Ремоделювання яєчників щурів за умов уведення розчинів важких металів

Размещено на http://www.allbest.ru/

Ремоделювання яєчників щурів за умов уведення розчинів важких металів

Ірина Колосова

Вплив низьких доз ацетату свинцю призводив до зменшення кількості примордіальних фолікулів при збільшенні атретичних, передчасного регресу жовтих тіл. За поєднаного введення ацетату свинцю й цитрату срібла кількісний склад основних компонентів яєчників - фолікулів і жовтих тіл - наближено до показників норми.

Ключові слова: ацетат свинцю, репродуктивна система, яєчники, фолікули, жовті тіла.

Колосова Ирина. Ремоделирование яичников крыс при введении растворов тяжелых металлов. Экспериментально исследовали изменения основных структурных элементов яичников в условиях изолированного введения низких доз ацетата свинца и его комбинации с цитратом серебра, полученного с использованием аквананотехнологий. Крыс разделено на три группы: экспериментальная № 1 - животные, которым вводили раствор ацетата свинца в дозе 0,05 мг / кг, n = 8; экспериментальная № 2 - животные, которым вводили раствор ацетата свинца в дозе 0,05 мг / кг с раствором цитрата серебра в дозе 2 мкг / кг, n = 8; группа № 3 - контрольная, животные, получавшие дистиллированную воду, n = 8. В каждой группе беременные самки разделены в зависимости от стадии, на которой планировалось извлекать плоды и яичники для дальнейших исследований, на три подгруппы: самки со сроком беременности 12, 16 и 20 суток.

Анализ результатов показал, что изолированное введение ацетата свинца приводит к уменьшению количества примордиальных фолликулов при увеличении атретических, преждевременному регрессу желтых тел. В результате комбинированного воздействия раствора ацетата свинца с цитратом серебра наблюдалось увеличение количества желтых тел и примордиальных фолликулов при уменьшении атретических, что свидетельствует о снижении негативного действия ацетата свинца на морфофункциональное состояние яичников крыс в эксперименте.

Ключевые слова: ацетат свинца, репродуктивная система, яичники, фолликулы, желтые тела.

Kolosova Iryna. Remodeling of the Ovaries of the Rats by the Infusion of Heavy Metals. Experimentally we investigated the changes of the main structural elements of the ovaries in conditions of isolated administration of low doses of lead acetate and combined with silver citrate prepared using aquananotechnology. Rats were divided into three groups: an experimental group №1 - animals that received lead acetate at a dose of 0.05 mg / kg, n = 8; experimental group № 2 -animals that received lead acetate at a dose of 0.05 mg / kg with a solution of silver citrate in a dose of 2 mcg / kg, n = 8; group № 3 - control, animals that received distilled water, n = 8 each group, pregnant females are divided depending on the stage on which the planned and ovaries fruit extract for further research into 3 groups: females with gestation 12, 16 and 20 days.

Analysis of the results showed that the introduction of insulated lead acetate lead to a decrease in the number of primordial follicles by increasing atresial, premature regression of corpora lutea. As result of the combined effects of lead acetate solution to the silver citrate were observed increase in the number of corpora lutea and primordial follicles with decreasing atresial that testifies to decrease the negative effect of lead acetate on morphological and functional condition of the ovaries of rats in the experiment.

Key words: lead acetate, reproductive system, ovaries, follicles, corpora lutea.

Це дослідження - фрагмент міжкафедральної планової наукової теми Державного закладу «Дніпропетровська медична академія» «Розвиток та морфофункціональний стан органів і тканин експериментальних тварин та людини в нормі, в онтогенезі, під впливом зовнішніх чинників» (номер державної реєстрації - 011Ш012193).

Постановка наукової проблеми та її значення. Важкі метали (ВМ) належать до поширених токсичних забруднювальних речовин, вони широко застосовуються в різноманітних промислових виробництвах, та, попри очисні заходи, їх сполуки проникають в атмосферу, воду й ґрунт. Свинець, кадмій, ртуть входять у трійку ВМ, що становлять найбільшу небезпеку для людини та навколишнього середовища [1; 2, 1-2; 5, 5-10; 12, 14, 16; 17, 425-427]. На жаль, токсичний вплив чинників малої інтенсивності на репродуктивну систему з урахуванням їх біологічного антагонізму з мікроелементами і в природних, і в експериментальних дослідженнях вивчено недостатньо. свинець метал медицина срібло

Аналіз досліджень цієї проблеми. Експериментальними дослідженнями доведено, що свинець уражає нервову систему, кістковий мозок і судини, генетичний апарат клітини, впливає на синтез білка й проявляє гонадотоксичну та ембріотоксичну дію [1, 71-72; 2, 1-2; 3, 126-127; 6, 45; 7, 25-26; 8, 6; 9; 10]. Свинець здатний проникати через плацентарний бар'єр і викликати порушення розвитку плода [7, 26; 8, 7; 13, 65-66; 15], викидні, мертвонародження, передчасні пологи [15]. Актуальний аспект сучасних наукових розробок - також пошук нових біоантогоністів сполукам свинцю. Учені світу займаються створенням нових матеріалів із наночастинок таких металів, як срібло, мідь, кремній, золото, залізо, магній, цинк, титан й ін. Особливий інтерес викликають розробки препаратів із наносрібла, які згубно діють на хвороботворні мікроорганізми та патогенну флору, є одними з перспективних дезінфікуючих засобів [4, 73; 11, 3-5; 16, 210-212].

Тому проведені дослідження спрямовано на пошук сполук, які здатні зменшувати або нейтралізувати негативний вплив ацетату свинцю на органи репродуктивної системи та розвиток плода.

Мета й завдання статті - вивчення змін гістологічної будови яєчників самиць щурів на досліджуваних термінах гестації за умов ізольованого введення ацетату свинцю і його комбінацій із цитратами срібла.

Виклад основного матеріалу й обґрунтування отриманих результатів дослідження. Вивчення морфофункціональних змін яєчників за умов низьких доз ацетату свинцю проводили на 72-х вагітних білих статевозрілих самицях щурів лінії. Дослідження на тваринах виконували відповідно до «Загальних етичних принципів експериментів на тваринах» (Київ, 2001), які узгоджуються з Європейською конвенцією про захист експериментальних тварин (Страсбург, 1985). В експериментальних моделях використовували розчини ацетату свинцю та цитрату срібла, отриманих за аквананотехнологією (Науково-дослідний інститут нанобіотехнологій та ресурсозбереження України, м. Київ).

Щурів розділено на три групи: дослідну №1 - тварини, яким уводили розчин ацетату свинцю в дозі 0,05 мг/кг, п = 8; дослідну групу № 2 - уводили розчин ацетату свинцю в дозі 0,05 мг/кг із розчином цитрату срібла у дозі 2 мкг/кг, п = 8; група № 3 - контрольна, тварини які отримували дистильовану воду, п = 8. У кожній із груп вагітних самок поділено залежно від стадії, на якій планували вилучати плоди та яєчники для подальших досліджень, на три підгрупи: самки з терміном вагітності 12, 16 і 20 діб.

Самиць щурів спарювали за стандартною схемою. Із моменту виявлення сперматозоїдів у вагінальних мазках рахували перший день вагітності. Згідно із загальноприйнятими інструкціями проведення експериментальних робіт, розчин ацетату свинцю та цитратів металів вагітним самицям уводили через зонд один раз на добу в один і той самий час, у І групі з 1-го по 11-й день, у ІІ - із 1-го по 15-й і в ІІІ - із 1-го по 19-й день гестації. У період проведення експерименту спостерігали загальний стан, поведінку вагітних самиць, реєстрували динаміку маси тіла. На 12-й, 16-й та 20-й день вагітності проводили оперативний забій.

Під час розтину вагітних самок щурів виділяли яєчники й роги матки з ембріонами та плацентами, виводили з експерименту способом передозування ефірного наркозу.

Гістологічним дослідженням яєчників установлено, що структурна організація органа дослідних груп практично не відрізняється від контролю: незалежно від досліджуваних термінів гестації, на поперечному зрізі у всіх гонадах чітко видно білкову оболонку, кіркову й мозкову речовини, функціональні утворення (фолікули на різних стадіях розвитку та жовті тіла) і кровоносні судини (рис.1).

Зовні яєчник укритий переважно одношаровим кубічним епітелієм, на апікальній поверхні якого візуалізувалися мікроворсинки з ділянками призматичного та плоского епітелію. Під поверхневим епітелієм розміщувалася білкова оболонка, що мала будову щільної сполучної тканини, у якій поміж видовжених фібробластоподібних клітин є густа сітка колагенових волокон.

Кіркову речовину яєчників контрольної й дослідних груп представлено сполучнотканинною основою (стромою), у якій містилися фолікули різного ступеня зрілості, що переважно підлягали фізіологічній атрезії, та жовті тіла. Під білковою оболонкою в кірковій речовині групами або поодиноко розміщувалися примордіальні фолікули, до їх складу входив невеликих розмірів ооцит, оточений одним шаром фолікулярних клітин (рис.1).

Кількість примордіальних фолікулів у дослідній групі №1 ізольованого введення ацетату свинцю була значно меншою, ніж у групі контролю, на всіх стадіях гестації. Так, у середньому на 12-ту добу - (-23,5 % (р<0,01)), на 16-ту - (-26,1 % (р<0,05)), на 20-ту - (-23,3 % (р>0,05)). У дослідній групі № 2 комбінованої дії ацетату свинцю з цитратом срібла кількість примордіальних фолікулів була більшою, порівняно з контрольною групою: 12-та доба гестації -- (+7,0 % (р>0,05)), 16-та - (+3,0 % (р>0,05)), 20-та - (+4,1 % (р>0,05)), так і відносно групи ізольованого введення ацетату свинцю: 12-та доба гестації - (+39,8 % (р<0,01)), 16-та - (+39,4 % (р<0,05)), 20-та - (+35,7 % (р<0,05)) (табл.1).

Рис. 1. Фрагмент яєчника щура на 12-ту добу вагітності дослідної групи №1 ізольованого введення ацетату свинцю: 1 - жовті тіла овальної форми, примордіальний фолікул (стрілка), 2 - пухирчастий яєчниковий фолікул, 3 - судини. Забарвлення гематоксиліном й еозином. Зб. х 100. Масштабний відрізок - 80 мкм

Таблиця 1 Показники структурних компонентів яєчників щурів контрольноїта дослідних груп (М ± т, п=8)