Изменения показателей красной крови и тромбоцитов при экспериментальном комбинированном стрессе

На действие стресс-факторов активно реагирует система крови, изменяются параметры форменных элементов, биологически активные вещества, медиаторы. Эти реакции являются неспецифическими и происходят от изменения интенсивности пролиферации клеток-предшественников в очагах гемопоэза. Изучены показатели лейкоцитарной формулы при стресс - реакциях [1]. Однако описана и динамика параметров красной крови в работах при изучении эффектов вибрационного, шумового и сочетанного химического и физического стресса на показатели количества эритроцитов и соотношения их форм [2].

Проблема гиподинамического стресса актуальна для человека ввиду сидячего образа жизни, болезней с ограничением подвижности, иных принудительных ситуаций. При этом ухудшается общая гемодинамика, угнетена микроциркуляция в органах и тканях. В ответ на иммобилизацию наблюдаются изменения и со стороны системы регуляции агрегатного состояния крови: тромбоцитарного гемостаза, внутреннего и внешнего путей активации коагуляционного гемостаза [3]. Одним из актуальных является и алиментарный стресс, в том числе, для Крымского региона, так как существует проблема йододефицитного и гиповитаминного питания.

Цель - изучить показатели красной крови и характеристики тромбоцитов у крыс при сочетанном гиподинамическом и алиментарном стрессе.

Задачи:

1. Изучить изменения показателей красной крови крыс при гиподинамическом стрессе на протяжении 3 недель.

2. Сравнить изменения параметров красной крови и тромбоцитов крыс на гиповитаминной дефицитной по йоду диете и крыс с полноценным питанием.

3. Выявить половые отличия реакции на гиподинамический и многофакторный стресс.

Материалы и методы. Исследование проведено на 20 самцах и 20 самках четырехмесячных крыс породы Wistar. Исследованы по 10 самцов и самок с обычным питанием и диетой (на протяжении 4 недель до гиподинамии в рационе были только прокаленное зерно и вода, бедная йодом, моделирующая состав ряда источников степного Крыма). Обе группы крыс подвергали гиподинамическому стрессу на протяжении трех недель, при этом их помещали в фиксаторы среднего размера. Режим моделирования стресса выбран таким образом, что время иммобилизации составило 18 непрерывных часов в сутки, в том числе в ночной период активности крыс (с 16.00 до 10.00 часов) и 6 часа свободного передвижения крыс в клетке (соответственно, в околополуденное время). В начале эксперимента провели контроль крови, в последующем кровь исследовали в конце каждой недели стрессирования.

Перед взятием крови готовили пробирки с 100 мкл раствора ЭДТА для предотвращения быстрого свертывания. Кровь получали методом сублингвального разреза. Для этого крыс предварительно помещали в банку с ватным шариком, пропитанным диэтиловым эфиром, чтобы добиться анестезиологического эффекта. Далее с помощью одноразового скальпеля прокалывали дно полости рта и забирали 2 мл крови, после чего ватой тампонировали рану.

Полученный объем крови плавно перемешивали и помещали в геманализатор Mythic 18 (“Orphee”, Швейцария). Для подсчетов использовали программу Microsoft Office Excel, достоверность определяли при помощи t- критерия Стьюдента, распределение было нормальным. Все числовые показатели, приведенные в разделе «результаты», статистически достоверны при ошибке Р менее 5%. Работа выполнена в ЦКП «Молекулярная биология» на базе ЦНИЛ Медицинской академии и ЦКП «Экспериментальная физиология и биофизика» Таврической академии КФУ. Исследование выполнено в рамках поддержанного ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В.И. Вернадского» гранта № АААА-А18-118112690030-2.

Результаты исследований. В группе животных с обычным питанием выявлен ряд закономерных изменений при стрессе. У самцов через неделю стрессирования установлен рост количества эритроцитов (5,73±0,18^ 6,62±0,23*10¹²/л), гемоглобина (10,94±0,32^-12,36±0,45 г/л) и, соответственно, гематокрита (27,47±0,73^31,56±1,00 %). Наблюдается значительный рост числа тромбоцитов (267,00±39,63^405,80±40,91*10 ⁹/л) и тромбокрита (0,14±0,02^-0,20±0,02 %), уменьшается коэффициент больших тромбоцитов (5,47±0,77^-2,84±0,32 %). У самок есть подобная тенденция по показателям красной крови, а также по количеству тромбоцитов (185,1±22,77^-329,6±16,88*10⁹/л). На второй неделе выявлены обратные изменения по вышеупомянутым показателям у самцов: снижены количество эритроцитов(5,73±0,18^4,25±0,37*10¹²/л),гемоглобин (10,94±0,32^-9,05±0,71 г/л), гематокрит (27,47±0,73^24,77±0,72%). У самок не происходит значимого изменения показателей красной крови и тромбоцитов, незначительно увеличивается концентрация гемоглобина в эритроцитах (38,18±0,51^40,81±0,57%). На третьей неделе, когда стресс носит характер хронического, остаются сниженными показатели содержания эритроцитов, гемоглобина и гематокрита у самцов. У самок показатели эритроцитов и тромбоцитарного компонента гемограммы, практически не отличаются от контроля.

В группе животных с дефицитом питания у самцов лишь на третьей неделе стрессирования заметна значимая разница показателей красной крови: содержание эритроцитов и гемоглобин снижаются (4,70±0,34^-3,63±0,30*10¹²/л и 10,22±0,70^-7,95±0,72 г/л, соответственно). У самок в группе комбинированного стресса через неделю гиподинамии выявлен значимый рост уровня содержания эритроцитов и гемоглобина, сопоставимый с группой изолированного гиподинамического стресса. На сроках второй и третьей недели разницы от исходных значений по эритроцитарным и тромбоцитарным показателям нет.

Если провести сравнение внутри групп животных одного пола, но при различных нутриентных статусах, по показателям тромбоцитов наблюдаем следующую тенденцию: количество тромбоцитов больше в группах, подвергшихся сочетанному стрессированию.

Если провести сравнение между самцами и самками можно выявить, что самцы более подвержены анемическому состоянию: параметры количества эритроцитов и концентрации гемоглобина на 2-3 неделе стрессирования у них ниже по сравнению с самками. Данная тенденция наблюдается как в группе стрессированных в условиях нормального питания, так и в группе стрессированных на фоне алиментарного и йод-дефицитного питания.

При гиподинамическом стрессе изначально количество эритроцитов возрастает (1 неделя), это возможно лишь в первую фазу стресса - мобилизацию, эти результаты соответствуют литературным данным [4]. Затем содержание красных кровяных клеток, уровень гемоглобина и гематокрита понижается (2-3 неделя стресса). В то время как возрастает количество тромбоцитов в крови. Это важно для понимания и интерпретации патофизиологических процессов, происходящих в органах при сочетанном стрессе, и для их коррекции.

Выводы. Показатели красной крови при стрессе характеризуются эритропенией, анемией, тромбоцитозом; у самцов они лабильней, и самцы крайне тяжело переносят комбинированный стресс, провоцирующий тромбоцитоз, не свойственный изолированному гиподинамическому стрессу.

Использованные источники