Импортозамещающая л-пе технология при лечении тяжелой формы генерализованного пародонтита

Размещено на http://www.allbest.ru/

ИМПОРТОЗАМЕЩАЮЩАЯ Л-ПЕ ТЕХНОЛОГИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ТЯЖЕЛОЙ ФОРМЫ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОГО ПАРОДОНТИТА

Неустроев Г.В., Гайдук И.В., Неустроева Ю.Д., Чикина Н.А., Горин Д.М., Ягов В.В.

Аннотация

регенераторный антивоспалительный пародонт генерализованный

Забирают по 10 мл венозной крови у 5 добровольцев, стабилизируют ее гепарином, проводят естественную седиментацию в течение 5 ч, выделяют в плазме крови три равные части (фракции): верхнюю- 1, среднюю - 2, нижнюю - 3. Нижнюю фракцию плазмы объединяют с 4-й фракцией (плазма-мениск и поверхностный слой эритроцитов). Полученный препарат соответствует неактивной форме L-PE. Добавляют к L-PE активатор плазмы СаС1 2, получают активный препарат AL-PE. Показано, что AL-PE превосходит L-PE по: 1/регенераторному, 2/антивоспалительному действию. Кроме того, AL-PE способен тормозить прогрессирующую возрастную деминерализацию твердых тканей пародонта у пожилого пациента с хроническим генерализованным пародонтитом.

Ключевые слова: клеточная плазмотерапия, неактивный L-PE и активированный препарат AL-PE, механизм их действия

Abstract

The import realise l-pe technology about the treatment of the difficult form of the parodontity. Neustroev G.V., Gaiduk I.V., Neustroeva Yu.D., Chikina N.A., Gorin D.M., Yagov V.V.

We take 10ml venous heparin blood from volunteer, accompanying this process with natural sedimentation, sort out the plasma of blood in three equal parts (fraction): upper -1, middle - 2, low - 3. Then we combine low fraction of the plasma with 4-th fractjon (the plasma-menisk and superficial layer of erythrocytes).

This preparation is unactive form of L-PE. We add CaCl 2 to this L-PE and get the active preparation AL-PE. It is shown that AL-PE exceed L-PE by biological activity in vitro and in vivo.

Keywords: the cell plasmotherapy, unactive L-PE and active AL-PE preparations, the mechanism their of the action.

При лечении заболеваний пародонта наряду с традиционными методами используют инновационные - клеточную (PRP) плазмотерапию. Имеются сообщения об ее эффективности у пациентов среднего возраста (25-40лет) с относительно нетяжелыми (1-2 степень) видами пародонтита (Ахмеров Р.Р., 2014, Микляев С.В. и др., 2018, Першуткина А.А. и др., 2018). Однако для лечения тяжелых форм заболеваний необходимы более активные препараты. В настоящее время существует несколько вариантов активации исходных инъекционных плазменных образцов:

1. Обогащение плазмы возрастающим количеством тромбоцитов от 200000 до 2000000/мм³ (PRP-препараты - Regen Lab, Plasmolifting, Endoret, Ycellbio),

2. Обогащение плазмы не только тромбоцитами, но и лейкоцитами (L-PRP препараты),

3. Обогащение плазмы тромбоцитами, лейкоцитами, бластами и небольшим количеством эритроцитов (L-PE препараты),

4. Повышение активности плазменных препаратов при помощи комбинированной терапии,

5. Превращение исходных образцов PRP и L-PRP в активные A-PRP, AL-PRP после обработки их триггерами (Са, тромбин, коллаген, температура). При получении перечисленных препаратов используются зарубежные технологии.

Возникает вопрос, можно ли с помощью импортозамещающей технологии из исходного препарата L-PE получить его активную форму.

Цель исследования: 1. Выделить неактивный препарат L-PE ( Л-ПЭ), перевести его в активную форму AL-PE (АЛ-ПЭ) без использования иностранного оборудования и реактивов (центрифуги, разделительные гели, пробирки). 2. Изучить влияние AL-PE (АЛ-ПЭ) на течение хронического генерализованного пародонтита тяжелой степени у пожилого пациента.

Материал и методы. Исследована кровь 5 добровольцев, у которых из локтевой вены забирали шприцом по 10мл крови, стабилизировали ее гепарином, подвергали естественной седиментации при низкой температуре 4С в течение 5ч, получали плазму и эритроцитарную массу. В плазме выделяли 3 равные фракции: верхнюю - 1, среднюю - 2, нижнюю - 3 и пограничную с эритроцитами 4-ю фракцию, состоящую из плазмы-мениска и поверхностного слоя эритроцитов с осевшими на них лейкоцитами. Соединяли 4-ю фракцию с 3-й, обогащенной лейкоцитами, тромбоцитами и бластными клетками. Полученная смешанная фракция плазмы соответствовала неактивированному препарату Л-ПЭ [8]. Концентрация эритроцитов в этой смешанной фракции плазмы составляла 5-8%. Для получения активной формы (АЛ-ПЭ) к неактивному препарату добавляли р-р СаС1 2. Для этого в стерильные опытные (а, б, в ) и контрольные (г, д) пробирки вносили равные количества Л-ПЭ, затем в опытные добавляли 10% р-р СаС1 2 по 0,01мл, 0,02мл, 0,2мл, а в контрольные - соответствующие количества физиологического раствора. Пробы помещали в термостат (температура 37С), где в опытных пробах происходил процесс гелеобразования, через 10 мин во все пробирки вносили по 0,2 мл Л-ПЭ (схемы опытов приведены в табл.1), добавляли антибиотики, винбластин и полученные смеси культивировали, наблюдали за интенсивностью бласттрансформации лейкоцитов под действием активированного АЛ-ПЭ и неактивированного препарата Л-ПЭ.

Особенность этих экспериментов состояла в том, что в опытных пробах на бласттрансформацию лейкоцитов действовали факторами роста (ФР), находящимися в растворе и сорбированными на нитях фибрина и фибринопептидов, а в контрольных - только растворенными в жидкой среде. Общее количество ФР в опытных и контрольных партиях было одинаковым. Через 2 суток инкубацию прекращали, для оценки гемолиза отбирали пробы из надосадочной жидкости, разводили их дистиллированной водой и измеряли экстинцию на СФ-РД 303 при 540микрон. Из осадка готовили мазки, фиксировали их по Романовскому-Гимза. Подсчитывали количество бластов в 30 и более полях зрения при увеличении 20х20, рассчитывали их среднее число на поле. Данные обрабатывали статистически. Помимо опытов in vitro эффективность активированного препарата АЛ-ПЭ изучали in vivo. С этой целью обследовали пациента в возрасте 83г с 3-й степенью хронического генерализованного пародонтита, которому до этого (14 мес. назад) проводили курс лечения неактивным препаратом Л-ПЭ. Такое лечение позволило снять признаки воспаления и укрепить слизистый барьер за счет регенерации эпителия, однако подвижность исследованных зубов (42, 41, 31, 32) на нижней челюсти сохранялась.

Для закрепления проведенной Л-ПЭ терапии, устранения подвижности зубов и гноетечения из одного пародонтального кармана, а также для оценки регенерации слизистой ротовой полости был назначен курс лечения активированным препаратом АЛ-ПЭ, включающим 4 сеанса с недельными интервалами. После предварительной местной анастезии убистеноном проводили инъекции препарата на нижней челюсти: 1/ в области пародонтальных карманов вдоль корней 4-х (42, 41, 31, 32) зубов, 2/в основания десневых сосочков, 3/ по переходной складке слизистой. Объем вводимого материала АЛ-ПЭ составлял 2мл. Остаток плазмы, бедный клеточными элементами, вводили в переходную складку слизистой десны нижней челюсти.

До лечения и через 2 суток после его окончания для представления об эффективности терапии проводили следующие лабораторные исследования: 1/ сбор слюны методом «сплевывания», 2/подсчет количества лейкоцитов в слюне в больших квадратах камеры Горяева, 3/определение высоты осадка в смывах ротовой полости после центрифугирования, 4/выявление в препаратах осадка «ключевых» клеток, клеток «муравейников», грибов Кандида, 5/определение токсичности смывов ротовой полости, 6/подсчет в отпечатках слизистой десны нижней челюсти молодых эпителиоцитов [7], 7/определение Са в слюне атомно-эмиссионным методом [10]. Кроме того после лечения снимали обзорную ортопантомограмму (ОПТГ-21) и сравнивали ее с предыдущими (ОПТГ-00, ОПТГ-18). Лабораторные исследования сопоставляли с клиническими наблюдениями.

Результаты и обсуждение. Как видно из табл.1, интенсивность бласттрансформации лейкоцитов в опытных партиях «а» и «б» значительно выше, чем в контрольных «г» и «д».

Таблица 1 - Интенсивность бласттрансформации лейкоцитов в опыте и контроле после 2 сут. инкубации

Примечание: 1/через 10мин в каждую пробу эксперимента вносили по 0,2мл Л-ПЭ, 2/в пробе «в» из-за высокой дозы СаС1 2 бласттрансформацию лейкоцитов наблюдать не удалось.

Стимуляция бласттрансформации носит выраженный дозовый характер: первоначально она возрастает («а» и «б»), однако при дальнейшем увеличении дозы активатора («в») наблюдается ее угнетение. Сравнение результатов действия двух препаратов показывает, что активная форма АЛ-ПЭ обладает более выраженным стимулирующим влиянием на клетки in vitro, чем ее неактивная форма. Аналогичным действием in vivo обладает активированный препарат АЛ-ПЭ на клетки слизистой ротовой полости испытуемого пациента. Из табл. 2 видно, что эпителиальный барьер регенерирует быстрее (на это указывает увеличение количества молодых эпителиоцитов).

Таблица 2 - Исследование слюны, смывов и отпечатков ротовой полости у пожилого пациента, страдающего хроническим пародонтитом, после проведения 4-х сеансов терапии АЛ-ПЭ

На повышенную регенерацию эпителиальной и соединительной ткани пародонта указывают также клинические наблюдения: 1/ слизистая была бледнорозового цвета, умеренно увлажнена, без признаков воспаления, она стала более плотной, игла с большим усилием входила в ткань, 2/глубина пародонтальных карманов уменьшилась с 3-5мм (исходные данные до лечения Л-ПЭ) до 2-4мм , 3/подвижность зубов после завершения лечения Л-ПЭ и АЛ-ПЭ (т.е. через 16 мес.) снизилась: исходная - 2-я степень, после лечения - у 3-х зубов (1-я степень), у одного (2-я степень) подвижности.

Кроме стимулирующего влияния на пролиферацию клеток слизистой ротовой полости, АЛ-ПЭ обладает антивоспалительным действием: низкая токсичность смывов, незначительная адсорбция микробов на клетках, исчезновение участков инфильтрации слизистой лейкоцитами (рис. 1, таб. 2)

Рис. 1. Инфильтрация слизистой полости рта лейкоцитами

Рис. 2. На ОПТГ-21 в области верхушки корня 31 зуба и вдоль всего корня четко видны очаги деструкции костной ткани

Лабораторные данные подтверждаются клиническими: 1/ в начале лечения АЛ-ПЭ из одного кармана наблюдалось выраженное гноетечение, в процессе лечения оно уменьшилось, а перед последним сеансом лечения прекратилось, 2/ после лечения АЛ-ПЭ у пациента отсутствовали исходные воспалительные признаки пародонтита.

Резюмируя изложенное, можно заключить, что АЛ-ПЭ обладает более выраженным стимулирующим действием на размножение клеток и более выраженным антивоспалительным влиянием, чем его неактивная форма Л-ПЭ.

Общие реакции организма на введение Л-ПЭ и АЛ-ПЭ:

1. Инъекции Л-ПЭ переносились пациентом хорошо, без температурных реакций,

2. После введения АЛ-ПЭ, в которых для активации использовались высокие дозы СаС1 2 (1:10) через 3ч отмечался кратковременный подъем температуры (38,5 С), который спустя 4ч снизился до 36,2 С. При дальнейших инъекциях доза СаС1 2 в препарате Л-ПЭ была уменьшена вдвое (1:20). В этих случаях никаких побочных реакций у пациента не наблюдалось (температура, А/Д, ЧСС, ЧД в пределах нормы). Полученные данные позволяют обсудить следующие вопросы:

1. Механизм развития кратковременной лихорадочной реакции на добавление высокой дозы СаС1 2 к препарату Л-ПЭ связан с активацией Са-зависимых ферментов метаболизма липидов мебран эритроцитов, развитием везикуляции, выходом Нв (гемолизом). Этот процесс сопровождается образованием пирогенных факторов (ЛПС). При уменьшении дозы СаС1 2 лихорадочная реакция исчезает, регенерация сохраняется. Учитывая это, дальнейшие 3сеанса введения АЛ-ПЭ проводили при уменьшении дозы СаС1 2 вдвое. Использование лихорадочной реакции при лечении пародонтита должно рассматриваться индивидуально: 1/ у пожилых пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями (напр., ГБ) дальнейшее лечение с повторением лихорадки нежелательно и поэтому терапию нужно проводить при пониженных концентрациях СаС1 2, что и было сделано в настоящей работе, 2/ у пациентов без сердечно-сосудистых заболеваний лечение на фоне лихорадки может дать дополнительный положительный эффект, т.к. последняя активирует специфические и неспецифические защитные реакции организма.

2. Механизмы повышения регенераторной и антивоспалительной реакций на введение АЛ-ПЭ. Усиление пролиферативных процессов инвитро (активация бласттрансформации лейкоцитов) и инвиво (повышение количества молодых эпителиоцитов слизистой полости рта) связан с действием 3-х видов факторов роста (ФР):

1. лейкоцитарных, источником которых являются присутствующие в препарате Л- ПЭ лейкоциты. Известно, что между количеством лейкоцитов и освобождающихся из них БАВ существует прямая зависимость [16]. Использование Л-ПЭ технологии приводит к увеличению количества лейкоцитов в препарате в 7-10 раз [8]. При добавлении Са к препарату Л-ПЭ происходит дополнительное выделение ФР за счет активации Са-зависимых цистеиновых протеаз. Кроме того происходит образование микровезикул, которые обладают свойствами стимуляторов роста [6]. Параллельно под действием Са в плазме из фибриногена образуются фибринопептиды, фибрин- мономеры, фибрин-полимеры, на которых сорбируются не только клетки, но и БАВ. Эта сорбция удлиняет срок жизни БАВ и обеспечивает более продолжитетельное их действие на клетки, находящиеся в разных фазах своего цикла [4, 11],

2. тромбоцитарных ФР. Источником их служат кровяные пластинки, количество которых так-же, как и лейкоцитов увеличивается в препарате Л-ПЭ. Это связано с тем, что при естественной седиментации, использованной в нашей технологии, скорость осаждения клеток зависит от величины их удельного веса. Согласно Европейским протоколам удельный вес тромбоцитов (легких, средних, тяжелых) составляет 1040-1080, а у лейкоцитов - 1062-1082. Близкие результаты получены и в отечественных исследованиях (Р.А.Поспелова,1973) соответственно 1030-1050 и 1040-1070. Совокупность этих данных означает, что «тяжелые» и «средние» тромбоциты вместе с лейкоцитами будут осаждаться с одинаковой скоростью и присутствовать в повышенных количествах в препарате Л-ПЭ. Как известно: 1/ тромбоциты выделяют около 30 цитокинов, ряд из них VEGF, TGF, PDEGF, JGF, FGF имеют большое значение в пролиферации разных типов клеток, 2/ у тромбоцитов, как и у лейкоцитов количество освобождающихся БАВ находится в прямой зависимости от их числа [13, 16]. Под действием Са количество освобождающихся ФР увеличивается, они также сорбируются на нитях фибриновых молекул и за счет этого удлиняют срок своей жизни. Кроме того тромбоциты способны освобождать микровезикулы, которые наряду с тромбоцитопоэтином участвуют в активации тромбоцитопоэза [2], 3.эритроцитарные ФР в качестве которых могут выступать микровезикулы (МВ), обнаруженные нами в препаратах Л-ПЭ и продукты гемолиза (таб. 1). Известно, что МВ образуются в процессе старения эритроцитов, их количество возрастает под влиянием разных факторов (анаэробные условия, ультразвук, СаС1 2, Н2О2 и др.) [1]. В экспериментах на кроликах продемонстрировано их стимулирующее действие на пролиферацию и дифференцировку эритроидных клеток.

Наши исследования показали, что при инкубации взвеси Л-ПЭ происходит везикуляция эритроцитов, их гемолиз и бласттрансформация лейкоцитов. Под действием Са в зависимости от дозы линейно увеличивается процесс деградации эритроцитов и бластрансформация лейкоцитов (таб.). Скорее всего, это связано с тем, что Са активирует Са-зависимые протеазы, способствующие отщеплению фрагментов мембран и образованию микровезикул, как это было обнаружено у лейкоцитов [6].

Итак, после инъекций АЛ-ПЭ перечисленные 3 группы факторов будут действовать на эпителиоциты слизистой нижней челюсти и фибробласты периодонтальной связки, а также их стволовые клетки. Так как стволовые клетки периодонтальной связки характеризуются более высокой скоростью пролиферации, чем другие стволовые клетки ротовой полости [5], можно предполагать, что регенерация связки будет также протекать быстрее. Помимо местных (регионарных) стволовых клеток в пролиферации могут принимать участие и привнесенные стволовые клетки и бласты, находящиеся во взвеси лейкоцитов в препарате Л-ПЭ [8].

Размножением перечисленных клеток можно объяснить появление таких клинических признаков как увеличение плотности слизистой десны, уменьшение глубины пародонтальных карманов, некоторое снижение подвижности зубов.

Наряду с активацией пролиферации клеток, АЛ-ПЭ оказывает выраженный антивоспали - тельный эффект, что проявляется как лабораторно, так и клинически в виде значительного уменьшения, а потом и полного прекращения гноетечения из пародонтального кармана. Механизм этого связан с: 1/присутствием в препарате АЛ- ПЭ большого количества лейкоцитов, обладающих высоким противовоспалительным потенциалом. Под действием Са эти лейкоциты способны усиливать освобождение БАВ [6], 2/ большим количеством тромбоцитов, с которыми после добавления Са могут происходить процессы, аналогичные описанным для лейкоцитов, приводящие к дополнительному выделению как стимулирующих ФР, так и антивоспалительных антимикробных пептидов [12, 14].

3. Причины незначительного уменьшения подвижности зубов нижней челюсти после лечения АЛ-ПЭ.

Фиксацию зубов обеспечивают: 1/ эпителий десны, 2/периодонтальная связка, 3/костная ткань - главный поддерживающий аппарат зуба. С возрастом у пожилых пациентов деминерализация зубочелюстной системы начинает преобладать над реминерализацией. На это указывает увеличение количества Са в слюне у нашего пациента до 2,5ммоль/л, в то время как у молодых пациентов (20-22 г) оно составляло 1,4+-0,17 ммоль/л. Эта особенность подтверждается анализом ортопантомограмм, имеющихся у пациента: 1/ ОПТГ-00 деструкция костной ткани на нижней челюсти отсутствует, 2/ ОПТГ-18 обнаруживается деструкция кости, в области верхушки корня 31 зуба видна гранулема размером 4х6мм, 3/ ОПТГ-21 деструкция кости увеличивается, от гранулемы размером 5х5мм вдоль всего корня 31 зуба снизу вверх распространяются две четкие узкие зоны засветления (рис. 2). Наблюдаемый процесс деструкции твердых тканей нижней челюсти клинически сопровождается выраженной подвижностью 31 зуба (2-я степень). В процессе лечения Л-ПЭ и АЛ-ПЭ (длительность наблюдений 16мес) пациент субъективно почувствовал улучшение, клинические признаки воспаления исчезли. Однако подвижность зубов снизилась незначительно. Концентрация Са в слюне в течение 6 мес. после АЛ-ПЭ терапии сохранялась практически на одном уровне (2,6; 2,3; 2,4; 2,9; 2,2; 2,9 ммоль/л ). Совокупность всех этих данных позволяет допустить, что АЛ- ПЭ терапия способна затормозить прогрессирующую декальцификацию твердых тканей пародонта. Небольшое уменьшение подвижности 41, 42, 32 зубов может быть связана с частичным восстановлением эпителиального барьера и периодонтальной связки за счет размножения эпителиоцитов и фибробластов. Для восстановления главного фиксирующего аппарата зубов - костной ткани необходимы не только стимуляция пролиферации остеобластов, но и образование ими внеклеточного коллагенового матрикса, его кальцификация. Настоящее исследование показало, что проведение одного курса АЛ-ПЭ терапии для успешной фиксации зубов еще недостаточно. С помощью такого курса можно лишь сдержать прогрессирующую деминерализацию зубочелюстной системы. Более эффективная терапия должна включать предварительное лечение каналов зубов с последующим проведением нескольких курсов АЛ-ПЭ терапии.

Итак, проведенное исследование дает основание считать, что АЛ-ПЭ по сравнению с Л-ПЭ обладает более выраженным: 1/регенераторным, 2/антивоспалительным действием, а также является 3/фактором, сдерживающим декальцификацию костной ткани нижней челюсти при пародонтите.

Эффективность разных видов клеточной плазмотерапии продемонстрирована во многих исследованиях [3, 9, 16]. В этих работах отмечены как положительные, так и отрицательные результаты. Соотношение между ними примерно 3:1 [3]. Причины неудач неясны. Не исключено, что результаты лечения можно будет улучшить за счет препаратов типа АЛ-ПЭ, содержащих набор разнообразных ФР, благодаря которым достигается эффект, наблюдаемый при комбинированной терапии.

Список литературы

1. Бархина Т.Г., Никитина Г.М., Бархина М.Н., Чернук А.С. Патология мембран форменных элементов крови при заболеваниях и в эксперименте. // Усп. совр. естествознания, 2006. № 6. С. 64-65.

2. Бутов К.Р., Осипова Е.Ю., Соколова С.Р., Колчин Н.А., Николаева Е.И., Николаев Р.В., Пантелеев М.А. Регуляция тромбопоэза тромбоцитарными микровезикулами. Сб. работ «Регенеративная биол. и мед.». М. Апр., 2021. С. 9.

3. Загородный Г.М., Муха П.Г., Ясюнович А.С., Гуревич Н.Л. Отечественный и зарубежный опыт применения PRP терапии в мед. и спорт. практике. // Приклад. спорт. наука, 2017. № 1(5). С. 83-91.

4. Зорина А.И., Зорин В.А. Применение препаратов PRP в косметологии. // Инъекционные методы в косметологии, 2015. № 4. С. 10-23.

5. Котова А.В., Домбровская Ю.А., Рюмина Н.А., Корчагина Н.М., Приходько Е.М., Енукашвили Н.И. Выявление экспрессии маркеров плюрипотентности ОСТ-4 и SSEA-4 в культуре ствол. кл. пульпы и пародонта. // Сб. науч. работ конф. «Регенер. биол. и мед.». М. Апр., 2021. С. 120-122.

6. Маркова К.Л., Коган И.Ю., Шевелева А.Р., Михайлова В.А., Селков С.А., Соколов Д.И. Микровезикулы лейкоцитарного происхождения. // Вест. РАМН, 2018. 73. № 6. С. 378-387.

7. Неустроев Г.В., Малый А.Ю., Малышев И.Ю., Джириков Ю.А., Чикина Н.А. Исследование токсичности при непереносимости материалов зубных протезов. // Хирург, 2012. № 8. С. 48-53.

8. Неустроев Г.В., Гайдук И.В., Горчаков М.Е., Неустроева Ю.Д. Плазмолифтинг в стоматологии, методы обогащения плазмы бластами и зрелыми лейкоцитами. // Сб. науч. ст. ХУ111 межд. конф. Пенза, 2020. Ч. 1. С. 236-241.

9. Поляева Т.О., Утц С.Р. Применение обогащенной тромбоцитами плазмы в дерматологии. // Сарат. науч. мед. ж., 2016. 12(9). С. 518-520.

10. Ягов В.В., Коротков А.С., Жарков А.А., Погонин В.И. Зуев. Портативный атомноэмиссионный спектрофотометр для анализа растворов на основе капельноискрового разряда. // Аналит. химия, 2019. 74. № 3. С. 234-240.

11. Amini F., Abiri F., Ramasamy Th.S., Tan E.S. Efficacy of PRP on skin rejuvenation. // Jran. J.Dermat., 2015. 18. P. 119-127.

12. Cieslik-Bieleska A., Ehrenfest D.M.D, Lubkowska A., Bielecki T. Microbicial properties of leukocyte - and platelet- rich plasma/fibrin L-PRP/L-PRF. // J.Biol.Reg.Homeostatic Agents, 2012. 26. № 2(1). P. 435-52 S.

13. Kobayashi Y., Saita Y., Nishio H. Leukocyte concentration and composition in PRP influences the growth factor and protease concentration. // J.Orthop.Science. 21. Issue 5. Sept., 2016. P. 683-689.

14. Tang Y.O., Yeman M.R., Selsted M.E. Antimicrobial peptides from human platelets. // Infect. Immun., 2002. 70. P. 6524-6533.

15. Timmerman A., Yandessel J., Jacobs A. The use of PRF in socket management and ridge preservation: a splitmouth randomizedcontrolled clinical trial. // J.Clin.Periodentol., 2016. Nov. 43(1). P. 990-999.

16. Wenjing Yin, Xin Qi, Yuelei Zhang. Advantages of pure platelet-rich plasma compared with Leucocyte-and platelet-rich plasma in promoting repair of bone defects. // J.Transl. Med., 2016. 14. P. 73.

Размещено на Allbest.ru