Размещено на http: //www. allbest. ru/

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПЕНЗЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Кафедра «Микробиология, эпидемиология и инфекционные болезни»

Курсовая работа

Специальность - 31.05.01 Лечебное дело

по дисциплине «Микробиология, вирусология»

на тему «Микробиологическое исследование глаз и ушей»

Выполнил студент: Хамит А.Х

Группа: 16ЛЛ22

Руководитель: асс. кафедры, Акстына С.Ю.

 Содержание

Введение

1. Микробиологическая диагностика инфекции глаз

2. Микробиологическая служба осуществляет основные функции

3. Микробиологическая диагностика инфекционной патологии глаз

4.Эндофтальмит

5. Микробиологического исследования при эндофтальмите

6. Последовательность действий

7.Обеспечение качества микробиологических исследований

8.Определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным лекарственным средствам

9.Особенностью микробиологического исследования отделяемого из глаза

10. Исследуемый материал

11. Микробиологические методы исслодования отделяемого ушей

12. Воспалительного процесса ЛОР-органов

Заключение

Список используемых источников

 Введение

Задача исследовать взаимосвязь между реакцией глазных яблок и их систем, на изображение и текст, установить взаимосвязь между ними.

Ответить на вопрос: возможно ли решить проблему определения формы объектов, искривления текста с помощью анализа данных, имея внешнею информацию о поведении глаз?

Данная проблема весьма интересна, так как при наличии соответствующих взаимосвязей, появляется возможность написать софт, который, к примеру, помогает распознавать текст с неровных поверхностей, использую дополнительно информацию, полученную с глаз.

Адекватным раздражителем слухового анализатора является звук - упругие волны, распространяющиеся в газах, жидкостях и твердых телах и воспринимаемые ухом человека и животных.

В отличие от других раздражителей раздражение слухового анализатора звуком имеет свои закономерности.

Первая из них характеризует слуховой диапазон человеческого уха. Здоровый человек периодические колебания окружающей среды начинает воспринимать как звук, когда число колебаний не менее 16 в секунду, и перестает слышать, когда это число превосходит 20 тыс. в секунду. Этими пределами ограничивается слуховой диапазон человеческого уха. Звуковые колебания частотой менее 16 в секунду относят к инфразвукам, более 20 000 - к ультразвукам. При условиях же костно-тканевого проведения человек способен воспринимать и ультразвуки частотой до 225 тыс. в секунду.

 1. Микробиологическая диагностика инфекции глаз

Микробиологическое обеспечение имеет большое значение для диагностики, профилактики и лечения инфекционной патологии глаз [34, 58]. Оно предназначено для решения следующих задач.

1. Установление инфекционной природы заболевания (этиология процесса).

2. Выявление возбудителя, его родовой и видовой принадлежности (микробиологическая диагностика).

3. Определение чувствительности возбудителя инфекции к антимикробным препаратам.

Микробиологические исследования необходимы также для эпидемиологического и санитарного контроля. Последнее сегодня важно для предупреждения осложнений, связанных с распространением госпитальных штаммов микроорганизмов.

Решение задач микробиологического обеспечения лечебного процесса в офтальмологии возможно только при тесном контакте клинициста и микробиолога.

Задачи клинициста (лечащего врача, хирурга).

1. Определяет адекватное для забора биоматериала время (момент взятия) для последующего посева, исключающее воздействие антимикробного или иного лечения на результат микробиологического исследования.

2. Обеспечивает асептическое взятие биоматериала для исключения или максимального ограничения обсеменения пробы посторонней микрофлорой (с непораженных участков глаза и кожи).

3. Проводит забор материала в количестве, достаточном для микробиологического исследования.

4. Осуществляет в необходимых случаях забор контрольных проб (обычно мазков с непораженных участков конъюнктивы) для посева и последующего сравнения с результатом анализа биоматериала из очага воспаления.

5. Обеспечивает передачу материала для микробиологического исследования в максимально короткие сроки.

6. При необходимости транспортировки или хранения биоматериала производит его посев в транспортные среды или помещает в транспортные системы.

7. Производит посев биоматериала на базовые питательные среды, обеспечивает передачу в микробиологическое подразделение.

8. Обеспечивает микробиологическую службу всей необходимой клинической информацией, что позволяет избирательно проводить бактериологический анализ, вести целенаправленный поиск возбудителя.

2. Микробиологическая служба осуществляет следующие основные функции

1. Производит посев биоматериала на все необходимые для полноценной диагностики питательные среды.

2. Осуществляет в полном объеме комплекс исследований, позволяющий установить родовую и видовую принадлежность микроба, в доступных случаях -- его патогенность.

3. Сравнивает микрофлору опытной и контрольной проб и определяет круг микроорганизмов, которые могут рассматриваться как возбудители инфекционного процесса.

4. Определяет чувствительность микроорганизмов к антимикробным препаратам. С учетом тяжести поражения глаз выбирает и использует наиболее информативный метод определения.

5. В особых клинических ситуациях определяет иные характеристики терапевтического потенциала антимикробных лекарственных средств (бактерицидное действие, сочетанное действие и др.).

6. Систематически (поэтапно) информирует лечащего врача о предварительных результатах микробиологических исследований вплоть до составления окончательного заключения.

7. В необходимых случаях ведет динамическое наблюдение за микрофлорой пораженного глаза и ее чувствительностью к антибиотикам для коррекции антимикробного лечения.

8. На основе систематического мониторинга чувствительности микроорганизмов -- возбудителей патологии глаз к антимикробным препаратам разрабатывает рекомендации для эмпирической антибиотикотерапии в отдельном клиническом подразделении (офтальмологическое отделение, специализированные клиника или стационар).

Значение взаимодействия клинициста и микробиолога для осуществления эффективного и качественного бактериологического исследования во многом связано с особенностями офтальмологической клиники. Забор материала для посева -- соскоб, мазок, аспирация, биопсия -- может осуществлять только клиницист, причем достаточной квалификации. Объем материала, как правило, очень невелик, но для полноценного анализа он должен быть достаточен с учетом посева на несколько питательных сред и приготовления мазков (микроскопия мазков при инфекционном поражении глаз имеет большое диагностическое значение). Вопрос «достаточности» может быть решен только совместно клиницистом и микробиологом.

Перед лечащим врачом стоит ответственная задача -- правильно оценить время взятия биоматериала для посева. Биоматериал не должен содержать антимикробного соединения или его концентрация должна быть сведена к минимальной. Следовательно, перед взятием материала для посева необходимо исключить местное применение лекарственных средств, содержащих антимикробный компонент, по меньшей мере за 6 часов до процедуры. Если клиническая ситуация позволяет, этот период должен быть увеличен до одних суток. Больной может получать антибиотики внутрь или парентерально. В этой ситуации следует последнее введение антибиотика провести таким образом, чтобы в момент взятия субстрата для посева концентрация антибиотика в тканях была минимальной. Для разных антимикробных препаратов этот период различен. Для бета-лактамных антибиотиков (пенициллины, цефалоспорины, карбапенемы, монобактамы) -- не менее 12 часов, для аминогликозидов, тет- рациклинов, макролидов -- до одних суток.

Очень важно минимизировать промежуток времени между забором биоматериала и посевом. Многие облигатно анаэробные бактерии при контакте с атмосферным кислородом гибнут в течение 10-30 минут. Другие, так называемые «требовательные» бактерии, теряют жизнеспособность в течение нескольких часов. В офтальмологической практике этому способствуют скудность посевного материала, его быстрое подсыхание. Мировая практика говорит о целесообразности овладения клиницистами, проводящими забор биоматериала, простейшими микробиологическими приемами, позволяющими сохранить жизнеспособность микроорганизмов. Это необходимо, если микробиолог не участвует в процедуре взятия проб, что в отечественной практике случается достаточно часто. К числу таких приемов относятся забор биоматериала в транспортные системы, посев в транспортные среды и на питательные среды общего назначения (мясо-пептонный агар с кровью, жидкие среды обогащения). Клиницист обязан уметь приготовить мазок нативного биоматериала на предметном стекле для последующей окраски и микроскопии в специализированной лаборатории.

Если в силу особых обстоятельств проба не может быть незамедлительно передана в микробиологическую лабораторию, то, будучи в транспортной системе (транспортной среде), она может храниться в холодильнике при 2-8°С в течение 2 часов и лишь в исключительных случаях -- 8 часов. Более поздний посев, как правило, малоинформативен или, хуже того, способен дать ошибочный результат, дезориентирующий лечащего врача. Посевы на питательные среды общего назначения, сделанные лечащим врачом, передают в микробиологическую лабораторию для инкубации при температуре 30-37 °С; ее можно проводить в любом подразделении, где есть термостат с адекватными температурой и санитарным состоянием.

3. Микробиологическая диагностика инфекционной патологии глаз

Микробиологическая диагностика инфекционной патологии глаз является сложной проблемой в силу многообразия этиологических факторов [13, 45, 58]. Инфекции бывают бактериальной природы, хламидийной, микоплазменной, грибной, вирусной, протозойной. Наиболее часто микробиологу приходится встречаться с бактериальным и грибным процессами, и именно они определяют основные функции и усилия микробиологической службы. В этой связи лаборатория должна иметь полный набор питательных сред, достаточный для выявления всех возможных возбудителей инфекций глаз -- бактерий и грибов.

Перечень наиболее распространенных и часто используемых в отечественной и зарубежной практике питательных сред именно при гнойной патологии различной локализации, в том числе глаз, представлен в приложении 4. Зарубежный опыт имеет ряд отличий, которые важно учитывать при бактериологической диагностике заболеваний глаз. Среды заметно богаче источниками белкового питания, они многокомпонентны (колумбийский агар, сердечномозговой агар и бульон, казеиново-соевый агар и бульон и др.). Важно, что в мясных средах не принято использовать заменители качественного мяса. Особое внимание уделено средам для выделения облигатно анаэробных бактерий. В них учтены высокие ростовые требования этих микроорганизмов к источникам азота, углерода, витаминов, к поддержанию рН и редокс-потенциала в строго определенных рамках. В зарубежных питательных средах большое внимание уделено селективным добавкам, позволяющим сократить время исследования и облегчить дифференциацию бактерий. Большинство названных в таблице питательных сред доступны отечественным микробиологам и выпускаются отечественными производителями.

4. Эндофтальмит

глаз ухо микробиологический лекарственный

При гнойном поражении глаза после оперативного вмешательства (послеоперационный эндофтальмит) наиболее часто выделяют стафилококки, цепочковые кокки (стрептококки, пневмококки), палочки синезеленого гноя, пропионибактерии. При посттравматическом эндофтальмите, помимо золотистого стафилококка и цепочковых кокков, выделяют спорообразующие грамположительные бактерии (B. cereus) и патогенные клостридии, реже кишечные палочки и псевдомонады. При эндофтальмите как осложнении септических процессов (сепсис, тяжелая инфекция иной локализации), особенно у больных с нарушенным иммунитетом, обнаруживают золотистые стафилококки, пневмококки, нейссерии, гемофильные палочки, бациллярные формы. Особо следует обратить внимание на возможную этиологическую роль микобактерий, в том числе быстрорастущих, например M. fortuitum или ее комплекса.

С учетом тяжести заболевания и многообразия микроорганизмов, вызывающих данную патологию, выбор питательных сред должен быть достаточно широким и обеспечивать надежность бактериологического анализа. Схема выбора питательных сред при эндофтальмите представлена на рис .



Рис. 1 Питательные среды для посева гнойного отделяемого при тяжелой патологии глаз

5. Порядок забора проб для микробиологического исследования при эндофтальмите следующий. Проводит офтальмолог

1. Увлажненным тампоном берут контрольные мазки с конъюнктивы. Забор проводят до анестезии. Для каждого глаза используют отдельный тампон.

2. Взятие пробы из пораженного глаза. Проводят забор аспирата внутриглазной жидкости (пункция, парацентез).

3. Если взятые пробы не передают сразу же микробиологу, их помещают в транспортные системы или проводят посев в транспортные среды, или на питательные среды общего назначения, готовят мазки на предметном стекле.

4. Пробы передают в микробиологическую лабораторию или хранят в рефрижераторе при 2-6°С в течение 2 часов. Посевы на культуральные питательные среды передают в микробиологическую лабораторию или помещают в термостат при 30-37 °С (чашки, перевернутые вверх дном).

5. Если объем аспирата недостаточен, непосредственно в шприц, которым сделан забор, можно добавить жидкой питательной среды сходного объема или в два раза большего.

Остальные манипуляции проводит только микробиолог.

Кератит. Поражение роговицы бывает бактериальной, грибной, вирусной и протозойной природы. Наиболее часто возникают кератиты бактериального и грибного происхождения. Основные возбудители: золотистые стафилококки, стрептококки, моракселлы (M. lacunata), пневмококки, палочки синезеленого гноя, серрации, быстрорастущие микобактерии, дрожжеподобные грибы рода Candida, аспергиллы, фузарии и некоторые другие.

6. Последовательность действий

1. Забор контрольных проб с конъюнктивы обоих глаз (см. выше).

2. Тщательно обрабатывают антисептическим веществом кожу вокруг глаза.

3. Стерильным режущим предметом (скальпель, шпатель Kimura) делают соскобы (3-5) в местах ульцерации и гноетечения.

4. Проводят инокуляцию биоматериала в транспортные или культуральные среды, как указано выше. Наносят по одной капле на два предметных стекла и готовят мазки для последующей микроскопии.

5. Транспортировку и хранение осуществляют по приведенным выше рекомендациям.

6. Поскольку в некоторых случаях материала для посева и приготовления мазков бывает недостаточно, его объем можно увеличить, добавив несколько капель жидкой питательной среды.

Слезный аппарат

Наиболее частые возбудители дакриоаденита и дакриоцистита -- стафилококки (обычно S. aureus), пневмококки, стрептококки (в том числе S. pyogenes), гемофильные палочки, палочки сине-зеленого гноя. При наличии соответствующих заболеваний иной локализации поражение может быть туберкулезной и гонококковой природы. Описаны кандидозные поражения (C. albicans').

К возбудителям каналикулита относятся стрептококки, моракселлы (M. la- cunata), пропионибактерии, анаэробные актиномицеты (A. israelii), дрожжеподобные грибы, аспергиллы. Для посева используют гнойное отделяемое. Берут тампоном мазки или собирают экссудат шприцом. При дакриоцистите, чтобы получить гной, слезный мешок пальпируют. При каналикулите для этого сжимают внутреннюю поверхность века.

Для сравнения результатов микробиологического исследования обязательно взятие мазков с конъюнктивы и их посев (контроль).

Рекомендуемые питательные среды: кровяной агар с 5% бараньей крови, шоколадный агар, среда Сабуро, жидкая обогащенная питательная среда для анаэробных бактерий, плотная среда для анаэробов. При наличии анамнестических и клинических данных целесообразно использовать гонококковую среду (шоколадный агар с активирующей добавкой).

При взятии гноя обязательно приготовление мазков для микроскопии. Окрашенные мазки исследуют в максимально короткие сроки для уточнения номенклатуры питательных сред и проведения по возможности адекватной химиотерапии.

7. Обеспечение качества микробиологических исследований

1. Входной контроль качества всех компонентов микробиологического анализа, особо питательных сред, используемых для посева биосубстратов.

2. Тщательное соблюдение требований к транспорту и хранению биопроб.

3. Взятие и посев контрольных проб (обычно мазков с неповрежденной конъюнктивы).

4. Сравнение роста болезнетворных бактерий на различных питательных средах, учет их количественной характеристики.

5. Наблюдение за ростом микроорганизмов в динамике: традиционные возбудители гнойной патологии не менее 72 часов, грибов -- 5-7 суток, микобактерий до 4-5 недель (быстрорастущих -- до 7-10 суток).

6. Соблюдение всех требований к методике микробиологического исследования: посев, выделение, идентификация и тестирование чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (данные методики в этой работе из-за их объемности не рассматриваются).

После бактериологической диагностики второй важнейшей функцией микробиологической службы является определение чувствительности возбудителей инфекционной патологии глаз к антимикробным препаратам. В передовых клинических учреждениях микробиологические лаборатории вышли за рамки диагностических подразделений и стали равноправными участниками лечебного процесса именно в силу их высокой роли в выборе антибиотиков и их дозы для лечения больного.

8. Существуют три базовых метода определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным лекарственным средствам

1) метод серийных разведений;

2) диск-диффузионный метод («метод дисков»);

3) сочетание метода серийных разведений с «методом дисков», так называемый Е-тест.

Диск-диффузионный метод наиболее часто используют в силу его относительной простоты и экономичности. Это фактически -- качественный тест. Информация, которую он обеспечивает, носит ориентировочный характер, чревата ошибками (или по меньшей мере неточностями), в ряде случаев не является доступной. Диск-диффузионный метод не может быть использован в следующих случаях [7, 53].

1. Если культура не образует на поверхности агаризованной питательной среды равномерный, необходимой плотности микробный газон (например, многие слизеобразующие бациллы, грибы, микобактерии).

2. Если для образования микробного газона требуется более суток. Только в отдельных случаях (например, при определении чувствительности грибов к противогрибным препаратам) допустимо зонообразование в течение 48 часов.

3. Если микроорганизм требует особых условий инкубации, которые могут повлиять на размер и время образования зоны подавления роста (например, облигатно анаэробные бактерии).

4. Если микроб требует специальных питательных сред (облигатные анаэробы, микобактерии).

5. Если образуемая зона подавления роста не адекватна истинной чувствительности микроорганизма к антимикробному препарату (например, чувствительность «метициллинрезистентных» стафилококков к макролидам, аминогликозидам, тетрациклинам и др.).

Кроме того, при кажущейся простоте «метод дисков» чувствителен к качеству питательной среды и дисков, к точности соблюдения технологии постановки исследования. Возможность получения ошибочных результатов в этих случаях велика.

Метод серийных разведений предпочтителен прежде всего тем, что дает количественную характеристику чувствительности. Он более точен, поскольку первичен по отношению к «методу дисков» (размеры зон подавления роста это отражение МПК, минимальных подавляющих концентраций, которые определяют методом серийных разведений). Результаты, получаемые методом серийных разведений, позволяют корригировать дозу антимикробного препарата. Они в ряде ситуаций дают возможность расширить круг антибиотиков, целесообразных для лечения больного. Однако метод серийных разведений более трудоемок и менее экономичен, чем «метод дисков». Показаниями к использованию метода серийных разведений являются следующие [7, 46].

1. Тяжелые инфекции глаз, требующие наиболее взвешенного выбора антимикробного препарата и его дозы.

2. Необходимость получения количественной информации о чувствительности микроба к антибиотику (МПК). Особо высокую ценность этот показатель имеет при параллельном установлении фармакокинетики используемого антимикробного препарата.

3. Все случаи, когда диск-диффузионный метод не информативен (см. выше).

4. Потребность в референтных исследованиях. Речь идет не только о контроле качества исследования и его компонентов. Существуют клинические ситуации, когда установление устойчивости возбудителя «методом дисков» исключает применение наиболее эффективной группы антибиотических веществ. В этом случае данные, полученные методом серийных разведений, могут существенно повлиять на перспективу применения «неэффективного» препарата.

Метод серийных разведений в микробиологическом обеспечении лечения офтальмологических больных заслуживает более широкого применения. Это же относится и к умению использовать полученные данные в практике.

Техника определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам детально приведена в соответствующих методических публикациях [7, 46, 53]. Повторять их содержание нецелесообразно. Необходимо, однако, обратить внимание микробиологов на некоторые детали, особенно с учетом полиэтиологического характера офтальмологической патологии и отечественной практики.

1. Определять чувствительность к антибиотикам можно только при работе с чистой культурой. Все рекомендации использовать «смешанную культуру», «ассоциативный штамм» способны привести к серьезным ошибкам, лишают исследование важнейшего основания -- строгой стандартизации.

2. Чувствительность микроорганизмов к антимикробным препаратам определяется только на специальных питательных средах, т. е. с использованием тех из них, которые были применены при разработке критериев чувствительности. Для диск-диффузионного метода -- это среда АГВ и агар Мюллера--Хинтон, для метода серийных разведений -- агар и бульон Мюллера--Хинтон. Есть несколько исключений, которые следует учитывать при определении чувствительности возбудителей инфекционных заболеваний глаз: чувствительность гонококков «методом дисков» определяют на гонококковом агаре, стрептококков (включая S.pneumoniae) -- на агаре Мюллера--Хинтон с добавлением 5% бараньей крови, гемофильной палочки -- на НТМ-агаре (вариант шоколадного агара). Свои особенности имеют питательные среды при определении чувствительности этих микроорганизмов методом серийных разведений.

3. Все питательные среды, используемые при определении чувствительности микроорганизмов к антибиотикам, независимо от производителя и наличия паспортных данных должны проходить входной лабораторный контроль с использованием референс-штаммов (см. далее).

4. «Индикаторные» диски, т. е. диски с антибиотиками, можно использовать только при условии их выпуска по утвержденной государством технологии (при наличии паспорта с указанием номера ТУ -- технических условий).

5. Диски чувствительны к воздействию влаги, нагревания, солнечных лучей. Их следует хранить в рефрижераторе при температуре не выше 8 °С, тщательно укупоренными. Не подвергать воздействию прямых солнечных лучей, не пользоваться влажным пинцетом, не держать флакон с дисками на столе открытым. В то же время перед использованием извлеченный из холодильника флакон с дисками следует выдержать при комнатной температуре не менее 1,5-2 часов, соблюдая указанные выше ограничения.

6. Приведенный в методических пособиях порядок проведения исследования (технология исследования) должен неукоснительно соблюдаться. Отклонения от требований к приготовлению и использованию инокулюма, приготовлению чашек с питательной средой, к подготовке и использованию дисков, к инкубации приводят к серьезным ошибкам.

7. Не определять чувствительность к антибиотикам тех микроорганизмов, для которых не разработаны общепризнанные критерии чувствительности.

9. Особенностью микробиологического исследования отделяемого из глаза являются прежде всего

Малое количество материала, трудности при его заборе, а также наличие, так называемой, «своей» инфекции для каждой структуры глаза, которая может оставить заметный след на ней. Наиболее частыми инфекциями, характерными для глаз, являются воспаление век или блефарит, воспаление слизистой оболочки или конъюнктивит, воспаление роговой оболочки или кератит, воспаление внутренних оболочек глазного яблока или эндофтальмит. Веки глаз и слизистой оболочка покрыты нормальной микрофлорой кожи и желез, к ней относятся коагулазонегативные стафилококки (KONS), стрептококки группы Viridans, коринобактерии, пропионбактерии.

Диагноз	Наиболее частые возбудители	Комментарии
Блефарит	Коагулонегативные стафи- лококки (КОНС) Staphylococcus aureus Грам-негативные палочки	* Лечение эмпирическое, микро- биологический посев обычно не делается * Причиной может быть дисфункция сальных желез, так называемый «сухой глаз»
Бактериальный конъюнктивит Вирусный конъюнктивит	Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae Moraxella spp. Neisseria gonorrhoeae Aденовирус Энтеровирус	* У новорожденных важно опре- делять Chlamydia trachomatis и Neisseria gonorrhoeae - методом PCR * Конъюнктивит может быть причиной аллергии или раздражения
Бактериальный кератит Вирусный кератит Грибковый кератит	Pseudomonas spp. Staphylococcus aureus KOНС Streptococcus pneumoniae Moraxella spp. Viridans grupi streptokokid Mycobacterium spp. Nocardia spp. Herpes simplex viirus Herpes zoster viirus Aspergillus spp. Fusarium spp. Alternaria spp. Penicillum spp.	* При хронических инфекциях следует исключить Nocardia spp., Mycobacterium spp. и грибы * Инфекция Pseudomonas spp. могла возникнуть по причине перфорации роговой оболочки * <48 часов * При язвах роговицы и невралгии тройничного нерва можно предположить вирусную инфекцию * Предположить инфекцию * Acanthamoeba spp. если в глаз попали загрязненные частицы воды, почвы, растений или деревьев * Кератит также может возникать после химического ожога, операции или аллергии * В 50% из всех случаев микро-биологический посев остается негативным
Паразитарный кератит Кератит при использовании контактных линз	Acanthamoeba spp. Acanthamoeba spp. Serratia spp. Bacillus spp.
Бактериальный эндоофтальмит Вирусный эндоофтальмит Грибковый эндоофтальмит Паразитарный эндоофтальмит	Staphylococcus aureus/MRSA Стрептококки группы Viridans Bacillus spp. Pseudomonas spp. Грам-негативные палочки Propionibacterium acnes Анаэробы Цитомегаловирус Коревой вирус Candida spp. Aspergillus spp. Cryptococcus spp. Toxoplasma gondii	* Эндофтальмит может возникать после бактериемии, гематогенным путем или после травмы * Для посева подходит внутриглазная жидкость или ткань

Показания: Подозрение на бактериальную глазную инфекцию или инфекцию с неясной этиологией.

10. Исследуемый материал

Глазной секрет, соскоб с конъюнктивы, слезная жидкость

Метод анализа: Микроскопия нативного материала, аэробный посев на среды, идентификация возбудителя болезни, определение лекарственной чувствительности.

Интерпретация результата:

При бактериальной инфекции в препарате возникают, в основном, полиморфонуклеарные лейкоциты, при заболеваниях аллергического происхождения - эозинофилы и при вирусных инфекциях как моно-, так и лимфоциты. Наиболее частыми возбудителями бактериальных воспалений глаз являются Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae и Moraxella spp.

У новорожденных возбудителями конъюнктивита могут быть Chlamydia trachomatis и Neisseria gonorrhoeae. Pseudomonas.

11. Микробиологические методы исследования отделяемого ушей

Гнойно-воспалительный процесс может быть локализован в наружном слуховом проходе (фурункул, диффузные поражения), на барабанной перепонке (мирингит), в среднем ухе (отит), а также в сосцевидном отростке (мастоидит). Исследованию подлежит отделяемое из наружного уха, аспират из среднего уха либо материал, полученный из внутреннего уха во время операции. Анализ проводится до начала антибактериальной терапии. Точная идентификация возбудителя и определение его чувствительности антибиотику позволяет максимально быстро ликвидировать заболевание и предотвратить переход в хроническую форму.

В норме микрофлора содержит эпидермальный стафилококк (S. еpidermidis до 10 2 КОЕ/мл).

К патогенным микроорганизмам, выявляемым в данном анализе, относятся: энтеробактерии (Enterobacteriaceae), протей (P. аeruginosa), золотистый стафилококк (S. аureus), стрептококки (S. pyogenes, S. pneumoniae, S. viridans), непатогенные дифтероиды (Corynebacterium sp.) и грибы рода кандида.

В среднем и внутреннем ухе микрофлора отсутствует. При остром отите возбудителями могут быть Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans, Streptococcus pneumoniae, а также Haemophilus influenzae, E. coli, C. diphtheriae, Bacteroides.

При хронически протекающей инфекции чаще обнаруживают ассоциации микроорганизмов рода Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Escherichia, Pseudomonas, а также Mycobacterium tuberculosis, Actinomyces и плесневые грибы Aspergillus, Mucor.

Взятие исследуемого материала При поражении наружного уха проводят обработку кожи антисептиком с последующим промыванием физиологическим раствором, затем отделяемое из очага собирают на стерильный ватный тампон (во время операции или перевязки).

Взятие мазка из наружного слухового прохода Для взятия мазка следует пользоваться тонким тампоном, на конец стержня которого накручено незначительное количество ваты так, чтобы можно было под контролем зрения легко ввести в наружный слуховой проход. В момент взятия мазка тампон вынимают из стерильной пробирки и берут в правую руку, левой рукой оттягивают ушную раковину обследуемого назад и кверху, а конец тампона с накрученной на нем ватой осторожно заводят в наружный слуховой проход приблизительно на глубину 1-2 см.

При поражениях среднего и внутреннего уха исследуют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранный в стерильную посуду. Материал доставляется на исследование не позднее 2-х часов. В транспортной среде материал может храниться до 24 часов при комнатной температуре. Микроскопия исследуемого материала Бактериоскопия нативного материала Проводят с целью обнаружения друз и элементов гриба при подозрении на микоз методом «раздавленной капли». Исследуемый материал помещают на предметное стекло в каплю физиологического раствора и покровным стеклом осторожно накрывают так, чтобы жидкость была без пузырьков воздуха.

Правильно сделанная капля заполняет все пространство между покровным и предметным стеклом, но при этом жидкость не выступает за края покровного стекла. Микроскопию проводят при опущенном конденсоре сначала при малом увеличении (объектив х 8), затем при большом (объектив х 40).

Бактериоскопия окрашенного материала Во всех случаях исследования окрашивание мазков проводят по Граму или метиленовым синим. При подозрении на туберкулез - по методу Циль-Нильсена, на актиномикоз - по Романовскому-Гимзе. При положительных результатах сообщается лечащему врачу. Дальнейший ход микробиологического исследования определяется видом предполагаемого возбудителя.

Посев исследуемого материала Питательные среды Внутреннее ухо:

? кровяной агар;

? шоколадный агар;

? среда Эндо (среда МакКонки);

? ЖСА, 0,1% полужидкий сывороточный агар или тиогликолевая среда;

? среда Сабуро при подозрении на грибы;

? анаэробный агар при подозрении на анаэробную инфекцию. Наружное ухо:

? кровяной агар;

? шоколадный агар;

? агар Эндо (Мак Конки агар);

? ЖСА;

? при подозрении на грибы - агар Сабуро.

Культивирование

? на кровяном агаре при 35-37°С, 5-10% СО2, в течение 24-48 ч;

? на шоколадном агаре при 35-37°С, 5-10% СО2, в течение 24-48 ч;

? Эндо агар (Мак-Конки агар) - при 35-37Со в аэробных условиях, в течение 24 ч;

? ЖСА - при 35-37°С в аэробных условиях, в течение 24- 48 ч;

? 0,1% полужидкий сывороточный агар, ТСБ, тиогликолевая среда - при 35-37°С в аэробных условиях в течение 48 ч;

? Сабуро агар - при 25-30°С в аэробных условиях в течение 72 ч;

? анаэробный агар - при 35-37°С в анаэробных условиях в течение 7 дней.

Чашки с биологическим материалом просматривают ежедневно. При отсутствии роста колоний на твердых средах делают высев из сред «обогащения» на кровяной агар и шоколадный агар. После посева на твердые питательные среды тампон помещают в 0,1% полужидкий сывороточный агар или ТСБ, или тиогликолевую среду (рис. 5). Рисунок 5 - Схема посева биологического материала, собранного с помощью микробиологического тампона При появлении роста на плотных средах проводят учет колоний различной морфологии, учитывая их рост на секторах: ? рост колоний микроорганизмов на только I секторескудный рост; ? на I - II секторах - умеренный рост; ? на III - IV секторах - массивное количество.

При наличии роста в жидких средах производят высев на кровяной агар. Проводят видовую идентификацию микроорганизмов. Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на всех питательных средах в течение 3-5 суток (при исследовании на анаэробы на 8-е сутки). Оценка результатов Выделение бактерий только на средах обогащения свидетельствует о высокой вероятности контаминации материала на любом из диагностических этапов (сбор, хранение, транспортировка и посев на питательные среды). Необходимо иметь в виду, что в процессе лечения антибактериальными средствами нередко происходит замена бактериальной флоры на грибковую.

Правила взятия биоматериала для определения микрофлорыпри острых и хронических заболеваниях лор-органов методом ПЦР Метод применяется для определения этиологии

12. Воспалительного процесса ЛОР-органов

? при острых и хронических синуситах;

? при острых и хронических тонзиллитах;

? при острых и хронических фарингитах;

? при острых и хронических отитах.

При хронических тонзиллитах и острых или хронических фарингитах для выяснения этиологии воспалительного процесса осуществляли взятие эпителиальных клеток из лимфоидной ткани миндалин и задней стенки глотки. Соскоб биологического материала производили после предварительной анестезии 2% или 10% раствором лидокаина аппликационно. Соскоб осуществляют кюреткой либо щипцами.

При острых отитах диагностикумом являлись экссудат или транссудат, получаемые при парацентезе. При хронических средних отитах материалом для диагностики могут использоваться удаленные ткани - полипы и грануляции. Правила хранения и доставки биологического материала Пробирки с биологическим материалом необходимо доставить в течение 2 ч в ПЦР-лабораторию. Полученные биологические пробы (соскобы эпителиальных клеток) могут храниться при температуре +4°С в течение 1-2 суток. При необходимости более длительного хранения соскобы замораживают при -20°С и хранят не более 2 недель. Не рекомендуется допускать повторного замораживания биологического материала. Транспортировку проб осуществляют в термосах или термоконтейнерах. Каждый образец для исключения взаимной контаминации хранят в отдельном полиэтиленовом пакете.

Заключение

Поставленная задача выполнена, все рассуждения о “самых популярных местах на изображение” к ней не относятся, хотя это существенно реализовано ( алгоритм 1(полностью) и 2(без разумного выбора R)). Считаю, что развиваться в данной теме далее не представляется целесообразным, так как на это требует много средств, как в материальном плане ( оборудование, специалисты, которые могут провести необходимые исследования), так и в научном (имеется ввиду, что в данной темы нужно владеть знаниями о функциональном строении человеческого мозга, процессах происходящих в нём). Сам процесс точного решения задачи «размер зрачка - объект» имеет очень много допущений. Для достижения каких-то ощутимых и весомых результатов, по моему мнению, понадобятся годы, так как проблема распознавания формы по реакции глаза или расчёта расстояния существенно зависит от разнообразных факторов. Все решения с “самыми популярными местами на изображение” приведены, чтобы показать, что из этих данных наивным образом, всё-таки, можно вынести что-то интересное.

 Список используемых источников

1. Сакс Д. С. «Микробы хорошие и плохие. Наше здоровье и выживание в мире бактерий» /Издательский дом: ACT: CORPUS/ 2015. -345 c.

2. Сбойчаков В. Б. «Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований» / Издательство: СпецЛит / - 2017 - 608 с.

3. http://www.machinelearning.ru/wiki/images/2/28/Voron-ML-Clustering-slides.pdf

4. Коротяев, А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология - М.: Спецлит, 2014. - 760 с.

5. Быкова А.С., Воробьёв А.А. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии - М.: Медицинское информационное агентство, 2013. - 278 с.

6. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология - М.: Медицинское информационное агентство, 2016. - 52 с.

7. http://theory.stanford.edu/~sergei/slides/BATS-Means.pdf

8. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни - М.: СпецЛит, 2016. - 231 с.

9. http://habrahabr.ru/

10. . https:// web.stanford.edu/class/cs345a/slides/12-clustering.pdf

11. Ярилин А.А. Иммунология: учебник /Издательство: ГЭОТАР-Медиа/ 2010. - 279 с.

Размещено на Allbest.ru

...