Визначання LD50 цисплатину для щурів при внутрішньоочеревинному введенні
Експериментальне визначення LD50 цисплатину для щурів при внутрішньоочеревинному введенні методом пробіт-аналізу. Врахування видової чутливості при екстраполяції даних щодо використаних доз в клініці. Методика визначення доз при певному способі введення.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | статья |
| Язык | украинский |
| Дата добавления | 19.09.2021 |
| Размер файла | 23,0 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Размещено на http://www.allbest.ru/
Український НДІ медицини транспорту, Одеса
Визначання LD50 цисплатину для щурів при внутрішньоочеревинному введенні
Пихтєєва О.Д., Третьяков О.М.
Проведено експериментальне визначення LD50 цисплатину для щурів при внутрішньоочеревинному введенні методом пробіт-аналізу. Використаний Цисплатин “Ебеве” (концентрат) з концентрацією 1 мг/мл. Вводили розчин цисплатину в 0,9% NaCl. За тваринами спостерігали 14 днів після введення. Встановлено наступні показники: LD16 = 4,65 мг/кг, LD50 = 6,27 мг/кг, LD84 = 7,89 мг/кг, LD100 =8,71 мг/кг.
Ключові слова: LD50, цисплатин, щури, внутрішньоочеревинне введення
Определение LD50 цисплатина для крыс при внутрибрюшинном введении
Пыхтеева Е.Д., Третьяков А.М.
Украинский НИИ медицины транспорта, Одесса
Проведено экспериментальное определение LD50 цисплатина для крыс при внутрибрюшинном введении методом пробит-анализа. Использован Цисплатин «Эбеве» (концентрат) с концентрацией 1 мг/мл. Вводили раствор цисплатина в 0,9% NaCl. За животными наблюдали 14 дней после введения. Установлены следующие показатели LD16 = 4,65 мг/кг, LD50 = 6,27 мг/кг, LD84 = 7,89 мг/кг, LD100 = 8,71 мг/кг.
Ключевые слова: LD50 цисплатин, крысы, внутрибрюшинное введение
Cystplastine LD50 determination in rats with intraperitoneal administration
Pykhteieiva E.D., TretyakovA.M.
Ukrainian Research Institute of Transport Medicine
Cisplatin LD50 to rats by intraperitoneal injection was experimentally determined by probit analysis. Cisplatin Ebeve (concentrate) was used with a concentration of 1 mg/ml. Cisplatin was administered dissolved in 0,9% NaCl. Animals were observed for 14 days after administration. The following indicators were established: LD16 = 4.65 mg/kg, LD50 = 6.27 mg/kg, LD84 = 7.89 mg/kg, LD100 = 8.71 mg/kg.
Key words: LD50, cisplatin, rats, intraperitoneal injection.
Вступ
Найбільш дешевим і в багатьох випадках досить ефективним протипухлинним препаратом багато років залишається цисплатин (ЦП) та інші похідні платини, тому вони широко використовується в світі при традиційній хіміотерапії та гіпертермічній хіміоперфузії (HIPEC). Загальнотоксичні ефекти препаратів платини є логічним продовженням їх протипухлинної активності і добре вивчені при внутрішньовенному застосуванні. HIPEC традиційно вважається менш небезпечним з точки зору побічних ефектів, проте ряд факторів (підвищена температура, перемішування при хіміоперфузіі, пошкодження поверхневих епітеліальних клітин внутрішніх органів) може сприяти дещо іншим механізмам транспорту, всмоктування і міжорганного розподілу хіміотерапевтичного препарату.
Раніше в клінічних спостереженнях [1] нами були показані прояви системної токсичності, нефротоксичні та гепа- тотоксичні ефекти дії ЦП при HIPEC, а також відмінності мікроелементного обміну до і після операції. На прояви системної токсичності ЦП впливає загальний стан, вік, обсяг циторедуктив- ної операції, наявність інтеркурентних неонкологічних захворювань, що знижує можливість узагальнення отриманих в клініці результатів. Невелика кількість прооперованих пацієнтів, яким було виконано HIPEC з цисплатином, вимагає для перевірки і уточнення спостережуваних ефектів проведення модельного експерименту на лабораторних тваринах.
Не дивлячись на давнє застосування ЦП, дані щодо LD50 при в/о введенні тваринам нечисленні та суперечливі. Так [2] А.І Нерсесян для мишей при в/о введенні наводять LD50 для ЦП 11,0 мг/кг, в інструкції до препарату ЛД50 у щурів -- 44 мг/м2, у мишей 39 мг/м2, що вимагає перерахунку площі поверхні на вагу тварини. Крім того не вказаний спосіб введення. MSDS (MATERIAL SAFETY DATA SHEET) -- це документ, який розробляють виробники хімічних речовин. В цьому документі повинні бути вказані основні характеристики речовини (в т.ч. токсикологічні). MSDS на ЦП [3] містить ЛД50 для щурів лише при пероральному надходженні -- 25,8 мг/кг. MSDS Cayman Chemical Company на ЦП [4] наводить LD50 при інтрапері- тонеальному введенні для щурів як 6,4 мг/кг (для мишей 6,6 мг/кг). MSDS на ЦП [5] фірми Pfizer Ltd наводить 8,0 мг/ кг як LD50 для щурів при в/в введенні. Зазвичай, LD50 при в/в введенні суттєво нижче, ніж при в/о. Для мишей при одноразовому в/в введенні за даними Гуськової ТА. LD50 для цисплатину була 12,5 мг/кг [6]. Машевська О.В. і Пентюк [7] дозу 7 мг/кг при в/о введенні для щурів оцінюють як сублетальну. Крім наведених вище даних, з яких видно, що неможливо знайти достовірні значення LD50 при в/о введенні для щурів, зрозуміло, що на показник LD50 впливають умови лабораторного утримання та розведення тварин, тому при плануванні експерименту необхідно було встановити LD50 саме для популяції тварин, яка залучається в експеримент.
цисплатин внутрішньоочеревинний
Таблиця 1
Експериментальні дані для розрахунку LD50 цисплатину для щурів при внутрішньоочеревинному введенні*
|
Доза ЦП, мг/кг |
Кількість тварин |
Кількість загиблих |
|
|
4 |
5 |
0 |
|
|
5 |
5 |
1 |
|
|
6 |
5 |
2 |
|
|
7 |
5 |
4 |
|
|
8 |
5 |
4 |
|
|
10 |
5 |
5 |
Примітка: час спостережень 14 діб після введення
Матеріали та методи
З урахуванням вимог біоетики, обсягу необхідних експериментів, кількості матеріалу для проведення біохімічних, морфологічних досліджень, визначення мікроелементного обміну та необхідності проведення різнопланових маніпуляцій в якості піддослідних тварин обрано статево зрілих лабораторних щурів лінії Вістар з масою 180-220 г Тварин отримували з віварію Одеського національного медичного університету, який обладнаний відповідно існуючих санітарно-гігієнічних норм. В період адаптації щурів утримували в умовах віварію з вільним доступом до їжі та води, що попередньо досліджувались на вміст ВМ. В жодному випадку вміст Zn, Cu, Hg, Cd, Pb не виходив за межі допустимих значень у харчових продуктах згідно МБТ [8] та ДСанПіН 2.2.4-171-10 “Гігієнічні вимоги до води питної, призначеної для споживання людиною”[9]). Перед початком експерименту проводили визначення температури та маси тіла тварин, а також загальний аналіз крові. За добу до проведення дослідження тварин не годували, але доступ до води зберігався. Використаний Цисплатин “Ебеве” (ЦП) (концентрат) з концентрацією 1 мг/мл. Внутрішньоочеревинно водили розчин розрахованої концентрації у стерильному розчині 0,9% NaCl.
Результати та їх обговорення
Вимір летальної дози для окремої особини практично неможливий, так як загибель від дози, навіть більшої, ніж смертельна, настає не відразу, а через кілька днів або навіть тижнів. Якщо ж доза недостатня, щоб викликати загибель піддослідної особини, це з'ясовується також лише через деякий час. За цей період в організмі відбуваються відновні процеси. Відновлення, проте, не буває повним, і тому повторювати дослід на одних і тих об'єктах з деякими інтервалами і кожен раз збільшуючи дозу неможливо.
Точно встановити дозу, що викликає 100 % летальність, при порівняльній оцінці різних чинників не тільки не просто, але і не виправдано у зв'язку з витратою експериментальних об'єктів і діючих речовин. Практично цілком достатньо встановити дозу, при якій гине 50 % особин, яку і приймають за усереднену характеристику летальної дії шкідливого чинника (LD50). Для визначення LD50 найчастіше використовується спеціальний статистичний метод -- пробіт-аналіз. При цьому для визначання LD50 на осі абсцис відкладають логарифми доз досліджуваного препарату, а по осі ординат -- відсоток загибелі піддослідних особин, трансформований в умовні імовірнісні величини, так звані пробіти (від англійського probability unit -- імовірнісна одиниця).
Зараз для розрахунку LD50 методом пробіт аналізу розроблені численні комп'ютерні програми, в які вносяться наступні дані: доза при певному способі введення (мг/кг), кількість піддослідних тварин, яким введено цю дозу та кількість тварин, які загинули протягом 14 діб після введення [10]. Використовуються декілька доз, з розрахунку виключаються дози, при яких не загинула жодна тварина або загинули всі.
Експериментальні дані для розрахунку LD50 цисплатину для щурів при внутрішньоочеревинному введенні наведені в таблиці 1. Цисплатин вводили одноразово, внутрішньоочеревинно в асептичних умовах в розчині 0,9% хлориду натрію в стерильній дистильованій воді. За тваринами спостерігали 14 діб.
Для розрахунку показників LD використана програма StatPlus.
Установлено, що при одноразовому внутрішньоочеревинному введенні ЦП показники LD, розраховані методом пробіт-аналізу, для нашої популяції щурів складають
LD16 = 4,65
LD50 = 6,27
LD84 = 7,89
LD100 = 8,71
Висновок
Експериментально встановлена LD50 для щурів при внутрішньоочеревинному введені склала 6,27 мг/кг. Оскільки при в/о введенні дози 4 мг/кг загибелі тварин протягом 14 днів не відбувалось, а також з урахуванням видової чутливості при екстраполяції даних щодо використаних доз в клініці (приблизно 1 мг/кг (50-100 мг/м2)), для моделювання HIPEC з цисплатином доцільно використовувати дозу 4 мг/кг.
Література
1. Пыхтеева Е.Д., Максимовский В.Е., Пыхтеева Е.Г., Большой Д.В. Токсикоки- нетика и токсикодинамика платины при проведении процедуры hipec с использованием цисплатина при канцерома- тозе брюшины/ Актуальные проблемы транспортной медицины - 2016 - №46 (4) - С. 113-120.
2. А.К.Нерсесян. Индукция микроядер новым противоопухолевым препаратом платиновой группы циклоплатаном в костном мозге мышей./ Химико-фармацевтический журнал -2002. -Т.36 №4 С. 9-10
3. https://www.sigmaaldrich.com/MSDS/ MSDS/DisplayMSDSPage.do? country=UA&language=en&product Number=479306&brand=ALDRICH& PageToGoToURL=https%3A%2F% 2Fwww.sigmaaldrich.com%2Fcatalog% 2Fsearch%3Fterm%3D15663-27- 1%26interface%3DCAS%2520No.%26N% 3D0% 26mode% 3Dpartialmax% 26lang%3Den%26region%3DUA% 26focus% 3Dproduct
4. https://www.caymanchem.com/msdss/ 13119m.pdf
5. https://www.pfizer.com/sites/default/ files/products/material_safety_data / PZ00042.pdf
6. Гуськова Т.А. Токсикология лекарственных средств, М.: Издательский дом “Русский врач”. -2003. - 154 с. 2003
7. Машевська О. В., Щентюк О. О. Оцінка протективної дії десферіоксаміну, три- метазидину, диметилтюсечовини та геністеїну при ураженні нирок щурів цисплатином //Актуальні проблеми сучасної медицини: Вісник української медичної стоматологічної академії. - 2009. - Т. 9. - №. 4-3 (28).
8. Збірник важливих офіційних матеріалів з санітарних і протиепідемічних питань. Видання офіційне. Під загальною редакцією Головного державного санітарного лікаря України В.Ф.Марієвського. У шести томах. Том 1. Частина 2. Медико-биологические требования и санитарные нормы качества продовольственного сырья и пищевых продуктов. Київ, 1995. 246 с.
9. ДсанПіН2.2.4-171-10"Гігієнічні вимоги доводипитної, призначеної для споживання людиною”.
10. Бабич П. Н. Применение пробит-анализа в токсикологии и фармакологии с использованием программы MICROSOFT EXCEL для оценки фармакологической активности при альтернативной форме учета реакций. Бабич ПН, Чубенко АВ, Лапач СН. - 2004.
References
1. Pyhtieieva Ye.D., Maksimovsky V.Ye., Pyhtieieva E.G., Bolshoy D.V.
Toxicokinetics and toxicodynamics of platinum during the procedure hipec with cisplatin in peritoneal carcinomatosis treatment/ Actual problems of transport medicine - 2016 - No. 46 (4) - P 113-120.
2. AK Nerssesyan. The induction of a micro nucleus with a new antitumor preparation of the platinum group by cycloplatan in the bone marrow of mice. / Chemistry and Pharmaceutical Journal -2002. -T.36 No. 5 P. 9-10
3. https://www.sigmaaldrich.com/MSDS/
MSDS/DisplayMSDSPage.do? country = UA & language = en & product number = 479306 & brand = ALDRICH &
PageToGoToURL = https% 3A% 2F% 2Fwww.sigmaaldrich.com% 2Fcatalog% 2Fsearch% 3Fterm% 3D15663-27-1% 26interface% 3DCAS% 2520No.% 26N% 3D0% 26mode% 3Dpartialmax % 26lang% 3Den% 26region% 3DUA% 26focus% 3Dproduct
4. https://www.caymanchem.com/msdss/ 13119m.pdf
5. https://www.pfizer.com/sites/default/ files/products/material_safety_data/ PZ00042.pdf
6. Guskova T.A Toxicology of Drugs, Moscow: Russian Medical Doctor's Publishing House. -2003 - 154 s. 2003
7. Mashevskaya O.V., Shchentyuk O. O.
8. Estimation of protective effect of desferrioxamine, trimetazidine,
dimethylthiourea and genistein in damages of kidney of rats with cisplatin / / Actual problems of modern medicine: Bulletin of the Ukrainian Medical Stomatological Academy. - 2009. - Vol. 9. - No. 4-3 (28).
9. Collection of important official materials on sanitary and anti-epidemic issues. Edition is official. Under the general editorship of the Chief State Sanitary Doctor of Ukraine V.F.Maryevsky. In six volumes. Volume 1. Part 2. Medical and biological requirements and sanitary
10. norms of quality of food raw materials and food products. Kiev, 1995. 246 p.
11. DsanPiN2.2.4-171-10 “Hygienic requirements of a prepotent, intended for human consumption”.
12. Babich P N. The use of probe analysis in toxicology and pharmacology using the MICROSOFT EXCEL program to evaluate pharmacological activity in an alternative form of reaction accounting. Babich PN, Chubenko AV, Lapach CH. - 2004
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Дослідження особливостей і динаміки змін реакцій у білих щурів при інтраназальному введенні нітроксоліну, як інтегрального показника фізіологічного стану організму та токсичного впливу на нервову систему. Принцип методу водного лабіринту Морріса.
статья [22,4 K], добавлен 18.08.2017Основні клінічні прояви ураження нирок. Дослідження впливу різних способів введення протипухлинної системи Реній-Платина та її компонентів на діагностичні маркери функціонального стану нирок щурів з моделі пухлинного росту. Лікування нефротоксичної дії.
дипломная работа [786,3 K], добавлен 07.01.2014Проблема формування лікарської резистентності до цитостатиків. Фактори регуляції апоптозу. Кінетика росту резистентної до цисплатину карциноми Герена. Зміни протеїназно-інгібіторного балансу в плазмі крові та пухлинній тканині при рості карциноми Герена.
автореферат [82,3 K], добавлен 21.03.2009Розробка біологічних моделей введення щурам цезію та стронцію хлоридів, визначення особливостей розподілу та накопичення в тканинах і органах тварин. Дослідження впливу лужного стану крові на вміст цезію та стронцію в органах за умов введення солей.
автореферат [42,0 K], добавлен 03.04.2009Метаболічни зміни у тканинах щурів при умовах коротко- та довготривалого експериментального свинцево-кадмієвого токсикозу і його корекції селенітом натрію та ліолівом. Доцільність використання даних препаратів з метою корекції метаболічних порушень.
автореферат [41,3 K], добавлен 24.03.2009Оцінка інтенсивності еритропоезу у щурів з експериментальним стрептозотоциновим діабетом. Активність NO-синтази в еритроцитах щурів у нормі і за умов ЦД 1-го типу. Динаміка вмісту лігандних форм гемоглобіну та кисень-зв’язуюча функція пігмента крові.
автореферат [35,8 K], добавлен 29.03.2009Морфофункціональні зміни в міокарді правого передсердя та лівого шлуночка в динаміці експериментального післяопераційного гіпотиреозу та за різних умов його корекції. Морфофункціональна оцінка стану ендокринного апарату серця у щурів при гіпотиреозі.
автореферат [97,7 K], добавлен 29.03.2009Аналіз дослідження розбіжностей у ультраструктурі скоротливого апарата кардіоміоцитів, протягом ранніх етапів постнатального розвитку щурів. Особливість порушення саркомерів з подальшою їх фрагментацію, дезорієнтацією актинових та міозинових ниток.
статья [1,7 M], добавлен 22.02.2018Значення ентропії Колмогорова-Сіная по ЕЕГ статевозрілих щурів-самців лінії Вістар характерні для вихідного стану та в умовах гострого і хронічного емоційного стресу. Оцінка напруження систем регуляції серцевого ритму в умовах емоційного стресу.
автореферат [86,3 K], добавлен 09.03.2009Тиреоїдний дисбаланс, розвиток поведінкового дефіциту і порушення мнестичних функцій. Накопичення продуктів перекисного окислення ліпідів в різних структурах головного мозку у білих щурів. Порушення інтегративної діяльності центральної нервової системи.
автореферат [125,7 K], добавлен 05.04.2009Вікові особливості імунологічної дизрегуляції, яка виникає у самців-щурів під впливом неповної глобальної ішемії головного мозку та можливостей застосування для корекції її проявів емоксипіну. Застосування нейропротекторної і імунокорегувальної терапії.
автореферат [53,0 K], добавлен 07.03.2009Антибіотики: історія відкриття, застосування та класифікація. Визначення чутливості до антибіотиків за методом дифузії в агар, методом серійних розведень та методом розведення на рідкому поживному середовищі. Ефективність застосування антибіотиків.
дипломная работа [105,6 K], добавлен 21.09.2010Мікрогемоциркуляторні зміни в печінці щурів з експериментальним цирозом після дії дозованої кріогепатодеструкції. Введення екстрактів кріоконсервованих фрагментів печінки і селезінки та при їхньому спільному застосуванні. Їх спільне застосування.
автореферат [47,0 K], добавлен 09.03.2009Історія вчення про антибіотики. Класифікації антибіотиків. Явище бактеріального антагонізму. Методи визначення чутливості бактерій до антибіотиків. Помилки при визначенні АБ-чутливості. Ускладнення антибіотикотерапії, природа антибіотикорезистентності.
презентация [2,8 M], добавлен 12.10.2015Определение острой токсичности (второй класс) селенита натрия, селенита цинка и расчёты LD50 по методу Кербера. Влияние селенита натрия и селенита цинка на мозговой кровоток, артериальное давление и частоту сердечных сокращений у бодрствующих крыс.
реферат [90,8 K], добавлен 30.04.2009Вміст свинцю в крові, аорті, печінці, серці та нирках щурів після введення ацетату свинцю. Зміни показників обміну оксиду азоту в організмі дослідних тварин. Вплив свинцю на скоротливу функцію судинної стінки на препаратах ізольованого сегменту аорти.
автореферат [49,0 K], добавлен 10.04.2009Методи ідентифікації екстракту буркуну за вмістом кумаринів. Гостра і субхронічна токсичність екстракту буркуну і його вплив на ультраструктуру гепатоцитів кролів при тривалому введенні та рівень фармакобіологичної активності на спеціальних біотестах.
автореферат [121,4 K], добавлен 05.04.2009Дисбаланс між оксидантами та антиоксидантами за гіпоксичних умов. Вплив селенопротеїну на ішемічний предстан у підвищенні резистентності організму та морфофункціональної адаптації серця до некоронарогенного некрозу міокарда. Ознаки такої адаптації.
автореферат [46,9 K], добавлен 09.03.2009Історичні події, які призвели до виникнення доказової медицини, видатні вчені. Описи перших клінічних випробувань і введення принципів кількісного експериментального дизайну. Рекомендації щодо категорування доказів дослідження та методи вибору лікування.
курсовая работа [746,9 K], добавлен 24.11.2014Закономірності виникнення електричного потенціалу навантаження у стегновій кістці щурів при різних ступенях механічного впливу й експериментальної гіпокінезії. Оцінка можливість використання біоелектричних показників для оцінки стану кісткової тканини.
автореферат [47,4 K], добавлен 09.03.2009
