Трихофітія великої рогатої худоби (етіологічна структура, діагностика, селекція штамів та розробка бівалентної вакцини)

26. Скрипник В.Г., Головко А.М., Ушкалов В.О., Скрипник А.В. Застосування штаму гриба Trichophyton verrucosum для контролювання імуногенності вакцин проти дерматомікозів тварин // Патент на корисну модель № 23493; заявлено 18.01.2007; опубл. 25.05.2007. - Бюл. № 7. - 4 с. - (дисертант провів експериментальні дослідження і оформив заявку на патент).

27. Скрипник В.Г., Головко А.М., Ушкалов В.О., Скрипник А.В. Застосування штаму гриба Trichophyton mentagrophytes для виготовлення вакцин проти дерматомікозів тварин // Патент на корисну модель № 23491; заявлено 18.01.2007; опубл. 25.05.2007. - Бюл. № 7. - 4 с. (дисертант здійснив експериментальні дослідження і оформив заявку на патент).

28. Скрипник В.Г., Головко А.М., Ушкалов В.О., Скрипник А.В. Застосування штаму гриба Trichophyton mentagrophytes для контролювання імуногенності вакцин проти дерматомікозів тварин // Патент на корисну модель № 23492; заявлено 18.01.2007; опубл. 25.05.2007. - Бюл. № 7. - 6 с. - (дисертант здійснив експериментальні дослідження і оформив заявку на патент).

29. Скрипник В.Г., Головко А.М., Ушкалов В.О., Скрипник А.В. Спосіб виготовлення вакцини проти трихофітії великої рогатої худоби бівалентної, живої, сухої, концентрованої // Патент України № 25296; заявлено 27.12.2006; опубл. 10.08.2007. - Бюл. № 12. - 6 с. (дисертант здійснив експериментальні дослідження і оформив заявку на патент).

30. Актуальні питання діагностики дерматомікозів / В.Г. Скрипник, А.М. Головко, М.В. Волков, В.М. Яненко // Матеріали ІІ Міжнародного конгресу спеціалістів ветеринарної медицини (3-4 серпня 2004 р., м. Київ, Україна). - К., 2004. - C. 36-37.

31. Скрыпник В.Г. Способ длительного хранения коллекций штаммов дерматофитов // Матер. Международной науч. -практ. конфер. "Актуальные проблемы ветеринарной медицины в условиях современного животноводства". - Минск, 2005. - Науч. труды. - Вып. 38. - С. 478-482.

32. Скрипник В.Г. Стабільність вакцини проти дерматомікозів при зберіганні // Міжнародна наукова конференція "Мікробні біотехнології". Тези доповідей. - Одеса: "Астропринт", 2006. - С. 154.

33. Скрипник В.Г. Вдосконалення засобів захисту тварин - вимога часу // IV Міжнародний конгрес спеціалістів ветеринарної медицини 3-6 жовтня 2006 р. - Київ, Україна. - С. 92-93.

34. Скрыпник В.Г., Ушкалов В.А., Романько М.Е. Некоторые аспекты стандартизации противогрибковых вакцин // Материалы Пятого всероссийского конгресса по мед. микологии "Успехи медицинской микологии". - Москва, 2007. - Т. IX. - С. 326-328.

АНОТАЦІЇ

Скрипник В.Г. Трихофітія великої рогатої худоби (етіологічна структура, діагностика, селекція штамів та розробка бівалентної вакцини). - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.03 - ветеринарна мікробіологія та вірусологія. ННЦ "Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини", Харків, 2007.

Дисертацію присвячено вивченню етіологічної структури, біологічних особливостей збудників та розробці засобу профілактики й терапії трихофітії великої рогатої худоби. Здійснено вивчення епізоотичної ситуації щодо трихофітії ВРХ в Україні за 1996-2006 роки, визначено етіологічну структуру захворювання. Удосконалено лабораторну діагностику дерматомікозів тварин, що дало змогу на 37 % підвищити ефективність виділення культур трихофітонів і скоротити час виділення T. verrucosum удвічі. Запропоновано спосіб довготривалого зберігання культур грибів дерматофітів, який дає змогу підвищити кількість життєздатних мікроконідій на 6-8 %, збільшити енергію росту та забезпечує життєздатність культур дерматофітів протягом 2 років в умовах зберігання за кімнатної температури.

Вивчено культурально-морфологічні та біологічні властивості виділених збудників трихофітії та шляхом цілеспрямованої селекції підібрані виробничі вакцинні й контрольні вірулентні штами трихофітонів, розроблено середовища для їх культивування та ліофілізації. Розроблене захисне середовище, що містить макро- і мікроелементи, пептон, сахарозу і желатину забезпечує збереженість мікроконідій до 90 % і дозволяє отримувати високоякісну вакцину. Розроблено спосіб виготовлення вакцини проти трихофітії великої рогатої худоби бівалентної, живої, сухої, концентрованої та вивчено нешкідливість, імуногенну й терапевтичну активність даного препарату в експериментах на лабораторних і продуктивних тваринах, а також в умовах виробництва на продуктивних тваринах. Застосування препарату індукує формування напруженого імунітету у 80-100 % тварин за 100 % захворювання контрольних тварин і не спричиняє ускладнень та імуносупресивної дії. Вакцина має лікувальні властивості за трихофітії великої рогатої худоби, що дозволяє у 78-100 % випадків упродовж 3-6 тижнів (залежно від тяжкості перебігу) виліковувати тварин.

Ключові слова: трихофітія, трихофітони, гриби дерматофіти, штами, вакцина, специфічна профілактика, терапевтична дія, імунітет.

Скрыпник В.Г. Трихофития крупного рогатого скота (этиологическая структура, диагностика, селекция штаммов и разработка бивалентной вакцины). - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук по специальности 16.00.03 - ветеринарная микробиология и вирусология. ННЦ "Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины", Харьков, 2007.

Диссертация посвящена изучению этиологической структуры, биологических особенностей возбудителя и разработке средств профилактики и терапии трихофитии крупного рогатого скота. Проведено изучение эпизоотической ситуации по трихофитии КРС в Украине за 1996-2006 годы, изучена этиологическая структура этого заболевания. Установлено, что трихофития крупного рогатого скота в Украине вызывается двумя возбудителями - Trichophyton verrucosum и Trichophyton mentagrophytes. При этом T. verrucosum вызывал заболевание в 75,9 % случаев, T. mentagrophytes - в 13,8 %, и их ассоциация - в 10,3 % случаев.

Определено, что заболевание проявляется как энзоотия на молочно-товарных фермах и фермах по откорму животных всех форм собственности.

В обследованных хозяйствах клинические признаки заболевания регистрировались практически круглый год, но наиболее интенсивно заболевание регистрировалось у животных в зимне-весенний период, особенно в феврале-апреле. Заболевание регистрировали преимущественно у телят возрастом 2-6 месяцев (84,0 %). Наименьшее количество животных заболевало в возрасте до двух месяцев и старше 2-х лет. Обнаружено, что клинические признаки заболевания трихофитией у крупного рогатого скота возникали и у животных, привитых живыми вакцинами ЛТФ-130 и "Триховак" в рекомендованных дозах.

При изучении клинических признаков заболевания трихофитией крупного рогатого скота выявлено дессиминированную, пятнистую и атипичную формы заболевания. Наиболее распространенной была пятнистая форма - 69,9 % от количества больных животных. Дессиминированная форма трихофитии регистрировалась в 17,7 % случаев. У взрослых животных (2,7 %), а также у значительного количества телят (10 %) выявляли признаки заболевания, характерные для атипичной формы течения заболевания.

Проведено усовершенствование лабораторной диагностики дерматомикозов животных, что позволило на 37 % повысить эффективность выделения культур трихофитонов и сократить время выделения T. verrucosum в два раза. Разработан способ длительного сохранения культур грибов дерматофитов, который дает возможность повысить количество жизнеспособных микроконидий на 6-8 %, повышает энергию роста культур и обеспечивает жизнеспособность культур дерматофитов на протяжении 2 лет при хранении их в комнатных условиях.

Изучены культурально-морфологические и биологические свойства выделенных культур возбудителей трихофитии. Установлено, что большинство культур T. verrucosum отличались от классически описанных форм скоростью роста (прорастали на 5-7 сутки) и формой роста (имели воздушно-субстратный мицелий). И только незначительное количество культур отвечали классическому образцу, были длительно растущими (рост появлялся на 10 день и позже) и имели кожистые колонии, глубоко врастающие в агар. Путем целенаправленной селекции подобраны производственные вакцинные и контрольные вирулентные штаммы трихофитонов.

Использование для выращивания грибов модифицированной питательной среды позволило сократить сроки выращивания культур на 3-5 дней при более интенсивном спороношении. Так, рост колоний T. verrucosum появлялся на 2 дня раньше, чем на общепринятой среде сусло-агар. Образование микроконидий на культуре гриба зарегистрировано на 3 дня раньше, чем на сусло-агаре. Количество микроконидий через 2 недели культивирования на модифицированной среде было на 21,8 % больше, чем на сусло-агаре. Использование при лиофилизации защитной среды, имеющей в своем составе макро- и микроэлементы, пептон, сахарозу и желатин, обеспечивает сохранность микроконидий до 90 % и позволяет получать вакцину высокого качества. Разработан спрособ изготовления вакцины против трихофитии крупного рогатого скота бивалентной, живой, сухой, концентрированной. В опытах на лабораторных и продуктивных животных изучена ее безвредность, иммуногенная и терапевтическая активность. Использование данного препарата вызывает формирование напряженого иммунитета в 80-100 % лабораторных животных и 95-100 % у крупного рогатого скота при 100 % заболевании контрольных животных. Вакцина вызывает накопление агглютининов до 8,49±0,97 lоg₂, увеличение количества иммуноглобулинов на 13-20 %, возрастание ЦИК на 17 % и активности лизоцима на 34 % по сравнению с контролем. При этом препарат не обладает иммуносупрессивным действием и не вызывает осложнений.

Лечебные свойства вакцины при трихофитии крупного рогатого скота, позволяют в 78-100 % случав на протяжении 3-6 недель (в зависимости от тяжести клинических проявлений) вылечивать животных.

Ключевые слова: трихофития, трихофитоны, грибы дерматофиты, штаммы, вакцина, специфическая профилактика, терапевтический эффект, иммунитет.

Skrypnyk V.G. Bovine ringworm (etiological structure, diagnostics, strain selection, development of bivalent vaccine). - Manuscript.

Thesis for scientific degree of the Doctor of Veterinary Sciences, specialty 16.00.03 - Veterinary Microbiology and Virology. National Scientific Center "Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine", Kharkiv, 2007.

The thesis is devoted to studying the etiology, biological characteristics of cattle ringworm infection agent and developing of the tool for its prophylaxis and therapy.

Epizootic situation on cattle ringworm in Ukraine in 1996-2006 was studied; the etiology of the disease was identified. The laboratory diagnostics of animal dermatomycosis was improved, which enabled the increase of the trychophyton culture isolation effectiveness on 37 % and the time of T. verrucosum isolation was also shortened in two times. The method for long-term storage of dermatophyte fungus culture was offered, which enabled the increase of the amount of viable microconidia on 6-8 %, the increase of the growth energy and assure the dermatophyte culture viability during 2-3 years at room temperature storage.

The cultural-morphological and biological properties of the isolated trychophytons were studied. By means of teleological selection the industrial and control strains of the trychophytons, media for their cultivation along with lyophilization were selected. Developed protective medium which contains macro- and microelements, peptone, saccharose and gelatin assures preservation of microconidia to 90 % and allows to derive the vaccine of high quality.

The method of production of the concentrated alive dry bivalent vaccine against cattle ringworm was developed. The harmlessness, immunogenic and therapeutical activity of this vaccine were studied not only in the experiments on laboratory and productive animals and also in the natural conditions on productive animals. Vaccine application induces forming of the expressed immunity in 80-100 % vaccinated animals while 100 % control animals shown clinically manifested disease. In the same time vaccine causes neither complications nor immunosupression activity. The vaccine has therapeutical properties that allow to heal animals from cattle ringworm in 80-100 % cases during 3-6 weeks (depends on the severity of the clinical manifestations)

Key words: trichophytosis, trichophytons, dermatophyte fungi, strains, vaccine, specific prophylaxis, immunity, therapeutical activity.

Размещено на Allbest.ru