5 с -1

Таким чином, отримані дані дозволили визначити температурні режими приготування супозиторної маси та введення діючих речовин в основу, що становить 45±5 0С.

За підсумками проведених експериментальних досліджень обґрунтовані основні стадії приготування препарату, на основі чого розроблено технологічні схеми виробництва супозиторіїв, як для аптечного, так і промислового виготовлення (рис. 7). Оскільки виготовлення супозиторіїв в аптечних умовах здійснюється з врахуванням майже всіх стадій, що відмічені на рис. 7, блок-схема даної технології ідентична. Особливістю є використовуване обладнання, кількість контролюємих параметрів та стадія пакування.

У розділі 4 «Фізико-хімічних дослідження та стандартизація супозіторіїв андрогенної дії» наведені результати фізико-хімічних та фармако-технологічних досліджень препарату, що покладені в основу розробленого проекту МКЯ. Вивчено стабільність супозиторіїв «Ліпаргін». Отриманий препарат у формі супозиторіїв стандартизували згідно з вимогами ДФУ за наступними показниками: опис, ідентифікація, середня маса та її однорідність, температура плавлення, час повної деформації, мікробіологічна чистота та кількісне визначення.

Якісний аналіз діючих речовин проводили таким чином: каротиноїди та токофероли в ЛЕОБ визначали за допомогою класичних реакцій ідентифікації (з розчином сурми (ІІІ) хлориду Р, 0,2% розчином кислоти фосфорно-молібденової Р); аргінін - за допомогою групової якісної реакції на б -амінокислоти з розчином нінгідріну та з розчином б -нафтолу і натрію гіпохлориту; цинку сульфату гептагидрат (з розчином калію фероціаніду та з розчином натрію сульфіду на іони цинку, з кислотою хлористоводневою та розчином барію хлориду на сульфат іони).

Для кількісного визначення суми в-каротиноїдів ліпофільного екстракту обніжжя бджолиного обрано метод абсорбційної спектрофотометрії (ДФУ 2.2.25) в УФ області з використанням приладу СФ-46. Обробку результатів здійснювали за допомогою програмного забезпечення «Спектр» для «Windows».

Рис. 7. Блок-схема технології приготування супозиторіїв андрогенної дії в промислових умовах

Вимірювали оптичну щільність розчину досліджуваного зразка препарату при довжині хвилі (450±2 нм) в кюветі з товщиною шару 10 мм. Як контрольний розчин використовували гексан. Паралельно вимірювали оптичну щільність стандартного розчину калію дихромату.

Розрахунок вмісту суми каротиноїдів, в перерахунку на в-каротин у міліграмах, проводили за методом зовнішнього стандарту, використовуючи з цією метою розчин калію дихромату (рис. 8 і табл. 4).

Рис. 8. Спектри поглинання супозиторіїв «Ліпаргін», ЛЕОБ та основи

А - ЛЕОБ

В - супозиторії «Ліпаргін»

С - основа

Таблиця 4 Результати визначення вмісту суми каротиноїдів в перерахунку на в -каротин (мг/суп.)

№	Маса наважки, г	Оптична густина, А	Вміст суми каротиноїдів в перерахунку на в-каротин мг/суп.	Метрологічні характеристики середнього результату визначення
1	3,0172	0,767	0,0752	= 0,07485 S2 = 3,6510-6; S = 1,9110-3 Sх = 7,8010-4; P, %= 95 t(P,) = 2,5706 = 2,0010-3 = 8,1810-4 = 1,093
2	2,9565	0,773	0,0774
3	2,9973	0,740	0,0731
4	3,0234	0,758	0,0742
5	3,0041	0,737	0,0726
6	2,9880	0,773	0,0766
1	3,0172	0,767	0,0752

Примітка: Acm=0,527 нм

Дані статистичної обробки отриманих результатів свідчать, що середнє значення суми каротиноїдів складає 0,07485 мг/суп., відносна невизначеність середнього результату не перевищує 1,1 %.

Кількісне визначення та ідентифікацію аргініну проводили методом ВЕРХ. Для цього поперемінно хроматографували підготовлені розчин препарату та розчин порівняння, отримуючи від 2 до 6 хроматограм. Об'єм інжекції 20 мкл (рис. 9 та 10).

Рис. 9. Хроматограма розчину порівняння

Рис. 10. Хроматограма випробовуваного розчину

Кількісне визначення цинку сульфату гептагідрату рекомендується проводити методом комплексонометричного титрування, за методикою, наведеною в ДФ Х СРСР, с.739, яка забезпечує чіткий перехід забарвлення індикатора. Отримані результати показують, що отримана величина відносної невизначеності середнього результату () не перевищує 1 %, що свідчить про високу точність аналізу і достовірність отриманих результатів (таблиця 5). препарат фармакологічний мікробіологічний супозиторій

Таблиця 5 Результати комплексонометричного титрування цинку сульфату гептагідрату в супозиторіих «Ліпаргін»

№	Маса наважки, г	V титранту, мл	Вміст цинку сульфату гептагідрату мг/суп.	Метрологічні характеристики середнього результату визначення
1	2,9648	6,94	0,101	= 0,09966 S2 = 6,6610-7; S = 8,1610-4 Sх = 3,3310-4; P, % = 95 t(P,) = 2,5706 = 8,5710-4 = 3,5010-4 = 0,351
2	2.9735	6,82	0,099
3	3,0976	7,11	0,099
4	3,0325	7,03	0,100
5	3,0902	7,09	0,099
6	2,9784	6,90	0,100

Примітка: КП = 1,0000.

Кількісне визначення бутилоксианізолу проводили методом ВЕРХ. Хроматографували розчин порівняння та розчин препарату, отримуючи від 2 до 6 хроматограм. Об'єм інжекції 20 мкл (рис. 12та 13).

Рис. 12. Хроматограма випробовуваного розчину супозиторіїв «Ліпаргін» на вміст бутилоксианізолу



Рис. 13. Хроматограма стандартного зразка бутилоксианізолу

Таким чином, доведена можливість використання розроблених методик для стандартизації препарату «Ліпаргін» при впровадженні його у виробництво.

З метою обґрунтування умов та термінів зберігання препарату були приготовлені серії препарату у чарунках з полівінілхлоридної плівки, що зберігалися при температурних режимах 8-15 0С (прохолодне місце) і 15-25 0С (кімнатна температура) в картонній упаковці.

Протягом всього періоду зберігання (27 місяців) кожні 6 місяців оцінювали органолептичні показники (зовнішній вигляд, колір, запах), фізико-хімічні властивості (температура плавлення, відхилення в масі, розпадання), реакції ідентифікації, кількісний вміст суми в-каротиноїдів, аргініну, цинку сульфату гептагідрату та мікробіологічну чистоту.

На підставі отриманих результатів, доведена стабільність супозиторіїв «Ліпаргін», що зберігалися при температурному режимі 8-15 0С протягом 27 місяців. На підставі проведених досліджень визначено термін придатності - 2 роки (табл. 6 та 7).

У розділі 5 «Фармакологічні та мікробіологічні дослідження супозиторіїв «Ліпаргін» представлені результати вивчення токсикологічних властивостей і специфічної активності та дослідження мікробіологічної чистоти розробленого препарату. Фармакологічні дослідження лікарського засобу проводили на базі кафедри клінічної фармакології НФаУ (зав. кафедри д.м.н., проф. Зайченко Г. В.).

Супозиторії «Ліпаргін» на моделі скипідарного простатиту виявили виражену протизапальну активність. Це підтверджувалося зменшенням вираженості як системних, так і локальних запальних проявів в простаті: зниженням лейкоцитозу та ШОЕ, нормалізацією кількості сперматозоїдів з одночасним поліпшенням їх функціональної активності, зменшенням набряку, клітинних інфільтрацій строми та деструктивних змін в ацинусах, відновленням нормального стану внутрішньопростатної гемодинаміки та андрогенної насиченості організму.

Супозиторії «Ліпаргін» перевершували за лікувальною ефективністю препарат порівняння «Цернілтон» виробництва США за нормалізуючим впливом на гістоархітектоніку простати та не поступалися йому за впливом на рівень андрогенізації та іншими показниками, що вивчалися.

Введення тваринам плацебо (супозиторної основи) на тлі простатиту не надавало лікувальної дії, що підтверджувалося відсутністю позитивної динаміки клінічних та морфофункціональних показників стану простати, насінних бульбашок, сперматозоїдів.

Термін зберігання	Показники проекту МКЯ	6 місяців	12 місяців	18 місяців	24 місяців	27 місяців
Опис	Супозиторії конусовидної форми, ясно-жовтого або жовтого кольору, із специфічним запахом. На поперечному зрізі не повинно бути яких-небудь вкраплень, але можлива наявність повітряного стрижня або воронкоподібного поглиблення
Ідентифікація	Аргінін	1) з розчином нінгідріну (фіолетове забарвлення) 2) з розчином б-нафтолу (червоно-помаранчеве забарвлення)
	Солі цинку	1) з розчином калію фероціаніду (білий осад) 2) з розчином натрію сульфіду (білий осад)
	Сульфати	з кислотою хлористоводневою розв. та розчином барію хлориду (білий осад)
	Каротиноїди	з розчином сурми (ІІІ) хлориду (зелене забарвлення)
	Токофероли	з розчином кислоти фосфорно-молібденової (зелене забарвлення)
Середня маса	від 2,89 до 3,05 г.	2,97 ±0,01	3,02 ±0,02	2,98 ±0,02	3,01 ±0,01	2,99 ±0,02
Температура плавлення, ?С	Не більше 37 ?С.	36,7±0,2	36,5±0,2	36,8±0,2	36,6±0,2	36,8±0,2
Розпадання, мин	Не більше 30	7,5±0,5	7,8±0,5	8,0±0,3	7,5±0,5	7,7±0,2
Кількісний вміст в одному супозиторії: - аргінін - цинку сульфату гептагідрату - сума каротиноїдів (в перерахунку на в-каротин), мг % - бутилоксианізол, г	від 0,25 до 0,27 г	0,257±0,004	0,256±0,003	0,254±0,003	0,256±0,002	0,255±0,004
	від 0,09 до 0,11 г	0,107±0,003	0,106±0,004	0,105±0,002	0,104±0,003	0,098±0,003
	від 0,07 до 0,08 мг	0,078±0,002	0,075±0,002	0,077±0,002	0,076±0,002	0,075±0,002
	від 0,005 до 0,007	0,006±0,001	0,006±0,001	0,006±0,001	0,006±0,001	0,006±0,001
Мікробіологічня чистота: - Аеробні бактерії, в 1 г - Гриби, в 1 г - Ентеробактерії, Pseudomonas aeruginosa та Staphylococcus aureus	Не більше 103	2?102	3?102	4?102	6?102	8?102
	Не більше 102	менше 10	менше 10	менше 10	менше 10	менше 10
	Не допускається	Не виявлено	Не виявлено	Не виявлено	Не виявлено	Не виявлено

За результатами проведених досліджень встановлено, що супозиторії «Ліпаргін» відносяться до практично нетоксичних речовин.

Мікробіологічні дослідження супозиторіїв «Ліпаргін» проводили за методикою ДФУ (1 - е видання, п. 2.6.12, п. 2.6.13) згідно з розділом «Мікробіологічна чистота» на базі Інституту мікробіології та імунології ім. І. І. Мечникова під керівництвом зав. лабораторії к. б. н., ст. н. с. Т. П. Осолодченко.

На підставі проведених досліджень встановлено нормування мік-робіологічної чистоти супозиторіїв «Ліпаргін» та отримані дані внесені до проекту МКЯ на препарат.

Результати вивчення стабільності супозиторіїв «Ліпаргін» в процесі зберігання при t 8-15 0С у полівінілхлоридній плівці

Результати вивчення стабільності супозиторіїв «Ліпаргін» в процесі зберігання при t 15-25 0С у полівінілхлоридній плівці

Термін зберігання	Показники проекту МКК	6 місяців	12 місяців	18 місяців	24 місяців	27 місяців
Опис	Супозиторії конусовидної форми, ясно-жовтого або жовтого кольору, із специфічним запахом. На поперечному зрізі не повинно бути яких-небудь вкраплень, але можлива наявність повітряного стрижня або воронкоподібного поглиблення
Ідентифікація	Аргінін	1) з розчином нінгідріну (фіолетове забарвлення) 2) з розчином б-нафтолу (червоно-помаранчеве забарвлення)
	Солі цинку	1) з розчином калію фероціаніду (білий осад) 2) з розчином натрію сульфіду (білий осад)
	Сульфати	з кислотою хлористоводневою розв. та розчином барії хлориду (білий осад)
	Каротиноїди	з розчином сурми (ІІІ) хлориду (зелене забарвлення)
	Токофероли	з розчином кислоти фосфорно-молібденової (зелене забарвлення)
Середня маса	від 2,89 до 3,05 г.	2,98 ±0,01	3,02 ±0,02	2,96 ±0,02	3,01 ±0,01	2,97 ±0,02
Температура плавлення, ?С	Не більше 37 ?С.	36,6±0,2	36,5±0,2	36,7±0,2	36,6±0,2	36,8±0,2
Розпадання, мин	Не більше 30	7,3±0,5	7,2±0,5	8,0±0,3	7,5±0,5	7,8±0,2
Кількісний вміст в одному супозиториії: - аргінін - цинку сульфату гептагідрату - сумма каротиноїдов (в перерахунку на в-каротин), мг % - бутилоксианізол, г	від 0,25 до 0,27 г	0,261±0,004	0,258±0,003	0,258±0,005	0,255±0,002	0,257±0,004
	від 0,09 до 0,11 г	0,101±0,003	0,102±0,004	0,105±0,002	0,103±0,003	0,097±0,003
	від 0,07 до 0,08 мг	0,077±0,002	0,075±0,002	0,073±0,001	0,069±0,002	0,068 ±0,002
	від 0,005 до 0,007	0,006±0,001	0,006±0,002	0,005±0,001	0,006±0,003	0,006±0,004
Мікробіологічна чистота: - Аеробные бактерії, в 1 г - Гриби, в 1 г - Ентеробактерії, Pseudomonas aeruginosa та Staphylococcus aureus	Не більше 103	2?102	3?102	4?102	6?102	8?102
	Не більше 102	менше 10	менше 10	менше 10	менше 10	менше 10
	Не допускається	Не виявлено	Не виявлено	Не виявлено	Не виявлено	Не виявлено

ЗАГАЛЬНІ ВИСНОВКИ

Вперше, на підставі проведених фізико-хімічних, фармако-технологічних, біофармацевтичних, фармакологічних та мікробіологічних досліджень науково обґрунтовано та експериментально підтверджено склад та технологію приготування андрогенного лікарського препарату у формі супозиторіїв на основі ліпофільного екстракту обніжжя бджолиного, аргініну та цинку сульфату гептагідрату для профілактики й лікування безпліддя у чоловіків.

1. Проаналізовано та узагальнено сучасні дані літератури відносно етіології, патогенезу та фармакотерапії чоловічого безпліддя. Встановлено, що дане захворювання є дуже поширеним та потребує своєчасної профілактики та лікування. Проведений аналіз фармацевтичних ринків України і Казахстану вказує на обмеженість номенклатури препаратів андрогенної дії. Асортимент лікарських засобів формують монокомпонентні препарати (Україна - 80 %, Казахстан - 77,3 %), комплексні препарати складають 20 % та 22,6 %, препарати вітчизняного виробництва 28 % і 6 % відповідно.

2. Комплексом фізико-хімічних, фармако-технологічних, біофармацевтичних досліджень обґрунтовано склад супозиторіїв «Ліпаргін»: ЛЕОБ - 0,05, аргініну - 0,25, цинку сульфату гептагідрату - 0,1, бутилоксианізолу - 0,005, гліцерину - 0,12, води очищеної - 0,15, цетостерилового спирту - 0,1, супозитороної основи - вітепсол Н32 до 3,0 г.

3. На підставі проведених реологічних і термогравіметричних досліджень розроблено раціональну технологію виготовлення препарату та обґрунтовано введення допоміжних речовин при виготовленні супозиторіїв; визначено оптимальні температурні режими введення діючих речовин у супозиторну основу 45±5 0С.

4. З метою оцінки якості супозиторіїв «Ліпаргін» вивчені їх фізико-хімічні та фармако-технологічні властивості. На підставі, отриманих результатів, розроблений проект МКЯ на препарат.

5. Розроблений проект технологічного регламенту на виробництво препарату апробовано в умовах промислового виробництва АТ «Лекхім-Харків» (акт апробації від 16.01.2013 р.).

6. Досліджено стабільність розробленого препарату «Ліпаргін» впродовж 27 місяців при зберіганні в полівінілхлоридній плівці при температурному режимі 8-15 0С; визначено термін придатності супозиторіїв 2 роки.

7. Проведені фармакологічні та мікробіологічні дослідження препарату. Встановлено, що супозиторії «Ліпаргін» проявляють виражену андрогенну дію, є практично нетоксичними і за рівнем мікробної контамінації відповідають вимогам ДФУ.

8. За результатами досліджень отримано інноваційний патент на винахід «Лекарственный препарат - суппозиторий андрогенного действия» № 26350 від 29.10. 2012 р. (Республіка Казахстан) та патент України на корисну модель № 77597, бюлетень № 4 від 25.02.2013 року.

9. Фрагменти дисертаційної роботи упроваджені в навчальний процес ряду вищих медичних та фармацевтичних навчальних закладів України III-IV рівня акредитації.

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ ПРАЦЬ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

1. Olmessekova A. T. Creation of medicine male sterility treatment / А. Т. Olmessekova, О. I. Tikhonov //Вісник фармації. - № 1 (65). - 2011. - С. 9-12. (Особистий внесок - проаналізовано та узагальнення сучасних даних літератури відносно етіології, патогенезу та фармакотерапії чоловічого безпліддя, оформлення статті).

2. Тихонов А. И. Изучение реологических свойств суппозиториев андрогенного действия / А. И. Тихонов, А. Т. Олмесекова, В. В. Михайленко // Український біофармацевтичний журнал. - № 5 (16). - 2011. - С. 48-51. (Особистий внесок - участь в проведенні експериментальної частини, обробка результатів, оформлення статті).

3. Tikhonov A. I. Thermographic study of suppositories of androgenic effect / A. I. Tikhonov, А. Т. Olmessekova, V. V. Mikhailenko // Вісник фармації. - № 1 (69). - 2012. - С. 30-32. (Особистий внесок - участь в проведенні експериментальної частини, обробка результатів, оформлення результатів).

4. Олмесекова А. Т. Доказательная фармация: изучение антибактериальной активности суппозиториев андрогенного действия для лечения мужского бесплодия / А. Т. Олмесекова, А. И. Тихонов, В. В. Михайленко // Український вісник психоневрології. - 2012. - Т. 20, вип. № 2 (71) (дод.). - С. 79. (Особистий внесок - участь в проведенні експериментальної частини, обробка результатів, оформлення статі).

5. Тихонов А. И. Разработка технологии приготовления суппозиториев «Липаргин» андрогенного действия / А. И. Тихонов, А. Т. Олмесекова, В. В. Михайленко // Республиканский научный журнал «Хабаршысы». - 2012. - № 4 (61). - С. 184-190. (Особистий внесок - участь в проведенні експериментальної частини, обробка результатів, оформлення статі).

6. Тихонов А. И. Разработка методик качественного и количественного определения действующих веществ в суппозиториях «Липаргин» / А. И. Тихонов, А. Т. Олмесекова // Вісник фармації. - 2013. - № 1 (73). - С. 35-39. (Особистий внесок - участь в проведенні експериментальної частини, обробка результатів, оформлення статі).

7. Olmessekova A. T. Investigation of specific pharmacological activity of Lipargin suppositories / А. Т. Olmessekova, A. V. Zaychenko, О. I. Tikhonov, S. R. Gevoyan // Фармация Казахстана. - 2013. - № 4. - С. 34-36. (Особистий внесок - участь в проведенні експериментальної частини, обробка результатів, оформлення статі).

8. Инновационный патент № 26350 Республики Казахстан на изобретение. Лекарственный препарат - суппозиторий андрогенного действия / А. И. Тихонов, А. Т. Олмесекова. -№ 2012/0081.1; заявка 20.01.2012; опубл. 29.10.2012. (Особистий внесок - виконання експерименту, участь в проведенні патентного пошуку, оформлення заявки).

9. Пат. 77597 України, МПК51 А 61 К 35/64, А 61 К 31/00. Фармацевтична композиція у формі супозиторіїв андрогенної дії / О. І. Тихонов, А. Т. Олмесекова: заявник і патентовласник Національний фармацевтичний університет. - заявл. 26.06.2012; опубл. 25.02.2013; Бюл. № 4 р. (Особистий внесок - виконання експерименту, участь в проведенні патентного пошуку, оформлення заявки).

10. Олмесекова А.Т. Технологія приготування комбінованих супозиторіїв андрогенної дії в умовах аптек: інформ. лист / Тихонов О.І., Олмесекова А.Т. // К.: Укрмедпатентінформ, 2012. - № 260. - 4 с.

11. Білаш І.А. Цинк дефіцитні стани: сучасні погляди на проблему / І.А. Білаш, А.Т. Олмесекова, Т.М. Зубченко // Актуальні питання створення нових лікарських засобів : матеріали Всеукр. наук.-практ. конф. студентів та молодих вчених, присвяченої 140-річчю з дня народження д-ра фармац. та хім. наук, проф. М.О. Валяшко, м. Харків, 21 квітня 2011 р., Х.: Вид-во НФаУ, 2011. - С. 180.

12. Тихонов А.И. Перспективы разработки апипрепаратов для фармакотерапии мужского бесплодия / А.И. Тихонов, А.Т. Олмесекова // Актуальні питання створення нових лікарських засобів : матеріали Всеукр. наук.-практ. конф. студентів та молодих вчених, присвяченої 140-річчю з дня народження д-ра фармац. та хім. наук, проф. М.О. Валяшко, м. Харків, 21 квітня 2011 р., Х.: Вид-во НФаУ, 2011. - С. 218

13. Тихонов А.И. Применение липофильного экстракта обножки пчелиной для лечения мужского бесплодия / А.И. Тихонов, А.Т. Олмесекова // Здобутки клінічної та експериментальної медицини : зб. матеріалів LV підсум. наук.-практ. конф., м. Тернопіль, 9 червня 2011 р. - Тернопіль : Вид-во ТДМУ «УКРМЕДКНИГА», 2011. - С. 145.

14. Тихонов А.И. Продукты пчеловодства - перспективные источники лечения мужского бесплодия / А.И. Тихонов, А.Т. Олмесекова // «Апітерапія» сьогодення та майбутнє фармації : матеріали IV з'їзду апітерапевтів України, м. Київ, 12-13 травня 2011. - Х.: Вид-во Оригінал, 2011. - С. 406-409.

15. Тихонов А.И. Цинк в медицинской и фармацевтической практике / А.И. Тихонов, А.Т. Олмесекова // Современные аспекты разработки и совершенствования состава технологии лекарственных форм : материалы Всеросс. наук.-практ. интернет-конф. с междунар. уастием, г. Курск, 27 апреля 2011 г. - К.: ГОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России, 2011. - С. 149-152.

16. Тихонов А.И. Доказательная фармация: Биофармацевтические исследования суппозиторий андрогенного действия / А.И. Тихонов, А.Т. Олмесекова, В.В. Михайленко // Український вісник психоневрології. - 2011. - Т. 19, вип. № 2 (67) (дод.) - С. 244.

17. Тихонов А.И. Проблемы создания и внедрения в производство лекарственных средств на основе продуктов пчеловодства для лечения мужского бесплодия / А.И. Тихонов, А.Т. Олмесекова // Современные достижения медицинской и фармацевтической науки : материалы I междунар. интернет-конф. молодых учених, г. Запорожье, 23-25 октября 2012 г. - З.: Изд-во ЗДМУ, 2012. - С. 119-120.

18. Олмесекова А.Т. Исследование специфической активности комбинированных суппозиториев андрогенного действия / А.Т. Олмесекова, А.И. Тихонов // Сучасні досягнення фармацевтичної технології : матеріали ІІІ наук.-практ. конф. з міжнар. участю, м. Харків, 21-23 листопада 2012 р. - Х.: Вид-во НФаУ, 2012. - С.119.

АНОТАЦІЯ

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук за спеціальністю 15.00.01 - технологія ліків, організація фармацевтичної справи та судова фармація - Національний фармацевтичний університет, м. Харків, 2013.

Вперше теоретично та експериментально обґрунтовано склад та технологію препарату «Ліпаргін» для профілактики та лікування чоловічого безпліддя.

На підставі результатів фізико-хімічних, фармако-технологічних, біофармацевтичних, мікробіологічних та фармакологічних досліджень обґрунтовано склад та раціональну технологію супозиторіїв «Ліпаргін» андрогенної дії.

Розроблено методики стандартизації андрогенного препарату «Ліпаргін», вивчено його стабільність та встановлено термін придатності. Фармакологічними дослідженнями доведена нешкідливість препарату та володіння вираженою андрогенною дією. Розроблено проекти технологічного регламенту та методик контролю якості на препарат «Ліпаргін».

За результатами експериментальних досліджень отримано інноваційний патент Республіки Казахстан (№ 26350 від 29.10.2012 р.) «Лекарственный препарат - суппозиторий андрогенного действия» та патент України на корисну модель (№ 77597 від 25.02.2013 р.).

Ключові слова: супозиторії «Ліпаргін», андрологія, ліпофільний екстракт обніжжя бджолиного, аргінін, цінку сульфату гептагідрат.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 15.00.01 - технология лекарств, организация фармацевтического дела и судебная фармация - Национальный фармацевтический университет, г. Харьков, 2013 г.

Впервые проведены комплексные исследования по теоретическому и экспериментальному обоснованию состава и технологии нового лекарственного препарата андрогенного действия - суппозиториев «Липаргин» для профилактики и лечения сексуальных расстройств и нарушений репродуктивной функции у мужчин, а именно бесплодия.

По данным анализа литературных источников и фармакологических исследований установлена активная терапевтическая доза действующих веществ при ректальном введении суппозиториев. Необходимую андрогенную активность в составе препарата обеспечивают 0,05 г липофильного экстракта обножки пчелиной (ЛЭОП), 0,25 г аргинина и 0,1 г цинка сульфата гептагидрата.

С целью определения оптимальной суппозиторной основы препарата были проведены физико-химические, фармако-технологические и биофармацевтические исследования, которые показали, что наиболее оптимальной основой является витепсол Н32. Результаты биофармацевтических исследований показали, что на интенсивность высвобождения аргинина, цинка сульфата гептагидрата из суппозиториев влияет вид суппозиторной основы и ПАВ. Для более полного высвобождения действующих веществ из суппозиторной основы в ее состав введено ПАВ - цетостеариловый спирт в количестве 0,1 г. В качестве растворителей для аргинина была использована вода очищенная, а для цинка сульфата гептагидрата - глицерин. По результатам проведенных исследований определена оптимальная концентрация антиоксиданта (БОА) - 0,005 г на один суппозиторий.

С помощью термогравиметрического анализа доказана термическая стабильность компонентов и готового препарата, что позволило установить параметры ведения технологического процесса. Исследованиями структурно-механических свойств обоснованы оптимальные температурные режимы для приготовления суппозиторной массы и растворения действующих веществ в основе, гомогенизации и разлива суппозиториев в формы (45±5 0С).

На основании полученных экспериментальных данных разработана технология приготовления андрогенного препарата для лечения мужского бесплодия в аптечных и промышленных условиях. Установлены критические точки производства суппозиториев «Липаргин» в условиях промышленного изготовления на базе АО «Лекхим-Харьков». Составлен проект технологического регламента на препарат «Липаргин».

Для оценки качества суппозиториев «Липаргин» были изучены его физические, физико-химические, фармако-технологические, микробиологические свойства. С целью идентификации действующих веществ (ЛЕОП, аргинина, цинка сульфата гептагидрата) были предложены характерные химические реакции. Количественное содержание действующих и вспомогательных веществ (бутилоксианизол) в препарате «Липаргин» предложено определить методом абсорбционной спектрофотомерии (сумму каротиноидов в пересчете на в-каротин); высокоэффективной жидкостной хроматографией (аргинин и бутилоксианизол) и комплексонометрическим титрованием - цинка сульфат гептагидрат.

Разработанные методики стандартизации препарата «Липаргин» были положены в основу проекта методов контроля качества.

Микробиологическими исследованиями установлено, что суппозитории «Липаргин» андрогенного действия по уровню микробной контаминации соответствуют требованиям ГФУ.

Экспериментальными исследов...