Мировые тенденции в изоляции, идентификация и характеристика Haemophilus influenzae тип b - возбудителя гемофильной инфекции

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

ФГУП «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов» ФМБА России

Мировые тенденции в изоляции, идентификация и характеристика Haemophilus influenzae тип b - возбудителя гемофильной инфекции

Е.Л. Салимова, А.Д. Конон, В.П. Трухин, И.В. Красильников

АННОТАЦИЯ

Гемофильная инфекция или Hib-инфекция, вызываемая Haemophilus influenzae тип b, является актуальной медицинской проблемой из-за значительной распространенности, частой генерализации и тяжелого течения с высокой смертностью. H. influenzae тип b является причиной тяжелой пневмонии, менингита и других инвазивных заболеваний у детей до 5 лет.

За рубежом проблема Hib-инфекции успешно решена с помощью специфической вакцинопрофи- лактики. После повсеместного введения заболеваемость гемофильной инфекцией снизилась более чем на 90 %. Однако в Российской Федерации до настоящего времени технологии получения вакцин для профилактики инфекций, вызываемых H. influenzae тип b, находятся на стадии разработки.

Главной составляющей технологий получения вакцин является штамм-продуцент, синтезирующий целевой продукт (действующее вещество лекарственного препарата), поэтому целью данной работы было обобщить данные литературы о штаммах H. influenzae тип b.

В обзоре приводятся данные по характеристике, способам выделения и идентификации бактерий F. influenzae тип b. Приводится информация по истории открытия и изучения H. influenzae тип b, а также структуры синтезируемого полисахарида, его иммуногенности. Подробно рассматриваются такие особенности H. influenzae тип b, как потребность в факторах роста Х (гемин) и V (никотина- мидадениндинуклеотид, НАД), их биохимическая роль для культуры, а также другие физиологобиохимические, серологические признаки, позволяющие идентифицировать серотип b среди представителей рода Haemophilus.

Обобщена информация об описанных в современной литературе штаммах H. influenzae тип b, используемых в производстве полисахаридных вакцин. Всего рассмотрено 25 штаммов H. influenzae тип b, для которых приводятся данные по месту выделения штаммов, их получению (источнику), способу хранения, условиям пассирования, продуктивности.

Совокупность литературных данных, представленных в настоящем обзоре, дает основание заключить, что выделенный сотрудниками ФГУП «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов» ФМБА России штамм Haemophilus influenzae SPB тип b В-7884 не уступает по свойствам штаммам, описанным в изученной литературе.

Ключевые слова: Haemophilus influenzae тип b, штамм, полирибозилрибитолфосфат, Х и V фактор, шоколадный агар

WORLD TRENDS IN ISOLATION, IDENTIFICATION AND CHARACTERISTICS OF HAEMOPHILUS INFLUENZAE TYPE B - THE AGENT OF HAEMOPHILIC INFECTION

E.L. Salimova, A.D. Konon, V.P. Truhin, I.V. Krasilnikov

FSUE “The Saint-Petersburg scientific research institute of vaccines and serums and the enterprise for the production of bacterial preparations” FMBA

ABSTRACT

Hib infection caused by Haemophilus influenzae type b is a topical medical issue due to its high prevalence, frequent generalization and severe course with high mortality. H. influenzae type b causes severe pneumonia, meningitis and other invasive diseases in children under 5 years of age.

Abroad, the problem of Hib infection has been successfully solved using specific vaccine prevention. After widespread administration, the incidence of Hib infection has decreased by more than 90 %. However, in the Russian Federation, vaccine technology for the prevention of H. influenzae type b infections is still under development.

The main component of vaccine technologies is a producer strain synthesizing the desired product (active drug substance), therefore the purpose of this work was to summarize the literature data about H. influenzae strains type b.

Data on characteristics, methods of isolation and identification of bacteria of Haemophilus influenzae type b are provided in review. Information on the history of the discovery and study of H. influenzae type b, as well as the structure of the synthesized polysaccharide and its immunogenicity is given. The features of H. influenzae type b, such as the requirement of growth factors X (hemin) and V (nicotinamide adenine dinucleotide, NAD), their biochemical role for culture, as well as other physiological, biochemical, serological characters that identify the serotype b among the genus Haemophilus are considered in detail.

The information about strains of Hib used in the manufacture of polysaccharide vaccines and described in the current literature is reviewed. A total of 25 strains of H. influenzae type b were examined, for which data on the place of strains isolation, their preparation (source), storage method, passaging conditions, and productivity are given.

The totality of the literature data presented in this review gives grounds for concluding that the strain of H. influenzae SPB type b B-7884 isolated by the officers of FSUE «The Saint-Petersburg scientific research institute of vaccines and serums and the enterprise for the production of bacterial preparations» FMBA of Russia is not inferior in properties to strains described in the studied literature.

Keywords: Haemophilus influenzae type b, strain, polyribosylribitol phosphate, X and V factor, chocolate agar

В настоящее время многие развитые страны мира включили в Национальные программы иммунизации вакцину против гемофильной инфекции, вызванной бактерией Haemophilus influenzae тип b. Основными признаками Hib-инфекции являются тяжелая пневмония, менингит и другие инвазивные заболевания у детей до 5 лет. До введения вакцинации серьезные заболевания были зафиксированы у 8.13 млн. детей в возрасте 1-59 месяцев, смертность составила - 371 000 человек [1]. Начиная с 90-х годов ХХ ст., после начала иммунизации Hib- вакциной, заболеваемость гемофильной инфекцией значительно снизилась (более чем на 90 %) [1]. В Российской Федерации вакцинация против Hib- инфекции осуществляется только детям из группы риска. В первую очередь это связано с отсутствием полного цикла производства вакцины против F. influenzae тип b на территории нашей страны.

Важной составляющей любого биотехнологического процесса является высокоактивный штамм-продуцент. Работа по изолированию, идентификации и изучению штаммов H. influenzae тип b ведется уже более 70 лет, а постоянное усовершенствование технологий, использование современного оборудования позволяют значительно повышать синтез целевых метаболитов продуцентов.

Цель настоящего обзора - обобщить данные литературы о свойствах, особенностях и местах выделения, идентификации, продуктивности описанных штаммов H. influenzae тип b, а также сравнить эти сведения с собственными результатами, полученными на базе ФГУП «Санкт- Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов» ФМБА России (ФГУП СПбНИИВС ФМБА России).

Общая характеристика H. influenzae тип b. Бактерии H. influenzae тип b относятся к гра- мотрицательным палочкам овоидной формы и вызывают ряд заболеваний у человека. Согласно книге Prokaryotes [2] типы вида H. influenzae впервые были выделены в 1889 г. во время эпидемии гриппа и описаны Пфайфером. Долгое время именно они считались возбудителями гриппа. В 1920 г. Winslow с соавтор. предложили название Haemophilus, а в 1933 г. Smith с соавтор. установили вирусную природу гриппа, а также то, что инфекция, вызванная H. influenzae была иного происхождения [3]. Однако наименование вида («influenzae», что в переводе означает «грипп») за данными микроорганизмами закрепилась.

На протяжении долгого времени данный вид менял свой таксономический статус, пока в 1984 г. не был окончательно включен в семейство Pasteurellaceae.

G. influenzae тип b синтезирует капсульный полисахарид, состоящий из повторяющихся единиц 5^-рибитол-(1^1)^-0-рибоза-3-фосфата (рисунок) и названный полирибозилрибитолфос- фатом (ПРФ) [4, 5].

Впервые структура капсульного полимера была описана в 1953 г. Zamenhof с соавтор. [6], однако в его составе выделяли только полирибо- зилфосфат. Наличие рибитола в структуре полисахарида было установлено в 1975 г. Crisel с соавтор. при помощи бумажной хроматографии и ядерно-магнитного резонанса [7].

Рис. 1. Структура ПРФ Haemophilus influenza тип b [5]

Основываясь на структуре капсульного полисахарида H. influenzae тип b, микроорганизмы данного серотипа также разделяются на две группы - тип I и тип II - причем большинство клинических изолятов относится к первому типу [8]. При помощи сиквенса генов hcsA и hcsB исследователи определяли принадлежность изолятов, выделенных от больных гемофильной инфекцией в Иране, к определенному генотипу. Установлено, что среди 50 исследованных культур H. influenzae четыре относились к серотипу b, половина из которых принадлежала ко II типу. Полученные результаты подчеркивают необходимость проведения таких исследований с целью усовершенствования вакцинопрофилактики [8].

По способности вызывать иммунный ответ капсульный полисахарид относится к Т-независимым антигенам 2-го типа, которые стимулируют образование антител без помощи главного комплекса гистосовместимости II класса. ПРФ запускает активацию комплементарного фактора C3d по комплимент альтернативному пути, в следствии чего примированные В клетки маргинальной зоны перемещаются в зародышевый центр и контактируют с комплексом полисахарид-C3d через CD21 рецептор комплимента [9].

Виды, относящиеся к роду Haemophilus, являются факультативными анаэробами. Клетки неподвижны и не образуют спор, оксидазополо- жительны и являются мезофилами - оптимальная для роста температура 35-37 °С. Для культивирования представителей рода Haemophilus используют натуральные (например, сердечно-мозговой бульон), синтетические и полусинтетические питательные среды, содержащие неорганические соли, глюкозу, пептон [10-14].

Выделение и идентификация H. influenzae тип b. В основном источниками выделения H. influenzae (в том числе и серотипа b) являются цереброспинальная жидкость, кровь, мокрота, ушная жидкость и верхние дыхательные пути детей, имеющих гемофильную инфекцию [4]. После изолирования определяют принадлежность представителей рода Haemophilus к определенному виду и серотипу. Идентификацию микроорганизмов, как правило, проводят общепринятыми методами по морфолого-культуральным, физиологобиохимическим, генетическим и серологическим признакам [11, 15-17].

Известно, что H. influenzae тип b обладает рядом уникальных отличительных особенностей и свойств, благодаря которым данный микроорганизм можно идентифицировать.

Традиционно считается, что представители рода Haemophilus для своей жизнедеятельности требуют Х (гемин) и V (никотинамидадениндину- клеотид, НАД) факторы и это является их отличительной особенностью, однако на данный момент установлено, что некоторые виды Actinobacillus и Pasteurella также нуждаются в V факторе [15]. Относительно H. influenzae тип b, данный вид способен расти только в присутствии данных двух факторов. В зависимости от вида и штамма большинство других представителей рода Haemophilus требуют для роста только один из них [15].

При использовании этого метода для идентификации H. influenzae тип b возникает трудность, связанная с тем, что потребность в Х и V факторах для данного вида одинакова с H. haemolyticus. В таком случае для их различия необходимо использовать дополнительные исследования, например, проверка типа гемолитической реакции. Известно, что H. haemolyticus способен к Я-гемолизису, что подтверждается по результатам дополнительного теста на кровяном агаре [15, 17].

Потребность штаммов H. influenzae в пор- фиринах различной структуры, а также влияние функциональных групп в их составе начали изучать еще в середине прошлого века [18]. Потребность в факторе X у H. influenzae обусловлена тем, что клетки данного микроорганизма не способны синтезировать фермент, превращающий S-аминолевулиновую кислоту (АЛК) в про- топорфирин IX (интермедиаты пути биосинтеза гема) [4]. Поэтому для роста представителей H. influenzae тип b в питательную среду обязательно необходимо вносить источник протопорфирина IX, например, в виде гемина. Установлено, что у H. influenzae присутствует активная феррохелата- за, которая катализирует введение двухвалентного железа в ядро протопорфирина с образованием гема. Предполагается, что оптимальная концентрация гема для роста H. influenzae - 0.1-10 мкг/мл.

НАД участвует в окислительно-восстановительных реакциях в клетке H. influenzae [4]. У H. influenzae полностью отсутствует биосинтетический путь получения НАД de novo. Накоплено достаточно информации о влиянии НАД на рост H. influenzae тип b при внесении фактора роста в питательную среду, однако мало информации о поглощении и преобразовании фактора V in vivo. Авторы [19] установили, что генетическая последовательность nad N у H. influenzae тип b Eagan отвечает за катаболизм НАД и его преобразование в никотинамидрибозид. Потребность в факторе V удовлетворяется путем внесения НАД или его производных в количестве 0.2-1.0 мкг/мл.

Кроме того, виды рода Haemophilus отличают по способности лизировать лошадиные эритроциты, присутствию каталазы и ферментативной активности в отношении сахаров [15-17].

На основе биохимических реакций, наличию уреазы, орнитиндекарбоксилазы и по продукции индола штаммы H. influenzae разделяют на биотипы. Всего различают восемь биотипов H. influenzae (I-VIII). Большинство изолятов типа b относятся к биотипу I, тогда как основная часть нетипируемых штаммов - к биотипу II-VI [16].

Учитывая метаболические особенности, представителей рода Haemophilus традиционно выращивают на шоколадном агаре, который получают путем добавления 5-10 % дефибринированной крови к основе кровяного агара. Смесь выдерживают при 80 °С в течение 15-20 мин до приобретения средой темнокоричневого цвета, напоминающего шоколад. Такое нагревание способствует высвобождению НАД из красных кровяных телец, а также приводит к инактивации НАД-разрушающих ферментов. В некоторых случаях в качестве источников НАД используют добавки, например, Isovitale X, а гемина - раствор гемоглобина [4, 16, 17]. Возможно приготовление шоколадного агара в лабораторных условиях из основы шоколадного агара с добавлением раствора гемоглобина и добавки, содержащей необходимые факторы роста. Также используют коммерческие готовые чашки со средой, в состав которых к основе - гонококковому агару - добавлен гемин и смесь различных добавок. При росте на шоколадном агаре H. influenzae тип b образует большие, круглые, гладкие, выпуклые, сероватые непрозрачные колонии [17]. Недостатком использования шоколадного агара для идентификации является невозможность наблюдения гемолитических свойств выделенной культуры, что не позволяет разделить различные виды рода Haemophilus [4].

Все признаки, характерные для H. influenzae, и позволяющие дифференцировать данный вид среди других представителей рода, представлены в определителе бактерий Берджи [15].

Необходимо отметить, что основной и наиболее простой способ определения серотипа b гемофильной палочки - реакция агглютинации со специфической сывороткой [16, 17].

Обобщенная схема по идентификации представителей рода Haemophilus предложена в работе [16]. Предварительно образцы материала высевают на кровяной или шоколадный агар, изучают морфолого-культуральные свойства полученной культуры и проводят ряд биохимических тестов (на оксидазу, каталазу, уреазу, рост в присутствии Х и V факторов).

Центром по контролю и профилактике заболеваний США для идентификации именно серотипа b H. influenzae предложена схема, включающая высев материала на шоколадный агар, изучение культуральных свойств полученных колоний, тест на оксидазу, рост в присутствии Х и V факторов, агглютинацию с сывороткой, специфичной к серотипу b. В случае положительных результатов делают предварительный вывод, что изолированная культура - H. influenzae тип b и при необходимости проводят дополнительные исследования (например, генетические) [17].

В настоящее время учеными предлагается использовать инструментальные методы для идентификации серотипа b. Так, в статье [20] описаны результаты применения времяпролетной масс- спектрометрии с лазерной ионизацией и десорбцией из жидкой матрицы (MALDI-TOF MS), которая позволила идентифицировать штаммы, относящиеся к H. influenzae тип b, с высокой чувствительность (100 %), специфичностью (99 %) и воспроизводимостью (98 %).

Ранее сотрудниками ФГУП СПбНИИВС ФМБА России был получен клинический изволят путем смыва свабом со слизистой из носоглотки больного ребенка. Из клинического изолята при помощи последовательного пассирования на твердой (шоколадный агар) и жидкой питательной среде выделили чистую культуру H. influenzae тип b. После изучения морфолого-культуральных, физиолого-биохимических, серологических и генетических (анализ последовательности генов 16 S rRNA) свойств было доказано, что изолированная культура относится к виду Haemophilus influenzae и обладает серотипом b [21].

Данный штамм был депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур «ГКПМ - Оболенск» Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» (ФБУН ГНЦ ПМБ) для целей национальной патентной процедуры под регистрационным номером В-7884. Область применения штамма обозначена как: высокоактивный продуцент капсульного полисахарида (полирибозилрибитолфосфата), используемый для промышленного производства. Максимальная продуктивность H. influenzae тип b В-7884 по полисахариду при оптимальных условиях составила 290-300 мкг/мл.

Таблица 1

Некоторые штаммы H. influenzae тип b - продуценты капсульного полисахарида ПРФ

гемофильная инфекция бактерия

ВЫВОДЫ

Получены и охарактеризованы по всем соответствующим показателям Главный и Рабочий банки клеток H. influenzae тип b В-7884, а также проведена отработка процесса культивирования штамма.

В таблице обобщена информация по некоторым описанным в литературе штаммам H. influenzae тип b, с приведением данных по их продуктивности и условиям пассирования.

На основании данных, приведенных в таблице, можно сделать вывод, что выделенный нами штамм по количеству синтезированного ПРФ не уступает, а иногда и превышает данные, указанные для других штаммов, в том числе и российских.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Всемирная организация здравоохранения // Еженедельный эпидемиологический бюллетень. 2013. Т. 88. С. 413-428.

2. Dworkin M., Falkow S., Rosenberg E., Schleifer K.-H., Stackebrandt E. The Prokaryotes. Springer. New York, 2006, vol. 6, 1194 p.

3. Centers for disease control and prevention. Epidemiology and prevention of vaccine-preventable Diseases. Haemophilus influenzae type b. Режим доступа: https://www.cdc.gov/vaccines/pubs/pinkbook/ hib.html#vaccines (дата обращения: 13.03.2017).

4. Богданович Т.М., Стецюк О.У, Кречико- ва О.И., Боронина Л.Г., Катосова Л.К., Фаустова М.Е., под редакцией Страчунского Л.С. // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2000. Т 2. № 2. С. 93-109.

5. Riza A., Nurainy N. // Proceed. Intern. Semin. Chemist. 2008, pp. 294-296.

6. Zamenhof S., Leidy G., Fitzgerald P. L., Alexander H.E., Chargaff E. // J. Biol. Chem. 1953. Vol. 203. N 2, pp. 695-704.

7. Crisel R.M., Baker R.S., Dorman D.E. // J. Biol. Chem. 1975. Vol. 250. N 13, pp. 4926-4930.

8. Bagherzadeh Khodashahri S., Siadat S.D., Rahbar M., Abdollahpour-Alitappeh M., Vaziri F., Rahnamaye-Farzami M., Mohammadzadeh M., Davari M., Fateh A., Masoumi M. // Iran J. Microbiol. 2015. Vol. 7. N 3, pp. 136-143.

9. Zarei A.E., Almehdar H.A., Redwan E.M.

Hib Vaccines: Past, present, and future perspectives. Режим доступа: https://www.cdc.gov/vaccines/

pubs/pinkbook/hib.html#vaccines (дата обращения: 13.03.2017).

10. Afshar M., Esmaily F., Aminian M., Asli E., Haadi A., Torabi M., Hatami A. // Arch. Razi Inst. 2012. Vol. 67. N 1, pp. 7-12.

11. Hamidi A., Beurret M.F. Patent United States, N 7,582,459 B2, 2004.

12. Ella K. M., Ramasamy V., Naidu M. G., Sarma A. D. Patent WO, N 2014009971, 2014.

13. Елкина С.И., Сергеев В.В., Ванеева Н.П. Апарин П.Г., Львов В.Л., Ястребова Н.Е., Орлова О.Е. Патент РФ, № 2257412, 2005.

14. Anderson P., Pitt J., Smith D.H. // Infect. Immun. 1976. Vol. 13. N 2, pp. 581-589.

15. Заварзин Г.А. Определитель бактерий Берджи. Москва, Мир, 1997, Т. 1, 2, 800 с.

16. UK Standards for microbiology investigations bacteriology. Identification of Haemophilus species and the HACEK group of organisms, 2015, N 3, 35 p.

17. Centers for Disease Control and Prevention. Identification and characterization of Haemophilus influenzae. Режим доступа: https://www.cdc.gov/ meningitis/lab-manual/chpt09-id-characterization-hi. html (дата обращения: 13.03.2017).

18. Granick S., Gilder H. // J. Gen. Physiol. 1946. Vol. 30, pp. 1-13.

19. Schmidt-Brauns J., Herbert M., Kemmer G., Kraiss A., Schlцr S., Reidl J. // Int. J. Med. Microbiol. 2001. Vol. 291. N 3, pp. 219-225.

20. Mвnsson V., Resman F., Kostrzewa M., Nilson B., Riesbeck K. // J. Clin. Microbiol. 2015. Vol. 53. N 7, pp. 2215-2224.

21. Салимова Е.Л., Конон А.Д., Трухин В.П., Петровский С.В., Красильников И.В. // Актуальная биотехнология. 2016. № 3 (18). С. 77-81.

22. Takagi M., Cabrera-Crespo J., Baruque- Ramos J., Zangirolami T.C., Raw I., Tanizaki M.M. // Appl. Biochem. Biotechnol. 2003. Vol. 110. N 2, pp. 91-100.

23. Esmaily F., Aminian M., Tavangar A.R., Hadi A. // Arch. Razi Instit. 2011. Vol. 66. N 1, pp. 43-49.

24. Maitre-Wilmotte G., Speck D., Rokbi B. Patent United States, N 8,673,617, 2014.

25. Arsang A., Tabatabaie A., Vaziri F., Nejati M., Zolfaghari M. R., Fateh A., Rahimi Jamnani F., Bahrmand A. R., Siadat S. D. // Minerv. Biotecnolog. 2017. Vol. 29. N 1, pp. 17-23.

26. American type culture collection. Haemophilus influenzae (Lehmann and Neumann) Winslow et al. (ATCC® 10211™). Режим доступа: https://www.lgcstandards-atcc.org/Products/

All/10211.aspx#generalinformation (дата обращения: 13.03.2017).

27. Ванеева Н.П., Елкина С.И., Апарин П.Г. Патент РФ, № 2465316, 2012.

REFERENCES

1. Vsemirnaya organizatsiya zdravookhraneniya // Ezhenedel'nyi ehpidemiologicheskii byulleten', 2013, Vol. 88, pp. 413-428.

2. Dworkin M., Falkow S., Rosenberg E., Schleifer K.-H., Stackebrandt E. The Prokaryotes. Springer, New York, 2006, vol. 6, 1194 p.

3. Centers for disease control and prevention. Epidemiology and prevention of vaccine-preventable Diseases. Haemophilus influenzae type b. Available at: https://www.cdc.gov/vaccines/pubs/pinkbook/hib. html#vaccines (accessed 13 March 2017).

4. Bogdanovich T.M., Stetsyuk O.U., Krechikova O.I., Boronina L.G., Katosova L.K., Faustova M.E., pod redaktsiei Strachunskogo L.S. // Klinicheskaya mikrobiologiya i antimikrobnaya khimioterapiya, 2000, Vol. 2, No. 2, pp. 93-109.

5. Riza A., Nurainy N. // Proceed. Intern. Semin. Chemist, 2008, pp. 294-296.

6. Zamenhof S., Leidy G., Fitzgerald P. L., Alexander H.E., Chargaff E. // J. Biol. Chem, 1953, Vol. 203, No. 2, pp. 695-704.

7. Crisel R.M., Baker R.S., Dorman D.E. // J. Biol. Chem, 1975, Vol. 250, No. 13, pp. 4926-4930.

8. Bagherzadeh Khodashahri S., Siadat S.D., Rahbar M., Abdollahpour-Alitappeh M., Vaziri F., Rahnamaye-Farzami M., Mohammadzadeh M., Davari M., Fateh A., Masoumi M. // Iran J. Microbiol, 2015, Vol. 7, No. 3, pp. 136-143.

9. Zarei A.E., Almehdar H.A., Redwan E.M.

Hib Vaccines: Past, present, and future perspectives. Available at: https://www.cdc.gov/vaccines/pubs/ pinkbook/hib.html#vaccines (accessed 13 March 2017).

10. Afshar M., Esmaily F., Aminian M., Asli E., Haadi A., Torabi M., Hatami A. // Arch. Razi Inst, 2012, Vol. 67, No. 1, pp. 7-12.

11. Hamidi A., Beurret M.F. Patent United States, no. 7,582,459 B2, 2004.

12. Ella K.M., Ramasamy V., Naidu M.G., Sarma A.D. Patent WO, no. 2014009971, 2014.

13. Elkina S.I., Sergeev V.V., Vaneeva N.P. Aparin P.G., L'vov V.L., Yastrebova N.E., Orlova O.E. Patent RF, no. 2257412, 2005.

14. Anderson P., Pitt J., Smith D.H. // Infect. Immun, 1976, Vol. 13, No. 2, pp. 581-589.

15. Zavarzin G.A. Opredelitel' bakterii Berdzhi. Moskow, Mir, 1997, vol. 1, 2, 800 p.

16. UK Standards for microbiology investigations bacteriology. Identification of Haemophilus species and the HACEK group of organisms, 2015, No. 3, 35 p.

17. Centers for Disease Control and Prevention.

Identification and characterization of Haemophilus influenzae. Available at: https://www.cdc.gov/ meningitis/lab-manual/chpt09-id-characterization-hi. html (accessed 13 March 2017).

18. Granick S., Gilder H. // J. Gen. Physiol, 1946, Vol. 30, pp. 1-13.

19. Schmidt-Brauns J., Herbert M., Kemmer G., Kraiss A., Schlцr S., Reidl J. // Int. J. Med. Microbiol, 2001, Vol. 291, No. 3, pp. 219-225.

20. Mвnsson V., Resman F., Kostrzewa M., Nilson B., Riesbeck K. // J. Clin. Microbiol, 2015, Vol. 53, No. 7, pp. 2215-2224.

21. Salimova E.L., Konon A.D., Trukhin V.P., Petrovskii S.V., Krasil'nikov I.V. // Aktual'naya biotekhnologiya, 2016, No. 3 (18), pp. 77-81.

22. Takagi M., Cabrera-Crespo J., Baruque-Ramos J., Zangirolami T.C., Raw I., Tanizaki M.M. // Appl. Biochem. Biotechnol, 2003, Vol. 110, No. 2, pp. 91-100.

23. Esmaily F., Aminian M., Tavangar A.R., Hadi A. // Arch. Razi Instit, 2011, Vol. 66, No. 1, pp. 43-49.

24. Maitre-Wilmotte G., Speck D., Rokbi B. Patent United States, no. 8,673,617, 2014.

25. Arsang A., Tabatabaie A., Vaziri F., Nejati M., Zolfaghari M. R., Fateh A., Rahimi Jamnani F., Bahrmand A. R., Siadat S. D. // Minerv. Biotecnolog, 2017, Vol. 29, No. 1, pp. 17-23.

26. American type culture collection. Haemophilus influenzae (Lehmann and Neumann) Winslow et al. (ATCC® 10211™). Available at: https://www.lgcstandards-atcc.org/Products/

All/10211.aspx#generalinformation (accessed 13 March 2017).

27. Vaneeva N.P., Elkina S.I., Aparin P.G. Patent RF, no. 2465316, 2012.

Размещено на Allbest.ru