Влияние гипергликемии на достоверность определения белка в сыворотке крови
Подготовка биологического материала для клинико-биохимических лабораторных исследований как важнейшая составная часть долабораторного этапа. Знакомство с основными особенностями влияния гипергликемии на достоверность определения белка в сыворотке крови.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | статья |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 20.04.2022 |
| Размер файла | 42,1 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru
Влияние гипергликемии на достоверность определения белка в сыворотке крови
Цикуниб А.Д., Ожева Д. М.
Лаборатория нутрициологии и экологии
НИИ комплексных проблем АГУ
Аннотация
Исследования влияния гипергликемии на результаты определения белка в сыворотке крови показали, что при концентрации глюкозы более 10 мМоль/л коэффициент вариации определения белка выходит за пределы нормы, что снижает стабильность и достоверность получаемых результатов.
Ключевые слова: сыворотка крови, гипергликемия, достоверность определения белка.
Abstract
Influence of hyperglycemia on the reliability of determination of protein in blood serum
Tsikunib A. D., ОхИеуа D.M.
Nutritionand Environment Laboratory Of Scientific Research Institute of comple Problems Of Adyghe State University
Research of the effect of hyperglycemia on serum protein determination results showed that when the glucose concentration is more than 10 mMol /l, the coefficient of variation in protein determination is outside the normal range, which reduces the reliability of the results.
Keywords: blood serum, hyperglycemi, protein determination confidence.
Введение
биологический клинический кровь
Подготовка биологического материала для клинико-биохимических лабораторных исследований является важнейшей составной частью долабораторного этапа, включающего назначение анализа, взятие биологического материала, его обработку и доставку в лабораторию [2, 9, 16]. Ошибки, возникающие на внелабораторном этапе анализа, составляют 70-95% от общего их числа, и именно они могут оказаться непоправимыми и полностью обесценить весь ход проводимых лабораторных исследований [1, 5, 6].Если биологическая проба собрана и доставлена с нарушениями правил, то ее исследование в лаборатории не только бессмысленно, но и вредно, может привести к неправильному результату научных исследований, если это касается исследовательских биохимических лабораторий, или неправильному диагнозу, ненужным дополнительным обследованиям, если это касается клинико-диагностических лабораторий.
На результаты лабораторных исследований могут оказать существенное влияние многочисленные факторы, в первую очередь, условия взятия пробы, приём пищи, физическая нагрузка, положение тела, стресс во время взятия пробы, физиологические закономерности, влияние окружающей среды, воздействие алкоголя, никотина, наркотиков, лекарственные средства и др. [4, 7, 8, 10, 11, 12, 13, 14].
Предугадать как увеличение или, наоборот, уменьшение содержания одного аналита в биоматериале, в частности сыворотке крови, являющемся наиболее частым объектом биохимических исследований, может повлиять на достоверность определения другого аналита невозможно без проведения соответствующих исследований [3, 9, 15, 16].
Учитывая многочисленность таких возможных комбинаций, обусловленных большим количеством аналитов в биоматериале, проведение таких исследований является актуальным и существенную теоретическую и практическую значимость. В связи с этим, целью наших исследований явилось изучение влияния гипергликемии на достоверность результатов определения белка в сыворотке крови.
Материалы и методы исследования
Объектами исследования явились модельные образцы, изготовленные из мульти сыворотки крови здоровых людей путем добавления глюкозы и с получением проб с различной концентрацией глюкозы: № 1 - 5,5 мМоль/л (исходная сыворотка, с добавлением необходимого объема дистиллированной воды), № 2 - 10,5мМоль/л, № 3 - 15,5 мМоль/л, № 4 - 20,5мМоль/л. Во всех пробах определяли содержание общего белка с использованием набора реагентов ВИТАЛ-01 биуретовым методом. Принцип метода заключается в том, что белок образует окрашенный комплекс с ионами меди в щелочной среде. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации общего белка и измеряется фотометрически при длине волны 540 (500-560) нм. В состав набора входят биуретовый реагент (натр едкий-0,5 моль/л, калий-натрий виннокислый-80 ммоль/л, калий йодистый-75 ммоль/л, сульфат меди-30 ммоль/л) и калибровочный раствор общего белка с концентрацией 60 г/л с добавлением хлористого натрия 9 г/л и азида натрия 1 г/л.
Для проведения анализа из концентрата биуретового реагента готовили рабочий раствор и дальше в пробирки вносили реактивы согласно схеме, представленной в таблицей
Таблица 1- Схема проведения анализа определения общего белка.
|
Отмерить, мл |
Опытная проба |
Калибровочная проба |
Контрольная проба |
|
|
Сыворотка крови |
0,10 |
- |
||
|
Калибровочный раствор общего белка |
- |
0,10 |
||
|
Вода дист. |
- |
0,10 |
||
|
Рабочий раствор биуретового реагента |
5,00 |
5,00 |
5,00 |
Содержимое пробирок тщательно перемешивали, избегая образования пены, инкубировали при комнатной температуре (+18-25° С) в течение 30 минут, после чего измеряли величину оптической плотности калибровочной и опытных проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 540 (500-560) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 1 см. Концентрацию общего белка рассчитывали по формуле:
где: С - концентрация общего белка в опытной пробе, г/л;
Ео - оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;
Ек - оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;
60 - концентрация общего белка в калибровочном растворе, г/л.
Аналитические характеристики метода: линейность - отклонение не более 3 % в диапазоне концентраций10-120 г/л; чувствительность - не более 5г/л; коэффициент вариации не более 5 %.
Аппаратура, использованная при проведении исследовании: весы лабораторные аналитические OHAUS Pioneer PA, спектрофотометр Unico 2802 S, термостат электрический суховоздушный TC-1/20 СПУ, центрифуга лабораторная Опн-8, сушильный шкаф, pH метр.
Статистическую обработку результатов проводили в программе MS Excel. Исследование проводилось на базе лаборатории нутрициологии и экологии НИИ КП АГУ.
Результаты и их обсуждение
Высокое содержание одних аналитов снижает или наоборот увеличивает содержание или активность других аналитов. Так, выявлено влияние повышенного уровня глюкозы на следующие аналиты как общий билирубин (+10,5%), активность АЛТ (±13,4%) и АСТ (+11,1%), креатинин (+51,4%).
Нами проведены исследования по выяснению влияния гипергликемии на содержание общего белка в сыворотке крови. Выбор данных показателей обусловлен, тем, что исследование содержания глюкозы и общего белка входят в перечень самых распространенных биохимических исследований, являются эффективным и финансово доступным методом диагностики целого ряда заболеваний.
Показатели абсорбции исследованных проб представлены в таблице2.
Таблица 2. - Показатели абсорбции исследуемых проб (А опыт.) и калибровочных проб (А контр.)
|
Пробы |
Оптическая плотность (Е опыт.) |
|||
|
Х1 |
Х2 |
Х ср. |
||
|
1 |
0,097 |
0,094 |
0,096±0,0015 |
|
|
2 |
0,113 |
0,114 |
0,090±0,0025 |
|
|
3 |
0,093 |
0,088 |
0,114±0,0030 |
|
|
4 |
0,111 |
0,099 |
0,105±0,006 |
|
|
калибровочный раствор |
оптическая плотность (Е контр.) |
|||
|
0,10 |
0,09 |
0,113±0,001 |
Результаты определения содержания общего белка в сыворотке крови представлены в таблице3.
Таблица 3- Содержание общего белка в модельных образцах сыворотки крови
|
Пробы |
Содержание глюкозы, мМоль/л |
Концентрация белка, % |
|
|
1 |
3,5 |
60,6±0,91 |
|
|
2 |
10,5 |
56,8±1,42 |
|
|
3 |
15,5 |
72,0±2,16 |
|
|
4 |
20,5 |
66,3±2,97 |
По результатам исследований, не выявлено тесной корреляционной зависимости, как прямой, так и отрицательной, между содержанием глюкозы в крови и количеством определяемого белка,т.е высокие уровни глюкозы могут как завышать (+ 11,4%), так и занижать (-3,8%) результаты определения белка, это приводит к тому, что при концентрации глюкозы более 10,5мМоль/л коэффицент вариации определения белка выходит за пределы нормы (таблица 4).
Таблица 4-Коэффициент вариации определения белка в пробах с разным уровнем глюкозы.
|
Пробы |
1 |
2 |
3 |
4 |
норма |
|
|
Коэффициент вариации |
3,1% |
0,9% |
10,8% |
5,4% |
не более 5% |
Так, при концентрации глюкозы, равном 15,5 мМоль/л коэффициент вариации определения белка выходит за пределы нормы на 5,4%, а при 20,5%- на 0,4%.
Выводы
Исследования показали, что высокие уровни глюкозы могут как завышать (+ 11,4%), так и занижать (-3,8%) результаты определения белка и при концентрации глюкозы более 10 мМоль/л коэффициент вариации определения белка выходит за пределы нормы равные 5%, что свидетельствует о нестабильности и недостоверности получаемых результатов.
Литература
1. Гильманов А.Ж. Современные технологии преаналитического этапа исследования газов и электролитов крови // Медицинский алфавит. Современная лаборатория. 2013. Вып.
2. С. 47-50.
2. Влияние гипергликемии на показатели биохимического анализа крови IN VITRO / Ф.Н. Гильмярова, О.А. Гусякова, О.А. Балдина [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. 2018. Т. 63, № 4. С. 205-210.
3. Данилова Л.А. Анализы крови и мочи. Санкт-Петербург: Салит: Деан, 2000. 128 с.
4. Диагностические пробы: от пациента до лаборатории / В.Г. Гудер, С. Нарайанан, Г. Виссер, Б. Цавта; пер. с англ. В.В. Меньшикова // GIT VERLAG 2009. RussianVersion by Becton Dickinson&Co, 2010. 118 с.
5. Кишкун А.А. Справочник заведующего клинико-диагностической лабораторией. Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2010. 704 с.
6. Кочетов А.Г., Лянг О.В., Огурцов П.П. Подготовка пациента, правила взятия, хранения и транспортировки биоматериала для лабораторных исследований. Общие правила: методические рекомендации. Москва: РУДН, 2013. 39 с.
7. Меньшиков В.В. Клиническая лабораторная аналитика. Т. II: Частные аналитические технологии в клинической лаборатории / под ред. В.В. Меньшикова. Москва: Лабпресс, 2000. 734 с.
8. Сравнительная оценка некоторых лабораторных показателей функциональной активности щитовидной железы в образцах капиллярной и венозной крови при единовременном заборе биоматериала / А.Ю. Ольховик, П.С. Садовников, А.В. Васильев [и др.] // Клиническая и экспериментальная тиреоидология. 2017. № 13 (2). С. 39-44.
9. Скороходова Т.Г., Матушкина С.В., Грищенко Д.А. Современные технологии для качественного анализа капиллярной крови // Клинико-лабораторный консилиум. 2013. № 1 (45). С. 34-39.
10. Цикуниб А.Д., Мягкова А.С. Биохимический анализ мочи. Лабораторный практикум. Майкоп: Изд-во АГУ, 2018. С. 26-28.
11. The detection and measurement of interleukin-6 in venous and capillary blood samples, and in sweat collected at rest and during exercise / S. Faulkner, K. Spilsbury, J. Harvey [et al.] // European Journal of Applied Physiology. 2014. № 114 (6). С. 1207-1216.
12. Significant differences between capillary and venous complete blood counts in the neonatal period / S. Kayiran, N. Ozbek, M. Turan, B.Gurakan // Clinical and Laboratory Haematology. 2003. № 25 (1). С. 9-16.
13. Lippi G., Avanzini P., Cervellin G. Prevention of hemolysis in blood samples collected from intravenous catheters // Clin. Biochem. 2013. Vol. 46, № 7-8. P. 561-564.
14. Comparison of capillary whole blood versus venous plasma glucose estimations in screening for diabetes mellitus in epidemiological studies in developing countries / M. Priya, R. Mohan Anjana, R. Pradeepa [et al.] // Diabetes Technology & Therapeutics. 2011. № 13 (5). С. 586-591.
15. Simundic A.M., Lippi G. Preanalytical phase - a continuous challenge for laboratory personals // Biochem. Med. (Zagreb), 2012. Vol. 22, № 2. P. 145-149.
16. Tatsumi N., Miwa S., Lewis S. Specimen collection, storage, and transmission to the laboratory for hematological tests // International Journal of Hematology. 2002. № 75 (3). С. 261-268.
Размещено на Allbest
...Подобные документы
Классификация белков - высокомолекулярных органических азотсодержащих соединений, состоящих более чем из 20 видов альфа-аминокислот. Физиологическая функция белков плазмы крови: альбумины, глобулины. Методы определения общего белка в сыворотке крови.
реферат [25,8 K], добавлен 19.01.2011Степени тяжести гипергликемии - клинического симптома, обозначающего повышенное содержание сахара (глюкозы) в сыворотке крови по сравнению с нормой. Острый эпизод гипергликемии без видимой причины. Приборы для измерения уровня сахара - глюкометры.
презентация [492,0 K], добавлен 24.12.2014Основные показатели биохимического анализа крови. Гестозы второй половины беременности. Оценка степени их тяжести. Определение и динамика содержания общего белка, мочевины, креатинина, глюкозы, фибриногена и трансаминаз в сыворотке и плазме крови.
дипломная работа [50,5 K], добавлен 10.11.2015Причины дефицита железа в организме. Исследования крови при анемии. Клинические проявления железодефицитной анемии. Определение содержания креатинина в сыворотке крови. Общий белок и белковые фракции. Определение содержания мочевины в сыворотке крови.
дипломная работа [226,6 K], добавлен 10.11.2015Поджелудочная железа и ее роль в обмене веществ. Механизмы нарушения функциональной деятельности поджелудочной железы при панкреатите. Определение билирубина в сыворотке крови у больных панкреатитом. Показатели активности альфа-амилазы в сыворотке крови.
дипломная работа [72,7 K], добавлен 20.02.2016Эпидемиология, этиология и патогенез острого и хронического пиелонефрита. Изменения биохимических показателей крови, показателей азотистого и белкового обмена. Морфологическое исследование элементов осадка мочи. Определение креатинина в сыворотке крови.
курсовая работа [166,8 K], добавлен 03.11.2015Транскутанная билирубинометрия как метод диагостики гипербилирубинемии новорожденных. Описание методов определения метаболитов пигментного обмена в сыворотке крови. Процессы обезвреживания свободного билирубина и мезобилиногена в печеночной клетке.
реферат [2,1 M], добавлен 13.02.2011Автоматические методы анализа клеток крови. Основные источники ошибок при подсчете эритроцитов и лейкоцитов в камере. Особенности влияния различных факторов на результаты исследования крови. Информативность и достоверность гематологических тестов.
реферат [44,1 K], добавлен 20.12.2012Креатинин и процесс его обмена в организме, его концентрация в крови. Алгоритм проведения исследования содержания креатинина в сыворотке крови на биохимическом анализаторе "ClimaPlus" с использованием биохимических диагностических наборов фирмы "Диакон".
методичка [17,4 M], добавлен 05.02.2011Группа крови как признак, который передается по наследству, подвижная внутренняя среда организма, знакомство с краткой историей открытия. Рассмотрение способов определения резус-фактора. Общая характеристика методов определения отцовства по группе крови.
презентация [407,1 K], добавлен 15.12.2013Характеристика вирусных гепатитов с фекально-оральным механизмом передачи и передающихся половым и парентеральным путем. Оценка состояния обмена билирубина, активности ферментов и щелочной фосфатазы в сыворотке крови. Корреляция биохимических показателей.
дипломная работа [219,5 K], добавлен 13.01.2015Анамнез жизни пациента и проведение клинических исследований: анализ крови и мочи, определение уровня гормонов в сыворотке крови, допплерэхокардиография, УЗИ органов мошонки. Постановка диагноза: нарушение формирования пола, двусторонний крипторхизм.
история болезни [18,1 K], добавлен 05.06.2014История открытия антигенов системы резус. Группы крови, расовые особенности и заболеваемость. Методы определения групп крови. Формирование групп крови у плода. Инструкция по применению цилоклонов анти-А, анти-В для определения групп крови человека АВО.
контрольная работа [36,8 K], добавлен 24.06.2011Свертывание крови как сложный биологический процесс образования в крови нитей белка фибрина, образующих тромбы, в результате чего кровь теряет текучесть, приобретая творожистую консистенцию. Влияние на данный процесс возрастных изменений в организме.
презентация [729,4 K], добавлен 06.04.2016Особенности распределения глюкозы в крови. Краткая характеристика сути основных современных методов определения глюкозы в крови. Методики усовершенствования процесса измерения уровня глюкозы в крови. Оценка гликемии при диагностике сахарного диабета.
статья [24,8 K], добавлен 08.03.2011Хронический и острый панкреатит. Активность амилазы, липазы, трипсина. Глюкоза крови при остром и хроническом панкреатитах. Маркеры печеночной недостаточности. Определение активности альфа-амилазы, билирубина в сыворотке крови, гаммаглутаминтрансферазы.
курсовая работа [338,7 K], добавлен 01.12.2014Исследование активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови кроликов при однократном введении четыреххлористого углерода и процессе лечения токсических поражений с использованием традиционных и нетрадиционных методов детоксикации организма.
дипломная работа [1,1 M], добавлен 15.07.2012Системы групп крови - иммуногенетические признаки крови людей, определенные сочетания групповых изоантигенов в эритроцитах. Методики определения групп крови системы АВ0. Резус-конфликт, коагуляционный гемостаз, свертывание крови, регуляция фибринолиза.
реферат [1,6 M], добавлен 06.04.2011Виды и методы реинфузии, преимущества и недостатки. Правила заготовки, переработки, хранения, реализации крови и ее компонентов. Устройство для сбора крови, инструменты и приспособления. Оборудование для определения времени свертывания крови по Ли-Уайту.
презентация [969,5 K], добавлен 19.05.2014Исследование роли свободнорадикальных процессов в патогенезе ряда бактериальных инфекционных болезней. Определение содержания церулоплазмина в сыворотке крови у больных рожей в зависимости от периода заболевания и степени тяжести патологического процесса.
статья [15,4 K], добавлен 01.09.2013
