Противотуберкулезная активность экстракта коры осины (экспериментальное исследование)

Противотуберкулезная активность экстракта коры осины (экспериментальное исследование)

Буркова В.Н.

Проблема заболеваемости туберкулезом в настоящее время весьма актуальна. В мире насчитывается 10 млн человек бацилловыделителей. Столько же диагностируется больных активным туберкулезом. Наибольшее число больных туберкулезом зарегистрировано в Африке и Юго-Восточной Азии. Заболеваемость туберкулезом по России в среднем составляет 87,3 случая на 100 тыс. населения. в Западной и Восточной Сибири наблюдается эпидемия туберкулеза. Противотуберкулезные препараты, подразделяющиеся на жизненно важные и резервные, высокоэффективны, но к ним быстро развивается устойчивость микобактерий и возникают побочные эффекты. Последние часто не позволяют провести курс химиотерапии в полном объеме, что, в свою очередь, обусловливает рост заболеваемости туберкулезом на современном этапе (Мишин В.Ю. и соавт., 2005; Перельман М.И. и соавт., 1990; Стрелис А.К., 1999).

Учитывая вышеизложенное, в настоящее время нет достаточно эффективного и нетоксичного противотуберкулезного препарата (Машковский М.Д., 2004; Хоменко А.Г., 1980). Как известно, многие растительные средства обладают выраженным антибактериальным эффектом, к тому же они не вызывают привыкания, не обладают побочными эффектами. В литературе указано на использование коры осины в народной медицине для лечения туберкулеза (Носаль М.А., Носаль И.М., 1991). В связи с вышесказанным представляют интерес экспериментальные исследования с экстрактом коры осины.

Экспериментальные исследования проводились в опыте in vitro согласно методическим указаниям по изучению противотуберкулезной активности фармакологических веществ. Для определения чувствительности из патологического материала (мокрота больных активным туберкулезом) выделялись штаммы микобактерий, как чувствительные к основным противотуберкулезным препаратам, так и имеющие различные спектры устойчивости к ним. Приготовление стандартного раствора бактериальной суспензии осуществляли согласно «Методическим указаниям по изучению противотуберкулезной активности фармакологических веществ» (М., 2000). Отмытые от бактерий микобактерии туберкулеза (МБТ) суспензировали в 0,1 мл 0,9%-го раствора Nacl. Из полученной суспензии приготавливали мазки и окрашивали по Цилю--Нильсену, затем засевали по 0,2 мл на 2 пробирки со средой Левенштейна--Йенсена и Финн-2 (согласно методическим указаниям). Результат оценивали по интенсивности косообразования и по количеству микобактерий в полях зрения. Учет результатов культуральных исследований проводили через 28 дней и через 2,5 мес. Результаты исследования отражены в таблице.

туберкулез экстракт кора осина

Эксперимент in vitro по испытанию экстракта коры осины на противотуберкулезную активность

Из таблицы видно, что на питательных средах после посева штаммов микобактерий отмечался обильный рост колоний; после добавления экстракта коры осины по 0,3 мл в каждую пробирку через 28 дней колоний на косяке не обнаружено во всех пробирках, при микроскопии также МБТ не обнаружено. Аналогичный результат получен и через 2,5 мес наблюдений. В контрольных пробирках на обеих средах рост колоний продолжался в течение всего эксперимента.

При неоднократном повторении эксперимента результаты были аналогичны проведенному исследованию.

Как видно из таблицы, экстракт коры осины обладает выраженным туберкулоцидным действием в опыте in vitro.

В бактериологической лаборатории Томской областной туберкулезной клинической больницы (г. Томск) проведено 50 исследований патологического материала больных с впервые выявленным туберкулезом.

1. Серия из 8 проб с приготовлением среды Левенштейна--Йенсена, инактивация которой проведена на протяжении 45 мин при температуре 80--82 С. Суспензия МБТ соответствовала общепринятому стандарту и закапывалась на среду по 0,2 мл во все пробирки. Популин без разведения закапывался в основную и контрольную пробирки. Длительность опыта составляла 3 нед. При контрольном исследовании в пробирках с популином роста МБТ не отмечалось.

2. Серия из 12 проб, когда популин был введен при изготовлении самой питательной среды: на 50 мл среды добавлено 25 мл популина. Засеяно 0,2 мл МБТ как в контрольные пробирки, так и в пробирки с популином. Через 3 нед проведена оценка результатов исследования.

В контрольных пробирках (чистая питательная среда Левенштейна--Йенсена) получен рост МБТ, в основных, с популином, -- роста МБТ нет.

3. Серия из 8 проб, когда при приготовлении среды Левенштейна--Йенсена добавляли на 50 мл среды 5 мл популина. Вводилось 0,2 мл суспензии МБТ в контрольные пробирки (среда Левенштейна--Йенсена), а в основные (опытные) пробирки (среда Левенштейна--Йенсена) -- с популином.

В контрольных пробирках констатирован рост МБТ, в основных (опытных) роста МБТ нет.

4. Серия из 7 проб с приготовлением среды следующим образом: на 50 мл среды Левенштейна--Йенсена введено 1,0 мл популина в первом разведении (1 мл популина + 9 мл физиологического раствора) и 1 мл второго разведения (1 мл первого разведения + 9 мл физиологического раствора). При введении суспензии МБТ по 0,2 мл в контрольную пробирку и основные пробирки, содержащие первое и второе разведения популина, получен рост МБТ во всех случаях.

5. Серия из 15 проб с приготовлением среды следующих разведений: 1 мл популина + 5 мл физраствора; 2 мл популина + 5 мл физраствора. На 50 мл среды Левенштейна--Йенсена добавлено по 1 мл каждого их двух разведений. При закапывании суспензии по 0,2 мл в контрольные пробирки и пробирки с разведениями популина в среде Левенштейна--Йенсена получены следующие результаты. Отмечен рост МБТ в контрольных пробирках (чистая среда Левенштейна--Йенсена) и в случае добавления на 50 мл среды Левенштейна--Йенсена 1 мл популина разведения 1 : 5, в третьем варианте, когда на 50 мл среды Левенштейна--Йенсена добавлялся популин в разведении 2 : 5, роста МБТ не было.

Перечисленные результаты опытов в бактериологической лаборатории Томской областной клинической больницы показали, что экстракт коры осины в достаточных концентрациях задерживает рост МБТ. В связи с этим важным становится установление оптимальной концентрации популина, обеспечивающей задержку роста МБТ.

В бактериологической лаборатории Томского областного противотуберкулезного диспансера проведен посев культур МБТ 21 больного с впервые выявленным туберкулезом легких.

6. Использовалась среда Левенштейна--Йенсена, когда к 1 мл популина добавляли 1 мл физраствора. На косяк культуры МБТ добавляли 0,2 мл популина, разведенного физраствором. Количество наблюдений -- 21 (основные и контрольные пробирки).

В контрольных пробирках отмечен рост МБТ, в основных роста МБТ нет.

7. К 1 мл популина добавляли 5 мл физраствора. Из данного разведения 1 мл вводили в 50 мл среды Левенштейна--Йенсена. Количество наблюдений -- 21. В 8 случаях нет роста, в 13 -- рост есть.

8. К 2 мл популина добавляли 5 мл физраствора. Из данного разведения 1 мл вводили в 50 мл среды Левенштейна--Йенсена. Количество наблюдений -- 21. В 15 случаях нет роста, в 6 рост есть.

9. К 1 мл популина добавляли 5 мл физраствора. Из данного разведения 0,2 мл вводили на косяк культуры МБТ (0,2 мл). Количество наблюдений -- 21. В 9 случаях нет роста, в 12 рост есть.

10. Проведен контроль, где использовали туберкулостатик канамицин. Количество наблюдений -- 20. В 18 случаях нет роста, в 2 рост есть.

Экстракт коры осины обладает противотуберкулезной активностью в экспериментальных условиях. Перспективен для изучения в клинике.

По данным проведенных экспериментальных исследований получен патент РФ 2210379 «Противотуберкулезное средство» (2003).

Размещено на Allbest.ru