Влияние динамической электронейростимуляции на морфометрические показатели слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи экспериментального животного с моделью хронического синусита

Влияние динамической электронейростимуляции на морфометрические показатели слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи экспериментального животного с моделью хронического синусита

Учреждение образования «Белорусский государственный медицинский университет»

(г. Минск, Беларусь)

Резюме. Мета дослідження - визначити вплив динамічної електронейростимуляції (ДЕНС) на морфометричні показники слизової оболонки верхньощелепної пазухи (ВЩП) експериментальної тварини з моделлю хронічного синуситу. Дослідження виконано на 22 самцях кролика, розділених на дві серії. У серії А досліджували формування хронічного синуситу ВЩП. У серії B визначали вплив ДЕНС на перебіг захворювання. Виявлене зниження активності хронічного запального процесу з явним переважанням продуктивної тканинної реакції і значним зниженням ексудативного компонента, зменшенням ступеня його вираженості і тривалості, переважання процесів організації та репарації дозволяє досягти стійкої ремісії, і зробити висновок про позитивний лікувальний вплив ДЕНС.

Ключові слова: експериментальний синусит, верхньощелепна пазуха, морфометрія, рефлексотерапія, динамічна електронейростимуляція.

ВЛИЯНИЕ ДИНАМИЧЕСКОЙ ЭЛЕКТРОНЕЙРОСТИМУЛЯЦИИ НА МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ВЕРХНЕЧЕЛЮСТНОЙ ПАЗУХИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ЖИВОТНОГО С МОДЕЛЬЮ ХРОНИЧЕСКОГО СИНУСИТА

Сурин А. В., Походенько-Чудакова И. О., Герасимович А. И., Адольф Е. В.

Резюме. Цель исследования - определить влияние динамической электронейростимуляции (ДЭНС) на морфометрические показатели слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи (ВЧП) экспериментального животного с моделью хронического синусита. Исследование выполнено на 22 самцах кролика, разделенных на две серии. В серии А исследовали формирование хронического синусита ВЧП. В серии B определяли влияние ДЭНС на течение заболевания. Выявленное снижение активности хронического воспалительного процесса с явным преобладанием продуктивной тканевой реакции и значительным снижением экссудативного компонента, уменьшением степени его выраженности и продолжи- тельности, преобладание процессов организации и репарации позволяет достичь стойкой ремиссии, и сделать вывод о позитивном лечебном воздействии ДЭНС.

Ключевые слова: экспериментальный синусит, верхнечелюстная пазуха, морфометрия, рефлексотерапия, динамическая электронейростимуляция.

THE INFLUENCE OF DYNAMIC ELECTRONEUROSTIMULATION ON MORPHOMETRIC INDICES OF MUCOSA OF THE MAXILLARY SINUS OF EXPERIMENTAL ANIMAL WITH MODEL OF CHRONIC SINUSITIS

Surin A. V., Pohodenko-Chudakova I. O., Gerasimovich A. I., Adolf Y. V.

Abstract. Morphometry meets all the principles of evidence-based medicine and objectively confirms the orientation of the pathological process dynamics when those or other methods of treatment are applied.

The purpose of the study was to determine the influence of dynamic electroneurostimulation (DENS) on morphometric parameters of mucosa of the maxillary sinus of experimental animal model of chronic sinusitis.

Object and methods. The study involved 22 male rabbit with the model of chronic sinusitis of the maxillary sinus and divided into two series. In series A (12) we studied the formation of chronic sinusitis of the maxillary sinus in a period of 3 months after the introduction into the sinus of the filling material for filling root canals of teeth. In series B (10) we studied the influence of DENS on the course of chronic sinusitis. The study included a descriptive morphology and morphometry with the calculation in the digitized fields of view of inflammatory cell infiltration (leucocytes, eosinophilic granulocytes, lymphocytes, plasma cells, macrophages, giant multinucleated cells) and the number of vessels and fibroblasts, reflecting the processes of reparative regeneration.

Results. Morphological pattern and morphometric parameters of the series A show that the introduction into the maxillary sinus of the filling material stimulates the conditions for the inflammatory process with chronic undulating relapsing.

In series B it was noted that after a course of DENS in most of examinations we found chronic productive inflammation going into a phase of decay with a predominance of processes of the organization and regeneration. There were no visible exudative reaction including microabscesses, there were only minor small focus admixture of neutrophils and eosinophilic granulocytes in a predominant mononuclear infiltrate. In the his to pathological picture the regenerative processes with a relatively rare appearance of fibroblasts, dominated signs of fibroplasia, some atrophy of the epithelium. Determined pronounced neoangiogenesis, represented by clusters of full-blooded venules, proliferating endotheliumand granulation tissue varying degrees of maturity, emboli, and aggregates of foreign material in the lymph and blood vessels. It was noted the formation of polyps with a predominance of macrophage giant cell granulomas over. Only in one field of view were identified coarse inclusions filling material, “immured” in a dense coarse-fibered connective tissue, indicating a more intense elimination of foreign material.

Conclusion. Identified in the experiment the decrease in the activity of chronic inflammatory process with a clear predominance of productive tissue reactions and a significant decrease in exudation, decrease in the degree of its severity and duration, the predominance of the processes of the organization and reparation allows to achieve stable remission and therefore to conclude that the positive therapeutic effect of DENS on the course of chronic sinusitis of the maxillary sinus.

Prospects for further research. Experimental results prove the feasibility of the application of DENS in complex postoperative treatment in the clinics.

Key words: experimental sinusitis, maxillary sinus, morphometry, reflexology, dynamic electroneurostimulation.

Вступление. Общеизвестно, что морфометрическое исследование соответствует всем принципам доказательной медицины [3,4]. Оно способно объективно подтвердить направленность динамики течения патологического процесса при применении тех или иных методов лечения, в том числе хирургических [9,16] и восстановительных [21].

Хронический одонтогенный синусит верхнечелюстной пазухи (ВЧП), развившийся вследствие проникновения инородного тела - пломбировочного материала под слизистую оболочку, выстилающую синус или непосредственно в пазуху, констатируется достаточно часто [17,18]. Как правило, это неразрывно связано с сенсибилизацией организма пациента, что неоднократно подчеркивалось как в экспериментальных [23], так и в клинических исследованиях [20].

Указанная причина развития хронического одонтогенного синусита ВЧП в период одного из обострений на фоне снижения, как местных [22], так и общих [19] показателей иммунитета, по сообщениям ряда авторов, наиболее часто приводит к тяжелым осложнениям, таким как орбитальные, тромбоз кавернозного синуса, менингит, менингоэнцефалит, абсцесс головного мозга, сепсис [24,25].

На текущий момент предложено много методик хирургического лечения хронического одонтогенного синусита, однако их применение не всегда и не в полной мере позволяет достичь желаемого результата [2].

Последний факт указывает на то, что кроме техники и метода выполнения операции, для обеспечения позитивного исхода заболевания, если не определяющим, то в достаточной степени важным, является комплекс восстановительного лечения и реабилитационных мероприятий[5].

В последние десятилетия все чаще в составе комплексного лечения воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области используются рефлексотерапия, позволяющая достичь хороших непосредственных и отдаленных функциональноэстетических результатов [11].

Динамическая электронейростимуляция (ДЭНС) в кожной проекции акупунктурных точек (АТ) представляет собой один из видов рефлексотерапевтического воздействия [14]. Основным его преимуществом является обеспечение максимально приближенного эффекта к иглоукалыванию без повреждения кожных покровов. При этом в специальной литературе на текущий момент отсутствуют данные о влиянии ДЭНС на изменение морфометрических показателей слизистой оболочки, выстилающей синус, при использовании данного вида рефлексотерапии для лечения хронического синусита ВЧП у экспериментальных животных.

Цель исследования - определить влияние динамической электронейростимуляции на морфометрические показатели слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи экспериментального животного с моделью хронического синусита.

Объект и методы исследования. Исследования проводили в соответствии с требованиями, регламентирующими работу с экспериментальными животными [6]. Перед проведением эксперимента было получено положительное заключение био- этической комиссии учреждения образования «Белорусский государственный медицинский университет». В исследование были включены 22 самца кроликов породы Шиншилла приблизительно одного возраста и массы тела. Указанным животным создали модели хронического синусита верхнечелюстной пазухи с соблюдением всех этапов авторской методики [12].

Далее эти животные были разделены на две серии. Серии А (12 особей) предназначалась для исследования формирования экспериментальной модели хронического синусита ВЧП. В соответствии со стандартными периодами исследования репаративной регенерации костной ткани и ее ремоделирования [8,26], с учетом данных специальной литературы о временных отрезках, необходимых для констатации изменений, происходящих в слизистой оболочке, выстилающей ВЧП [10], и на основании данных собственных исследований был установлен срок формирования экспериментальной модели хронического синусита верхнечелюстной пазухи - 3 месяца после введения в синус пломбировочного материала (инородного тела), предназначенного для заполнения корневых каналов зубов.

Серия B (10 особей) была предназначения для исследования влияния рефлексотерапии на течение хронического синусита ВЧП. Животные данной серии получали ДЭНС на кожную проекцию АТ при помощи аппарата чрезкожной электронейростимуляции с выносным точечным электродом. Курс лечения включал 1 0 процедур, выполняем ых ежедневно или через день на протяжении двух недель. Подтверждение правильности определения локализации АТ выполняли на основании измерения сопротивления кожных покровов в зоне кожной проекции указанного пункта. Раздражение осуществляли в накожной проекции АТ в режиме, не вызывавшем негативных реакций у животного с частотой от 10 до 77 Гц [14]. Подбор акупунктурных точек на процедуру осуществлялся с таким расчетом, чтобы задействовать одну пару точек общего действия и 2-3 локальные АТ, таким образом, чтобы суммарное время процедуры не превышало 20 минут, и так, чтобы одна и та же АТ не повторялась в идущих подряд процедурах.

В указанный срок животных выводили из эксперимента путем передозировки тиопентала натрия и осуществляли забор материала для патогистологического исследования. Выпиливание блоков верхней челюсти проводили, отступив 0,7-0,8 см по обе стороны от места введения в ВЧП пломбировочного материала. Препараты тканей фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, подвергали декальцинации в азотной кислоте, после чего проводили по стандартной схеме через спирты восходящей крепости и заключали в парафин [8]. Изготовленные серийные патогистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином с последующим заключением в бальзам. Микропрепараты исследовали с помощью микроскопа LeicaDM 2500.

Параллельно с этим осуществляли морфометрическое исследование по стандартной методике серийных срезов с подсчетом в оцифрованных полях зрения клеток воспалительного инфильтрата (лейкоцитов, эозинофильных гранулоцитов, лимфоцитов, плазматических клеток, макрофагов, гигантских многоядерных клеток), также высчитывали число элементов сосудистого русла и фибробластов, отражающих процессы репаративной регенерации [1,7].

Затем все полученные данные подвергались обработке при помощи методов медицинской статистики и пакета программы Statistica 10,0 [13]. Для оценки изменения клеточных популяций при воздействии ДЭНС и для сравнения результатов серий A и B использовали критерий Манна-Уитни (U). Подсчеты выполняли в 76 полях зрения.

Результаты исследования и их обсуждение. В микропрепаратах серии A было выявлено хроническое неспецифическое воспаление с умеренной очаговой мононуклеарной воспалительной инфильтрацией, формирующимися и заживающими эрозиями слизистой оболочки. Определено формирование гиперпластических полипов слизистой оболочки с преобладанием макрофагальных гранулем. Гигантские многоядерные клетки были единичными или не выявлялись (в отдельных наблюдениях оно доходит до нуля), значительно сокращается число фибробластов. Отмечался очаговый склероз и ангиоматоз собственной пластинки, эктазия кровеносных и лимфатических сосудов. В просвете отдельных лимфатических сосудов присутствовали эмболы из инородных материалов.

В воспалительном инфильтрате происходит уменьшение количества лейкоцитов, макрофагов и эозинофильных гранулоцитов с одновременным ростом показателя лимфоцитов и плазматических клеток. Число микрососудов сохраняется на высоком уровне (табл.).

Характерная патогистологическая картина для модели экспериментального хронического синусита верхнечелюстного синуса представлена на рисунке 1.

Таблица.

Изменение количественного соотношения клеточных элементов инфильтрата в результате ДЭНС у экспериментальных животных с моделью хронического синусита верхнечелюстной пазухи,

Представленная морфологическая картина и морфометрические показатели свидетельствуют, что введение в верхнечелюстной синус инородного тела - пломбировочного материала для заполнения корневых каналов, создает условия для развития в слизистой оболочке ВЧП воспалительного процесса с хроническим волнообразным рецидивирующим течением. Элиминация инородного тела является неполноценной и незавершенной, его персисти- рование способствует обострению хронического воспаления, рецидивирующему эрозированию слизистой оболочки и образованию полипов, гиганто клеточных гранулем. При этом отмечается деформация и эктазия сосудистого русла слизистой оболочки с формированием конвалют эктазированных сосудов, в просвете которых определяются эмболы инородного тела.

При исследовании микропрепаратов экспериментальных объектов серии B в абсолютном большинстве наблюдений было констатировано, что после курса рефлексотерапевтического воздействия хроническое продуктивное воспаление переходит в фазу затухания (плазматические клетки 0 (0-2), лимфоциты 3,5 (0-14,5)) с преобладанием процессов организации и регенерации. При этом не наблюдалось заметной экссудативной реакции, в том числе микроабсцессов, имела место только незначительная мелкофокусная примесь нейтрофилами (лейкоциты 0 (0-2,0)) и эозинофильными гранулоцитами 0 (0-1,5) в преобладающем моно- нуклеарном инфильтрате. В патогистологической картине преобладали регенераторные процессы с относительно редким появлением фибробластов 42,5 (26,5-80,5), признаками фиброплазии, некоторой атрофией эпителия. Определялся выраженный

Размещено на http://www.allbest.ru/

одонтогенный синусит верхнечелюстной

Размещено на http://www.allbest.ru/

неоангиогенез, представленный скоплениями полнокровных венул, пролиферирующего эндотелия, грануляционной тканью различной степени зрелости, эмболами и агрегатами инородного материала в лимфатических и кровеносных сосудах 135 (73,5-187,0). Отмечалось формирование полипов с преобладанием макрофагальных гранулем (макрофаги 67 (38,5-157,5)) над гигантоклеточными (гигантские клетки 0,5 (0-6,5)). Только в одном поле зрения были выявлены крупнодисперсные включения пломбировочного материала, «замурованные» в плотной грубоволокнистой соединительной ткани, что свидетельствовало о более интенсивной элиминации инородного материала. Данные морфометрические изменения представлены в таблице, а патогистологическая картина, характеризующая морфологические изменения в результате лечебного воздействия, оказываемого ДЭНС, отражена на рисунке 2.

Известно, что важное значение в раннем послеоперационном периоде при хирургическом лечении хронического синусита ВЧП имеет уменьшение отека слизистой оболочки, что способствует нормализации функции естественного соустья, в обязательном порядке влекущее за собой восстановление транспортной функции мерцательного эпителия [15].

Вывод. Таким образом, выявленное в эксперименте снижение активности хронического воспалительного процесса с явным преобладанием продуктивной тканевой реакции и значительным снижением экссудативного компонента, уменьшением степени его выраженности и продолжительности, преобладанием процессов организации и репарации, позволяет достичь стойкой ремиссии, и, следовательно, сделать заключение о позитивном лечебном воздействии ДЭНС на течение хронического синусита верхнечелюстной пазухи.

Перспективы дальнейших исследований. Результаты экспериментального исследования свидетельствуют о положительном воздействии ДЭНС на течение экспериментального хронического синусита верхнечелюстной пазухи и доказывают целесообразность применения данного вида рефлексотерапии в составе комплексного послеоперационного лечения в клинике. Определение клинической эффективности динамической электронейростимуляции и составляет перспективы дальнейших исследований в указанном направлении.

Литература