Разработка и биологические исследования комплексного извлечения с мембраностабилизирующей и антиоксидантной активностью

Локарев Александр Владимирович, кандидат технических наук, ведущий научный сотрудник, ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», Россия

Огай Марина Алексеевна, доктор фармацевтических наук, профессор кафедры фармацевтической технологии с курсом медицинской биотехнологии, Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России

Степанова Элеонора Федоровна, доктор фармацевтических наук, профессор, профессор кафедры фармацевтическойтехнологиискурсоммедицинскойбиотехнологии,Пятигорскиймедико

фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России

Ковтун Елена Владимировна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармацевтическойтехнологиискурсоммедицинскойбиотехнологии,Пятигорскиймедико фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России

Чахирова Анна Анатольевна, кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической технологии с курсом медицинской биотехнологии, Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России

Нам Наталия Леонидовна, кандидат химических наук, доцент кафедры химии, ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева», Россия

Ижагаева Сурият Гаджиевна, ассистент кафедры управления и экономики фармации, медицинского и фармацевтического товароведения, ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России

Проведены технологические исследования разработки комплексного лекарственного сбора, извлечение из которого влияет на процессы, возникающие в результате поражений суставов воспалительной этиологии.

Результатом проведенных на парамециях исследований стало создание оптимального комплекса, включающего в себя 13 объектов лекарственного растительного сырья. Биологический скриниг, осуществленный на парамециях, подтвердил наличие мембраностабилизирующего и антиоксидантного эффекта в разработанном комплексе, что позволяет предполагать наличие противовоспалительного действия. Технологический аспект получения комплексного извлечения состоял из метода ремацерации, где соотношение «сырье : экстрагент» составляет 1 : 8. Исследования показали, что полученное спирто-водное извлечение из комплекса лекарственного растительного сырья соответствует требованиям Государственной фармакопеи XIII издания и позволяет отнести его к категории 4 Б микробиологической чистоты. Соответствие полученных данных указанным требованиям позволит использовать его в качестве как самостоятельного лекарственного средства, так и полупродукта при разработке более сложных лекарственных форм.

development and biological investigations of complex extraction WITH MEMBRANE STABILIZING AND ANTIOXIDANT ACTIVITY

Lokarev Aleksandr V., Cand. Sci. (Technic.), leading researcher, All-Russian Research and Technological Institute of the Biological Industry, Shchelkovo district, village of Biokombinata

Ogay Marina A., Dr. Sci. (Pharm.), Professor of Department, Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - a branch of Volgograd State Medical University

Stepanova Eleonora F., Dr. Sci. (Pharm.), Professor, Professor of Department, Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - a branch of Volgograd State Medical University

Kovtun Elena V., Cand. Sci. (Pharm.), Senior teacher, Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - a branch of Volgograd State Medical University

Chakhirova Anna A., Cand. Sci. (Pharm.), Associate Professor of Department, Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - a branch of Volgograd State Medical University

Nam Nataliya L., Cand. Sci. (Chemic.), Associate Professor of Department, Russian State Agrarian University - Moscow Timiryazev Agricultural Academy

Izhagaeva Suriyat G., Assistant, Volgograd State Medical University

Technological studies have been carried out on the development of a complex medicinal collection, the extraction from which affects the processes arising as a result of lesions of the joints of inflammatory etiology. The result of the studies conducted on paramecia was the creation of an optimal complex including 13 objects of medicinal plant materials. Biological screening carried out on paramecia confirmed the membrane-stabilizing and antioxidant effect of the developed complex, which may suggest an anti-inflammatory action. The technological aspect of obtaining the complex extraction consisted of a remaceration method, where the ratio of “raw materials: extractant” is 1: 8. The studies have shown that the resulting alcohol-water extraction from the complex of medicinal plant raw materials meets the requirements of the State Pharmacopoeia of the XIII edition and makes it possible to refer it to Category 4 B microbiological purity. Compliance of the obtained data with the specified requirements will allow it to be used both as an independent medicinal product and as an intermediate product in the development of more complex dosage forms.

Key words: membrane stabilizing effect, antioxidant effect, complex phytoextract, alcohol-water extraction, ointments, paramecia.

Введение

В настоящее время в России наблюдается рост интереса к фитотерапии как у врачей, так и у пациентов [2, 3]. Лекарственные средства (ЛС) растительного происхождения обладают достаточно широким спектром биологического действия, что позволяет использовать их для лечения и профилактики многих заболеваний. Они входят в более чем 85 групп фармакотерапевтических ЛС и в большинстве своем не имеют равноценных синтетических заменителей [5]. Эти ЛС содержат вещества, созданные в живой клетке, и поэтому могут органично участвовать в обменных процессах, что дает возможность применять их при хронических заболеваниях в течение длительного времени. ЛС растительного происхождения имеют относительно низкую токсичность, не вызывают аллергических реакций, свойственных их синтетическим аналогам [10, 11, 12].

Галеновые препараты на основе указанных ЛС, а именно - настойки и экстракты, являются одними из старейших лекарственных форм официальной медицины. Сегодня эти лекарственные системы не потеряли своей актуальности, они постоянно развиваются и, как следствие, имеют фармакопейный статус во многих государствах [7, 8]. Возрастающая популярность растительных ЛС, доказавших свою безопасность и эффективность, требует расширения их арсенала. На практике обычно используют не одно, а несколько растений (лекарственные сборы) [12, 13, 14], что увеличивает спектр применения препарата, усиливает действие отдельных видов лекарственного растительного сырья, способного влиять на различные патологические процессы, в том числе такие, которые присущи артриту и артрозу.

Артрит и артроз - это заболевания, связанные с воспалительным поражением суставов. Патологический процесс сопровождается дискомфортом, болезненностью пораженной хрящевой ткани, при этом подвижность пораженного участка ограничивается, нарушая привычный ход жизни пациента, существенно ухудшая ее качество [18, 19, 21]. Проблема лечения и профилактики артритов и артрозов, как и других хронических заболеваний, требует многостороннего и скрупулезного подхода к использованию в терапии как синтетических препаратов, так и препаратов на основе лекарственного растительного сырья, поскольку требует длительного, а по большому счету пожизненного использования [9, 20]. И именно растительные объекты, биологически активные вещества, которые созданы живой клеткой, способны мягко и без побочных эффектов корректировать подобные заболевания [22].

Цель: провести технологические исследования комплексного лекарственного сбора, извлечение из которого оказывает влияние на процессы, возникающие в результате поражений суставов воспалительной этиологии.

Материалы и методы исследования

Первым этапом исследований стал подбор оптимального состава. Для достижения поставленной цели использовали биологический тест-объект Paramecium caudatum. Биологические исследования на Рагатесіит caudatum заключались в том, что в ходе эксперимента анализировали их размножение, рост, характер движения и время остановки [1, 4].

Среди всего многообразия микроорганизмов парамеции являются одним из наиболее удобных тест-объектов для медико-экологических, фармакокинетических и токсикологических исследований, так как достаточно изучены, имеют большие размеры, позволяющие работать с отдельными организмами [1, 6]. Для них разработаны методы культивирования, обеспечивающие необходимую стандартизацию культуры относительно недорогими методами, и среди них отсутствуют патогенные формы [1, 4, 6, 16, 17]. Выбор парамеций как живой модели для исследования различных веществ обусловлен еще и тем, что они являются эукариотическими клетками и реагируют на внешнюю среду как самостоятельные организмы [1, 4, 6, 16, 17].

В фармакологии парамеции как биологическую модель используют для скрининга ЛС антиоксидантного (регулирующего перекисное окисление липидов (ПОЛ)) и мембраностабилизирующего типов действия [1, 4, 6, 16, 17].

Парамециям как живым саморегулирующим структурам свойственна высокая степень адаптивности, то есть они способны вырабатывать защитные реакции, направленные на ослабление повреждающего воздействия различных раздражителей, причем устойчивость к раздражителям некоторое время после его удаления сохраняется [1, 8]. Это свойство парамеций используют для скрининга природных соединений, обладающих адаптогенными свойствами [13, 14, 15, 16].

В качестве контроля токсичности наиболее распространено изучение реакций роста и размножения в питательной среде с добавлением химических веществ, а затем реакции хемотаксиса. Критерий токсичности - различие концентраций живых парамеций в опытной и контрольной пробах, а также концентрация веществ, вызывающих морфологические и функциональные изменения клеток. В эксперименте были использованы две группы парамеций: экспериментальная, защищенная разработанной комбинацией, и контрольная с одинаковым количеством особей в каждой.

В медицинских и микробиологических исследованиях существуют различные модификации микроскопического счета. Для проведения эксперимента из взвеси с организмами забирают несколько капель и подсчитывают под микроскопом число парамеций. Микроскопический метод позволяет проводить визуальные наблюдения за изменениями функциональных и структурных показателей парамеций под влиянием веществ различной природы в условиях как острого, так и хронического экспериментов. растительное лекарственное сырье сустав

В качестве фармакологического индикатора (токсиканта), преимущественно повреждающего липидную часть мембраны, предлагается пероксид водорода 1 %, который расщепляется до перекис- ных радикалов in vivo, инициирующих процесс (ПОЛ) мембран. Фармакологическим индикатором, повреждающим в основном структуру белковой биомембраны, является 14 % этиловый спирт, приводящий к денатурации и ферментных, и мембранных белков [8, 11].

Методика проведения процесса экстракции заключалась в следующем. В мацерационный бак помещали измельченное сырье и заливали 5-кратным количеством экстрагента (70 % спирт этиловый и 10 % метиленхлорид). Добавление метиленхлорида существенно увеличивало выход флавоноидов, что доказано количественным определением флавоноидов при экстракции чистым этанолом и в смеси с ним.

Экстракцию проводили при комнатной температуре. По истечении 24 ч вытяжку сливали и фильтровали, сырье отжимали. Повторно заливали 3-кратным количеством экстрагента и в течение 12 ч экстрагировали при комнатной температуре. Вторую порцию вытяжки сливали, фильтровали, а сырье отжимали снова. Извлечения объединяли. Периодическая смена экстрагента значительно увеличивает скорость диффузии и разность концентраций, что при меньшей затрате времени на извлечение позволяет полнее истощить сырье и уменьшить диффузионные потери. После завершения экстракции объединяли полученные вытяжки с отжимом.

Объединенное спирто-водное извлечение отстаивали в течение суток и фильтровали, упаривали под вакуумом 20-25 % сухого остатка.

Результаты исследования и их обсуждение

В ходе эксперимента анализировали размножение, рост и характер движения, время остановки Parametium caudatum.

Представленная методика позволяет подбирать оптимальные комбинации из растительного л е- карственного сырья и формировать на их основе различные препараты [1].

В процессе многочисленного подбора и исследования комбинаций действующих веществ на Рагатесіит caudatum была выбрана оптимальная комбинация, включающая в себя 13 объектов из 23 проанализированных. По данным литературы отобранные объекты обладают противовоспалительной, регенерирующей и, как следствие, противоартрозной активностью [7, 9].

В число 23 исследованных объектов вошли: ромашка (цветки), календула (цветки), тмин (плоды), сосна (почки), тысячелистник (трава), мята (лист), шиповник (плоды), фенхель (плоды), солодка (корень), полынь (трава), чабрец (трава), зверобой (трава), чистотел (трава), лабазник (корни), кровохлебка (корневище), лапчатка (корневище), девясил (корень), змеевик (корень), элеутерококк (корень и корневище), боярышник (плоды), укроп (плоды), подорожник (листья), мать-и-мачеха (листья).

После эксперимента на парамециях была отобрана окончательная комбинация ЛС растительного происхождения, представленная в таблице 1.

Таблица 1

Состав оптимальной комбинации спирто-водных извлечений из лекарственного растительного сырья

Результаты определения протективного действия и токсичности выбранной комбинации по отношению к клеточным ядам отражены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2

Результаты определения влияния разработанной комбинации

Размер парамеций, защищенных разработанной комбинацией, был меньше, чем в контрольной группе. Однако по шкале активности эта экспериментальная группа была очень активна, и по истечении 3 суток количество парамеций в 3 раза превосходило контроль. Анализ данных, приведенных в таблице 3, подтверждает, что комбинация в экологическом отношении для парамеций благоприятна.

Таблица 3

Изучение защиты парамеций от действия токсикантов по времени прекращения движения (острый опыт)

Примечание: * - уровень значимости изменений р < 0,05 относительно контрольной группы

Разработанная комбинация существенно удлиняла время прекращения движения парамеций под воздействием клеточных ядов - спирта этилового и пероксида водорода. Удлинение времени прекращения движения парамеций под воздействием этилового спирта характеризует мембраностабилизирующую активность разработанной комбинации, подобранные компоненты которой в качественном и количественном соотношении препятствуют повреждению белковой части биомембраны [1, 16]. Антиоксидантная активность проверена под воздействием раствора пероксида водорода по удлинению времени прекращения движения парамеций, что связано со способностью компонентов разработанной комбинации тормозить ПОЛ мембраны.

Таким образом, опираясь на теоретические исследования и результаты биологического скрининга на парамециях, был предложен состав комплексного экстракта, который содержит ромашку (цветки), календулу (цветки), шиповник (плоды), фенхель (плоды), тмин (плоды), сосну (почки), тысячелистник (трава), полынь горькую (трава), чабрец (трава), зверобой (трава), чистотел (трава), мяту (листья), солодку (корень).

Календула, зверобой, мята, тмин - это заживляющие и успокаивающие растительные компоненты, флавоноиды, в значительных количествах присутствующие в комплексном экстракте, способны противодействовать воспалительным процессам и застойным явлениям в венозном кровообращении [3, 5]. Солодка - это известный адаптоген, она способна бороться с аллергическими проявлениями, а содержащийся в экстракте чабрец закрепляет этот антиаллергический эффект и обладает противовоспалительными свойствами, что позволяет не опасаться побочного действия многосоставного экстракта. Плоды шиповника, почки сосны, трава тысячелистника, цветы ромашки имеют весомый антимикробный и витаминизирующий эффект [3, 5, 7, 15].

После разработки оптимальной комбинации комплексного сбора следующим этапом исслед о- ваний стал подбор экстрагента и способа экстракции.

В качестве экстрагента был выбран 70 % спирт этиловый с добавлением 10 % метиленхлорида.

Затем была проведена работа по совершенствованию комплексной технологии извлечения суммарных галеновых фитоконцентратов для увеличения их количественных и качественных показателей с учетом состава растительного сырья и направленности использования конечного продукта.

Был выбран метод ремацерации в соотношении 1 : 8, описанный в разделе «Материалы и методы». Комплексное извлечение получали в мацерационном баке.

Стадии технологического процесса: подготовка ЛС растительного происхождения и экстрагента, получение комплексного спирто-водного извлечения из ЛС растительного происхождения, фасовка и упаковка.

В выбранном комплексе ЛС растительного происхождения содержатся, помимо флавоноидов, терпеновые соединения, которые при хранении и переработке теряют легколетучие вещества (эфирные масла, смолы), поэтому борьба с потерями на всех стадиях хранения и переработки имеет исключительное значение. Эфирные масла должны быть максимально извлечены, несмотря на разный характер распределения их в растениях: железистые волоски, чешуйки, ходы, вместилища. Для эффективного их извлечения большое значение имеет оптимальная форма и размер измельченных частиц. Следует учитывать и то, что воздушно-сухое растительное сырье при вальцевании образует много пыли, согревается и эфирное масло, попавшее на открытые поверхности, интенсивно испаряется. Кроме того, сухие листья и стебли после выхода из валка возвращают свою прежнюю форму. Очевидно, необходимо создать особые условия для измельчения лекарственного сырья, содержащего легколетучие вещества (эфирные масла, смолы).

Была опробована пропитка купажной смеси сырья раствором касторового масла в этаноле, что позволяет при вальцевании растворять в пропиточной жидкости эфирные масла и сформировать лепесток толщиной 0,2-0,4 мм. При этом вдавленная в лепесток пропиточная жидкость впоследствии значительно улучшает массообмен при экстракции. Касторовое масло является средством- фиксатором эфирных масел, препятствуя его испарению при подготовительных операциях. Из литературы известно, что пропитка сырья предотвращает налипание на валки некоторых видов сырья: почки тополя, сосны, березы, цветки календулы и др. Проведенные исследования показали, что пропитывание выбранного сырья перед вальцеванием дает возможность за счет улучшения массообмена и сокращения потерь увеличить содержание эфирных масел в продукте (фитоконцентрате) на 5-7 % по сравнению с контрольным процессом без пропитки.

Полученное спирто-водное извлечение было подвергнуто микробиологическим исследованиям, результаты которых представлены в таблице 4.

Таблица 4

Результаты определения микробиологической чистоты спирто-водного извлечения из комплекса растительных ЛС

Примечание: * КОЕ - колониеобразующих единиц в 1 мл продукции

Таким образом, проведенные исследования показали, что полученное спирто-водное извлечение из комплекса растительных ЛС соответствует требованиям Государственной фармакопеи XIII издания, и позволяют отнести его к категории 4 Б микробиологической чистоты. Соответствие полученных данных требованиям Государственной фармакопеи XIII издания позволит использовать спирто-водное комплексное извлечение из лекарственного растительного сырья в качестве и самостоятельного средства, и полупродукта при разработке более сложных лекарственных форм.

Заключение

1. Сконструирован комплексный лекарственный сбор, который влияет на звенья патологического процесса, развивающегося в макроорганизме при артрите и артрозе.

2. Результатом проведенных исследований на парамециях стал оптимальный комплекс следующего состава: ромашка (цветки), календула (цветки), тмин (плоды), сосна (почки), тысячелистник (трава), мята (лист), шиповник (плоды), фенхель (плоды), солодка (корень), полынь (трава), чабрец (трава), зверобой (трава), чистотел (трава), лабазник (корни), кровохлебка (корневище), лапчатка (корневище), девясил (корень), змеевик (корень), элеутерококк (корень и корневище), боярышник (плоды), укроп (плоды), подорожник (листья), мать-и-мачеха (листья).

3. Разработанная комбинация существенно удлиняет время прекращения движения парамеций, возникающих под воздействием клеточных ядов - спирта этилового и пероксида водорода. У д- линение времени прекращения движения парамеций, характеризует мембраностабилизирующую активность разработанной комбинации, подобранные компоненты, которой препятствуют в качественном и количественном соотношении повреждению белковой части биомембраны. Антиоксидантная активность связана со способностью компонентов разработанной комбинации тормозить перекисное окисление липидов мембраны, что подтверждается удлинением времени прекращения движения парамеций под воздействием раствора пероксида водорода при ее введении. Наличие мембраностабилизирующего и антиоксидантного эффекта в разработанном комплексе может характеризовать опосредованно наличие и противовоспалительного, и противоартритного, и противоартрозного действия.

4. Технологический аспект получения комплексного извлечения состоял из метода ремацерации, где соотношение «сырье : экстрагент» составляет 1 : 8.

5. Исследования показали, что полученное спирто-водное извлечение из комплекса лекарственного растительного сырья соответствует требованиям Государственной фармакопеи XIII издания и позволяет отнести его к категории 4 Б микробиологической чистоты. Данные, полученные в ходе работы, дают возможность использовать извлечение из комплекса лекарственного растительного сырья в качестве самостоятельного средства, а также как полупродукт при разработке более сложных лекарственных форм.

Список литературы

1. Балабаньян, В. Ю. Разработка системы скрининга лекарственных веществ антиоксидантного и мембраностабилизирующего типов действия : автореф. ... канд. фарм. наук / В. Ю. Балабьян. - М., 1998. - 24 с.

2. Барнаулов, О. Д. Детоксикационная фитотерапия, или противоядные свойства лекарственных растений / О. Д. Барнаулов. - М. : Политехника, 2007. - 416 с.

3. Барнаулов, О. Д. Фитотерапия больных сердечно-сосудистыми заболеваниями / О. Д Барнаулов. - СПб. : Элби, 2002. - 224 с.

4. Бурновский, И. В. Основы экологии свободноживущих инфузорий : автореф. ... д-ра биол. наук / И. В. Бурновский. - М., 1986. - 43 с.

5. Вайс, Р. Ф. Фитотерапия : руководство / Р. Ф. Вайс, Ф. Финтельманн. - М. : Медицина, 2004. - 552 с.

6. Дассайе, Ч. Р. Разработка экспресс-метода фармакологической и токсикологической оценки индивидуальных лекарственных средств и комплексных препаратов (составов) на одноклеточном организме Paramecium caudatum : дис. ... канд. фарм. наук / Ч. Р. Дассайе. - М., 1996. - 177 с.

7. Ковалева, Н. Г. Лечение растениями / Н. Г. Ковалева. - М. : Медицина, 1972. - 352 с.

8. Кудрин, А. Н. Система экспресс-методов интегральной оценки биологической активности индивидуальных и комплексных препаратов на биологических объектах / А. Н. Кудрин, В. В. Ананин, В. Ю. Балабьян // Российский химический журнал. - 1997. - Т. 41, № 5. - С. 114-123.

9. Маловастый, К. С. Фитотерапия в ветеринарии, традиционной и нетрадиционной медицине /

10. Огай, М. А. Исследование гипогликемического фитопрепарата / М. А. Огай, Э. Ф. Степанова, Ю. К. Василенко // Химия в технологии и медицине : мат-лы Всероссийской научно-практической конференции (Махачкала, 17-18 мая 2001 г.) / под ред. Ш. М. Самудова. - Махачкала : Дагестанский государственный университет, 2001. - С. 25-26.

11. Огай, М. А. Разработка и исследование гипогликемического фитосбора / М. А. Огай, Э. Ф. Степанова // Вестник Воронежского государственного университета. Серия : Химия, биология, фармация. - 2006. - № 2. -

12. Огай, М. А. Разработка и исследование адаптогенного фитопрепарата / М. А. Огай // Медикоэкологические проблемы лиц экстремальных профессий : работоспособность, здоровье, реабилитация и экспертиза профессиональной пригодности : мат-лы Четвертого Международного научно-практического конгресса. (Москва, 18-22 октября 2004 г.) / под ред. В. Д. Власова. - М. : Национальный научно-практический центр сердечно-сосудистой хирургии имени А. Н. Бакулева, 2004. - С. 371.

13. Огай, М. А. Разработка технологии, методов стандартизации гипогликемического фитосиропа / М. А. Огай, Э. Ф. Степанова // Материалы 57-й Региональной конференции по фармации, фармакологии и подготовке кадров (Пятигорск, 12-15 октября, 2002 г.) / под ред. Е. Н. Вергейчика. - Пятигорск : Пятигорская государственная фармацевтическая академия (Невинномысская городская типография), 2002. - С. 209-212.

14. Огай, М. А. Разработка корригированных растительных препаратов для профилактики и лечения сахарного диабета / М. А. Огай, Э. Ф. Степанова, В. В. Гаврась, М. А. Веретенникова, В. А. Великанова // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения : мат-лы VI Международного съезда (Санкт-Петербург, 4-6 июля 2002 г.) / под ред. А. Е. Александрова. - СПб. : Научноисследовательский институт химии Санкт-Петербургского государственного университета, 2002. - С. 114-116.

15. Огай, М. А. Фитопрепараты для профилактики и лечения некоторых осложнений сахарного диабета / М. А. Огай, Э. Ф. Степанова, В. В. Гаврась, М. А. Веретенникова, В. А. Великанова // Фитодизайн в современных условиях : мат-лы Международной научно-практической конференции (Белгород, 14-17 июня 2010 г.) / под ред. В. К. Тохтарь, В. Н. Сорокопудова. - Белгород : ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», 2010. - С. 329-331.

16. Огай, М. А Экспресс-анализ биологической активности фитопрепаратов / М. А. Огай,

17. Степанова, Э. Ф. Использование экспресс-методов оценки биологической активности на культуре клеток при разработке фитопрепаратов адаптогенного действия / Э. Ф. Степанова, И. Н. Андреева, М. А. Огай // Фармация на современном этапе - проблемы и достижения : сборник научных трудов / под ред. Л. В. Мошковой. - М. : 2000. - Т. 39, ч. 1. - С. 299-302.

18. Basnyat, S. Ayurvedic medicine for rheumatoid arthritis / S. Basnyat, S. L. Kolasinski // Curr. Rheumatol. Rep. - 2014. - Vol. 16, № 8. - Р. 435.

19. Daily, J. W. Efficacy of Turmeric Extracts and Curcumin for Alleviating the Symptoms of Joint Arthritis : A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomized Clinical Trials / J. W. Daily, M. Yang, S. Park // J. Med. Food. - 2016. - Vol. 19, № 8. - Р. 717-729.

20. Lin, B. Inhibitory effects of the root extract of Litsea cubeba (lour.) pers. on adjuvant arthritis in rats / B. Lin, H. Zhang, X. X. Zhao, K. Rahman, Y. Wang, X. Q. Ma, C. J. Zheng, Q. Y. Zhang, T. Han, L. P. Qin //

J.Ethnopharmacol. - 2013. - Vol. 147, № 2. - Р. 327-334.

21. Ramadan, G. Protective effects of ginger-turmeric rhizomes mixture on joint inflammation, atherogenesis, kidney dysfunction and other complications in a rat model of human rheumatoid arthritis / G. Ramadan,

O.El-Menshawy // Int. J. Rheum. Dis. - 2013. - Vol. 16, № 2. - Р. 219-229.

22. Zhang, C. F. Antioxidant effects of Genkwa flos flavonoids on Freund's adjuvant-induced rheumatoid arthritis in rats / C. F. Zhang, S. L. Zhang, X. He, X. L. Yang, H. T. Wu, B. Q. Lin, C. P. Jiang, J. Wang, C. H. Yu,

Z.L. Yang, C. Z. Wang, P. Li, C. S. Yuan // J. Ethnopharmacol. - 2014. - Vol. 153, № 3. - Р. 793-800.

References