Лептоспиры. Бактериологическая и серологическая диагностика

Размещено на http://www.allbest.ru/

28

3

ФГБОУ ВО

Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия

Кафедра "Микробиология, вирусология, биотехнология, радиобиология и безопасность жизнедеятельности"

Курсовая работа по дисциплине

Микробиология

на тему: "Лептоспиры. Бактериологическая и серологическая диагностика"

Выполнила: студентка 2 курса

ветеринарного факультета

группы 43 ВСЭ

Гостюшева С.Ю.

Проверила: Каткова А.Н

Н. Новгород, 2018



Содержание

Введение

1 Характеристика возбудителя

1.1 Классификация

1.2 Морфология

1.3 Культуральные свойства

1.4 Биохимические свойства

1.5 Токсинообразование

1.6 Антигенная структура

1.7 Устойчивость

1.8 Патогенность

1.9 Патогенез

1.10 Клинические признаки

2 Лабораторная диагностика

2.1 Материал для исследования

2.2 Бактериологическая диагностика

2.2.1 Микроскопия

2.2.2 Выделение чистой культуры

2.3 Серологическая диагностика

2.3.1 Реакция микроагглютинации

2.3.2 Реакция агглютинации

2.3.3 Реакция агглютинации латекса

2.3.4 РА полимерных частиц с лептоспирозным антигеном

2.3.5 Реакция связывания комплемента

2.4 Биопроба

3 Иммунитет

Заключение

Список литературы



Введение

Лептоспироз -- острое инфекционное заболевание человека и животных, вызываемое различными штаммами лептоспир, характеризующееся большим полиморфизмом клинических проявлений (с преимущественным поражением почек и печени.

Лептоспироз является очень распространенным зоонозным заболеванием, он встречается на всех континентах. Именно потому, что основным источником инфекции являются грызуны, в меньшей степени -- домашние животные, формируются трудно контролируемые городские и природные очаги. Контроль тем более усложняется, что животные могут длительно, иногда месяцами, выделять лептоспиры с мочой, оставаясь внешне здоровыми. Даже вакцинированные животные могут становиться стойкими носителями лептоспир, выделяя их в большом количестве в окружающую среду. Высокая восприимчивость к инфекции людей и легкость инфицирования создают опасность заражения и заболевания человека во время пребывания его в природных очагах лептоспироза, а также при наличии инфицированных грызунов в жилых помещениях, на складах, фермах и т. д., при общении с больными и инфицированными домашними животными.

Тяжесть течения отдельных клинических форм с быстрым нарастанием клинической симптоматики представляет нередко реальную угрозу для жизни больного, а полиорганность поражений, проявляющаяся полиморфизмом клинических проявлений, часто становится причиной диагностических ошибок -- при первичном обращении число таких ошибок, по некоторым данным, доходит до 90 %. А при лептоспирозе, как, пожалуй, при немногих заболеваниях, каждый потерянный день снижает шансы больного на выживание.

бактерия лептоспироз лихорадка желтуха



1 Характеристика возбудителя

Лептоспироз - инфекционная природно-очаговая болезнь животных и человека, вызываемая бактериями рода Leptospira, характеризующаяся кратковременной лихорадкой, анемией, желтухой, гемоглобинурией, геморрагическим диатезом, некрозом слизистых оболочек и кожи, атонией органов пищеварения, абортами. Болезнь может протекать бессимптомно. Зарегистрирована во многих странах, в том числе и в нашей стране. Летальность при клинически выраженной форме 20-25%.

Заболевание длительное время носило название болезни Вейля-Васильева, поскольку первые клинические описания лептоспироза как самостоятельной нозологической формы даны А. Вейлем (1886) и Н.П. Васильевым (1888). Впервые возбудитель заболевания выделен от больных японскими исследователями Р. Инадо и У. Идо (1915) и назван Leptospira icterohaemorrhagiae. Позднее стало известно, что возбудитель имеет много сероваров.

Также лептоспироз называется иктерогеморрагическая лихорадка.
В 1928 году В.А. Башенин описал безжелтушную форму лептоспироза, и назвал ее водной лихорадкой. В 1972 году предложено разделить лептоспироз на две группы: желтушный лептоспироз и безжелтушный лептоспироз.

1.1 Классификация

Возбудителя лептоспироза относят к семейству Leptospiraceae (leptos - тонкий, speira - виток, спираль) и роду Leptospira, который включает два вида: патогенный - L. interrogans и сапрофитный - L. biflexa. Патогенный вид представлен 183 сероварами, которые по составу антигенов объединены в 25 серологических групп.

В инфекционной патологии животных наибольшее значение имеют серогруппы: L. pomona, L. tarassovi, L. grippotyphosa, L. hebdomadis, L. canicola, L. icterohaemorrhagiae, L. cazackstanika.

Более подробная классификация представлена в таблице 1.

Таблица 1.“Возбудители лептоспирозов и их основные хозяева”

Геномовид	Серогруппа	Серовар	Основные хозяева лептоспир
L. interrogans	Icterohaemorrhagiae	Copenhageni icterohaemorrhagiae	Серая, черная крысы
L. borgpeterseni	Javanica	Poi Hanka	Землеройка-бурозубка, полевая мышь
L. interrogans	Canicola	Canicola	Собака
L. kirschneri	Autumnalis	Erinacei auriti	Ушастый еж
L. interrogans	Australis	Bratislava	Европейский еж
L. interrogans L. kirschneri	Pomona	Pomona Monjakov Mozdok	Крупный рогатый скот Свинья Полевая мышь
L. kirschneri	Grippotyphosa	Grippotyphosa	Крупный и мелкий рогатый скот, лошади
L. interrogans L. borgpeterseni L. interrogans	Hebdomadis	Saxkoebing Hebdomadis Hardjo	Серые полевки Домовая мышь Крупный рогаты скот
L. interrogans	Bataviae	Bataviae	Мышь-малютка
L. borgpeterseni	Tarassovi	Tarassovi	Свинья, крупный рогатый скот

1.2 Морфология

Лептоспиры - спиралевидные бактерии диаметром 0,10-0,25 мкм и длиной от 5-15 до 30 мкм, образующие около 20 мелких, тесно расположенных первичных завитков и 1-2 вторичных, придающих клетке форму букв G, S, С. Осевая нить состоит из двух фибрилл. В темном поле они имеют вид тонких серебристых нитей с утолщенными и загнутыми в виде крючков концами (рис. 1). У клеток некоторых штаммов концы прямые (бескрючковые лептоспиры).

Для лептоспир характерна активная подвижность, наиболее частый тип движения - вращательно-поступательный. Спор не образуют. Грамотрицательные, плохо окрашиваются анилиновыми красителями, по Романовскому-Гимзе - в красный цвет, фиксация мазка существенно изменяет их морфологию; используют также метод импрегнации серебром по Левадити.

Рисунок 1. Лептоспиры. Микроскопия в темном фоне

1.3 Культуральные свойства

Лептоспиры - хемоорганотрофные факультативно-анаэробные бактерии. Культивируют их в аэробных условиях при 28 - 30 °С, но могут расти в пределах от 22 до 37 °C, на специальных средах, содержащих 5-10% сыворотки крови кролика или овцы, дистиллированную, колодезную, водопроводную воду или фосфатный буфер (рН 7,2-7,6). Эти среды имеют хорошие ростовые качества, но при этом лептоспиры обладая вариабельностью могут изменять свои биологические свойства, в определенной мере зависимой от качества сыворотки животных.

Культивирование лептоспир связано с определенными трудностями, обусловленными их низкой способностью к размножению в жидких, полужидких и особенно на плотных искусственных питательных средах. На простых питательных средах лептоспиры не растут. Для их культивирования наиболее часто используют жидкие среды Любашенко, Терских, Ферворта - Вольфа, Уленгута, а также среду ГНКИ с альбумином. Максимальное накопление биомассы лептоспир отмечается по истечении 5-7 суток, иногда 1-2 месяца культивирования, при этом вид питательных сред не изменяется.

На плотных средах (Кокса, ВГНКИ) образуют колонии S-, O- и R-форм. S-форма - типичная для патогенных штаммов, ее колонии прозрачные, в виде диска с ровным краем.

В полужидких средах образуются колонии округлой формы диаметром 1 - 3 мм. В молодых культурах в области наиболее пышного роста в 1,5 - 2 см от поверхности наблюдается легкое помутнение в виде кольца. В жидких средах культуры прозрачны, не имеют запаха, при пышном росте определяется опалесценция, заметная в проходящем свете при легком встряхивании пробирки.

1.4 Биохимические свойства

Изучены недостаточно. Способность ферментировать углеводы отсутствует; образуют каталазу, оксидазу, липазу и другие ферменты. Лептоспиры способны утилизировать азот из мочевины, креатинина и саркозина, что протекает под контролем ферментов микроорганизмов - аланиндегидрогеназы, глютаматдегидрогеназы и глютаматпируват-трансаминазы.



1.5 Токсинообразование

Истинный экзотоксин лептоспиры не синтезируют. Они образуют эндотоксин и патогенные ферменты: гемолизин, фибринолизин, плазмокоагулазы, гиалуронидазы, липазы, лецитиназу, которые выделяются в результате лизиса лептоспир. Патогенностью обладают свежевыделенные штаммы лептоспир; при культивировании на питательных средах это свойство относительно быстро теряется.

1.6 Антигенная структура

Лептоспиры обладают белковым соматическим антигеном, определяющим их видовую специфичность. Поверхностные полисахаридные антигены служат критериями групповой и серовариантной дифференциации. Антигенные свойства лептоспир изучают в реакции микроагглютинации и методом иммуноадсорбционного анализа.

1.7 Устойчивость

В воде открытых водоемов патогенные лептоспиры сохраняются более 7-30 суток; будучи типичными гидрофилами, в почве, перенасыщенной водой, выживают до 280 суток; в свежем молоке - 8-24 ч; в почках убойных животных при 0-4 ⁰С - до 28 суток; в замороженном мясе погибают через 10 суток.

Чувствительны к действию поваренной соли: в засоленном (4,8 % NaCl) мясе крупного рогатого скота погибают через 10 суток; в гипертоническом растворе поваренной соли (2,8 %) - через 15 минут.

При кипячении погибают моментально, при 56-58 ⁰С - в течение 25-30 минут. Быстро гибнут при высушивании и под воздействием прямого солнечного света. Растворы (0,1 % соляной кислоты, 0,5 % фенола) инактивируют лептоспиры за 20 минут.

1.8 Патогенность

К лептоспирозу наиболее восприимчивы крупный рогатый скот (серогруппы L. Pomona и L. Hebdomadis), свиньи (серогруппы L. Pomona и L. Tarassovi), овцы, лисицы, песцы, менее - лошади, козы, буйволы, верблюды, олени, ослы, собаки, кошки, куры. Болеет и человек. Основные носители лептоспир в природных очагах: серые и водяные полевки, ондатры, серые крысы, домовые мыши, землеройки.

Наибольшую опасность представляют свиньи, которые бывают поголовно инфицированы. Чрезвычайно опасны собаки как резервуар лептоспир и источник инфекции. Собакам не отводилось должной роли примерно до 1992-93 года, когда резко повысилась роль собачьей лептоспиры в возникновении лептоспироза. Этот лептоспироз, как правило, безжелтушный, протекает не так тяжело, без выраженных геморрагического синдрома.

Выделяющиеся из организма больных животных и микробоносителей лептоспиры инфицируют воду, корма, пастбища, почву, подстилку, и другие объекты внешней среды, через которые заражаются здоровые животные. Среди указанных факторов передачи возбудителя водный путь является основным. Особую опасность представляют невысыхающие лужи, пруды, болота, медленно текущие речки, влажная почва.

Животные заражаются лептоспирозом чаще при водопое, при поедании трупов грызунов - лептоспироносителей или кормов, инфицированных мочей этих грызунов. Промысловые животные при клеточном их содержании инфицируются в основном при поедании продуктов убоя больных лептоспирозом животных; свиньи - во время купания в открытых водоемах, молодняк - при выпойке молока от больных матерей.

Возможно и внутриутробное заражение у крупного рогатого скота, овец и свиней. Доказана возможность передачи возбудителя половым путем.

1.9 Патогенез

Входными воротами возбудителя являются поврежденные кожа и слизистые оболочки. Патогенные лептоспиры благодаря активной подвижности преодолевают защитные барьеры организма и быстро проникают в кровь. Через 12 ч после заражения их обнаруживают в печени. Затем наступает генерализация инфекции (бактеремия), размножение и накопление лептоспир в печени, почках, надпочечниках, селезенке, легких, появляется лихорадка. К этому времени образуются антитела. Они инактивируют лептоспиры, и происходит их элиминация из крови и паренхиматозных органов. В почечных же клубочках и канальцах лептоспиры недоступны воздействию антител, где они активно размножаются и выделяются с мочой.

Лизис лептоспир сопровождается накоплением токсических веществ, под действием которых повышается проницаемость сосудов, лизируются эритроциты, происходят кровоизлияния, развиваются гематурия и желтуха, поражается нервная система. Токсикоз может привести к гибели животного.



2 Лабораторная диагностика

2.1 Материал для исследования

Для прижизненной диагностики, для бакисследования берут кровь из вены (в первые 7 суток при повышении температуры тела больного животного, 5 мл для бактериологического и 5-10 мл для серологического исследований). Для серологической диагностики кровь отбирают не ранее 5-7 суток после начала заболевания. Обязательно нужно брать пробу крови от абортировавшего животного. В крови можно обнаружить живые лептоспиры. Можно брать мочу, которую собирают в стерильные емкости во время естественного мочеиспускания утром (во время кормления). Абортированный плод посылают целиком или его желудок с содержимым (перевязывая его с двух сторон), паренхиматозные органы плода (отдельно от желудка).

Для посмертной диагностики - трупы мелких животных целиком, от крупных животных - сердце с перевязанными сосудами, кусочки органов, почку, селезенку, перевязанный мочевой пузырь, транссудаты из грудной и брюшной полостей. Материал должен быть исследован не позднее 6 часов летом, 10-12 часов - зимой, мочу - в течение 3 часов (то есть сроки выживания лептоспир в данных условиях).

Помимо материала от больных (павших) животных, в лабораторию могут быть направлены для исследования пробы воды (редко корм, навоз).

2.2 Бактериологическое исследование

Бактериологическая диагностика основана на обнаружении лептоспир в исследуемом материале путем микроскопии или выделения культур. Она складывается из следующих этапов: микроскопия в темном поле микроскопа, выделение культур лептоспир путем посева присланного материала от сельскохозяйственных животных или органов, зараженных этим материалом, лабораторных животных (биопроба) на специальные питательные среды, идентификация и дифференциация выделенных культур.

Одним из самых быстрых, простых и доступных для выполнения в практических условиях методов бактериологической диагностики является микроскопическое исследование.

2.2.1 Микроскопия

Исследуют мочу, цитратную кровь, тканевую суспензию из коркового слоя почки, печени, у плода - из всех органов. Микроскопию проводят в раздавленной капле с конденсором «темного поля» (рис. 2). Типичные лептоспиры активно подвижны и имеют форму прямой или S-образной с загнутыми в виде крючков концами серебристо-белой нити. Лептоспир также можно обнаружить в срезах из органов после импрегнации серебром по методу Левадити (рис.3, 4).

Рисунок 2. Лептоспиры. Микроскопия в темном поле



Рисунок 3. Лептоспиры. Мазок из культуры, импрегнация серебром

Рисунок 4. Лептоспиры в печени - гистологический препарат, импрегнация серебром по Левадити

2.2.2 Выделение чистой культуры

Материал засевают по 1-3 капли в 3-5 пробирок со специальной питательной средой и инкубируют при 28-30 0С в течение 3 месяцев. Лептоспиры начинают размножаться через 7-20 суток, иногда через 1-2 и очень редко - 3 месяца. Наличие роста определяют темнопольной микроскопией раздавленных капель на 3, 5, 7, 10 сутки и далее через каждые 5 суток. При обнаружении размножения лептоспир делают пересев в 3-5 пробирок со свежей средой. Выделить культуры лептоспир удается не всегда.

2.3 Серологическая диагностика

Для серологической диагностики лептоспироза используют РМА, РА, РАЛ, РА полимерных частиц с лептоспирозным антигеном, РСК. Пробы крови берут на 5-7 сутки болезни и при необходимости повторно через 7-10 суток. Следует учитывать, что антитела в крови у выздоровевших животных могут сохраняться до двух лет и более.

2.3.1 Реакция микроагглютинации

РМА ставят в лунках полистироловых пластин. В качестве антигенов используют живые 5-15 суточные культуры лептоспир 13-16 серогрупп. Сыворотку исследуют с антигенами каждой серогруппы в разведениях 1:5, 1:10 и т.д. до титра. В лунки вносят по 0,1 мл разведенной сыворотки и 0,1 мл антигена. Контролем служит антиген с физиологическим раствором (по 0,1 мл). Пластины выдерживают при 30 ⁰С в течение 1 ч; результаты учитывают в препаратах раздавленной капли в микроскопе с конденсором темного поля. Агглютинация проявляется в склеивании лептоспир и образовании «паучков», состоящих из нескольких десятков или сотен бактерий (рис. 5). Свободные концы лептоспир сохраняют подвижность. Оценивают реакции в крестах по 4-балльной системе: положительная - не менее чем два креста в разведении сыворотки 1: 50 и выше, при отсутствии агглютинации в контроле.



Рисунок 5. Реакция микроагглютинации: «паучки» из склеившихся лептоспир

2.3.2 Реакция агглютинации

РА ставят на стеклянной пластинке, на которую наносят каплю разведенной 1:100 исследуемой сыворотки и добавляют равное количество антигена. Лептоспирозные антигены для РА выпускают шести серогрупп (для каждой отдельно), представляющие собой концентрированную взвесь лептоспир в альбуминовой питательной среде. При наличии в сыворотке специфических антител наступает агглютинация. Оценка результатов производится в крестах по 4 балльной системе. Положительной считают реакцию два креста и выше, сомнительной - один крест. Для выявления лептоспир в крови, моче, паренхиматозных органах, в тканях абортированного плода, в воде и почве предложен иммунофлюоресцентный метод.

2.3.3 Реакция агглютинации латекса

Со времени разработки Мартином и Петтитом в 1918 г. этот тест остается «золотым стандартом» серологической диагностики лептоспироза. Для получения антигена для РАЛ используют 7-10-дневные культуры лептоспир, выращенные на жидких питательных средах и имеющие пышный рост (не менее 50 лептоспир в поле зрения без спонтанной агглютинации и примесей).

Агглютинация проявляется склеиванием лептоспир в агломераты, размер которых может варьировать от 3-5 бактерий до огромных шаров, занимающих несколько полей зрения микроскопа. Лизис сначала проявляется образованием зернистости у одиночных и агглютинированных лептоспир. Затем бактерии постепенно теряют подвижность и фрагментируются, превращаясь в скопление аморфных зернистых образований. Агглютинация и лизис протекают в первых разведениях сыворотки одновременно, но по мере увеличения разведения сыворотки начинает преобладать агглютинация так, что в конечных разведениях лизис отсутствует.

Специфические агглютинины появляются в крови через 7-10 дн после заражения. У непривитых животных в этот период титр агглютининов обычно невысок (1:100 - 1:200), но в последующем он быстро возрастает до 1:400 и выше, что считают диагностическим уровнем. Обычно к концу второй недели болезни титр антител повышается в 15-40 раз и выше. На этом уровне он сохраняется несколько недель. В последующем отмечают тенденцию постепенного его снижения. На острой стадии инфекции отмечают 4-кратное повышение титра агглютинирующих антител к лептоспир при тестировании парных проб сывороток. Однако при исследовании этим тестом сыворотки хронически больных животных могут быть получены отрицательные результаты из-за низкого титра специфических агглютининов.

При оценке результатов теста необходимо принимать во внимание большую продолжительность персистенции агглютининов у многих переболевших и привитых, а также возможность отсутствия сероконверсии у части инфицированных животных. Стабильные титры антител 1:200 -1:400 выявленные в крови с интервалом в 1-2 нед скорее свидетельствуют о ранее перенесенном заболевании или лептоспироносительстве, чем о текущей инфекции. 4-кратное повышение титра антител считают доказательством последней.

Поскольку на динамику антительного ответа большое влияние оказывает интенсивность репродукции ЛС в организме животного, то первое серологическое исследование необходимо проводить до начала антибиотикотерапии и введения противолептоспирозных антисыворотки. В случаях неспецифической реактивности пробы сыворотки крови исследуют повторно после обработки 2-меркаптоэтанолом.

В РАЛ может быть тестирована также моча подозреваемых в заболевании лептоспирозом животных. Однако результаты такого исследования носят ориентировочный характер, поскольку титр специфических антител в моче обычно не превышает 10% титра сывороточных антител.

2.3.4 РА полимерных частиц с лептоспирозным антигеном

Этот современный вариант РА пока еще не нашел широкого применения, хотя получил положительные отклики, как медицинских, так и ветеринарных специалистов. В качестве носителя наружных мембранных антигенов лептоспир использованы частицы поли-DL-лактид-полиэтиленгликоля, покрытые антигеном лептоспир. Тест по специфичности соответствует, но несколько уступает по чувствительности РАЛ. Он проще в постановке и позволяет получить результат серологического исследования в течение 3 ч. Кроме того, агглютинины выявляются им в более ранние сроки и в более высоком титре, чем в РА.

2.3.5 Реакция связывания комплемента

РСК редко используют для серологической диагностики лептоспироза собак. Комплементсвязывающие антитела появляются у инфицированных сероварами icterohaemorrhagiaee и canicola животных этого вида через 4 дн после заражения, а через 9-10 нед они исчезают. Тест не позволяет дифференцировать серовары лептоспир.

При постановке РСК большое значение имеет концентрация лептоспир в антигене. Поэтому для приготовления последнего отбирают только те культуры лептоспир, в которых при темнопольном микроскопировании в 1 поле зрения видно не менее 50-100 бактерий. Для получения ориентировочного результата РСК проводят с пулом антигенов разных сероваров (полиантигеном), но при необходимости установления серотипа / серовара лептоспир, вызвавшего инфекцию у животного, для постановки теста пользуются моновалентными антигенами, приготовленными из референтных штаммов, относящихся к определенным серогруппам / сероварам.

2.4 Биопроба

Метод более чувствительный, чем культуральный; проводится с целью выделения и очистки культур лептоспир, определения их вирулентности и дифференциации от сапрофитов.

Заражают 20-30 суточных золотистых хомяков и крольчат-сосунов в возрасте 10-20 суток. Каждую пробу испытывают на двух животных; на 4-5 сутки убивают первого, на 14-16 сутки - второго, если оно не погибло раньше. Из сердца, печени и почек убитых или павших животных проводят посевы. Сыворотку крови убитого через 14-16 суток животного исследуют в реакции микроагглютинации (РМА) с лептоспирами 13 серогрупп. Положительная РМА в разведении 1:10 и выше указывает на наличие лептоспир в исследуемом материале.



3 Иммунитет и средства специфической профилактики

После переболевания у животных формируется длительный и напряженный иммунитет. Он характеризуется серовариантной специфичностью, поэтому возможны реинфекции. Ведущее значение в невосприимчивости к лептоспирозу принадлежит антителам, и особенно IgG. Сыворотки иммунных животных обладают превентивными свойствами. Отмечается также длительное лептоспироносительство и вследствие этого инфекционный иммунитет.



Заключение

Чувствительны к лептоспирам многие дикие и сельскохозяйственные животные, они и являются резервуаром инфекции. Но чувствительность отдельных видов животных к разным лептоспирам неодинакова.

У животных наблюдаются самые различные варианты течения болезни, но наибольшее значение имеют субклинические формы и носительство, которое может быть длительным, при этом лептоспиры в большом количестве выделяются с мочой. В открытых пресных водоемах лептоспиры, попавшие туда с мочой, могут сохраняться в течение месяца, а во влажной почве -- до 9 мес, не погибая даже во время зимних морозов.

Не зарегистрированы случаи заражения человека трансмиссивным путем, хотя доказано, что лептоспиры длительное время (до 1 мес) мо­гут сохраняться в организме некоторых сосущих насекомых (мухи-жигалки, слепни).

Существует профессиональный риск возникновения заболева­ния у лесорубов, косцов, работников ферм, ветеринаров, рабочих коллекторов. В группу риска можно отнести и любителей-рыболовов. Чаще болеют молодые люди -- любители купаний, рыбалки, пикников на природе.

Пик заболеваемости приходится на летние месяцы, именно в это время создаются наилучшие условия для инфицирования. Возникают заболевания преимущественно в виде спорадических случаев, очень редко -- в виде групповых вспышек (преимущественно при работе на сахарных и рисовых полях), поэтому часто не распознаются. Восприимчивость всеобщая.



Список литературы

1Микробиология: учебное пособие [Текст]/ Р.Г. Госманов, А.К. Галлиулин, А.Х.Волков [и др.] - СПб: Лань, 2017. - 496 с. - ISBN 978-5 -8114-1180-1.

2Колычев, Н.М. Ветеринарная микробиология и иммунология: учебное пособие [Текст]/ Н.М. Колычев, Р.Г. Госманов.- СПб: Лань, 2014 г.-624 с.- ISBN 978-5-8114-1540-3.

3Коротяев, А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: учебник для мед. вузов [Текст]/ А.И. Коротяев, С.А. Бабичев. - СПб: СпецЛит, 2010 г. - 760 с. - ISBN 978-5-299-00425-0

4Госманов, Р.Г. Практикум по ветеринарной микробиологии и микологии [Текст]/ Р.Г. Госманов, Н.М. Колычев, А.А. Барсков. - СПб: Лань, 2014 г. - 384 с. - ISBN 978-5-8114-1625-7

5Кисленко, В.Н. Ветеринарная микробиология и иммунология. Часть 1. Общая микробиология [Текст]/ В.Н. Кисленко, Н.М. Колычев.- М.: НИЦ ИНФРА- М, 2016.- 184 с.- ISBN 978-5-16-010759-2.

6Воробьев А.А. Микробиология: Учебник.- 2-е изд., перераб. и доп. [Текст]/ А.А. Воробьев, А.С. Быков, Е.П. Пашков, А.М. Рыбаков.- М.: Медицина, 2006 г.- 336 с.- ISBN 5-225-04411-5.

7Костенко, Т. С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии/ Т.С. Костенко, Е.И. Скрашевская, С.С. Гительсон. - М.:Агропромиздан, 1989г. - 272с.

8Мальцев, В.Н. Медицинская микробиология и иммунология: Учебник / В.Н. Мальцев, Е.П. Пашков. - М.: Практическая медицина, 2014. - 512 c.

9Лептоспироз [Электронный ресурс] USI: http://infection.in.ua/bakterialnyie/leptospiroz/1060-leptospiroz (дата обращения 17.03.2018г.)

10Лептоспиры - лекция по инфекционным болезням [Электронный ресурс] USI: http://studentmedic.ru/referats.php?view=620 (дата обращения 17.03.2018г.)

11Возбудитель лептоспироза [Электронный ресурс] USI: https://studfiles.net/preview/1697043/page:7/ (дата обращения 17.03.2018г.)

12Лептоспиры и лептоспироз - микробиология [Электронный ресурс] USI: https://vse-zabolevaniya.ru/mikrobiologija/leptospiry-leptospiroz.html (дата обращения 13.03.2018)

13Лептоспироз: симптомы и лечение [Электронный ресурс] USI: http://okeydoc.ru/leptospiroz-simptomy-i-lechenie/ (дата обращения 10.03.2018г.)

14Лептоспиры - причины, симптомы, диагностика и лечение [Электронный ресурс] USI: http://www.krasotaimedicina.ru/diseases/infectious/leptospirosis (дата обращения 10.03.2018)

15Микробиология - лептоспиры [Электронный ресурс] USI: http://microbiology.ucoz.org/index/leptospiry/0-157 (дата обращения 10.03.2018г.)

16Медицинская энциклопедия. Лептоспиры [Электронный ресурс] USI: http://medictionary.ru/leptospiry/ (дата обращения 10.03.2018г.)

Список сокращений

L. - Leptospira

РА - реакция агглютинации

РМА - реакция микроагглютинации

РАЛ - Реакция агглютинации латекса

РСК - Реакция Связывания Комплемента

Размещено на Allbest.ru

...