Изучение фенотипических эпидемиологических маркеров бактериальных культур

Размещено на http://www.allbest.ru/

Изучение фенотипических эпидемиологических маркеров бактериальных культур

Ахмадзянова А.Р.,

Алиева Э.Х.,

Маслов Ю.Н.,

Каблинова Т.В.,

Галямова Л.А.

Актуальность. При бактериологическом исследовании клинического материала (гноя, мокроты, экссудата) для специалистов всех профилей первоначально важен один вопрос - какой микроб является этиологически значимым? Но после решения этого вопроса интересы врачей расходятся. Для клиницистов, прежде всего, важны те показатели, которые позволяют повысить эффективность лечебных назначений, то есть чувствительность к антимикробным препаратам: антибиотикам и антисептикам [2]. Эпидемиологам важно оценить чувствительность возбудителя к дезинфектантам для проведения противоэпидемических мероприятий [1], а также определить эпидмаркеры культуры для выявления ее возможной циркуляции во внутрибольничной среде лечебнопрофилактической организации (далее - ЛПО) [3, 4, 5]. При этом у бактериологов, проводящих все эти исследования, возникает естественное желание произвести все необходимые исследования с минимальной затратой сил и средств [1].

Цель нашей работы - разработать и представить комплексный подход к изучению дополнительных характеристик бактериальных культур на основе метода серийных разведений.

Материалы и методы. Микровариант метода серийных разведений как методическая основа исследования представляется как удобный, надежный и достаточно экономичный метод.

Во-первых, с его помощью можно оценить уровень чувствительности/резистентности выделенных бактериальных культур к препаратам, недоступным для дискодиффузионного метода: антисептикам и дезинфектантам, что важно для проведения эффективных лечебных и противоэпидемических мероприятий.

Во-вторых, выполнение методики с использованием набора механических дозаторов повышает стабильность и воспроизводимость результатов исследований. бактериальный серийный культура

В-третьих, существенным достоинством данного метода является возможность количественной оценки этих характеристик. Первичным показателeм при использовании метода серийных разведений является последнее разведение каждого из препаратов, подавляющее рост культуры. Зная этот показатель, можно вычислить минимальную подавляющую концентрацию каждого антисептика и дезинфектанта. Для дальнейшего анализа надо рассчитывать сопоставимые между собой характеристики препаратов - так называемые индексы активности (ИА) [2].

Индекс активности (ИА) антисептика или дезинфектанта - это отношение рабочей концентрации препарата к МПК культуры, то есть показатель, не имеющие размерности.

Чем выше показатель ИА, тем активнее препарат влияет на данную микробную культуру. Значения ИА < 4 указывают на устойчивость культуры к данному препарату [2].

В настоящей работе мы попытались оценить с математической точки зрения информативность микроварианта метода серийных разведений, реализуемого по принципу: "Одна культура - один планшет".

Стандартный 96-луночный планшет позволяет изучить чувствительность к каким-либо 8 препаратам. Унифицированность метода позволяет одновременно в одном планшете оценить отношение культуры к антисептикам, дезинфектантам и анилиновым красителям. На наш взгляд, оптимальной представляется оценка чувствительности культуры к трем антисептикам, трем дезинфектантам, а также к двум анилиновым красителям.

Поясним свою позицию: в качестве антисептиков целесообразно использовать наиболее распространенные в настоящее время и эффективные препараты: Пронтосан, Хлоргексидин и Мирамистин.

Набор дезинфицирующих средств должен включать минимум 2 препарата, используемых в ЛПО для текущей и заключительной дезинфекции, а также минимум 1 препарат для планируемой ротации дезсредств.

Чувствительность бактерий к анилиновым красителям включена в набор как независимый фенотипический эпидмаркер бактериальных культур, не связанный с особенностями схем антимикробной терапии и дезинфекции в данной ЛПО. Данная оригинальная методика была разработана в ЦНИЛ ПГМУ им.академика Е.А. Вагнера [4].

К достоинствам метода можно отнести возможность легкой смены препаратов в любой из групп, изменения количеств изучаемых препаратов (например, уменьшение или увеличение количества тестируемых антисептиков или дезинфектантов, исключение какой-либо группы препаратов), а также использования комбинаций препаратов. Важно, что все полученные при этом 8 количественных характеристик культуры можно использовать при проведении эпидемиологического анализа.

Результаты и обсуждение. Для оценки специфичности предлагаемого подхода к использованию показателей чувствительности к антисептикам, анилиновым красителям и дезинфектантам в качестве комплексного эпидмаркера бактериальных культур мы использовали статистический метод. Поскольку неспецифичность в данном случае может быть связана с выявлением у культур, не имеющих родственных (то есть, эпидемиологических) связей друг с другом, идентичных показателей чувствительности, мы рассчитали, какова статистическая вероятность такого события.

Известен математический прием расчета статистической вероятности совпадения двух сочетаний как произведения всех возможных вариантов. Для его реализации мы предварительно проанализировали диапазоны изменчивости показателей чувствительности бактериальных культур к каждому из используемых агентов более чем у 1200 культур гноеродных бактерий. Диапазоны полученных показателей сведены в таблицу.

Таблица. Диапазоны уровней чувствительности бактерий к антимикробным препаратам, крайние значения последнего эффективного разведения

Как видно из таблицы, число вариантов "профиля культуры" для каждой из категорий изученных бактерий составило несколько миллионов, а статистическая вероятность совпадения была ниже 0,000001%. Таким образом, специфичность предлагаемого метода при комплексном использовании выбранных нами 8 показателей составляет более 99,99999%.

Выводы

1. Предлагаемый комплексный подход повышает информативность бактериологических исследований, как для лечебной, так и для эпидемиологической службы.

2. Комплекс показателей чувствительности бактериальных культур к антисептикам, дезинфектантам и анилиновым красителям является уникальной характеристикой, позволяющей проводить анализ структуры клинической микрофлоры, выявляя процессы циркуляции культур во внутрибольничной среде, что имеет важное эпидемиологическое значение.

Литература

1. Леви М.И., Сучков Ю.Г. "Ускоренный и упрощенный способ определения антибактериальной активности дезинфекционных средств"/ Дезинфекционное дело. - 1999, №3. c.30-33.

2. Красильников А.П. Справочник по антисептике. - Минск, Выш. шк., 1995. - 367 с.

3. Маслов Ю.Н., Катрецкая Г.Г., Шайдуллина Е.В., Братчикова Е.А. Показатели антисептикограммы микробных культур как эпидемиологический маркер // Внедрение инновационных технологий в хирургическую практику (фундаментальные и прикладные аспекты). Материалы международной дистанционной научно-практической конференции. Пермь, 2009. - С. 83-85.

4. Маслов Ю.Н., Фельдблюм И.В., Пегушина О.Г., Прохорова Л.А. Применение показателя чувствительности бактериальных культур к анилиновым красителям в качестве эпидемиологического маркера // Методические рекомендации Пермь: ГБОУ ВПО ПГМУ им.академика Е.А. Вагнера Минздрава России, 2016. - 18 с.

5. Шкарин В.В., Ковалишена О.В. Концепция многоуровневой систем эпидемиологического надзора за госпитальными инфекциями // Мед.альманах, 2009.- № 2 (7).- С.14-21.

Размещено на Allbest.ru