Иммуногистохимичекое исследование щитовидной железы при развитии аутоиммунного тиреоидита

Размещено на http://www.allbest.ru/

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ РАЗВИТИИ АУТОИММУННОГО ТИРЕОИДИТА

Туганова Агундас Зурабовна

Таугазова Людмила Алексеевна

Епхиев Александрc Алибекович

Аннотация

щитовидная железа аутоиммунный тиреоидит

В ходе исследования была выявлена взаимосвязь между количеством клеток с фенотипами CD1a - , CD3 - , CD4 - , CD8 - , CD23 - , CD25 - , инфильтрирующих узловые образования в щитовидной железе при аутоиммунном тиреоидите, от числа этих же клеток, инфильтрирующих ткань, окружающую узлы.

Ключевые слова: аутоиммунный тиреоидит, иммуногистохимия, субпопуляции лимфоцитов, щитовидная железа, лимфоидная инфильтрация.

Annotation

Tuganova AgundacZurabovna Taugazova Lyudmila Alekseevna Yepkhiev Alexander Alibekovich

IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY OF THE THYROID GLAND IN THE DEVELOPMENT OF AUTOIMMUNE THYROIDITIS

The study revealed a relationship between the number of cells with the CD1a - , CD3 - , CD4 - , CD8 - , CD23 - , CD25 - phenotypes infiltrating nodules in the thyroid gland in autoimmune thyroiditis and the number of the same cells infiltrating the tissue surrounding the nodes.

Key words: autoimmune thyroiditis, immunohistochemistry, lymphocyte subpopulations, thyroid gland, lymphoid infiltration.

Введение

Аутоиммунный тиреоидит (АИТ), который также известен как тиреоидит Хашимото, представляет собой аутоиммунное заболевание, которое проявляется инфильтрацией щитовидной железы лимфоцитами и плазмоцитами, что приводит к созданию лимфоидных фолликулов с активными зонами размножения. В ходе иммунного ответа наблюдается разрушение щитовидных фолликулов, увеличение количества фибробластов, а также диффузный или локальный склероз ткани щитовидной железы, и увеличение лимфоцитов Ашкенази -Гюртля, богатые оксифильными Вклетками.

Многочисленные исследователи уделяют значительное внимание изучению влияния разных групп лимфоцитов на развитие АИТ. Существуют разнообразные данные о составе лимфоидных инфильтратов, о маркерах клеточной и гуморальной иммунных реакций в тканях щитовидной железы, а также о субпопуляциях лимфоцитов внутри щитовидной железы, но они часто бывают противоречивыми. Согласно современной научной мысли, патогенез АИТ основывается на генетически предопределенных иммунных нарушениях, которые прерывают естественную толерантность к аутоантигенам. Это сопряжено с нарушениями в регулирующей роли Тлимфоцитов и соотношении их субпопуляций, возникновением непредусмотренных клонов В -лимфоцитов и синтезом аутоантител.

Основополагающую функцию в развитии аутоиммунной реакции и поражении щитовидной железы в контексте АИТ играют клеточные иммунные механизмы. В ходе гистологических исследований, исследователи нередко выявляют повышенное содержание Т-лимфоцитов, как среди лимфоидных инфильтратов, так и в основной ткани щитовидной железы. Применение иммуногистохимических методов исследований открывает новые возможности для определения фенотипов лимфоцитов и понимания морфогенеза в контексте аутоиммунных процессов.

Изменения в численности лимфоцитов и нарушения пропорций м ежду их подгруппами в ходе аутоиммунных заболеваний становятся причиной дисбаланса цитокинов, которые вырабатываются лимфоцитами.

Цель исследования

В данной исследовательской работе была поставлена цель - изучить местную иммунную активность в тканях щитовидной железы при развитии аутоиммунного тиреоидита (АИТ), используя иммуногистохимический (ИГХ) метод для анализа фенотипов лимфоцитов в тиреоидной ткани.

Материалы и методы

Было проведено исследование материала щитовидной железы у 18 женщин, страдающих аутоиммунным тиреоидитом (АИТ), в возрастной категории от 36 до 60 лет.. Иммуногистохимическое исследование было произведено на срезах, зафиксированных в парафине, с применением мышиных моноклональных антител против антигенов CD3, CD4, CD1a, CD23, CD25, CD8 и TGF-0. Для подготовки были использованы срезы толщиной 3 микрометра из парафиновых блоков, которые укладывались на специализированные предметные стекла, а затем проходили специальную физико-химическую обработку. Первичные антитела наносились в разведении 1:50, и срезы инкубировались в течение 30 мин. при комнатной температуре. Для визуализации реакции применли раствор диаминобензидина, которым срезы обрабатывались в течение 10 минут. Ядра клеток докрашивали гематоксилином и заключали в полистирол под покровное стекло.

Результаты исследования

В исследовании ткани щитовидной железы, обнаружилась значительная лимфоидная инфильтрация как очаговая так и диффузная, при этом в структуре тканей были выявлены лимфоидные фолликулы. В 11 случаях из исследованных была замечена узловая гиперплазия, что привело к созданию коллоидных узлов. Размеры отдельных узлов варьировались от одного до двух с половиной сантиметров.

Лимфоидная инфильтрация в этих узлах была умеренной, сопровождалась образованием лимфоидных фолликулов, особенно в периферических областях узлов.

При проведении иммуногистохимического исследования (ИГХ) было зафиксировано, что анализируемые иммуномаркеры CD3, CD4, CD1a, CD23, CD25, CD8 проявлялись в виде светло -коричневой или коричневой мембранной окраски лимфоцитов. Кроме того, экспрессия TGF0 антигена наблюдалась в цитоплазме клеток щитовидной железы и лимфоцитов, демонстрируя высокую степень сходства интенсивности по окраске между областями щитовидной железы и очагами узловых образований.

CDS-позитивные Т-лимфоциты были обнаружены равномерно распределенными как внутри лимфоидных инфильтратов (ЛИ),, так и среди структуры самого узла и паренхимы щитовидной железы. Доля Тлимфоцитов с рецептором CD3 в лимфоидных инфильтратах ткани щитовидной железы составила 28%, и в самых узлах этот показатель был равен 16%. В лимфоидных фолликулах, CD3 - клетки чаще всего локализовались по периферии фолликулов или в зонах зародышевых центров, а также равномерно распространялись в малых первичных фолликула.

Что касается субпопуляций CD8 - и CD4 - Т-лимфоцитов в ЛИ, они зачастую присутствовали в значительном количестве. Соотношение клеток CD4 - /CD8 - было приблизительно 1 к 2,4 в ткани щитовидной железы и составляло 1 к 1,9 в узлах. CD8 - лимфоциты распределены равномерно как в ЛИ ткани щитовидной железы, так и в узлах, с преобладанием в ткани 17% и 10%. Лишь незначительное количество CD8 - клеток присутствовало в лимфоидных фолликулах. С другой стороны, лимфоциты с маркером CD4 в основном располагались в ЛИ и лимфоидных фолликулах, тогда как в строме щитовидной железы находилось лишь малое число таких клеток.

CD25 - лимфоциты были наименее численной субпопуляцией, с распределением лимфоцитов в ЛИ около 3% и в узлах около 2%. Они были представлены в ЛИ небольшими группами, которые распределялись относительно равномерно.

В фолликулярных структурах щитовидной железы, а также в тканях, содержащих узлы, наблюдалось проникновение иммунных клеток с маркерами CD1a - , CD3 - , CD8 - , CD4 - , CD25 - . Эти клетки локализовались среди тиреоцитов, формируя картину внедрения в ткань щитовидной железы. Отдельные лимфоциты также были замечены внутри просвета фолликулов.

Лимфоциты с маркером CD23 - были обнаружены в значительном количестве в лимфоидных фолликулах, занимая преимущественно центральную зону этих структур, предназначенную для размножения клеток. В то же время, незначительная часть этих клеток располагалась в мантийной зоне фолликулов и лимфоидных инфильтратах. Заметна была нижняя экспрессия CD23 в узловых областях.

При анализе данных пациентов с автоиммунным тиреоидитом (АИТ), как с наличием узлов, так и без узлов, а также у пациентов с одиночными и множественными узлами, значимых различий в распределении лимфоцитов и экспрессии исследуемых маркеров обнаружено не было.

Выводы

В ходе исследования была выявлена взаимосвязь между количеством клеток с фенотипами CD1a - , CD3 - , CD4 - , CD8 - , CD23 - , CD25 - , инфильтрирующих узловые образования в щитовидной железе при аутоиммунном тиреоидите, от числа этих же клеток, инфильтрирующих ткань, окружающую узлы. Значительно увеличено количество В-лимфоцитов и Т-клеток с фенотипом CD8 - в лимфоидных инфильтратах по сравнению с узловыми образованиями.

Литература

1. Богин Ю.Н., Бондаренко В.О., Орлов В.М., Шапиро Н.А. Комплексная экспресс-диагностика заболеваний щитовидной железы. М.: Медицина, 1992. 80 с.

2. Бомаш Н.Ю. Морфологическая диагностика заболеваний щитовидной железы. М.: Медицина, 1981. 175 с.

3. Khan, F. A. Thyroid dysfunction: an autoimmune aspect / F. A. Khan [et al.] // International Journal of Clinical and Experimental Medicine. 2015. No8. Р. 6677-6681.

4. Korn, T. IL-17 and Th17 Cells / Т. Korn [et al.] // Annual Review of Immunology. 2009. No27. Р.485-517.

Размещено на Allbest.ru