Кишечные инфекции

Размещено на http://allbest.ru

Кишечные инфекции

(учебно-методическое пособие для студентов)

Настоящее пособие составлено в соответствии с программой по микробиологии и содержит расширенный план лекций, методические рекомендации по выполнению практических заданий и ситуационные задачи по разделу "Кишечные инфекции".

Предназначено для студентов лечебного и педиатрического факультетов медицинских институтов и служит для самостоятельной работы с целью повышения эффективности использования учебного времени, отводимого планом, по разделу "Кишечные инфекций".

Позволяет подготовиться к восприятию лекционного курса к самостоятельному выполнению лабораторных работ и выявить глубину усвоения материала по данному разделу.

Лекция I Семейство Эшерихии

Общая характеристика семейства кишечных бактерий. Патогенные и условно-патогенные представители этого семейства. Роль кишечных бактерии в патологии человека.

Морфологические, тинкторкальные, культуральные и биохимические свойства кишечных бактерий. Антигенная структура. Токсинообразонание. Таксономия, принципы положенные в основу классификации кишечных бактерий.

Эшерихии. Морфологические, культуральные и биохимические свойства. Антигенное строение, серотипы. Колициногенность, колицинотипы. Фагогипы.

Токсинообразование, эндо- и экзо-токсины эшерихии. Роль эшерихии в патологии: эндогенная и экзогенная колиинфекции. Эшерихиозы. Энтеропатогонные кишечные палочки (ЭПКП)-возбудители эшерихиозов. Характеристика ЭПКП I и II категорий.

Лекция 2. Сальмонеллы

Морфологические, культуральные и биохимические свойства сальмонелл. Антигенная, структура и классификация по Кауфману-Уайту. Токсинообразование.

Патогенность сальмонелл для человека и животных. Сальмонеллы, патогенные только для человека - возбудители тифо-паратифозного заболевания.

Патогенез сальмонеллезов, особенности его. Иммунитет при салмонеллеах. Бактерионосительство, причины его формирования.

Шигеллы. Общая характеристика шигелл. Международная классификация шигелл. Характеристика отдельных видов шигелл. Эндо- и экзотоксины шигелл. Эволюция шигеллеза.

Диаррейные заболевания. Роль условно-патогенных кишечных бактерий - представителей родов: цитробактер, клебсиелла, беррация, и др. в этиологии диаррейных заболеваний.

Методы лабораторной диагностики кишечных инфекций. Бактериологическия, серологический, аллергический, иммунофлюоресцентный и др.

Специфическая терапия и профилактика кишечных инфекций.

Лекция 3. Холера

Характеристике холеры как карантинной инфекции. Краткая история изучения холеры. Особенности седьмой пандемии холеры. Возбудитель холеры. Таксономия. Биологическая характеристика. Классификация по Хейбергу. Антигенное строение, серологическая классификация. Холерные фаги, фаготипы холерных вибрионов. Отличие вибриона Эль-Тор от классического холерного вибриона.

Холероподобные вибрионы и их отличие от холерных, НАГ - вибрионы, их роль в патологии человека.

Особенности распространения холеры. Основы патогенеза. Бактериологическая диагностика холеры и ее особенности. Ускоренная диагностика.

Специфическая профилактика. Значение холероген-анатоксина в иммунитете.

Тема I. Роль кишечной палочки в патологии человека

Кишечная палочка является возбудителем разнообразных заболеваний человека, клинические формы которых зависят от локализации процесса, эндогенного или экзогенного характера инфицирования, возраста, состояния макроорганизма и т.д. Основным методом лабораторной диагностики этих заболеваний является бактериологический. Исследование проводится для подтверждения диагноза заболевания, выявления носительства в эпидемиологических целях и др.

Материалом для анализа служат испражнения, кровь, гнойное отделяемое, мокрота, моча, смывы с объектов внешней среды, трупный материал и др.

Задание I. Провести бактериологическое исследование новорожденного с подозрением на коли-сепсис.

Выполнение задания. Кровь в объеме 5 мл вносят в 50 мл сахарного бульона. Посев помещают в термостат сроком до 10 сутокб (При отсутствии специальных указаний температура инкубации)

Ежедневно производят высев на одну из дифференциально-диагностических сред для кишечных бактерий (Эндо,Левина). Выросшие окрашенные колонии отсевают на скошенный агар (среды Ресселя) и через 18-20 часов подвергают морфологической, биохимической и серологической идентификации. Морфологическая идентификация осуществляется микроскопией мазков окрашенных по Граму, биохимическая - посредством изучения ферментативной, активности, в особенности сахаролитической и индолообразования. При серологической идентификации обязательно определяют принадлежность к о-серотипу посредством постановки реакции агглютинации по идентификации с набором поливалентных (смеси) и типовых ОЕ-коли сывороток различных серотипов. Полная серологическая идентификация включает определение типа В и Н-антигенов в развернутой (в пробирках) реакции агглютинации. При необходимости проводят определение чувствительности к антибиотикам, бактериофагу, серо - и колицинотипирование. Отрицательный ответ дается при отсутствии роста в бульоне в течение 10 суток.

Результаты исследования оформляют в виде протокола.

Задание 2 Провести бактериологическое исследование . испражнений больного ребенка с подозрением на колиэнтерит.

Выполнение задания. Испражнения наносят на одну из дифференциально-диагностических сред (Эндо, Левина) и Рассевают по ее поверхности. Посев помещают в термостат.

Черев 18-20 часов 1/3-1/4- объема из нескольких окрашенных колоний снимают петлей и подвергают серологической идентификации в реакции агглютинации на стекле со смесью иммунных агглютинирующих ОВ-коли сывороток наиболее распространенных патогенных серотипов. В случае положительного результата оставшуюся часть колонки отсевают на скошенный агар. кишечный бактерия холера токсикоинфекция

После суточной инкубации выделенные культуры подвергают морфологической, биохимической и серологической идентификаций (см. выше). Серологическая идентификация заключается в постановке реакции агглютинации на стекле с СВ-коли сыворотками отдельных серотипов, входящих в состав смеси, давшей положи тельный результат при первичном отборе (см.выше). С иммунной сывороткой, давшей положительную реакцию ставят развернутую реакцию агглютинации по идентификации в пробирках, используя в качестве антигена гретую и негретую (живую) культуру изучаемых бактерий.

При необходимости проводят определение чувствительности антибиотикам, бактериофагу, колицинотипирование, изучение токсигенности, гемолитической активности и др.

Результаты исследования оформляют в виде протокола.

Ситуационные задачи:

При микробиологическом исследовании испражнений выделена грамотрицательная палочка, средней величины, с закругленными концами, расположенная беспорядочно. К какому семейству может быть отнесена выделенная культура?

Для материального обеспечения работы баклаборатории составляется заявка на питательные среды. Какие основные среды необходимо включить в заявку для обеспечения микробиологической диагностики заболеваний, вызываемых кишечными бактериями?

При бактериологическом исследовании материала от больных кишечными инфекциями выделение возбудителя удается не всегда. Какими еще методами микробиологической диагностики можно воспользоваться в подобных ситуациях?

При бактериологическом исследовании гноя больного парапроктитом на среде Эндо выросли красные колонии с металлическим блеском, в мазках - полиморфные палочки с закругленными концами, грамотрицательные, расположенные беспорядочно. К какому роду можно отнести выделенную культуру?

При исследовании фекалий больного с кишечным расстройством выросли единичные колонии гемолитических кишечных палочек. В чем может быть причина данного расстройства?

У больного с травматическим разрывом кишечника развился перитонит. Из отделяемого брюшной полости при посеве на сахарный бульон и на агар Хоттингера выделена палочка средней величины, с закругленными концами, грамотрицательная, расположенная беспорядочно, расщепляющая углеводы короткого пестрого ряда до кислоты и газа, образующая индол и сероводород. Лакмусовое молоко свертывает. К какому роду относится выделенная культура бактерий?

В детскую больницу поступил ребенок с подозрением на колисепсис. Какой метод лабораторной диагностики следует использовать для подтверждения диагноза?

В областную детскую больницу санавиацией доставлен ребенок с подозрением на колисепсис. Какой материал и на какие среды необходимо посеять для выделения возбудителя?

9. В приемный покой 2 горбольницы доставлена женщина с подозрением на пищевую токсикоинфекцию. из промывных вод желудке выделена кишечная палочка в большом количестве. Как доказать этиологическую роль выделенной культуры при данном заболевании?

Тема 2. Тифо-паратифрзозные заболевания.

Тифо-паратиозное заболевание - антропонозная иифекция, возбудителями которой являются сальмонеллы тифа, паратифа А и паратифа В, Основными методами лабораторной диагностики паратиозных инфекций являются бактериологический и серологический. Бактериологичесое исследование проводится для подтверждения диагноза, для контроля за выздоровлением и выявления носительства.

Материалом для посева, в зависимости от пеоиода болезни, служат кровь, пунктат костного мозга, соскоб с розеол, ипражнения, моча, желчь и др. Для повышения высеваемости возбудителей первичный посев производят в среды обогащения (селенитовый бульон, желчный бульон, среда Адлера и др.).

Задание. Провести бактериологическое исследование крови больного с подозрением на тиф-паратифозное заболевание.

Выполнение задания. Кровь больного взятую из локтевой вены в объеме 5-10 мл вносят в одну из сред обогащения в соотношении 1:10. Посев помещают в термостат. Наблюдение ведут в течение 10 суток.

Ежедневно отбирают пробы, которые высевают на одну из дифференциально-диагностических сред для кишечных бактерий (Эндо, Левина, висмут-сульфит агар и др.).

Выросшие бесцветные колонии отсевают на скошенный агар (среды Ресселя) и после 18-20-часовой инкубации подвергают морфологической, биохимической и серологической идентификации.

Морфологическая идентификация проводится микроскопией мазков, окрашенных по Грамму и проверкой подвижности, биохимическая - изучением ферментативной активности, серологическая постановкой реакции агглютинации по идентификации с О- и Н-иммуииыми аглютинирующими сальмонеллезными (тифозной,паратифозной А и В) сыворотками, выбор которых основывается на результатах изучения ферментативной активности выделенных культур (см.схему антигенного строения сальмонелл. Кауфмана-Уайта).

Выделенные культуры подвергаются фаготипированию, а также определяют их чувствительность к антибиотикам

Отрицательный ответ дается при отсутствии роста в бульоне в течение 10 суток.

Результат исследований оформляют в виде протокола.

Ситуационные задачи:

1. Больной К. Лихорадочное состояние 5 дней, подозрение на тиф-паратифозное заболевание., Какой материал надо взять. на исследование? На какие среды сделать первичный посев?

2.Больной С. Лихорадочное состояние 8 дней; на теле розеолезная сыпь. Какие методы лабораторной диагностики можно использовать для установления диагноза?

3.Больной В. Лихорадочное состояние 4 дня, подозрение на тиф-паратифозное заболевание. Какой материал взять на исследование, и какой метод лабораторной диагностики можно использовать? В <5акяабораторкю поступили фекальные масса повара А, для исследования на носительство тихо-паратифозных бактерий. Какие методы исследования могут быть использованы?

5. Больной А. После перенесенного заболевания обследуется на носительство тифо-паратифозных бактерий. Бактериологическое исследование фекалий дало отрицательный результат.Какой еще материал можно взять для бактериологического исследования?

6. При бактериологическом исследовании официантки Н. выделена культура со следующими свойствами: на. среде Эндо бесцвет ные колонии, глюкоза, маннит, мальтоза разлагаются до кис лоты, сероводород образуется, молоко' без изменений. С какими агглютинирующими сыворотками следует провести серологическую идентификацию для установления видовой принадлежности культуры?

7.При бактериологическом исследовании фекалий переболевшего тиф-паратифозным заболеванием, перед выпиской выделена культура, которая на пестром ряде разлагает лактозу, глюкозу, мальтозу, маннит до кислоты и газа, образует сероводород и индол, свертывает молоко. Относится ли она к сальмонеллам?

8. В общежитии случай тифа-паратифозного заболевания. Какие меры провести в очаге для выявления источника инфекции и специфической профилактики среди контактных? :

9. На бактериологическое исследование поступила моча больного тифо-паратифозным заболеванием. На какие питательные среда сделать первичный посев материала?

10.В поселке №.зарегистрировано 3 случая . брюшного тифа. В ходе эпидемиологического обследования выявлен носитель, живущий по соседству с колодцем, водой которого пользовались все заболевшие. Какое исследование следует провести для доказательства связи имевших место заболеваний с выявлением носителя?

11. В лабораторию для серологического исследования поступила сыворотка крови носителя тифозных бактерий. Какой серологи ческой реакцией следует воспользоваться в данном случае?

Тема 3 Бактериальная дизентерия

Бактериальная дизентерия (шигеллез) - антропонозное инфекционное заболевание, вызываемое бактериями из рода шигелл. Для лабораторной диагностики дизентерии могут быть использованы бактериологический, серологический, аллергический и другие методы диагностики.

Основным методом лабораторной диагностики является бактериологический.

Исследование проводится для подтверждения, диагноза заболевания, контроля за выздоровлением, выявления носительства в эпидемиологических целях и др.

Материалом для посева служат испражнения, смывы с объектов внешней среды,трупный материал и др.

Задание. Провести бактериологическое исследование испражнений больного с подозрением на дизентерию

Выполнение задания. Испражнения наносят на среду Плоскирева и шпателем тщательно втирают в ее поверхности. Посевы помещают в термостат.

Через сутки, выросшие бесцветные колонии отсевают на сношенный агар Середу Ресселя) и после 18-20-часовой инкубации подвергают морфологической, биохимической и серологической идентификации. морфологическая идентификация осуществляется микроскопией мазков окрашенных по Граму и определением подвижности, биохимическая - изучением ферментативной активности, серологическая -постановкой реакции агглютинации по идентификации с видовыми, типовыми и подтиповыми иммунными агглютинирующими дизентерийными сывоооткамя, выбор которых основывается на результатах изучения Ферментативной активности, выделенной культуры ( см.схему классификации шигелл).

При неообходимости проводят биохимическое и колициноти-пирование, определяют чувствительность к антибиотикам, бактериофагу, изучают вирулентность и др.

Результаты исследования оформляют в виде протокола.

Ситуационные задачи:

1.При бактериологическом исследовании испражнений больного с подозрением на дизентерию выделена культура предвари тельно идентифицированная как кишечная палочка. Вызывает каратоконъюнктивит у морских свинок. Могут ли кишечные палочки вызывать подобный процесс? Если да, то,какие?

При массовом обследовании на дизентерию в детском саду для сбора материала использовались горшки, обработанные карболовой кислотой. Результаты бакисследования оказались отрицательными. В чем ошибка тактики медперсонала?

Известно, что бактериологическое исследование дает положительные результаты при нахождении в материале тысяч микробных клеток в I мл. Существует ли метод лабораторной диагностики, обнаруживающий присутствие единичных клеток в I мл материала. Если да, то назовите его?

В приемный покой поступил больной с подозрением на дизентерию. Какой Материал необходимо взять для бактериологического исследования? Каковы правила забора материала и его исследования?

Тема 4. Пищевая токсикоинфекция

Пищевая токсикоинфекция - заболевании полиэтиологической природы, возбудителем которого могут являться кишечные бактерии, кокки, анаэробы и др. Среди кишечных бактерий наиболее частыми возбудителями пищевой токсикоикфеции являются сальмонеллы, эшерихии, протеи

Основной метод лабораторной диагностики пищевой токсикоинфекции - бактериологический. Бактериологическое исследование проводится для подтверждения диагноза и установления этиологической природы заболевания и для обнаружения возбудителей в окружающей среде. Материалом для посева служат рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, продукты питания и т.д.

Для ретроспективной диагностики заболевания может бать использован серологический метод.

Задание. Провести бактериологическое исследование мясного фарша с целью выведения возбудителей пищевой токсикоинфекции?

Выполнение задания. Учитывая полиэтиологический характер заболевания, исследуемый материал засевают одновременно на ряд сред: в среду обогащения (селенитовый бульон, среда Мюллера и т.п.), на скошенный агар по методу Шукевича, на одну из дифференциально-диагностическифх сред для кишечных бактерий и др. Посевы помещают в термостат. На второй день при наличии роста, выросшие культуры подвергают морфологической, биохимической и серологической идентификации.

При обнаружении на дифференциально-диагностической среде окрашенных колоний, отсутствии роста в посеве по Шукевичу может быть сделано предположение о наличии эшерихий. Их идентификация осуществляется по преведенной ранее схеме (см. тема №1).

При обнаружении ползучего роста на плотных средах и в посеве по Шукевичу делается предположение о наличии бактерий рода протея (Н-форма). Идентификация возбудителя проводятся на основании изучения морфологических (микроскопия мазков, окрашенных по Граму), биохимических свойств (посев на среды пестрого ряда) и определения серотипа (реакция агглютинации по идентификации с типовыми О- и Н-протейнмми сыворотками) .

При обнаружении на дифференциально-диагностической среде бесцветных колоний и отсутствии роста в посеве по Шукевичу дальнейшее исследование ведется в направлений идентификации сальмонелл, протея (О-форма) или лактозоотрицательных эшерихий,

Принадлежность выделенной культуры к сальмонеллам устанавливается на основании изучения морфологии (микроскопий мазков, окрашенных по Граму, подвижность) и ферментатилной активности (посев в среды пестрого ряда). Серологическое типирование сальмонелл проводят в два этапа. На первом этапе определяют принадлежность к группе, используя О поливалентные (смесь) и О-монорецепторные сыворотки, на втором - Н-монофазные сыворотки соответствующей О-серогруппе, определяя тип выделенной культуры.

Идентификация лактозоотрицательнвх эшерихий основана на изучении их ферментативной активности и антигенного строения (см. тема №1).

Результаты исследования оформляют в виде протокола.

Ситуационные задачи:

В стационар поступил больной с подозрением на пищевую токсикоинфекцию. Какие методы микробиологической диагностики используются для подтверждения клинического диагноза?

Больной поступил в клинику о подозрением на пищевую токсикоинфекцию. Какой материал необходимо взять на исследование?

3. В баклабораторию доставлен салат для выделения возбудителей пищевых токсикоинфекций. На какие питательные среды производится первичный посев?

4. В одном из детских садов отмечены случаи пищевой токсикоинфекции Какой материал необходимо взять на исследование?

5. При первичном посеве фарша на среде Эндо обнаружены бесцветные колонии. Каков дальнейший ход исследования?

6. В ходе бакисследования фарша выделены бактерии, относящиеся к роду сальмонелл. Как определить их тип?

7. В ходе бакисследования салата выделены грамотрицательные палочки. На среде Эндо бесцветные колонии. Лактозу не расщепляют на коротком пестром ряде - кислота и газ, сероводород и индол образуется. На лакмусовом молоке -легкое порозовение. О каком возбудителе можно думать в данном случае?

8. При первичном посеве рвотных масс на среду Эндо выросли красные колонии с металлическим блеском. Каков дальнейший ход бактериологического исследования?

9. При первичном посеве винигрета обнаружен ползучий рост на плотных питательных средах. Каков дальнейший ход исследования?

10. Первичный посев крема был произведен на кровяной агар. Через сутки обнаружены пигментные колонии, окруженные зоной гемолиза. Каков дальнейший ход исследования?

11. Из очага пищевой токсикоинфекции в баклабораторию поступили остатки пищи, рвотные массы смывы с посуды и разделочных досок. При бакисследовании обнаружено; в рвотных массах протеи; в смывах - протеи и кишечная палочка. Какой из выделенных микроорганизмов является наиболее вероятным возбудителем пищевой токсикоинфекции.

12. После употребления рыбы отмечены случаи пищевой токсикоинфекции. При посеве данного материала на кровяной агар выросли мелкоточечные блестящие колонии, окруженные зоной гемолиза. О каком возбудителе пищевой токсикоинфекции может идти речь.

13.В результате бакисследования сметаны выделен стафилококк. Как доказать его этиологическую роль в заболеваниях, возникших у группы лиц, употреблявших этот продукт.

Тема 5. Холера

Холера - острое инфекционное заболевание, вызываемое вибрионами (классическим, Эль-Тор и НАГами). Основный методом лабораторной диагностики является бактериологический и его ускоренные модификации,

Исследование проводится для подтверждения диагноза заболевания, контроля за выздоровлением, выявлении носительства и индикации возбудителя в объектах внешней среды.

Материалом для бактериологического исследования служат испражнения, рвотные массы, трупный материал, вода и др.

Для ретроспективной диагностики используется серологический метод.

Задание 1. Провести бактериологическое исследованиеиспражнений больного с подозрением на холеру.

Выполнение задания. Испражнения засевают параллельно в жидкую (1% пептонная вода) и на плотную (щелочной агар) элективные среды. Посевы помещают в термостат.

Через 6-8 часов при наличии типичного роста на средах (пленка на поверхности пептонной воды и прозрачные голубоватые колонии на агаре). Проводятся их дальнейшая морфологическая, биохимическая и серологическая идентификация.

Морфологическая идентификация осуществляется микроскопией мазков, окрашенных по Граму и определением подвижности, биохимическая - изучением ферментативной активности (в осо бенности ферментация сахарозы, маннозы ,арабинозы), разжижения желатины, образования индола и др. , серологичееские - постановкой реакции агглютинации по идентификации с холерной О и Н-сыворотками. Для определения биотипа ставят пробы с полимиксином, специфическими фагами и проверяют гемолитическую активность (см. схему дифференцировки).Внутривидовая идентификация осуществляется с использованием холерных фагов и специфических типовых агглютинирующих сывороток.

Задание 2. Провести бактериологическое исследование воды на присутствие холерных вибрионов.

Выполнение задания. Исследуемую воду (в объеме 500-1000 мл) вносят во флаконы с раствором пептона до конечной концентрации 1%. Посевы помещают в термостат на 10-12 часов. При появлений на поверхности пленки из нее делают мазки по Граму и высев на щелочной агар, При наличии типичных колоний дальнейшее исследование проводят так же, как и исследование испражнений (см. выше),

Результаты оформляю в виде протокола.

Ситуационные задачи:

1. Больной поступил в клинику с подозрением на холеру. Какие методы микробиологической диагностики используют для подтверждения клинического диагноза?

2. Больной поступил в клинику инфекционных болезней с подозрением на холеру. Какой материал необходимо взять для бактериологического исследования, чтобы подтвердить клинический диагноз?

3. В санэпидсианцию доставлена вода из открытого водоема для выделения холерных вибрионов. На какие питательные среды производят первичный посев?

4. При первичном посеве воды на пептонную воду, черев 6 часов на поверхности среды появилась пленка. Каков ход дальнейшего бактериологического исследования?

5. В ходе бактериологического исследования испражнений выделен вибрион чувствительный к полимикоину и бактериофагу "С", не дает агглютинации с куриными эритроцитами. К какому биотипу относится выделенная культура?

Тема 6. Серологическая диагностика кишечных инфекций

Серологическая метод диагностики (обнаружение инфекционных антител в сыворотке обследуемого) широко применяется при лабораторном подтверждении диагноза у больных кишечными инфекциями. С этой целью чаще всего используется реакция агглютинации с бактериальными (РА) или эритроцитарными (РПГА) диагностикумами.

Инфекционные антитела в сыворотках больных кишечными инфекциями появляются со 2-ч дня болезни. По мере развития заболевания количество их нарастает и может достигать титров 1/800-1/1600 и выше. В зависимости от характера используемого диагностикума (бактериальный или эритроцитарный) и его природы (дизентерийный, холерный, сальмонеллезный О-,Н или Ви) исследуемая сыворотка разводятся от 1/20-1/40 до 1/800 -1/1600.

Характерным признаком инфекционных антител/позволяющим отличить их от анамнестических и поствакцинальных, является увеличение их количества по мере развития заболевания.. Чтобы проследить за динамикой изменения количества антител в ходе развития заболевания исследуют парные сыворотки, т.е. сыворотки, полученные от больного в разные сроки болезни.

Реакция Видаля. Реакция Видаля используется как метод серологической диагностики брюшного тифа и паратифов.

Компоненты реакции: 1. Сыворотка обследуемого 2. Физиологический раствор. 3. Диагностикумы: брюшнотифозный - О брюшнотифозный - ОН паратифозный А - ОН паратифозный В - ОН

Задание 1. Поставить реакцию Видаля с сыворотками

больного, взятыми на 8-й и 16-й день болезни.

Выполнение задания. Сыворотку разводят физиологическим раствором в отношениях 1/50-1/I600 (объем 1 мл). Готовят 4 таких ряда, В пробирки каждого ряда вносят по 2-3 капли одного из диагностикумов (брюшнотифозный О, брюшнотифозный ОН, паратифозный А и В), встряхивают и помешают в термостат на 18-20 часов. Опыт сопровождается контролем диагаостикума. На следующий день учитывают результаты реакции и оформляют в виде протокола.

Реакция агглютинации с сальмонеллезными диагностикумами. Используется как метод серологической диагностики сальмонеллезов. Наиболее частым возбудителем сальмонеллезной инфекции (до 80%) является сальмонелла мышиного тифа (тифимуриум) Компонента реакции: I; Сыворотка обследуемого

2,Физиологический раствор

3.Сальмонеллезный диагностикум тифимуриум

Задание 2. Поставить реакцию агглютинации с сывороткой больного с подозрением на сальмонеллезную инфекцию.

Выполнение задания. Сыворотку крови разводят физиологическим раствором в отношениях 1/50-1/800 (объем 1 мл). В каждую пробирку вносят по две-три капли диагностинума (тифимуриум). Встряхивают, помещают в термостат на 18-20 часов. Опыт сопровождается контролем диагностикума. На следующий день учитывают результат реакции и оформляют в виде протокола.

Дизентерийный Видаля . Используется как метод серологической диагностики дизентерии. Чаще всего дизентерию вызывают шигеллы Флекснера и Зонне. Компоненты реакции:I. Сыворотка обследуемого

Физиологический раствор

Дизентерийные диагностикумы Флекснера и Зонне.

Задание 3. Поставить реакцию агглютинации о сывороткой больного с подозрением на дизентерию

Выполнение задания. Сыворотку больного разводят физиологическим раствором в отношении 1/50 - 1/800 (объем I мл). Готовят 2 таких ряда. Во все пробирки каждого ряда вносят по 2-3 капли одного из дизентерийных диагностикумов (Зонне, Флекснера), встряхивают я помещают в термостат. Контроль тот же что и в реакции Видаля. Результат учитывают на следующие сутки и оформляют в виде протокола.

Создание эритроцитарных диагностикумов (Брюшнотифозных, дизентерийных, холерных, сальмонеллезных) позволило широко использовать для серологической диагностики кишечных инфекций реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА). Эта реакция отличается высокой чувствительностью, четкостью и демонстративностью результатов, простотой выполнения. Для ее постановки необходимы: сыворотка обследуемого, физиологический раствор и соответствующий поставленной задаче эритроцитарный диагностикум.

Задание 4. Поставить РПГА с целью серологической диагностики тифозного бактерионосительства

Выполнение задания. Сыворотку крови бодьного разводят физиологическим раствором 1/20-1/640 (объем 0,5 мл). В каждое разведение вносят по две капли эритроцитарного брюшнотифозного Ви-диагностикума, Встряхивают и помещает в термостат на 2-4 часа или оставляют на.сутки при комнатной температуре. Учитывают результат и оформляют протокол.

Задание 5. Поставить РПГА с целью серологической диагностики дизентерии.

Выполнение задания. Сыворотку крови больного разводят физиологическим раствором 1/20-1/320 (объем 0,5 мл). Готовят несколько таких рядов. В разведении каждого ряда вносят по 2-3 капли эритроцитарного диагностикума (Зонне, Флекснера, Бойда). Встряхивают и помещают на 2-4 часа в термостат или оставляют на сутки при комнатной температуре. Учитывают результаты и оформляют их в виде протокола.

Ситуационные задачи:

Больной К. , 42 лет поступал в клинику инфекционных болезней с подозрением на тифо-паратифозное заболевание. Считает себя больным 10 дней. Бактериологическое исследование крови дало отрицательный результат. Какие еще методы лабораторной диагностики можно применись для обследования данного больного?

У больной А., 18 лет, поступившей в клинику инфекционных болезней о подозрением на тифо-паратифозное заболевание зарегистрируем следующие результаты Видаля:

Диагностикумы	День болезни
	6	11
Брюшнотифозный О	1/150	1/100
Брюшнотифозный ОН	1/100	1/400
Паратифозный А	1/50	1/50
Паратифозный В	1/50	1/50

Ваше мнение относительно диагноза у данной больной? Обоснуйте его.

3. Больной Р. , 47 лет поступил в клинику инфекционных болезней с жалобами на сильные головные боли, высокую температуру, общее недомогание.

Больным себя считает 6 дней.

Результаты реакции Видаля следующие:

Диагностикумы	Разведения сыворотки
Брюшнотифозный О	1/100
Брюшнотифозный ОН	1/200
Паратифозный А	1/50
Паратифозный В	1/50

Ваше мнение относительно диагноза заболевания у данного больного? Обоснуйте его.

4. Больной Д_. , 22 лет обратился к врачу поликлиники с жалобами на общее недомогание, высокую температуру, головные боли.

Был поставлен диагноз ОРЗ (острое респираторное заболевание) и выдан больничный лист. Через 10 дней несмотря на проводимое лечение состояние больного не улучшилось, врач направил сыворотку больного на серологическое исследование для исключения тифо-паратифозного заболевания.

Результаты реакции Видаля следующие:

Диагностикумы	Разведения сыворотки
Брюшнотифозный О	1/50
Брюшнотифозный ОН	1/50
Паратифозный А	1/50
Паратифозный В	1/100

Ваше мнение по результату реакции?

5. В детском саду № 196 зарегистрирована вспышка брюшного тифа среди детей. Бактериологическое обследование здоровых, а также персонала не выявило брюшнотифозных бактерионосителей. Какие еще методы лабораторного исследования следует применить для выявления носительства в данном коллективе?

6. Больная З., 16 лет поступила в клинику инфекционных болезней на 7 день с начала заболевания с жалобами на частый жидкий стул с примесью слизи и крови, общую слабость, повышенную температуру. До поступлений в клинику в течение 5 дней принимала левомицетин и фталазол.

В клинике поставлен диагноз - острая дизентерия. Какие методы лабораторной диагностики, помимо бактериологического, Вы порекомендуете применить для подтверждения диагноза у данной больной?

7. Три месяца назад в одном из районов города была зарегистрирована вспышка пищевой токсикоинфекции, в ходе которой заболело 13 человек. При бактериологическом исследовании материала от больных выделить возбудителя не удалось.

При бактериологическом исследовании в этот же период времени различных образцов мяса из столовой (все заболевшие связывают свое заболевание с употреблением пищи в этой столовой) выделена культура сальмонелл мышиного тифа.

Можно ли доказать этиологическую роль этого возбудителя при указанной вспышке?

Дифференциация энтеробактерий по биохимическим тестам

Ситематичес-кие группы	Escherichia	Salmonella	Klebsiella	Proteus	Pseudomanas aeruginosa
	Escherichiae	Shigella	Salmonella	Citrobacter	Klebsiella	Serratiae	Vulgaris	Mirabilis
Тест или субстрат
Индол	+	+-	-	-	+-	-	+	-	-
Метилрот	+	+	+	+	-	+-	+	+	-
Фогес-проскауэр	-	-	-	-	+	+-	-	-	-
Цитрат Симонса	-	-	+-	+	+	+	+-	+	+
H2S	-	-	+	+-	-	-	+	+	-
Уреаза	-	-	-	+-	+	+-	+	+	+-
Подвижность	+-	-	+	+	-	+	+	+	+
Желатин	-	-	-	-	-	+	+	+	+
Газ на глюкозе	+	-	+	+	+	+-	+-	+	-
Лактоза	+	-	-	+-	+	-	-	-	-
Маннит	+	+-	+	+	+	+	-	-	-
Сахароза	+-	-	-	+-	+	+	+	+-	-
Фенилаланиндезаминаза	-	-	-	-	-	-	+	+	-
Лизиндекарбоксилаза	+-	-	+	-	+	+	-	-	-
Оксидаза	-	-	-	-	-	-	-	-	+
Ксилоза	+-	-	+	+-	+	+-	+-	+	+(89%)
Пигмент	-	-	-	-	+-	+-	-	-	+(89%)

Условные обозначения:

+ наличие признака

- отсутствие признака

+ - непостоянно

Размещено на Allbest.ru

...