Определение антиоксидантной активности плодово-ягодного сырья
Оценка антиоксидантной активности лекарственных растений с применением метода гальваностатической кулонометрии на приборе "Эксперт-006". Биологическая ценность и потребительские свойства в плодах рябины, водных экстрактах боярышника и гребней винограда.
Рубрика | Медицина |
Вид | статья |
Язык | русский |
Дата добавления | 04.12.2018 |
Размер файла | 36,9 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Полная исследовательская публикация ________________ Романова Н.Г., Зеленков В.Н. и Лапин А.А.
Размещено на http://www.allbest.ru/
76 ______________ http://butlerov.com/ ______________ ©--Butlerov Communications. 2010. Vol.22. No.11. P.71-75.
Тематический раздел: Химия возобновляемых биоресурсов. Полная исследовательская публикация
Подраздел: Методы исследования природных веществ. Регистрационный код публикации: 10-22-11-71
г. Казань. Республика Татарстан. Россия. __________ ©--Бутлеровские сообщения. 2010. Т.22. №11. ________ 71
Определение антиоксидантной активности плодово-ягодного сырья
Романова Наталья Геннадиевна,1* Зеленков Валерий Николаевич2*
и Лапин Анатолий Андреевич3*+
Аннотация
В последнее время проявляется большой интерес к определению антиоксидантной активности пищевых продуктов и напитков, лекарственных препаратов.
Антиоксидантами лекарственных растений являются: витамины С, Е, А, D, K; микроэлементы цинк, селен; биологически активные компоненты, выделенные из растений (арония, черника, гинкго билоба, шиповник, смородина, боярышник, рябина, красный виноград (лоза, косточки, гребни), зеленый чай и пр.), например, биофлавоноиды, антоцианы, каротиноиды и др. В связи с этим оценка антиоксидантной активности разных биологических объектов - актуальная задача.
Целью данного исследования являлось определение антиоксидантной активности плодов боярышника и рябины, гребней винограда, зеленого и черного чая.
Ключевые слова: лекарственные растения, антиоксидантная активность, боярышник, рябина, гребни винограда, зеленый и черный чай, продукты функционального питания.
Введение
Результаты эпидемиологических исследований последних лет указывают на ухудшение показателей здоровья населения практически всех регионов России. При этом большинство заболеваний человечества - следствие воздействия неблагоприятных факторов внешней среды (радиация, ультрафиолет, озон, загрязнение воздуха токсичными соединениями, курение и т.д.) и активации внутренних механизмов образования активных форм кислорода (воспалительные, онкологические заболевания, нервный стресс и др.). Одним из наиболее эффективных подходов в профилактике здоровья является использование продуктов функционального питания, которые, наряду с питательными компонентами (белки, жиры, углеводы), содержат в своем составе микронутриенты, необходимые для обеспечения физиологических потребностей организма и поддержания гомеостаза в норме [5, 6]. Особо важны микронутриенты, обеспечивающие антиоксидантную защиту. Наиболее известными микронутриентами-антиоксидантами являются витамины С, Е, А, D, K; микроэлементы цинк, селен; выделенные из растений (арония, черника, гинкго билоба, шиповник, смородина, боярышник, рябина, красный виноград (лоза, косточки, гребни), зеленый чай и пр.) биологи-чески активные компоненты, например, биофлавоноиды, антоцианы, каротиноиды и др. [4, 8, 11, 16, 17].
В связи с этим оценка антиоксидантной активности разных биологических объектов - актуальная задача.
Целью данного исследования являлось определение антиоксидантной активности плодов боярышника и рябины, гребней винограда, зеленого и черного чая.
Нами впервые была определена антиоксидантная активность некоторых лекарственных растений с применением метода гальваностатической кулонометрии на приборе “Эксперт-006”, с использованием электрогенерированных радикалов брома. Выбор в качестве электро-генерированных титрантов соединений брома обусловлен его высокой реакционной способ-ностью по отношению практически ко всем биоантиоксидантам растительного сырья.
Экспериментальная часть
Перед количественной оценкой суммарной антиоксидантной активности (САОА) определяли влажность образцов на анализаторе влажности МХ-50 А&D Company, Limited (Япония) [1]. Програм-мное обеспечение “WinCT-Moisture” анализатора позволяло нам определять оптимальную темпера-туру сушки как образцов для определения сухого вещества образцов (СВО), так и водных экстрактов для определения содержания абсолютно сухого экстракта (АСЭ). Количественную оценку АОА образцов проводили по методике определения интегральной САОА в соответствии с МВИ 01-44538054-07 методом кулонометрического титрования электрогенерированным бромом на серийном анализаторе “Эксперт-006” [9]. Математическую обработку экспериментальных данных проводили методами дисперсионного анализа [2] и интервальной оценки параметров распределения при помощи t-критерия.
Измерение САОА плодов разных образцов проводили в виде свежеприготовленных водных экстрактов, которые готовили настаиванием в течение 15 минут проб массой в два грамма (в пересчете на сухой вес), заливая их 100 мл кипящей дистиллированной водой. Подготовленное сырье размалы-вали в мельнице для растительных образцов, купажировали в пропорциях в соответствии со схемой опытов и расфасовывали по 2 г в фильтр-пакеты, которые в дальнейшем подвергали завариванию.
По результатам анализа рассчитывали суммарное содержание свободных антиоксидантов в исследуемых образцах в г рутина на 100 г абсолютно сухого образца (а.с.о.) [8].
Результаты и их обсуждение
Боярышник был нами выбран не случайно: препараты боярышника избирательно расширяют коронарные сосуды и сосуды головного мозга, снижают возбудимость нервной системы, усиливают снабжение сердца и мозга кислородом, улучшают обмен веществ, нормализуют ритм сердца, сон и общее состояние, устраняют неприятные ощущения в области сердца, способствуют снижению уровня холестерина в крови [4, 7].
В результате эксперимента была определена САОА свежих и высушенных плодов боярышника (табл. 1). Проведенные исследования САОА свежих образцов боярышника выявили, что максимальные значения САОА отмечаются у боярышника Алма-атинского (1.930), тогда как, образцы боярышника зеленомякотного имеют САОА 1.240 г рутина на 100 г а.с.о., что ниже предыдущих показаний на 0.69 г рутина на 100 г а.с.о. В результате исследования АОА высушенных образцов боярышника выявили, что максимальные значения АОА отмечаются у боярышника мелкоплодного (8.690 г рутина на 100 г а.с.о.), восточного (6.670) и алма-атинского (4.250). При этом, нужно отметить, что боярышник Алма-атинский представляет больший интерес по сравнению с другими боярышниками, т.к. имеет высокую урожайность - 10.6 кг с растения, средний размер и вес плодов - около 16.5 г, а содержание аскорбиновой кислоты - около 27 мг% [13]. На основании проделанной работы был выявлен перспективный вид боярышника - Алма-атинский, его можно рекомендовать для использования в качестве сырья для пищевой промышленности при получении напитков, применяемых современной медициной в качестве лечебно-диетического и профилактического средства больным с различными заболеваниями обмена веществ.
Повышенное содержание антиоксидантных веществ в плодах определяет их биоло-гическую ценность, высокие потребительские свойства.
Плоды рябины обладают желчегонным и мочегонным свойствами, противовоспалительным, кровоостанавливающим, капилляроукрепляющим, витаминным, вяжущим, легким слабительным, потогонным действием, понижают кровяное давление, повышают свертываемость крови, применяются как средство, понижающее содержание жира в печени и холестерина в крови. Различные лечебно-оздоровительные и профилактические свойства плодов рябины обеспечиваются за счет большого количества химических соединений, находящихся в них [7, 10, 14].
Табл. 1. Суммарная антиоксидантная активность водных экстрактов
боярышника разных образцов, г рутина на 100 г а.с.о.
Вид боярышника |
Влажность, % |
САОА |
Sx |
|
Боярышник Алма-атинский (свежие плоды) |
78.18 |
1.93±0.11 |
0.02 |
|
Боярышник зеленомякотный (свежие плоды) |
69.64 |
1.24±0.11 |
0.03 |
|
Боярышник Алма-атинский |
10.39 |
4.25±0.27 |
0.02 |
|
Боярышник мелкоплодный |
9.14 |
8.69±0.11 |
0.005 |
|
Боярышник восточный |
10.45 |
6.67±0.06 |
0.004 |
Проведенный анализ по суммарной САОА плодов рябины различных образцов пред-ставлен в табл. 2.
Табл. 2. Суммарная антиоксидантная активность водных экстрактов
рябины разных образцов, г рутина на 100 г а.с.о. (2005-2007 г.г.)
Вид рябины |
Влажность, % |
АОА |
Sx |
|
Гранатная |
4.89 |
2.98±0.13 |
0.02 |
|
Невежинская желтая |
9.96 |
2.49±0.09 |
0.01 |
|
Невежинская кубовая |
11.22 |
2.42±0.08 |
0.001 |
В результате проведенных исследований установлено, что максимальные значения САОА отмечаются у сорта Гранатная - 2.980 г рутина на 100 г а.с.о., минимальные значения характерны для сортов Невежинская желтая и Невежинская кубовая - 2.490 и 2.420 г рутина на 100 г а.с.о. соответственно, что коррелировало с их биохимическими показателями. Анализируя накопление в плодах рябины витамина С и каротина отмечено, что наиболее высоким их содержанием характеризуются сорта рябины Невежинская желтая и Невежинская кубовая - в среднем за 2 года исследований оно составило 118.5 и 88.5 мг% витамина С и 10.5 и 12 мг% каротина соответственно сортам, тогда как у сорта Гранатная эти показатели были в среднем в два раза ниже [13].
Следует отметить, что плоды рябины, независимо от сорта, характеризовались более низкой антиоксидантной активностью по сравнению с плодами боярышника.
Ценность винограда как сырья для производства функциональных напитков опреде-ляется комплексом содержащихся в нем физиологически активных веществ, витаминов, микроэлементов и прочих соединений, обусловливающих его органолептические и фармако-логические свойства. Как известно из литературных источников, в виноградных гребнях можно обнаружить представителей разных групп химических соединений - углеводы, пектины, витамины, органические кислоты, азотистые и минеральные вещества и др. [15]. Продукты переработки винограда проявляют не меньшую биологическую активность при их использовании, как в чистом виде, так и в составе продуктов функционального питания, т.к. содержат большое количество биологически активных веществ, некоторые из которых являются природными антиоксидантами [12]. Наличие АО в продуктах питания играет важную роль для профилактики болезней и положительно влияет на сохранение и усиление защитных механизмов организма человека.
антиоксидантный лекарственный боярышник гальваностатический
Табл. 3. Суммарная антиоксидантная активность водных экстрактов
гребней винограда разных сортов, г рутина на 100 г а.с.о.
Сорт винограда |
Влажность, % |
АОА |
Sx |
|
Рислинг |
10.59 |
9.84±0.18 |
0.007 |
|
Пино |
14.79 |
9.13±0.07 |
0.003 |
|
Каберне Совиньон |
10.31 |
7.90±0.27 |
0.01 |
|
Бархат |
9.96 |
13.13±0.40 |
0.01 |
Проведенные исследования 4-х образцов показали, что при влажности от 9.96 до 14.79%, самый перспективный образец - гребни виноград сорта Бархат - 13.13 г рутина на 100 г а.с.о., другие образцы имеют более низкий показатель САОА, например, гребни сорта Каберне Совиньон имеют минимальные значения САОА - 7.90 г рутина на 100 г а.с.о.
Самый верный путь обеспечения организма антиоксидантами - это употребление пище-вых продуктов, в том числе напитков, богатых биологически активными веществами, обла-дающими антиоксидантным действием в организме, к которым, в первую очередь, следует отнести чай.
Черный и зеленый чай, обладая высокими органолептическими свойствами, являясь источником ценных физиологически активных соединений, а также благодаря содержанию минеральных элементов, может выступать в качестве основы при производстве функцио-нальных напитков из лекарственного сырья [11, 14]. Зелёный чай является весьма ценным продуктом, пользующимся большой популярностью. На мировом рынке по спросу зелёный чай занимает второе место после чёрного. По ароматическим и вкусовым свойствам зелёный чай очень сильно отличается от чёрного, однако различия между этими видами чая зависят только от способа переработки чайного листа.
С физиологической точки зрения, учитывая высокие лечебно- профилактические и резко выраженные Р-витаминные свойства чайных катехинов, зелёный чай - наиболее биологи-чески ценный продукт. В зелёном чае почти полностью (до 90%) сохраняются все катехины и другие биологически активные вещества, в том числе витамин С [11]. Эти, даже столь незначительные изменения веществ чайного листа вполне достаточны для того, чтобы образо-вались специфические вкусовые и ароматические свойства, характерные для зелёного чая. Учитывая высокую биологическую активность зеленого чая можно предложить его в качестве компонента для производства чайных напитков изготавливаемых из нетрадиционного расти-тельного сырья [3, 14].
Из табл. 4 видно, что наблюдается широкий интервал антиоксидантной активности чаев от 9.68 г кверцетина на 100 г сухого образца у черного чая до 12 г кверцетина на 100 г сухого образца у зеленого, а, следовательно, и их различие в физиологическом действии на организм.
При этом существует прямая зависимость антиоксидантной активности от содержания в них известных биологически активных антиоксидантов (полифенольные соединения, флаво-ноиды, витамин Р, органические кислоты), которые и формируют интегральную величину ан-тиоксидантного потенциала исследуемого чая.
Табл. 4. Суммарная антиоксидантная активность зеленого
и черного чая, г кверцетина на 100 г а.с.в.
Вид чая |
Дегустационная оценка по 5 балльной шкале |
САОА в г кверцетина на 100 г сухого образца |
Sr |
|||
цвет |
аромат |
вкус |
||||
Зеленый чай |
3.8 |
3.8 |
3.7 |
12.01±0.34 |
0.01 |
|
Черный чай |
4.7 |
4.3 |
4.3 |
9.68±0.45 |
0.02 |
Более высокая САОА зеленого чая обусловлена, в первую очередь, наличием в нем полифенольных соединений, в частности, катехинов, флавоноидов. Из-за особенностей обра-ботки листьев, а именно отсутствия стадии ферментации, в зелёном чае значительно больше катехинов, чем в чёрном. Катехины зеленого чая являются даже более мощными антиок-сидантами, чем витамины С и Е. [3]. Кроме того, во время ферментации происходит окисле-ние витамина С, поэтому черный чай теряет САОА.
Заключение
Таким образом, нами впервые проведена оценка антиоксидантной активности некоторых лекарственных растений. На основании исследования можно сделать вывод, что употребление в ежедневном рационе продуктов, например, чайных, с плодами боярышника и рябины, гребнями винограда эффективно для уменьшения вредного воздействия на организм человека “свободных радикалов”. Использование показателей суммарной антиоксидантной активности позволяет проводить скрининг для отбора наиболее ценных образцов для применения в научно-практических разработках в области селекции, кормопроизводства, пищевой и фармацевтической промышленности. Также суммарная антиоксидантная активность является чувствительным показателем качества продукции, что может быть использовано для дальней-ших технологических работ с данным видом сырья.
Выводы
1. Установлено, что антиоксидантная активность зависит от видовой специфики растений, плоды рябины имели более низкую суммарную антиоксидантную активность по сравне-нию с плодами боярышника. Максимальные значения суммарной антиоксидантной актив-ности отмечаются у свежих плодов боярышника Алма-атинского (1.930), тогда как, образ-цы боярышника зеленомякотного имеют активность 1.240 г рутина на 100 г а.с.о.
2. Суммарная антиоксидантная активность плодов сорта Гранатная - 2.980 г рутина на 100 г а.с.о., минимальные значения характерны для сортов Невежинская желтая и Невежинская кубовая - 2.490 и 2.420 г рутина на 100 г а.с.о. соответственно.
3. Самый перспективный образец по суммарной антиоксидантной активности - гребни вино-града сорта Бархат - 13.13 г рутина на 100 г а.с.о., другие образцы имеют более низкий показатель активности, например, гребни сорта Каберне Совиньон имеют минимальные значения - 7.90 г рутина на 100 г а.с.о.
4. Биологические активные соединения зеленого чая являются более мощными антиокси-дантами, по сравнению с черным: суммарная антиоксидантная активность последнего на 2.33 г кверцетина на 100 г а.с.в. меньше.
Литература
[1] Анализатор влажности MX-50/MF-50. Q&A. Справочник пользователя. A&D Company, Limited. Внешнеэкономический отдел. Версия 2.20. Февраль. 2003. 31с.
[2] Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. М.: Агропромиздат. 1985. 351с.
[3] Джемухадзе К.М. Физиология чая. В кн.: Физиология сельскохозяйственных растений. М.: Издательство МГУ. 1970. Т. IХ. C.450-616.
[4] Загоскина Н.В. Биофлавоноиды высших растений - биологически активные вещества для фармацевтической и пищевой промышленности. Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания функциональных продуктов (4-5 июня 2007 г.): Материалы IY Российской научно-практической конференции. М.:РАЕН. 2007. С.99.
[5] Здравоохранение Российской Федерации. М.: Медицина. 2006. №5. С.22-25.
[6] Кочеткова А.А. Функциональные продукты в концепции здорового питания. Пищевая промышленность. 1999. №2. С.4-5.
[7] Куминов Е.П. Нетрадиционные садовые культуры. М.: “Издательство АСТ”. 2003. 254с.
[8] Борисенков М.Ф., Лапин А.А. Роль питания в профилактике возрастных заболеваний. Бутлеровские сообщения. 2010. Т.19. №2. С.42-53.
[9] Лапин А.А. Методика выполнения измерений на кулонометрическом анализаторе МВИ 01-44538054-07. Свидетельство об аттестации МВИ № 4 выданное федеральным государственным учреждением “Тамбовский центр стандартизации, метрологии и сертификации”.
[10] Носов А. Лекарственные растения. М.: ЭКСМО-Пресс. 1999. 349с.
[11] Пучкова Л. И., Белявская И.Г., Жамукова Ж. М. Экстракт зеленого чая - источник биофлавоноидов. Хлебопекарное производство. 2005. №1. С.36-37.
[12] Разунаев Н.И. Комплексная переработка вторичных продуктов виноделия. М.: Пищевая промышленность. 1975. 166с.
[13] Романова Н.Г. Плоды боярышника и рябины - перспективный сырьевой источник для создания продуктов функционального питания. Достижения науки и техники АПК. №9. М. 2008. С.59-62.
[14] Романова Н.Г., Поверин А.Д. К вопросу расширения ассортимента чайной продукции. Доклады ТСХА. М. 2005. С.343-348.
[15] Сапрыкина О.А., Абдуразакова С.Х. Химические и биохимические особенности экстракта из твердых частей винограда. Изв. Вузов Пищевая технология. 2001. №1. С.15-23.
[16] Лапин А.А., Яровой С.А., Полянский К.К. Хлебобулочные изделия для функционального питания и их антиоксидантные свойства. Бутлеровские сообщения. 2010. Т.21. №9. С.78-87.
[17] Шанин Ю.Н., Шанин В.Ю., Зиновьев Е.В. Антиоксидантная терапия в клинической практике. Изд-во Санкт-Петербург. 2003. 120с.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Исследование пищевых и лекарственных свойств рябины, ее краткая ботаническая характеристика. Рациональные приемы сбора, сушки и хранения растительного сырья. Пути использования, применения рябины обыкновенной в народной и официальной современной медицине.
курсовая работа [836,0 K], добавлен 14.03.2015Заболевания опорно-двигательного аппарата - артрозо-артриты. Атеросклеротическое поражение аорто-подвздошного сегмента. Основные направления консервативной терапии. Повышение антиоксидантной активности крови и стимуляция коллатерального кровотока.
реферат [18,0 K], добавлен 15.03.2009Категории лекарственных растений. Получение и использование лекарственных растений с лечебными или профилактическими целями в народной, медицинской или ветеринарной практике. Лекарственная ценность женьшеня, лимона, апельсина и ромашки ободранной.
реферат [1,6 M], добавлен 22.12.2010Электрография и ее задачи. Оценка функционального состояния органа по его электрической активности. Примеры использования метода эквивалентного генератора. Метод регистрации биологической активности головного мозга посредством записи биопотенциалов.
презентация [1,6 M], добавлен 30.09.2014Общая характеристика лекарственных растений, содержащих сапонины и определение их вида, строения и свойств содержащихся в них. Правила заготовки лекарственных растений, содержащих сапонины, характеристика лекарственного сырья и область его применения.
курсовая работа [2,3 M], добавлен 08.12.2012Общая характеристика лекарственных растений, история их открытия и основные свойства. Сведения об использовании целебных свойств растений в древности. Методика сбора лекарственных растений. Перечень лекарственных растений Природного парка "Река Чусовая".
реферат [56,1 K], добавлен 08.12.2013Ознакомление с запасами сырья и возможностями заготовки лекарственных растений. Характеристика фармакологической активности, распространенности, функций, видов алкалоидов. Описание свойств эфедры хвощовой, перца стручкового и безвременника великолепного.
реферат [726,0 K], добавлен 01.08.2010Приемы возделывания различных лекарственных растений. Определение ресурсов дикорастущих лекарственных растений на примере травянистых, древесных и кустарниковых. Приемы сбора лекарственных средств, сушка и хранение. Растения, снижающие секрецию желез.
отчет по практике [107,3 K], добавлен 14.06.2012История изучения лекарственных растений, содержание биологически активных веществ в них. Этапы внедрения их в медицину. Фармакогнозия как наука о лекарственных растениях. Особенности и ботаническое описание лекарственных растений Московской области.
курсовая работа [1,1 M], добавлен 20.12.2013Описание Рябины обыкновенной (Sorbus L.). Места распространения. Фармакологические свойства растения. Плоды рябины обыкновенной - природная кладовая биологически активных веществ, что позволяет на их основе создавать новые медицинские препараты.
реферат [43,4 K], добавлен 27.01.2010Характеристики функций витамина Е, его естественные источники, синтез. Строение и свойства токоферола. Признаки гиповитаминоза витамина Е, симптомы его дефицита в организме. Участие в антиоксидантной и генеративной функциях в организме животных.
презентация [861,0 K], добавлен 22.10.2015Понятие и общая характеристика лекарственных растений, их классификация и основные свойства, физико-химическое описание. Группы лекарственных растений, используемых в пищевой промышленности, а также в парфюмерии, ценящиеся в них свойства, характеристики.
реферат [37,4 K], добавлен 07.12.2014Активированные кислородные метаболиты (АКМ), их источники в живых организмах. Характеристика основных форм АКМ. Антиоксиданты и ингибиторы. Селен как составляющая антиоксидантной системы. Патологические процессы, происходящие при недостатке селена.
реферат [66,1 K], добавлен 12.11.2013Использование лекарственных растений для профилактики и в комплексной терапии заболеваний кожи. Описание химического состава, фармакологические свойства растений, применение их в дерматологии. Выбор метода лечения в зависимости от стадии болезни.
учебное пособие [427,2 K], добавлен 15.02.2017Химическая классификация витаминов и по растворимости. Описание свойств плодов рябины черноплодной, рябины обыкновенной, смородины черной облепихи крушиновидной, шиповника. Листья и корневища с корнями первоцвета весеннего, цветки ноготков лекарственных.
презентация [1,2 M], добавлен 06.02.2016Аналитические характеристики набора для определения активности лактатдегидрогеназы. Принцип метода, основные условия измерения. Пробоподготовка, характеристика оборудования, проведение наблюдения. Фотометрирование с помощью анализатора Stat Fax 1904+.
презентация [709,9 K], добавлен 06.12.2016Ознакомление с клетками крови, которые в основном представлены эритроцитами и лейкоцитами. Определение и анализ особенностей обмена веществ эритроцитов. Изучение системы антиоксидантной защиты организма. Рассмотрение схематического изображения почки.
презентация [3,3 M], добавлен 09.04.2018Фармакогнозия как наука о сырьевых источниках лекарственных средств, предмет ее исследования и задачи. Проведение экскурсий по ботаническому саду и хвойному лесу, оценка условий произрастания лекарственных растений. Механизм камеральной обработки сырья.
отчет по практике [89,2 K], добавлен 15.05.2016Сердечные гликозиды как биологически активные вещества лекарственных растений. Ботаническое описание и фармакология лекарственного растительного сырья, содержащего сердечные гликозиды. Потребительский портрет пациентов, приобретающих данные препараты.
курсовая работа [1,5 M], добавлен 17.06.2017История использования лекарственных растений в медицине. Потребность человека в витаминах. Химический состав, фармакологические свойства, лекарственные формы и применение в медицине видов лекарственных растений семейства Губоцветные Пензенской области.
курсовая работа [1,2 M], добавлен 29.06.2013