Анализ лекарственного растительного сырья, содержащего эфирные масла

Размещено на http://www.allbest.ru/

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ

«РОССИЙСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ Н.И.ПИРОГОВА» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России)

Медико-биологический факультет

Кафедра «Фармации»

33.05.01 - Фармация

Курсовая работа

по дисциплине Фармакогнозия

Тема работы «Анализ лекарственного растительного сырья, содержащего эфирные масла»

Редозубова Элина Сергеевна

Москва 2020

Содержание

Введение

Глава 1. Понятие об эфирных маслах (обзор литературных источников)

1.1 Общая характеристика терпенов и терпеноидов

1.2 Классификация эфирных масел

1.3 Исследование и стандартизация эфирных масел и эфирно-масличного сырья

1.3.1 Физические свойства и константы

1.3.2 Химические свойства и константы

1.3.3 Методы количественного анализа эфирных масел

1.4 Применение и фармакологические свойства эфирных масел

1.5 Лекарственные растения, используемые для получения эфирного масла

Выводы по главе 1

Глава 2. Фармакогностический анализ листьев базилика обыкновенного (Ocinum basilicum) (экспериментальная часть)

2.1 Установление подлинности листьев Базилика обыкновенного

2.2 Макроскопический анализ листьев Базилика обыкновенного

2.3 Микродиагностический анализ листьев Базилика обыкновенного

2.4 Качественный и количественный анализ листьев Базилика обыкновенного

Выводы по главе 2

Заключение

Список использованной литературы

Приложение

Введение

В древние времена народы таких стран, как Индия, Египет, Китай, Греция и Рим, начали замечать, что от некоторых растений исходил приятный запах и при их настаивании, например, в оливковом масле, получались ароматные жидкости. Они пользовались большой популярностью: женщины делали из них духи и косметику, шаманы погружались с помощью благовоний в транс, а лекари быстро поняли, что это спасение от болезней - с этого момента началась история использования эфирного масла.[26]

Особую роль эфирные масла сыграли в 14 и 17 веках, когда в Европе разразилась эпидемия чумы. Легочная форма этой болезни высококонтагиозна и передается воздушно-капельным путем, но врачи спасались от инфекции, и делали они это с помощью масок, в которые помещали гвоздику, шалфей, розмарин, полынь и лаванду. Люди поняли, что данные растения обладают антибактериальными свойствами, и начали изучать их химических состав и способы выделения эфирного масла. [24]

Основным методом для извлечения масла стала дистилляция. Самое первое оборудование для данного процесса было придумано в древности арабским врачом - Авиценной.[23] Также в мире существовали и другие методы: экстракция, мацерация, анфлераж и прессование.

В настоящее время наиболее популярным способом извлечения эфирных масел для производства различных препаратов до сих пор остается перегонка с водой. Этот метод сложен и выход продукта небольшой, однако производители редко пытаются сэкономить и сделать качество ниже, так как оно строго регламентируются Государственной фармакопей РФ. Также проверяется лекарственное растительное сырье, из которого получают эфирное масло. Чтобы установить подлинность и доброкачественность сырья, проводят его фармакогностический анализ.

Данный анализ применяется не только для установления качества, но и для оценки целесообразности использования различных растений в производстве лекарственных препаратов. Известно множество эфиромасличных растений, не включенных в Государственную фармакопею РФ и не имеющих точного фармакогностического анализа, но использующихся в народной медицине долгое время и в лекарственных препаратах как вспомогательная добавка. К таким растениям относится Базилик обыкновенный (Ocinum basilicum), он богат большим количество полезных химических соединений.

Целью данной курсовой работы является проведение анализа лекарственных растений, содержащих эфирные масла и используемых в практической медицине, а также фармакогностическое изучение Базилика обыкновенного с перспективой его дальнейшего включения в список фармакопейных растений.

Задачи:

1) Изучить химическое строение эфирных масел, ознакомиться с физико-химическими свойствами и методами исследования, обобщить фармакологическую активность и применение в официальной медицине.

2) Ознакомиться с химическим составом, методами количественного и качественного анализа лекарственных растений, содержащих эфирные масла.

3) Получить представление об основных лекарственных препаратах, включающих эфирные масла.

4) Провести фармакогностический анализ Базилика обыкновенного.

5) Провести качественное и количественное определение биологически активных веществ Базилика обыкновенного.

6) Сделать вывод о возможности включения Базилика обыкновенного в список фармакопейных растений.

Глава 1. Понятие об эфирных маслах (обзор литературных источников)

1.1 Общая характеристика терпенов и терпеноидов

Прежде чем говорить об эфирных маслах, следует остановиться на терпенах и их производных, чтобы понять, какую часть занимают эфирные масла в этом многообразном классе химических соединений.

Терпены или изопреноиды - это обширный класс природных органических веществ на основе изопрена состава (С₅Н₈)_n, где n > 2.

Рисунок 1 - Строение изопрена и терпена[9]

Терпеноиды - это производные терпена, относящиеся к кетонам, альдегидам, сложным эфирам и спиртам. Структура данных соединений подчинена «общему изопреновому правилу», которое сформулировал швейцарский ученый Л. Ружичка. Оно гласит, что терпеноиды состоят из изопреновых звеньев, крайние из которых получили названия «хвост» и «голова». Порядок прикрепление изопреновых звеньев определяется «частными изопреновыми правилами». [13,21]

Из-за сложности строения терпеноидов, их классифицируют по количеству изопреновых частей в молекуле[9]:

Таблица 1. Общая характеристика терпеноидов

Терпеноиды	Формула	Где содержится
Монотерпеноиды	С10Н16	В эфирных маслах; горечах
Сесквитерпеноиды	С15Н24	В эфирных маслах; смолах, горечах
Дитерпеноиды	С20Н32	В эфирных маслах; смолы
Тритерпеноиды	С30Н48	Сапонины
Тетратерпеноиды	С40Н64	Каротины, ксантофиллы, ликопин
Политерпеноиды	(С5Н8)n	Каучук, гуттаперча

Из таблицы видно, что эфирные масла относятся только к трем группам: монотерпеноиды, сесквитерпеноиды и дитерпеноиды. Выяснив природу терпенов и терпеноидов, можно переходить к непосредственному изучению эфирных масел.

1.2 Классификация эфирных масел

Эфирные масла - продукты метаболизма растений, являющиеся смесью летучих соединений со специфическим запахом и относящихся к различным классам органических веществ. [15] Как было отмечено выше, во многих из них преобладают терпеноиды, однако высокий процент содержания имеют и ароматические соединения.

Из-за того, что эфирные масла разнообразны по своему составу, систематизировать их достаточно сложно. Поэтому в основу классификации легли соединения, являющиеся носителями запаха данного масла. [9,15]

1) Ациклические монотерпены

Они являются ненасыщенными алифатическими соединениями жирного ряда с 3 кратными связями. Известными представителями данной группы являются линалоол (содержится в плодах кориандра) и гераниол (преобладает в эвкалиптовом, гераниевом и розовом маслах).

2) Моноциклические монотерпены

Это циклические вещества с 2 кратными связями, которые могут располагаться либо в кольце, либо одна - в кольце, а другая - в изопропильном радикале. Из них наиболее важными в медицине являются: цинеол, содержащийся в листьях шалфея и эвкалипта, и ментол, извлекаемый из мяты.

Рисунок 2 - Ациклические монотерпены :а - гераниол; б - линалоол [9]

Рисунок 3 - Моноциклические монотерпены: а - ментол; б - цинеол [9]

3) Бициклические монотерпены

Вещества, имеющие два конденсированных неароматических кольца и одну двойную связь. Примером данной группы соединений могут служить: борнеол (содержится в валериане виде эфира с изовалерьяновой кислотой), пинен, туйон и камфора.

Рисунок 4 - Бициклические монотерпены: а - пинен; б - борнеол; в - камфора [9]

4) Сесквитерпены

Обширная группа веществ, которая делятся на 3 подгруппы:

- алифатические сесквитерпены включают неролидол и фарнезол;

- моноциклические сесквитерпены входят в состав эфирного масла ромашки - бисаболол и бисаболен;

- бициклические сесквитерпеноиды представлены многочисленными соединениями: хамазулен (содержится в эфирном масле ромашки аптечной), арнифолин (получают из цветков арники), алантолактон (выделяют из корневищ и корней девясила).

Рисунок 5 - Бициклические сесквитерпены: а - алантолактон; б - хамазулен [9]

5) Ароматические соединения

Рисунок 6 - Тимол[9] Рисунок 7 - Анетол [9]

В эфирных маслах данная группа веществ в основном представлена своими кислородными производными, такими как фенолы, ароматические соединения с гидроксильной группой в боковой цепи, альдегиды и простые эфиры. Из фенольных веществ, следует отметить карвакрол (компонент эфирного масла чабреца, душицы и тимьяна обыкновенного) и тимол. Из фенилпропаноидных веществ медицинское значение имеет анетол, выделяемый из плодов фенхеля и аниса. [9,14]

1.3 Исследование и стандартизация эфирных масел и эфирно-масличного сырья

1.3.1 Физические свойства и константы

Выделенные эфирные масла по внешнему виду в большинстве случаев напоминают жирные - практически бесцветные, либо слегка желтоватые прозрачные жидкости. Однако некоторые из них иногда бывают красного (масло тимьяна), коричневого (коричное и гвоздичное масло), ярко-синего цвета(масло ромашки и тысячелистника). Они обладают характерным запахом и жгучим, пряным вкусом. Также данные жидкости на ощупь жирные, и если капнуть их на фильтровальную бумагу, то через некоторое время они улетучиваются, не оставляя после этого жирного пятна. Судан III окрашивает эфирные масла в оранжевый цвет.[9,13,21]

У эфирных масел есть определенные физические константы с помощью, которых определяется их подлинность и доброкачественность.

Плотность. Большое количество эфирных масел имеет плотность ниже 1 г/см³, соответственно они легче воды. Однако некоторые из них тяжелее воды, например гвоздичное (1,04 г/см³), горькоминдальное (1,06 г/см³), ветиверовое масло (1,001 г/см³), гаультериевое масло (1,188 г/см³). Среднее значение плотности эфирных масел находится в промежутке от 0,8 до 1,2 г/см³.[7,13,14]

Плотность масла одного вида сырья может меняться в зависимости от стадии развития растения, способа получения масла, продолжительности и условий хранения, поэтому по ней можно судить о качестве масла. Если плотность понижена, то велика вероятность того, что количество кислородных соединений также понижено. Плотность выше нормы может говорить об окислении масла кислородом воздуха, т.е. об «осмолении». [13,14]

Оптическое вращение. Так как эфирные масла являются смесью оптически активных веществ, часто имеющих разные по значению и противоположные знаками вращения, то устанавливаемая константа представляет собой алгебраическую сумму вращения данной смеси. Поэтому эта характеристика не всегда является достоверным признаком для определения подлинности эфирного масла. По значению вращения плоскости поляризации можно свидетельствовать об относительном обогащении масла определенным соединением. Выход за границы норм по данному показателю, а тем более смена знака вращения, говорит о низком качестве масла. [8,13,14].

Показатель преломления. Высокий коэффициент рефракции, так же как и высокая величина плотности, чаще всего свидетельствует о большом содержании в эфирном масле кислородных соединений, что может говорить о правильном выборе периода сбора сырья. При долгом хранении масла из-за осмоления, окисления и накопления продуктов полимеризации, рефракция возрастает[8,13,14].

Растворимость. Все эфирные масла растворимы в этаноле. В растворах с низкой концентрацией спирта могут растворяться только те масла, которые содержат большое количество кислородных веществ. Для определения растворимости эфирного масла используют 70%-ный и 90%-ный этанол. Также оно хорошо растворяется и в других органических растворителях. Например, бензин, ацетон, хлороформ, этиловый и петролейный эфир. Эфирные масла практически не растворяются в воде, хотя и придают ей вкус и аромат.

Кроме качества сырья, с помощью определения растворимости в этаноле можно определить и чистоту эфирного масла. Это возможно благодаря тому, что многие углеводороды плохо растворимы в этиловом спирте и выпадают в осадок либо образуют взвесь.

В свою очередь, эфирное масло является хорошим растворителем для воска, смолы, жира, парафина и резины. Данную особенность нужно учитывать при выборе упаковочного материала для масел и их закупоривании. Так, нельзя использовать пробки, сделанные из резины и заливать горлышко парафином или сургучом. [7,8,14]

Температура кипения. Эфирные масла - это многокомпонентные смеси, поэтому их температура кипения не является постоянным значением. Многие из них закипают в температурном интервале от 150 до 300 ^°С. Однако при производстве эфирные масла обычно не подвергаются такому сильному тепловому эффекту. [7,13]

Температура застывания. Одной из важнейших величин при определении качества эфирного масла является температура застывания. Например, высокое значение данной характеристики свидетельствует об обогащении масла анетолом. [8]

Температура плавления. В состав эфирных масел входят соединения с высокой температурой плавления, являющиеся в чистом виде кристаллическими веществами. Масла, которые содержат данные компоненты в своем составе, включают кристаллы при обычной температуре и быстро затвердевают при охлаждении. Также разные фракции эфирного масла могут обладать собственными наименованиями. Жидкая часть розового масла называется элеоптеном, а твердая - стеароптеном. Для отбора проб данного типа масел необходимо их разогреть до 30-40 ^°С, потому что именно при такой температуре оно становится однородным и жидким. [8,13]

Итак, из вышеперечисленных физических свойств и констант большее значение имеют следующие характеристики: температура затвердевания, плотность, оптическое вращения, показатель преломления и растворимость - так как именно они предложены Государственной Фармакопей РФ для анализа эфирных масел и эфирно-масличного сырья.

1.3.2 Химические свойства

Как уже было сказано выше, эфирное масло является многокомпонентной смесью, где основную часть составляют изопреновые вещества. Для многих из них характерны реакции полимеризации, изомеризации и окисления. По кратным связям они могут подвергаться гидратации, гидрогенизации, галогенизации. Также терпены дают реакции, свойственные их функциональным группам. [9,20]

Окисление. Данный тип реакции применяется в технологических процессах для получения обепанина (анисового альдегида), вератона и диэпоксида аллоцимена. Для этого используют бихромат натрия, кислород воздуха, перекись водорода и различные катализаторы. [20]

Рисунок 7 - Пример реакции окисления[20]

Изомеризация. Чаще всего в изопреновых соединениях реакция изомеризации происходит не с изменением углеродного скелета, а с перемещением кратных связей. Данный процесс начинается с воздействия кислоты или щелочи при высокой температуре. С помощью него может быть получен анетол и изоэвгенол. [20]

Рисунок 8 - Получение анетол из эстрагола[20]

Полимеризация. Поскольку большинство терпеноидов имеют двойные связи, они могут вступать в реакцию полимеризации. Реакция происходит под действием свободных радикалов и кислот. Она вызывает потерю запаха, увеличению вязкости. [20]

Данные реакции не используются для подтверждения подлинности и доброкачественности эфирно-масличного сырья и эфирного масла, потому что они происходят в процессе хранения. Однако количество продуктов этих процессов может служить достоверной характеристикой качества масла. Их концентрация оценивается с помощью перекисного, эфирного, кислотного и эфирного числа после ацетилирования. Значения пределов для данных констант указаны в соответствующей нормативной документации. При анализе эфирных масел по Государственной Фармакопеи РФ используется только перекисное и кислотное число, так как эфирное число является показателем количества эфиров, обуславливающих запах.

Перед данным способ предусмотрено выделение эфирных масел путем экстракции. Она проходит в аппаратах сходных по строению с аппаратом Сокслета. В качестве растворителей используются ацетон, этанол, этиловый или петролейный эфир. Также экстракция может проводиться с помощью сжиженных газов (бутан, углекислота). Такой вид качественного анализа предусмотрен для мяты перечной, шалфея лекарственного, эвкалипта прутовидного, можжевельника обыкновенного, валерианы лекарственной и многих других. Однако для некоторых видов сырья предусматривается газовая хроматография (например, для тмина, фенхеля и аниса обыкновенного), так как компоненты могут обладать сильной летучестью и испаряться при использовании предыдущего способа. [5,13] Также существуют качественные реакции на обнаружение эфирных масел.

Реакция с Суданом III. Реактив получают путем растворения 0,1 г красящего вещества в 50 мл этилового спирта, затем приливают 50 мл глицерина. Каплю Судана III наносят на микропрепарат и накладывают покровное стекло. Содержимое железок и вместилищ с эфирным маслом окрасится в оранжевый цвет. [4,5,13]

Реакция на эфирное масло в эвкалипте прутовидном. 10 мл очищенного извлечения, полученного из эвкалипта, помещают в фарфоровую чашку и выпаривают на водяной баня досуха. К остатку добавляют несколько капель свежеприготовленного раствора ванилина в концентрированной H₂SO_4. Должно появиться красно-коричневое окрашивание. [5]

Если сравнивать количество физических и химических констант, использующихся в анализе эфирного масла и эфирно-масличного сырья, то первых будет больше, однако и те и другие помогают в равной степени оценить доброкачественность и подлинность эфирного масла, без любой из них фармакогностический анализ не будет считаться полным и достаточно достоверным.

1.3.3 Методы количественного анализа эфирных масел

Количество эфирного масла в сырье устанавливают путем перегонки с водяным паром, после которой измеряют объем в соответствии с Государственной Фармакопеей XIII издания (методы 1-3). [17]Однако прежде чем переходить к особенностям извлечения эфирных масел, нужно понять суть данного процесса.

Дистилляция используются в следующих ситуациях[8,13]:

1) для выделения компонентов из смеси веществ, в которых один из них может улетучиваться с водяным паром - это причина применения перегонки с водяным паром для извлечения эфирных масел;

2) для очищения веществ от смолистых соединений;

3) если после нее летучие вещества выделяются более полно, в отличие от дистилляции при пониженном давлении.

Данный метод основывается на том, что вещество с высокой температурой кипения, характеризующееся летучестью, перегоняется с паром и конденсируется вместе с ним в холодильнике. Полученный дистиллят из-за разницы плотностей состоит из двух слоев, которые затем разделяются специальной воронкой.

Летучесть соединения с водяным паром зависит от химического строения и природы вещества. Например, орта-нитрофенол, не может образовывать межмолекулярные ассоциаты, и поэтому имеет меньшую температуру закипания, чем его пара- и мета-изомеры. Он не взаимодействует с водородными связями воды и вследствие этого плохо растворяется в ней. Поэтому только орта-итрофенол может извлекаться данным способом. [8,13]

Также перегонку стараются проводить как можно быстрее, потому что в колбе, на всем протяжении процесса, конденсируется пар, и чтобы она не переполнилась, ее нужно нагревать на плитке. Для предотвращения переливания перегоняемой жидкости в приемник и холодильник, колбу нужно расположить наклонно.

Рисунок 9 - Прибор для дистилляции[8]: 1 - колба с круглым дном и длинным горлом; 2 - вода и перегоняемое вещество; 3 - холодильник; 4 - приемник; 5 - парообразователь; 6 - трубка, по которой пригоняется пар; 7 - пароотвод; 8 - предохранительная трубка; 9 - тройник; 10 - винтовой зажим; 11 - алонж.

Давления паров несмешивающихся соединений не зависят друг от друга. Давление насыщенного пара равно сумме парциальных давлений паров двух компонентов.

Из этого следует, что температура кипения данной смеси будет ниже, чем температура кипения отдельных соединений. Поэтому при дистилляции смесь высококипящего соединения и воды закипает при температуре ниже 100°С, это способствует очищению перегоняемого вещества, чувствительного к нагреванию, не выдерживающего классической перегонки. [8,13,17]

Чтобы этот процесс прошел с минимальными потерями и полученные данные были точными и достоверными, сырье, из которого извлекают эфирное масло, должно быть соответственно подготовлено. Степень измельчения, масса сырья, время перегонки, возможные растворители и метод находятся в соответствующей нормативной документации или фармакопейной статье на сырье. Концентрацию эфирного масла указывают в объемно-весовых процентах в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Метод 1 (метод Гинзберга). Применяется только в тех случаях, когда эфирное масло составляет высокую массовую долю, или если есть возможность использовать в анализе достаточно большую навеску. Метод Гинзберга не подходит для анализа эфирных масел, не выдерживающих воздействие высоких температур.

Метод 2 (метод Клевенджера) применяется для анализа эфирных масел, составляющих высокую массовую долю в сырье и не выдерживающих воздействие высоких температур. Растительное сырье, стандартизующиеся по нему: плоды кориандра и тмина, соплодия хмеля, листья мяты перечной и эвкалипта, трава шалфея, шишки можжевельника.

Метод 3 (модифицированный метод Клевенджера). Компоненты эфирного масла, претерпевающие изменения при перегонке, становятся эмульсией, способные загустевать или увеличивать плотность до единицы или более, определяют методом 3. Растительное сырье, стандартизующиеся по нему: корневища аира обыкновенного и трава тысячелистника обыкновенного. [8,13,17]

Рисунок 10 - Прибор для определения содержания эфирного масла методом 1[8]: обратный шариковый холодильник; 2 - резиновая пробка; 3 - приемник (размеры даны в мм): а -55-80; б - 70-95; в - 18 - 21; г - 6-10; 4 - широкогорлая колба.

Рисунок 11 - Прибор для определения содержания эфирного масла методом 2 и 3[8]: 1 - колба; 2 - изогнутая паропроводная трубка; 3 - холодильник; 4 - трубка-приемник градуированная; 5 - спускной край; 6 - расширение приемника; 7 - боковая трубка приемника; 8 - резиновый шланг; 9 - сливная трубка.

Метод 4. Применяется для тех же эфирных масел, что и 3 метод. Специфика данного метода состоит в том, что способ приема позволяет контролировать температуру нагрева и выхода масла. [13]

Метод 5. Данный метод применяется, когда масло имеет низкую массовую долю в сырье и частично растворимо в воде (масло родиолы и мелиссы). [13]

Также для количественного метода анализа может использовать газовую (для тмина, фенхеля и аниса обыкновенного) и высокоэффективную жидкостную хроматографию (для валерианы лекарственной).

1.4 Применение и фармакологический эффект эфирных масел

Эфирные масла и эфирно-масличное сырье могут оказывать различное влияние на организм человека, потому что их состав достаточно многообразен. Однако можно заметить зависимость фармакологического эффекта от химического строения преобладающих компонентов масла и сопутствующих веществ. Далее рассмотрим классы терпеновых соединений и характерные для них фармакологические свойства. [7]

Монотерпены. Эфирно-масличное сырье, преимущественно содержащее монотерпеновые углеводороды (пинен, лимонен, сабинен и др.) могут обеспечить противоотечный и общеукрепляющий эффект, усиление работы надпочечников, снятие мышечного спазма. Ациклические монотерпены включают большое количество двойных связей, поэтому обладают антиоксидантными свойствами (масло лимона, лайма, грейпфрута, мандарина и апельсина). Ряду монотерпеновых углеводородов свойственно бактерицидное, противовоспалительное и фунгицидное действие. Противовирусный и антибактериальный эффект имеют эфирные масла хвойных (сосновое, еловое, пихтовое) с большой массовой долей бициклических терпенов. Например, масла можжевельника и ладана, богатые пиненами, обладают сильным антисептическим и противовоспалительным действием. Схожие свойства характерны и для монотерпеновых спиртов (цитронеллол, цинеол, ментол), однако они также являются хорошими анальгетиками.

Сесквитерпены. Многим из них свойственно общеукрепляющие, эстрогенное, противовоспалительное, иммуностимулирующие, бактериостатическое и диуретическое действие.

Сложные эфиры терпеновых спиртов обладают седативной, антиспазматической и фунгицидной активностью. Содержатся в основном в масле герани (геранилацетат), бессмертника (нерилацетат) и ромашки римской (эфиры ангеликовой ксилоты).

Монотерпеноидные фенольные соединения. Тимол и карвакрол, имеющие гидроксильную группу, являются сильными антисептиками. Фенилметиловые эфиры (сафрол, миристицин, эвгенол) имеют, кроме антисептической активности, обезболивающую и антиспазматическую. При больших дозах могут вызывать наркотическое и галлюциногенное действие.

В эфирных маслах часто встречаются нераль, цитраль, гераниаль, относящиеся к альдегидам терпенового строения. Они оказывают раздражающие действие на слизистые оболочки и кожу. С другой стороны проявляют седативные свойства.

Кетоны, содержащиеся в эфирном масле, обладают муколитическим эффектом. Наибольшая физиологическая активность характерна для бициклических монотерпеновых кетонов (изотуйон, туйон, камфора, пинокамфон). Большое значение среди них имеет камфора, которая может стимулировать кровообращение и дыхание, при этом являясь сильным антисептиком. Она часто входит в различные препараты, использующиеся при заболеваниях дыхательной и опорно-двигательной системы (мазь «Капсикам», таблетки «Доброкам» и бромкамфоры).

Также иногда в эфирных маслах в небольших количествах могут присутствовать азотсодержащие вещества. Например, в масле жасмина (индол), нероли (индол и метилантранилат), мандарина (N-диметилантранилат). Они могут оказывать успокаивающий, реже стимулирующий, эффект. [6,7]

Итак, рассмотрев большинство фармакологических эффектов эфирных масел, можно выявить основные: [7,13,18]

1) Антисептический эффект присущ эфирным маслам с высоким содержанием фитонцидов (масла хвойных). Он связана с гидролизом цианосодержащих гликозидов (летучие фракции черемухи и лавровишни) и наличием горчичных эфирных масел, действующих на многие микроорганизмы.

2) Антибактериальный эффект не является одинаковым по отношению к разным микроорганизмам. Самую большую активность имеют масла тмина, мяты и шалфея, на втором месте стоят масла аниса и розмарина, еще более слабой активностью обладают масла эвкалипта, тимьяна, бергамота и сосны.

3) Противовоспалительный эффект связан со способностью эфирных масел стабилизировать мембраны клеток и уменьшать проницаемость сосудов. Хорошая активность по данной характеристики отмечалась у лавандового, лаврового, базиликового, эвкалиптового и гераниевого масла.

4) Отхаркивающие эффект наблюдается у масла тимьяна, эвкалипта и аниса. В малой дозировке они способны возбуждать сосудистый и дыхательный центр, а в большой - могут вызывать сильное сужение сосудов и уменьшение количества секрета, поэтому возникает неприятное ощущение сухости и першение.

5) Седативный эффект присущ корневищам валерианы, траве мелиссы лекарственной и цветкам лаванды.

6) Регенерирующий эффект наблюдается у масла ромашки аптечной из-за содержания в нем хамазулена.

7) Диуретический эффект свойственен плодам можжевельника, почкам и листьям березы.

Однако если рассматривать применение эфирных масел в официнальной медицине, то наиболее важными становятся следующие виды активности: противовоспалительная, антибактериальная, антисептическая, местно-раздражающая, обезболивающая, седативная и спазмолитическая. Данные по преобладанию определенных фармакологических свойств в эфирных маслах представлены виде диаграммы в Приложении 2. [7]

Некоторые препараты на основе эфирных масел, включенные в Государственный реестр лекарственных средств РФ, описаны в Приложении 1.[6, 18]

В заключение можно сказать, что эфирные масла могут использоваться, как вспомогательные и самостоятельные лекарственные препараты для лечения и профилактики различных заболеваний, требующих антисептического и обезболивающего действия. [22]

1.5 Лекарственные растения, используемые для получения эфирного масла

Эфирно-масличные растения (эфироносы) широко распространены, но наибольшим содержанием эфирного масла характеризуются следующие семейства: астровые (Asteraceae), яснотковые (Lamiaceae), сельдерейные (Apiaceae), рутовые (Rutacea), сосновые (Pinaceae). Эфирные масла образуются во всех частях растения, но более высокое содержание отмечается в листьях, цветках и плодах. Максимальная возможная массовая доля эфирного масла равна 20%. На нее влияют возраст и фаза вегетации растения (в молодых растениях эфирных масел больше), почва, высота над уровнем моря.

К этим факторам также относится соблюдение правил заготовки, сушки и хранения. Большинство эфироносов следует собирать ранним утром, так как в течение дня эфирное масло может сильно испариться. Сушка может быть как естественной, так и искусственной - однако температура не должна превышать 40°С. Также допускается только один тип вентиляции - приточно - вытяжная.

Эфирное масло в тканях растений может быть рассеяно по всем клеткам, находясь при этом в эмульгированном или растворенном состоянии в клеточном соке или цитоплазме, но наиболее часто они накапливаются в особых образованиях, которые обнаруживаются под микроскопом, поэтому являются важным микродиагностическом признаком при фармакогностическом анализе сырья. [7,13,14]

Экзогенные образования развиваются под кутикулой в эпидермальной ткани. К ним относятся железистые волоски, пятна и железки.

Железистые пятна развиваются при радиальном растяжении клеток, при этом образуется свободное пространство, в котором накапливается эфирное масло. Железистые волоски состоят из железистой овальной или шаровидной «головкой» и многоклеточной, реже одноклеточной, ножки.

Железки имеют различное строение. Например, железки у семейства астровых включают 8 клеток, которые расположены в 4 ряда. Яснотковые также имеют 8 клеток, однако они образуют «розетку».

Рисунок 12 - Простой (слева) и сложный (справа) железистый волосок [7]

Рисунок 13 - Железистое пятно [7]

Эндогенные образования формируются в паренхиме растений. Они включают вместилища, секреторные клетки и ходы.

Вместилища - это овальные или круглые полости, которые в зависимости от способа образования могут быть схизолизигенными либо схизогенными. Встречаются в экзокарпе цитрусовых, мезофилле листа, древесине и коре некоторых растений.

Секреторные клетки находятся в тканях в виде паренхимных слоев либо одиночных клеток-идиобластов. Широко распространены в подземных органах растений (корневища валерианы и аира). [7,13,14]

Рисунок 14 - Схизогенное вместилище[7]

Рисунок 15 - Лизигенное вместилище [7]

Рассмотрев, основные структуры, накапливающие эфирные масла, следует перейти к эфирно-масличному сырью, применяемому в лечебной практике. К лекарственным растениям, используемым для получения эфирного масла, относятся многие эфироносы, поэтому будут рассмотрены наиболее часто применяемые в медицине: Кориандр посевной (Coriandrum sativum), Хмель обыкновенный (Humulus lupulus), Мята перечная (Mentha piperita), Шалфей лекарственный (Salvia officinalis), Эвкалипт прутовидный (Eucalyptus viminalis), Можжевельник обыкновенный (Juniperus communis), Валериана лекарственная (Valeriana officinalis), Сосна обыкновенная (Pinus silvestris), Ромашка аптечная (Chamomilla recutita), Багульник болотный (Ledum palustre), Тысячелистник обыкновенный (Achillea millefolium), Аир обыкновенный (Aсorus calamus), Анис обыкновенный (Anisum lgare), Душица обыкновенная (Origanum vulgare), Тимьян ползучий (Thymus serpyllum).

Таблица 2. Лекарственное растительное сырье, содержащие эфирные масла и применяемое в медицине. [5,6,7]

Лекарственное растительное сырье	Стандартизация	Химический состав	Метод колвенного анализа	Препараты
В: Кориандр посевной (Coriandrum sativum) Сем:Сельдерейные (Apiaceae). Сырье: Плоды кориандра (Coriandri sativi fructus)	ГФ 13	0,7-0,14% эфирное масла (линалоол), жирное масло 20%, стероиды, флавоноиды.	Метод 2, время: 1 час.	Сборы, горькая настойка, эликсиры, бальзамы, «Фитоким», мазь «Эспол»
В: Хмель обыкновенный (Humulus lupulus) Сем: Коноплевые (Саnnаbасеае) Сырье: Соплодия хмеля (Strobuli Lupuli)	ГФ 13	1-3% эфирное масло (мирцен), смолы и горечи.	Метод 1 или 2, время: 3,5 часа.	Сборы, «Валокордин», «Уролесан», «Ново-Пассит», Нервофлукс, «Санасон».
В: Мята перечная (Mentha piperita) Сем:Яснотковые (Lamiaceae) Сырье: Листья мяты (Folia menthae piperitae)	ГФ 13	Эфирное масло до 3% (ментол, ментон, цинеол), каротиноиды, флавоноиды.	Метод 2, время: 1 час.	Сборы, настойка, мятные таблетки, ментоловое масло
В:Шалфей лекарственный (Salvia officinalis) Сем:Яснотковые (Lamiaceae) Сырье: Трава шалфея (Herba Salviae)	ГФ 13	Эфирное масло (цинеол, туйон, камфора, пинен), флавоноиды, дубильные вещества, горечи.	Метод 1 или 2, время: 2 часа.	Сборы, таблетка и пастилки из шалфея, «Фитолизин», «Алталекс», «Сальвин»
В: Эвкалипт прутовидный (Eucalyptus viminalis) Cем:Миртовые(Myrtaceae) Сырье: Листья эвкалипта (Folia Eucalypti)	ГФ 14	Эфирное масло до 3% (цинеол, пинен, миртенол, карвон, глобулон).	Метод 1 или 2, время: 1 час.	Сборы, настойка, «Эвкалимин», «Пектусин», «Ингалипт».
В:Можжевельник обыкновенный (Juniperus communis) Сем:Кипарисовые (Cupressaceae) Сырье: Плоды можжевельника	ГФ 13	Эфирное масло (пинен, камфен), борнеол, фелландрен, сахара, пектиновые вещества.	Метод 2, время: 2 часа.	Сборы, «Амрита», «Маратоник», «Бальзам Маурера оригинальный».
В:Валериана лекарственный (Valeriana officinalis) Сем:Валериановые (Valerianaceae) Сырье: Корневища с корнями валерианы (Rhizomata cum radicibus Valerianae)	ГФ 13	Эфирное масло (эфир борниола и изовалериановой к-ты,камфен, пинен, терпинеол), иридоиды, дубильные вещества	ВЭЖХ (Высокоэффективная жидкостная хроматография)	Сборы, настойка, густой экстракт, жидкий экстракт, «Ново-Пассит», «Персен», «Нервофлукс.
В: Сосна обыкновенная (Pinus silvestris) Сем: Сосновые (Pinaceae) Сырье: Почки сосны (Gemmae Pini)	ГФ 13	Эфирное масло от 0,3% (пинен, смола, борниолацетат), каротиноиды, витамин С.	Метод 2, время: 2 часа.	Сбор, капли «Пинанбин», «Пиносол», «Фитолизин», «Випросал В».
В: Ромашка аптечная (Chamomilla recutita) Сем:Астровые(Asteraceae) Сырье: Цветки ромашки (Flores Chamomillae)	ГФ 13	Эфирное масло от 0,3% (хамазулен, мирцен фарнезен), камеди, горечи, кумарины.	Метод 1 или 2, время: 2 часа.	Сборы, «Алором», «Рекутан», «Эвалар», «Камагель».
В: Багульник болотный (Ledum palustre) Сем:Вересковые(Ericaceae) Сырье: Побеги багульника болотного (Сormi Ledi palustris)	ГФ 14	Эфирное масло от 0,1% (ледол, палюстрол, п-цимол, цинеол, геранилацетат), смолы, кумарины, флавоноиды.	Метод 2, время: 4 часа.	Сбор, таблетки «Ледин».
В:Тысячелистник обыкновенный (Achillea millefolium) Сем: Астровые(Asteraceae) Сырье:Трава тысячелистника (Herba Millefolii)	ГФ 14	Эфирное масло от 0,1% (азулен, туйон, фелландрен), горечи, стерины, филлохинон, флавоноиды, полиацетилены.	Метод 3, время: 2 часа.	Сборы, «Ротокан», «Тонзилгон Н», «Фарингал», «Холафлукс», бальзамы и эликсиры.
В: Аир обыкновенный (Aсorus calamus) Сем: Ароидные (Araceae) Сырье: Корневища Аира обыкновенного (Rhizomata calami)	ГФ 14	Эфирное масло от 2% (камфора, акорон, борнеол, эвгенол), дубильные вещества, кислота аскорбиновая,йод.	Метод 3, время: 1,5 часа.	Сборы, «Викаир», «Викрам», «Олиметин», «Викалин», настойка.
В: Анис обыкновенный (Anisum vulgare) Сем:Сельдерейные (Apiaceae) Сырье: Плоды аниса обыкновенного (Fructus anisi vulgaris)	ГФ 14	Эфирное масло от 1,5% (транс-анетол, метилхавикол, анисовый кетон), жирное масло, белковые вещества.	Метод 1 или 2, время: 2 часа.	Сборы, нашатырно - анисовые капли, «Алталекс», «Цистенал», «Бронхосан», эликсиры.
В: Душица обыкновенная (Origanum vulgare) Сем:Яснотковые (Lamiaceae) Сырье: Трава душицы (Herba Origani)	ГФ 13	Эфирное масло от 0,1% (тимол, карвакрол, геранилацетат), флавоноиды, витамин С.	Метод 2, время: 2 часа.	Сборы, «Уролесан», «Бронхосан», «Виватон», «Алтайский», «Валосердин».
В: Тимьян ползучий (Thymus serpyllum) Сем:Яснотковые (Lamiaceae) Сырье: Трава чабреца (Herba Serpylli)	ГФ 13	Эфирное масло (фенол, тимол, карвакрол, борнеол, цимол), горечи, камедь, флавоноиды.	Метод 1 или 2, время: 2 часа.	Сбор, «Амрита», «Пертуссин», «Витаон», «Алталекс», «Ментоклар», «Виватон».

Выводы по главе 1

Эфирные масла - продукты метаболизма растений, являющиеся смесью летучих соединений со специфическим запахом и относящихся к различным классам органических веществ. Их делят на пять групп: ациклические монотерпеноиды, моноциклические монотерпеноиды, сесквитерпеноиды, бициклические монотерпеноиды и ароматические соединения.

Эфирные масла являются многокомпонентными смесями, поэтому их химические свойства при качественном анализе практически не учитываются, за исключением подсчета их кислотного и перекисного числа. Большее предпочтение в анализе отдается физическим свойствам и константам. Могут определяться следующие физические параметры: плотность, оптическое вращение, показатель преломления, растворимость, температура плавления, кипения и застывания. Для количественного анализа эфирно-масличного сырья используется перегонка с водяным паром, газовая или высокоэффективная жидкостная хроматография. Государственной Фармакопеей в большинстве случаев предусмотрено применение дистилляции в трех из пяти возможных вариантов, потому что они являются наиболее достоверными и в них учитываются все физико-химические особенности эфирных масел. К ним относятся метод Гинзберга, Клевенджера и модифицированный метод Клевенджера.

Также из-за того, что эфирные масла являются многокомпонентными смесями, их фармакологические свойства описать довольно трудно. Однако если рассматривать применение эфирных масел в официальной медицине, то наиболее важными становятся следующие виды активности: противовоспалительная, антибактериальная, антисептическая, местно-раздражающая, обезболивающая, седативная и спазмолитическая. Чаще всего эфирные масла используются в комбинациях с другими биологически-активными вещества, но могут быть и самостоятельными лекарственными препаратами, рассмотренные в работе, для лечения и профилактики различных заболеваний, требующих антисептического и обезболивающего действия.

В качестве эфирно-масличного сырья используются в основном растения из семейства астровые (Asteraceae), яснотковые (Lamiaceae), сельдерейные (Apiaceae), рутовые (Rutacea) и сосновых (Pinaceae). Эфирные масла образуются во всех частях растения, но более высокое содержание отмечается в листьях, цветках и плодах.

Эфирные масла могут быть рассеяны по всем клеткам растения, однако наиболее часто они накапливаются в особых образованиях, которые обнаруживаются под микроскопом, поэтому являются важным микродиагностическом признаком при фармакогностическом анализе сырья. Выделяют два вида образований: экзогенные образования, включающие железистые волоски и пятна, железки, и эндогенные образования, включающие вместилища и секреторные клетки.

К лекарственным растениям, используемым для получения эфирного масла, относятся многие эфироносы, поэтому будут рассмотрены наиболее часто применяемые в медицине: Кориандр посевной (Coriandrum sativum), Хмель обыкновенный (Humulus lupulus), Мята перечная (Mentha piperita), Шалфей лекарственный (Salvia officinalis), Эвкалипт прутовидный (Eucalyptus viminalis), Можжевельник обыкновенный (Juniperus communis), Валериана лекарственная (Valeriana officinalis), Сосна обыкновенная (Pinus silvestris), Ромашка аптечная (Chamomilla recutita), Багульник болотный (Ledum palustre), Тысячелистник обыкновенный (Achillea millefolium), Аир обыкновенный (Aсorus calamus), Анис обыкновенный (Anisum vulgare), Душица обыкновенная (Origanum vulgare), Тимьян ползучий (Thymus serpyllum).

эфирный масло терпен базилик

Глава 2. Фармакогностический анализ лекарственного растительного сырья листьев базилика обыкновенного (ocinum basilicum) (экспериментальная часть)

Базилик обыкновенный или камфорный (Ocinum basilicum) не является фармакопейным растением, однако было доказано, что в базилике содержится до 6% эфирного масла, основным компонентном которого является линалоол, цитронеллола, эвгенола и камфора, дубильные вещества, филлохинон. Наибольшие содержание эфирного масла наблюдается в листьях данного растения [2,12,19].

Были проведены исследования нейропротекторных свойств сухого экстракта базилика камфорного. Эксперимент проводился на 39 белых крысах массой 175-245 грамм. Им моделировали черепно-мозговую травму (ЧМТ) средней тяжести под легким эфирным наркозом. После данной процедуры животных разделили на 5 групп: 1- находились под наркозом без ЧМТ; 2- контрольная патология - модель ЧМТ; 3- крысы с ЧМТ, получавшие сухой экстракт базилика; 4 - крысы с ЧМТ, получавшие сухой экстракт дымянки Шлейхера; 5 - крысы с ЧМТ, получавшие стандартизованный экстракт гинкго двулопастного. В ходе исследования было установлено, что у животных, которым вводились сухие экстракты базилика и дымянки, снижались поведенческие и когнитивные нарушения, отек и гипоксия. Уменьшение гипоксии при применении экстракта базилика наблюдалось за счет большого содержания камфоры в данном растении. [25] Также отмечалось, что масло базилик обладает антибактериальным, антивирусным, антиоксидантным и отхаркивающим действием. [10] Базилик входит в состав некоторых лекарственных препаратов: мазь «Доктор Мом», сироп «Трависил», сироп «Бронхотон», сироп «Бронхоцин», сироп «Кука», «Суприма-бронхо» [6]. Учитывая эффекты базилика, некоторые исследователи начали активно изучать данное растение, с целью возможности введения базилика обыкновенного в список фармакопейных растений.

Так, в Первом Московском государственном медицинском университете имени Сеченова был проведен фармакогностический анализ листьев базилика обыкновенного или камфорного. Для проведения исследования были взяты листья взрослого растения, купленного в одном из магазинов торговой сети АШАН Ритейл города Москвы и соответствующего требования ГОСТу Р 56562-2015 «Базилик свежий-зелень. Технические условия». [3,12]

Фармакогностический анализ базилика камфорного проводился для определения и описания макродиагностических и микродиагностических признаков сырья, так как данные сведения отсутствуют в Государственной Фармакопеи РФ. Также проводился качественный и количественный анализ для изучения биологически-активных веществ, содержащихся в листьях данного растения. [12]

2.1 Установление подлинности листьев Базилика обыкновенного

В исследованиях, проводимых с целью введения базилика обыкновенного в список фармакопейных растений, проводили анализ, сравнивая купленное сырье с нормами, изложенными в ГОСТе Р 56562-2015 «Базилик свежий-зелень. Технические условия», для установления подлинности сырья. Результаты оформили в виде сводной таблицы. [3,12]

Таблица 3. Результаты, проведенного анализа на соответствие купленного ЛРС ГОСТу Р 56562-2015. [3,12]

Наименование показателя	Характеристика и норма	Результаты, проведенного анализа
Внешний вид	Молодые побеги различной длины без бутонов или с ними, без корней, здоровые листья, не одревесневшие, не пожелтевшие, не вялые, не загрязненные, без болезней и повреждений вредителями; без признаков самосогревания, без излишней внешней влажности. Допускается наличие незначительных дефектов листьев, окраски, небольшая утрата свежести, если это не влияет на качество, общий внешний вид, товарный вид и сохраняемость продукта в упаковке.	Молодые побеги без бутонов, с небольшими корешками, свежие, не пожелтевшие, не вялые, без загрязнений, без помятости некоторых листьев, без излишней влажности.
Цвет, запах и вкус	Характерный цвет, запах и вкус для ботанического сорта, без постороннего привкуса и запаха.	Фиолетовый цвет с зеленой пигментацией, характерный запах базилика, пряный вкус.
Массовая доля растений с дефектами, %, не более в т.ч.	15,0	13, 0
- помятых, поломанных	10,0	9,0
- слегка увядших	5,0	4,0
Массовая доля сорных растений, %, не более	1,0	0
Наличие вредителей и продуктов их жизнедеятельности	Не допускается	Не имеется
Минеральная примесь	Не допускается	Не имеется

Купленное сырье соответствует характеристикам и нормам ГОСТа Р 56562-2015 «Базилик свежий-зелень. Технические условия», поэтому его смогли использовать в фармакогностическом анализе. [12]

2.2 Макроскопический анализ листьев Базилика обыкновенного

При проведении макроскопического анализа свежего цельного сырья базилика обыкновенного исследователи применяли методику, указанную в ОФС.1.5.3.0003.15 Листья. Использовали следующие приборы и материалы: лупа, измерительная линейка, лист бумаги, свежие цельные листья базилика обыкновенного. Запах сырья устанавливали с помощью растирания, а цвет определяли при дневном свете. Данные предоставлялись в виде таблице. [12,16]

Таблица 4. Результаты, проведенного макроскопического анализа [12,16].

Диагностические признаки	Результаты проведенного анализа
Тип сырья	Цельное, свежее.
Размеры листовой пластинки	Ширина 2-5 см, длина 4,5-7,8 см.
Форма	Яйцевидная, основание листовой пластинки округлое, верхушка - заостренная.
Край листовой пластинки	Городчатый.
Черешок	Имеется, диаметр 2 мм, длина - 2,5 см.
Характер поверхности	Гладкая, опушения не имеется, голая. Эфирно-масличные железки отсутствуют.
Наличие листового влагалища и прилистников	Листовое влагалище отсутствует. Имеются латеральные прилистники, ширина - 1,3 см, длина - 2,3 см.
Жилкование	Перистое.
Вкус водного извлечения	Пряный.
Запах	Резкий, бальзамический, пряный.
Цвет	Фиолетовый с редкими вкрапления зеленого.

Рисунок 13 - Внешний вид и размеры цельных листьев Базилика обыкновенного [12]

2.3 Микродиагностический анализ листьев Базилика обыкновенного

В исследовании микродиагностический анализ, включающий приготовление, просветление и микроскопирование препарата сырья базилика обыкновенного, проводился в соответствии с требованиями ОФС.1.5.3.0003.15 «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». [12,16] Микроскопирование проводилось с помощью светового микроскопа (увеличение 10х-100х).

При рассмотрении препарата цельного листа Базилика обыкновенного видны следующие микродиагностические признаки:

Рисунок 14 - Наружный эпидермис верхней поверхности листа Базилика обыкновенного (Ув х10) [12]

Рисунок 15 - Специфические микродиагностические признаки листа Базилика обыкновенного (Ув х 40): 1 - диацитный устьичный аппарат; 2 - спиралевидная склеренхима жилки листа [12]

Благодаря проведенному микродиагностическому анализу, исследователями были определены следующие микродиагностические признаки листьев базилика обыкновенного: с верхней и нижней стороны видны извилистые клетки эпидермиса, спиралевидная склеренхима жилок, устьичный аппарат, состоящий из двух клеток, диацитного типа. Также на микропрепарате встречаются простые 2-3-клеточные волоски с широким основанием и с обеих сторон листа видны эфирно-масличные железки, включающие 8 клеток, образующих «розетку» и характерные для семейства яснотковых (см. рисунки 14,15,16). [12]

Рисунок 16 - Специфические микродиагностические признаки листа Базилика обыкновенного (Ув х 40): 1 - простой многоклеточный волосок с широким основанием; 2 - эфирно - масличная железка, состоящая из 8 клеток, образующая «розетку» [12].

2.4 Качественный и количественный анализ листьев Базилика обыкновенного

Качественный и количественный анализ базилика обыкновенного производился во многих исследованиях, однако мы разберем, те, которые в большей степени посвящены анализу его эфирного масла.

В исследовании, которые были использованы для получения основной информации о химическом составе листьев базилика обыкновенного, применялись следующие материалы и методы: высушенные измельченные листья базилика, экстракция, газовая хроматография. Каждая стадия данного эксперимента будет рассмотрена в отдельности.[19]

1) Заготовка и сушка сырья. Заготовка сырья производилась в Белгородской области во время цветения (август - сентябрь) в сухую погоду. Сушку проводили в тени в хорошо проветриваемом помещении, затем сырье измельчали.

2) Экстракция. Данный метод использовался для выделения суммы терпенов. Для него было взято 1,0 г высушенного и измельченного сырья базилика обыкновенного. Отобранное сырье поместили в аппарат Сокслета и экстрагировали в течение двух часов н-гексаном. Полученное извлечение использовали для анализа методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектором.

3) Газовая хроматография. Данный метод является основным во всех исследованиях, посвященным изучению состава эфирного масла базилика, так как при его использовании данные получаются более точными и можно установить состав эфирного масла, чего нельзя достичь при использовании перегонки с водяным паром.

Измерения проводились методом газовая хроматографии с помощью хромато-масс-спектрометра модели GCMS-QP2010 Ultra, произведенной в фирме «Shimadzu» в Японии. Детектор - вторичный электронный умножитель с обращенным динодом. [19]

Разделение выполняли на колонке:

- «Zebron ZB-5MS» 30 m L х 0,25 mm ID х 0,25 мm df;

- Жидкая фаза состояла из полисилорилена (5%) и полидиметилсилоксана (95%);

- Температура находилась в пределах от - 60 С° до 325/ 350 С°

Условия хроматографии:

- Газ - носитель - гелий с постоянным потоком - 0,7 мл/мин;

- Температура колонки находится в пределе от 70 С° (изотерма 2 минуты) - 230 С° (изотерма 5 минут). Скорость подъема температуры 3 С°/ мин.

- Температура испарителя - 240 С°;

- Температура интерфейса и ионного источника - 250 С°;

- Режим ввода пробы - с делением потока - 1,5 мин;

- Поток эмиссии - 60 мА;

- Напряжение на детекторе - 0,84 кВ;

- Объем вводимой пробы - 1мl.

Детектирование проводилось в режиме полного ионного тока (SCAN) в пределах m/z 70 - 350 Da, со скоростью считывания 769 и временем результата 0,4 сек. Время анализа - 1 час. После всех подготовительных операций проводилась непосредственно хроматография, в ходе которой была получена следующая диаграмма.

Рисунок 17 - Хроматограмма н-гексанового извлечения листьев

Базилика обыкновенного [19]

Расшифровку состава эфирного масла базилика обыкновенного проводили с помощью библиотечной базы данных NIST₁₁. Данные предоставлялись в виде таблицы. [19]

...