Полипренолы листьев растения alceanudifloral и его антиоксидантная активность

Размещено на http://www.allbest.ru/

ПОЛИПРЕНОЛЫ ЛИСТЬЕВ РАСТЕНИЯ ALCEANUDIFLORAL И ЕГО АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ

Гайибов Улугбек Гаппаржанович, Институт биоорганической химии АН РУз им.

Malokhat Zhumaevna Rakhmatova

PhD, researcher of Institute of the Chemistry of Plant Substances Academy Science of Uzbekistan Karimova Irodakhon Ibrohimjonovna PhD, National University named after Mirzo Ulugbek, Gayibov Ulugbek Gapparjanovich PhD, Institute of bioorganic chemistry Academy of Sciences of Uzbekistan named after acad. A.S. Sadykov, Academy Science of Uzbekistan

Khidyrova Nazira Kudratovna candidate of Chemical Science, Senior Researcher, Institute of the Chemistry of Plant Substances Academy Science of Uzbekistan

Studies have been conducted to find the optimal conditions for the isolation of polyprenols (PP) and facility of Prenalon from the leaves of the plant Alceanodiflora L. It was found that the use of ultrasonic mixing increases the yield of the target products and accelerates the process. The antiradical activity of polyprenol (PP) and facility of Prenalon were studied. It is shown that polyprenol (PP) is inferior to Prenalon in antiradical activity.

Key words: Alceanudiflora L., polyprenols, ultrasonic mixing, microwave radiation, antiradical activity.

Аннотация

POLYPRENOLS THE LEAVES OF THE PLANT ALCEAE NUDIFLORA L. AND THEIR ANTIOXIDANTACTIVITY

Проведены исследования по нахождению оптимальных условий выделения полипренолов (1111) и средства Преналон из листьев растения AlceanudifloraL. Установлено, что применение ультразвукового перемешивания повышает выход целевых продуктов и ускоряет процесс. Изучена антирадкальная активность 1111 и средства Преналон. Показано, что по антирадикальной активности ПП уступает Преналону.

Ключевые слова: AlceanudifloraL, полипренолы, ультразвуковое перемешивание, микроволновое излучение, антирадикальная активность.

AlceanudifloraL -шток роза голоцветковая семейства мальвовых (Malvaceae) широко распространена в растительном покрове всего Тянь-Шаня, в Узбекистане встречаются 3 вида A. ryhticapa (Trautv.) Iljin, A. nudiflola (Lindl.)Boiss.,A. [1, с.84]. Растительный материал - листья культивируемого. собирали из окрестностей Наманганской области в августе 2019г. Высушили в тени при температуре 20-22⁰С. Ранее нами были изучены полипренолы и тритерпеноиды данного растения [2, с.181]. В данной работе приводим результаты исследований по выделению противоязвенного средства Преналон на основе полипренолов листьев А1сеа пийфога Ь. с применением ультразвукового перемешивания и изучения его антиоксидантной активности.

На сегодняшний день в мире проводятся широкие исследования по выделению и определению биологической активности лекарственных веществ, около 45% медикаментов, используемых, в медицине создано на основе растительных экстрактов.

Изучение молекулярных механизмов патогенеза ряда заболеваний растений, животных и человека показало, что все они в той или иной мере связаны сактивацией или подавлением свободно-радикальных процессов. Поэтому актуальным остаётся поиск и изучение регуляторов таких процессов на основе природного и синтетического сырья.

В связи с изложенным, поиск антиоксидантов и изучение их ингибирующего действия на процессы свободно-радикального окисления, неконтролируемой липопероксидации, представляется вполне своевременным и востребованным.

Известно, что полипренолы обладают разнообразной биологической активностью, среди которой особый интерес представляет способность тимулировать регенераторные процессы в организме, проявлять антитоксическое и другие действия [3, с.328; 4,с.12].

На основе ПП листьев А1сеа пийфога создано средство Преналон, компонентый сотав которого: ПП (не менее 35%), токоферолы (не более 6%), каротиноиды (не менее 3,0%), стерины (не менее 20,5%), терпеноиды (не менее 25,5 %) и углеводороды (не более 10%) [5, с. 289].

Исходя из этого в данной работе сообщается исследования по нахождению оптимального метода выделения средства Преналона (1) из листьев А1сеа пийфога. с применением экстракции ультразвукового перемешивания и изучению ее антирадикальной активности (АРА) по отношению к стабильному свободному радикалу ДФПГ (2,2 -дифенил-1 -пикрилгидразила) по сравнению ПП (содержание 95,2% )(2).

С целью нахождения оптимальных условий выделения средства Преналон экстракцию растительного сырья - листьев А1сеа пийЬ/1ога Ь. проводили с применением альтернативных методов экстракции “зеленой химии”: настаивание, ультразвуковая (УЗ), а также микровольновая (МВ). Параллельно выделены сумма экстрактивных веществ (СЭВ), сумма нейтральных веществ (условно названный “Преналон”) и полипренолы (ПП). Выходы и условия экстракции приведены в табл.1.Таблица 1.

Выходы СЭВ, СНВ и ПП выделенных с применением альтернативных методов экстракции, % отв.с.м.

Таблица 1

Данные представленной таблицы показывают, что применение ультразвуковой экстракции способствует повышению выхода биологически активных Преналона (1,13 раз) и ПП (1,4 раз) и сокращает время экстракции на 16 раз, при этом сохраняется нативность компонентов экстракта.

В результате применения УЗ экстракции, выход составил 19,8%(СЭВ), 5.1% (Преналон) и 2,41%(1111) от воздушно сухой массы растительного материала. А в случае применения МВ экстракции наблюдалось уменьшение содержания полипренолов, что объясняется частичной их деструкцией.

Все растительные соединения по отношению к животным организмам в той или иной степени обладают биологической активностью чрезвычайно широкого спектра, за счет разнообразия их химического строения, и в настоящее время находятся в центре научного внимания [6, с.63; 7, с.44].

Для оценки АРА использовали методику спектрофотометрического измерения кинетики восстановления молекул стабильного радикала 2,2- дифенил-1-пикрилгидразила (ДФПГ) антиоксидантами. Исследуемые соединения растворяли в воде при концентрации 1 мг/мл.

При добавлении исследуемых соединений 1 и 2 в спиртовой раствор ДФПГ происходит переход свободно-радикальных молекул в нерадикальную форму, при этом интенсивно фиолетовый раствор ДФПГ обесцвечивается. На рис. 1 представлена кинетика изменения оптической плотности раствора ДФПГ при добавлении исследуемых нами двух соединений 1 и 2.

Для сравнения АРА исследуемых соединений выбрали концентрацию для каждого соединения 50 мкл из приготовленного раствора 1 мг вещества в 1 мл воды. Анализируя полученные результаты можно заключить, что при добавлении в спиртовой раствор ДФПГ исследуемых соединений 1 и 2 наблюдается резкое снижение оптической плотности раствора ДФПГ, что свидетельствует об их антирадикальной способности.

Рис.1. Изменение оптической плотности спиртового раствора ДФПГ по отношению к контролю при добавлении исследуемых соединений в зависимости от времени.

Сплошная линия построена на основании нелинейной регрессии. Концентрация ДФПГ 0.1 мМ. Измерения проводились при 20оС сразу после добавлении исследуемых препаратов. Концентрация исследуемых соединений 1 мг/мл.

Из экспериментальных данных следует, что изучаемые соединения обладают высокой способностью к тушению свободных радикалов. Для количественной оценки антирадикальной активности использовали стабильный радикал 2,2.

Таблица 2. Значения константы скорости реакции, концентрация, ингибирующая на 50 % (1С50) и время необходимое для снижения концентрации ДФПГ на 50 % ^50) при реакции с исследуемыми образцами 1 и 2

В реакции ДФПГ с соединениями 1 и 2 t₅₀ при 20^оС составляет для препарата 1 - 105 с, препарата 2 - 9,6 с, следовательно, по реакционной способности средство Преналон (1) превосходит ПП (2) (табл.1).

Способ получения суммы экстрактивных веществ листьев растения А1сеа. Общая методика. Листья растений А1сеа (по 1000 г), измельчали до степени помола 2,05,0-мм, экстрагировали трехкратно 96%-ным этиловым спиртом при гидромодуле 1:20(1:8, 1:6, 1:6) методом настаивания, ультразвукового перемешивания и микроволнового излучения. Все спиртовые экстракты объединяли, растворитель отгоняли на роторном испарителе при 40⁰С. В результате получили сумму экстрактивных веществ (СЭВ) в количестве 144г (14,4%), 198г(19,8%), 168г (16,8%) от воздушно-сухой массы (от ВСМ) растения соответственно.

Выделение Преналона с применением УЗ переешивания. 100 г СЭВ растворяли в 510 мл этилового спирта и добавляли 64,0 мл водного раствора едкого калия, 0,200мг пирагаллола и 0,5 л петролейного эфира. Смесь перемешивали в течение 30 минут с применением УЗ, петролейную часть отделяли и еще дважды экстрагировали птролейным эфиром. Все петролейную часть объединяли, промывали 10%-ным водным раствором соды, затем водой до рН= 7. Высушивали над безводным сернистым натрия и перегоняли на роторном испарителе. Выход Преналона 5,10% от ВСМ. Компонентый состав которого, определяли с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии Agilent Technologies1100 по [8, c.426], где ПП (43,5%), токоферолы (4,8%), стерины ( 20,5%), терпеноиды (26,5 % ) каротиноиды по СФ (спектрофотометрический) (4,7%).

Выделение полипренолов. 5,5г Преналона разделяли на колонке с силикагелем и получили 2. 43г полипренольной фракции с содержанием более 95,2% (42.80% от суммы нейтральных веществ, 2.43% от воздушно сухой массы). Контролировали с помощью ТСХ. Для ТСХ использовали пластинки Sorbfil (Россия) размером 10х10 см, AL SIL в/иУ(Германия), размером 20х20 см, система растворителей бензол-этилацетат 24:1, гексан - хлороформ 1:2, проявитель KMnЬ4 в серной кислоте, 3%-ный спиртовой раствор ванилина или пары йода. Повторность опыта трехкратная.

Идентификацию провели с применением ИК-, ЯМР- Н¹ и С¹³ спектров. Спектральные характеристики полипренолов соответствуют литературным данным [2, с.182; 3,с. 327].

Работа выполнена при поддержке прикладного гранта №ПЗ -2170929759. лечебный растение медицина полипренол

Выводы:

1. Показано, что применение ультразвуковой экстракции для выделения Преналона и ПП из листьев растения Alceanudifllora L.способствует повышению выхода их на 0,6% и 0,66%, соответственно и сокращает время экстракции в 16 раз.

2. Изучена антирадикальная активность Преналона и ПП с применением стабильного радикала 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (ДФПГ), при этом выявлено, что Преналон по своей антирадиальной активности превосходит полипренолов.

Список литературы

1. Хамидов А., Набиев М., Одилов Т. Узбекистану симликлар и анщлагичи // -Тошкент“Уцитувчи”, 1987. -Б.84- 90.

2. KhidirovaN.K., RakhmatovaM.J., KukinaT.P., Shakhidoyatov R.Kh., ShakhidoyatovKh.M.. Polyprenols and triterpenoids from leaves of Alceanudiflora//Chemistry of Natural Compounds. 2012. - Vol.48. - № 2. -P.180-184.

3. Хидырова Н.К., Ван Е.В., Шахидоятов Р.Х., Бобакулов Х.М., Абдуллаев Н.Д., Шахидоятов Х.М. Полипренолы листьев и стеблей растения Althaeaofficinalis/ Химия природ. соедин. 2012. - №3. - С.326-329.

4. Патент РФ, № 2252026C1. Средство для стимуляции процессов естественной регенерации печени //Рощин В. И., Султанов В. С.2005. Бюлл. № 1. 12.

5. Юсупова С.М., Вайс Е.В., Хидырова Н.К., Рахматова М.Д., Нарбутаева Д.А., Сыров В.Н. AlceanudiflloraL как перспективный источник получения полипренолов, обладающих высокой ранозаживляющей активностью // Инфекция, иммунитет и фармакология. 2019. - №2. -С. 289294.

6. Додаев К.О., Атакулова Д.Т. Лечебные свойства нетрадиционного сырья, листьев винограда и их использование при приготовлении популярных блюд // Universum: Технические науки /электрон. научн. журн. 2019. -№ 6(63). URL: http://7universum.com/ru/tech/archive/item/7444

7. Кукина Т.П., Баяндина И.И., Л.М. Покровский. Неполярные компоненты экстрактов зверобоя продырявленного //Химия растительного сырья. - 2007. -№3. -С.39-45

8. U. T. Zokirova, N. K. Khidyrova, N. V. Tursunova, V. N. Syrov, and Kh. M. Shakhidoyatov. Polyprenols from Vitisvinifera leaves and their hepatoprotective activity // Chemistry of Natural Compounds. 2015. - Vol. 51. -№3.-P.423-426.

Размещено на Allbest.ru