Моноциты периферической крови и псориатической папулы

Проведено клинико-иммунологическое обследование 89 больных (41 женщины и 48 мужчин) в возрасте от 20 до 60 лет, страдающих вульгарным и экссудативным псориазом. Давность заболевания составила от 3 месяцев до 10 лет. В качестве контрольной группы обследованы 50 практически здоровых лиц (28 женщин и 22 мужчины) в возрасте от 20 до 60 лет, не имеющих на момент обследования острых хронических заболеваний или их обострения. Обследование проводили с письменного согласия респондентов, с соблюдением основных норм биомедицинской этики в соответствии с документом "Этические принципы проведения медицинских исследований с участием людей в качестве субъектов исследования" (Хельсинкская декларация Всемирной медицинской ассоциации 1964 г. с изменениями и дополнениями на 2008 г.).

На мазках периферической крови и крови, полученной с поверхности псориатической папулы (феномен точечного кровотечения при проведении псориатической триады), зафиксированных в смеси Никифорова и окрашенных по Романовскому - Гимзе, определяли концентрацию моноцитов среди других лейкоцитов: эозинофилов, базофилов, нейтрофилов, лимфоцитов. В соответствии с методом, предложенным О.П. Григоровой, проводили дифференцировку моноцитов по морфологии ядра на промоноциты, собственно моноциты и полиморфноядерные моноциты [6].

Венозную кровь для исследования брали утром натощак. На проточном цитометре FC-500 "Beckman Coulter" (США) определяли содержание L-селектина (CD62L, FITC), LFA-1 (CD11a, FITC), LFA-3 (CD58, FITC), ICAM-1 (CD54, FITC), PECAM-1 (CD31, FITC) на моноцитах цельной крови.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью SPSS 13.0 for Windows. Распределение параметров было ненормальным, в связи с чем описание выборок проводили с помощью подсчета медианы (Me) и межквартильного интервала (Q25; Q75). Вероятность различий оценивали по непараметрическим критериям Колмогорова - Смирнова (Z) и Вилкоксона (W). Корреляционный анализ проведен с использованием коэффициента корреляции Спирмена (р).

Результаты

Уровень моноцитов периферической крови как в группе контроля, так и у больных псориазом был одинаковым, соответственно 4 % (3; 8) и 6 % (4; 8); Z = 0,96; р = 0,31. При этом у больных псориазом в структуре моноцитограммы (рис. 2) отмечали статистически значимое увеличение промоноцитов - с 27 % (20; 36) до 34 % (24; 44); 2 = 2,02; р = 0,001; за счет снижения собственно моноцитов - с 41 % (29,5; 47) до 30 % (22; 34); 2 = 2,72; р = 0,001. Различий в концентрации полиморфноядерных моноцитов у больных псориазом и в группе контроля не регистрировали - 32 % (24,5; 43) против 36 % (30,5; 40,5); 2 = 1,25; р = 0,08 (рис. 2).

Таким образом, несмотря на то, что в целом содержание моноцитов в периферической крови у больных псориазом и в контрольной группе было одинаковым, различия заключались в структуре моноцитограммы: увеличение концентрации промоноцитов у больных псориазом происходило на фоне снижения содержания собственно моноцитов и отсутствии реакции со стороны полиморфноядерных моноцитов.

Непосредственно в очаге поражения - в псориатической папуле - концентрация моноцитов увеличилась в 3 раза: с 6 % (4; 8) до 18,7 % (15,8; 24,); Ж = -3,40; р = 0,001. Увеличение происходило за счет повышения концентрации полиморфноядерных моноцитов - с 36 % (30,5; 40,5) до 65 % (56; 74,5); Ж =-3,29; р = 0,001), тогда как промоноциты практически не выявлялись из- за чего медиана содержания этих клеток составила 0 % (0; 6); Ж = -3,29; р = 0,001. Содержание собственно моноцитов было одинаковым в периферической крови и псориатической папуле - 30 % (22; 34) и 34 % (24; 36) Ъ = 0,65; р = 0,78 (рис. 3).

Рис. 2. Моноцитограмма (промоноциты, собственно моноциты, полиморфноядерные моноциты) у практически здоровых лиц и больных псориазом (Ме %)

Рис. 3. Моноциты периферической крови и крови псориатической папулы (промоноциты, собственно моноциты, полиморфноядерные моноциты) (Ме %)

Итак, в периферической крови у больных псориазом по сравнению с группой контроля изменения касались только структуры моноцитограммы, что проявлялось увеличением уровня промоноцитов при снижении концентрации собственно моноцитов. В крови, выделяемой с поверхности псориатической папулы, по сравнению с периферической кровью концентрация моноцитов увеличивалось в 3 раза за счет увеличения уровня полиморфноядерных форм на фоне резкого снижения количества промоноцитов.

Учитывая, что процессы миграции клеток, в том числе и моноцитов, связаны с молекулами адгезии, нами изучены моноциты венозной крови, имеющие молекулы адгезии. На основании полученных данных (табл. 1) можно заключить, что статистически значимых различий в содержании молекул адгезии на моноцитах у больных псориазом с контрольной группой нет ни на этапе роллинга, ни на этапе прочной адгезии, ни на этапе трансэндотелиальной миграции.

Различия были выявлены посредством корреляционного анализа. Так, если в группе сравнения статистически значимых корреляций между содержанием промоноцитов, собственно моноцитов и полиморфноядерных моноцитов и уровнем активности молекулы L-селектина не регистрировали, то у больных псориазом были выявлены корреляции между уровнем активности молекулы L-селектина с содержанием собственно моноцитов (р = 0,32; р = 0,34) и полиморфноядерных моноцитов (р = 0,34; р = 0,004). Статистически значимых различий в отношении L-селектина и промоноцитов не выявлено (р = 0,13; р = 0,28).

Содержание молекул адгезии на моноцитах у практически здоровых лиц и больных псориазом (Ме (С 25; С 75))

Таблица 1

На этапе прочной адгезии у больных псориазом наблюдали статистически значимые корреляции между концентрациями моноцитов, имеющих молекулы с LFA-1, LFA-3, ICAM-1 и промоноцитов, собственно моноцитов и полиморфноядерных моноцитов. Существенные различия выявлены в отношении молекулы PECAM-1: у больных псориазом, в отличие от группы контроля, содержание молекулы PECAM-1 статистически достоверно коррелировало с содержанием промоноцитов (р = 0,58; р = 0,001), собственно моноцитов (р = 0,48; р = 0,001) и полиморфноядерных моноцитов (р = 0,42; р = 0,001), тогда как в группе сравнения достоверная корреляция была выявлено только с уровнем полиморфноядерных моноцитов (р = 0,45; р = 0,03).

Обсуждение

Итак, в крови псориатической папулы нарастает концентрация моноцитов за счет полиморфноядерных форм и снижается уровень промоноцитов. Известно, что именно промоноциты обладают способностью к пролиферации, а также, пройдя дифференцировку, преобразуются через собственно моноциты в полиморфноядерные моноциты [14, 15]. Учитывая, тот факт, что их концентрация в периферической крови у больных псориазом нарастает, а в крови, выделяемой с поверхности папул, - снижается, а также наличие статистически достоверных корреляций с молекулами адгезии, проявляющие свои функции на этапах прочной адгезии и трансмиграции, дают возможность предполагать усиление трансмиграции промоноцитов в псориатическую папулу с одной стороны, а с другой - усиление пролиферации и дифференцировки их именно в псориатической папуле. Дополнительным подтверждением может служить отсутствие различий в периферической крови концентраций полиморфно-ядерных моноцитов между больными псориазом и группой контроля.

Заключение