Монтмориллонит содержащий сорбент и его антибактериальные свойства

Размещено на http://www.allbest.ru/

Монтмориллонит содержащий сорбент и его антибактериальные свойства

Высокая стоимость лекарственных средств, иногда быстро развивающаяся резистентность возбудителей к антибактериальным соединениям, иммунодепрессивные свойства антибактериальных препаратов, нарушения микроэкологии и возрастание этиологической роли условно-патогенных микроорганизмов под влиянием терапевтических средств - побуждают исследователей к поиску новых путей оптимизации лечебного процесса [1-3].

Для решения этих проблем наиболее эффективным методом является применение натуральных монтмориллонит содержащих энтеросорбентов в сочетании с химиотерапевтическими соединениями, которые безопасны для организма. Сорбенты осуществляют местную детоксикацию, обладают антиадгезивным действие по отношению к патогенной микрофлоре и, тем самым, сокращают сроки лечения больных животных [2-4]. Энтеросорбенты эффективно могут применяться как для лечения, так и для профилактики инфекционных желудочно-кишечных заболеваний.

Адсорбционная способность монтмориллонитовых глин обусловлена их слоистой структурой. Такого рода адсорбенты обычно имеют большую удельную поверхность - до нескольких сотен м2/г.

Лечебное действие монтмориллонит содержащих препаратов объясняется их сорбционно-адгезивными и ионоселективными свойствами, а также насыщенностью разнообразными химическими элементами, часть из которых находится в биологически доступной форме. Поэтому такого рода энтеросорбенты при нарушении функции пищеварения в просвете кишечника связывают токсины, микробные клетки и различные продукты распада, которые далее выводятся из организма.

В связи с вышесказанным представляет интерес испытание литиевой формы сорбента, разработанной группой исследователей БелГУ под руководством профессора А.И. Везенцева.

Наноструктурный энтеросорбент с улучшенной адсорбционной способностью был получен в процессе комплексного переструктурирования монтмориллонитовой глины месторождения Белгородской области, включающего: обогащение, кислотную обработку и внедрение между слоями глины ионов лития. Из-за низкого содержания лития сорбент не токсичен для животных, не обладает кумулятивными свойствами: эмбриотоксичность, тератогенность, раздражающее действие на слизистые оболочки экспериментально не установлены.

Цель данного исследования: изучение возможности наноструктурной литиевой формы сорбента подавлять способность эшерихий и сальмонелл проявлять свои болезнетворные свойства.

Материал и методы исследований. С целью выяснения взаимодействия литиевой формы монтмориллонитовой глины с поверхностью фимбрий и клеточной стенки эшерихий суспензию экспериментального препарата в концентрации 50 мг/мл окрашивали родамином Б. Далее в этот раствор, содержащий 0,01 % родамина Б, вносили взвесь кишечной палочки из расчёта 0,5.108 КОЕ/мл. После суспендирования и 20-минутного отстаивания надосадочную жидкость микроскопировали с помощью конфокального лазерного сканирующего микроскопа Nikon Digital Eclipse Ti- E (длина волны - 488 нм, объектив 60х). Для сравнения в растворе родамина Б окрашивали культуру кишечной палочки.

Определение результативного действия литиевой формы сорбента сдерживать способность сальмонелл оказывать свои вирулентные свойства проводили на трёх группах белых мышей (по 10 голов в каждой). Для заражения мышей на стерильном изотоническом растворе натрия хлорида изготавливали необходимые взвеси. Первой группе приготовили стерильную суспензию сорбента в концентрации 50 мг/мл, второй - сорбента и Salmonella enteritidis в соответствующих концентрациях 50 мг/мл и 0,5.108 КОЕ/мл (колониеобразующих единиц), в третьей - только взвесь сальмонелл в концентрации 0,5.108 КОЕ/мл. После тщательного суспендирования и 20-минутной экспозиции каждую суспензию фильтровали через стерильный бумажный фильтр «синяя лента». Далее мышам первой, второй и третьей групп интраперитониально инокулировали по 0,5 мл надлежащих фильтратов.

Результаты исследований и их обсуждение. Во время микроскопирования взвеси кишечной палочки с активированной глиной чётко просматривалось яркое свечение вокруг образовавшихся конгломератов из бактерий и сорбата, являющихся результатом адсорбции на клеточной стенке эшерихий высокодисперсной активированной глины, окрашенной родамином Б (рис.3). При микроскопии исследуемой активированной глины, суспендированной в 0,01 % растворе родамина Б (рис. 1), отмечалось незначительное свечение твердых частичек различных размеров. Еле улавливаемое свечение наблюдалось вокруг клеточных стенок Escherichia coli, окрашенных 0,01 % раствором родамина Б (рис.2).

сорбент организм химиотерапевтический

В опыте по выяснение эффективности литиевой формы сорбента подавлять способность сальмонелл проявлять свои болезнетворные свойства за период 10-дневного клинического наблюдения, после внутрибрюшинного введения белым мышам первой группы профильтрованной суспензии исследуемого сорбента, падежа, угнетённого состояния и других отклонений в состоянии их здоровья не отмечалось (табл.1.)

В связи с этим нельзя не заметить тот факт, что введение мышам в брюшную полость профильтрованной суспензии экспериментального препарата не способствовало раздражению и воспалению брюшины и серозных оболочек. По истечении 10 суток, во время вскрытия мышей данной группы, в брюшной полости отсутствовали признаки воспаления.

Во второй и третьей группах наблюдалась гибель мышей. Тем не менее, суммарная продолжительность жизни мышей второй группы в 2,5 раза была выше, чем в третьей. Приведенные в таблице результаты исследований достоверно свидетельствуют о снижении клинического проявления сальмонеллёза среди белых мышей второй группы. Отмеченное снижение заболеваемости обусловливается способностью экспериментального препарата препятствовать адгезии возбудителя сальмонеллёза на эпителиальных клетках брюшной полости мышей, что в свою очередь сдерживает их дальнейшее размножение.

У павших мышей во время их вскрытия обнаруживались патологоанатомические изменения характерные для сальмонеллёза. Произведённые посевы на среду эндо и висмут-сульфат агар из селезёнки павших мышей во всех случаях подтверждали сальмонеллёз.

1. Установлено, что разработанная литиевая форма монтмориллонитовой глины в высокодисперсном состоянии легко адсорбируется на поверхности фимбрий и клеточной стенке эшерихий, образуя конгломерат - «сорбент-микроорганизм».

Таблица 1. Влияние литиевой формы сорбента на способность Salmonella enteritidis вызывать заболевание и гибель белых мышей

2. Установлено, что разработанная литиевая форма монтмориллонитовой глины не вызывает воспаления и раздражения брюшины и серозных оболочек у белых мышей. В высокодисперсном состоянии сорбент легко адсорбируется на поверхности фимбрий и клеточной стенке сальмонелл, образуя конгломерат - «сорбент-микроорганизм», препятствующий её адгезии на эпителиальных клетках брюшины мышей, что в свою очередь сдерживает их дальнейшее размножение.

3. Создание препаратов антиадгезивного действия является одним из наиболее перспективных направлений при разработке эффективных методов лечения и профилактики инфекционных заболеваний. Антиадгезивное действие не синонимично понятию бактерицидность и нарушать адгезию микроорганизмов могут соединения, не обладающие антибактериальным действием в низких концентрациях. Примером таких веществ могут служить глины на основе монтмориллонита.

Литература

сорбент организм химиотерапевтический

1. Сидоренко С.В., Резван С.П., Макарова А.Н. Механизмы устойчивости к хинолонам и современный уровень чувствительности клинически значимых микроорганизмов к офлоксацину // Антибиотики и химиотерапия. - 1996. - №41 (9). - С. 33 - 38.

2. Любарский М.С., Летягин А.Ю., Габитов В.Х. Сочетанная лимфотропная и сорбционная терапия гнойных ран.- Бишкек-Новосибирск, 1995.

3. Семченко Л.Ю., Полуэктов В.Л., Степанов С.С. и др. Обоснование местного применения сорбционно-детоксикационной терапии при послеоперационных гнойно-септических осложнениях у больных колоректальным раком.// Бюллетень СО РАМН. - 2002. - №2. - С.101 - 104.

4. Гроссер А.В., Матело С.К., Купец Т.В. Антиадгезивное действие средств гигиены как способ профилактики стоматологических заболеваний. (Электронный вариант http://www.gradusnik.ru/rus/doctor/stomat/stomgig/).

Размещено на Allbest.ru