Динамика показателей спинномозговой жидкости в послеоперационный период при коррекции дегенеративного пояснично-крестцового стеноза у собак

Размещено на http://www.Allbest.Ru/

Динамика показателей спинномозговой жидкости в послеоперационный период при коррекции дегенеративного пояснично-крестцового стеноза у собак

Аннотация

Динамика показателей спинномозговой жидкости в послеоперационный период при коррекции дегенеративного пояснично-крестцового стеноза у собак представляет собой важный диагностический аспект, позволяющий осуществлять контроль над изменением состояния животных после хирургического вмешательства. Точный анализ спинномозговой жидкости дает широкий спектр информации о неврологическом здоровье пациента. Оценка должна состоять из макроскопического, количественного и микроскопического анализов. Количество клеток является наиболее важным и потенциально чувствительным индикатором заболевания. Целью данного исследования было определение изменений в спинномозговой жидкости в течение послеоперационного периода при коррекции дегенеративного пояснично-крестцового стеноза. В исследовании было 9 собак различных пород, в возрасте от 2 до 8 лет (опытная группа), в качестве контроля использовали показатели ликвора и периферической крови 3 здоровых беспородных собак, полученных в результате диспансеризации в возрасте до 5 лет.

Хирургическое вмешательство осуществляли по методу Б.П. Меий, Н. Бергкнут, заключающемуся в дорсальном доступе к дужкам позвонков L7-S 1, диссекции мягких тканей, рассечении дорсальной связки, формировании каналов в краниальных суставных отростках S 1, L7. От каждого животного трижды отбирали на исследование по три ликворограммы на 1-3-и сутки после операции, на 12-15-е и 27-30-е сутки после оперативного вмешательства. Исследование ликвора выполняли в течении 30 мин после взятия. В результате установлено, что клеточный состав ликвора собак в послеоперационный период коррекции пояснично-крестцового стеноза находился в пределах физиологической нормы, эритроциты в ликворе не были обнаружены. Количество ядросодержащих клеток у прооперированных собак было наибольшим в 1-3-и сутки после операции. На 12-15-е сутки цитоз в опытной и контрольной группе животных был больше на 1,17 кл/мкл. На 27-30-е су.т после операции цитоз у собак в опытной группе был ниже, чем в контроле на 0,43 кл/мкл. Анализ спинномозговой жидкости может помочь в диагностической оценке состояния животных в постоперационный период. Однако следует учитывать, что результаты редко бывают специфичными для какого-либо конкретного состояния и должны интерпретироваться в свете клинических и дополнительных диагностических данных.

Ключевые слова: собаки, дегенеративный пояснично-крестцовый стеноз, послеоперационный период, ликвор, периферическая кровь, цитоз клеток

Abstract

Dynamics of cerebrospinal fluid parameters in postoperative period during correction of degenerative lumbosacral stenosis in dogs is an important diagnostic aspect that allows monitoring changes in the state of animals after surgery. An accurate analysis of cerebrospinal fluid provides a wide range of information about the patient's neurological health. The assessment should consist of macroscopic, quantitative and microscopic analyses. Cell count is the most important and potentially sensitive indicator of disease. The aim of this study was to determine changes in the cerebrospinal fluid during the postoperative period in the correction of degenerative lumbosacral stenosis. In the study, there were 9 dogs of various breeds, aged from 2 to 8 years (experimental group), the indicators of cerebrospinal fluid and peripheral blood of 3 healthy outbred dogs obtained as a result of medical examination at the age of up to 5 years were used as a control.

Surgical intervention was carried out according to the B.P. Meij, N. Bergknut, which consists in dorsal access to the L7-S 1 vertebral arches, soft tissue dissection, dissection of the dorsal ligament, formation of channels in the cranial articular processes of S 1, L7. From each animal, three liquorograms were taken for examination three times on days 1-3 after surgery, on days 12-15 and 27-30 after surgery. The study of cerebrospinal fluid was performed within 30 minutes after taking.

As a result of the data obtained, it was found that the cellular composition of the liquor of dogs in the postoperative period of correction of lumbosacral stenosis was within the physiological norm, erythrocytes in the cerebrospinal fluid were not detected. The number of nucleated cells in operated dogs was the highest on days 1-3 after surgery. On the 12th-15th day after the operation, cytosis in the experimental and control groups of animals was 1.27 cells/pl more. On days 27-30 after surgery, cytosis in dogs in the experimental group was lower by 0.45 cells/pl compared to the control. Analysis of cerebrospinal fluid can help in the diagnostic assessment of the condition of animals in the postoperative period. However, it should be borne in mind that results are rarely specific to any particular condition and should be interpreted in the light of clinical and additional diagnostic findings.

Keywords. Dogs, degenerative lumbosacral stenosis, postoperative period, cerebrospinal fluid, peripheral blood

Введение

Спинномозговая жидкость обладает высокой чувствительностью, но низкой специфичностью для выявления заболеваний, и возможные ее аномалии относительно ограничены, учитывая разнообразие существующих неврологических патологий у животных. При этом анализ спинномозговой жидкости не всегда имеет отклонения при неврологических заболеваниях, но иногда он помогает поставить точный диагноз [1]. В последние годы многочисленные исследования оценивали связанные с заболеванием изменения в составе спинномозговой жидкости, исследования которой могут дать представление о механизмах, лежащих в основе заболеваний, и определить значимые диагностические, прогностические и терапевтические биомаркеры [2].

В этой связи влияние показателей крови в сравнительном аспекте операционной и спонтанной травм, контроль течения постоперационного периода при различных оперативных вмешательствах у собак является важным аспектом, позволяющим вносить коррекцию в сопровождение постоперационного периода [3-5]. По этим причинам точный анамнез, физикальное и неврологическое обследование, корреляция показателей крови, спиномозговой жидкости, визуализирующие исследования и другие диагностические тесты необходимы для точной и правильной интерпретации изменений ликвора и контроля патологического состояния в каждом отдельном случае [6].

В исследованиях P. Moissonnier, S. Blot и др. [7] сообщается, что анализ цереброспинальной жидкости считается важной составляющей во время спинальной хирургии. Лейкоцитоз в люмбальной цереброспинальной жидкости может возникать в послеоперационном периоде, но механизм влияния нейрохирургии как таковой на количество клеток спинномозговой жидкости в поясничном отделе неизвестен [8].

Цель исследования - определить изменения в спинномозговой жидкости в течение послеоперационного периода при коррекции дегенеративного пояснично-крестцового стеноза у собак.

Материалы и методы исследования

В исследовании было 9 собак различных пород, в возрасте от 2 до 8 лет (опытная группа), которым выполняли оперативное вмешательство по исправлению дегенеративного пояснично-крестцового стеноза, в качестве контроля использовали показатели ликвора и периферической крови 3 здоровых беспородных собак, полученных в результате диспансеризации в возрасте до 5 лет.

Операции выполняли под общим обезболиванием. Хирургическое вмешательство осуществляли по методу B.P. Meij, N. Bergknut [9], заключающемуся в дорсальном доступе к дужкам позвонков L7-S 1, диссекции мягких тканей, рассечении дорсальной связки, формировании каналов в краниальных суставных отростках S1, L7. В сформированные каналы билатерально устанавливали мультиаксиальные винты, которые соединяли с помощью балок. Затягивание гаек в винтах проводили в положении физиологической тракции L7-S 1. Рану ушивали послойно.

От каждого животного трижды отбирали на исследование по три ликворограммы на 1-3-и сутки после операции, на 12-15, 27-30-е сут. после оперативного вмешательства.

Ликвор у собак отбирали из люмбальной цистерны с соблюдением мер асептики и антисептики в объеме до 1 мл на 5 кг веса со скоростью не более 1 мл/30 с, первые 1-5 капель не отбирали в пробирки для удаления «путевой» крови. Пробы ликвора отбирали в две стерильные пробирки эппендорф. В первую пробирку отбирали ликвор для органолептического и биохимического исследования. Во вторую пробирку отбирали ликвор со стабилизатором (1 капля 10% формалина на 1-2 мл ликвора) для определения цитоза. Исследование ликвора выполняли в течение 30 мин после взятия.

Мазок ликвора на цитоз выполняли по методике C. Rusbridge [10]. Для приготовления мазка ликвора применяли чистое предметное стекло, фильтровальную бумагу размером с предметное стекло с круглым отверстием, стерильный «инсулиновый» шприц, острое стерильное лезвие, две канцелярские скрепки. Далее носик шприца обрезали. Затем на предметное стекло укладывали фильтровальную бумагу с отверстием посередине стекла. Далее шприц устанавливали на фильтровальную бумагу так, чтобы просвет шприца совпадал с отверстием в фильтровальной бумаге, и конструкция фиксировалась канцелярскими скрепками. Свежий ликвор из эппендорфа медленно (по капле) переливали в цилиндр, при этом фильтровальная бумага впитывала в себя воду, а клетки задерживались на стекле в пределах прорезанного «окошка». Исходный объем ликвора для этой процедуры лимитирован влагоемкостью фильтровальной бумаги. Далее разбирали конструкцию, аккуратно снимали и утилизировали фильтровальную бумагу, высушивали готовый препарат на воздухе и окрашивали. спинномозговой поясничный крестцовый хирургический собака

Для окрашивания мазка ликвора, постановки реакций Панди и Нонне-Апельта применяли специализированный набор реагентов для клинического анализа спинномозговой жидкости «Диахим-Ликвор» по ТУ 9398-067-27428909-2012 (ООО «НПФ «АБРИС+», Россия). Принцип применения набора «Диахим-Ликвор»: реактив Самсона предотвращает цитоз клеток в смесителе в течение нескольких часов; уксусная кислота, которая содержится в реактиве, растворяет эритроциты, фуксин окрашивает ядра клеток в интенсивный красный цвет, что облегчает счет клеток и их дифференцирование; качественная реакция Панди: общий белок с раствором фенола дает помутнение, интенсивность которого зависит от содержания общего белка; качественная реакция Нонне-Апельта: при взаимодействии глобулинов с насыщенным раствором сернокислого аммония появляется помутнение, интенсивность которого зависит от содержания глобулинов (осаждаются такие белковые фракции, которые остаются не осажденными в реакции Панди).

Подсчет клеток в мазках осуществляли в световом микроскопе Olympus-СХЗІ (Япония) при увеличении 400* и в счетной камере Фукса-Розенталя (Heinz Herenz, Германия).

Полученные результаты подвергали статистическому анализу с использованием критерия достоверности Стьюдента в программе Microsoft Excel.

Результаты исследования и обсуждение

Клиническое исследование органолептических характеристик ликвора собак после оперативной коррекции L7-S 1 пояснично-крестцового стеноза показало, что такие характеристики, как цвет, ксантохромия, прозрачность и фибринозная пленка, находились в пределах физиологической нормы. Ликвор был бесцветным и прозрачным, ксантохромия и фибринозная пленка не наблюдалась ни на 1-3-и, ни на 12-15-е, ни на 27-30-е сутки после операции.

Для получения ответов, позволяющих верифициоровать влияние операционной травмы на изменение биологических жидкостей собак с данной патологией, следует искать истоки изменений в патогенезе заболевания. В этой связи необходимо указать, что дегенерация пояснично-крестцовых дисков была обнаружена гистопатологически и при МРТ-исследованиях у немецких овчарок в возрасте одного года [11]. Это указывает на то, что в процесс дегенерации пояснично-крестцового диска могут быть вовлечены факторы помимо механической нагрузки. Снижение питания межпозвонкового диска вследствие изменений позвоночной кости и хрящевой замыкательной пластинки представляет собой альтернативное объяснение дегенерации. Метаболизм диска зависит от диффузии жидкости либо из костного мозга тел позвонков через субхондральную кость и хрящевые замыкательные пластинки, либо через фиброзное кольцо из окружающих кровеносных сосудов. Морфологические изменения в этих структурах могут препятствовать нормальному питанию диска и вызывать дальнейшую дегенерацию. Метаболизм клеток диска впоследствии нарушается, и целостность проте- огликанов и концентрация воды снижают количество жизнеспособных клеток. Независимо от инициирующего механизма, механические и пищевые факторы могут суммироваться, и конечным результатом будет изменение функции диска для сопротивления приложенным силам [12].

Исследованиями установлено, что изменения химического состава ликвора после оперативной коррекции L7-S 1 пояснично-крестцового стеноза собак показали, что реакции Панди и Нонне-Аппельта оставались отрицательными у животных опытной и контрольной групп. Клинический уровень общего белка на 1-3-й день после L7-S 1 оперативного вмешательства был выше контрольной группы на 0,04 г/л (P<0,001) с тенденцией к уменьшению на 12-15-е сутки после операции на 0,01 г/л (P<0,05) и возращением к исходным значениям к 27-30-м суткам после оперативного вмешательства. Углеводный обмен в ликворе собак после оперативной коррекции L7-S 1 пояснично-крестцового стеноза оставался на сопоставимом контрольной группе физиологическом уровне. Концентрации хлора и рН ликвора собак также были в пределах физиологической нормы при отсутствии осложнений в послеоперационный период (табл. 1).

Таблица 1

Результаты ликворограммы в течение послеоперационного периода (M±m, n = 9)

Заключение

Результаты собственных исследований показали, что соблюдение правил асептики и антисептики при проведении оперативного вмешательства, а также строгое следование методике операции, позволяет осуществлять ее без риска какого-либо влияния на спинномозговую жидкость. Динамика показателей ликвора и периферической крови находится в пределах физиологической нормы, и колебания показателей демонстрируют определенную зависимость от течения постоперационного периода. Таким образом, установлено, что оперативная коррекция L7-S 1 пояснично-крестцового стеноза у собак не влияет негативно на состав ликвора и способствует лишь физиологическому плейоцитозу в допустимых пределах.

References / Библиографический список

1. Braund K.G. Clinical neurology in small animal: localization, diagnosis and treatment. In: Braund, K.G. (ed.). Ithaca, New York: International Veterinary Information Service; 2003.

2. Pino M.G., Ganguly R., Rich K.A., Fox A., Mattox L., Keckley E., et al. Continual cerebrospinal fluid sampling in the neonatal domestic piglet for biomarker and discovery studies. Journal of Neuroscience Methods. 2022; 366:109403.

3. Vatnikov Y.A., Rotanov D.A., Bazhibina E.B. Analysis of structure and function of dogs' erythrocytes with trauma. Veterinary medicine. 2007; (2):44-48. (In Russ.).

Ватников Ю.А., Ротанов Д.А., Бажибина Е.Б. Анализ структуры и функции эритроцитов собак при спонтанной и операционной травме // Ветеринария. 2007. №2. С. 44-48.

4. Vatnikov Y.A. Immunokorrektsiya reparativnogo osteogeneza u eksperimental'nykh zhivot-nykh [Immunocorrection of reparative osteogenesis in experimental animals]. Moscow: RUDN publ.; 2009. (In Russ.).

Ватников Ю.А. Иммунокоррекция репаративного остеогенеза у экспериментальных животных. М.: РУДН, 2009. 214 с.

5. Vatnikov Y.A. Characteristics of hematopoiesis in multiple injuries in dogs. Veterinary pathology. 2012; (4):45-48. (In Russ.).

Ватников Ю.А. Характеристика кроветворения при множественных травмах у собак // Ветеринарная патология. 2012. №4 (42). С. 45-48.

6. Terlizzi R.D., Platt S.R. The function, composition and analysis of cerebrospinal fluid in companion animals: Part II -Analysis. The Veterinary Journal. 2009; 180(1):15-32.

7. Moissonnier P., Blot S., Devauchelle P., Delisle F., Beuvon F., Boulha L., et al. Stereotactic CT-guided brain biopsy in the dog. J Small Anim Prac. 2002; 43(3):115-123.

8. Craven C.L., Asif H., Curtis C., Thompson S.D., D'Antona L., Ramos J., et al. Interpretation of lumbar cerebrospinal fluid leukocytosis after cranial surgery: The relevance of aseptic meningitis. Journal of Clinical Neuroscience. 2020; 76:15-19.

9. Meij B.P., Bergknut N. Degenerative lumbosacral stenosis in dogs. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice. 2010; 40(5):983-1009.

10. Rusbridge C. Collection and interpretation of cerebrospinal fluid in cats and dogs. In Practice. 1997; 19(6):322-331.

11. Mayhew P.D., Kapatkin A.S., Wortman J.A., Vite C.H. Association of cauda equina compression on magnetic resonance images and clinical signs in dogs with degenerative lumbosacral stenosis. J Am Anim Hosp Assoc. 2002; 38(6):555-562.

12. Modic MT, Ross J.S. Lumbar degenerative disk disease. Radiology. 2007; 245(1):43-61.

13. Floman Y., Wiesel S.W., Rothman R.H. Cauda equine syndrome presenting as a herniated lumbar disk. Clin Orthop Rel Res. 1980; 147:234-237.

14. Jaradeh S. Cauda equina syndrome: a neurologist's perspective. Regional Anesthesia and Pain Medicine. 1993; 18:473-480.

15. Suwankong N., Meij B.P., Voorhout G., de Boer A.H., Hazewinkel HAW. Review and retrospective analysis of degenerative lumbosacral stenosis in 156 dogs treated by dorsal laminectomy. Vet Comp Orthop Traumatol. 2008; 21(3):285-293.

16. Jeffery N.D., Barker A., Harcourt-Brown T. What progress has been made in the understanding and treatment of degenerative lumbosacral stenosis in dogs during the past 30 years? The Veterinary Journal. 2014; 201(1):9-14.

Размещено на allbest.ru