Исследование роли мембранных структур в процессах неспецифической адаптации тромбоцитов к воздействию низкоинтенсивного гелий-неонового лазера в условиях модельного эксперимента
Особенности использования низкоинтенсивного лазерного излучения в качестве физиотерапевтического метода воздействия на кровь и ее компоненты. Влияние излучения гелий-неонового лазера на состояние тромбоцитарных мембран, на жизнеспособность тромбоцитов.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | статья |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 13.02.2022 |
| Размер файла | 587,6 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Размещено на http://www.allbest.ru/
Исследование роли мембранных структур в процессах неспецифической адаптации тромбоцитов к воздействию низкоинтенсивного гелий-неонового лазера в условиях модельного эксперимента
Н.А. Мельникова
Д.Г. Седова
Т.В. Уланова
О.Г. Агеносова
И.А. Евстифеева
Аннотация
Актуальность и цели. Низкоинтенсивное лазерное излучение широко используется в качестве физиотерапевтического метода воздействия на кровь и ее компоненты. В то же время остается до конца не раскрытым механизм воздействия света оптического спектра на ткани внутренней среды. Предполагается, что это воздействие носит неспецифический характер и осуществляется в том числе на уровне мембранных структур клеток. Нами было изучено влияние излучения гелий-неонового лазера на состояние тромбоцитарных мембран, на жизнеспособность и функциональную активность тромбоцитов.
Материалы и методы. Объектом исследования являлись тромбоциты, полученные из донорской крови. Для облучения тромбоцитарной суспензии применяли низкоинтенсивный гелий-неоновый лазер марки ЛГ-78, имеющий мощность 0,02 мВт и длину волны облучения - 632,8 нм. Дозы облучения составили 1,2, 6,0, 12,0 и 24,0 Дж/см2. Исследовали функциональное состояние тромбоцитов, их жизнеспособность, трансмембранный потенциал, а также соответствие изменений микровязкости мембран изменениям соотношений насыщенных жирных и ненасыщенных жирных кислот, холестерина и фосфолипидов в мембранной фракции липидов.
Результаты. Выявлено, что примененные дозы облучения оказывают выраженное фотомодифицирующее воздействие на мембраны тромбоцитов. Так, последовательно возрастало отношение общих фосфолипидов к холестерину мембраны при облучении в дозах 1,2, 6,0, 12,0 Дж/см2, а также соотношение между ненасыщенными и насыщенными жирными кислотами в фосфолипидах. Выявленные изменения имеют положительное значение и сопровождаются последовательным повышением текучести мембран тромбоцитов, но в пределах физиологической нормы, с одновременным повышением значений трансмембранного потенциала тромбоцитов, сохраняется их жизнеспособность и потенциальная агрегационная активность. Доза в 24,0 Дж/см2 способствовала уменьшению доли фосфолипидов в объеме общих липидов тромбоцитарных мембран, снижению содержания ненасыщенных жирных кислот в них, возрастание доли холестерина. Снижались также показатели жизнеспособности тромбоцитов, часть пластинок морфологически находилась в состоянии начальной стадии активации.
Выводы. В исследованиях показано, что низкоинтенсивный гелий-неоновый лазер обусловливает развитие в мембранах тромбоцитов фотоэффектов, имеющих неспецифический характер, приводящих к перераспределению мембранных липидов, изменению жидкостных свойств мембраны, позволяющих поддерживать жизнеспособность кровяных пластинок и их функциональную активность. Возрастание значений трансмембранного потенциала в тромбоцитах, вероятнее всего, говорит о возрастании энергопотребления в адаптирующихся к воздействию лазерного излучения тромбоцитах. Таким образом, обнаруженные эффекты стимуляции гелий-неоновым лазером носят характер физиологических воздействий, не приводящих живые системы и их структурные компоненты к дистрессу и перенапряжению систем адаптации.
Ключевые слова: гелий-неоновый лазер, жизнеспособность, жирные кислоты, микровязкость мембран, трансмембранный потенциал, тромбоцит, холестерин, фосфолипиды.
Abstract
N.A. Mel'nikova, D.G. Sedova, T.V. Ulanova,
O.G. Agenosova, I.A. Evstifeeva
A research of the role of membrane structures in processes of nonspecific adaptation of thrombocytes to the influence of a low-intensive helium-neon laser in the conditions of a model experiment
Background. The low-intensity laser radiation is widely used as a physiotherapeutic method of impact on blood and its components. In too time remains up to the end not opened the mechanism of impact of light of an optical spectrum on fabrics of the internal environment. It is supposed that this influence has nonspecific character and is carried out, including, at the level of membranous structures of cages.
By us it was examined influence of radiation of the helium-neon laser on a condition of membranes of thrombocytes, their viability and the functional activity.
Materials and methods. As object of a research served the thrombocytes allocated from blood of donors. For irradiation of trombotsitamy suspension used light of the low-intensive LG-78 helium-neon laser, 0,02 MW with a wavelength of 632,8 nanometers in doses 1,2, 6,0, 12,0 and 24,0 J/cm2. Investigated the functional condition of thrombocytes, their viability, transmembrane potential and also compliance of changes of microviscosity of membranes to changes of ratios of saturated fatty and unsaturated fatty acids, a cholesterin and phospholipids in fraction lipids of membranes.
Results. It is еstablished that the ^osen exposure doses exert the photomodifying impact on membranes of thrombocytes. Doses in 1,2, 6,0 and 12,0 J/cm2 successively lead to increase in a ratio among the content of the common phospholipids and a cholesterin and also among unsaturated and saturated fatty acids of phospholipids. The specified changes in general have positive character and are followed by reduction in microviscosity of membranes of thrombocytes within physiological norm, with synchronous increase of level of transmembrane potential, the viability of thrombocytes and their potential aggregation activity remain. The dose in 24,0 J/cm2 caused reduction of a weight of phospholipide fraction in a bullet of the common lipids of membranes of thrombocytes, decrease in amount of unsaturated fatty acids in them, increase of a share of a cholesterin. Also indicators of viability of thrombocytes decreased, a part of plates morphologically was in a condition of an incipient state of activation.
Conclusions. In an experiment it is established that the helium-neon laser causes in membranes of thrombocytes the photoeffects of nonspecific character leading to redistribution of membrane lipids, change of the liquid properties of a membrane allowing to maintain viability of platelets and their functional activity. Increase in level of transmembrane potential in thrombocytes can demonstrate increase of intensity of energy consumption. In general effects helium-neon stimulation have character of the «weak» physiological influences which are not leading alive systems, whether it be membranes or cells to a stressful condition, an overvoltage of their function systems or development of a parabiosis.
Key words: helium-neon laser, fatty acids, microviscosity of membranes, thrombocyte, transmembrane potential, cholesterol, phospholipids, vitality.
Введение
Низкоинтенсивный гелий-неоновый лазер, широко используемый в настоящее время в физиотерапевтической практике, при его воздействии на организм, ткани и клетки способствует формированию обширного ряда фото - физических и фотохимических изменений, итогом которых является усиление метаболических процессов и интенсификация структурных перестроек, не связанных с нарушением зон облучения. Данное свойство позволило использовать его для стимуляции жизненно важных процессов во время терапии большого количества заболеваний [1, 2].
Структурами, запускающими биохимические реакции, которые в конечном итоге определяют физиологические эффекты оптического воздействия, являются клеточные мембраны. В экспериментах наблюдали изменения строения и функциональной активности мембран разнообразных клеток при их облучении низкоинтенсивным гелий-неоновым лазером [3, 4]. Неспецифическое влияние оптического излучения на структурно-функциональное состояние клеток крови может быть опосредовано как перестройками в самой мембране, выражающимися в изменении ее микровязкости и проницаемости, так и в изменении конформации составляющих ее молекул, в частности, липид-белковых комплексов, приводящих к модификации ферментативной и транспортной активности мембран, изменению мембранного потенциала.
Так, в экспериментах установлена фотомодификация проницаемости мембран форменных элементов крови для различных химических соединений, а ультрамикроскопическое исследование эритроцитов, подвергнутых фотостимуляции позволило выявить структурные перестройки в их мембранах [5, 6]. Тем не менее остается менее изученным влияние излучения гелий - неонового лазера на состояние мембран тромбоцитарных пластинок.
Таким образом, целью исследования стало изучение особенностей воздействия различных доз облучения низкоинтенсивным гелий-неоновым лазером на жизнеспособность и функциональную активность тромбоцитов, содержание фосфолипидов, холестерина и жирных кислот фосфолипидов в их мембранах, микровязкость тромбоцитарных мембран и трансмембранный потенциал тромбоцитов.
Материалы и методы
Объектом исследования являлись тромбоциты, полученные из донорской крови. Для получения суспензии тромбоцитов использовали метод центрифугирования в градиенте плотности [7]. Для облучения применяли низкоинтенсивный гелий-неоновый лазер марки ЛГ-78, имеющий мощность 0,02 мВт и длину волны излучения 632,8 нм. Применяли дозы облучения - 1,2, 6,0, 12,0 и 24,0 Дж/см2.
Жизнеспособность тромбоцитов изучали с помощью флуоресцентного зонда ДСМ (4 - (п-диметиламиностирил) - 1-метилпиридиний в люминесцентном микроскопе МЛ-2. В нативных пластинках желто-зеленым светом светилась плазматическая мембрана, в пластинках с пониженным уровнем жизнеспособности, нарушенной целостностью мембраны, вся цитоплазма флуоресцировала красно-оранжевым. Проводили подсчет 200 пластинок в пяти полях зрения в каждой пробе и рассчитывали процент нативных тромбоцитов и тромбоцитов с нарушенной структурой мембран.
Специфическую функциональную активность необлученных и фото - стимулированных тромбоцитов (способность к адгезии) определяли электронно-микроскопически по изменению их строения и состоянию плазматической мембраны. Для электронно-микроскопических исследований суспензию фиксировали в 3% растворе глутарового альдегида на 0,2 М фосфатном буфере на протяжении 20 ч. Затем проводили дофиксацию в 1% осьмиевой кислоте в течение одного часа и последовательное обезвоживание в спиртах и ацетоне. Далее осуществляли заливку эпоксидными смолами (эпон-аралдит). Ультратонкие срезы изготавливали на ультрамикротоме иИтаки и контрастировали уранилацетатом. Полученные срезы просматривали в электронных микроскопах ЭМФ-100И и ЭМ-125.
Используя флуоресцентный зонд пирен изучали микровязкость мембран тромбоцитов. Для исследования трансмембранного потенциала применяли флуоресцентный краситель ДСМ (4 - (п-диметиламиностирил) - 1-метил - пиридиний и-толуолсульфонат). Спектры флуоресценции записывали с помощью спектрофлуориметра «8 щпе-4». Мембранные липиды экстрагировали по методу Блая - Дайера [8]. Содержание фосфолипидов определяли фосфорнованилиновым методом, содержание холестерина - методом Златкиса - Зака [8]. Количественное определение отдельных фракций жирных кислот проводили с помощью газожидкостного анализа на анализаторе Хром-3700 (Чехословакия). Полученные результаты статистически обрабатывались, проводили расчет достоверности различий с применением /-критерия Стьюдента.
Результаты
Как показали исследования, содержание жизнеспособных тромбоцитов в контрольной суспензии составило 84,5 ± 1,3%. При облучение гелий - неоновым лазером в дозах 1,2, 6,0 и 12,0 Дж/см2 количество жизнеспособных тромбоцитов в суспензии практически не изменялось по сравнению с контролем. Доза облучения 24,0 Дж/см2 приводила к увеличению в суспензии количества пластинок с признаками нарушения структурной целостности мембран и пониженным уровнем жизнеспособности до 24,5 ± 1,7% (табл. 1).
Таблица 1. Жизнеспособность тромбоцитов в суспензии при действии гелий-неонового лазера
|
Показатели |
Контрольная группа |
Доза облучения, Дж/см2 |
||||
|
1,2 |
6,0 |
12,0 |
24,0 |
|||
|
Нативные тромбоциты, % |
84,5 ± 1,3 |
82,5 ± 1,4 |
85,2 ± 1,6 |
80,7 ± 1,6 |
75,5 ± 1,3* |
|
|
Тромбоциты с признаками нарушения целостности мембран, % |
15,5 ± 1,6 |
17,5 ± 1,8 |
14,8 ± 1,3 |
19,3 ± 1,4 |
24,5 ± 1,7* |
Примечание. * - Р < 0,01
При исследовании функциональной активности необлученных и фото - стимулированных тромбоцитов (способность к адгезии) проводили обнаружение на электронограммах признаков активации тромбоцитов. Обнаружено, что при облучении суспензии тромбоцитов в дозах 1,2, 6,0 и 12,0 Дж/см2 количество активированных пластинок не изменялось по сравнению с контролем. Тромбоциты имели округлую или овальную форму, с четко выраженной мембраной, лишенной выростов, их грануломер находился в центральной части, а на периферии наблюдался хорошо выраженный цитоскелетный комплекс (рис. 1, а). При облучении в дозе 24,0 Дж/см2 на электронограммах обнаруживали пластинки с признаками активации: перемещение грануломера на периферию, дезорганизация цитоскелета, крупные просветленные вакуоли и утрата целостности мембраны (рис. 1,6).
Рис. 1. Тромбоциты в нативной форме (а) и с признаками начальной активации (б)
тромбоцит лазер физиотерапевтический мембрана
Предполагается, что изменения функциональной активности тромбоцитов индуцируются тонкими структурно-химическими перестройками их мембран. Так, в исследовании установлено, что процессы структурных перестроек на уровне надмолекулярных ансамблей тромбоцитарных мембран происходят различно, в зависимости от дозы облучения.
Общее содержание липидов в мембранах тромбоцитов составило 9,76 ± 1,20 мг на 109 тромбоцитов. Облучение НИГНЛ лазером способствовало перераспределению количественного соотношения липидов в мембранах, но не вызывало изменения их общего содержания. Исключение составила доза облучения в 24,0 Дж/см2, которая способствовала незначительному снижению содержания общих липидов на 5,4% (рис. 2).
Облучение в дозе 1,2 Дж/см2 приводило к незначительному повышению процента холестерина в мембране за счет снижения остальных фракций липидов, тогда как его абсолютное содержание фактически не изменялось. Облучение в дозе 6,0 Дж/см2 способствовало снижению содержания холестерина на 9,3%. Повышение дозы облучения усиливало данный эффект. Максимально уровень холестерина снижался на 16,8% при дозе облучения в 24,0 Дж/см2.
Рис. 2. Содержание фракций общих липидов, фосфолипидов и холестерина в тромбоцитарных мембранах при облучении суспензии тромбоцитов низкоинтенсивным гелий-неоновым лазером: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01
Количество общих фосфолипидов при облучении в дозах 1,2 и 6,0 Дж/см2 НИГНЛ повышалось соответственно на 8,0 и 17,3% по сравнению с контрольными показателями. При применении более высоких доз облучения в 12,0 и 24,0 Дж/см2 количество фосфолипидов в тромбоцитах незначительно превышало контрольные показатели, однако обнаруженные изменения не были достоверными. Обнаруженные закономерности изменения содержания липидов в тромбоцитарных мембранах при облучении суспензии тромбоцитов различными дозами НИГНЛ согласуются с данными по модификации липидной составляющей мембран лимфоцитов под действием низкоэнергетического лазерного излучения [9].
При изучении влияния низкоинтенсивного гелий-неонового лазера на жирнокислотный состав фосфолипидов мембран тромбоцитов установлено, что различные дозы приводят к его значительной модификации (табл. 2).
Таблица 2. Содержание различных жирных кислот в фосфолипидах мембран тромбоцитов при облучении суспензии низкоинтенсивным гелий-неоновым лазером
|
Содержание ЖК, моль/% |
Контроль |
Доза облучения, Дж/см2 |
||||
|
1,2 |
6,0 |
12,0 |
24,0 |
|||
|
M ± m |
M ± m |
M ± m |
M ± m |
M ± m |
||
|
С (14:0) |
4,4 ± 0,06 |
4,4 ± 0,01 |
4,35 ± 0,06 |
4,5 ± 0,08 |
6,1 ± 0,16 |
|
|
% |
100 |
100,0 |
98,9 |
102,3 |
138,6 |
|
|
Р |
>0,05 |
>0,05 |
>0,05 |
<0,01 |
||
|
С (16:0) |
18,6 ± 0,23 |
9,4 ± 0,11 |
10,8 ± 0,10 |
13,3 ± 0,16 |
17,8 ± 0,30 |
|
|
% |
100 |
50,5 |
58,1 |
71,5 |
95,7 |
|
|
Р |
<0,001 |
<0,01 |
<0,01 |
>0,05 |
||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|
|
С (16:1) % Р |
1,6 ± 0,03 100 |
1,7 ± 0,03 106,3 >0,05 |
2,2 ± 0,05 137,5 <0,05 |
2,3 ± 0,04 143,8 <0,05 |
1,0 ± 0,02 62,5 <0,05 |
|
|
С (18:0) % Р |
11,8 ± 0,19 100 |
25,5 ± 0,40 50,5 <0,001 |
4,4 ± 0,05 58,1 <0,01 |
12,6 ± 0,21 71,5 <0,01 |
8,4 ± 0,14 95,7 >0,05 |
|
|
С (18:1) % Р |
10,4 ± 0,16 100 |
15,6 ± 0,24 101,9 >0,05 |
8,1 ± 0,30 101,2 >0,05 |
8,6 ± 0,08 95,9 >0,05 |
8,6 ± 0,06 91,2 <0,05 |
|
|
С (18:2) % Р |
11,24 ± 0,42 100 |
11,45 ± 1,01 101,9 >0,05 |
11,37 ± 1,07 101,2 >0,05 |
10,78 ± 0,63 95,9 >0,05 |
10,25 ± 0,58 91,2 <0,05 |
|
|
С (18:3) % Р |
11,24 ± 0,42 100 |
11,45 ± 1,01 101,9 >0,05 |
11,37 ± 1,07 101,2 >0,05 |
10,78 ± 0,63 95,9 >0,05 |
10,25 ± 0,58 91,2 <0,05 |
|
|
С (20:0) % Р |
11,24 ± 0,42 100 |
11,45 ± 1,01 101,9 >0,05 |
11,37 ± 1,07 101,2 >0,05 |
10,78 ± 0,63 95,9 >0,05 |
10,25 ± 0,58 91,2 <0,05 |
|
|
С (20:4) % Р |
11,24 ± 0,42 100 |
11,45 ± 1,01 101,9 >0,05 |
11,37 ± 1,07 101,2 >0,05 |
10,78 ± 0,63 95,9 >0,05 |
10,25 ± 0,58 91,2 <0,05 |
|
|
С (24:0) % Р |
11,24 ± 0,42 100 |
11,45 ± 1,01 101,9 >0,05 |
11,37 ± 1,07 101,2 >0,05 |
10,78 ± 0,63 95,9 >0,05 |
10,25 ± 0,58 91,2 <0,05 |
|
|
Насыщенные ЖК, % |
50,1 |
50,7 |
40,5 |
46,0 |
55,0 |
|
|
Ненасыщенные ЖК, % |
49,9 |
65,2 |
56,3 |
48,4 |
61,7 |
Количество насыщенных, а также моно- и полиненасыщенных жирных кислот в фосфолипидах мембран тромбоцитов под действием НИГНЛ изменялось различно. Облучение в дозе 1,2 Дж/см2 способствовало возрастанию насыщенных ЖК на 7,3%. Облучение в дозах 6,0 и 12,0 Дж/см2 приводило к снижению содержания насыщенных жирных кислот соответственно на 2,2 и 23,3%. Доза в 24,0 Дж/см2 способствовала восстановлению их содержания до уровня контроля.
Содержание моно- и полиненасыщенных жирных кислот последовательно возрастало при дозах облучения НИГНЛ в 1,2 и 6,0 Дж/см2 на 15,5 и 47,0% соответственно, но далее при облучении в дозах 12,0 и 24,0 Дж/см2 снижалось, тем не менее оставаясь выше исходного значения на 35,4 и 5,5% соответственно.
Динамические показатели мембран, в том числе их текучесть, можно определить, рассчитав количественные соотношения холестерина и фосфолипидов и коэффициент насыщенности ЖК фосфолипидов. Первая доза облучения НИГНЛ в 1,2 Дж/см2 не способствовала достоверным изменениям данных показателей (табл. 3). При воздействии в дозах 6,0 и 12,0 Дж/см2 наблюдалось снижение и коэффициента насыщенности ЖК, и соотношения между холестерином и фосфолипидами мембран. При возрастании дозы облучения до 24,0 Дж/см2 коэффициент насыщенности ЖК возрастал до контрольных цифр.
Таблица 3. Соотношение холестерин / фосфолипиды и коэффициент насыщенности жирных кислот в мембранах тромбоцитов при облучении суспензии низкоинтенсивным гелий-неоновым лазером
|
Показатели |
Контроль |
Доза облучения, Дж/см2 |
||||
|
1,2 |
6,0 |
12,0 |
24,0 |
|||
|
ХЛ/ФЛ |
0,85 |
0,75 |
0,87 |
0,78 |
0,62 |
|
|
% |
100,0 |
88,2 |
102,4 |
91,8 |
72,9 |
|
|
НЖК/ННЖК |
1,01 |
0,79 |
0,98 |
1,02 |
0,92 |
|
|
% |
100,0 |
78,2 |
97,0 |
101,0 |
91,1 |
Примечание. ХЛ - холестерин; ФЛ - фосфолипиды; НЖК - насыщенные жирные кислоты; ННЖК - ненасыщенные жирные кислоты
Таким образом, рассчитанные показатели указывают на возможность повышения текучести мембран тромбоцитов при облучении суспензии НИГНЛ в исследуемых дозах.
Далее было проведено измерение микровязкости мембран тромбоцитов с использованием флуоресцентного зонда пирена, который позволяет исследовать динамические изменения в мембранах с достаточно коротким временем жизни. Спектральные характеристики пирена очень чувствительны к условиям окружения, в конкретном случае к характеру взаимодействия молекул липидов в плазматической мембране тромбоцитов при облучении различными дозами низкоинтенсивного гелий-неонового лазера. В пробах была определена степень эксимеризации пирена, имеющая обратную зависимость от микровязкости. Установлено, что в суспензии не облученных тромбоцитов степень эксимеризации составила 0,85 ± 0,015 усл. ед. (табл. 4).
Таблица 4. Уровень эксимеризации пирена в суспензии и тромбоцитов при ее облучении разными дозами низкоинтенсивного гелий неонового лазера
|
Доза облучения, Дж/см2 |
Эксимеризация, усл. ед. (М ± т) |
% |
n |
t |
P |
|
|
Контроль |
0,85 ± 0,015 |
100 |
30 |
|||
|
1,2 |
0,86 ± 0,023 |
101,2 |
32 |
2,35 |
>0,05 |
|
|
6,0 |
0,96 ± 0,021 |
112,6 |
27 |
2,99 |
<0,01 |
|
|
12,0 |
1,09 ± 0,025 |
128,2 |
30 |
2,61 |
<0,01 |
|
|
24,0 |
0,88 ± 0,018 |
103,5 |
30 |
2,95 |
>0,05 |
Уровень эксимеризации повышался при облучении НИГНЛ в дозах 1,2, 6,0 и 12,0 Дж/см2, соответственно на 1,2, 12,6 и 28,2% от уровня контроля. При воздействии лазером в дозе 24,0 Дж/см2 квантовый выход флуоресценции эксимерной формы пирена снижался, хотя и оставался на 3,5% выше исходного уровня (см. табл. 4).
Структурные и молекулярные перестройки мембран тромбоцитов под действием НИГНЛ способствовали изменению липид-белковых взаимодействий и трансмембранного потенциала в мембранах тромбоцитов. В контрольной группе трансмембранный потенциал тромбоцитов составил 196,2 ± ± 2,32 мВ. Установлено дозозависимое изменение трансмембранного потенциала при облучении суспензии тромбоцитов НИГНЛ (табл. 5).
Таблица 5. Трансмембранный потенциал тромбоцитов (ТМПТ) при облучении различными дозами низкоинтенсивного гелий-неонового лазера
|
Доза облучения, Дж/см2 |
ТМПТ (М ± т) |
% |
n |
t |
P |
|
|
Контроль |
196,6 ± 2,32 |
100 |
30 |
- |
- |
|
|
1,2 |
199,1 ± 2,78 |
101,3 |
32 |
1,87 |
>0,05 |
|
|
6,0 |
203,2 ± 2,99 |
103,4 |
27 |
2,27 |
<0,05 |
|
|
12,0 |
211,7 ± 3,03 |
107,7 |
30 |
2,35 |
<0,01 |
|
|
24,0 |
212,4 ± 3,25 |
108,0 |
30 |
2,46 |
<0,01 |
Доза облучения 1,2 Дж/см2 способствовала возрастанию трансмембранного потенциала, однако зафиксированные изменения не носили достоверного характера. При облучении в дозах 6,0, 12,0 Дж/см2 трансмембранный потенциал последовательно увеличивался на 3,4 и 7,7% по отношению к контрольному значению. Обнаруженные изменения трансмембранного потенциала оставались в пределах физиологической нормы, что может свидетельствовать о благоприятном общем физиологическом действии гелий-неонового лазера на тромбоциты крови.
Заключение
В исследовании установлено, что низкоинтенсивный гелий-неоновый лазер способствует формированию в мембранах тромбоцитов фотоэффектов неспецифического характера, приводящих к перераспределению мембранных липидов, изменению жидкостных свойств мембраны, позволяющих поддерживать жизнеспособность кровяных пластинок и их функциональную активность. Механизмы их осуществления, возможно, связаны с изменением содержания активных форм кислорода, возрастанием активности системы антиоксидантной защиты и структурно-функциональными модификациями в мембранах тромбоцитов [10]. Возрастание показателей трансмембранного потенциала в тромбоцитах может указывать на повышение интенсивности энергопотребления в условиях их адаптации к неспецифическому воздействию лазерного излучения. На это указывают и данные о повышении активности клеточных АТФ-аз при облучении гелий-неоновым лазером [10]. В целом эффекты облучения гелий-неоновым лазером носят характер физиологических воздействий, не приводящих живые системы, будь то мембраны или клетка к стрессовому состоянию, перенапряжению их функциональных систем или развитию парабиоза.
Библиографический список
1. Гейниц, А.В. Внутривенное лазерное облучение крови / А.В. Гейниц, С.В. Москвин, А.А. Ачилов. - М.; Тверь: Триада, 2012. - 336 с.
2. Москвин, С.В. Основы лазерной терапии. Серия «Эффективная лазерная терапия» / С.В. Москвин. - М.; Тверь: Триада, 2016. - Т. 1. - 896 с.
3. Садилова, П.Ю. Изменение биологических свойств крови при воздействии на нее низкоинтенсивным лазерным излучением при различной экспозиции опытных образцов в условиях эксперимента / П.Ю. Садилова, К.В. Гасников, Е.Б. Лисина, Л.А. Баязитова // Медицинский альманах. - 2012. - №2. - С. 104-107.
4. Изменение морфофункционального состояния мембраны лимфоцитов у больных бронхиальной астмой под действием излучения Ие-Ые лазера / Р.Р. Гильметди - нов, А.В. Глотов, Н.А. Давлеткильдеев, И.А. Лобов, Г.С. Трушников // Вестник Омского университета. - 2013. - №2 (68). - С. 133-136.
5. Байбеков, И.М. Влияние лазерного облучения донорской крови на форму эритроцитов / И.М. Байбеков, А.Ф. Ибрагимов, А.И. Байбеков // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2011. - Т. 152, №12. - С. 703-707.
6. Линькова, Н.С. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения красного спектра на некоторые свойства эритроцитов крыс Вистар / Н.С. Линькова, О.П. Горшкова, В.И. Шуваева, Д.П. Дворецкий // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2008. - Т. 145, №1. - С. 12-15.
7. Клиническая лабораторная аналитика. Том I. Основы клинического лабораторного анализа: в 5 т. / под ред. В.В. Меньшикова. - М.: Агат-Мед, 2002. - 860 с.
8. Кейтс, М. Техника липидологии / М. Кейтс. - М.: Мир, 1975. - 322 с.
9. Кузьмичева, Л.В. Морфологические и функциональные изменения лимфоцитов в процессе краткосрочной адаптации: дис…. д-ра биол. наук / Кузьмичева Л.В. - Саранск, 2005. - 278 с.
10. Баврина, А.П. Перекисное окисление липидов при воздействии на ткани крыс высокоинтенсивным лазерным излучением и низкоинтенсивным красным светом / А.П. Баврина // Современные проблемы науки и образования. - 2015. - №2-2. - С. 814.
References
1. Geynits A.V., Moskvin S.V., Achilov A.A. Vnutrivennoe lazernoe obluchenie krovi [Intravenous laser irradiation of blood]. Moscow; Tver: Triada, 2012, 336 p.
2. Moskvin S.V. Osnovy lazernoy terapii. Seriya «Effektivnaya lazernaya terapiya» [Essentials of laser therapy. Series «Efficient laser therapy»]. Moscow; Tver: Triada, 2016, vol. 1, 896 p.
3. Sadilova P. Yu., Gasnikov K.V., Lisina E.B., Bayazitova L.A. Meditsinskiy al'manakh [Medical almanach]. 2012, no. 2, pp. 104-107.
4. Gil'metdinov R.R., Glotov A.V., Davletkil'deev N.A., Lobov I.A., Trushnikov G.S. Vestnik Omskogo universiteta [Bulletin of Omsk University]. 2013, no. 2 (68), pp. 133-136.
5. Baybekov I.M., Ibragimov A.F., Baybekov A.I. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of experimental biology and medicine]. 2011, vol. 152, no. 12, pp. 703-707.
6. Lin'kova N.S., Gorshkova O.P., Shuvaeva V.I., Dvoretskiy D.P. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of experimental biology and medicine]. 2008, vol. 145, no. 1, pp. 12-15.
7. Klinicheskaya laboratornaya analitika. Tom I. Osnovy klinicheskogo laboratornogo analiza: v 5 t. [Clinical laboratory analytics. Volume 1. Essentials of clinical laboratory analysis: in 5 volumes]. Ed. by V.V. Men'shikova. Moscow: Agat-Med, 2002, 860 p.
8. Keyts M. Tekhnika lipidologii [Lipidological technique]. Moscow: Mir, 1975
9. Kuz'micheva L.V. Morfologicheskie i funktsional'nye izmeneniya limfotsitov v pro - tsesse kratkosrochnoy adaptatsii: dis. d-ra biol. nauk [Morphological and functional lymphocyte changes during short-term adaptation: dissertation to apply for the degree of the doctor of biological sciences]. Saransk, 2005, 278 p.
10. Bavrina A.P. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya [Modern problems of science and education]. 2015, no. 2-2, p. 814.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Оценка восстановления функциональной активности нейтрофилов и иммунореактивности организма при системном и локальном воздействии низкоинтенсивного лазера с постоянной и переменной генерацией импульса при воспалительных заболеваниях урогенитального тракта.
автореферат [138,2 K], добавлен 05.09.2010Процесс лазерного излучения. Исследования в области лазеров в диапазоне рентгеновских волн. Медицинское применение CO2–лазеров и лазеров на ионах аргона и криптона. Генерация лазерного излучения. Коэффициент полезного действия лазеров различных типов.
реферат [7,1 M], добавлен 17.01.2009Понятие лазерного излучения. Механизм действия лазера на ткани. Его применение в хирургии для рассечения тканей, остановки кровотечения, удаления патологий и сваривания биотканей; стоматологии, дерматологии, косметологии, лечении заболеваний сетчатки.
презентация [233,0 K], добавлен 04.10.2015Общее понятие о квантовой электронике. История развития и принцип устройства лазера, свойства лазерного излучения. Низкоинтенсивные и высокоинтенсивные лазеры: свойства, действие на биологические ткани. Применение лазерных технологий в медицине.
реферат [37,7 K], добавлен 28.05.2015Изменение кровенаполнения сосудистой оболочки, функционального состояния сетчатки и цветовой чувствительности при действии лазерного излучения различных длин волн и режимов. Схема лазерного воздействия на глаза. Обработка результатов аномалоскопии.
курсовая работа [740,9 K], добавлен 31.10.2013Понятие и назначение лазера, принцип действия и структура лазерного луча, характер его взаимодействия с тканью. Особенности практического использования лазера в стоматологии, оценка основных преимуществ и недостатков данного метода лечения зубов.
реферат [20,7 K], добавлен 14.05.2011Остеоартроз как нозологическая форма дегенеративных заболеваний суставов с хроническим неуклонно прогрессирующим течением. Влияние комбинированной терапии на содержание гликозаминогликанов у больных остеоартрозом, оценка клинической эффективности лечения.
статья [47,6 K], добавлен 01.09.2013Определение тромбоцитопении или кардинального снижения количества тромбоцитов в крови. Границы нормальных значений количества тромбоцитов. Ускоренное разрушение тромбоцитов. Синдром анемии - классификация, этиология, методы диагностики. Принципы лечения.
презентация [900,5 K], добавлен 06.04.2016Основные направления и цели медико-биологического использования лазеров. Меры защиты от лазерного излучения. Проникновение лазерного излучения в биологические ткани, их патогенетические механизмы взаимодействия. Механизм лазерной биостимуляции.
реферат [693,2 K], добавлен 24.01.2011Компоненты гемостаза. Отличительные черты сосудисто-тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза. Образование тромбоцитов в костном мозге. Компоненты гранул тромбоцитов. Механизмы тромборезистентности сосудистой стенки. Классификация типов кровоточивости.
презентация [846,4 K], добавлен 20.06.2013Кровь. Функции крови. Компоненты крови. Свертывание крови. Группы крови. Переливание крови. Болезни крови. Анемии. Полицитемия. Аномалии тромбоцитов. Лейкопения. Лейкоз. Аномалии плазмы.
реферат [469,2 K], добавлен 20.04.2006Возможность применения низкоинтенсивного лазерного света, магнито-лазерной терапии физиотерапевтическими приборами такими как: "Оптодан", "Милта", "Матрикс". Местное стоматологическое вмешательство. Особенности использования аппарата "Физиокорректор".
статья [12,7 K], добавлен 05.06.2015Целесообразность применения скрининговых тестов свертывающей системы. Функция тромбоцитов в процессе коагуляции. Допустимый предоперационный уровень тромбоцитов. Главные компоненты механизма гемостаза. Аспирин как антикоагулянт, механизм коагуляции.
контрольная работа [19,6 K], добавлен 04.08.2009Исследование крови как один из важнейших диагностических методов, общая методика и этапы его проведения, особенности и значение. Параметры оценки красной и белой крови, тромбоцитов, нейтрофилов и эритроцитов, документальное оформление результатов.
курсовая работа [65,4 K], добавлен 25.04.2009Функции клеточных элементов миелопоэза. Нарушение системы гемостаза. Гемостазиопатии и коагулопатии. Основные функции эритроцитов, тромбоцитов, нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов и лимфоцитов. Лейкоцитарная формула крови здорового человека.
курсовая работа [45,9 K], добавлен 22.03.2019Важнейшие функции, которые выполняет кровь с помощью системы гемостаза. Номенклатура факторов свертывания крови. Схема агрегации тромбоцитов и фибринолиза. Классификация исследуемых нарушений системы гемостаза по этиологии и направленности изменений.
презентация [338,2 K], добавлен 03.09.2011Математическая модель кинетики свертывания в реконструированных системах и пространственной динамики свертывания в плазме. Регуляция свертывания ингибитором пути тканевого фактора. Влияние тромбоцитов и фосфолипидов на скорость реакций свертывания.
дипломная работа [1,2 M], добавлен 11.12.2012Изучение клеточного состава крови: эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов. Строение, физико-химические свойства, функции крови. Физиологически активные вещества, принимающие участие в свертывании крови и находящиеся в плазме. Скорость оседания эритроцитов.
курсовая работа [146,8 K], добавлен 26.12.2013Лабораторное исследование периферической крови у детей. Функции эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов. Качественные изменения нейтрофилов. Скорость оседания эритроцитов. Белковый состав плазмы крови. Нормальные показатели у детей различного возраста.
презентация [3,2 M], добавлен 22.09.2016Состав плазмы крови. Морфология форменных элементов крови: эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов. Понятие о лейкоцитарной формуле. Морфофункциональные особенности лимфы. Сравнение состояния хроматина в лимфоците и моноците. Гемоглобин и его соединения.
презентация [7,7 M], добавлен 22.05.2015
