Теоретичні і практичні аспекти біотехнології виробництва мінерально-вітамінних препаратів та вивчення їх впливу на гомеостаз і продуктивність молодняку сільськогосподарських тварин

Після введення комплексного препарату Вітамет жирнокислотний склад ліпідів нормалізувався за рахунок зменшення вмісту пальмітинової (на 18,9%, р <0,05), миристинової (на 21,4 %, р <0,01) та арахідонової (на 19,6 %, р <0,01) кислот. Дослідження та аналіз даних щодо вмісту індивідуальних жирних кислот у мембранах еритроцитів телят дослідних і контрольної груп дозволив встановити підвищення відсоткового вмісту ЖК 22:5 (щ-3) та 22:6 (щ-3) (р<0,05) в мембранах еритроцитів 1-ї групи тварин, що, можливо, є фактором захисту від пероксидного ушкодження мембранних фосфоліпідів, оскільки жирні кислоти щ-3 ряду є недосконалим субстратом для цикло-та ліпооксигеназ (Jump D.B., 2004; Маргитич В.М., 2005). Дисбаланс жирних кислот в еритроцитах крові телят, яким уводили монокомпонентний ферумдекстрановий препарат Урсоферан, характеризується підвищенням умісту окремих поліненасичених жирних кислот (арахідонової та докозагексаєнової, р<0,05). Використання комплексного мінерально-вітамінного препарату призводить до нормалізації рівня жирних кислот і відновлення їхнього метаболізму на стадії утворення ейкозаноїдів.

Проведені дослідження вказують на позитивний вплив комплексного препарату Вітамет на жирнокислотну формулу ліпідів сироватки крові і мембран еритроцитів піддослідних тварин, який нормалізує ліпідний їх склад та сприяє оптимізації параметрів гомеостазу.

Стан мембран еритроцитів при застосуванні мінерально-вітамінного препарату Вітамет новонародженим телятам. Відомо, що стан мембран, особливо еритроцитарних, є одним із домінуючих факторів регуляції біохімічних та біофізичних процесів, у підтримці гомеостазу в клітинах та організмі в цілому. Функціонування мембран залежить від їх проникності, природи та складу ліпідів, їх кількості та інтенсивності пероксидного окиснення та антиоксидантної активності (Томчук В.А., Мельничук Д.О., 2005). Розвиток будь-якого патологічного процесу призводить до порушення метаболізму клітин, пошкодження клітинних структур та, як наслідок, до порушення структурної і бар'єрної функції мембран (Барабой В.А., 1997). До факторів, що можуть впливати на показники ПЕМ, належать порушення процесів еритропоезу, обміну білків і ліпідів у мембранах, зміни біохімічного складу плазми крові .

Оскільки існує відповідність між змінами у мембранах та станом органів, визначення проникності еритроцитарних мембран (ПЕМ), осмотичної та кислотної резистентності еритроцитів (ОРЕ, КРЕ) може бути використано для оцінки дії отриманих біотехнологічних препаратів для профілактики та лікування анемій.

У таблиці 2 наведено дані щодо проникності еритроцитних мембран, осмотичної та кислотної резистентності еритроцитів. Встановлено, що у тварин контрольної групи ПЕМ дорівнює 31,9 %, ОРЕ - 63,8 %, а КРЕ -26,4 %, а після введення препарату Урсоферан ПЕМ збільшилось до 37,4 % (р <0,05), а ОРЕ і КРЕ зменшилося до - 52,1% (р <0,05), та 20,6 % (р <0,01) відповідно.

Таблиця 2

Проникність еритроцитарних мембран, осмотична та кислотна резистентність еритроцитів телят за дії антианемічних препаратів, % (М±m, n=6)

Примітка: *- p < 0,05, **- р < 0,01

При застосуванні телятам препарату Вітамет ПЕМ складає 30,2 %, ОРЕ - 64,5, а КРЕ - 27,3 %. Таким чином, встановлено підвищення проникності мембран, зниження осмотичної та кислотної резистентності за використання препарату Урсоферан.

Із літературних джерел відомо, що осмотична резистентність еритроцитів є показником стабільності клітинних мембран, порушення якої виникає в наслідок стресів, несприятливої екологічної ситуації, інтоксикацій і стає важливою|поважною| ланкою патогенезу, а іноді й етіологічним чинником багатьох хвороб. Порушення стабільності клітинних мембран пов'язане з посиленням процесів пероксидного окиснення ліпідів. При цьому в біліпідному| шарі плазмолеми відбувається|походить| накопичення дієнових кон'югатів|, які згодом перетворюються на малоновий| діальдегід, що “зшиває” біомолекули і знижує проникність мембрани, внаслідок чого вона стає крихкішою, порушуються процеси, пов'язані зі зміною поверхні мембрани (фагоцитоз|, піноцитоз, клітинна|кліткова| міграція та ін.), знижується чутливість клітини|клітини| до ряду|лави| гормонів, які регулюють функціональну| активність клітини|клітини| з її поверхні (Снітинський В.В.та ін., 2002).

Фосфоліпідний склад мембран еритроцитів та плазми крові телят за використання антианемічних препаратів. Фосфоліпіди є головним ліпідним компонентом клітинних мембран, які безпосередньо беруть участь в основних метаболічних процесах, а більшість їх властивостей пов'язана з присутністю полярних ліпідів, наявність яких визначає інтенсивність вільнорадикального пероксидного окиснення. Активація процесу ПОЛ у мембранах суттєво впливає на структуру і функції ліпідного бішару мембран, супроводжується появою в їхній структурі лізоформ фосфоліпідів, альдегідів, кетонів, які пошкоджують структуру ліпідного бішару і потенціюють підвищення проникності й плинності мембран. У відповідь відбувається адаптивна перебудова структури ліпідного бішару мембран (Афоніна А.Б. та ін., 2000; Мітін Ю.В. та ін., 2003). При вивченні складу та природи фосфоліпідів мембран еритроцитів крові телят, яким уводили антианемічні препарати, встановлено, що в мембранах еритроцитів 1-ї групи, спостерігається істотне зростання абсолютних рівнів фосфатидилетаноламіну (р <0,01) та сфінгомієліну (р <0,01) порівняно з 2-ю групою тварин. При цьому в мембранах еритроцитів, окрім зазначених фосфоліпідів, підвищується ще й уміст фосфатидилсерину (р<0,05). У той час не зазнає вірогідних змін уміст фосфатидилінозитолу (ФІ), фосфатидилхоліну (ФХ) та кардіоліпіну (КЛ). Підвищення лізокардіоліпіну (ЛКЛ), лізофосфатидилхоліну (ЛФХ), лізофосфатидилетаноламіну (ЛФЕА) у мембранах еритроцитів свідчить про інтенсифікацію вільнорадикального окиснення (Лизогуб В.Г. та ін., 2003). З урахуванням вищенаведених даних, слід відзначити, що мембрани еритроцитів телят 1-ї групи характеризуються вірогідними змінами в ліпідному складі порівняно з цими показниками у телят 2-ї групи. Ці зміни, зокрема, стосуються підвищення кількості - 22:5 щ-3 (р <0,01), загального холестеролу (р<0,01), а також зниження рівня 22:5 щ-6 (р<0,05). Результати проведених досліджень свідчать про наявність закономірностей у виникненні порушень складу жирних кислот та фосфоліпідів у мембранах еритроцитів телят, які отримували однокомпонентний ферумдекстрановий препарат. Відомо, що холестерол та сфінгомієлін ущільнюють клітинні мембрани, у той час як фосфоліпіди, які містять великі кількості полієнових жирних кислот (фосфатидилетаноламін, фосфатидилсерин), їх розріджують (Jump D.B., 2004). Підвищення рівня фосфатидилетаноламіну та фосфатидилсерину у мембранах еритроцитів телят 1-ї групи компенсує ущільнювальну дію надлишку мембранного холестеролу та сфінгомієліну, що узгоджується с даними інших авторів (Маргитич В.М., 2005). Відомо, що за умов пероксидного ушкодження мембрани холестерол може виступати як антиоксидант (Parasassi T. та ін., 1995). Можливо, що підвищення рівня холестеролу після введення монодекстранового препарату (Урсоферан), яке спостерігали в наших дослідженнях, забезпечує неспецифічний протекторний ефект від ушкодження вільними радикалами. В еритроцитах телят 1-ї групи встановлено підвищений вміст сфінгомієліну (р<0,01), який є прекурсом для вторинних месенджерів (церамід, сфінгозин та сфінгозин-1-фосфат), які беруть участь у клітинних процесах, включаючи диференціацію, старіння, апоптоз та проліферацію (Дикуха І.С. та ін., 2008). В результаті проведеної роботи встановлено, що антианемічні препарати впливають на проникність еритроцитарних мембран, їх осмотичну та кислотну резистентність. Ефективність їх дії залежать від компонентного складу використаних препаратів. Отже є підстави щодо використання препарату Вітамет молодняку великої рогатої худоби з метою оптимізації показників гомеостазу.

Середньодобові прирости живої маси телят при застосуванні антианемічних препаратів. Середньодобові прирости живої маси у тварин 1-ї і 2-ї груп були вірогідно вищими, ніж у тварин контрольної групи (р< 0,01). Надалі ця перевага показників 1-ї і ,особливо, у телят 2-ї групи збереглася до кінця досліду. Застосування мінерально-вітамінних антианемічних препаратів для молодняку великої рогатої худоби грунтується на вивченні їх впливу на інтенсивність росту тварин з урахуванням оптимальної дози препарату і віку тварин.

У результаті проведених досліджень і економічних розрахунків встановили, що застосування препарату Вітамет як профілактичного засобу покращує збереження телят на 8,3 % за рахунок зниження захворюваності новонароджених телят на анемію, збільшує середньодобові прирости на 13,0-19,7% (р<0,05, р<0,01), а певний імуностимулювальний ефект забезпечує стійкість молодняку до інших захворювань, тим самим підвищуючи ефективність і рентабельність виробництва.

Таким чином встановлено, що препарат Вітамет справляє більш високий ростостимулювальний ефект, ніж Урсоферан, і може бути рекомендований для застосування новонародженим телятам.

Морфологічні та біохімічні показники крові поросят під час використання препарату Полімет-В₁₂ . Дані, наведені на рис.3, свідчать про те, що внутрішньом'язове введення антианемічного препарату Полімет-В₁₂ сприяє збільшенню у крові поросят на 10-й день кількості еритроцитів порівняно з контрольною групою на 12,9% (р<0,01); у поросят при застосуванні Феродекстрану-В₁₂ кількість еритроцитів зросла на 6,3% (р<0,05). На 15-й день кількість еритроцитів у крові поросят дослідних груп збільшилася порівняно з контрольною групою (р<0,001).

Примітка: *- р < 0,05, **- р < 0,01, ***- р < 0,001

Рис. 3 Динаміка гематологічних показників поросят-сисунів при застосуванні препарату Полімет-В₁₂ (Mm, n=25)

З даних, наведених на рис. 3, видно, що після парентерального введення поросятам дослідних груп антианемічного препарату вітчизняного виробництва Полімет-В₁₂ і препарату закордонного виробництва Феродекстран-В₁₂, концентрація гемоглобіну вірогідно збільшилася на 15-й день життя (р<0,001) порівняно з п'ятим днем. Щодо тварин, які знаходились у контрольній групі, то цей показник від 5-го до 15-го дня знизився на 12,3% (р<0,01), а порівняно з концентрацією гемоглобіну у крові поросят дослідних груп різниця характеризувалася високим рівнем вірогідності (р<0,001). Вміст гемоглобіну в еритроциті (ВГЕ) поросят 2-ї групи (Полімет-В₁₂) вірогідно збільшився порівняно з контрольною (р<0,01).

Вміст лейкоцитів на 10-й день у крові тварин дослідних груп підвищився (p<0,01) і на 15-й день цей показник залишався вищим порівняно з контрольною групою (p<0,01), що також свідчить про позитивний вплив антианемічних препаратів на лейкопоез.

Вміст загального білка у плазмі крові у поросят контрольної групи на 10-й та 15-й дні досліду вірогідно зменшився (p<0,05), що свідчить про гальмування білоксинтезувальної функції печінки. Одночасно найбільшу концентрацію білка було виявлено у крові поросят 2-ї дослідної групи на 15-у добу досліду (p<0,01). У крові поросят контрольної групи також було встановлено відхилення від оптимального співвідношення трансаміназ на 10-у та 15-у добу експерименту. Так у поросят 1-ї дослідної групи на 10-у добу спостерігали тенденцію до підвищення активності АсАТ та вірогідне підвищення АлАТ (p<0,05). Зміни активності амінотрансфераз вказують на певне гальмування системи природної детоксикації в організмі поросят 1-ї дослідної групи; у поросят 2-ї дослідної групи, яким уводили Полімет-В₁₂, активність цих ферментів була оптимальною.

Показником, який характеризує інтенсивність катаболізму амінокислот в організмі тварин, є концентрація сечовини. Встановлено, що вміст цього метаболіту в плазмі крові 10-добових поросят 1-ї і 2-ї дослідних груп був меншим відповідно на 8,9% (p<0,05) та 11,2 % (p<0,05), а у 15-добових - на 9,2 % (p<0,05) та 11,1% (p<0,01) порівняно з показниками концентрації сечовини в плазмі крові поросят контрольної групи.

Отримані результати свідчать про підвищення рівня анаболічних процесів і ефективності використання попередників у біосинтетичних процесах у тканинах поросят, що узгоджується з рівнем приросту живої маси у тварин дослідних груп.

Показники вмісту мікроелементів у крові поросят. Аналіз проведених нами досліджень свідчить, що у поросят контрольної групи виникає ферумодефіцитний стан організму, який проявляється зниженням концентрації сироваткового Феруму на 10-й день життя до 12,9 мкмоль/л (р<0,001), внаслідок чого зменшується рівень Феруму, що транспортується, та тої його кількості, яка зв'язана з трансферином. У результаті застосування антианемічних препаратів (Феродекстран-В12 і Полімет-В12) було встановлено, що концентрація сироваткового Феруму на 10-й день у тварин дослідних груп була вищою порівняно з аналогічними показниками у поросят контрольної групи (р<0,001). Крім того, у тварин, яким уводили Полімет-В12, мало місце вірогідне збільшення концентрації Купруму на 10-у та 15-у добу (р0,05) та вміст Цинку - на 5-у добу досліду (р0,05).

Встановлено, що у поросят 2-ї дослідної групи вміст вітаміну В12 вірогідно підвищувався на 10-у (р0,01) та 15-у (р0,05) добу досліду (табл. 3). Відомо, що за недостатності ціанокобаламіну порушується метаболізм фолієвої кислоти, знижується синтез ДНК в еритроцитах і нормобластах, затримується процес їхнього ділення та дозрівання, поглиблюється анемія (Судаков М.О. та ін., 2000, Кравців Р.Й. та ін., 2004). Таким чином, застосування комплексного препарату Полімет-В12 стимулює еритропоез, сприяє підвищенню рівня вітаміну В12, сприяє асиміляції Феруму, Купруму та Цинку.

Таблиця 3

Вміст вітаміну В₁₂ у сироватці крові поросят (Mm, n=6)

Примітка: *- р < 0,05, **- р < 0,01

Вплив препарату Полімет-В₁₂ на ріст поросят і якість отриманої продукції. Досліди на поросятах-сисунах проводили в господарствах Київської області за вищезгаданою схемою. За час проведення експерименту відхилень клінічних показників від норми не спостерігали. Не виявляли підвищення температури в місцях уведення препарату. Встановлено, що застосування Полімет-В₁₂ дозволило підвищити збереженість поголів'я на 8,2% та середньодобові прирости маси тіла на 16,5% (р0,01).

Під час вивчення забійних якостей та проведення ветеринарно-санітарної оцінки м'ясної продукції встановлено, що розвиток внутрішніх органів і тканин у дослідних свиней проходив пропорційно. М'ясо тварин досліджували за низкою біохімічних показників, зокрема, проводили реакцію на пероксидазу, визначали pH, концентрацію аміно-аміачного азоту, вологоємність, визначали біологічну цінність та радіоактивність печінки. Було встановлено що якість отриманої свинини свідчить про її високі технологічні та кулінарні властивості.

Дослідами з використанням інфузорії Tetrachymena pyriformis підтверджено високу біологічну цінність свинини, отриманої від тварин, яким уводили Полімет-В₁₂. Слід зазначити, що зразки м'яса, отримані від тварин дослідної групи, протягом 8 діб добре зберігалися при t⁰ +2 +4⁰С.

Таким чином, нашими дослідженнями встановлено, що застосування комплексного препарату Полімет-В₁₂ активує еритропоез, інтенсифікує анаболічні процеси, що сприяє інтенсивному росту м'язової тканини і забезпечує збільшення приросту маси тіла, не знижуючи якості отриманої продукції та підвищує збереженість

Гістологічний контроль та морфофункціональна характеристика селезінки у поросят за корекції гемопоезу антианемічним мінерально-вітамінним препаратом Полімет В_12. Розробка, виробництво і контроль якості нових біологічно активних препаратів, їх впровадження у практику є складним технологічним процесом. Це зумовлено необхідністю створення безпеки для працюючого персоналу, тварин, яким уводять препарат, та довкілля. Крім того, препарат має бути біобезпечним, ефективним, якісним за показниками, що закладені в стандартах. Розробка, виготовлення та впровадження у виробництво ветеринарних препаратів мають бути єдиним процесом, що контролюється на всіх стадіях.

З цією метою проводили вивчення щодо визначення морфофункціонального стану селезінки у поросят-сисунів після парентерального застосування комплексного антианемічного мінерально-вітамінного препарау Полімет-В12. шляхом дослідження гістоструктури селезінки 10-добових поросят, яка є найбільш анатомічно сформованим компактним органом гемопоезу. Визначали рівень розвитку сполучнотканинної строми та диференціювання паренхіми органа на червону і білу пульпи з характерною для кожної з них структурою ретикулярного остова. Після введення антианемічного мінерально-вітамінного препарату Полімет В12, слід відзначити, що у тварин зберігається загальний принцип архітектоніки ретикулярного остова червоної пульпи, яка займає більшу частину поверхні селезінки. Строму паренхіми формує сітка ретикулінових волокон. Спостерігаються ділянки, де волокна не мають певної орієнтації. Отже у структурі селезінки має місце варіабельність тканинних структур. У поросят 20-денного віку відмічали структурно-функціональну перебудову, яка стосується більш інтенсивного розвитку паренхіми та строми. Капсула селезінки потовщується поряд з незначним зменшенням кількості трабекул. Також стають товщими ретикулярні волокна, які формують аргірофільний остов. Таким чином, морфологічні дослідження дали змогу оцінити стан організму та одержати інформацію про характер біологічної дії мінерально-вітамінного препарату Полімет В12 за корекції ним гемопоезу у поросят постнатального періоду онтогенезу. Проведені дослідження із застосуванням різних підходів та методів вказують передусім на відсутність малопомітних ознак дегенеративних змін структури селезінки при дії препарату на клітинному та тканинному рівнях, що є надзвичайно важливим при встановленні токсичності, нешкідливості та біобезпеки зазначеного лікарського засобу.

Виробниче випробування та апробація антианемічних препаратів Вітамет та Полімет-В₁₂. В умовах свинокомплексу АТЗТ “Агро-Союз” Сінельніківського району Дніпропетровської області проведено виробничу апробацію застосування препаратів Полімет-В₁₂ (ТУ У 24.4.00493712.005-2003) та Вітамет, (ТУ У 24.4.00493712.007-2003) та порiвняння його ефективності з препаратом Суїферон, який використовують у господарстві.

11. Підвищення відсоткового вмісту 22:5 (щ-3), 22:6 (щ-3) в мембранах еритроцитів 1-ї групи тварин є фактором захисту від пероксидного ушкодження мембранних фосфоліпідів, оскільки жирні кислоти щ-3 ряду є недосконалим субстратом для цикло- та ліпоксигеназ. Дисбаланс жирних кислот в еритроцитах крові телят, яким уводили монокомпонентний ферумдекстрановий препарат Урсоферан, характеризується збільшенням кількості насичених жирних кислот, а також підвищенням вмісту поліненасичених жирних кислот (арахідонової та докозагексаєнової). Використання мінерально-вітамінного препарату Вітамет оптимізує рівень жирних кислот.

12. Встановлено, що інтенсифікація процесів ПОЛ у мембранах еритроцитів за введення Урсоферану супроводжується появленням в їхній структурі лізоформ фосфоліпідів, альдегідів, кетонів, які пошкоджують структуру ліпідного бішару і потенціюють збільшення проникності й плинності мембран, внаслідок чого відбувається адаптивна перебудова структури ліпідного бішару мембран.

13. Після уведення комплексного органічно-мінерального препарату Вітамет у жирнокислотному складі ліпідів еритроцитів спостерігається нормалізація показників насамперед за рахунок зміни рівня пальмітинової, арахідонової, стеаринової, ейкоза -та докозаполієнових жирних кислот. Відсутність компенсаторного накопичення докозаполієнових жирних кислот у клітинних мембранах еритроцитів тварин дослідної групи є важливим чинником сприятливого впливу уведеного препарату, а також обґрунтуванням необхідності призначення тваринам комплексних препаратів, що здатні оптимізувати склад жирних кислот у мембранах клітин.

14. Проведеними дослідженнями встановлено, що зміна режиму оксигенації у новонароджених тварин потребує фармакотерапевтичної корекції специфічними препаратами, які підвищують адаптаційні можливості організму. Таку дію справляють створені комбіновані профілактично-лікувальні засоби, що містять комплекс мікроелементів і вітамінів для регуляції гомеостазу новонароджених сільськогосподарських тварин при сучасних прогресивних технологіях ведення тваринництва.

15. Жива маса поросят, яким уводили Полімет- В₁₂ і Вітамет, на 60-й день життя була вищою (р<0,01), порівняно з групами поросят, яким уводили Урсоферан, Суїферон та Ферибіон. Збереженість поросят при застосуванні Полімет- В₁₂ становила 91,2%, Вітамету - 95,3, Урсоферану - 88,2, Ферибіону - 90,4, Суїферону - 83,4%. При застосуванні антианемічних препаратів Полімет-В₁₂ та Вітамет, за даними навчально-дослідного господарства Празького аграрного університету, економічна ефективність складає відповідно 2490 та 3200 євро на 1000 голів поросят.

16. На створені препарати отримано Нормативно-технічну документацію (ТУ У, ДСТУ), настанови щодо їх застосування. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Державному департаменті ветеринарної медицини, фармкомісії Державного комітету ветеринарної медицини МАП України, Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок Міністерства аграрної політики України, у ТК 132 Держспоживстандарту України, в Українському державному підприємстві стандартизації, сертифікації, метрології та захисту прав споживачів (Укрметртестстандарт) Держспоживстандарту України .

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ

Профілактика мікроелементозів у молодняку сільськогосподарських тварин у критичний постнатальний період онтогенезу досягається парентеральним та пероральним уведення їм створених в НДІ екології та біотехнології у тваринництві МАП України мінерально-вітамінних антианемічних препаратів Полімет-В₁₂ та Вітамет, які запобігають виникненню анемії, забезпечують збільшення приростів живої маси та підвищення збереженості поголів'я тварин, що знижує собівартість продукції тваринництва та підвищує рентабельність галузі і її конкурентоспроможність.

Пропозиції виробництву викладені у наступних рекомендаціях: “Методичні рекомендації щодо застосування антианемічних препаратів для профілактики та лікування мікроелементозів сільськогосподарських тварин у постнатальному періоді онтогенезу”, “Методичні рекомендації щодо застосування антианемічного препарату Вітамет для профілактики та лікування аліментарної анемії молодняку сільськогосподарських тварин” і “Методичні рекомендації щодо застосування антианемічних препаратів для корекції адаптивних систем організму поросят”, які затверджені науково-методичною радою Державного департаменту ветеринарної медицини Міністерства аграрн політики України (протокол №14 від 23.12.2004, п. 1,3,4).

На підставі експериментальних даних та виробничих апробацій розроблено та затверджено пакети нормативно-технічної документації:

1. Полімет-В₁₂ - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.005-2003. ОКП. 933730. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу у Державному департаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок Міністерства аграрної політики України, зареєстрований у Всеукраїнському державному науково-виробничому центрі стандартизації, метрології, сертифікації та захисту прав споживачів (Укрметртестстандарт) Держспоживстандарту України 10.07.2003. № 081/027788.

2. Настанова до застосування Полімет-В₁₂. Розглянута та схвалена Вченою радою ДНДКІВПКД (протокол № 2 від 12.02.2003 р.). Затверджено Головою Державного департаменту ветеринарної медицини Міністерства аграрної політики України 04.03.03 № 15-14/130.

3. Вітамет - Технічні умови України (ТУ У) 24.4.00493712.007-2003. ОКП. 933730. Нормативно-технічна документація пройшла експертизу в Державному департаменті ветеринарної медицини і Державному науково-дослідному контрольному інституті ветеринарних препаратів та кормових добавок Міністерства аграрної політики України, Всеукраїнському державному науково-виробничому центрі стандартизації, метрології, сертифікації та захисту прав споживачів (Укрметртестстандарт) Держспоживстандарту України 02.08.2004. № 081/029120.

4. Настанова до застосування Вітамету. Розглянута та схвалена Вченою радою ДНДКІВПКД (протокол №11 від 25.11.2003 р.). Затверджено Головою Державного департаменту ветеринарної медицини Міністерства аграрної політики України 14.10.03 № 15-14/462.

5. Національний стандарт України. Ветеринарія. Препарати для профілактики та лікування анемічного стану поросят-сисунів. Технічні умови. ДСТУ 4919:2008. Прийнято та надано чинності: наказ Держспоживстандарту України від 22 січня 2008 р. № 18 з 2009-07-01; Київ, Дерджспоживстандарт України, 2008.Уведено вперше.

6. Національний стандарт України. Ветеринарія. Препарати для зменшення негативних наслідків під час відлучення поросят від свиноматок. Технічні умови. ДСТУ 4916:2008. Прийнято та надано чинності: наказ Держспоживстандарту України від 22 січня 2008 р. № 18 з 2009-07-01; Київ, Держспоживстандарт України, 2008. Уведено вперше.

7. Національний стандарт України. Ветеринарія. Препарати комплексні адаптогенні для молодняку свиней на відгодівлі. Технічні умови. ДСТУ 4917:2008. Прийнято та надано чинності: наказ Держспоживстандарту України від 22 січня 2008 р. № 18 з 2009-07-01; Київ, Держспоживстандарт України, 2008. Уведено вперше.

8. Національний стандарт України. Ветеринарія. Препарати антиоксидантно-вітамінні для супоросних свиноматок. Технічні умови. ДСТУ 4918:2008. Прийнято та надано чинності: наказ Держспоживстандарту України від 22 січня 2008 р. № 18 з 2009-07-01; Київ, Держспоживстандарт України, 2008. Уведено вперше.

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ ПРАЦЬ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

Статті у наукових фахових виданнях

1. Мельниченко О.М. Біохімічні основи конструювання металоорганічних препаратів спрямованої дії / О.М. Мельниченко, В.Г. Герасименко // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 1997. - Вип. 3,ч.1. - С.257-260. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

2. Герасименко В.Г. Ефективні методи оцінки якості біотехнологічно синтезованих макромолекулярних металоорганічних сполук / В.Г. Герасименко, О.М. Мельниченко, В.С. Бітюцький // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 1998. - Вип.4,ч.2. - С. 201-204. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, особисто провів ряд досліджень, підготував роботу до друку).

3. Мельниченко А.Н. Изучение влияния металлоорганических препаратов меди и железа на морфологический состав и гематологические показатели крови поросят-сосунов / А.Н. Мельниченко, В.Г. Герасименко, В.С. Битюцкий // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 1998. - Вип. 6,ч.2. - С. 48-52. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготував матеріал до публікації).

4. Мельниченко О.М. Вивчення впливу металоорганічних препаратів міді та заліза на деякі біохімічні показники поросят-сисунів / О.М. Мельниченко, В.Г Герасименко, В.С. Бітюцький // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 1999.- Вип.9,ч.2.-С.227-231.(Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

5. Герасименко В.Г. Фізико-хімічні основи конструювання металоорганічних сполук / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту, - Біла Церква, 2000. - Вип. 11. - С. 149-152. (Дисертант розробив схему та особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

6. Ферокол - новий вітчизняний високоефективний препарат для профілактики та лікування аліментарних анемій / [Герасименко В.Г., Мельниченко О.М., Бітюцький В.С., Веред П.І.] // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 2000. - Вип. 14. - С. 105-109. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

7. Вивчення ефективності застосування Біомету - нового залізомідькобальтумісного препарату для профілактики та лікування аліментарних анемій / [Герасименко В.Г., Мельниченко О.М., Бітюцький В.С., Веред П.І.] // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 2001. - Вип.19. - С.134-140. (Дисертант розробив схему і особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

8. Герасименко В.Г. Використання мембранних технологій для одержання біологічно активних речовин / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 2001.- Вип.17. - С. 147-151. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, підготував роботу до друку).

9. Мельниченко О.М. Апробація і токсикологічний контроль біотехнологічного антианемічного препарату Біомет / О.М. Мельниченко // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 2002. - Вип.24. - С.27-30.

10. Герасименко В.Г. Апробація нових комплексних антианемічних препаратів в умовах навчально-дослідного господарства Празького аграрного університету / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Ветеринарна медицина: відом. темат. наук. зб. - Вип. 82. - Харків, 2003. - С. 150-152. (Дисертант розробив схему та особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

11. Веред П.І. Ефективність застосування металовмісних препаратів Ферокол вітчизняного виробництва і Ферибіон чеського виробництва / П.І. Веред, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Науковий вісник Львів. нац. академії вет. медицини імені С.З. Гжицького. - Львів, 2003. - Т. 5, № 2, ч. 3. - С. 27-30. ( Дисертант брав участь у плануванні та проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

12. Веред П.І. Вплив різних антианемічних препаратів на гематологічні показники у поросят / П.І. Веред, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 2003.- Вип.27. - С. 28-34.

( Дисертант брав участь у плануванні та проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

13. Герасименко В.Г. Ефективність застосування комплексних антианемічних препаратів широкого спектра дії / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Аграрні вісті. - 2003.- № 2. - С. 8-10. (Дисертант розробив схему та особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

14. Розробка технології одержання і використання металокомплексних препаратів для зменшення антропогенного навантаження на навколишнє середовище / [Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М., Веред П.І. ] //Науковий вісник Нац. аграр. ун-ту. - К.,2004. - №73,ч.1.-С.44-47. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

15. Герасименко В.Г. Біотехнологія розробки та застосування профілактично-лікувальних антианемічних препаратів / В.Г. Герасименко, В.С Бітюцький, О.М. Мельниченко // Ветеринарна медицина. - 2004. - № 84. - С. 200-202. (Дисертант розробив схему та особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

16. Мельниченко О.М. Застосування ультрафільтрації як ефективного способу концентрації і очищення сполук у біотехнологічному процесі отримання антианемічних препаратів / О.М. Мельниченко //Аграрні вісті. - 2004. - № 3. - С. 26-28.

17. Обмін заліза у поросят при використанні антианемічних препаратів вітчизняного та закордонного виробництва / [Веред П.І., Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Мельниченко О.М.] // Зб. наук. праць Вінниц. держ. аграр. ун-ту.-Вінниця, 2005. - С. 155-160. (Дисертант брав участь в експериментальних дослідженнях, аналізі одержаних результатів, підготовці матеріалів до публікації).

18. Герасименко В.Г. Біохімічні показники крові поросят-сисунів при використанні комплексних антианемічних препаратів / В.Г.Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Ветеринарна медицина: відом. темат. наук. зб. - Харків, 2005. - Вип. 85.- С. 272-276. (Дисертант розробив схему та особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

19. Мельниченко О.М. Полімет-В₁₂: біотехнологічні аспекти розробки та порівняльна характеристика застосування вітчизняного антианемічного препарату / Мельниченко О.М. // Науково-техн. бюл. Інституту біології тварин. - Львів, 2005. - Вип. 6, № 3 - 4. - С.269 - 271.

20. Герасименко В.Г. Використання сучасних біотехнологій для одержання вітчизняних комплексних антианемічних препаратів та ефективності застосування їх у свинарстві / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Ветеринарна біотехнологія. - 2006. - № 9. - С.47-53. (Дисертант брав участь у плануванні і проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

21. Мельниченко О.М. Токсикологічний контроль антианемічних препаратів /О.М. Мельниченко, В.С. Бітюцький // Вісник Держ. агроеколог. ун-ту.- Житомир, 2007. - Т.1, № 2 (19). - С. 10 - 13. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, особисто провів дослідження, підготував роботу до друку).

22. Мельниченко О.М. Визначення параметрів гострої токсичності залізовмісних препаратів Полімет-В₁₂ та Вітамет на білих щурах із застосуванням різних методів обчислення / О.М. Мельниченко, О.Л. Тішин, І.П. Патерега // Науково-техн. бюл. Інституту біології тварин. - Львів, 2007. - Вип. 8, № 3-4. - С. 380 - 390. (Дисертант розробив схему та особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку).

23. Мельниченко О.М. Вивчення показників обміну Феруму сироватки крові поросят-сисунів при застосуванні антианемічних препаратів / О.М. Мельниченко, В.С. Бітюцький, В.Г. Герасименко //Аграрні вісті. - 2007.- № 3 - 4. - С. 26-28. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, особисто провів дослідження, підготував роботу до друку).

24. Мельниченко О.М. Результати експериментальних досліджень щодо застосування препарату Вітамет з метою підвищення біобезпеки та якості виробництва продукції тваринництва / О.М. Мельниченко // Зб. наук. праць Вінниц. держ. аграр. ун-ту. - Вінниця, 2008. - Вип. 34, т.1. - С. 155-160.

25. Мельниченко О.М. Морфофункціональна характеристика селезінки у поросят постнатального періоду онтогенезу за корекції гемопоезу антианемічним мінерально-вітамінним препаратом Полімет-В₁₂ / О.М. Мельниченко // Вісник Держ. агроеколог. ун-ту. - Житомир, 2008. - Т. 1(21). - С. 144-149.

26. Герасименко В.Г. Інноваційні проекти: розробка нових антианемічних препаратів для ринку України / В.Г.Герасименко, О.М. Мельниченко, В.С. Бітюцький //Науковий вісник Львів. нац. ун-ту вет. медицини та біотехнології ім. С.З. Гжицького. - Львів, 2008. - Т.10, № 2(37), ч.1. - С. 40-43. (Дисертант брав участь у плануванні та проведенні експерименту, підготував роботу до друку).

27. Мельниченко О.М. Жирнокислотний склад еритроцитів телят при ентеральному застосуванні антианемічних препаратів / О.М. Мельниченко, В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький // Вісник Сумського нац. аграр. ун-ту. - Суми, 2008. - № 9/2(22). - С. 43-46. (Дисертант розробив схему та особисто провів ряд досліджень, узагальнив результати, оформив роботу до друку ).

28. Вивчення електронних та коливальних спектрів поглинання металохелатних комплексів / [Мельниченко О.М., Герасименко В.Г., Бітюцький В.С., Соболева Н.В.] //Аграрні вісті. - 2008. - № 2-3.-С. 34-36. (Дисертант теоретично обгрунтував концепцію, провів дослідження, підготував роботу до друку).

29. Мельниченко О.М. Дослідження гострої токсичності антианемічних мінерально-вітамінних препаратів / О.М. Мельниченко // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Біла Церква, 2008. - Вип. 53. - С. 94-98.

30. Мельниченко О.М. Вивчення морфологічних та біохімічних показників крові білих щурів під час застосування мінерально-вітамінного препарату Полімет - В₁₂ / О.М. Мельниченко // Аграрні вісті. - 2008. -№ 4. -С. 29-31.

Патенти

31. Пат. 68862, 7 А61 КЗЗ/26. ІІА. Спосіб профілактики та лікування анемії новонароджених поросят / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко, П.І. Веред, В.М. Оксамитний. - № 2003110200; заявл. 12.11.03; опубл. 16.08.04, Бюл.№8. (Дисертант провів дослідження, підготував заявку на патент).

32. Пат. 6101 А, 7 А 61КЗЗ/26. ІІА. Комплексний мінерально-вітамінний препарат для профілактики мікроелементозів новонароджених поросят /В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко. - № 20040907693; заявл. 22.09.04; опубл. 15.04.05, Бюл. № 4. (Дисертант провів патентний пошук, підготував заявку на патент).

33. Пат. 6102 А, 7 А 61КЗЗ/26. ІІА. Препарат Полімет-В₁₂ для профілактики та лікування анемії новонароджених поросят /В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, М.О. Герасименко. - № 20040907694; заявл. 22.09.04; опубл. 15.04.05, Бюл. № 4. (Дисертант обгрунтував концепцію, узагальнив результати, підготував заявку на патент).

34. Пат. 01300 UА, МПК А61К33/26. Спосіб стабілізації біологічно активних речовин / В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко, І.А. Псуйко, Н.В. Соболева. - № 20040907989; заявл. 9.02.06; опубл. 14.10.06, Бюл. № 8. (Дисертант особисто провів дослідження, брав участь у проведенні експерименту, підготував заявку на патент).

Тези конференцій і симпозіумів

35. Герасименко В.Г. Конструирование новых ветеринарных препаратов металлов-биотиков парентерального назначения /В.Г.Герасименко, В.С. Битюцкий, А.Н. Мельниченко // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Материалы 13-й междунар. конф. (Санкт-Петербург, 22-24 мая 2001г.). - Санкт-Петербург, 2001. - С.26-27.

36. Бітюцький В.С. Сучасні методи профілактики та лікування анемії поросят-сисунів / В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // Ветеринарія: матеріали VІІ-ї міжнар. наук.-практ. конф. [“Наука і освіта“], (Дніпропетровськ, 10-25 лют. 2004 р.) - Дніпропетровськ, 2004. - С. 3-4.

37. Technology of constructing membrane device of module type for lowmolecular connections ultrafiltrating /[ V.G. Gerassimenko, V.S. Bitutskiy, A.N. Melnichenko, P.I. Vered ] // VII International Conference of Young Scientists / TF, CUA. - Prague, 2005. - P. 42-44.

38. Герасименко В.Г. Розробка вимог екологічної безпеки для виробництва комплексних антианемічних препаратів/ В.Г. Герасименко, В.С. Бітюцький, О.М. Мельниченко // ECOLOGY-2006: матеріали Першого Всеукр. з'їзду екологів. - Вінниця, 2006 - С.12.

39. Розробка технології отримання вітчизняних комплексних антианемічних препаратів та налагодження їх пілотного виробництва й використання у тваринництві [Герасименко В.Г., Мельниченко О.М., Герасименко М.О., Веред П.І.] // Тези доповідей 5-ї держ. наук.-практ. конф. - Біла Церква, 2006. - Ч.1. - С. 120.

40. Мельниченко О.М. Розробка біотехнології одержання комплексних металоорганічних препаратів для потреб тваринництва та ветеринарної медицини /Мельниченко О.М., Герасименко В.Г.// Тези доповідей IV міжнар. наук.-практ. конф. [“Біотехнологія. Наука. Освіта. Практика”]. - Дніпропетровськ, 2008. - С. 133-134.

Державні національні стандарти (ДСТУ)

41. Ветеринарія. Препарати для профілактики та лікування анемічного стану поросят-сисунів. Технічні умови: ДСТУ 4919:2008. / В.С. Бітюцький, В.Г. Герасименко, М.О. Герасименко, О.М. Мельниченко. - [Чинний від 2009-07-01]. Уведено вперше. - К.: Держспоживстандарт України, 2008. - 9 с. - (Національний стандарт України). (Дисертант брав участь у написанні, оформленні, затвердженні документів).

42. Ветеринарія. Препарати для зменшення негативних наслідків під час відлучення поросят від свиноматок. Технічні умови: ДСТУ 4916:2008. / В.С. Бітюцький, В.Г. Герасименко, М.О. Герасименко, О.М. Мельниченко. - [Чинний від 2009-07-01]. Уведено вперше. - К.: Держспоживстандарт України, 2008. - 9 с. - (Національний стандарт України). (Дисертант брав участь у написанні та затвердженні документів).