Психоэмоциональные и вазомоторные реакции при экспериментальной овариоэктомии и их коррекция фитоэстрогенами

Размещено на http://www.allbest.ru/

Психоэмоциональные и вазомоторные реакции при экспериментальной овариоэктомии и их коррекция фитоэстрогенами

Анищенко А.М., Алиев О.И.

Плотникова Т.М.

¹ ФГБУ «НИИ фармакологии» СО РАМН

² ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава РФ

Изучено влияние экстракта семян льна (40 мг/кг, ежедневно, внутрижелудочно в течение 14 дней) на психоэмоциональные и вазомоторные реакции крыс после овариоэктомии. Экстракт семян льна не изменял уровень эстрадиола в крови, проявлял противотревожную активность при моделях тревоги, существенно не влиял на общую двигательную активность в тесте «открытое поле». Экстракт семян льна уменьшал выраженность патологических вазомоторных реакций при овариоэктомии, проявляющихся изменением реакции сосудов на вазоактивные агенты и приливами жара.

Ключевые слова: экстракт семян льна, фитоэстрогены, овариоэктомия, противотревожный эффект, вазомоторные реакции.

Psychoemotional and vasomotor reactions after experimental ovariectomy and their correction of phytoestrogens. Anishchenko A. M.¹, Aliev O. I.¹, Plotnikova T. M.^{2 1} Institute of Pharmacology, Siberian Branch, Russian Academy of Medical Sciences. 634028, Tomsk, Lenin's Street, 3. ² Siberian State Medical University. 634050, Tomsk, Moskowsky Trakt., 2. The effects of flax seed extract (40 mg/kg, daily, p. o. during 14 days) on the psychoemotional and vasomotor reactions in rats after ovariectomy were investigated. The flax seed extract did not change the level of estradiol in the blood, showed anxiolitic activity with the models of anxious disorders, did not influence considerably on the motor activity in «open field» test. Flax seed extract reduced the pathological vasomotor reactions in ovariectomy, showing by the change in vessels reactions on vasoactive agents and hot flushes.

Key words: Flax seed extract, phytoestrogens, ovariectomy, anxiolytic effect, vasomotor reactions.

У женщин климактерический период является переходной ступенью от репродуктивного периода к старости и характеризуется гормональными сдвигами, которые приводят к психоэмоциональным расстройствам, ухудшающим качество жизни [1, 2, 3]. Для лечения синдрома дефицита эстрогенов при естественной или хирургической менопаузе применяют гормональную заместительную терапию. Отмечен её положительный эффект в отношении как вегетососудистых расстройств, так и гиперлипидемии, остеопороза и других метаболических нарушений [4, 5]. Вместе с тем длительное применение гормональной заместительной терапии вызывает нежелательные эффекты - нарушение функций печени, гемостаза, повышенный риск опухолевого роста. Большие надежды специалисты возлагают на применение избирательных модуляторов эстрогеновых рецепторов, которые, сохраняя позитивное влияние гормонов, не обладают их побочными эффектами. Модуляторами активности эстрогеновых рецепторов могут быть фитоэстрогены - лигнаны и изофлавоноиды, выделенные из растений [6, 7]. Наибольший интерес представляет экстракт семян льна. Высокое содержание лигнанов в экстракте семян льна явилось основанием для изучения его эффектов при гипоэстрогенемии.

Цель. Изучение влияния экстракта семян льна на психоэмоциональные и вазомоторные реакции у крыс с недостаточностью половых гормонов, вызванной овариоэктомией.

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на 48 самках крыс Вистар массой 250-300 г в соответствии с рекомендациями «Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических средств» [8]. Животных содержали в виварии НИИ фармакологии СО РАМН при естественном освещении, свободном доступе к воде и пище. В работе использовали стандартизованную субстанцию - сухой экстракт семян льна (ЭСЛ), содержащий, по данным ВЭЖХ, 42 % секоизоларицирезинола диглюкозида.

Под эфирным наркозом проводили овариоэктомию (опытная и контрольная группы) или лапаротомию без удаления яичников (группа ложнооперированных животных). После овариоэктомии крысам опытной группы вводили в желудок ежедневно ЭСЛ в дозе 40 мг/кг массы тела в виде взвеси в 1 % крахмальной слизи в течение 14 дней, начиная с 8-х суток после операции. Животные контрольной группы после овариоэктомии получали эквиобъемное количество 1 % крахмальной слизи. Последнее введение ЭСЛ или крахмальной слизи осуществляли за 2 часа до исследования. Содержание эстрадиола в пробах крови определяли иммуноферментным методом с помощью набора «Эстрадиол ИФА» («Хема-Медика», Россия) на приборе для иммунноферментного анализа «Пикон» (Россия).

Влияние ЭСЛ на двигательную активность и ориентировочно-исследовательское поведение крыс изучали в экспериментальных установках «открытое поле» и «светлая - темная камера» [8]. Вазомоторные реакции оценивали с помощью функциональных проб и измерением температуры кожи на середине хвоста лазерным измерителем температуры ИТ301А. На 21-е сутки от начала эксперимента под наркозом (тиопентал натрия, 50 мг/кг массы тела) катетеризовали сонную артерию для регистрации артериального давления (АД) до и после болюсного введения в бедренную вену 0,1 мл растворов ацетилхолина (5 мкг/кг массы тела) и эпинефрина (50 мкг/кг массы тела).

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием пакета статистических программ «Statistica 8.0». Данные представлены в виде M±m, где M - среднее значение, m - стандартная ошибка среднего значения. Для оценки достоверности межгрупповых различий использовали непараметрическиe критерии Mann-Whitney U test.

Результаты и обсуждение. Для изучения гормонального статуса у ложнооперированных крыс забор крови осуществляли в фазе эструса. Уровень эстрадиола в крови ложнооперированных половозрелых крыс составил 43,8±1,3 пг/мл. Овариоэктомия приводила к исчезновению половых циклов у самок крыс и снижению содержания эстрадиола на 60 % к 21-м суткам после операции. Введение ЭСЛ не вызывало изменений содержания гормона в крови животных по сравнению с уровнем гормона у крыс контрольной группы. Следовательно, ЭСЛ не устранял вызванное овариоэктомией снижение уровня эстрадиола в крови.

Исследование психоэмоциональных нарушений, возникающих при экспериментальной овариоэктомии, позволило установить, что снижение уровня половых гормонов в крови приводило к формированию пассивного типа поведения крыс в тесте «открытое поле» с уменьшением ориентировочно-исследовательской активности и повышением тревожности. Изменение поведения животных выражалось уменьшением числа горизонтальных перемещений и вертикальных стоек на 19 и 33 % по сравнению с соответствующими значениями у ложнооперированных животных (табл. 1). Уровень тревожности овариоэктомированных крыс регистрировали по оценке времени их пребывания в светлом и темном отсеках камеры. Длительность пребывания крыс в светлом отсеке снижалась на 62 %, а латентный период выхода животного из первого квадрата увеличивался на 40 % по сравнению с продолжительностью у ложнооперированных животных (табл. 1).

Изучение поведения овариоэктомированных крыс в тесте «открытое поле» выявило особенности психоэмоционального действия ЭСЛ. Курсовое введение ЭСЛ не оказывало существенного влияния на ориентировочно-исследовательскую активность крыс: сохранялось выраженное снижение общего числа локомоторных актов, как горизонтальных перемещений, так и вертикальных стоек, не изменялось число обследованных отверстий (норковый рефлекс) по сравнению с показателями у ложнооперированных крыс. ЭСЛ, подобно другим фитоэстрогенам [9], достоверно уменьшал симптомы тревоги в условиях стресса новизны, о чем свидетельствовало уменьшение на 57 % времени выхода животных из первого квадрата в тесте «открытое поле» по сравнению с поведенческими реакциями при овариоэктомии (табл. 1). Следовательно, ЭСЛ при курсовом введении крысам после овариоэктомии, существенно не влияя на двигательную активность, ослаблял проявления тревоги и страха.

Таблица 1 Влияние экстракта семян льна (ЭСЛ, 40 мг/кг в течение 14 дней) на ориентировочно-исследовательское поведение крыс в «открытом поле» и время нахождения в светлой камере (M±m)

Примечание. * - p<0,05 по сравнению со значениями у ложнооперированных животных; ⁺ - р<0,05 по сравнению со значениями у животных контрольной группы.

При изучении с помощью функциональных проб вазомоторных реакций, сопровождающих экспериментальный постовариоэктомический синдром, установлено, что ацетилхолин вызывал меньшее (на 30 %) снижение, а эпинефрин - меньшее повышение системного АД (САД) по сравнению с реакцией на вазоактивные агенты у ложнооперированных животных (табл. 2). Изменение реакции сосудов при экспериментальной овариоэктомии, вероятно, обусловлено эндотелиальной дисфункцией [6], которая вызывает уменьшение продукции двух наиболее важных вазоактивных веществ, продуцируемых эндотелием, - вазодилататора оксида азота и вазоконстриктора эндотелина-1. ЭСЛ не влиял на уровень САД крыс после овариоэктомии, но восстанавливал реакции сосудов в ответ на внутривенное введение ацетилхолина и эпинефрина. Нормализация вазомоторных реакций под влиянием курсового введения ЭСЛ, вероятно, обусловлена его эндотелийпротективной активностью при гипоэстрогенемии [6] и, как следствие, способностью восстанавливать баланс между продуцируемыми эндотелием вазоактивными агентами.

Таблица 2 Влияние экстракта семян льна (ЭСЛ, 40 мг/кг в течение 14 дней) на реакцию АД (мм рт. ст.) в ответ на внутривенное болюсное введение ацетилхолина (5 мкг/кг) и эпинефрина (50 мкг/кг)

Изменения температуры, измеренной на коже середины хвоста крыс после овариоэктомии, в эксперименте являются эквивалентом приливов жара у женщин с климактерическим синдромом [10]. У ложнооперированных животных температура кожи с 9⁰⁰ до 12⁰⁰ часов не изменялась. У овариоэктомированных животных температура повышалась на 11 % к 10 часам, снижалась до исходного уровня к 11 часам и повторно повышалась к 12 часам. Данные температурные скачки оценивали как приливы жара.

Рис. 1. Влияние экстракта семян льна (ЭСЛ, 40 мг/кг в течение 14 дней) на температуру кожи хвоста у крыс после овариэктомии

По оси абсцисс - время, ч.; по оси ординат - температура, ^оС. * - р<0,05 по сравнению со значениями у ложнооперированных животных; ⁺ - р<0,05 по сравнению со значениями у животных контрольной группы.

У крыс, получавших ЭСЛ, температура существенно не изменялась на всем протяжении эксперимента. Следовательно, ЭСЛ способствовал нормализации вазомоторных реакций овариоэктомированных крыс.

Овариоэктомия вызывала снижение содержания в крови эстрадиола, усиливала чувство страха и тревоги, нарушала вазомоторные реакции с изменением реакций сосудов на вазоактивные агенты и приливами жара. Экстракт семян льна при курсовом введении в желудок в дозе 40 мг/кг массы тела, не влияя на уровень эстрадиола в крови, проявлял противотревожную активность и способствовал нормализации вазомоторных реакций у овариоэктомированных животных. Следовательно, экстракт семян льна может быть предложен для клинических исследований в качестве фитоэстрогенного средства для устранения вегетативных и психоэмоциональных симптомов, ухудшающих качество жизни женщин при климактерическом синдроме.

лен психоэмоциональный овариоэктомия психический

Литература

1. Семке В. Я., Куприянова И. Е., Трусов В. Б. Качество жизни как критерий психического здоровья женщин // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. - 1999. - № 1. - С. 37--41.

2. Куприянова И. Е. Профиль качества жизни больных невротическими расстройствами // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. - 2001. - № 2. - С. 67--69.

3. Ситдиков З. А., Куприянова И. Е. Теоретико-методологические аспекты изучения качества жизни и психического здоровья в разных социально-профессиональных группах населения // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. - 2004. - № 2. - С. 15--17.

4. Сметник В. П. Климактерические расстройства и методы их коррекции // Consilium medicum. - 2007. - Т. 9, № 6. - С. 65--70.

5. Тихомиров А. Л. Заместительная гормональная терапия в физиологической и хирургической постменопаузе // Фарматека. - 2007. - № 10. - С. 37--41.

6. Никитин А. И. Фитоэстрогены // Проблемы репродукции. - 2000. - № 3. - С. 12--20.

7. Сappelletti V., Miodini P., Fronso G. et al. Modulation of estrogen-beta isoforms by phytoestrogens in breast cancer cells // Int. J. Oncol. - 2006. - V. 28, № 5. - P. 1185--1191.

8. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических средств. - М., 2005. - 832 с.

9. Walf A. A., Frye C. A. Еrbeta-selective estrogen receptor modulators produce antianxiety behavior when administered systemically to ovariectomized rats // Neurophsychopharmacol. - 2005. - V. 30, № 9. - P. 1288--1301.

10. Bowe J., Li X. F., Kinsey-Jones J. et al. The hot phytoestrogen, 8-prenylnaringenin, reverses the ovariectomy-induced rise in skin temperature in an animal model of menopausal hot flushes // J. Endocrinol. - 2006. - V. 191, № 2. - P. 399--405.

Транслитерация русских источников

1. Semke V. Ya., Kupriyanova I. E., Trusov V. B. Kachestvo zhizni kak kriteriy psihicheskogo zdorovya zhenschin // Sibirskiy vestnik psihiatrii i narkologii. - 1999. - N 1. - S. 37--41.

2. Kupriyanova I. E. Profil kachestva zhizni bolnyih nevroticheskimi rasstroystvami // Sibirskiy vestnik psihiatrii i narkologii. - 2001. - N 2. - S. 67--69.

3. Sitdikov Z. A., Kupriyanova I. E. Teoretiko-metodolo-gicheskie aspektyi izucheniya kachestva zhizni i psihicheskogo zdorovya v raznyih sotsialno-professionalnyih gruppah naseleniya // Sibirskiy vestnik psihiatrii i narkologii. - 2004. - N 2. - S. 15--17.

4. Smetnik V. P. Klimaktericheskie rasstroystva i metodyi ih korrektsii // Consilium medicum. - 2007. - T. 9, N 6. - S. 65--70.

5. Tikhomirov A. L. Hormone replacement therapy in physiological and surgical menopause // Farmateka. - 2007. - № 10. - S. 37--41.

6. Nikitin A. I. Phytoestrogens // Problemi reprodukcii. - 2000. - № 3. - S. 12--20.

7. Guidelines for experimental (preclinical) studies of new pharmacological agents. - М., 2005. - 832 s.

Размещено на Allbest.ru