Цитохимическая активность нейтрофилов периферической крови после односторонней нефрэктомии на фоне интоксикации 40% этанолом с последующей антиоксидантной коррекцией

Размещено на http://www.allbest.ru/

Крымский федеральный университет имени В.И. Вернадского

ЦИТОХИМИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПОСЛЕ ОДНОСТОРОННЕЙ НЕФРЭКТОМИИ НА ФОНЕ ИНТОКСИКАЦИИ 40% ЭТАНОЛОМ С ПОСЛЕДУЮЩЕЙ АНТИОКСИДАНТНОЙ КОРРЕКЦИЕЙ

Сатаева Татьяна Павловна

Литвиненко Антон Николаевич

Повышение функциональной нагрузки на почку, оставшуюся после контрлатеральной нефрэктомии, сопровождается дисбалансом окислительно-восстановительных процессов в ее тканях [2,4,5], который значительно усиливается при токсическом воздействии 40% этанола, в связи с чем возникает необходимость производить коррекцию возникших нарушений в тканях веществами, обладающими универсальными протекторными свойствами -антиоксидантами.

«Эноант» - пищевой концентрат полифенолов винограда сорта “Каберне-Совиньон”, разработан в институте винограда и вина «Магарач». В пищевом концентрате «Эноант» присутствует весь спектр флаваноидной и нефлаваноидной групп полифенолов винограда, а также микроэлементы: Zn, Cu, Mn, Fe и др. Одним из основных свойств, характеризующих биологическую активность полифенолов винограда, является их способность ингибировать свободные радикалы, которые образуются при различных патологических состояниях человеческого организма [1,3].

Целью данного исследования было изучение цитохимической активности неитрофилов периферической крови при введении экспериментальным животным с единственной почкой концентрата полифенолов винограда «Эноант» после предварительной алкогольной интоксикации.

Материал и методы исследования

Для экспериментальных исследований были использованы 39 трехмесячных нелинейных белых крыс (самцов и самок), которые содержались в стандартных условиях вивариях, массой 160-200 г в трех сериях:

1 серия (14 крыс) производилось удаление левой почки при сохранении другой с послеоперационным ежедневным одноразовым внутрижелудочным зондовым введением 40% этанола из расчета 10 мл/кг массы тела животного в течение 3-х месяцев;

2 серия (15 крыс) удаление левой почки при сохранении правой контрлатеральной с послеоперационным ежедневным одноразовым внутрижелудочным зондовым введением 40% этанола с одномоментным введением концентрата полифенолов винограда «Эноант», растворенного в кипяченой воде из расчета суточной дозы 0,5 мл/кг массы тела животного в течение 3-х месяцев.

3 серия (контроль) -10 интактных здоровых животных. Забор периферической крови производился в первые сутки, в первую, вторую, третью недели, а также на 1, 2 и 3 месяцы

Проводилось определение дегидрогеназ в клетках периферической крови, которое заключается в том, что последние должны помещаться в среду, содержащую субстрат, кофермент, ингибитор ферментов, краситель. В указанной среде клетки крови инкубируются в течение 45-60 минут при температуре 37°С.

В качестве индикатора ферментного процесса использовали нитротетразолий синий (НСТ), образующий при восстановлении в клетке мелкие гранулы формазана и окрашивающий цитоплазму от дымчато-серого до насыщенного синего цвета. Тонкие нативные мазки крови, высушенные на воздухе, после соответствующей обработки инкубировали в течение 45 мин при температуре 37°С. Ядра клеток докрашивали раствором метилового зеленого. Высушенные мазки микроскопировали под иммерсионным объективом. Для оценки активности ферментов в клетках крови вычисляли средний цитохимический показатель (СЦП).

Математическую обработку результатов полученных данных производили методом вариационной статистики достоверными считали показатели при p1<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

К первым суткам после применения 40% этанола в нейтрофилах периферической крови крыс отмечался значительный цитохимический дисбаланс. Так показатель активности СДГ был ниже контроля на 4,2%, в то время как СЦП активности ЛДГ повысился по отношению к контролю незначительно на 0,9% (p1<0,05) (Таблица1). Аналогичные изменения наблюдались во второй серии опытов (Таблица 2).

К первой недели уровень дисбаланса в обеих сериях значительно не менялся. Ко второй неделе в обеих сериях отмечалось преобладание анаэробного гликолиза, что наиболее было выраженным в первой серии, где СЦП активности СДГ был на 18,8% ниже контроля (p1<0,05)., а СЦП активности ЛДГ - на 18,7% выше контроля (p1<0,05). К третьей неделе аналогичная тенденция сохранялась, однако во второй серии дисбаланс цитохимических показателей был меньше по сравнению с контролем, чем в первой серии, так СЦП активности СДГ во второй серии был выше контроля на 4,2%, а СЦП активности ЛДГ ниже контроля на 9,4% (p1<0,05). К первому месяцу эта разница увеличилась, так СЦП активности СДГ во второй серии был выше контроля на 4,9%, а СЦП активности ЛДГ ниже контроля на 9,9% (p1<0,05). цитохимический нейтрофил периферический кровь

Второй месяц явился переломным сроком для второй серии, что выражалось снижением дисбаланса цитохимических показателей, где СЦП активности СДГ был на 17,5% ниже контроля, а СЦП активности ЛДГ - на 16,9% выше контроля (p1<0,05). В первой серии итохимический дисбаланс по-прежнему оставался высоким и составлял для СЦП активности СДГ на 20,0% ниже контроля, а для СЦП активности ЛДГ - на 26,2% соответственно выше контроля (p1<0,01). Аналогичные тенденции продолжались вплоть до третьего месяца исследований, максимально приближаясь к показателям контроля во второй серии (таблица 2).

Таблица 1. Цитохимические показатели нейтрофилов периферической крови крыс после односторонней нефрэктомии на фоне интоксикации 40% этанолом (n =14, усл.ед.)

Где p1 - достоверность по отношению к показателям контроля.

Таблица 2. Цитохимические показатели активности нейтрофилов периферической крови крыс после односторонней нефрэктомии на фоне интоксикации 40% этанолом с использованием антиоксиданта «Эноант» (n=15, усл.ед.)

Где p1 -- достоверность по отношению к показателям контроля.

Таким образом, применение концентрата полифенолов винограда «Эноант» существенно уменьшает цитохимический дисбаланс нейтрофилов периферической крови крыс после односторонней нефрэктомии на фоне интоксикации 40% этанолом, что проявляется в уменьшении СЦП ЛДГ, который является индикатором интенсивности анаэробных процессов.

Библиографический список

1. Авидзба A.M., Иванченко В. И., Загоруйко В. А., Огай Ю. А. Перспективы разработки новых биологически активных продуктов питания на основе винограда. //Биологические активные природные соединения винограда: перспективы производства и применения в медицине и питании. -Симферополь, 2001. - с. 6-7.

2. Западнюк И.П. с соавт. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. Киев, «Вища школа», 2003.-350 с.

3. Лазарев К.Л., Жукова А.А., Лященко О.И. Состояние компенсаторных процессов в почке после нефрэктомии при введении в организм этанола в эксперименте // Проблемы, достижения и перспективы развития медико-биологических наук и практичекого здравоохранения, - 2006, т. 142, ч.1. - С. 47-53.

4. Лазарев К.Л., Жукова А.А., Лященко О. И. Сравнительная морфометрическая характеристика отделов нефрона единственной почки при воздействии этанола и эноанта // Таврический медико-биологический вестник. - 2006. - Т. 9, ч. 1, № 3. - С. 31-35.

5. К. L. Lazarev, A. A. Zhukova, O.I. Lyashchenko, А.А. Semko, K. A. Leieko Comparative morphometrical characteristics of nephron parts in introduction of ethyl alcohol and ” Enoant'”(experimental research). Таврический медико-биологический вестник. - 2007.- Т. 10, №3. - С. 169-172.

Аннотация

Применение концентрата полифенолов винограда «Эноант» существенно уменьшает цитохимический дисбаланс нейтрофилов периферической крови крыс после односторонней нефрэктомии на фоне интоксикации 40% этанолом, что проявляется в уменьшении СЦП ЛДГ, который является показателем интенсивности анаэробных процессов.

Ключевые слова: полифенолы винограда, почка, цитохимия, этанол

We studied the effect of the food extract ofpolyphenols of grapes "Enoant"on the tissues of the single kidney, left after a one-sided nephrectomy. It was determined that the introduction ofpolyphenols of grapes in to the organism of the experimental animals accelerate the speed and level of the compensatory hypertrophy of the kidney during the time of experiment which is shown by cytochemical indicators of the neutrophiles in the peripheral blood.

Размещено на Allbest.ru