Выделение и идентификация γ-пироновых соединений горечавника бородатого Gentianopsis Barbata (Froel.) Ма

Николаева Ирина Геннадьевна, Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Бурятский государственный университет имени Доржи Банзарова

Николаева Галина Григорьевна, доктор фармацевтических наук, профессор, ведущий научный сотрудник, Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН Россия, профессор, Бурятский государственный университет имени Доржи Банзарова

Кириллина Татьяна Цыреновна, преподаватель, Северо-Восточный федеральный университет имени М. К. Аммосова Россия

Аннотация

Из надземной части горечавника бородатого Gentianopsis barbata (Froel.) Ма (сем. Gentianaceae) выделены и идентифицированы г -пироновые соединения (флавоноиды и ксантоны), обладающие желчегонной и противовоспалительной активностью.

Ключевые слова: горечавник бородатый; ксантоны; флавоноиды; тритерпеноиды; гликозиды.

Abstract

ISOLATION AND IDENTIFICATION OF y-PYRONE COMPOUNDS OF GENTIAN BEARDED GENTIANOPSIS BARBATA (FROEL.) MA.

Galina G. Nikolaeva, Doctor of Pharmaceutical Sciences, Professor, Leading Researcher, Institute of General and Experimental Biology, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences, Professor, Department of Pharmacy, Moscow State University,

Irina G. Nikolaeva, Doctor of Pharmaceutical Sciences, Senior Researcher, Institute of General and Experimental Biology SB RAS, Associate Professor, Department of Pharmacy, Moscow State University

Tatyana Ts. Kirillina, Teacher of Special Disciplines,North-Eastern Federal University named after MK Ammosov Federal State Autonomous Educational Institution of Higher Education

From the aerial part of the gentian bearded Gentianopsis barbata (Froel.) Ma (family Gen- tianaceae), y-pyron compounds (flavonoids and xanthones) with choleretic and antiinflammatory activity were isolated and identified.

Keywords: bearded gentian, xanthones, flavonoids.

Виды семейства горечавковые (Gentianaceae) характеризуются способностью к биосинтезу и накоплению г-пироновых соединений. Горечавник бородатый - Gentianopsis barbata (Froel.) Ма - это однолетнее травянистое растение высотой 10-60 см, произрастает на лесных лугах, луговых склонах, по лесным опушкам, солонцеватым берегам рек в европейской части России, Западной Сибири, Восточной Сибири, Дальнем Востоке, на субальпийских и альпийских лугах Средней Азии [4]. В народной медицине настой травы горечавника бородатого применяется в качестве средства, возбуждающего аппетит и улучшающего пищеварение, а также при расстройствах желудочно-кишечного тракта. В тибетской медицине горечавник бородатый применяется под названием «тигда» [2].

Из данных литературы известно, что трава в составе горечавника бородатого содержит г-пироновые соединения, алкалоиды (0,17%), из которых идентифицирован генцианин, а также обнаружены дубильные вещества (следы) и горечи [1].

Фармакологические исследования показали выраженное желчегонное и умеренное противовоспалительное действие извлечений из горечавника бородатого [5, 6, 7].

Для выделения индивидуальных веществ горечавника бородатого использовали прием последовательной экстракции травы растворителями с изменением их полярности. Около 1,00 кг измельченного воздушно-сухого сырья травы горечавника бородатого экстрагировали 70%-ным спиртом в соотношении сырья и экстрагента 1:10. Объединенные экстракты концентрировали в вакууме до водного остатка, который последовательно обрабатывали в делительной воронке гексаном, хлороформом, этилацетатом и н-бутанолом. горечавник бородатый желчегонный экстракция

Хлороформное извлечение горечавника бородатого упаривали на ротационном испарителе. Сухой остаток растворяли в минимальном количестве хлороформа, смешивали с силикагелем и наносили на колонку, заполненную силикагелем. Элюирование проводили хлороформом, а затем смесью хлороформа и спирта этилового и далее с постепенным увеличением концентрации последнего. Первые фракции содержали ксантоновый агликон - соединение 1 (1,8-диокси- 3,7-диметоксиксантон - сверциаперенин). Из последующих фракций было выделено соединение - 2 (1-окси-3,7,8-триметоксиксантон - декуссатин), соединение 3 (1,7,8-триокси-3-метоксиксантон - гентиакохианин) и 4 (1,7-диокси-3,8- диметоксиксантон - гентикаулеин).

Упаренное этилацетатное извлечение смешивали с силикагелем и наносили на колонку, заполненную силикагелем. Элюирование проводили хлороформом и смесью хлороформа и метанола. При элюировании 5 %-ным раствором метанола в хлороформе было выделено вещество 5 (1-О-в-D-гликозид 3,7,8-триметоксиксантон) и вещество 6 (1-О-в-D-гликозид 3-метокси-7,8-диметоксиксантон)).

Увеличением концентрации метанола в элюирующей смеси до 10%, после отгонки растворителя и перекристаллизации, получено соединение 7 (5,7,4*-триоксифлавон - апигенин); соединение 8 (5,7,3*,4*-тетраоксифлавон - лютеолин), и соединение 9 (5,7,4* -триокси-3*-метоксифлавон - хризоериол). 15 %-ной смесью метанола в хлороформе элюированием получены фракции, из которых после отгонки растворителя из небольшого объема выпадали желтые кристаллы вещества 10 (5,4*-диокси-7- метоксифлавон - генкванин). После отделения осадка и дальнейшей очистки на колонке силикагеля элюированием 20 %-ным метанолом в хлороформе получили соединение 11 (7-О-в-D-глюкопиранозил-5-,3*,4* триоксифлавон - цинарозид).

Бутанольное извлечение упаривали на ротационном испарителе до минимального объема смешивали с полиамидом и высушивали. Полученную смесь наносили на колонку, заполненную полиамидом. Водно-спиртовые фракции объединяли, упаривали до минимального объема и рехроматографировали. Элюирование проводили смесью хлороформ - этанол с возрастающей концентрацией последнего. выделено соединение 12 (7-О-в-D-глюкопиранозил-5-,3*,* триок- сифлавон - цинарозид; соединение 11 ((7-О-в-D-глюкопиранозил-5-4*-диметоксифлавон - тилианин). Увеличением концентрации этанола в элюирующей смеси были получены фракции, содержащие смесь веществ, которые после рехроматографирования содержали вещество 13 (7-О-в-D-глюкопиранозил -5 -, 4* диоксифлавон - космосиин) и соединение 14 (7-О-в-D-глюкопиранозил-5,3*- диокси-4*-метоксифлавон - диосметин - 7-О-гликозид).

Выделенные вещества горечавника бородатого по качественным реакциям и характеру поведения на хроматограммах отнесены к у-пиронам (ксантонам и флавонам). Отнесение веществ к конкретной группе проводили на основании результатов УФ-спектроскопии.

Кроме г-пироновых соединений из надземной части горечавника бородатого выделены тритерпеноиды - олеаноловая кислота, оксикоричные кислоты и секоиридоидные гликозиды - свертиамарин и гентиопикрозид [3]. Химическое строение ксантонов и флавонов устанавливали с помощью качественных реакций, температуры плавления, элементного анализа, получения производных, УФ-, ПМР-, ЯМР- и 13С- и масс-спектров. Выделенные флавоны и мангиферин (который выделен методом препаративной хроматографии) непосредственно сравнивали с аутотентичными образцами. В гликозидированных соединениях углеводные фрагменты определяли после кислотного и ферментативного гидролиза методом хроматографии на бумаге в системах н-бутанол - пиридин-вода (6:4:3) в сравнении со стандартными образцами. О конфигурации гликозидной связи и величине окисленного цикла сахаров исследуемых гликозидов судили по данным кислотного и ферментного гидролиза, ПМР- и ЯМР 13С-спектроскопии. Положение углеводных заместителей определяли УФ- с добавками, ПМР- и ЯМР 13С-спектроскопией.

Таким образом, выделены и идентифицированы г-пироновые соединения - ксантоны, флавоноиды; тритерпеноиды; оксикоричные кислоты и секоиридоидные гликозиды горечавника бородатого.

Литература

1. Блинова К.Ф., Куваев Б.В. Лекарственные растения тибетской медицины Забайкалья // Вопросы фармакогнозии: тр. / ЛХФИ. 1965. Т. 19. Вып. 3. С. 163-178.

2. Гаммерман А.Ф., Семичов Б.В. Словарь тибетско-латинско-русских названий лекарственного растительного сырья, применяемого в тибетской медицине. Улан-Удэ, 1963. 180 л.

3. Глызин В.И., Николаева Г.Г., Даргаева Т.Д. Природные ксантоны. Новосибирск: Наука, 1986. 176 с.

4. Малышев Л.И., Пешкова Г.А. Флора Центральной Сибири. Новосибирск: Наука, 1979. Т. 2. С. 709-718.

5. Николаев С. М. Желчегонное действие экстракта горечавки бородатой (Gentiana barbata Froel.) // Фармация. 1985. № 3. С. 16-19.

6. Способ получения гентиакаулеина, обладающего желчегонным и гепатопротекторным действием: патент № 2000114525 /14(015237) от 06.06.2000 / Г.Г. Николаева [и др.].

7. Выделение из горечавника бородатого гентиабаварозида и изучение его иммуномодулирующей активности / С.М. Николаев [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. 2004. Т. 38. № 1. С. 25-27.

Размещено на Allbest.ru