Фармакологические свойства галодифа и перспективы его клинического применения

Фармакологические свойства галодифа и перспективы его клинического применения

Новожеева Т.П.

Производные мочевины -- перспективный класс биологически активных веществ. Как правило, эти вещества малотоксичны и при этом обладают широким спектром фармакологической активности. Ярким примером является отечественный препарат галодиф, синтезированный в Томском политехническом университете (г. Томск) и первоначально изученный на базе кафедры фармакологии Сибирского медицинского универститета (г. Томск), а затем и в других научных центрах России -- НИИ БАВ (г. Купавна), Институте молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, НИИ фармакологии и НИИ психического здоровья ТНЦ СО РАМН (г. Томск).

Соединение m-хлорбензгидрилмочевина, впоследствие зарегистрированное как препарат галодиф и изученное в ряду других линейных и циклических производных мочевины, показало выраженные противосудорожные свойства на экспериментальных моделях. Галодиф обладает высокой антиконвульсивной активностью при максимальном электрошоке, коразоловых, стрихниновых и камфорных судорогах, выраженным центральным М-холинолитическим и слабым Н-холинолитическим действием, блокирует судорожное действие тиосемикарбазида. Эффективная доза галодифа по тесту максимального электрошока для мышей равна 11,8 мг на 1 кг массы тела. По широте противосудорожного действия препарат превосходит барбитураты -- фенобарбитал, бензонал и фенурон.

Высокая противосудорожная активность (ПСА) была доказана и на других моделях судорожных состояний. В 1972 г. было получено авторское свидетельство на изобретение. В экспериментах на нескольких видах лабораторных животных был изучен механизм ПСА галодифа в сравнении с действием классических противоэпилептических препаратов -- фенобарбитала, дифенина, фенурона.

Галодиф в терапевтических дозах не изменяет двигательную активность и ориентировочные реакции у мышей, увеличивает длительность медикаментозного сна (хлоралгидрат, барбамил, гексобарбитал), не проявляет антирезерпинового действия по тесту резерпиновой гипотермии, не влияет на апоморфиновую стереотипию и не угнетает выработанный условно-оборонительный рефлекс.

Электроэнцефалографический анализ выявил депримирующее действие галодифа на двигательную область коры больших полушарий, интраламинарные ядра таламуса, головку хвостатого ядра и ретикулярную формацию среднего мозга.

В механизме противосудорожного действия галодифа определенную роль играет его нормализующее действие на водно-электролитный баланс головного мозга. Галодиф стабилизирует концентрационный градиент ионов, препятствует изменению мембранной проницаемости и мембранного потенциала клетки. Препарат тормозит развитие отека-набухания мозга при эпилептиформных судорогах.

Галодиф малотоксичен: LD50 (при введении внутрь) для мышей -- 2 570 мг на 1 кг массы тела, для крыс -- более 4 000 мг на 1 кг массы тела, имеет большую широту терапевтического действия. В хронических экспериментах на крысах, кроликах и собаках при введении галодифа не выявлено токсического влияния на функциональное состояние печени, почек, щитовидной железы, сердечно-сосудистой и центральной нервной систем.

Клиническое изучение галодифа проведено в 7 клиниках стран СНГ на 528 больных эпилепсией различного генеза. Результаты клинических испытаний показали, что галодиф является эффективным антиконвульсантом, обладающим широким спектром противоэпилептического действия. Препарат наиболее эффективно купирует первично и вторично генерализованные тонико-клонические судорожные припадки. Он также показан больным, страдающим фокальными припадками типа джексоновских, височной эпилепсией с психомоторными и психосенсорными компонентами. Галодиф целесообразно назначать больным эпилепсией с резидуальными органическими поражениями ЦНС, при которых другие препараты недостаточно эффективны. Галодиф оказывает умеренное седативное действие при дистимических и дистрофических явлениях. Он показан при алкогольной эпилепсии и купировании алкогольного делирия. Препарат хорошо переносится и не вызывает осложнений. галодиф мочевина метаболизм ксенобиотик

На основании результатов доклинических и клинических испытаний Фармакологический комитет Минздрава СССР рекомендовал галодиф к клиническому применению в качестве противоэпилептического средства и промышленному выпуску (протокол № 6 от 25.03.1988 г.).

В ходе экспериментальных исследований и клинической апробации у галодифа были выявлены новые фармакологические свойства, которые повышают его ценность как лекарственного средства. Так, в эксперименте и клинических наблюдениях у галодифа обнаружено значительное противоаритмическое действие при различных моделях аритмии. Другим ценным свойством галодифа является его антигипоксическая активность, которая исследована и доказана на моделях асфиксии, гемической, гипербарической и гиперкапнической гипоксии у экспериментальных животных. Возможно, антигипоксические свойства важны и для реализации противосудорожной активности галодифа. Дальнейшие исследования показали, что галодиф эффективен как средство, снижающее алкогольную мотивацию в эксперименте у крыс.

В процессе изучения безвредности у галодифа были выявлены свойства индуктора ферментов метаболизма ксенобиотиков. При оценке функционального состояния печени было обнаружено снижение коэффициента ретенции бромсульфалеина через 1--3 мес введения препарата, что указывает на активацию антитоксической и экскреторной функций печени. Кроме того, введение галодифа значительно сокращает длительность гексобарбиталового сна, что также указывает на активацию ферментных систем печени, участвующих в метаболизме гексобарбитала.

Дальнейшее углубленное изучение механизма ферментиндуцирующего действия галодифа показало, что препарат вызывает индукцию цитохрома Р-450 по смешанному типу, при этом именно хлор в мета-положении отвечает за появление свойств индуктора метилхолантренового типа, тогда как исходная молекула бензгидрилмочевины является индуктором фенобарбиталового типа.

Как показали результаты исследования, галодиф так же, как фенобарбитал и зиксорин, вызывает достоверное увеличение содержания микросомального цитохрома Р-450 в печени крыс, при этом существенно возрастают активность флавопротеида -- цитохром-Р-450-редуктазы и уровень цитохрома b5. Молекулярная масса индуцированных изучаемыми соединениями форм гемопротеида установлена с помощью SDS-гельэлектрофореза. Увеличение интенсивности полос белка под влиянием галодифа соответствует молеку-лярной массе 52 кДа и указывает на синтез белков микросом -- цитохрома Р-450, характерных для фенобарбитала, т.е. формы Р-450b+e .

Качественная оценка индуцированных форм цитохрома Р-450 в микросомах печени животных, получавших галодиф, проведена в реакции двойной иммунодиффузии по Оухтерлони с помощью антител против цитохромов Р-450b и Р-450с. Микросомы, выделенные из печени крыс после обработки фенобарбиталом, образуют линию преципитации с анти-Р-450b, при этом микросомы из печени крыс, получавших галодиф, дают линию преципитации и с анти-Р-450с. Количественное содержание изоформ цитохрома Р-450, иммунологически идентичных формам «b+e» и «с», определяли методом ракетного иммуноэлектрофореза с использованием анти-Р-450b+e и анти-Р-450с. Галодиф так же, как и фенобарбитал, вызывает достоверное увеличение содержания формы цитохрома Р-450b+e. Вместе с тем введение галодифа способствует и параллельному приросту содержания цитохрома Р-450с.

Каталитическую активность цитохром-Р-450-зависимой монооксигеназной системы оценивали в отношении метаболизма неспецифичных субстратов-ксенобиотиков: аминопирина и анилина. Для оценки специфической каталитической активности форм цитохрома Р-450, индуцированных галодифом, были использованы субстраты, метаболизм которых строго связан с определенными формами гемопротеида. Галодиф, как и фенобарбитал, вызывает существенное увеличение скорости О-деалкилирования 7-пентоксирезору- фина, что является характерным признаком индукции фенобарбиталового типа. Одновременно с этим галодиф вызывает существенное увеличение скорости О-деэтилирования 7-этоксирезоруфина, что согласуется с результатами иммунохимического анализа и характерно для индукции метилхолантренового типа.

Галодиф так же, как и фенобарбитал, ускоряет гидроксилирование андростендиона в положении 16-, что связывают с индукцией изоформы Р-450b. Скорость метаболизма этого гормона в положениях 7-, 16- и 6- изменяется несущественно, за исключением окисления по положению 16-, где наблюдаются тенденция к снижению уровня метаболитов и существенное ускорение метаболизма этого гормона в позиции 6. Это указывает на индукцию изоформы гемопротеида Р-450р.

Исходя из полученных данных можно сделать вывод о фенобарбиталовом типе индукции цитохрома Р-450, вызываемом галодифом. Вместе с тем галодиф проявляет одновременно и все признаки индуктора метилхолантренового типа, а также свойства индуктора PCN-типа. Кроме того, галодиф вызывает выраженное увеличение активности фермента II фазы биотрансформации ксенобиотиков -- микросомальной глутатион-S-трансферазы печени крыс.

Таким образом, линейное производное мочевины галодиф является малотоксичным и высокоактивным индуктором монооксигеназной системы печени и некоторых ферментов II фазы биотрансформациии, что делает его перспективными для коррекции сниженной антитоксической функции печени при некоторых патологических и физиологических состояниях. В этом аспекте представляет клинический интерес эффективность галодифа при некоторых экспериментальных моделях, в частности, при токсическом ССl4-гепатите, D-галактозаминовом гепатите, подпеченочном и внутрипеченочном холестазе, тотальной ишемии печени у крыс и викасоловой гипербилирубинемии у крысят.

Таким образом, линейное производное мочевины препарат галодиф обладает широким спектром фармакологической активности и безопасен при длительном назначении и в условиях патологии печени. Кроме того, препарат соответствует фармакоэкономическим критериям, предъявляемым к современным фармакологическим средствам.

Размещено на Allbest.ru