Біотехнологія одержання комплексних антианемічних препаратів та їх застосування для корекції адаптивних систем організму поросят в постнатальному онтогенезі

Результати визначення концентрації гемоглобіну та кількості еритроцитів у крові поросят контрольної і дослідних груп 10- та 15-денного віку дозволили встановити, що вплив антианемічних препаратів Урсоферану та Полімет-Селену на гемопоез виявився досить ефективним. У тварин, яким уводили Урсоферан та Полімет-Селен, концентрація гемоглобіну та кількість еритроцитів збільшилися на 10- та 15-у добу досліду, а різниця відносно контрольної групи виявилася статистично вірогідною (p<0,01).

Вміст гемоглобіну в одному еритроциті при використанні антианемічних препаратів на 10- та 15-у добу життя поросят виявився більш високим порівняно з показниками у тварин контрольної групи (p<0,01). Встановлено, що при застосуванні антианемічних препаратів на 10- та 15-у добу кольоровий показник, який характеризує середню насиченість окремого еритроцита гемоглобіном, у них був більш високим відносно контрольної групи (p<0,01), що узгоджується з даними В.Г. Герасименка, О.М. Мельниченка (1997); І.М. Карпутя, М.Г. Ніколадзе (2003).

При вивченні обміну Феруму в організмі поросят у результаті застосування антианемічних препаратів (Урсоферану, Полімет-Селену) тваринам дослідних груп було встановлено, що концентрація сироваткового Феруму була вищою в порівнянні з аналогічними показниками у тварин контрольної групи (відповідно: p<0,05, р< 0,001, p<0,001).

Дослідження стану транспортного фонду Феруму дозволило встановити, що у групі поросят, де застосовували Урсоферан, спостерігається підвищення рівня Феруму у сироватці крові порівняно з тими тваринами, яким уводили Полімет-Селен та підвищення коефіцієнта насичення трансферину Ферумом більше 60%, що свідчить про можливість збільшення фонду низкомолекулярного Феруму при використанні Урсоферану. Аналіз вмісту мікроелементів у сироватці крові дослідних поросят свідчить, що у тварин, яким уводили Полімет-Селен, відбулося вірогідне збільшення концентрації Купруму на 10- та 15-у добу експерименту (p<0,05), вмісту Цинку - на 5-у добу (p<0,05) та вмісту Кобальту - на 10-у добу досліду (p<0,05). Уміст Селену був вірогідно більшим на 10- та 15-у добу досліду (відповідно p<0,01 та p<0,05).

Селенові сполуки з групою -SеН є більш ефективними антиоксидантами, ніж тіолові (цистеїн, глутатіон), які нейтралізують активні метаболіти Оксигену (Тутельян В.А., 2002). Оскільки вміст глутатіону у плазмі крові низький, то важливу антиоксидантну роль виконує селенопротеїн Р, який містить залишки селеноцистеїну (Motchnik P. A., Tappel A.L., 1989).

Уведення поросятам 1-ї дослідної групи ферумдекстрану призводить до активації процесів вільнорадикального окиснення ліпопротеїнів крові, зниження вмісту СІПЗ (p<0,05) та збільшення концентрації ДК (p<0,01), кетодієнів та сполучених триєнів (p<0,05). Збільшення кількості гідропероксидів ліпідів відбувається як внаслідок активації процесів вільнорадикального окиснення ліпідів, так і в результаті індукції ліпооксигеназного шляху окиснення арахідонової кислоти, продуктом якого є гідропероксиди (Дубиніна О.Ю., 2001). Збільшення концентрації гідропероксидів ліпідів (p<0,05) у поросят 1-ї групи (5-а доба) за рахунок посилення пероксидних процесів спричинює активацію ліпооксигенази лейкоцитів і збільшення кількості лейкотриєнів (p<0,05). Дослідження змін у крові поросят концентрації тіолових сполук дозволили встановити зниження вмісту НS-груп низькомолекулярних сполук у плазмі крові поросят

1-ї дослідної групи відповідно до контролю на 10-у добу (p<0,05), що може бути пов'язано з активацією процесів ПОЛ, які сприяють підвищенню вмісту окисненої та зменшенню концентрації відновленої форм глутатіону, що свідчить про порушення захисного механізму тіолового ланцюга антиоксидантного захисту під час використання монокомпонентного ферумдекстранового препарату. Уведення поросятам комплексного препарату Полімет-Селен призводить до підвищення вмісту білкових та загальних сульфогідрильних груп на 10-у добу досліду (p<0,05), що узгоджується з результатами досліджень В.Г. Герасименка (1982), який встановив, що за збагачення Селеном раціонів свиней під час дорощування спостерігалося збільшення концентрації загальних та білкових тіолових груп у плазмі крові.

Дослідженнями активності антиоксидантних ферментів встановлено, що стимульована ферумдекстрановим препаратом Урсофераном пероксидація ліпідів у поросят 1-ї дослідної групи відбувається на фоні зниження активності таких антиоксидантних ферментів, як ГПО на 15-у добу (p<0,05) та СОД на 10-у добу (p<0,05) досліду в еритроцитах крові поросят цієї групи.

Реакція розгалуження ланцюга в процесі вільнорадикального окиснення призводить до значної активації пероксидного окиснення ліпідів і пригнічується глутатіонпероксидазою, завдяки чому зниження активності цього ферменту стає важливим чинником ініціації процесу ліпопероксидації та ушкодження клітинних мембран. У свою чергу глутатіонредуктаза каталізує реакцію відновлення сульфогідрильних груп глутатіону. Порушення активності ГП та ГР гальмує відновлення глутатіону - важливого компонента неферментативної антиоксидантної системи захисту. Парентеральне введення комплексного препарату Полімет-Селен зумовило підвищення функціональної активності селенозалежної глутатіонпероксидази на 7,3 % (10-а доба) та 29,9 % (15-а доба) та ГР на 21,7 та на 31,6% (відповідно 5-а та 10-а доба); підвищення активності СОД на 54,9 % (5-а доба), на 30,4 % (10-а доба) та на 37, 8 % (15-а доба).

Уведення Полімет-Селену активує глутатіонзалежні ферменти антиоксидантного захисту, пригнічує процеси пероксидації ліпідів, захищає клітинні мембрани від ушкодження продуктами вільнорадикального окиснення. Аналіз одержаних результатів вивчення процесів ПОЛ на рівні ліпідних комплексів мембран еритроцитів свідчать, що введення монокомпонентного ферумдекстранового препарату призводить до підвищення вмісту ТБК-активних продуктів в еритроцитах (10-доба: p<0,05).

Підвищення рівня ТБК-активних продуктів в еритроцитах поросят, яким парентерально вводили ферумдекстран, пов'язано передусім зі зростанням інтенсивності процесів ПОЛ на рівні клітинних мембран.

Утворення дієнових кон'югатів та гідропероксидів ліпідів у біомембранах клітин сприяє формуванню в гідрофобному ліпідному бішарі гідрофільних кластерів, в які можуть проникати вода та низькомолекулярні комплекси Феруму, що призводить до ”розпушування” мембран й індукції процесів ПОЛ, кінцевими продуктами яких є ТБК-АП. Результати наших досліджень показали, що застосування комплексного препарату Полімет-Селен сприяє нормалізаціі процесів ПОЛ, зниженню вмісту ТБК-активних продуктів в еритроцитах поросят (15 доба: p0,01).

У препаратах Полімет та Полімет-Селен Ферум знаходиться у формі кластерних сполук у складі стабілізованих вуглеводним компонентом міцел, які є аналогом природної ферумдепонуючої форми Феруму у складі феритину і слугують джерелом нетоксичної, розчинної і, що важливо, легкодоступної форми цього елемента. Основна роль цих міцел - транспортування Феруму у доступній для клітин формі. При цьому мінімізується концентрація потенційно високотоксичного пулу низькомолекулярного Феруму.

Хімічний склад м'язової тканини, інтенсивність росту поросят та економічна ефективність застосування антианемічних препаратів. При аналізі даних хімічного складу м'яса слід відзначити, що за використання антианемічних препаратів Полімет та Полімет-Селен уміст сухої речовини та білка має тенденцію до підвищення, а кількість вологи зменшується, що зумовлює зростання калорійності отриманої продукції. У м'ясі дослідних тварин кількість оксипроліну зменшується, внаслідок чого відношення триптофану до оксипроліну (білково-якісний показник) підвищується. Висока біологічна активність біометалів за їх використання створює небезпеку забруднення металами ланок харчового ланцюга, погіршення екологічної ситуації (Розпутній О.І., 1999). Визначення концентрації Феруму, Купруму, Цинку, Кобальту та Селену в органах і тканинах свиней, яким уводили препарати Урсоферан, Суїферон, Полімет та Полімет-Селен, дозволило встановити, що концентрація металів в органах і тканинах була меншою від ГДК.

Досліди з визначення порівняльної біологічної цінності свинини проводилися з використанням інфузорії Tetrahymena pyriformis. Встановлено, що біологічна цінність продукції, отриманої від тварин, що одержували препарати Полімет та Полімет-Селен, була на 2,72-3,14% вищою, ніж за використання Урсоферану.

Інтегральним показником дії протианемічних препаратів є швидкість росту поросят, що зумовлює рентабельність галузі і конкурентоспроможність виробленої продукції свинарства.

В умовах свинокомплексу АТЗТ "Агро-Союз" проведено виробничу апробацію застосування препаратів Полімет і Полiмет-Селен та порiвняння їхньої ефективності з препаратом аналогiчної дiї Суїферон (Польща). Отримані результати застосування препаратiв, створених нами в НДІ екології та біотехнології БДАУ. Результати дослiджень свiдчать, що Полімет та Полімет-Селен є ефективними засобами профiлактики алiментарної анемiї поросят-сисунiв.

Встановлено, що препарати Полімет та Полiмет-Селен за ефективнiстю дiї перевершують препарат Суїферон, мають переваги за економiчними i технологiчними показниками в cxeмi профiлактики аліментарної анемії поросят-сисунів, що дозволяє одержати додатковий прибуток у сумі сумі 13,12 та 17,3 грн./гол відповідно.

При проведенні досліджень в умовах Чеського аграрного університету встановлено, що застосування Полімету та Полімет-Селену дозволяє одержати додатково прибуток у розмірі 1,1 та 1,42 євро/гол відповідно, що доводить доцільність застосування цих препаратів для одержання додаткової продукції та зниження її собівартості при різних умовах утримання тварин.

Результати проведених досліджень та виробнича апробація створених комплексних антианемічних препаратів дали змогу зробити висновки, що введення монокомпонентних ферумдекстранових препаратів підсилює оксидативний стрес у поросят у постнатальний період розвитку. Метаболічний захист в умовах активації процесів вільнорадикального окиснення біосубстратів пов'язаний з активацією антиоксидантних систем. З огляду на це важливим є виробництво комплексних вітчизняних препаратів з антиоксидантними властивостями, які спрямовано регулюють стан антиоксидантного захисту, що значною мірою визначає характер перебігу окислювально-відновлювальних процесів. Особливо важлива мембрано-протекторна дія таких комплексних препаратів завдяки їхнім антиоксидантним властивостям, що є підставою до включення цих засобів у перелік ефективних препаратів для профілактики та лікування аліментарних захворювань.

Таким чином, профілактика анемії у підсисних поросят шляхом уведення їм антианемічних препаратів Полімет та Полімет-Селен сприяє збільшенню приростів живої маси та підвищенню збереженості поголів'я. Встановлено, що розроблені комплексні антианемічні препарати з антиоксидантними властивостями мають переваги над тими препаратами, які застосовуються в Україні та за кордоном, за рахунок кластерних сполук Феруму та наявності хелатних компонентів у їх складі. Розроблена технологія дозволила одержати біотехнологічні продукти, які дешевші від закордонних аналогів, що, в свою чергу, забезпечує підвищення конкурентоспроможності вітчизняних препаратів і виробленої з їх застосуванням екологічно чистої тваринницької продукції.

ВИСНОВКИ

У дисертації викладено теоретичне обгрунтовання та використання сучасних підходів до вирішення проблеми, яка полягає у розробці технології одержання комплексних антианемічних препаратів. Для досягнення мети сконструйовано, виготовлено та випробувано обладнання із застосуванням сучасних мембранних технологій, проведені доклінічні та клінічні дослідження на лабораторних тваринах, визначені токсикологічні характеристики одержаних препаратів, здійснено їх державну реєстрацію. Розроблена необхідна нормативна документація (Технічні умови, патенти, настанови, рекомендації, ДСТУ тощо). Науково обгрунтовано та експериментально підтверджено в умовах виробництва в Україні та за кордоном (Республіка Чехія) ефективність одержаних комплексних препаратів з антиоксидантними властивостями для профілактики аліментарної анемії та корекції адаптивних систем організму поросят в постнатальному онтогенезі.

1. Вивчені механізми вилучення Феруму з нативного феритину, проведені експерименти з конструювання in vitro молекул феритину із апоферитину. Одержані результати покладено в основу біотехнології одержання захищених міцел Феруму.

2. Розроблено біотехнологію конструювання захищенних міцел гідроксиду Феруму, які за своїми фізико-хімічними та біологічними характеристиками максимально наближені до природних сполук, що накопичують Ферум - феритинів. Сконструйовані кластерні сполуки Феруму, розміри одержаних міцел наближені до розмірів та характеристик молекул феритину, що підтверджується спектральними параметрами одержаних комплексів. Як стабілізуюча речовина була одержана, за розробленою нами технологією, модифікована фосфатом феродекстринова композиція, наближена за властивостями до нативного феритину.

3. Для виробництва комплексних антианемічних препаратів нами сконструйована пілотна установка, яка складається з таких приладів та обладнання для здійснення технологічного процесу: зворотно-осмотичної системи для одержання апірогенної води, реактора, керамічних фільтрів, плоскорамних модульних мембранних блоків для здійснення розподілу компонентів водного розчину у режимі тангенціальної ультрафільтрації, потужної помпи плунжерного типу, які дозволяють одержати продукцію в обсягах промислового виробництва.

4. Розроблена технологія, сконструйоване та вироблене обладнання дозволили одержати комплексні препарати, в яких Ферум знаходиться у формі кластерних сполук у складі стабілізованих вуглеводним компонентом міцел. Створені міцели є аналогом природної ферумдепонуючої форми Феруму у складі феритину і слугують джерелом нетоксичної, розчинної і легкодоступної форми цього елемента. До складу препаратів введено хелатні комплекси Купруму, Цинку та Селену, які є простетичними групами антиоксидантних ферментів.

5. При визначенні токсикологічних властивостей отриманих антианемічних препаратів встановлено, що LD₅₀ для білих щурів при введенні Полімету та Полімет-Селену становить 2380 - 2540 мг/кг маси, тобто створені препарати належать до класу слаботоксичних сполук.

6. При проведенні перевірки ефективності створених препаратів було встановлено, що у поросят контрольної групи, яким не вводили препарати Феруму, до 15-го дня експерименту виявлено ферумдефіцитний стан, що характеризується низьким вмістом Феруму в сироватці (р<0,001), зниженням ступеня насиченості трансферину Ферумом (р<0,01) та високими значеннями загальної ферумзв'язувальної здатності (ЗФЗЗ) сироватки крові (р<0,001). Високі значення ЗФЗЗ є наслідком підвищеного синтезу трансферину як компенсаторного адаптаційного фактора у відповідь на дефіцит Феруму в організмі поросят контрольної групи. Уведення поросятам-сисунам препаратів Полімет та Полімет-Селен забезпечує профілактичний ефект за рахунок збільшення концентрації Феруму в крові поросят порівняно з показниками тварин контрольної групи (р<0,01). При цьому оптимізується ступінь насиченості трансферину Ферумом (р<0,01) та загальна ферумзв'язувальна здатність сироватки (р<0,01), підвищується концентрація гемоглобіну на статистично вірогідну величину відносно показників контрольної групи (р<0,001), де цей показник знижується на 21,7-22,5% (р<0,001); кількість еритроцитів збільшується відповідно на 14,1-25,5% відносно контролю. При застосуванні Урсоферану концентрація гемоглобіну та кількість еритроцитів зростає відносно контролю на 15,2 та 17,4% відповідно (р<0,01).

7. Встановлено, що введення поросятам монокомпонентного ферумдекстранового препарату призводить до активації процесів ПОЛ. На 5-у добу досліду у крові поросят кількість сполук з ізольованими подвійними зв'язками зменшилася на 21,1% (p<0,05), а концентрація дієнових кон'югатів була вищою на 30,5% (p<0,01). Уведення ферумдекстрану спричиняє суттєве підвищення в крові вмісту кетодієнів і сполучених триєнів на 18% (p<0,05) та загальних гідропероксидів ліпідів на 16,3% (p<0,05).

8. Стимульована монокомпонентним ферумвмісним препаратом Урсофераном ліпопероксидація у сироватці крові відбувається на фоні зниження активності ферментативного та неферментативного ланцюгів антиоксидантного захисту: супероксиддисмутази (р<0,05), глутатіонпероксидази (р<0,01), глутатіонредуктази (р<0,05) еритроцитів , вмісту відновленого глутатіону (р<0,05), токоферолу (р<0,05), церулоплазміну (р<0,01); одночасно пригнічення трансформації Fe²⁺ Fe³⁺ є додатковим чинником активації вільнорадикального окиснення ліпідів.

9. При введенні поросятам Полімету та Полімет-Селену встановлено відповідно підвищення вмісту кількості сполук з ізольованими подвійними зв'язками (р<0,05, p<0,01), зменшення концентрації дієнових кон'югатів (р<0,01, p<0,001, гідропероксидів ліпідів (р<0,05, p<0,01), кетодієнів та сполучених триєнів (р<0,01, p<0,01). Відбувається активація системи антиоксидантного захисту, про що свідчить підвищення активності супероксиддисмутази крові (р<0,01) та еритроцитів (p<0,05), а також умісту церулоплазміну (р<0,01) у плазмі крові, що сприяє переходу прооксидної форми Феруму у транспортну у складі трансферину та зменшенню пулу низькомолекулярного токсичного Феруму. Уведення поросятам препарату Полімет-Селен супроводжується підвищенням активності селенозалежної глутатіонпероксидази (р<0,01), вмісту HS-груп низькомолекулярних сполук (р<0,05) у порівнянні з поросятами, яким уводили ферумдекстран, за рахунок стимуляції Селеном біосинтезу відновленої форми глутатіону у печінці та підвищенням його експорту в плазму крові.

10. Застосування препарату Полімет-Селен призводить до зниження рівня загального білірубіну сироватки (р<0,05), що корелює із коефіцієнтом насиченості трансферину Ферумом і є свідченням гальмування активності гем-оксигенази внаслідок зменшення концентрації низькомолекулярного нетрансферинового Феруму - джерела активних форм Оксигену, які ушкоджують мембрани клітин.

11. Встановлено, що кофакторне забезпечення гомеостатичних механізмів антиоксидантного захисту шляхом використання координаційних сполук біометалів призводить до корекції адаптивних систем організму поросят у постнатальному онтогенезі.

12. Виявлено, що у крові поросят 1-ї дослідної групи спостерігається тенденція до підвищення активності АсАТ, вірогідне підвищення активності АлАТ на 10-у добу експерименту (p<0,05) та зниження коефіцієнта Де Рітіса на 10-у та 15-у добу експерименту. У поросят 2-ї дослідної групи, які отримували Полімет-Селен, спостерігали зниження активності трансаміназ та нормалізацію коефіцієнта Де Рітіса. Встановлено, що вміст сечовини в плазмі крові поросят дослідних груп був вірогідно меншим, ніж у поросят контрольної групи. Так, у 10-добових поросят 2-ї та 3-ї дослідних груп зменшення складало відповідно 8,9 (p<0,05) та 11,2% (p<0,05), а у 15-добових - 9,2 (p<0,05) та 11,1% (p<0,01) порівняно з показниками сечовини в плазмі крові поросят контрольної групи.

13. Отримані нами результати досліджень свідчать про зниження інтенсивності катаболізму білків і підвищення ефективності їх використання у біосинтетичних процесах у тканинах поросят дослідних груп, що узгоджується з різницями в інтенсивності приросту їхньої живої маси. Жива маса поросят, яким уводили Полімет, Полімет-Селен, Урсоферан, Ферибіон, на 60-й день життя була вищою порівняно з контрольною групою (р<0,001), причому у поросят, яким уводили Полімет та Полімет-Селен, цей показник був вищим, ніж у тих, що одержували Урсоферан, Суїферон та Ферибіон (р<0,01). Збереженість поросят при застосуванні Полімету становила 90,7%, Полімет-Селену - 94,6%, Урсоферану -88,4, Ферибіону - 90%, Суїферону - 82,6%.

14. Застосування Полімету та Полімет-Селену дозволяє одержати до 40-денного віку, порівняно з групою поросят, яким вводили Суїферон, додатковий прибуток у сумі 13,1 та 17,3 грн/гол відповідно.

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ

З метою профілактики анемії, оксидативного стресу, підвищення рівня збережености та інтенсифікації росту рекомендується новонародженим поросятам на 3-4-й день життя внутрішньом'язове введення вітчизняних препаратів Полімет або Полімет-Селен в дозі 2 мл/гол.

Пропозиції виробництву викладені у “Рекомендаціях щодо застосування вітчизняного залізовмісного препарату Полімет для профілактики та лікування анемії поросят-сисунів” та у “Рекомендаціях щодо застосування препарату комплексної дії Полімет-Селен для профілактики та лікування анемії та оксидативного стресу новонароджених поросят”, які затверджені науково-методичною радою Державного департаменту ветеринарної медицини (протокол № 14 від 22-23. 12. 2004 р.).

При виготовленні та застосуванні препаратів Полімет та Полімет-Селен слід керуватися такими нормативними документами:

1.“Полімет” - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.004-2003. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Держдепартаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок МАП України, Державному підприємстві Укрметртестстандарт Держспоживстандарту України (2003 р).

2. Настанова по застосуванню препарату “Полімет”. Розглянута та схвалена Вченою радою ДНДКІ ветеринарних препаратів та кормових добавок (протокол № 14 від 18.12.2002 р.). Затверджено Головою Державного департаменту ветеринарної медицини МАП України 19.02.2003 р., № 15-14/62.

3.“Полімет-Селен” - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.006-2003. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Держдепартаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок МАП України, Державному підприємстві Укрметртестстандарт Держспоживстандарту України (2003 р).

4. Настанова по застосуванню препарату “Полімет-Селен”. Розглянута та схвалена Вченою радою ДНДКІ ветеринарних препаратів та кормових добавок (протокол № 14 від 18.12.2002 р.). Затверджено Головою Державного департаменту ветеринарної медицини МАП України 19.02.2003 р., № 15-14/63.

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ ПРАЦЬ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

Статті у наукових фахових виданнях

1. Бітюцький В.С. Вплив іммобілізованих ферментів на біохімічні процеси, продуктивність і якість м'яса курчат-бройлерів // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 1997. - Вип. 3. - С. 205-207.

2. Герасименко В.Г., Мельниченко О.М., Бітюцький В.С. Ефективні методи оцінки якості біотехнологічно синтезованих макромолекулярних металоорганічних сполук // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 1998. - Вип. 4. - С. 201-204. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, особисто провів ряд досліджень, підготував роботу до друку).

3. Мельниченко А.Н., Герасименко В.Г., Битюцкий В.С. Изучение влияния металлоорганических препаратов меди и железа на морфологический состав и гематологические показатели крови поросят-сосунов // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 1998. - Вип. 6. - С. 52-54. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

4. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Вивчення впливу металоорганічних препаратів міді та заліза на деякі біохімічні показники поросят-сисунів // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 1999. - Вип. 9. - С. 227-230. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

5. Ферокол - новий вітчизняний високоефективний препарат для профілактики та лікування аліментарних анемій / В.Г. Герасименко, О.М. Мельниченко, В.С. Бітюцький, П.І. Веред // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 2000. - Вип. 14. - С. 105-109. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

6. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Фізико-хімічні основи конструювання металоорганічних сполук // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква: БДАУ, 2000. - Вип. 11. - С. 149-152. ( Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

7. Вивчення ефективності застосування біомету - нового залізомідькобальтвмісного препарату для профілактики та лікування аліментарних анемій / В.Г. Герасименко, О.М. Мельниченко, В.С. Бітюцький, П.І. Веред // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 2001. - Вип. 19. - С. 140-143. (Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

8. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Використання мембранних технологій для одержання біологічно активних речовин. // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 2001. - Вип. 17. - С. 147-151. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, підготував роботу до друку).

9. Бітюцький В.С. Біотехнологічні критерії експрес-оцінки стабільності препарату “Біомет” для профілактики та лікування анемій сільськогосподарських тварин // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 2002. - Вип. 22. - С. 8-11.

10. Бітюцький В.С. Антиоксидантний статус крові поросят-сисунів при використанні антианемічного препарату комплексної дії вітчизняного виробництва // Аграрні вісті. - 2003. - № 4. - С. 27 - 29.

11. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Ефективність застосування комплексних антианемічних препаратів широкого спектра дії // Аграрні вісті. - 2003. - № 2. - С. 8-10. (Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

12. Веред П.І., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Вплив різних антианемічних препаратів на гематологічні показники у поросят // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету: Збірник наукових праць. - Біла Церква, 2003. - Вип. 27. - С. 28-34. (Дисертант брав участь у плануванні та проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

13. Веред П.І., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Ефективність застосування металовмісних препаратів “Ферокол” вітчизняного виробництва і “Ферибіон” чеського виробництва // Науковий вісник Львівської національної академії ветеринарної медицини імені С.З. Гжицького. - 2003. - Т. 5, № 2, ч. 3. - С. 27-30. ( Дисертант брав участь у плануванні та проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

14. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Біотехнологія розробки та застосування профілактично-лікувальних антианемічних препаратів // Ветеринарна медицина. - 2004. - № 84. - С. 200-202. (Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

15. Розробка технології одержання і використання металокомплексних препаратів для зменшення антропогенного навантаження на навколишнє середовище / В.Г. Герасименко, П.І. Веред, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Науковий вісник Національного аграрного університету. - К., 2004. - № 73, ч. 1. - С. 44-47. (Дисертант брав участь у плануванні і проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

16. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Псуйко І.А. Показники пероксидного окиснення ліпідів та системи антиоксидантного захисту в крові перепела // Науковий вісник Львівської національної академії ветеринарної медицини імені С.З. Гжицького. - 2005. - Т. 7, № 2, ч. 2. - С. 39-42. (Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

17. Бітюцький В.С. Стан процесів перекисного окиснення ліпідів, системи антиоксидантного захисту та ефективність застосування нового комплексного антианемічного препарату для поросят-сисунів // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин і ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок. - 2005.-Вип. 6, № 3. - С. 32-37.

18. Обмін заліза у поросят при використанні антианемічних препаратів вітчизняного та закордонного виробництва / П.І. Веред, В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Збірник наукових праць Вінницького державного аграрного університету. - 2005. - № 5. - С. 155-160. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

19. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Біохімічні показники крові поросят-сисунів при використанні комплексних антианемічних препаратів // Ветеринарна медицина. - 2005. - № 85. - С. 112-115. (Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

20. Бітюцький В.С. Корекція процесів перекисного окиснення ліпідів і системи антиоксидантного захисту у поросят-сисунів // Науковий вісник Львівської національної академії ветеринарної медицини імені С.З. Гжицького. - 2005. - Т. 7, № 2, ч. 2. - С. 10-16.

21. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Використання сучасних біотехнологій для одержання вітчизняних комплексних антианемічних препаратів та ефективності застосування їх у свинарстві // Ветеринарна біотехнологія. - 2006. - № 9. - С.47-53. (Дисертант брав участь у плануванні і проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

22. Бітюцький В.С. Вміст тіолових сполук та продуктів ПОЛ у крові поросят за використання антианемічних препаратів // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин і ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок. - Львів, 2007. - Вип. 8, № 1-2. - С. 10-14.

Патенти

23. Пат. 69049 UА, МПК А61 К33/26. Залізовмісний препарат “Ферокол” з пролонгованим виділенням активної речовини для профілактики залізодефіцитних станів тварин / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко, П.І. Веред, В.М. Оксамитний. - № 20031110835; Заявл. 28.11.2003; Опубл. 16.08.2004 // Бюл. № 8. (Дисертант провів дослідження, підготовив заявку на патент).

24. Пат. 9069 UА, МПК А61К33/26. UA. Спосіб одержання стійкого магнітокерованого біокаталізатора / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.І. Цвіліховський, І.Я. Коцюмбас. - № 20041209896; Заявл. 03.12.2004; Опубл. 15.09.2005 // Бюл. № 9. (Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, підготовив заявку на патент).

25. Пат. 71364А UА, МПК А61К33/26. Препарат “Полімет” для профілактики анемії та оксидативного стресу у сільськогосподарських тварин / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко. - № 20031212335; Заявл. 25.12.2003; Опубл. 15.11.2004 // Бюл. № 11. (Дисертант особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, підготовив заявку на патент).

26. Пат. 6103 UА, МПК А61К33/26. Комплексний селеновмісний препарат для профілактики мікроелементозів у сільськогосподарських тварин / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко. - № 20040907696; Заявл. 22.09.2004; Опубл. 15.04.2005 // Бюл. № 4. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, брав участь у плануванні і проведенні експерименту, підготовив заявку на патент).

Нормативно-технічна документація

27. Ферокол / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, В.М. Оксамитний. - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.003-2002. ОКП. 933730. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Держдепартаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок МАП України, Державному підприємстві Укрметртестстандарт Держспоживстандарту України (2001 р). (Дисертант брав участь у написанні та оформленні документів).

28. Біомет / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, В.М. Оксамитний. - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.002-2002.ОКП. 933730. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Держдепартаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок МАП України, Державному підприємстві Укрметртестстандарт Держспоживстандарту України (2001 р). (Дисертант брав участь у написанні та оформленні документів).

29. Полімет / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко. - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.003-2002. ОКП. 933730. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Держдепартаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок МАП України, Державному підприємстві Укрметртестстандарт Держспоживстандарту України (2003 р). (Дисертант брав участь у написанні та оформленні документів).

30. Полімет-Селен / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко. - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.005-2002.ОКП. 933730. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Держдепартаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок МАП України, Державному підприємстві Укрметртестстандарт Держспоживстандарту України (2003 р). (Дисертант брав участь у написанні та оформленні документів).

Методичні рекомендації

31. Рекомендації щодо застосування вітчизняного залізовмісного препарату “Ферокол” для профілактики та лікування анемії поросят-сисунів /В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, П.І. Веред. - Біла Церква, 2004. - 7 с. (Дисертант організував досліди, провів лабораторні дослідження, підготував рекомендації).

32. Рекомендації щодо застосування препарату комплексної дії “Біомет” для профілактики та лікування анемії новонароджених поросят / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, П.І. Веред. - Біла Церква, 2004. - 9 с. (Дисертант брав участь в проведенні дослідів, провів лабораторні дослідження, підготував рекомендації).

33. Методичні рекомендації щодо застосування антианемічних препаратів для корекції адаптивних систем організму поросят / Білоцерків. держ. аграр. ун-т; Укл.: В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко. - Біла Церква, 2007. - 12 с. (Дисертант провів експериментальні та виробничі досліди, підготував рекомендації).

34. Методичні рекомендації щодо застосування селеновмісного препарату з антиоксидантними властивостями для профілактики та лікування залізодефіцитної анемії поросят / Білоцерків. держ. аграр. ун-т; Укл.: В.С. Бітюцький. - Біла Церква, 2007. - 14 с. (Дисертант провів експериментальні та виробничі досліди, підготував рекомендації).

Тези конференцій і симпозіумів

35. Герасименко В.Г., Битюцкий В.С., Мельниченко А.Н. Конструирование новых ветеринарных препаратов металлов-биотиков парентерального назначения // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Материалы 13-й Международной конференции, 22-24 мая 2001 г., г. Санкт-Петербург. - Санкт-Петербург, 2001. - С. 26-27.

36. Technology of constructing membrane device of module type for lowmolecular connections ultrafiltrating / V.G. Gerassimenko, V.S. Bityutsky, A.N. Melnichenko, P.I. Vered // VII International Conference of Young Scientists / TF, CUA. - Prague, 2005. - P. 42-44.

37. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Злочевський М.В. Технологія конструювання препаратів біологічно активних речовин пролонгованої дії // Наукове забезпечення агропромислового комплексу України в сучасних умовах: Матеріали науково-практичної конференції. - Біла Церква, 1995. - С. 116-119.

38. Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Сучасні методи профілактики та лікування анемії поросят-сисунів // V міжнародна науково-практична конференція “Наука і освіта - 2004”, 10-25 лютого 2004 р., Т. 31. Ветеринарія. - Дніпропетровськ, 2004. - С. 3-4.

39. Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М. Розробка вимог екологічної безпеки для виробництва комплексних антианемічних препаратів// Перший Всеукраїнський з'їзд екологів (Ecology-2006): Матеріали Міжнародної науково-практична конференції. - Вінниця, 2006. - С. 12.

40. Бітюцький В.С. Використання мембранних технологій для одержання антианемічних препаратів // Аграрна наука виробництву: Тези доповідей V державної науково-практичної конференції, м. Біла Церква, 23-25 листопада, 2006 р. - Біла Церква, 2006. - С. 109.

БІТЮЦЬКИЙ В.С. БІОТЕХНОЛОГІЯ ОДЕРЖАННЯ КОМПЛЕКСНИХ АНТИАНЕМІЧНИХ ПРЕПАРАТІВ ТА ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ ДЛЯ КОРЕКЦІЇ АДАПТИВНИХ СИСТЕМ ОРГАНІЗМУ ПОРОСЯТ В ПОСТНАТАЛЬНОМУ ОНТОГЕНЕЗІ. - РУКОПИС

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора сільськогосподарських наук за спеціальністю 03.00.20 - біотехнологія. - Білоцерківський державний аграрний університет, Біла Церква, 2007.

Дисертація присвячена розробці біотехнології одержання комплексних антианемічних препаратів Полімет та Полімет-Селен для профілактики анемії поросят та встановленню ефективності застосування Полімету та Полімет-Селену для запобігання анемії поросят. Розроблена технологія одержання комплексних препаратів, в яких Ферум знаходиться у формі кластерних сполук у складі стабілізованих вуглеводним компонентом міцелярних частинок. Створені міцели є аналогом природної ферумдепонуючої структури цього елемента у складі феритину і слугують джерелом нетоксичної, розчинної і легкодоступної форми Феруму. До складу препаратів нами введено хелатні комплекси Купруму, Кобальту, Цинку та Селену, які є простетичними групами антиоксидантних ферментів.

Встановлено, що кофакторне забезпечення гомеостатичних механізмів антиоксидантного захисту шляхом використання координаційних сполук біометалів сприяє корекції адаптивних систем організму поросят у постнатальному онтогенезі. Розроблена необхідна нормативна документація на препарати (Технічні умови, ДСТУ, патенти, настанови, рекомендації тощо).

Науково обгрунтовано та експериментально підтверджено в умовах виробництва в Україні та за кордоном (Республіка Чехія) ефективність одержаних комплексних препаратів з антиоксидантними властивостями для профілактики аліментарної анемії поросят порівняно з препаратами закордонного виробництва.

Ключові слова: Полімет, Полімет-Селен, профілактика, анемія, Ферум, Купрум, Кобальт, Цинк, Селен, гемоглобін, еритроцити, адаптація, збереженість поросят, жива маса, конкурентоспроможність.

БИТЮЦКИЙ В.С. БИОТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСНЫХ АНТИАНЕМИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ АДАПТАЦИОННЫХ СИСТЕМ ОРГАНИЗМА ПОРОСЯТ В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ. - РУКОПИСЬ

Диссертация на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук по специальности 03.00.20 - биотехнология. - Белоцерковский государственный аграрный университет, Белая Церковь, 2007.

Диссертация посвящена разработке биотехнологии получения новых отечественных препаратов Полимет и Полимет-Селен и изучению эффективности их применения для профилактики анемии новорожденных поросят в сравнении с зарубежными аналогами. Разработанная биотехнология, сконструированное и изготовленное оборудование позволили получить комплексные препараты, в которых Феррум содержится в форме кластерных соединений в составе стабилизированных углеводным компонентом мицеллярных частичек. Созданные мицеллы являются аналогом природной феррумдепонирующей формы Феррума в составе ферритина и служат источником нетоксической, растворимой и легкодоступной формы этого элемента. В состав препаратов введены хелатные комплексы Купрума, Цинка и Селена, которые являются простетическими группами антиоксидантных ферментов.

Доказано, что применение поросятам-сосунам отечественных препаратов Полимет и Полимет-Селен обеспечивает профилактический эффект при анемии за счет оптимизации показателей транспортного фонда Феррума и адекватного обеспечения тканей Оксигеном. Кофакторное обеспечение гомеостатических механизмов антиоксидантной защиты путем применения координационных соединений биометаллов в составе препаратов способствует коррекции адаптационных систем организма поросят в постнатальном онтогенезе.

Установлено, что стимулированная монокомпонентным феррумсодержащим препаратом липопероксидация происходит на фоне снижения активности ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной защиты: супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы эритроцитов и уменьшения содержания восстановленного глутатиона и токоферола в сыворотке крови. Снижение содержания церулоплазмина и торможение трансформации Fe²⁺ Fe³⁺ является добавочным фактором активации свободнорадикального окисления липидов при использовании монокомпонентных препаратов.

Введение Полимета и Полимет-Селена сопровождается увеличением содержания соединений с изолированными двойными связями, уменьшением содержания диеновых конъюгатов, гидропероксидов липидов, кетодиенов и сопряженных триенов. Активизируется система антиоксидантной защиты, повышается активность супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы крови и эритроцитов и концентрация церулоплазмина в плазме крови, что способствует переходу прооксидационной формы Феррума в транспортную в составе трансферина и уменьшению пула низкомолекулярного токсического Феррума.

Установлено, что профилактика анемии у подсосных поросят путем введения им антианемических препаратов Полимета и Полимет-Селена способствует увеличению приростов живой массы и сохранности поголовья животных. Полученные препараты обладают преимуществами перед средствами, которые применяются в Украине, за счет феррумсодержащих кластерных комплексов и антиоксидантных компонентов в их составе.

Ключевые слова: Полимет, Полимет-Селен, профилактика, анемия, Феррум, Купрум, Кобальт, Цинк, Селен, адаптация, сохранность поросят, живая масса, конкурентоспособность.

BITYUTSKY V. BIOTECHNOLOGY OF RECEIVING OF THE COMPLEX ANTIANEMIC PREPARATIONS AND THEIR USE IN THE CORRECTION OF THE ADAPTIVE SYSTEMS OF THE YOUNG PIGS' ORGANISMS IN THE POSTNATAL ONTOGENY. - MANUSCRIPT

Thesis for a Doctor's degree of the agricultural sciences, speciality 03.00.20 - biotechnology. - Bila Tserkva State Agrerian University, Bila Tserkva, 2007.

The thesis is about the biotechnology development of the complex antianemic preparations Polimet and Polimet-Selen receiving for the anemia prophylaxis of young pigs. The complex preparations receiving technology is developed, in which iron (Ferrum) is in the form of the cluster compounds in the structure of the micellar particles, which were stabilized by carbonic component. Developed micelles are the analogue of the natural ferrumdeposited form of Ferrum in the structure of the feritin and they are nontoxic, soluble and simple source for this element. To the preparations' composition we add chelate complexes of Cuprum, Cobalt, Zinc, Selenium, which are the prosthetic groups of antioxidant ferments.

It was established, that cofactor supplying of homeostatic mechanisms of antioxidant protection by means of biometal coordinating compounds use contributes to the correction of adaptive systems of the young pigs' organisms in the postnatal ontogeny. Normative documentation for these preparations was prepared.

It is scientifically based and experimentally proved, that in the condition of production in Ukraine and abroad (Czech Republic) the effectiveness of received complex preparations with antioxidant properties for the alimentary anemia prophylaxis of young pigs in comparison with foreign preparations.

Key words: Polimet, Polimet-Selen, anemia prophylaxis, Ferrum, Cuprum, Zinc, Selenium, haemoglobin, erythrocytes, adaptation, safe keeping of young pigs, competitive ability.

Размещено на Allbest.ru