Коррекция нарушений в сыворотке крови и тканях полости рта крыс при моделировании метаболического синдрома
Влияние витаминно-минерального комплекса "Сера активная" на биохимические показатели сыворотки крови и тканей пародонта крыс в условиях моделирования метаболического синдрома. Противовоспалительное и антиоксидантное действие на уровне организма крыс.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | статья |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 31.05.2021 |
| Размер файла | 25,3 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Статья по теме:
Коррекция нарушений в сыворотке крови и тканях полости рта крыс при моделировании метаболического синдрома
Пиндус Татьяна Алексеевна, к. мед.н., Львовский медицинский институт
Деньга Оксана Васильевна, д. мед.н., Доктор медицинских наук Государственное учреждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины»
Ткаченко Евгения Константиновна, к. биол. н., Государственное учреждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины»
Summary
CORRECTION OF VIOLATIONS IN THE BLOOD SERUM AND TISSUES OF THE RAT PATH AT THE RATS AT THE MODELING OF THE METABOLIC SYNDROME
Pindus T.A., the candidate of medical Sciences Lviv medical institute, Denga O. V., doctor of medical Sciences, Professor
State Establishment “The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery National Academy of Medical Science of Ukraine”
Tkachenko E. K., candidate of biology, State Establishment “The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery National Academy of Medical Science of Ukraine”
Introduction. Metabolic syndrome refers to a group of metabolic disorders, in which there is a high prevalence of inflammatory-destructive period on taldi seases. Sulfur is one of the vitally important macro and micro elements, carrying out numerous function sin the body, includingtheparticipationintheconstructionofthegeneticmaterialofcells.
Purpose of the study. Study of the influence of the vitamin-mineral complex "Sulfur Active" on the biochemical parameters of bloodserumand period on taltissuesofratsunderconditionsofexperimentalmetabolicsyndrome.
Materials and methods. The metabolic syndrome was modeled by feedingrats of interiorpork fat and a 10percent fructosesolutionadlibitum. Thebiologicallyactivesupplement "Activesulfur" was administered orally. The duration of the experiment was 70 days.
Results.
Conclusions. Thevitamin-mineralcomplex "Sulfur Active" had a favorableeffectonallthestudiedbiochemicalparametersofbloodserumandperiodontaltissue, significantly reducing the level of triglycerides, total cholesterol, glucose, uricacid, improving the functional state of the liver, significantly reducing visceral obesity of animals, and also locally in period on taltissues activated enzy mesof antioxidant protection.
Keywords: experiment, rats, metabolicsyndrome, vitamin-mineralcomplex "Sulfuractive".
Аннотация
Показано, что витаминно-минеральный комплекс «Сера активная», перорально вводимый крысам на фоне модели «метаболический синдром», оказал благоприятное влияние на все изученные биохимические показатели сыворотки крови и ткани пародонта, значительно снижая уровень триглицеридов, общего холестерина, глюкозы, мочевой кислоты, улучшая функциональное состояние печени, существенно уменьшая висцеральное ожирение животных. Кроме того комплекс оказал противовоспалительное и антиоксидантное действие на уровне организма крыс, локально в тканях пародонта активировал ферменты антиоксидантной защиты, снижал число и глубину поражений зубов крыс кариесом.
Ключевые слова: эксперимент, крысы, метаболический синдром, витаминно-минеральный комплекс «Сера активная».
Метаболический синдром (МС) относится к группе метаболических нарушений, включающих абдоминальное ожирение, высокий уровень триглицеридов, снижение липопротеидов высокой плотности (ИПВП), высокое кровяное давление, повышенное содержание глюкозы.
У больных с метаболическими нарушениями наблюдается и высокая распространенность воспалительно-деструктивных заболеваний пародонта [1, с. 1708-1724]. МС и его компоненты приводят к развитию тяжелых хронических заболеваний - атеросклерозу, сердечно-сосудистым осложнениям, сахарному диабету 2-го типа, создают условия для возникновения и развития воспалительно-дистрофических изменений в пародонте [2, с. 33-38].
Макро- и микроэлементы играют существенную роль в регулировании большинства процессов в организме человека. К жизненно необходимым макроэлементам относится и сера. Среднее содержание её в организме млекопитающих составляет 0,1-0,9 % от массы тела [3, с. 213]. Сера выполняет в организме многочисленные функции, начиная с участия в построении генетического материала клеток и выработки энергии. Она поступает в организм в связанном виде в составе органических белковых соединений - аминокислот (цистеин, цистин, метионин), биологически активных веществ - витаминов (тиамин), ферментов, гормонов (инсулин) [4, с. 2-11].
Целью настоящего исследования было изучение влияния витаминно-минерального комплекса «Сера активная» на биохимические показатели сыворотки крови и тканей пародонта крыс в условиях моделирования МС.
Материалы и методы. В опыт были взяты белые крысы-самцы 1,5-2-х мес. возраста. Интактную группу составили 6 животных, которые получали стандартный рацион вивария. Во второй (контрольной) группе 7 крысам моделировали МС ежедневным дополнительным пероральным введением в пищу нутряного свиного жира - источник липидов (из расчета 40 % от средней массы крыс) и 10-процентного раствора фруктозы adlibitum - источник углеводов (вместо питьевой воды). В третьей (основной) группе 6 крысам на фоне моделирования МС перорально ежедневно вводили биологически активную добавку «Сера активная» (производства ИИ «Европа плюс», Украина) по 1/6 таблетки 5 раз в неделю. Одна таблетка «Серая активная» содержит 30 мг серы, 4 мг витамина Е, 0,6 мг витамина В1, 0,6 мг витамина В2, 0,8 мг витамина В6 и вспомогательные вещества -- лактозу, сорбит, крахмал, стеарат кальция. Длительность эксперимента составила 70 дней, по завершению которого крыс умерщвляли под наркозом и собирали образцы.
Таблица 1 - Влияние комплекса «Сера активная» на массу висцеральных органов крыс при моделировании метаболического синдома, М±ш, г
|
Органы |
Группы |
Интактная |
модель МС |
МС+ «Сера активная» |
|
|
-печень+жир |
7,9±0,7 |
10,9±0,6 р<0,005 |
8,4±0,5 р1<0,006 |
||
|
-почки+жир |
6,9±0,7 |
10,8±0,9 р<0,005 |
7,8±0,5 р1<0,01 |
||
|
-яички+жир |
7,1±0,9 |
10,3±0,6 р<0,01 |
8,2±0,7 р1<0,05 |
Иримечание: р -- показатель достоверности отличий от интактной группы, р1 -- от группы «Модель МС».
При изучении биохимических показателей в сыворотке крови животных, получавших комплекс «Сера активная» на фоне моделирования МС, крови, выделяли печень, почки, яички с абдоминальной жировой клетчаткой, челюсти, слизистую оболочку полости рта (СОИР). Объектами биохимических исследований служили сыворотка крови, надосадочная жидкость гомогенатов СОИР (25 мг/мл) и кости альвеолярного отростка (50 мг/мл).
В сыворотке крови и тканях крыс определяли унифицированными методами, используя коммерческие наборы реактивов производства DAC- SpectroMed (Молдова), Felicit (Украина), Biolatest (Чехия), содержание триглицеридов, холестерина (ХС), липопротеидов высокой плотности (ЛИВИ), глюкозы, мочевой кислоты, сиаловых кислот, активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), глутатион-перокси-дазы (ГИО) [5, с. 2], каталазы [6, с. 16-18], кислой фосфатазы (КФ), а также содержание малоновогодиальдегида (МДА) [7, с. 16].
В костной ткани альвеолярного отростка также определяли содержание кальция, фосфора [8, с. 616], гликозаминогликанов [9, с. 330-332] и оксипролина [10, с. 283-285].
Результаты исследования. Иод влиянием комплекса «Сера активная» при моделировании МС у крыс снижалась по сравнению с группой «модель МС» масса почек (с жиром) на 28 %, масса яичек (с жиром) - на 20 %, а масса печени (с жиром) - на 23 % (табл. 1).
Наблюдалось достоверное уменьшение по сравнению с контрольной группой концентрации триглицеридов, холестерина, увеличивалось содержание ЛИВИ в 1,6 раза (табл. 2).
Таблица 2 - Биохимические показатели сыворотки крови крыс при моделировании метаболического синдрома и действии комплекса «Сера активная», М±ш
|
Группы Иоказатели" |
интактная |
модель МС |
МС+ «Сера активная» |
|
|
Содержание: -триглицеридов (ммоль/л) |
1,53±0,03 |
2,22±0,02 р<0,001 |
1,72±0,02 р1<0,001 |
|
|
-холестерина (ммоль/л) |
5,31±0,09 |
6,31±0,03 р<0,001 |
5,87±0,05 р1<0,001 |
|
|
-ЛИВИ (ммоль/л) |
4,04±0,18 |
1,69±0,05 р<0,001 |
2,78±0,02 р1<0,001 |
|
|
-глюкозы (ммоль/л) |
2,32±0,07 |
5,20±0,07 р<0,001 |
3,20±0,06 р1<0,001 |
|
|
-мочевой кислоты (мкмоль/л) |
258,10±4,13 |
467,10±6,90 р<0,001 |
291,10±7,52 р1<0,001 |
|
|
- сиаловых кислот, ммоль/л |
1,95±0,06 |
2,50±0,05 р<0,001 |
2,10±0,07 р1<0,002 |
|
|
- МДА, нмоль/л |
4,30±0,40 |
5,80±0,30 р<0,01 |
4,71±0,36 рі<0,01 |
|
|
Активность: -АЛТ (ммоль/л) |
1,42±0,16 |
3,09±0,13 р<0,001 |
1,83±0,08 рі<0,001 |
|
|
-АсАТ (мкмоль/л) |
0,53±0,010 |
0,81±0,01 р<0,001 |
0,63±0,02 рі<0,001 |
|
|
- каталазы, мкат/мл |
5,10±0,60 |
3,42±0,25 р<0,05 |
4,47±0,35 р<0,05 |
|
|
- ГПО, мкмоль/с-мл |
1,70±0,15 |
1,21±0,15 р<0,05 |
1,63±0,13 р<0,05 |
Примечание: р - показатель достоверности отличий от интактной группы; рі- от группы «Модель МС».
Снижение при этом активности трансамелогеназ АЛТ и АсАТ в сыворотке крови крыс в 1,7 и 1,3 раза соответственно, говорит об улучшении при этом функционирования печени у животных. Кроме того, в сыворотке крови крыс снижались под действием витаминно-минерального комплекса по сравнению с контрольной группой концентрация глюкозы в 1,6 раза и уровень мочевой кислоты на 38% (табл. 2).
В табл. 3 представлены результаты влияния комплекса на зубо-челюстную систему крыс в условиях моделирования МС.
Таблица 3 - Влияние комплекса «Сера активная» на состояние зубо-челюстной системы крыс при моделирова-нии метаболического синдрома, М±ш
|
Группы Показатели' |
Интактная |
модель МС |
МС + «Сера активная» |
|
|
Резорбция кости альвеолярного отростка (%): |
32,0±2,5 |
36,2±1,3 р>0,1 |
35,0±1,3 рі>0,1 |
|
|
Число кариозных поражений (в среднем на 1 крысу) |
1,5±0,2 |
2,7±0,2 р<0,001 |
1,7±0,4 рі<0,05 |
|
|
Глубина поражений зубов кариесом (в баллах) |
1,4±0,3 |
3,0±0,3 р<0,005 |
1,7±0,4 рі<0,02 |
|
|
Содержание в костных тканях: -кальция, ммоль/г |
0,35±0,02 |
0,32±0,01 р>0,1 |
0,33±0,03 рі>0,1 |
|
|
-фосфора, ммоль/г |
1,45±0,12 |
1,10±0,11 р<0,05 |
1,47±0,17 рі<0,05 |
|
|
-общего оксипролина, мкмоль/г |
342,0±9,0 |
297,0±7,0 р<0,001 |
325,0±8,0 рі<0,05 |
|
|
- ГАГ, мг/г |
0,70±0,07 |
0,38±0,04 р<0,05 |
0,65±0,02 рі<0,001 |
|
|
-МДА, нмоль/г |
4,20±0,25 |
4,64±0,37 р>0,1 |
4,45±0,14 рі>0,1 |
|
|
Активность в костных тканях: -кислой фосфатазы, нкат/г |
10,4±1,2 |
24,4±1,8 р<0,001 |
10,9±1,1 рі<0,001 |
|
|
-каталазы, мкат/г |
16,3±1,5 |
9,96±1,23 р<0,01 |
13,5±1,31 рі<0,05 |
|
|
-ГПО, мкмоль/с-г |
71,0±6,2 |
30,7±5,52 р<0,001 |
62,7±5,02 рі<0,001 |
Примечание: р - показатель достоверности отличий от интактной группы; р1 - от группы «Модель МС».
Под действием комплекса число кариозных поражений у крыс снижалось в 1,6 раза, а глубина поражений зубов кариесом - в 1,8 раза. В кости альвеолярного отростка при этом активность КФ снижалась по сравнению с контрольной группой в 2,3 раза и не отличалась от данных интактной группы, а содержание ГАГ увеличилось в 1,7 раза, приближаясь к показателям интактной группы (табл.3). Кроме того, под действием витаминно-минерального комплекса на фоне моделирования МС достоверно увеличилось в костных тканях крыс содержание фосфора в 1,34 раза, общего оксипролина - в 1,1 раза, активность каталазы в 1,36 раза и ГПО - в раза, что свидетельствует об улучшении в них обменных процессов (табл. 3).
О снижении под действием комплекса «Сера активная» воспалительных явлений в слизистой оболочке полости рта животных при моделировании МС свидетельствовало уменьшение в гомогенатах СОПР активности КФ на 22 % и увеличение активности антиоксидантных ферментов - каталазы в 1,12 раза и ГПО - в 1,14 раза. Комплекс также положительно повлиял на состояние у крыс коллагена, оцениваемого по уровню оксипролина, содержание которого в СОПР увеличилось на 7 % (табл. 4).
Таблица 4 - Влияние комплекса «Сера активная» на биохимические показатели слизистой оболочки полости рта крыс при моделировании метаболического синдрома, М±ш
|
Группы Показатели |
Интактная |
модель МС |
МС + «Сера активная» |
|
|
Содержание -общего оксипролина, мкмоль/г |
442,1±9,2 |
403±10,6 р<0,05 |
433±7,26 р1<0,05 |
|
|
-МДА, нмоль/г |
46,2±7,3 |
54,7±5,8 р>0,1 |
51,6±8,34 р1>0,1 |
|
|
Активность: -КФ, нкат/г |
18,8±0,4 |
22,3±0,8 р<0,001 |
17,4 ±0,40 р1<0,001 |
|
|
-каталазы, мкат/г |
72,3±8,1 |
65,5±7,23 р>0,1 |
73,6±1,14 р1>0,1 |
|
|
- ГПО, мкмоль/с-г |
88,5±11,3 |
74,0±12,6 р1>0,1 |
84,3±6,29 р1>0,1 |
Примечание: р - показатель достоверности отличий от интактной группы; рі- от группы «Модель МС».
Изучение влияния витаминно-минерального комплекса «Сера активная» на состояние межклеточного матрикса соединительной ткани пародонта показало положительное его влияние на состояние коллагена, связанного с увеличением оксипролина в СОПР и в кости альвеолярного отростка крыс (табл. 3, 4). Достоверное снижение содержания сиаловых кислот в сыворотке крови также говорит о частичном восстановлении гликопротеинов межклеточного матрикса под влиянием комплекса (табл. 2).
Выводы
крыса кровь пародонт сера
Витаминно-минеральный комплекс «Сера активная», перорально вводимый крысам на фоне модели МС, оказал положительное влияние на биохимические показатели сыворотки крови и тканей пародонта, значительно снижая уровень триглицеридов, общего холестерина, глюкозы, мочевой кислоты, улучшая функциональное состояние печени, существенно уменьшая висцеральное ожирение животных. Кроме того, комплекс оказал противовоспалительное и антиоксидантное действие на уровне организма крыс, активируя локально в тканях пародонта ферменты антиоксидантной защиты, снижал число и глубину поражений зубов крыс кариесом.
Список литературы
1. Chaffe B.W., Weston S.J. Association between chronic period on taldise aseandobesity: a systematic review and meta-analysis // B.W. Chaffe, S.J. Weston // J. Periodontal. - 2010. - №81. - P. 1708-1724.
2. Ковалева О. Н. Метаболический синдром: проблемы диагностики и прогностические критерии / О.Н. Ковалева, Н.А. Кравченко, Т.Н. Амбросова // Medicine Internal. - 2008. - №1(7). - С.33-38.
3. Скальный А. В. Химические элементы в физиологии и экологии человека. - М., Мир. - 2004. - 213 с.
4. Соколовский В.В. Тиоловые антиоксиданты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальное воздействие (обзор) / В. В. Соколовский // Вопросы мед.химии. - 1988. - Т. XXXIV. - №6. - С. 2-11.
5. А.С.922637 СССР. МКИ 01 33/48. Способ определения активности глутатион-пероксидазы в биологических тканях / В. Пахомова, Н. Козлянина, Г. Крюкова. - Опубл. 25.04.82, Бюл. №15. - 2 с.
6. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы / М. Королюк., Д. Иванова, И. Майорова // Лабораторное дело. - 1988. - №1. - С. 16-18.
7. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости [методические рекомендации] / Левицкий А.П., Деньга О. В., Макаренко О. А. [и др.]. -- Одесса: КП «Одеська міська друкарня», 2010. -- 16 с.
8. Горячковский А.М. Клиническая биохимия в лабораторной диагностике / А. М. Горячковский. - Одеса: Екологія, 2005. - 616 c.
9. Метод определения гликазаминогликанов в биологических жидкостях. / [П. Шараев, В. Пешков, Н. Соловьева, Т. Широкова, Н. Зворыгина, А. Солопаев, Н. Алексеева] // Лаб. дело. - 1987. - 5. - С. 330-332.
10. Шараев П.Н. Метод определения свободного и связанного оксипролина в сыворотке крови. / П. Шараев. // Лаб. дело. - 1981. -№ 5. - С. 283-285.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Реперфузионный синдром - сложный комплекс нарушений, возникающих в результате восстановления кровотока в ранее ишемизированной ткани. Изучение механизма патологии в результате моделирования системной воспалительной реакции реперфузионного синдрома у крыс.
статья [2,6 M], добавлен 06.04.2011Роль печени в организме. Биохимические основы формирования алкогольной болезни печени. Экспериментальное моделирование патологии печени у крыс. Влияние карсила и эссенциале на состояние печени крыс при острой интоксикации CCl4 и этиловым спиртом.
дипломная работа [10,2 M], добавлен 06.06.2016Развитие экспериментальной язвенной болезни (ЯБ) желудка у 3-х месячных самцов крыс линии Вистар. Клиническое исследование сыворотки крови животных после формирования ЯБ желудка. Действие фармакологического препарата актовегин на заживление ЯБ желудка.
курсовая работа [125,2 K], добавлен 08.09.2011Биологическая роль серосодержащих соединений. Рабдомиолиз: биохимия, этиология, патогенез. Различия в содержании белковых SH-групп у крыс. Определение белка в тканях по методу Лоури. Определение SH-групп в печени, почках и мозге крыс методом Фоломеева.
дипломная работа [1003,6 K], добавлен 20.06.2012Лучевые и реперфузионные поражения при воздействии ионизирующего излучения. Легкие крысы при моделировании реперфузионного синдрома. Обоснование сочетанного применения антиоксиданта корвитина и ингибитора протеиназ контрикала при исследуемой патологии.
статья [2,6 M], добавлен 06.04.2011Этиология и патогенез метаболического синдрома, артериальная гипертензия как его проявление. Инсулинорезистентность в генезе гипертензии. Основные критерии диагностики метаболического синдрома, современные методы лечения и профилактики заболевания.
реферат [98,2 K], добавлен 05.05.2009Механизм развития ДВС-синдрома. Нарушение свёртываемости крови по причине массивного освобождения из тканей тромбопластических веществ. Звенья патогенеза ДВС-синдрома. Особенности его лечения. Этиологические формы острого и подострого ДВС-синдрома.
презентация [570,2 K], добавлен 29.05.2013Исследование клинической эффективности классического иглоукалывания и вариантов фармакупунктуры у больных с наличием метаболического синдрома. Коррекция нарушений метаболизма углеводов и липидов гомеопатическими препаратами, вводимыми в точки акупунктуры.
дипломная работа [844,0 K], добавлен 31.03.2018Исследование активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови кроликов при однократном введении четыреххлористого углерода и процессе лечения токсических поражений с использованием традиционных и нетрадиционных методов детоксикации организма.
дипломная работа [1,1 M], добавлен 15.07.2012Биохимические и клинические показатели сыворотки крови при заболеваниях почек. Динамика активности трансаминаз; концентрации креатинина, билирубина, электролитов и глюкозы у больных почечной недостаточностью в условиях применения метода гемосорбции.
дипломная работа [336,1 K], добавлен 03.11.2015Эпидемиология, этиология и патогенез острого и хронического пиелонефрита. Изменения биохимических показателей крови, показателей азотистого и белкового обмена. Морфологическое исследование элементов осадка мочи. Определение креатинина в сыворотке крови.
курсовая работа [166,8 K], добавлен 03.11.2015Общая характеристика ДВС-синдрома - нарушения свертываемости крови по причине массивного освобождения из тканей тромбопластических веществ. Этиология и механизмы развития заболевания. Методы лабораторных исследований, диагностики и лечения ДВС-синдрома.
презентация [187,2 K], добавлен 01.11.2014Исследование закономерностей морфофункциональных изменений в тканях тимуса крыс-самцов на различных этапах онтогенеза при хроническом воздействии серосодержащего природного газа газоконденсатного месторождения и применения комплекса антиоксидантов.
статья [21,8 K], добавлен 18.08.2017Хронический и острый панкреатит. Активность амилазы, липазы, трипсина. Глюкоза крови при остром и хроническом панкреатитах. Маркеры печеночной недостаточности. Определение активности альфа-амилазы, билирубина в сыворотке крови, гаммаглутаминтрансферазы.
курсовая работа [338,7 K], добавлен 01.12.2014Основные причины синдрома диссеминированного внутрисосудистого свёртывания крови (ДВС-синдром) и что его провоцирует. Образование большого количества микротромбов и агрегатов кровяных клеток. Распространенность, тяжесть и скорость развития ДВС-синдрома.
презентация [428,9 K], добавлен 27.03.2015- Биоморфологические изменения в тканях пародонта при горизонтальных и вертикальных перемещениях зубов
Изучение состава и функций пародонта или комплекса тканей, окружающих зуб и удерживающих его в альвеоле. Этиология и патогенез заболеваний пародонта. Виды перегрузки. Примеры травматической окклюзии. Сущность ортодонтического лечения. Реакция пародонта.
презентация [316,7 K], добавлен 12.03.2015 Определение глюкозы в крови на анализаторе глюкозы ECO TWENTY. Определение креатинина, мочевины, билирубина в крови на биохимическом анализаторе ROKI. Исследование изменения биохимических показателей крови при беременности. Оценка полученных данных.
отчет по практике [67,4 K], добавлен 10.02.2011Кислотно-основное состояние (КОС) крови, его определение, влияние на физиологическое состояние организма человека, механизмы поддержания, нарушения, профилактика и коррекция. Методика забора крови для исследования КОС и характеризующие его показатели.
реферат [27,2 K], добавлен 28.09.2009Поджелудочная железа и ее роль в обмене веществ. Механизмы нарушения функциональной деятельности поджелудочной железы при панкреатите. Определение билирубина в сыворотке крови у больных панкреатитом. Показатели активности альфа-амилазы в сыворотке крови.
дипломная работа [72,7 K], добавлен 20.02.2016Средства, применяемые для профилактики и лечения лучевой болезни. Витамины и противомикробные средства. Диуретическое действие цистамина на суточный диурез и экскрецию натрия у крыс и собак. Влияние на функцию почек аскорбиновой кислоты и витамина.
реферат [23,4 K], добавлен 19.06.2010
