Полиморфизм генов белков фолатного обмена и рак молочной железы в Забайкалье

Изучение частоты генотипов и аллелей генетического полиморфизма белков фолатного цикла у женщин, больных раком молочной железы в Забайкалье. Сравнение результатов генетического тестирования у больных раком молочной железы методом "сумма баллов генотипов".

Рубрика Медицина
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 31.12.2019
Размер файла 171,8 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Полиморфизм генов белков фолатного обмена и рак молочной железы в Забайкалье

Марковский А.В., Страмбовская Н.Н.

Рак молочной железы (РМЖ) - с точки зрения Международного агентства по изучению рака (IARC, Лион), это «идеальная» опухоль для проведения популяционного скрининга [4]. В России эта патология является ведущей в структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями у женского населения. Абсолютное число вновь выявленных больных в 2012 г. составило 59,5 тыс. против 39,0 тыс. в 1996 г., а число умерших выросло до 23,1 тыс. по сравнению с 19,6 тыс. В 2007 г. в структуре онкологической заболеваемости женского населения России рак молочной железы занимал 1-е ранговое место в возрастной группе 40-85 лет и 2-е (18,9%) - в возрастной группе 15-39 лет (после рака шейки матки) [3]. Актуальна эта проблема и для Забайкальского края, где рак молочной железы является одной из основных локализаций среди злокачественных опухолей у женщин, а показатели заболеваемости и смертности (43,3 и 15,3 соответственно на 2012 г.), соотносимые со среднероссийскими данными, имеют тенденцию к росту [3,5].

В клинической практике используются различные молекулярно-генетические методы ранней диагностики, которые позволяют идентифицировать большинство случаев наследственных форм РМЖ, обусловленных мутациями определенного гена -- BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN и др. В качестве генов-кандидатов, также, могут быть рассмотрены гены белков фолатного цикла, играющие важную роль в таких процессах как синтез и метилирование ДНК, регенерация метионина, биосинтез пуриновых нуклеотидов, превращение уридинмонофосфата в тимидинмонофосфат [1]. Роль их в этиопатогенезе РМЖ окончательно не установлена, что делает изучение данных генов чрезвычайно интересным.

Цель исследования. Изучить частоту генотипов и аллелей генетического полиморфизма белков фолатного цикла у женщин, больных раком молочной железы в Забайкалье.

Материалы и методы. В исследование вошли 90 больных с объективно доказанным (гистологические и иммуногистохимические методы исследования) раком молочной железы, в возрасте 53,1±13,0 лет, находившихся на стационарном лечении в Забайкальском краевом онкологическом диспансере. Контрольную группу составили 299 здоровых женщин Забайкальского края в возрасте 38,2±5,9 лет (р>0,05), считающих себя относительно здоровыми и не имеющих на момент исследования онкологической патологии.

Экстракцию ДНК из лейкоцитов цельной периферической крови проводили посредством комплекта реагентов «ДНК-Экспресс Кровь» (ООО НПФ «Литех», Россия), из буккального эпителия - «Проба Рапид Генетика» (ООО ДНК-Технология, Россия), согласно инструкции производителя.

Генотипирование проводилось с использованием наборов «Генетика Метаболизма Фолатов» для выявления полиморфизма: MTHFR-677C>T, MTHFR-1298A>C, MTRR-66A>G (ООО «НПО ДНК-Технология», Москва) методом полимеразной цепной реакции с детекцией продукта амплификации в режиме реального времени. Для постановки ПЦР использовался ПЦР-амплификатор ДТ-96 («ДНК-Технология», Россия). Для оценки соответствия распределений наблюдаемых генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайнберга и для сравнения распределений частот генотипов и аллелей в двух субпопуляциях использовали критерий ч2, где значения уровня p<0,05 рассматривались как значимые. Статистическая обработка данных проводилась с использованием on-line-калькулятора http://gen-exp.ru/calculator_or.php

Для более объективной оценки вклада нескольких полиморфных генов в патологический процесс была использована система баллов [2]. С этой целью гомозиготам по нормальному аллелю присваивали 0 баллов, гетерозиготам - 1 балл, гомозиготам по мутантному аллелю - 2. Затем для каждого пациента суммировали баллы всех исследованных генотипов с выделением средней величины (M).

Результаты исследования и их обсуждение. Полиморфные варианты генов MTHFR, MTRR влияют на широкий спектр биохимических реакций в ходе фолатного цикла, обуславливая различную функциональную значимость белковых продуктов [14].

Ген MTHFR локализуется на коротком плече хромосомы 1 (1р36.3) и состоит из 11 экзонов. Длина всего кодирующего региона составляет около 1980 пар нуклеотидов. Имеется ряд аллельных вариантов этого гена, вызывающих тяжелую недостаточность фермента метилентетрагидрофолатредуктазы, но большинство из этих вариантов редки. Практическое значение имеют два полиморфизма:

1) полиморфизм C677T в экзоне 4 - приводящий к замене аминокислотного остатка аланина на валин (Ala222Val) в сайте связывания фолата. У гетерозигот по данной мутации, отмечается термолабильность фермента и снижение его активности примерно до 35%, у гомозигот - до 70% [16].

2) полиморфизм А1298С в экзоне 7 - приводящий к замене аминокислотного остатка глутамина на аланин (Glu429Ala) в регуляторном домене фермента. Аллель 1298С незначительно снижает активность фермента, а гетерозиготность по двум аллелям 1298C и 677T сопровождается снижением активности фермента на 40-50% [16].

Ген MTRR картирован на хромосоме 5 в локусе 5р15.3-р.15.2. В этом гене описаны разные типы мутаций и ряд полиморфных вариантов. Полиморфизм A66G (Ile22Met) в 4 раза снижает активность фермента MTRR (метионин-синтазы редуктазы) участвующего в восстановлении активности метионинсинтазы - непосредственно осуществляющей метилирование гомоцистеина [10].

В ходе исследования полиморфизма генов белков фолатного цикла, обнаружены все искомые мутации в гомо- и гетерозиготном состоянии с частотным подчинением закону Харди-Вайнберга (табл. 1).

Таблица 1. Частота аллелей и генотипов полиморфизма MTHFR-C677T, MTHFR-A1298C, MTRR-А66G в группах сравнения

Примечание: выделены значимые различия частот. *df = 1, **df = 2.

Частоты генотипов и аллелей генов MTHFR(C677T), MTHFR(A1298C) в исследуемой и контрольной группе не имели статистически значимых отличий (p>0,05), что может быть связано с недостаточным количеством наблюдений. Следует отметить, что в литературе приводятся неоднозначные данные по изучению полиморфизма этих генов, где например, у носителей генотипа MTHFR-677T/Т отмечается сниженный риск развития аденокарциномы толстой кишки [13], что противоречит данным Giovannucci E. и соавт. [12]. Результаты исследования G. Yin и соавт., другого полиморфного аллеля MTHFR-1298С, показывают повышенный риск развития рака толстой кишки у носителей генотипа MTHFR-1298С/С [13]. В тоже время, по данным мета-анализа, выполненного Y. Huang и соавт., - риск развития колоректальных раков снижен, у носителей этого аллеля [7]. Противоречивость выводов может быть отчасти обусловлена как объективными причинами (мультифакториальный генез рака, этногеографическое разнообразие генофондов популяций), так и субъективными (различные критерии при отборе обследуемых лиц), а изучение роли полиморфизмов гена MTHFR в этиопатогенезе онкопатологии остается актуальным.

В нашей работе, в результате генотипирования, у больных РМЖ выявлено преобладание частоты генотипа MTRR66A/G - 56,8%, против 41,5% (ч2=6,73; p=0,03) в контрольной группе, с увеличением риска развития заболевания в 1,86 раза (CI95%:1,15-3,00). Полиморфизм MTRRA66G является распространенным для большинства популяций, частота гетерозигот составляет около 45-50%, а гомозигот ~ 25% [15]. Распределение генотипов, например, в украинской популяции отличаются от европейских высоким удельным весом патологических гомозигот (35.5%) (в европейской популяции 29.6%) и частотой мутантного аллеля MTRR66G (57%) против 54% [9]. Можно предположить, что ассоциация полиморфизма MTRR-A66G с РМЖ связана, например, с четырехкратным снижением активности метионинсинтазы редуктазы, что может вызвать повреждение ДНК, в том числе, и в клетках молочной железы. В подобных исследованиях ряда авторов была показана неоднозначность результатов. Так, например, по мнению Т. Otani и соавт., не наблюдается ассоциации генотипов MTRR66A/G и MTRR66G/G и аллеля 66G с риском развития рака толстой кишки [8], что противоречит данным других исследователей, сообщавших о повышенном риске развития колоректального рака у гомозигот по мутантному аллею [11].

Для более объективной оценки вклада нескольких полиморфных генов в патологический процесс, при сравнении средних сумм баллов, полученных при оценке полиморфизма генов фолатного обмена в двух группах - получены статистически не значимые отличия. Так, средняя сумма баллов у больных РМЖ составила 2,209 и была незначительно выше, чем в контрольной группе - 2,112 (р>0,05) (табл. 2).

Таблица 2. Сравнительный анализ результатов генетического тестирования у больных РМЖ методом «сумма баллов генотипов»

Примечание: * - статистически не значимые результаты.

Таким образом, полиморфизм MTRR-A66G может выступать, как потенциальный фактор риска развития неопластических процессов, связанных со снижением метилирования ДНК, что является одним из наиболее характерных признаков опухолевой клетки. Важно отметить снижение степени метилирования с возрастом, что в совокупности с полиморфизмами генов фолатного цикла может обуславливать возрастание частоты РМЖ у пожилых [6]. Но, по-видимому, влияние аллелей 677T, 1298C и 66G на развитие онкологических заболеваний зависит от наличия дополнительных факторов риска, изучение которых требует большей выборки.

Выводы

В результате исследования выявлены все изучаемые генетические полиморфизмы в гомо- и гетерозиготном состоянии. В сравнении с контрольной группой у больных РМЖ в Забайкальском крае отмечено частотное преобладание генотипа MTRR66A/G - 56,8%, против 41,5%, с увеличением риска развития заболевания в 1,86 раза (p=0,03). Частоты генотипов и аллелей полиморфизма генов MTHFR(C677T), MTHFR(A1298C) в исследуемой и контрольной группе не имели статистически значимых отличий (p>0,05). рак молочная железа генетический белок

И все же, несмотря на неоднозначность данных по различным случаям онкопатологии, несмотря на неясно обозначенные различия в иммунопатогенезе и в их этиологии, имеются основания говорить о базисной тождественности их патогенеза - о нестабильности генома клеток, индуцированной метилированием ДНК, которое играет значительную роль в манифестации клинических проявлений наследственных заболеваний и мультифакториальных нарушений, что необходимо учитывать, например, при выборе тактики лечения.

Список использованных источников

1. Анализ ассоциации полиморфных вариантов генов фолатного цикла с предрасположенностью к развитию рака молочной железы в западно-сибирском регионе России / А.С. Вайнер и др. // Сибирский онкологический журнал. - 2009. - № 1. - С. 38.

2. Генетический паспорт - основа индивидуальной и предиктивной медицины / Под ред. В.С. Баранова. - СПб.: Изд-во Н-Л, 2009. - 528 с.

3. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2012 г. / М.И. Давыдов, Е.М. Аксель. - М.: Издательская группа РОНЦ, 2014. - 226 с.

4. Скрининг рака молочной железы / В.Ф. Семиглазов, В.В. Семиглазов // Практическая онкология - Т. 11, № 2 - 2010. С.60-65.

5. Частота и взаимосвязь полиморфизма генов BRCA1/2 и белков фолатного цикла у больных раком молочной железы в Забайкалье / А.В. Марковский // Матер. V междунар. (XII итоговой) НПК молодых учёных, посв. 70-летию ЮУГМУ. - Челябинск, 2014. - С.85-87.

6. DNA methylation and cellular ageing / J. Catania, D.S. Fairweather // Mutat. Res. - 1991. -Vol. 256. - P. 283-293.

7. Different roles of MTHFR C677T and A1298C polymorphisms in colorectal adenoma and colorectal cancer: a meta-analysis / Y. Huang et al. // J. Hum. Genet. 2007. Vol. 52, № 1. P. 73-85.

8. Folate, vitamin B6, vitamin B12, and vitamin B2 intake, genetic polymorphisms of related enzymes, and risk of colorectal cancer in a hospital-based case-control study in Japan / T. Otani et al. // Nutr. Cancer. 2005. Vol. 53, № 1. P. 42-50.

9. Influence of a methionine synthase (D919G) polymorphism on plasma homocysteine and folate levels and relation to risk of myocardial infarction. / J.Chen et al. //Atherosclerosis. - 2001. - Vol.154. - P.667-672.

10. MЕCP2 mutations in children with and without the phenotype of Rett syndrome / K. Hoffbuhr et al. // Neurology. - 2001. - Vol.56, P.1486-1495.

11. Methionine synthase reductase gene A66G polymorphism is associated with risk of colorectal cancer / K. Matsuo et al. // Asian. Pac. J. Cancer Prev. -2002. Vol. 3, №4. - P.353-359.

12. Methylenetetrahydrofolate reductase, alcohol dehydrogenase, diet, and risk of colorectal adenomas / E. Giovannucci et al. // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. - 2003. - Vol. 12, №10. - Р.970-979.

13. Methylenetetrahydrofolate reductase C677T and A1298C polymorphisms and colorectal cancer: the Fukuoka Colorectal Cancer Study / G. Yin et al. // Cancer Sci. 2004. Vol. 95, № 11. P. 908-913.

14. No association between the MTHFRA1298C and transcobalamin C776G genetic polymorphisms and hyperhomocysteinemia in thrombotic disease / H. Zetterberg et al. // Thromb. Res. - 2002. - Vol.108. - P.127-131.

15. Polymorphisms in genes involved in folate metabolism as maternal risk factors for Down syndrome / C.A. Hobbs et al. // Am. J. Hum. Genet. - 2000.- Vol. 67.- P. 623-630.

16. Cytosine methylation and the ecology of intragenic parasites / J.A.Yoder, C.P. Walsh, Т.Н. Bestor // Trends Genet. - 1997. - Vol. 13. - P. 335-340.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

  • Изучение особенностей психологических реакций на наличие онкологического заболевания и способы его лечения. Определение основных проблем пациенток с раком молочной железы. Рекомендации по организации ухода за пациентками с раком молочной железы.

    презентация [1,1 M], добавлен 13.12.2017

  • Статистика заболеваемости раком молочной железы, основные причины его развития. Типы рака молочной железы по анатомической форме роста. Клинические признаки фиброзно-кистозной мастопатии. Симптомы фиброаденомы, ее виды. Самообследование молочной железы.

    презентация [365,3 K], добавлен 14.07.2015

  • Распространенность заболевания раком молочной железы (злокачественная опухоль железистой ткани молочной железы). Структура онкологической заболеваемости у женщин. Зависимость возникновения заболевания от возраста. Первичная профилактика рака груди.

    презентация [2,1 M], добавлен 03.05.2015

  • Морфогенез молочной железы. Особенности строения лактирующей и нелактирующей молочной железы в норме. Морфоколичественный анализ компонентов молочной железы. Оценка удельного объема структурных компонентов молочной железы с помощью сетки Автандилова.

    курсовая работа [722,1 K], добавлен 08.02.2011

  • Постоянное ощущение чувства тяжести и ограничение движений в суставе, снижение мышечного тонуса - одни из основных клинических признаков лимфодемы. Хирургическое восстановление - важный элемент комплексной реабилитации больных раком молочной железы.

    курсовая работа [315,2 K], добавлен 13.12.2017

  • Структура онкологической заболеваемости женского населения. Особенности раковой опухоли. Современные методы диагностики РМЖ. Виды рака молочной железы, симптомы. Риск развития рецидива. Эффективность лучевой терапии рака молочных желез (менее сантиметра).

    реферат [20,0 K], добавлен 30.05.2013

  • Строение молочной железы. Лимфатическое метастазирование при раке молочной железы. Плюсы и минусы методики лоскута широчайшей мышцы спины. Виды хирургических операций. Секторальная резекция молочной железы. Радикальная мастэктомия по Холстеду-Майеру.

    презентация [1,8 M], добавлен 21.12.2011

  • Факторы риска развития рака молочной железы, связанные с репродуктивной функцией. Первые симптомы и жалобы пациентов при раке молочной железы. Диагностика и лечение рака молочной железы на фоне беременности. Возможные метастазы в плаценту и ткани плода.

    презентация [6,8 M], добавлен 06.10.2016

  • Патогенез и классификация рака молочной железы. Факторы риска его развития. Цитологические особенности отдельных форм рака молочной железы. Особенности, присущие протоковому раку. Заболеваемость рака молочной железы в Гомельской области и Беларуси.

    дипломная работа [2,8 M], добавлен 20.09.2012

  • Установление диагноза злокачественной опухоли ткани молочной железы. Структура онкологической заболеваемости у женщин. Профилактика и факторы риска рака молочной железы. Комплексное, комбинированное и хирургическое лечение заболевания. Скрининг РМЖ.

    презентация [1,4 M], добавлен 22.12.2014

  • Факторы риска, цитологическая диагностика рака молочной железы. Критерии злокачественности рака молочной железы. Интраоперационная цитологическая диагностика рака молочной железы. Аспекты дифференциальной цитологической диагностики рака молочной железы.

    реферат [27,6 K], добавлен 05.11.2010

  • Распространенность доброкачественных и злокачественных опухолей молочной железы, их виды. Эпителиальная опухоль, исходящая из протоков или долек железы (рак груди), причины ее возникновения и типичные симптомы. Клиническая картина течения заболевания.

    презентация [1,6 M], добавлен 19.03.2017

  • Классификация мастопатий, их клинические проявления. Доброкачественные опухоли молочной железы. Истинная и ложная гиникомастия. Злокачественная опухоль у женщин, патогенетические факторы риска. Гистологическая классификация рака молочной железы.

    презентация [198,7 K], добавлен 10.04.2015

  • Факторы риска развития рака молочной железы (РМЖ). Порядок осмотра и пальпации молочных желез. Дифференциальная диагностика между доброкачественной опухолью молочной железы и РМЖ. Методы лечения данного заболевания, условия назначения лучевой терапии.

    презентация [6,2 M], добавлен 20.09.2016

  • Этиологические факторы рака молочной железы, его разновидности и характеристика. Локализация рака молочной железы, методы самообследование и диагностики. Обзор способов лечения и профилактики заболевания. Рекомендации женщинам, перенесших мастэктомию.

    презентация [5,7 M], добавлен 31.05.2013

  • Анатомия молочных желез. Устройства, методы диагностики рака молочной железы. Физикальное и ультразвуковое исследования, маммография. Магнитно резонансная томография и радионуклидная диагностика. Использование метода акустической резонансной визуализации.

    дипломная работа [2,0 M], добавлен 06.11.2012

  • Структура онкологической заболеваемости женского населения, факторы риска рака молочной железы. Эндокринные и метаболические факторы, связанные с сопутствующими заболеваниями. Проведение цитологической и гистологической диагностики рака молочной железы.

    презентация [3,6 M], добавлен 25.10.2016

  • Незрелая злокачественная опухоль из железистого эпителия. Факторы, которые увеличивают вероятность возникновения рака молочной железы. Эндокринные и метаболические факторы, связанные с сопутствующими заболеваниями. Рак молочной железы и беременность.

    презентация [23,6 M], добавлен 25.01.2015

  • Основные факторы развития рака молочной железы. Цитологическая и патологоанатомическая диагностика: техника пункции и этапы макроскопического исследования материала. Определение содержания стероидных гормонов, маркеров пролиферации, белков-супрессоров.

    курсовая работа [48,0 K], добавлен 26.05.2014

  • Клиническая картина, осложнения, лечение рака молочной железы. Факторы, снижающие риск возникновения. Важнейшие факторы риска. Преимущества и недостатки маммографии. Участие медицинской сестры в проведении реабилитационных мероприятий после мастэктомии.

    реферат [679,0 K], добавлен 11.04.2017

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.