Полиморфизм гена синтазы азота (NOS3 C786T) и эндотелина-1 (LYS198ASN) при гриппе, осложненном пневмонией у детей

Диагностика и терапия внебольничной пневмонии в детском возрасте. Три формы пневмонии: первичная вирусная пневмония, вторичная вирусно-бактериальная и третичная пневмония. Изучение частоты встречаемости генотипов полиморфного маркера гена эндотелина.

Рубрика Медицина
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 31.12.2019
Размер файла 89,3 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Полиморфизм гена синтазы азота (NOS3 C786T) и эндотелина-1 (LYS198ASN) при гриппе, осложненном пневмонией у детей

Мироманова Н.А.

Введение

Диагностика и терапия внебольничной пневмонии в детском возрасте являются актуальными вопросами педиатрии в связи с достаточно высокой заболеваемостью и сохраняющейся смертностью [1]. Причем, в 5-15% всех внебольничных пневмоний причиной их развития являются вирусные инфекции, основное значение среди которых имеет вирус гриппа [5]. В настоящее время при гриппе принято выделять три формы пневмонии: первичная вирусная пневмония, вторичная вирусно-бактериальная и третичная пневмония. При этом следует отметить, что в детском возрасте при гриппе чаще встречается вторичная вирусно-бактериальная пневмония, ассоциированная с разнообразным спектром микроорганизмов (S.pneumoniae, H.influen-zae типа b и пр.) и обуславливающая высокий процент неблагоприятных исходов. Тяжелые внебольничные пневмонии у детей нередко сопровождаются синдромом системной воспалительной реакции (ССВР), сепсисом и полиорганной недостаточностью, которые представляют стадии развития одного процесса. В генезе развития ССВР наиболее важным звеном считают гиперпродукцию провоспалительных цитокинов и оксида азота (NO), как основного повреждающего фактора эндотелия капилляров и обуславливающего формирование дисфункции эндотелия [2]. Кроме оксида азота, одним из изученных маркеров, характеризующих дисфункцию эндотелия, является эндотелин-1.

В норме уровень эндотелина чрезвычайно низкий, однако под воздействием различных факторов (гипоксия, ишемия, стресс) стимулируется его синтез. Известно, что эндотелин оказывает мощное вазоконстрикторное действие, может способствовать внутрисосудистому свертыванию крови [3]. Регуляторное действие оксида азота в организме обеспечивается его генерацией из L-аргинина, катализируемой изоформами NO-синтаз (NOS) [7]. Показано, что физиологические концентрации NO играют важную роль в регуляции функций иммунной системы, эндотелия сосудов, нейротрансмиссии, поддержании гемостаза. В тоже время, недостаток, как и избыток NO могут вызывать ряд патологических состояний (тромбообразование, ишемию органов, дисбаланс регуляторных систем) [4]. Представляется вероятным, что активность определенных изоформ NOS, являющихся продуктами экспрессии соответствующих генов (NOS1-3), может обеспечивать различную концентрацию NO в организме, и таким образом, определять его функцию как физиологического регулятора, либо как токсического агента. А повышение концентрации эндотелина у пациентов с мутациями в соответствующем гене, может стать значимым в развитии и усугублении дисфункции эндотелия.

Поэтому поиск генетических критериев, характеризующих дисфункцию эндотелия при гриппе, осложненном пневмонией для прогнозирования тяжести ее течения, представляется чрезвычайно актуальным. пневмония генотип эндотелин

Цель исследования - изучить частоту встречаемости генотипов полиморфного маркера гена эндотелина-1 (EDN1 Lys198Asn) и синтазы окиси азота (NOS3 C786T) у детей при гриппе А H1N1/v, осложненном пневмонией.

Материал и методы. В исследование включено 137 детей с внебольничной пневмонией. Основную группу исследуемых составили 87 детей с внебольничной пневмонией, как осложнение пандемического гриппа А H1N1/v, проходивших стационарное лечение в государственном учреждении здравоохранения "Краевая клиническая инфекционная больница" (Забайкальский край) в эпидемический сезон октябрь-декабрь 2009 года по гриппу А H1N1/v. Пневмония в данной группе носила вторичный вирусно-бактериальный характер. Группу сравнения для основной группы составили 50 детей с внебольничной пневмонией в постэпидемический по гриппу период. Дети с атипичной этиологией внебольничной пневмонии (микоплазменная, хламидийная) из данной группы исключались. Распределение исследуемых по группам, полу и возрасту представлены в табл.1.

В работе с обследуемыми лицами соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинкской Декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (World Medical Association Declaration of Helsinki (1964, 2000 - поправки) и Правилами клинической практики в Российской Федерации", утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. № 266.

Таблица 1. Распределение больных по группам, полу и возрасту

Диагноз внебольничной пневмонии устанавливался на основании достоверных критериев, предложенных А.Г. Чучалиным и соавт. [1]. В качестве критериев тяжести внебольничной пневмонии у детей использовали модифицированную шкалу тяжелых внебольничных пневмоний у взрослых (2007) [8]. Все пациенты с тяжелым течением внебольничной пневмонии соответствовали критериям ССВР, предложенные Международной согласительной конференции по педиатрическому сепсису (2005) [6].

Этиологическую связь с вирусом гриппа А H1N1/v у детей с пневмонией в сезон циркуляции пандемического гриппа подтверждали путем обнаружения РНК вируса в назофарингеальных мазках методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и/или с помощью реакции торможения гемагглютинации (РТГА) в парных сыворотках с нарастанием тира антител. Детей с внебольничной пневмонией в постэпидемический период по гриппу А H1N1/v тестировали методом ПЦР (назофарингеальные мазки) на группу респираторных вирусов (вирусы гриппа А H1N1/v, A H3N2, типа В, парагриппа 1-3 серотипов, аденовирусы, респираторно-синцитиальный вирус, риновирусы, метапневмовирус, бокавирус).

В качестве контрольной группы для оценки распределения генотипов исследуемых полиморфизмов в популяции обследовано 200 здоровых детей, сопоставимых по полу и возрасту с основной группой.

Материалом для молекулярно-генетического анализа служили образцы ДНК, выделенные из периферической венозной крови. Для исследования выбрана точка мутации эндотелина-1 (EDN1) в позиции 198 (Lys>Asn) и эндотелиальной синтазы окиси азота (NOS3) в позиции 786 (C>T).

Амплификацию проводили в термоцикле (модель Ре "Бис" - М 111 (ООО "Бис-Н", Новосибирск). В работе использовались стандартные наборы праймеров научно-производственной фирмы "Литех"-"SNP" (Москва). Визуализация продуктов амплификации выполнена с помощью электрофореза в 3% агарозном геле с добавлением бромистого этидия, проходящем в ультрафиолетовом свете.

Полученные данные подвергали статистической обработке с помощью программы "BIOSTAT". При сравнении частот и групп по качественному бинарному признаку пользовались критерием ч2. Различия считались статистически значимыми при p<0,05. Для определения частот аллельных вариантов генов применялся закон Харди-Вайнберга. С целью оценки ассоциаций аллелей с генотипом рассчитывали относительный риск (ОР) и отношение шансов (ОШ).

Результаты исследования и их обсуждение. Распределение распространенности генотипов полиморфного локуса С 786Т гена NOS3 и Lys198Asn гена EDN1 в группе больных и контрольной группе соответствовало ожидаемому равновесию Харди-Вайнберга.

По данным распределения распространенности генотипов гена EDN1 Lys198Asn у больных с пневмонией получены достоверные различия с группой здоровых лиц (табл.2).

Таблица 2. Распределение генотипов EDN1 (Lys198Asn) среди больных с пневмонией и здоровых индивидуумов

Примечание: здесь и далее * - статистическая значимость различий с контролем; ** - статистическая значимость различий с группой клинического сравнения

Причем, данные различия затрагивают исключительно группу пациентов с пневмонией при гриппе A H1N1/v (р=0,0001). Так, распределение генотипов Lys/Lys, Lys/Asn и Asn/Asn оказалось одинаково частым у здоровых детей и у больных с нетяжелым и тяжелым течением внебольничной пневмонии, этиологически не связанной с вирусом гриппа A H1N1/v (соответственно, р=0,102, р=0,161). Кроме того, частота выявления этих же генотипов не отличалась и у пациентов с различной тяжестью течения внебольничной пневмонии вне эпидемического сезона по гриппу (р=0,26). В тоже время у детей при тяжелой пневмонии, обусловленной пандемическим вирусом гриппа, частота регистрации исследуемых генотипов отличалась не только от группы здоровых лиц, но и от пациентов группы сравнения (р=0,022) и детей с нетяжелым течением пневмонии в сезон циркуляции гриппа A H1N1/v (р=0,04). У пациентов при тяжелом течении пневмонии при гриппе относительно детей группы сравнения с тяжелым течением пневмонии генотип Asn/Asn обнаруживался чаще в 2,2 раза, а генотип Lys/Asn - чаще в 1,9 раза.

Оценивая частоту аллельных вариантов гена EDN1 Lys198Asn выявлено, что в отличие от группы контроля и группы сравнения, пневмонии при пандемическом гриппе сопровождаются более редким обнаружением аллели Lys (тяжелое течение - 0,6, нетяжелое - 0,7, р=0,0001) (табл.3).

Соответственно, мутантная аллель Asn у детей при гриппе, осложненном пневмонией, выявлялась чаще в сопоставлении со здоровыми индивидуумами и пациентами группы сравнения (соответственно, р=0,0001, р=0,002). Достоверных отличий распространенности аллели Asn у детей с различной тяжестью течения пневмонии при гриппе нами не выявлены (р=0,182). Расчет относительного риска выявил положительную ассоциацию данного аллеля с тяжелым течением пневмонии при гриппе A H1N1/v (ОР=1,37, ДИ [-0,39; 2,12]). Тогда как аллель Lys при тяжелом течении пневмонии у детей с гриппом оказывала протективное действие (ОР=0,72, ДИ [-2,12; 0,39]).

Распределение генотипов NOS3 (C786T) у здоровых лиц и у пациентов с гриппом представлены в табл.4.

Таблица 3. Частота аллельных вариантов в гене EDN1 полиморфизма Lys198Asn среди больных с пневмонией и здоровых индивидуумов, (Р)

Таблица 4. Распределение генотипов NOS3 (C786T) среди больных с пневмонией и здоровых индивидуумов

Согласно полученным данным, частота генотипов С/С и Т/Т отличалась от группы контроля только у больных с пневмонией в сезон циркуляции вируса гриппа A H1N1/v как при тяжелом, так и нетяжелом ее течении (р=0,05, р=0,0001, соответственно). Частота генотипа С/Т отличалась от здоровых лиц только при тяжелом течении пневмонии при гриппе A H1N1/v (р=0,0001). Тяжелая пневмония у детей в период циркуляции гриппа характеризовалась достоверно частым обнаружением генотипа Т/Т в сравнении не только с группой контроля, но и группой сравнения (р=0,0001). В тоже время статистически значимые различия распределения генотипов NOS3 (C786T) при различном течении пневмонии при гриппе нами не выявлены.

При сравнении частоты аллельных вариантов С и Т гена NOS3 С 786Т обнаружены статистически достоверные различия со здоровыми детьми только у больных при тяжелом течении пневмонии при гриппе (р=0,003) (табл.5). Причем частота аллели Т регистрировалась чаще у пациентов этой группы и в сопоставлении с группой сравнения (р=0,003), но не отличалась от больных с нетяжелой пневмонией при гриппе (р=0,182).

Таблица 5. Частота аллельных вариантов в гене NOS3 полиморфизма C786T среди больных с пневмонией и здоровых индивидуумов, (Р)

Расчет относительного риска выявил положительную ассоциацию аллеля Т гена NOS3 полиморфизма C786T с тяжелым течением пневмонии при гриппе A H1N1/v (ОР=1,5, ДИ [-1,0; 3,21]).

Таким образом, определение полиморфизма генов молекул, характеризующих дисфункцию эндотелия, дает возможность осуществлять индивидуальный прогноз при пневмонии, ассоциированной с вирусом пандемического гриппа, позволяя тем самым расширить перечень хорошо известных предикторов тяжести ее течения в детском возрасте и повысить вероятность прогноза.

Выводы

1. Распространённость генотипа Lys/Asn полиморфного маркера гена EDN1 Lys198Asn выше у детей с внебольничной пневмонией при гриппе A H1N1/v, независимо от тяжести ее течения.

2. Генотип Т/Т полиморфизма гена NOS3 (С 786Т) встречается чаще у пациентов с тяжелым течением пневмонии в сезон циркуляции вируса пандемического гриппа.

3. Тяжелое течение пневмонии при гриппе A H1N1/v у детей ассоциировано с аллелем Asn гена EDN1 полиморфизма Lys198Asn и аллелем Т гена полиморфизма гена NOS3 (С 786Т).

4. Аллель Lys гена EDN1 полиморфизма Lys198Asn может быть расценен как фактор защиты при пневмонии у детей с гриппом A H1N1/v.

5. Частота распределения генотипов гена EDN1 полиморфизма Lys198Asn и гена NOS3 (С 786Т) у детей с внебольничной пневмонией вне эпидемического сезона по гриппу, независимо от тяжести ее течения, не отличается от здоровых лиц.

Список использованных источников

1. Чучалин А.Г. и др. Внебольничная пневмония у детей: распространенность, диагностика, лечение и профилактика. - М.: Оригинал-макет, 2011. - 64 с.

2. Козлов В.К. Сепсис: этиология, иммунопатогенез, концепция современной иммунотерапии. - СПб.: Диалект, 2006. - 304 с.

3. Кузник Б.И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии. - Чита: Экспресс-издательство, 2010. - 832 с.

4. Bachmann S., Mundel P. Nitric oxide in the kidney : synthesis, localization and function// Am. J. Kidney Dis. - 1994. - V. 24. - P. 112-129.

5. Almirall J. et al. Epidemiology of community-acquired pneumonia in adults : a population-based study// Eur Respir J. - 2000. - №15. - P. 757-763.

6. International pediatric sepsis consensus conference : Definitions for sepsis and organ dysfunction in pediatrics/ B. Goldstein, B. Giroir, A. Randolph// Pediatr. Crit. Care Med. - 2005. - №6. - P. 2-8.

7. Sobrier F. Nitric oxide synthase genes among many others// Hypertension. - 1999. - V. 33. - P. 924-926.

8. Bradley J.S. et al. The management of community-acquired pneumonia in infants and children older than 3 months of age: clinical practice guidelines by the Pediatric Infectious Diseases Society and Infectious Diseases Society of America// Clin. Infect. Dis. - Aduance Access published August 30, 2011. - P. 1-5.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

  • Специфические причины пневмонии. Пневмония, вызываемая трахомной хламидией. Связь проявления заболевания со степенью вовлечения дыхательных путей и развитием гипоксии. Респираторно-синцитиальный вирус. Бактериальная пневмония в детском возрасте.

    доклад [15,5 K], добавлен 28.05.2009

  • Инфекционное поражение легких как ведущая причина серьезной заболеваемости в младенческом и детском возрасте. Симптомы проявления пневмонии у детей различного возраста. Клиническое обследование детей с подозрением на пневмонию, характеристика лечения.

    доклад [19,1 K], добавлен 28.05.2009

  • Виды пневмонии и ее возбудители. Заболеваемость внебольничной пневмонией, перечень основных факторов риска развития заболевания и летального исхода. Особенности клинического течения и диагностики. Выбор антибиотика при известном возбудителе пневмонии.

    реферат [16,7 K], добавлен 30.11.2009

  • Этиология и патогенез внебольничной пневмонии. Пути контаминации легких патогенной флорой. Клинические критерии пневмонии у новорождённого ребёнка. Критерии степени дыхательной недостаточности. Лечение острой пневмонии, показания к госпитализации.

    презентация [20,3 M], добавлен 27.02.2016

  • Этиология пневмонии – острого инфекционного воспаления тканей легких. Заболеваемость пневмонией у детей. Рентгенодиагностика крупозных и фокальных пневмоний. Характерные признаки респираторного хламидиоза у детей раннего возраста. Сегментарная пневмония.

    презентация [1,0 M], добавлен 20.09.2014

  • Общие сведения о симптоматике, этиологии и патогенезе пневмонии внебольничной. Особенности диагностики и разновидности недуга. Сравнительный анализ современных лекарственных препаратов, которые рекомендуются для лечения пневмонии у детей и подростков.

    курсовая работа [47,7 K], добавлен 23.05.2014

  • Этиология, симптомы внебольничной пневмонии. Частота встречаемости бактериальных возбудителей. Сопутствующие заболевания и факторы риска, связанные с определенными возбудителями внебольничной пневмонии. Комплексное лечение внебольничных пневмоний.

    курсовая работа [330,0 K], добавлен 07.08.2015

  • Пневмония как поражение легких, ее разновидности и механизмы возникновения, предпосылки и факторы развития патогенных процессов. Общая характеристика и особенности лечения пневмонии при гриппе, гипостатической и аспирационной, бензиновой пневмонии.

    реферат [17,1 K], добавлен 26.04.2010

  • Место пневмонии в общей заболеваемости детей, источники заражения данным заболеванием и предпосылки перероста его в хроническую форму. Формы пневмонии, дающие наибольшую смертность в раннем детском возрасте, механизмы их возникновения и развития.

    реферат [17,4 K], добавлен 27.04.2010

  • Пневмония как острое инфекционное воспаление тканей легких. Этиологические аспекты пневмонии у детей. Рентгенодиагностика крупозных пневмоний в дошкольном и школьном возрасте. Характерные признаки респираторного хламидиоза у детей раннего возраста.

    презентация [1,7 M], добавлен 19.10.2014

  • Затяжная пневмония как клинико-рентгенологический диагноз. Формы туберкулеза, встречающиеся у детей. Патогенез, симптоматика, клинические проявления заболевания. Дифференциальная диагностика первичного туберкулезного комплекса и затянувшейся пневмонии.

    презентация [341,2 K], добавлен 15.09.2015

  • Этапы диагностического поиска на примере внебольничной бактериальной левосторонней полисегментарной пневмонии. Жалобы больного при поступлении. Данные объективного исследования, обоснование клинического диагноза. Этиология и патогенез заболевания.

    история болезни [41,4 K], добавлен 29.10.2013

  • Общая характеристика гена eNOS. Анализ наследственной отягощенности у детей в группе риска по ожирению, по сахарному диабету тип 2 (СД2) и по сердечно-сосудистой патологии. Проведение ПЦР для 4a4b полиморфизма гена эндотелиальной NO-синтазы (eNOS).

    курсовая работа [317,8 K], добавлен 06.07.2011

  • Факторы, предрасполагающие к бактериальной пневмонии. Диагностические исследования, клиническая картина, лечение, применяемые препараты, частота и сезонность заболевания. Клинические особенности стрептококковой, стафилококковой пневмонии, госпитализация.

    доклад [18,5 K], добавлен 26.04.2009

  • Понятие пневмонии, анализ частоты ее наблюдения у раненных, а также этиология, патогенез, классификация, диагностика, лечение и профилактика. Особенности выявления пневмонии при проникающих ранениях груди. Сущность профилактики нагноительных процессов.

    реферат [20,0 K], добавлен 20.03.2010

  • Понятие, классификация и клинические проявления пневмонии. Факторы риска развития пневмонии. Методика диагностики заболевания. Принципы лечение, реабилитация и основные методы профилактики пневмонии. Описание применяемых лекарственных препаратов.

    реферат [32,7 K], добавлен 08.06.2011

  • Оценка фармакоэкономической эффективности антибактериальной терапии у пациентов с диагнозом внебольничная пневмония. Рассмотрение антибиотиков, наиболее часто применяемых при внебольничной пневмонии. Динамика рентгенологической картины на фоне лечения.

    презентация [330,8 K], добавлен 14.04.2015

  • Этиология внебольничной пневмонии, характеристика пациентов и её вероятные возбудители. Патогенетические механизмы, обусловливающие развитие пневмонии. Жалобы пациента при поступлении, план обследования, данные анамнеза, результаты анализов и диагноз.

    презентация [166,3 K], добавлен 04.11.2015

  • Пневмония как острое инфекционное поражение нижних отделов дыхательных путей. Развитие пневмонии у людей старческого возраста, ее проявления. Возбудитель заболевания, факторы риска. Классические клинические симптомы пневмонии у грудных детей, лечение.

    презентация [1,9 M], добавлен 17.09.2015

  • Клинические признаки и основные симптомы пневмонии, распространенные жалобы. Порядок обследования кожных покровов, систем, внутренних органов, взятие проб анализов для постановки диагноза. Методика формирования схемы лечения при внебольничной пневмонии.

    история болезни [10,2 K], добавлен 24.10.2010

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.