Оценка выраженности окислительного стресса у больных алкоголизмом и его коррекция с помощью севитина

Размещено на http://www.allbest.ru/

ГУ НИИ психического здоровья ТНЦ СО РАМН

Оценка выраженности окислительного стресса у больных алкоголизмом и его коррекция с помощью севитина

В.Д. Прокопьева, Н.А. Бохан, Е.В. Патышева, Е.Г. Ярыгина, В.В. Сафиуллина, Л.Г. Молькина, Г.П. Ляшенко

Томск

Резюме

Исследована динамика содержания продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), активности каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) в плазме крови больных алкоголизмом за 1 месяц реабилитационного периода, а также проведена оценка влияния севитина (биологически активной добавки, основной субстанцией которой является антиоксидант карнозин) на перечисленные параметры. У пациентов без применения фармакологических препаратов на стадии реабилитации наблюдалась тенденция к снижению продуктов ПОЛ, а также активности каталазы и супероксиддисмутазы, однако все исследуемые параметры снижались не достоверно. В плазме крови больных алкоголизмом, принимавших севитин в период реабилитации, содержание продуктов перекисного окисления липидов снизилось достоверно (P<0,05), активность супероксиддисмутазы имела тенденцию к повышению, а активность каталазы - к понижению. Сделано заключение о целесообразности использования севитина в реабилитации больных алкоголизмом с целью более эффективного снижения выраженности у них проявлений окислительного стресса. Ключевые слова: алкоголизм, окислительный стресс, антиоксидант, карнозин.

Abstract

Dynamic of amount of lipid peroxidation (LPO) products, activity of catalase and superoxide dismutase (SOD) in blood plasma of patients with alcoholism for month of rehabilitative period and assessment of influence of Sevitin (biologically active addition which basic substance is an antioxidant carnosine) on the above parameters has been investigated. In patients without application of pharmacological preparations at the stage of rehabilitation, trend toward decrease of LPO products was observed as well as activity of catalase and superoxide dismutase, however all the investigated parameters did not decreased reliably. In blood plasma of alcoholic patients with intake of Sevitin in the period of rehabilitation, amount of LPO products has decreased reliably (p<0,05), activity of superoxide dismutase had a trend toward increase and activity of catalase - toward decrease. It has been concluded about purposefulness of use of Sevitin in rehabilitation of patients with alcoholism to decrease effectively severity in them of manifestations of oxidative stress. Key words: alcoholism, oxidative stress, antioxidant, carnosine.

Введение

Известно, что при алкоголизме формируется состояние окислительного стресса [2], которое характеризуется резким возрастанием перекисного окисления липидов (ПОЛ), играющего важную роль в патогенезе алкоголизма [3], а также окислительной модификацией белков, что выражается в увеличении уровня их карбонилирования [7]. Активность ферментов антиоксидантной системы также изменена, при этом направленность изменений неодинакова для различных ферментов и в разных органах и зависит от длительности приема алкоголя [3]. Приведенные данные литературы позволяют сделать заключение, что использование антиоксидантов в терапии алкоголизма может быть полезным и перспективным.

Карнозин (в-аланил-L-гистидин) относится к гистидинсодержащим дипептидам, которые широко представлены в возбудимых тканях позвоночных животных, в том числе мозге, скелетных мышцах и в сердце, где эти соединения участвуют в различных физиологических процессах [1]. Карнозин обладает рядом свойств, среди которых для нас наибольший интерес представляют антиоксидантная и мембранопротекторная активности, а также способность связывать протоны и ионы тяжелых металлов.

При исследовании влияния карнозина на эритроциты больных алкоголизмом было выявлено, что данный препарат in vitro способен повышать устойчивость эритроцитов к гемолизирующему действию кислоты, а также предохранять клетки от структурных повреждений [2]. Опыты, проведенные на животных, показали, что карнозин способен напрямую взаимодействовать с продуктами ПОЛ и нейтрализовать их. Также с помощью карнозина можно регулировать активность ферментов, управляющих гомеостазом организма в условиях развития окислительного стресса [6]. Данные факты показывают, что карнозин целесообразно использовать в терапии больных алкоголизмом.

Фирмой ООО ПТП «Медтехника» (фармацевтические и пищевые препараты, г. Казань) разработана и выпускается биологически активная добавка к пище севитин, активной субстанцией которой является карнозин.

Целью нашей работы являлась оценка выраженности окислительного стресса у больных алкоголизмом на стадии реабилитации в период формирования ремиссии, а также изучение действия севитина на параметры, характеризующие оксидативный статус больных алкоголизмом.

Материалы и методы

В исследовании участвовали 43 мужчины, больных алкоголизмом, прошедших курс антиалкогольного лечения на базе отделения аддитивных состояний ГУ НИИ психического здоровья ТНЦ СО РАМН, а также 63 психически и соматически здоровых человека, из которых формировались контрольные группы.

После окончания антиалкогольного лечения в условиях стационара 32 пациента получили севитин для его приема на стадии реабилитации вне стационара. Из них 27 человек в течение 1 месяца принимали (со слов пациентов) севитин (основная группа) в дозе 1,2 г в сутки, 5 пациентов из этой группы через месяц на повторное обследование не явились. Другие 11 пациентов составили группу сравнения. Эти больные после антиалкогольного лечения на стадии реабилитации вне стационара медикаментозного лечения не получали, но через 1 месяц им было проведено такое же обследование, как и больным основной группы.

У всех обследуемых лиц проводили определение показателей крови до и после 1 месяца реабилитации. Кровь брали из локтевой вены утром натощак.

Активность супероксиддисмутазы (СОД) определяли по методике, описанной Т. В. Сиротой по способности СОД ингибировать аутоокисление адреналина при щелочных значениях рН [5]. Активность каталазы определяли спектрофотометрически при длине волны 410 нм по методу, основанному на способности перекиси водорода образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс [4]. ПОЛ определяли по изменению уровня продуктов реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП) [8].

Данные обрабатывали согласно общепринятым критериям параметрической статистики.

Результаты и обсуждение. Данные, отражающие содержание ТБК-РП в плазме крови в разных группах доноров, представлены на рис.

Рис. Содержание ТБК-РП в плазме крови в исследуемых группах. * P<0,05 - достоверные различия по сравнению с контролем, # P<0,05 - достоверные различия внутри группы до и после реабилитации, n - количество человек в группе

Уровень ТБК-РП в плазме здоровых лиц (контрольная группа) составил 1,12±0,05 мкмоль/л, а у больных алкоголизмом до реабилитации в основной группе и группе сравнения - 2,25±0,15 и 1,51±0,20 мкмоль/л соответственно. Очевидно, что у больных обеих групп после антиалкогольного лечения перед реабилитацией ТБК-РП были достоверно повышены по сравнению с контролем (P<0,05). При этом в основной группе больных этот показатель был достоверно выше, чем в группе сравнения (P<0,05).

После реабилитационного периода продолжительностью 1 месяц содержание ТБК-РП у больных группы сравнения (не принимавших севитин) составило 1,36±0,11 мкмоль/л, а в основной группе пациентов (принимавших севитин) - 1,68±0,13 мкмоль/л. То есть в обеих группах пациентов во время реабилитации произошло снижение продуктов ПОЛ. При этом оказалось, что только в группе больных, принимавших севитин в период реабилитации, снижение продуктов ПОЛ было достоверным (P<0,05). Необходимо также отметить, что в обеих группах пациентов после реабилитации уровень ТБК-РП оставался повышенным по сравнению с контрольной группой (P<0,05).

Таким образом, прием севитина больными на стадии реабилитации способствовал снижению продуктов ПОЛ в плазме крови.

Активность каталазы в плазме больных алкоголизмом обеих групп до реабилитации была достоверно повышена по сравнению с контрольным значением (P<0,01). Через месяц реабилитационного периода была обнаружена тенденция к снижению активности каталазы как в основной группе пациентов, так и в группе сравнения. Однако уровень активности каталазы в обеих группах оставался повышенным по сравнению с нормой (P<0,01).

Таблица Активность каталазы и СОД в плазме крови доноров разных групп

Примечание. * - p<0,01 по отношению к контролю; + - p<0,05 по отношению к контролю

Активность СОД в плазме больных алкоголизмом обеих групп до реабилитации также была достоверно повышена по сравнению с контрольным значением (P<0,05). За период реабилитации активность СОД в основной группе больных несколько возросла, а в группе сравнения, напротив, снизилась. Однако в обеих группах изменения за период реабилитации не были достоверными. Во всех группах активность СОД оставалась повышенной по сравнению с нормой.

Полученные данные подтверждают тот факт, что у больных алкоголизмом организм находится в состоянии окислительного стресса [2]. Об этом свидетельствует достоверное увеличение продуктов ПОЛ в плазме крови больных алкоголизмом до реабилитации по сравнению с контрольной группой. Повышение продуктов ПОЛ влечет за собой активацию ферментов антиоксидантной системы, к которым относятся супероксиддисмутаза и каталаза. Согласно нашим данным, действительно, у больных алкоголизмом активность этих ферментов в плазме достоверно выше, чем у здоровых лиц.

После 1 месяца реабилитации без медикаментозного лечения в группе сравнения наблюдалась тенденция к снижению всех исследуемых параметров, но это снижение было недостоверно. При приеме севитина во время реабилитации в основной группе пациентов выявлено достоверное снижение продуктов ПОЛ, а также тенденция к повышению активности СОД и снижению активности каталазы плазмы крови.

Таким образом, севитин способствует снижению содержания продуктов ПОЛ в плазме крови больных алкоголизмом. Мы связываем этот эффект препарата с его прямым антиоксидантным действием и способностью взаимодействовать со свободными радикалами, а также напрямую взаимодействовать с продуктами перекисного окисления липидов и нейтрализовать их [1].

Обращает на себя внимание тот факт, что в группе сравнения после периода реабилитации активность СОД несколько снижается, в то время как прием севитина способствует увеличению активности супероксиддисмутазы в плазме больных основной группы. Этот факт мы связываем со способностью карнозина активировать ферменты акнтиоксидантной системы [1]. Не исключено, что механизм активации СОД карнозином связан с его способностью взаимодействовать с Cu и Zn, содержащимися в активном центре данного фермента антиоксидантной системы [1].

Полученные результаты показывают, что прием севитина больными алкоголизмом в период реабилитации способствует более быстрому снижению выраженности окислительного стресса у пациентов, что позволяет рассматривать данный препарат как полезный для терапии больных алкоголизмом в период реабилитации.

Авторы выражают благодарность Производственно-торговому предприятию «Медтехника» (г. Казань) в лице заместителя директора И. И. Багаутдинова за предоставление севитина для проведения настоящих исследований. липид кровь алкоголизм севитин

Литература

1. Болдырев А. А. Карнозин. Биологическое значение и возможности применения в медицине. - М. : Изд-во МГУ; 1998.

2. Бохан Н. А., Прокопьева В. Д. Молекулярные механизмы влияния этанола и его метаболитов на эритроциты in vitro и in vivo. - Томск : Изд-во Том. ун-та, 2004. - С. 100--115.

3. Долматова Л. С., Ромашина В. В. Особенности изменения активности антиоксидантных ферментов различных типов лейкоцитов крови у больных хроническим алкоголизмом // Патологическая физиология и эксперимент. терапия. - 2003. - № 2. - С. 17--19.

4. Метод определения активности каталазы / М. А. Королюк, Л. И. Иванова, И. Г. Майорова, В. Е. Токарев // Лаб. дело. - 1988. - № 1. - С. 16--18.

5. Сирота Т. В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы // Вопросы мед. химии. - 1999. - № 3. - С. 12--34.

6. Стволинский С. Л. Защита организма от окислительного стресса карнозином: эколого-биохимический подход : Автореф. дис. … д. б. н. - М. : МГУПП, 2006. - С. 9--13.

7. Суханова Г. А., Серебров В. Ю. Биохимия клетки. - Томск : Чародей, 2000. - С. 99--101.

8. Лабораторные методы оценки липопероксидации / В. Н. Ушкалова, Н. В. Иоанидис, З. М. Деева, Г. Д. Кадочникова // Лаб. дело. - 2003. - № 6. - С. 446--460.

Размещено на Allbest.ru