Забезпечення точності та інфомативності визначення біологічно активних речовин у плазмі крові
Етапи підготовки зразків плазми крові для дослідження вмісту в них біологічно активних речовин. Практичні рекомендації для підвищення точності та якості при дослідженні вмісту біологічно активних речовин у плазмі крові: гепарину, гістаміну, серотоніну.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | статья |
| Язык | украинский |
| Дата добавления | 16.01.2024 |
| Размер файла | 13,5 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Размещено на http://www.allbest.ru/
Забезпечення точності та інфомативності визначення біологічно активних речовин у плазмі крові
О.В. Ткаченко, C.М. Гайдукова, Ю.С. Бублій
Національна медична академія післядипломної освіти імені П. Л. Шупика, Київ
Резюме
У статті систематизовано та викладено основні етапи підготовки зразків плазми крові для дослідження вмісту в них біологічно активних речовин. Зроблено висновок про необхідність врахування показника гематокриту при приготуванні проб для забезпечення якості, точності, відтворюваності та інформативності наукових та клінічних лабораторних досліджень.
Ключові слова: плазма крові, лабораторні дослідження, біологічно активні речовини, гепарин, серотонін, гістамін.
Резюме
ОБЕСПЕЧЕНИЕ ТОЧНОСТИ И ИНФОМАТИВНОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ
Е.В.Ткаченко, С.Н. Гайдукова, Ю.С. Бублий
Национальная медицинская академия последипломного образования имени П.Л. Шупика, Киев
В статье систематизированы и изложены основные этапы подготовки образцов плазмы крови для исследования содержания в них биологически активных веществ. Сделан вывод о необходимости учета показателя гематокрита при приготовлении проб для обеспечения качества, точности, воспроизводимости и информативности научных и клинических лабораторных исследований.
Ключевые слова: плазма крови, лабораторные исследования, биологически активные вещества, гепарин, серотонін, гистамин.
Summary
ENSURE THE ACCURACY AND INFORMATIONAL CONTENT OF DETERMINATION OF BIOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCES IN BLOOD PLASMA
E.V. Tkachenko, S.M Gaidukova, Ju.S. Bublij
National Medical Academy of Postgraduate Education named after P.L. Shupik, Kiev
The article systematized and presented the basic stages of preparing plasma samples for the study of content of biologically active substances. The conclusion was made about the need to accounting the hematocrit in the preparation of samples for quality assurance, accuracy, reproducibility and informative scientific and clinical laboratory test.
Keywords: blood plasma, laboratory studies, the biologically active substances, heparin, serotonin, histamin.
Вступ
Проблема забезпечення якості лабораторних досліджень є однією із ключових у лабораторній медицині і стає все актуальнішою [2, 4, 6]. Точність і інформативність наукових і клінічних лабораторних досліджень залежить від дотримання цілого ряду умов [1, 3, 5]. До них, насамперед, належать: дотримання правил взяття крові, отримання плазми та їх зберігання; якість реактивів і лабораторного посуду, що застосовується; урахування факту призначення хворому медикаментів, що впливають на досліджувані параметри; вибору оптимальних методик та схем лабораторних досліджень; рівня кваліфікації науковців чи лаборантів, які проводять дослідження тощо [1-8]. При підготовці до проведення наукового пошуку, пов'язаного із дослідженням вмісту біологічно активних речовин у плазмі крові певної категорії хворих, у доступній літературі ми не зустріли узагальнюючих даних щодо особливостей взяття та обробки крові для їх дослідження, що і спонукало нас до даної роботи.
Мета роботи: систематизувати та узагальнити дані літератури стосовно особливостей взяття і обробки крові, розробити практичні рекомендації для підвищення точності та якості при дослідженні вмісту біологічно активних речовин у плазмі крові, зокрема, гепарину, гістаміну, серотоніну.
Результати та обговорення
В результаті аналізу літератури, що при- св'ячена проблемі визначення вмісту біологічно активних речовин у плазмі крові, зокрема, гепарину, серотоніну, гістаміну тощо ми провели систематизацію даних, узагальнили відомості та розробили практичні рекомендації щодо особливостей взяття крові та її стабілізації для наукових та клінічних досліджень. Вони полягають у наступному.
1. Важливою ланкою забезпечення точності і відтворюваності результатів досліджень є чистота реактивів, лабораторного посуду і правильність його обробки. Для дослідження в крові та її плазмі біологічно активних речовин, зокрема, таких як гепарин, гістамін, серотонін тощо застосовуть силіконований посуд. Для силіконування пробірок, флаконів, скляних піпеток тощо 10% розчин силікону (ПМС-400, ПМС-500) в хлороформі переливають із пробірки в пробірку, які потім перевертають на 510 хв на фільтрувальний папір для вилучення залишків розчину. Силіко- нування піпеток проводять за допомогою гумової груші, яку вдягають на неробочий кінець піпетки. Розчином силікону заповнюють лише градуйовану частину піпетки. Процедуру силіконування виконують у витяжній шафі. Повторну обробку силіконом лабораторного посуду проводять після 2-3-кратного використання. Голки разового використання оброблюють аналогічним чином і ретельно промивають стерильним розчином стабілізатора безпосередньо перед венепункцією.
2. Кров при дослідженні вмісту біологічно активних речовин у плазмі беруть вранці, в однаковий час, натщесерце із ліктьової вени силіконова-
ною товстою голкою без шприца, самовитіканням. Застосування шприца є неприпустимим через активацію тромбоцитів і факторів згортання крові турбулентним рухом крові і її змішування з повітрям припусимо лише короткочасне накладання джгута. У ряді клінічних ситуацій, наприклад, при шоці, вилучення крові із ліктьової вени є проблематичним через низький тиск. В таких випадках кров для досліджень забирають із підключичного катетера, але необхідно пам'ятати про можливість забруднення крові гепарином.
3. Для стабілізації кров змішують із 3,8% розчином цитрату натрія у співвідношенні 9:1. На даному етапі припускаються наступних помилок. Перша із них - помилка точності і правильності приготування розчину стабілізатора. Важливо враховувати, що трьохзаміщений 5,5-водяний цитрат натрію готують у концентрації 3,8% (0,11 М), а 2-водяний - у концентрації 3,2%. Зберігання цитрату припустимо впродовж одного тижня при +2...+80С, а триваліше зберігання супроводжується бактеріальним забрудненням і зниженням концентрації цитрату натрію. Друга помилка полягає у тому, що загально вживане співвідношення 9:1 є вірним лише за нормального гематокритного числа. Натрія цитрат не проникає внутрішньоклітинно, а тому за високого гематокритного числа у плазмі крові створюється надлишкова його концентрація, що супроводжується хибною гіпокоагуляцією. Напроти, при зменшенні гематокритного числа, наприклад, при анемії, виявляють хибну гіперкоагуляцію і кров у пробірці може згорнутися ще до початку дослідження. Розрахунки об'єму стабілізатора відповідно до показника гематокритного числа дозволяють уникнути такої неточності (табл.1).
Таблиця 1 - Співвідношення об'ємів 3,8% розчину цитрату натрію і крові залежно від величини гематокриту (Баркаган З.С., Момот А.П., 2001)
|
Показник гематокритного числа, % |
Об'єм антикоагулянта, мл |
Об'єм крові, мл |
|
|
20-21 |
1,4 |
8,6 |
|
|
22-27 |
1,3 |
8,7 |
|
|
28-33 |
1,2 |
8,8 |
|
|
34-39 |
1,1 |
8,9 |
|
|
40-45 |
1,0 |
9,0 |
|
|
46-51 |
0,9 |
9,1 |
|
|
52-57 |
0,8 |
9,2 |
|
|
58-60 |
0,7 |
9,3 |
|
|
понад 65 |
0,5 |
9,5 |
Примітка. У здорових новонароджених до 5-ї доби в умовах фізіологічної поліглобулії показник гематокритного числа становить 55-60%.
Третя помилка є однією із найчастіших погрішностей при взятті крові. Вона полягає у недостатньому перемішуванні її із розчином стабілізатора. Для уникнення її необхідно одразу ж після взяття необхідного об'єму крові шляхом повільного похитування перемішати вміст. Струшування є неприпустимим. Стабілізовану кров до центрифугування (в тому числі і в процесі транспортування зберігають при кімнатній температурі при +18...+220С не більше 1 год. Транспортування стабілізованих зразків крові на великі відстані і часте її струшування супроводжується спотворенням результатів дослідження.
4. Важливим є вхідний контроль проб крові для досліджень. При цьому перевіряють маркірування, уточнюють час взяття крові, реєструють проби, контролюють правильність і достатність отриманої кількості стабілізованої крові для досліджень (краще застосовувати градуйовані пробірки), відповідність кількості стабілізатора показнику гематокрита. Останній легко визначається автоматичними лічильниками крові або на гематокритній центрифузі. Здійснюють візуальний контроль на можливе спонтанне згортання крові, для чого пробірку повільно нахиляють у горизонтальній площині. Стабілізована кров не повинна мати згустків і щільних конгломератів. Зразки крові із згустками і ознаками гемолізу не досліджують!
5. Для одержання багатої чи бідної тромбоцитами плазми крові, її послідовно центрифугують. При цьому надзвичайно важливим є дотримання режиму центрифугування.
Для одержання плазми, що багата тромбоцитами, стабілізовану кров після врівноваження пробірок центрифугують при 1000 об/хв. (140-160 g) впродовж 5-7 хв. Більш значне прискорення призводить до збіднення плазми тромбоцитами, спотворює результати при визначенні кількості і функцій тромбоцитів у плазмі. Для отримання точних результатів необхідно уточнювати число об/хв відповідно до радіуса ротора конкретної центрифуги. Одержану плазму без скаламучування відсмоктують силіконованою піпеткою із грушою або напівавтоматичною піпеткою з пластиковим наконечником і переносять в іншу пробірку для дослідження або повторного центрифугування для одержання бідної тромбоцитами плазми.
Для одержання бідної тромбоцитами плазми, багату тромбоцитами плазму центрифугують при 3000-4000 об/хв (1200-1400 g) впродовж 15 хв. При меншому прискоренні в плазмі залишається значна частина тромбоцитів, які обумовлюють недостовірність ряду досліджень і тестів. Центрифугування проводять при кімнатній температурі. Багату і бідну тромбоцитами плазму зберігають до момента дослідження при кімнатній температурі при +18...+220С не більше 1-2 год.
Висновки
1. Для забезпечення точності, інформативності і відтворюваності результатів наукових і клінічних лабораторних досліджень необхідно неухильно дотримуватись правил приготування лабораторного посуду, реактивів, взяття крові.
2. Рекомендуємо враховувати співвідношення розчину стабілізатора і об'єму крові при визначенні вмісту біологічно активних речовин у плазмі крові, що забезпечить точність, інформативность і відтворюваність лабораторних досліджень.
Таким чином, дотримання правил виконання лабораторних досліджень біологічно активних речовин у плазмі крові хворих забезпечить належну якість діагностичних і наукових досліджень в перспективі.
Література
біологічно активні речовини плазма крові
1. Видиборець Ю.С. Особливості отримання та стабілізації зразків крові для досліджень біологічно активних речовин / Ю.С. Видиборець // Тези доп. V Української конференції молодих вчених, присв'яченої пам'яті акад. В.В. Фролькіса (23 січня 2004 р.). - К. : Ін-т геронтології АМН України, 2004. - С. 29-30.
2. Гаранина Е.Н. Качество лабораторного анализа / Е.Н. Гаранина // - М. : ТОО Лабинформ, 1977. - 192 с.
3. Голубева А.П. Проблемы организации экспертной деятельности по оценке качества медицинской помощи в амбулаторно-поликлинических учреждениях /
A. П. Голубева // Здравоохранение. - 1998. - № 11. - С. 13-19.
4. Зимин В.П. Мониторинг качества медицинской помощи: связь с управлением, экономикой стационара и страховыми медицинскими организациями /
B. П. Зимин // Здравоохранение. - 1999. - № 8. - С. 145-153.
5. Лапин А. Контроль качества в лабораторной медицине / А. Лапин // Новости фармации и медицины. - 1994. - № 3. - С. 36-42.
6. Луньова Г.Г. Система експертизи клініко-лабораторних досліджень як складова моніторингу якості медичної допомоги / Г.Г. Луньова, Т.Д. Бахтєєва, Т.М. Калмикова // Лаб. діагностика. - 2000. - № 2. - С. 56-57.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Фітохімічне дослідження сировини надземної частини кульбаби лікарської. Методики аналізу біологічно активних речовин в сировині, в моно- та багатокомпонентних препаратах. Створення лікарських засобів. Проекти аналітичної нормативної документації.
автореферат [262,3 K], добавлен 10.04.2009Проведення комплексних фармакогностичних вивченнь вегетативних та генеративних органів розторопші плямистої. Дослідження якісного складу та кількісного вмісту різних груп біологічно активних речовин у сировині та отриманих ліпофільних фракціях з сировини.
автореферат [53,2 K], добавлен 10.04.2009Поняття, класифікація, склад і особливості виготовлення біологічно активних харчових добавок. Лікарські рослинні компоненти і загальні принципи терапії, особливості їх використанні у клінічній практиці. Стандартизація продукції за змістом діючих речовин.
курсовая работа [2,9 M], добавлен 23.03.2015Походження, ботанічна характеристика, хімічний склад та перспективи використання хризантеми. Кількісне визначення вмісту біологічно активних речовин у квітках рослини. Етіологія, патогенез, клініка цукрового діабету. Принципи лікування захворювання.
дипломная работа [1,6 M], добавлен 07.06.2014Ознайомлення з історією виникнення точкового масажу. Вивчення "біологічно активних точок" на тілі людини. Оцінка ефективності впливу точкового масажу на організм людини. Аналіз методів впливу на "біологічно активні точки" та оцінка їх ефективності.
контрольная работа [43,4 K], добавлен 18.06.2015Накопичення біологічно активних речовин. Зовнішні фактори, які впливають на рослину під час онтогенезу. Вплив заготівлі, сушіння, обробки на вміст діючих речовин в лікарській рослинній сировині. Особливості заготівлі сировини різних рослинних органів.
курсовая работа [380,0 K], добавлен 17.05.2015Склад і властивості плазми крові. Хвороби крові як результат порушень регуляції кровотворення і кроворуйнування. Кількісні зміни крові, особливості і класифікація анемії. Пухлини системи крові або гемобластози. Злоякісні та доброякісні утворення крові.
реферат [26,1 K], добавлен 21.11.2009Характеристика крему як лікарської форми. Їх види: жирові, емульсійні, суспензійні. Складання їх рецептури, технологія приготування, принципи дії. Класифікація біологічно активних, діючих і допоміжних речовин, використовуваних у складі косметичних кремів.
курсовая работа [65,2 K], добавлен 30.11.2014Оборотна зупинка метаболізму в клітинах за рахунок технологічних процесів з використанням низьких температур. Зберігання плаценти, її здатність бути "депо" різних біологічно активних речовин і впливати на патологічні процеси. Регрес атеросклерозу.
автореферат [77,0 K], добавлен 20.02.2009Локальне і глобальне поширення поліантибіотикорезистентних збудників нозокоміальних і опортуністичних інфекцій. Нові стратегічні підходи до протимікробної терапії. Пошук у стафілококових клітинах нових потенційних мішеней для протимікробних препаратів.
автореферат [112,7 K], добавлен 29.03.2009Біологічно активні добавки вітчизняного та іноземного виробництва, лікарські рослини, які входять до їх складу. Діючі речовини рослин, які зумовлюють їх основну фармакологічну дію. Значення для рослин і динаміка накопичення ефірних олій, методи одержання.
курсовая работа [1,9 M], добавлен 07.10.2012Характеристика основних симптомів глікемії та концентрації в крові глюкози, яка відображає обмін в організмі вуглеводів, білків і жирів. Особливості гіпоглікемічного стану, пов’язаного із різким зниженням вмісту глюкози в крові, особливо під час змагань.
реферат [782,2 K], добавлен 27.05.2010Етіологія і методи лікування куперозу. Маркетингове дослідження ринку професійних косметичних засобів для догляду за чутливою шкірою. Аналіз біологічно-активних речовини у складі антикуперозних засобів. Технологія виготовлення і контроль якості крем-гелю.
дипломная работа [1,6 M], добавлен 12.10.2015Роль крові як єднального елементу у забезпеченні життєдіяльності організму. Склад крові, поняття плазми та характеристика кровообігу. Будова серця, суть систоли і діастоли. Методика електрофізіологічного дослідження, коронарографії та ангіографії.
презентация [936,5 K], добавлен 29.03.2010Метод гетерогенного твердофазного імуноферментного аналізу для визначення вмісту антитіл до екзогенного та ендогенного інсулінів у сироватках крові людей. Діагностичні характеристики імуноферментного методу (чутливість, специфічність, відтворюваність).
автореферат [47,5 K], добавлен 07.03.2009Клінічний аналіз крові - кількісне та якісне дослідження елементів, формуючих кров; діагностика захворювань та подальший моніторинг на фоні медикаментозної терапії. Фактори впливу на показники аналізу крові. Показання та підготовка до дослідження.
презентация [896,7 K], добавлен 10.10.2013Кореляційний аналіз показників лейкограми крові жінок з фізіологічним перебігом вагітності. Лабораторні показники вмісту еритроцитів та гемоглобіну, кількості формених елементів у сечі жінок при ускладненні вагітності різних строків пієлонефритом.
дипломная работа [1,1 M], добавлен 13.10.2015Ізосерологічна несумісність крові матері та плоду. Розподіл антигенів еритроцитів по імунологічному ризику. Продукування антитіл при першій та наступних вагітностях. Профілактика резуссенсибілізації, а також зв'язок групи крові та стану здоров’я.
курсовая работа [503,3 K], добавлен 26.03.2014Біологічна дія вітаміну РР, його похідних за різних функціональних станів центральної нервової системи. Реалізація нейротропних ефектів вітаміну РР на рівні модуляції процесів зворотного поглинання та вивільнення нейромедіаторів синаптичними закінченнями
автореферат [51,5 K], добавлен 29.03.2009Оксидативний стрес внаслідок інтенсивного утворення у клітинах активних форм кисню. Участь нервової, ендокринної та імунної систем в адаптації організму до стресових чинників та підтриманні гомеостазу. Дія ферментів глутатіонової антиоксидантної системи.
автореферат [134,1 K], добавлен 24.03.2009
