Асептика и антисептика. Определения. Методы

Размещено на http://www.allbest.ru/

Асептика и антисептика. Определения. Методы



Асептика -- комплекс мероприятий, направленных на предупреждение попадания микробов в рану.

Асептика -- безгнилостный способ лечения ран. Асептику следует отличать от антисептики, которая имеет целью уничтожить возбудителей воспаления, уже имеющихся в ране, посредством определённых химических веществ, как карболовой кислоты, сулемы и др.

Одним из основателей асептики считается немецкий хирург Эрнст фон Бергманн. Он предложил физические методики обеззараживания -- кипячение, обжигание, автоклавирование. Это произошло на X конгрессе хирургов в Берлине. Помимо их существует химический способ и механический. асептика антисептика инфекция рана

При асептическом способе лечения ран пользуются исключительно обеспложенной путём кипячения водой; весь перевязочный материал и инструменты также обеспложиваются текучим паром или кипячением.

Асептика применима до и во время операций на здоровых тканях, но неприменима там, где можно предполагать присутствие возбудителей воспаления в ране.

Асептика обладает несомненными преимуществами перед антисептикой в смысле результатов лечения, а также потому, что при асептическом способе лечения ран не бывает отравлений, которые возможны при применении некоторых антисептических средств.

Асептика -- метод предупреждения раневой инфекции. Профилактическое уничтожение микробов, предупреждение их попадания в рану. Соблюдение стерильности в ходе операции, стерилизация приборов, инструментов.

Основой асептики является стерилизация.

Способы стерилизации:

§ паром под давлением (бельё);

§ кипячение (металлические инструменты, кроме режущих);

§ суховоздушные шкафы (можно обжигать инструмент над пламенем);

§ холодная стерилизация (погружение резиновых перчаток в хлорамин);

§ 96 % спирт (30 мин.).

Аппаратура: автоклав, кипятильник, суховоздушный шкаф. В автоклаве существует несколько режимов:

§ щадящий -- с температурой 120 °C и давлением 1,1 атмосферы;

§ рабочий -- с температурой 132 °C и давлением 2,2 атмосферы;

§ с температурой 160 °C и давлением 3,3 (3,2) атмосферы.

Методы:

Уборка помещений

Автоклавирование

Сухожаровой шкаф

Лучевая стерилизация

Стерилизация

Обработка рук

Антисептика - комплекс мер, направленных на борьбу с микробами, находящихся в ране или в организме человека в целом

Виды

1. Механическая - удаление микроорганизмов с помощью каких-то механических методов (она основная в работе хирурга). Она включает:Туалет раны (удаление гнойного экссудата, сгустков крови, очищение поверхности раны)Первичная хирургическая обработка раны (она превращает инфицированную рану в стерильную за счет иссечения краев раны, стенок, дна и зон некроза/мертвая ткань, поражение ткани). Эта обработка включает: рассечение (рану рассекают), ревизия (пускают зонд), иссечение (иссекают стенки), восстановление поверхности, наложение швов.Вторичная хирургическая обработка (рану, в отличие от ПХОР, не зашивают, проводится дренирование раны/дают оттоки для гноя).Другие операции и манипуляции

2. Физическая - уничтожение микроорганизмов за счет физических явлений, например гигроскопический перевязочный материал/марля, ватно-марлевые тампоны; гипертонические растворы/за счет разницы давления (NaCl/фурацилин); адсорбенты, например активированный уголь или полифепан; лазер; УЗИ.

3. Химическая - используются следующие химические антисептические средства: йод (1 - 5 - 10% спиртовой раствор, используется для обработки кожи вокруг раны); йодипал (1%-ный раствор для наружного применения, для полоскания зева); раствор люголя (I + KI, используется как водный, так и спиртовой раствор, обладает дезинфицирующими, антисептическими свойствами, лечит больных с заболеваниями щитовидной железы); хлорамин (для дезинфекции посуды, мытья полов, 1 - 3% водный раствор); спирт (96%, 70% для стерилизации, обработка раны, рук хирурга); бриллиантовая зелень (1 - 2% раствор для обработки поверхностных ссадин и т.д.); метиленовый синий (1 - 2% спирт./водный раствор, наружное применение, для обработки слизистых оболочек, поверхностных оболочек, а 0,02% - для промывания ран); борная кислота (1 - 2% для наружного применения, основной препарат для промывания гнойных ран); перекись водорода(3% для промывания гнойных ран, обладает гемастатическим/кровоостанавливающим и дезодорирующим действием); марганцовка (2 - 3% для лечения ожогов и пролежней); фурацилин (наружное применение для лечения гнойных ран и полоскания горла); нашатырный спирт (0,5% для обработки рук хирурга); деготь, ихтиоловая мазь и т.д.

4. Биологическая

5. Смешанная

Бактерицидное действие - убивающее микробы

Бактериостатическое действие - задерживает рост и дальнейшее распространение микробов

Методы:

Механический

Физический

Биологический

Химический

Методы стерилизации и дезинфекции. Определение. Виды. Контроль эффективности стерилизации.

Стерилизация -- это процесс уничтожения всех видов микробной флоры, в том числе их споровых форм, и вирусов с помощью физических или химических воздействий. Принято считать медицинское изделие стерильным, если вероятность его бионагрузки равна или менее 10 в степени -6. Стерилизации должны подвергаться медицинские изделия, контактирующие с кровью пациента, контактирующие с раневой поверхностью и соприкасающиеся со слизистой оболочкой и могущие вызвать нарушение ее целостности. Стерилизация -сложный процесс, для успешной реализации которого необходимы следующие требования:

- эффективная очистка;

- соответствующие упаковочные материалы;

- соблюдение правил упаковки медицинских изделий;

- соблюдение правил по загрузке стерилизатора упаковками с медицинскими изделиями;

- адекватное качество и количество стерилизуемого материала; соответствующая работа оборудования;

- соблюдение правил хранения, обращения и транспортировки простерилизованного материала.

Дезинфекция -- мероприятия, направленные на уничтожение возбудителей инфекционных заболеваний во внешней среде.

Методы:

I. Физический метод дезинфекции основан на уничтожении или удалении патогенных микроорганизмов с поверхности предметов, подлежащих обеззараживанию путем воздействия ряда физических факторов.

II. Химический метод дезинфекции основан на использовании различных химических веществ. Наиболее часто применяют водные растворы. Химические методы дезинфекции применяют для изделий из стекла, коррозионностойких металлов, полимерных материалов, резины. Производят полное погружение в дезинфицирующий раствор или двукратное протирание салфеткой из бязи, смоченной дезраствором, с интервалом в 15 мин.

III. Воздушный метод

Применяется для изделий из стекла и металла. Дезинфекция происходит сухим, горячим воздухом в воздушном стерилизаторе в лотках без упаковки. При температуре 120 °С -- в течение 45 минут.

IV. Паровой метод

Применяют для изделий из стекла, металла, резины, латекса и термостойких полимеров. Производится она централизованно, водяным насыщенным паром под избыточным давлением в автоклаве в стерилизационных коробках.

Контроль эффективности стерилизации

Контроль эффективности стерилизации осуществляется физическими, химическими и бактериологическими методами.

К физическим методам контроля относятся: измерение температуры, давления и времени применения стерилизации.

Для проведения химического контроля на протяжении десятилетий применялись химические вещества, имеющие температуру плавления, близкую к температуре стерилизации. Такими веществами были: бензойная кислота - для паровой стерилизации; сахароза, гидрохинон и некоторые другие -для контроля воздушной стерилизации. Если происходило расплавление и изменение цвета указанных веществ, то результат стерилизации признавался удовлетворительным. Поскольку применение вышеуказанных индикаторов является недостаточно достоверным, в настоящее время внедрены в практику контроля термических методов стерилизации химические индикаторы, цвет которых изменяется под воздействием температуры, адекватной для конкретного режима, для определенного времени, необходимого для реализации данного режима. По изменению окраски индикаторов судят об основных параметрах стерилизации - температуре и продолжительности стерилизации. С 2002 года в России введен в действие ГОСТ РИСО 11140-1 «Стерилизация медицинской продукции. Химические индикаторы. Общие требования», в котором химические индикаторы распределены на шесть классов:

Принципы и методы выделения и идентификации чистой культуры бактерий. Этапы исследования.

Чистой культурой называется популяция микроорганизмов одного вида, выращенная на питательной среде.

Методы получения чистых культур:

1.из колонии (изолированное скопление микроорганизмов одного вида, выросших на питательной среде в результате размножения одной или нескольких клеток) - механическое разобщение бактериальных клеток

* посев петлёй, штрихом по Коху; посев шпателем, газоном по Дригалю; посев осаждением по Коху; посев разбрызгиванием; посев перемешиванием в расплавленном и остуженном студне

2.путём подавления роста «лишних» микробов

* на избирательных средах; после прогревания; после обработки кислотой; после антибиотиков; использование фагов; после проведения через живой организм

Чистую культуру бактерий получают для проведения диагно¬стических исследований -- идентификации, которая достигается путем определения морфологических, культуральных, биохимиче¬ских и других признаков микроорганизма.

Морфологические и тинкториальные признаки бактерий изучают при микроскопическом исследовании мазков, окрашенных разными методами, и нативных препаратов.

Культуральные свойства характеризуются питатель¬ными потребностями, условиями и типом роста бактерий на плот¬ных и жидких питательных средах. Они устанавливаются по мор¬фологии колоний и особенностям роста культуры.

Биохимические признаки бактерий определяются на¬бором конститутивных и индуцибельных ферментов, присущих определенному роду, виду, варианту.

При идентификации бактерий до рода и вида обращают вни¬мание на пигменты, окрашивающие колонии и культуральную среду в разнообразные цвета. Например, красный пигмент обра¬зуют Serratiamarcescens, золотистый пигмент -- Staphylococcusaureus (золотистый стафилококк), сине-зеленый пигмент -- Pseu-domonasaeruginosa.

Для установления биовара (хемовара, серовара, фаготипа) проводят дополнительные исследования по выялвению соответствующего маркера - определению фермента, антигена, чувствительности к Фанам.

Этапы:

1.Исследование материала

ъ@забор, регистрация

ъ@ориентировочная микроскопия с окраской мазка.

ъ@посев смеси бактерий на пластинчатый агар

2.Изучение колоний

ъ@изучение культуральных свойств (величина, форма, консистенция, поверхность, край, наличие пигмента, цвет, прозрачность)

ъ@микроскопия с окраской .

ъ@посев колонии на скошенный агар.

3.Изучение чистой культуры

ъ@микроскопия с окраской - морфологически и тинкториально однородные клетки

ъ@идентификация

ъAбиохимическая - посев в «пёстрый» ряд

ъAфагоидентификация

ъAсероидентификация

Микробиологический метод включает в себя выделение чистой культуры и её идентификацию.

Этапы исследования:

1. Приготовить мазок из бактериальной смеси. Окрасить по грамму. Микроскопировать, определить морфотип и их грамм-принадлежность. Для получения изолированных колоний (чистых культур) выполнить посев на МПА в чашку Петри с помощью шпателя.

2. Изучить рост на МПА, определить количество типов выросших колоний. Изучить и описать типичные колонии. Выбрать «подозрительную» колонию, часть матерала из которой используют для риготовления мазка, окрашенному по граму. При обнаружении в нем грамотрицтельных палочек, оставшуюся часть колонии пересеять на скошенный агар для накопления биомассы и поддержания культуры в чистоте.

3. Проверить выделенную культуру на чистоту. С целью идентификации выпонить посев чистой культуры на среды короткого «пестрого ряда» (лактоза-, манит-, глюкоза-, 1% пептонная вода-). Для оценки спектра антибиотикочувствительности выполнить «газонный посев» разложить диски с антибиотиками(цефуроксин, пиперациллин, цефоперазон, стрептомицин, мономицин). Для оценки фаголизабельности нанести на газооный посев диагностический бактериофаг кишечной палочки E.coli.

4. Оценить результат идентификации тестов и спектр антибиотикочувствительности выделенной культуры, определить антибиотик выбора.

Основные типы и сущность дыхания бактерий. Механизм дыхания бактерий. Методы культивирования анаэробов.

Дыхание бактерий - это процесс переноса атомов водорода о цепи дыхательных ферментов, в результате которого вырабатывается энергия.

По типу дыхания выделяют:

1.Облигатные (строгие) аэробы. Им необходим молекулярный (атмосферный) кислород для дыхания.

2.Факультативные анаэробы могут потреблять глюкозу и размножаться в аэробных и анаэробных условиях.

3.Строгие анаэробы размножаются только в анаэробных условиях т.е. при очень низких концентрациях молекулярного кислорода, который в больших концентрациях для них губителен.

Классификация бактерий по типу дыхания - биологического окисления.

По потребности микроорганизмов в кислороде выделяют пять групп:

1. Облигатные (строгие) аэробыспособны получать энергию только путем дыхания и поэтому обязательно нуждаются в молекулярном кислороде. Энергию получают окислительным метабо¬лизмом, используя кислород как терминаль¬ный акцептор электронов в реакции, катали-зируемойцитохромоксидазой. Пример: представители родовPseudomonasиBacillus.

2. Облигатные (строгие) анаэробыне способны расти и размножаться в присутствии кислорода, поскольку у них отсутствуют ферменты, расщепляющие токсические соединения кислорода.Для них как тип окисли¬тельно-восстановительных процессов характерна ферментация, при которой происходит перенос электронов от субстрата-донора к субстрату-акцептору. Тип метаболизма у них -- бродильный. Пример: микроорганизмы родовClostridiumи Bacteroides.

3. Факультативные анаэробы способны расти и размножаться как в при¬сутствии кислорода, так и в его отсутствии.Они обладают смешанным типом метабо¬лизма и могут ис¬пользовать в качестве терминальных акцепторов электронов как молекулярный кислород, так и органические соединения. Процесс получения энергии у них мо¬жет происходить кислородным дыханием в присутствии кислорода, а в его отсутствиипереключаться на брожение. Пример: Escherichiacoli и Saccharomyces.

4. Микроаэрофилынуждаются в низком содержании свободного кислорода 2-10%. Естественной средой обитания микроаэрофилов является мукозный слой, покрывающий эпителий желудка, где концентрация кислорода невелика. У микроаэрофилов имеются ферменты, которые инактивируются при контакте с сильными окислителями иактивны только при низких значениях парци¬ального давления кислорода, например фер¬мент гидрогеназа. Многие микроаэрофильные бактерии растут быстреев избыточном количестве углекислого газа (до 20%), поэтому их называют капнофилами.Пример: Helicobacterpylori, Campylobacter.

5. Аэротолерантные микроорганизмы способны расти в присутствии атмосферного кислорода, но не использовать его в качестве источника энергии. Они осуществляют анаэробный метаболизм (брожение), но устойчивы к действию кислорода при его обычных концентрациях. Пример: Streptococcuspyogenes, Lactobacillus.

Методы культивирования анаэробов:

Механические методы:

1. Посев уколом в столбик сахарного агара.

2. Метод Виньял-Вейона: в расплавленный и остуженный до 50° С агар вносят исследуемую анаэробную культуру, перемешивают и засасывают в пастеровскую пипетку, конец которой запаивают. Через 24 -- 48 часов столбике агара вырастают ясно видимые колонии микробов -- анаэробов.

3. Метод Перетца. Исследуемый материал вносят в 3 пробирки с физиологическим раствором, а затем в 3 пробирки с остуженным до 50° С МПА. Содержимое пробирок перемешивают и выливают в 3 стерильные чашки Петри, на дно которых предварительно кладут стерильное предметное стекло, через 18-20 часов инкубации в термостате под пластинками стекла вырастают анаэробы.

Физические методы:

1. Анаэростат -- создание вакуумных условий.

2. Аппарат Киппа -- замена воздуха индифферентным газом (водородом).

3. Среда Китта-Тароцци -- содержит кусочки печени, обладающие высокой адсорбционной способностью, 0.5% глюкозы. Перед посевом среду кипятят на водяной бане не менее 15 минут, сверху заливают слоем вазелиного масла, чтобы предохранить посев от проникновения кислорода,

Химические методы:

1. Прибор Омелянского -- для поглощения кислорода используется пирогаллол.

2. Среда Вильсон -- Блера. Содержит глюкозу, сернисто-кислый натрий, хлорид железа. Анаэробы образуют черные колонии за счет восстановления сернисто-кислого натрия в сернистый натрий, который, соединяясь с хлоридом железа, образуют осадок черного цвета -сернистое железо.

Биологический метод Фортнера:

Чашку Петри с толстым слоем агара делят на 2 половины на одну половину засевают облигатный аэроб -- «чудесную» палочку, на другую половину чашки засевают исследуемую анаэробную культуру. Чашку заливают растопленным парафином. Через 24 -- 48 часов в чашке вырастают аэробы, затем, когда запас кислорода исчерпывается, начинают размножаться анаэробы.

Культуральные свойства бактерий

К культуральным или макроморфологическим свойствам относятся характерные особенности роста микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах. На поверхности плотных питательных сред в зависимости от посева микроорганизмы могут расти в виде колоний, штриха или сплошного газона.

Колонией называют изолированное скопление клеток одного вида, выросших из одной клетки (клон клеток). В зависимости от того, где растет микроорганизм (на поверхности плотной питательной среды, в толще ее), различают поверхностные, глубинные и донные колонии.

Колонии, выросшие на поверхности среды, отличаются разнообразием, они видоспецифичны и их изучение используется для определения видовой принадлежности исследуемой культуры.

При описании колоний учитывают следующие признаки:

1. форму колонии- округлая, амебовидная, ризоидная, неправильная и т.д.;

2. размер (диаметр) колонии- очень мелкие (точечные) (0,1-0,5 мм), мелкие (0,5-3 мм), средних размеров (3-5 мм) и крупные (более 5 мм в диаметре);

3. поверхность колонии- гладкая, шероховатая, складчатая, морщинистая, с концентрическими кругами или радиально исчерченная;

4. профиль колонии- плоский, выпуклый, конусовидный, кратерообразный и т.д.;

5. прозрачность- тусклая, матовая, блестящая, прозрачная, мучнистая;

6. цвет колонии(пигмент) - бесцветная или пигментированная (белая, желтая, золотистая, красная, черная), особо отмечают выделение пигмента в среду с ее окрашиванием;

7. край колонии- ровный, волнистый, зубчатый, бахромчатый и т.д.;

8. структура колонии- однородная, мелко или крупнозернистая, струйчатая; край и структуру колонии определяют с помощью лупы или на малом увеличении микроскопа, поместив чашку Петри с посевом на столик микроскопа крышкой вниз;

9. консистенция колонии- определяют прикасаясь к поверхности петлей, колония может быть плотной, мягкой, врастающей в агар, слизистой (тянется за петлей), хрупкой (легко ломается при соприкосновении с петлей).

Глубинные колонии чаще всего похожи на более или менее сплющенные чечевички (форма овалов с заостренными концами), иногда комочки ваты с нитевидными выростами в питательную среду. Образование глубинных колоний часто сопровождается разрывом плотной среды, если микроорганизмы выделяют газ.

Донные колонии имеют обычно вид тонких прозрачных пленок, стелющихся по дну.

Описание роста микроорганизмов при посеве штрихом включает его особенности: скудный, умеренный, обильный; сплошной с ровным или волнистым краем; диффузный; перистый; ризоидный; древовидный. Характеризуют цвет, поверхность, консистенцию.

Размещено на Allbest.ru

...