Флюориметрическое определение биогенных аминов в плазме крови при истинной полицитемии в эритремической стадии

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Флюориметрическое определение биогенных аминов в плазме крови при истинной полицитемии в эритремической стадии

С.Н. Гайдукова, Е.В. Ткаченко, Ю.С. Бублий

Национальная медицинская академия последипломного образования имени П.Л. Шупика, Киев

Ключевые слова: истинная полицитемия, биогенные амины, гистамин, серотонин, костно-мозговые пунктаты, миелограмма, особенности.

ФЛЮОРИМЕТРИЧНЕ ВИЗНАЧЕННЯ БІОГЕННИХ АМІНІВ В ПЛАЗМІ КРОВІ ПРИ СПРАВЖНІЙ ПОЛІЦИТЕМІЇ В ЕРИТРЕМІЧНІЙ СТАДІЇ

C.М. Гайдукова, О.В. Ткаченко, Ю.С. Бублій

Ключові слова. справжня поліцитемія, біогенні аміни, гістамін, серотонін, кістково-мозковий пунктат, мієлограма, особливості.

S.М. Gaidukova, O.V. Tkachenko, Yu.S. Bublij

Keywords. polycythemia vera, biogenic amines, histamin, serotonin, bone marrow aspirate, myelogram, peculirity.

Введение

Истинная полицитемия (ИП) является клональным заболеванием неизвестной этиологии [1, 2] с поражением на уровне клетки- предшественницы миелопоэза и характеризуется пролиферацией клеток трех ростков кроветворения, аккумуляцией фенотипически нормальных эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов и их предшественников при отсутствии известных физиологических стимулов.

Наиболее распространенными методами, позволяющими оценить интенсивность гемопоэза в целом и отдельных его ростков, в настоящее время является морфологическое исследование гистологических препаратов и мазков КМ. Однако при оценке костномозгового кроветворения диагностические ошибки могут быть следствием переоценки возможностей гистоморфологического исследования костного мозга, так как образцы КМ бывают неудачными по количеству взятого материала, качеству его обработки. а стандартная окраска препаратов гематоксилином и эозином не позволяет дифференцировать мелкие клетки и таким образом определить тип пролиферации.

В клинической практике исследование гемопоэза у больных ИП чаще всего проводится в эритремической стадии (стадии развернутых клинических проявлений заболевания), что обусловлено частым выявлением и диагностированием заболевания в этой стадии, длительностью ее течения (до 20 и более лет), множеством различных сосудистых осложнений [1, 2]. Для этой стадии характерно венозное полнокровие внутренних органов и костного мозга, которое способствует частому разведению КМП, и снижению диагностической значимости цитоморфологического исследования КМП [4].

Одними из физиологически-активных соединений, что играют существенную роль в патохимии и патофизиологии многих типичных патологических процессов, являются биогенные амины - серотонин (СН) и гистамин (ГН). Участие СН и ГН в регуляции различных функций органов и систем, влияние на метаболические процессы в организме определяет необходимость білее детального изучения роли этого вещества в патогенезе различных заболеваний.

Известно, что одним из факторов, которые могут нарушать метоболизм СН и ГН является гипоксия. В условиях гипоксии, очевидно, розба- лансировуются процессы освобождения и инактивации ГН и СН, что отрицательно влияет на нервную систему, особенно на регуляцию функций вегетативной нервной системы. Расширение знанний о патогенезе гипоксического поражения мозга, позволит более успешно проводить его лечение.

При анализе научной литературы, мы выявили, что данные об изменениях уровней СН и ГН в плазме крови при эритроцитозах различного происхождения являются фрагментарными, что побудило нас провести данное исследования.

Цель работы: изучить содержание СН и ГН в плазме крови и особенности гемопоэза при ИП в эритремической стадии по данным цитоморфо- логических исследований КМП и выявить характер взаимоотношений между ростками кроветворения при этом заболевании.

Материалы и методы

Проанализированы 80 КМП больных ИП, проходивших обследование и лечение по поводу ИП в гематологических стационарах города г. Киева в период с 1998 по 2013 гг. КМП получены у больных ИП в эритремической стадии на момент установления диагноза до проведения цитостатической терапии. Среди обследованных больных 60 мужчины и 20 женщин. Средний возраст обследованных больных составил 57,2±1,2 года. Контрольную группу составили пациенты, обследованные в связи с подозрением на различные заболевания крови. После тщательного клинико-гематологического обследования такие заболевания были исключены. Средний возраст пациентов контрольной группы составил 55,7±3,6 лет. Проанализировано 30 КМП у таких пациентов.

Содержание свободных фракций СН и ГН в плазме крови определяли флюориметрическим методом на анализаторе "БИАН-130", "БИАН-100" по методике Б.В.Михайличенко, С.В. Выдыборца (1999) [3]. Для исследования использовали венозную кровь. Количественное содержание СН в плазме крови выражали в нмоль/г.

Исследование проводились в лаборатории анализа биологически активных соединений кафедры судебной медицины Национального медицинского университета имени А.А. Богомольца. Авторы искренне благодарят зав. кафедрой, профессора Б.В.Михайличенка за методическую помощь при проведении научного поиска.

Результаты исследований обработаны методами вариационной статистики. Достоверность различия в группах определялась с использованием дисперсионного анализа и F-критерия Фишера. Корреляционный анализ проводился с использованием непараметрического коэффициента корреляции Спирмена (rS). Расчеты проводились на персональном компьютере с использованием пакета статистической обработки STATISTIKA 5.5.

Результаты и обсуждения

Нами установлено, что содержание свободной фракции СН в плазме крови обследованных был следующим: 1,72±0,06 нмоль/г, (контроль - 0,61±0,04), а ГН - соответственно 1,92±0,04 нмоль/г и 1,49±0,03 нмоль/г.

Как видно из приведенных данных у пациентов с ИП наблюдается достоверное увеличение содержания СН и ГН в плазме крови, по сравнению со здоровыми (р<0,001). Очевидно, это может быть обусловлено явлениями эндогенной метаболической интоксикации вследствие клонального хронического миелопролиферативного заболевания. Достоверной разницы в содержании СН и ГН в плазме крови в зависимости от пола обследованных нами не выявлено (р<0,1).

В ЦНС СН играет роль медиатора синаптической передачи нервных импульсов. Медиаторная роль СН впервые была доказана В.В. Brodie, P.A. Shore (1957). СН, который синтезируется специфической системой нейронов, двигается по аксонах, достигает их терминалей и, высвобождаясь, взаимодействует из серотонинэргическими рецепторами других нейронов. Основное количество нейронов, которые способны синтезировать СН, находится в 9 ядрах шва (nuclei raphe), которые расположены в центральной части среднего и продолговатого мозга. Нейроны названных ядер и их аксоны рассматривают как специфическую серотонинэргичную систему мозга. Описаны два основнные серотонинэргические пути - ме- золимбический и мезостриатный. Серотонинергическая система мозга принимает участие в регуляции общегго уровня активности ЦНС, циклов сна и бодрствования, общей двигательной активности, эмоционального поведения, процессов памяти и обучения. При этом важным моментом является взаємодействие серотонинэргической системы мозга с другими нейромедиаторными системами, прежде всего, с норадренэргической.

Роль СН в регуляции функций периферической нервной системы мало изучена, но известно, что СН усиливает передачу нервных импульсов в вегетативных ганглиях, а также повышает их реакции на раздражение током преганглионарных волокон и введения ганглиостимулирующих веществ, например, ацетилхолина.

В КМП больных ИП выявлено достоверное (р<0,001) снижение относительного содержания нейтрофильных гранулоцитов, по сравнению со здоровыми лицами (50,7±1,2% и 57,7±1,0% соответственно). В то же время абсолютное количество нейтрофильных гранулоцитов у больных ИП достоверно (р<0,05) превышало аналогичные показатели здоровых лиц (63,3±7,0х10 /л и 41,4±4,0х10⁹/л).

Во многих случаях нами отмечено повышение доли незрелых клеток нейтрофильного ростка по отношению к зрелым клеткам этого ростка. Данная тенденция отразилась на достоверном (р<0,01) повышении индекса созревания нейтрофильных гранулоцитов у больных ИП, по сравнению со здоровыми лицами (0,75±0,05 и 0,51±0,03 соответственно).

Нами не виявлено достовеного изменения количества базофильных гранулоцитов, что может обрясняться небольшой долей этих клеток в КМП и недостаточным для выявления достоверных различий количеством наблюдений.

Литература

1. Демидова А.В. Эритремия и вторичные эритроцитозы / А.В. Демидова, Н.Н. Коцюбинский, В.И. Мазуров. - СПб. : Гиппократ, 2001. - 328 с.

2. Мельник А. А. Референтные значения лабораторных показателей у детей и взрослых / А.А. Мельник. - К. : Книга плюс, 2000. - 118 с.

3. Михайличенко Б.В. Метод одночасного флюорометричного визначення біогенних амінів в аналізованій пробі біосубстрату / Б.В. Михайличенко, С.В. Види- борець // Лаб. діагностика. - 1999. - № 2. - С. 58-61.

4. Lundberg L.G. Bone marrow in polycythemia vera, chronic myelocytic leukemia and myelofibrosis has an increased vascularity / L.G. Lundberg, R. Lerner, P. Sundelin et al. // J. Pathol. - 2000. - Vol. 157. - P. 690-698.

Размещено на Allbest.ru