Главная Коллекция "Revolution" Сельское, лесное хозяйство и землепользование Продуктивность норок стандартной породы при использовании комплексного иммунного модулятора

Продуктивность норок стандартной породы при использовании комплексного иммунного модулятора

Использование иммуномодулирующих и биологически активных препаратов в пушном звероводстве. Технология приготовления комплексного иммунного модулятора. Влияние комплексного иммунного модулятора на развитие и сохранность молодняка норок в подсосный период.

Рубрика	Сельское, лесное хозяйство и землепользование
Вид	диссертация
Язык	русский
Дата добавления	06.07.2017
Размер файла	261,4 K

посмотреть текст работы

скачать работу можно здесь

полная информация о работе

весь список подобных работ

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Страница:

Ряд авторов для профилактики возникновения осложнений во время беременности и родов и отхода молодняка рекомендуют применять препараты, которые непосредственно оказывают влияние на уровень неспецифической резистентности норок.

Как показали исследования А.Б. Полежаева и А.В. Комарова (1997), однократное внутрибрюшинное введение препарата «Биоадаптоген» в первую треть беременности норкам достоверно повышает плодовитость и способствует хорошей выживаемости щенков, причем наиболее эффективными оказались аффиногенно-очищенные антитела, которые вводили в дозе 1 мг/кг массы тела.

По сообщению Н.Т. Рассказовой (1998), включение препарата KED в рацион норок в дозе 10 мг/кг живой массы увеличивает плодовитость в 1,2 раза, количество щенков на одну основную самку на 0,9 щенка, повышает молочность, уменьшает процент мертво рождаемости на 0,7 головы.

Повысить биологическую 'полноценность протеина кормов рациона можно за счет добавок синтетических незаменимых аминокислот.

Согласно данным О.В. Растимешиной (1997), при введении в кормосмесь норок кормового концентрата лизина в период воспроизводства в дозе 200 мг, выход молодняка на основную самку повышается на 0,6 щенка, молочность самок - на 20%.

В последние годы учеными (Л.Б. Узенбаева, В.А. Илюха, 1993; М.Е. Ежкова и др., 1997; Е.Г. Карпухин, М.С. Найденский, 1997; О.В. Березина, 2000) проведен ряд научных исследований по изучению влияния янтарной кислоты и препаратов на ее основе на обмен веществ, гемопоэз, воспроизводительную способность пушных зверей.

1.4 Влияние биологически активных веществ на плодовитость норок

Норки наряду с другими представителями отряда хищных, разводимых в неволе на промышленной основе (лисицы, песцы, соболи), обладают рядом биологических особенностей, отличающих их от сельскохозяйственных животных. Эти звери - типичные представители отряда хищных. Как все плотоядные, они могут в продолжение долгих месяцев нормально себя чувствовать, питаясь одними животными кормами.

Знание физиологии зверей дало возможность регулировать наступление половых циклов, определять время наиболее эффективного покрытия самок, изменять сроки созревания пушнины, увеличивать воспроизводство поголовья, улучшить качество продукции звероводства при одновременном снижении себестоимости.

Многие исследователи, рассматривая организм как единую биологическую систему, в которой функционирование всех органов и тканей находятся в динамической взаимосвязи, в своих научных работах отмечают, что процессы, протекающие в органах репродуктивной системы, очень тонко реагируют на изменения метаболического гомеостаза и патологическое состояние последнего, а также снижение функциональной активности печени- органа, имеющего основное значение в обменных процессах, влечет за собой патофизиологические изменения половой системы, которые проявляются снижением плодовитости вплоть до бесплодия.

Пушные звери размножаются в определенные сроки, поэтому производственный год делят на следующие периоды: подготовка к гону, гон, беременность, щенение, выращивание молодняка и период покоя для взрослых зверей. Период подготовки к гону лисиц, песцов и норок довольно продолжительный.

У норок половые клетки созревают один раз в год в течение определенного периода. В период размножения в половых органах самцов и самок происходят резкие изменения: семенники и яичники сильно увеличиваются в объеме, матка и влагалище также увеличиваются, половые клетки самцов - спермии - наполняют придатки семенников, семенники становятся упругими и твердыми.

Изменения наблюдаются и в гормональных показателях крови. Так, по данным О.Н. Савченко и др. (1987), активация андрогенной функции семенников наблюдается в 6-7 месяцев и продолжает увеличиваться до наступления гона в марте (16,08±4,24 нмоль/л). Затем наблюдается небольшое снижение тестостерона в крови (13,02±2,42 нмоль/л) еще в период активного размножения в марте, причем уровень андрогенов в крови остается достаточно высоким. В конце апреля после окончания гона у зверей наступает спад уровня андрогенных гормонов в крови до базальных величин (2,39+0,38 нмоль/л).

Овуляция у норок носит провоцированный характер (R. Enders, 1939, A. Hansson, 1947, Venge,1960) и, кроме коитуса, может быть стимулирована другими факторами, в частности, подсадкой к самцам.

В отношении времени начала, и продолжительности овуляции в литературе имеются противоречивые данные. По данным R. Enders (1939), овуляция у норок наступает в промежутке между 42 и 52 часом, и в яичниках, удаленных через 38 часов после спаривания, имеются только развивающиеся фолликулы.

Это согласуется с наблюдениями A. Hansson (1947), который считает, что фолликулы овулируют через 36,5 часов после покрытия. По данным К.Д. Беляева (1968), овуляция у стандартных норок наступает через 34 часа после коитуса и всегда заканчивается через 40 часов, у мутантных норок она обнаруживается даже через 44 часа после спаривания.

Литературные данные о количестве овулирующих яйцеклеток также противоречивы. По данным A. Hansson (1947), у норок овулирует 8,71 яйцеклетки, по данным М.Д. Абрамова (1960) - 8,0, по R. Enders (1952) - 9,8; по Д.К. Беляеву (1968)-13,16.

По данным Н.Г. Носовой (1977), овуляция у норок зависит от сроков спаривания. При однократном покрытии в начале гона у 10% самок овуляция не обнаружена, при более поздних спариваниях процент не овулирующих зверей снижается до 4,5; в 20,8% случаев у норок отмечена овуляция без акта спаривания, стимулированная подсадкой к самцам.

Беременность - один из самых ответственных периодов. У клеточных норок ее продолжительность варьирует от 40 до 73 суток (М.Д., Абрамов 1974). Удлинение сроков беременности связано с эмбриональной диапаузой, во время которой развитие эмбриона замедленно. Период интенсивного роста плода составляет 30 суток. Что значительно меньше, чем позволяют их потенциальные возможности. Гибель плодов происходит в результате аборта, причинами которого могут быть: скармливание самкам недоброкачественных кормов, травма, испуг и пр. Бывают случаи неоплодотворения самок, причем причины различны: слишком раннее или позднее покрытие, неполноценная сперма самца, аномалии в строении половых органов и гибель зародышей. Самое распространенное явление - гибель части зародышей на различных стадиях эмбриогенеза.

Отмечается гибель новорожденных щенков и во время родов. Это происходит в том случае, если самка не своевременно или совсем не снимает плодных оболочек с новорожденного плода, или поедает щенков.

Многие исследователи - звероводы (Н.Г. Михайлов, 1964, A. Frind, 1977, Н.Ш. Перельдик и др., 1987, А.Т. Ерин, 1993, Н.А. Балакирев, 1997), основным проявлением А-витаминной недостаточности у зверей считают нарушение функции размножения. Задолго до клинического проявления, недостаточность витамина А вызывает у самцов норок дегенерацию зародышевых элементов семенников и нарушение спермопродукции, а у самок- расстройство процессов овуляции и имплантации плодов, гибель и резорбцию эмбрионов на ранних стадиях развития.

При дефиците витамина Е, вызываемом у зверей большим содержанием в рационе ненасыщенного жира, возрастает количество самок, оставшихся без приплода вследствие абортов, гибели и рассасывании плодов во второй половине беременности. Продолжительность беременности у Е-авитаминозных самок, как правило, на 3-4 дня больше. Щенки рождаются вялыми, малоподвижными и менее жизнеспособными. Часть приплода плохо присасывается и погибает в первые дни жизни. При недостатке витамина Е у производителей наблюдается дегенерация семенных канальцев и нарушение сперматогенеза (А.Т. Ерин, 1993). Наблюдается также огрубение кожи и ухудшение пигментации меха (A. Helgebostad, F. Enoler, 1973).

Таким образом, анализируя литературные данные о многообразии факторов, влияющих на воспроизводительную способность, и давая им критическую оценку, можно заключить, что значительную роль в регуляции плодовитости играют, так называемые, паратипические факторы, которые включают в себя кормление, содержание, уход, систему спаривания.

Проведенный анализ современной литературы показал, что назначение самкам норок в период воспроизводства биологически активных веществ оказывает корригирующее влияние на метаболизм в их организме белков, углеводов, липидов, витаминов и минералов, что, в конечном итоге, положительно сказывается на течении беременности, родов и жизнеспособности щенков.

Данное заключение еще раз подтверждает, что в основе снижения воспроизводительной способности лежат расстройства метаболизма, связанные с дегенеративным нарушением печени, которое, в свою очередь, детерминировано дефицитом биологически активных веществ в организме животных.

1.5 Иммуннодефицитные состояния

В современных условиях сельскохозяйственного производства практически повсеместно регистрируется снижение иммунобиологической реактивности большинства животных. Это, в значительной степени, связано с несбалансированным или недостаточным кормлением, с несоблюдением зоогигиенических норм содержания, экологическим неблагополучием и другими неблагоприятными факторами, постоянно присутствующими в среде обитания (Ю.Н. Бригадиров, А.И. Ануфриев, В.М. Асламов, 1997; И.М. Донник, 1997; И.М. Карпуть, М.П. Бабина, 1998; А.А. Буянов и др., 2000; Д.А. Девришов, 2000).

А.А. Сохин, Е.Ф. Чернушенко (1984) считают, что рабочая клиническая классификация иммунодефицитных состояний должна включать, по возможности, их полный перечень, содержащий наследственную патологию и фенокопии ее. Так, все иммунодефициты делятся на две больших группы - это наследственные или первичные специфические иммунодефициты и приобретенные иммунодефицитные состояния. Другая большая группа наиболее распространенных иммунодефицитов - приобретенные иммунодефицитные состояния - делится по этиологическому признаку на иммунодефициты, вызванные протозойными, глистными болезнями, бактериальными и вирусными инфекциями, нарушениями питания и влиянием иммунодепрессантов (Л.М. Петрова и др., 1972, В.П. Рютова, 1972, И.И. Дукур, 1973, B.C. Слугин, 1975, 1998 и др., А.А. Сохин, Е.Ф. Чернушенко, 1984, B.C. Слугин, 1998 и др., Е.Г. Квартникова с сотр.,1994, А.В. Караулов, 1999).

.Так, А.А. Буянов (2000) настаивает на том, что как врожденные, так и приобретенные иммунодефициты необходимо подразделять на первичные и вторичные.

Одну из наиболее важных позиций занимает иммунологическая недостаточность при бактериальных инфекциях (R.K. Chandra, P.M. Newberne, 1977, Ю.М. Лопухин, Р.В. Петров, 1975, А.Е. Ефременко и др.,1990), и вирусных инфекциях (П.Ф. Сонин, Дедовских Н.П., 1986, С.В.Аулова,1993, А.К. Кириллов, 1994, П.А. Емельяненко с сотр. 1999, С.Ю. Ольховский, Т.В. Ольховская, 2000, А.А. Буянов и др., 2000).

При врожденных инфекциях иммунная система является лишь одним из множества объектов, повреждаемых вирусом, и имеет широкий диапазон иммунологических нарушений (, Basrur P.K. et. al., 1963, Gorham J.R. e.a., 1964, P.К. Basrur.1966, K A. Joseph, J.A. Bellanti, 1971.).

Большое количество причин иммунодефицитных состояний, а в связи с этим и различный патогенез развития иммунодефицитов, связанный с нарушением различных цепей общей реактивности организма, требует применения не просто иммуностимуляторов, а поиск и внедрение новых высокоэффективных иммуномодулирующих средств, особенно на самых ранних этапах жизни животных (И.Ю. Фролов, 1993; И.М. Карпуть, М.П. Бабина, 1998; А.А. Буянов и др., 2000).

1.6 Инфекционная патология у пушных зверей

В Северной Америке с высокоразвитым клеточным пушным звероводством ежегодный ущерб от алеутской болезни достигает 10 млн. долларов. (Porter D.D., Larsen A.E., 1964, 1965, 1967, 1968, 1974, Kangas J, 1962)

Впервые это заболевание было зарегистрировано у алеутских норок в 1946 году американским ученым на норководческой ферме Северной Америки. (Hartsough Y.R., Gorham J.R., 1956).

Алеутская болезнь причиняет огромный экономический ущерб норководческим хозяйствам из-за широкого ее распространения, большого падежа зверей (до 75%), значительного дорегистрационного отхода щенков, неблагополучно щенящихся и малопометных самок, повышенной стерильности самцов и ухудшения качества меха. (Л.М. Петрова и др., 1972,, В.П. Рютова, 1972, В.П. Акулова, Н.С. Букина, Е.Т. Цветкова 1972, И.И. Дукур 1973, B.C. Слугин, 1975, 1998, 1987 и др.).

В нашей стране это заболевание было установлено в 1965 году. (И.А. Бузинов и др. 1967). Вирус алеутской болезни длительно персистирует в организме норок, вызывая развитие специфических антител в первые две недели после заражения, которые достигают максимального уровня к двум месяцам (L. Karstad, 1967, 1969, 1970, В.A. Берестов, 1967, 1969, А.В. Жаров, 1966, Henson J.B. e.a., 1969, D.G. Ingram 1970, 1972, H.J. Cho, 1974, В.А. Чижов, И.И. Дукур, 1969, 1972, Porter H.G., 1972, 1973).

В естественных условиях болеют только норки. Восприимчивы животные всех окрасок, однако норки с гомозиготностью по рецессивному гену «а» болеют чаще и тяжелее, чем стандартные. Чувствительность норок к алеутской болезни зависит от вирулентности возбудителя (J. Haagsma 1968, I.B. Henson е.а., 1968, 1969). Алеутской болезнью поражаются в одинаковой степени как взрослые, так и молодые норки обоего пола. (E. Jungcherr, 1958, H.C. Loliger 1963, С. Helmboldt, 1964, A. J. Kenyon e. a., 1966, 1967).

Заражение норок может происходить при спаривании, при проведении прививок, рассадке щенков и т.д. (G. Trautwein, 1964, И.А. Бузинов и др., 1967, В.П. Акулова, 1967, 1970, Б.А. Гусев, 1968, L. Karstad, 1970, M.J. Messing, 1981, Ю.Г. Анакина, 1983 и др )

1.7 Иммуннодефицитные состояния у молодняка пушных зверей

Наиболее значительный экономический ущерб животноводство несет в результате болезней и гибели молодых животных. Падеж последних составляет 60-90% от общего числа павших животных (Г.М. Топурия, Л.Ю. Топурия, 1997). Причем в первые месяцы жизни падеж и санитарный брак достигают в среднем 10-15% (Д.А. Девришов, 2000). Это обусловлено относительной физиологической незрелостью, несовершенством защитно-приспособительных механизмов организма к факторам внешней среды, а также пагубным влиянием на организм молодняка болезней, недостатков в содержании и хозяйственном использовании материнских особей (J.R. Gorham e. a., 1964, Y.R. Hartsough, 1965, Е.С. Воронин, Д.А. Девришов, В.П. Шишков, 1988, И.М. Карпуть, М.П. Бабина, 1998, С.Х. Абдалимов, 2002).

В условиях промышленного ведения животноводства большое значение приобретает вопрос повышения общей резистентности организма животных путем применения неспецифических стимулирующих препаратов. Учитывая множественность звеньев нарушения иммунитета у молодняка в современных условиях, в последнее время предпочтение отдается препаратам, обладающим регуляторным влиянием на иммунную систему - иммуномодуляторам (J.Y. Tilahum, 1987; D. Archambault, G. Morin, Y. Elazhary, 1988, А.А. Долидова и др., 1988, Б.В. Качоровский, В.Е. Логинский, И.А. Лыхман, 1988, Е.В. Гусева, В.И. Балихина, 1994).

Широкое использование в ветеринарии неспецифических средств для повышения общей и специфической резистентности организма, коррекции иммунитета, профилактики и лечения больных позволит снизить заболеваемость и в значительной мере повысить продуктивность животных (Д.А. Девришов, Е.С. Воронин, 1988, T.E. Belokrinitskaya, B.I. Kuznik, V. Kh. Khavinson, 1994).

2. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в 2001-2005 гг. на кафедре частной зоотехнии, на базе учебно-научной испытательной лаборатории (УНИЛ) Ставропольского государственного аграрного университета, а также в ЗАО зверохозяйстве «Лесные ключи» Шпаковского района, Ставропольского края.

Разработку способа приготовления иммуномодулятора КИМ (комплексного иммунного модулятора), осуществляли в учебной научно-испытательной лаборатории (УНИЛ), Ставропольского государственного аграрного университета. Для приготовления препарата использовалось инкубационное яйцо, полученное на птицефабрике, благополучной по паразитарным и инфекционным заболеваниям. Яйца выдерживали при температуре +4 - 6 Сє, с относительной влажностью 60-75%. Перед использованием яйцо подвергали овоскопии. На первом этапе яйца отбирали из благополучного по инфекционным заболеваниям хозяйства. Использовали яйца среднего размера, примерно одинаковые по массе, без видимых повреждений и загрязнения скорлупы

Препарат КИМ исследовали на аминокислотный состав. Их количественное содержание определяли общепринятыми методами. Отбирали пробы от одной партии и подвергали кислотному гидролизу. Количество аминокислот в препарате определяли на аминокислотном анализаторе ААА-332Т производства Чехословакии.

Определение лизоцимной активности смеси препарата проведено нефелометрическим методом, где об активности лизоцима судили по изменению светопроницаемости опытной микробной взвеси Micrococcus lisodekticus (штамм 19) по сравнению с исходной.

Проводили исследование биохимического состава препарата (КИМ) с определением содержания в нем белка, аминокислот, гормонов методами, применяемыми для жидких органических субстратов.

Биологическая апробация препарата была проведена в лаборатории на белых мышах. В опыт было взято две группы, по пять мышей: первая группа была опытной, вторая служила контролем. Животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления. Взвешивание животных проводились: перед постановкой на опыт и через каждые два дня. Наблюдение за физиологическим состоянием животных велось ежедневно. Мыши опытной группы инъецировались внутримышечно во внутреннюю поверхность бедра препаратом (КИМ) в дозе 0,5мл/гол.

Клиническое обследование опытных групп проводили по общепринятой методике. Ежедневно учитывали живую массу, упитанность, осматривали видимые слизистые оболочки, отмечали общее состояние, а также наблюдали за активностью и состоянием опорно-двигательного аппарата в течение 10 дней.

Для определения показателей резистентность у опытных и контрольных мышей исследовали кровь, на бактерицидную и лизоцимную активность. Кровь, для биохимических исследований брали из яремной вены в центрифужную пробирку через 10 суток после введения препарата. Исследования проводились согласно общепринятой методике.

Подопытных животных разбивали на группы в зависимости от задач поставленных в процессе исследования. Подробное описание состава групп отражено в основных разделах. Во всех случаях при отборе животных в экспериментальные группы руководствовались принципом аналогов.

Испытание препарата КИМ на норках проводили в зверохозяйстве «Лесные ключи» Шпаковского района. Общая схема проводимых исследований представлена на рисунке 1. В опытной группе препарат норкам вводили внутримышечно во внутреннюю поверхность бедра: молодняку в дозе 0,05 мл/кг, взрослым в дозе 0,1 мл/кг живой массы. Контрольным зверям вводили физиологический раствор в тех же дозах. У молодняка учитывалась сохранность, физиологическое состояние, продолжительность периода восстановления после вакцинации, живая масса, качество пушнины.

Место проведения опыта в хозяйстве - бригада №3, группа №6. Для проведения опыта нами были отобраны норчата из пометов 6-8 щенков, с датой рождения с 20 по 25 апреля (условие отбора самок - из пометов 7- 9 щенков). Отобранные животные были поделены на две группы: первая - контроль, которой вводили физиологический раствор в дозе 0,05мл/кг живой массы; вторая группа - норки которым вводили КИМ трехкратно с интервалом в 7 дней в дозе 0,05 мл/кг. Животные опытной и контрольной группы содержались в одном шеде для создания более благоприятных условий для проведения опыта и большей чистоты эксперимента. За всеми группами животных ухаживал один зверовод для того, чтобы животных кормили и поили в одно и тоже время и в равных количествах. У всех зверей было проведено клиническое обследование по общепринятой схеме. При осмотре особое внимание уделялось состоянию кожи, волосяного покрова, видимых слизистых оболочек.

Препарат КИМ вводили по схемам представленным в нижеприведенных таблицах.

Таблица 1

Схема проведения опыта на новорожденных норчатах

Группа	Препарат	Кратность введения	Доза мл/кг	Кол-во зверей в группе	Возраст при введении препарата, дней
Контроль	Физиологический раствор	3	0,05	90	0, 7, 14
Опыт	КИМ	3	0,05	88	0, 7, 14

Продуктивность норок стандартной породы при использовании комплексного иммунного модулятора (КИМ)

Молодняк норок от 0 до 45 дней	Молодняк норок от 45 до 105 дней	Самки	Самцы

Изучаемые показатели

Рост, развитие, сохранность молодняка	Абсолютный, среднесуточный, относительный прирост живой массы. Сохранность молодняка. Качество шкурок. Гематологические и биохимические показатели крови	Воспроизводительные качества, устойчивость к лактационному истощению, качество меха	Количественные и качественные показатели спермопродукции, количество оплодотворенных самок, развитие внутренних органов, морфологические и биохимические показатели крови

Экономическая эффективность применения препарата КИМ

Рис. 5 Общая схема исследований

Таблица 2

Схема опыта на отсаженном молодняке

Группа	Препарат	Кратность введения	Доза, мл/кг	Кол-во зверей в группе, гол.	Возраст при введении препарата, дней
I контр.	Физилогический раствор	1	0,05	50	45
II опыт	КИМ	1	0,05	50	45
III опыт	КИМ	3	0,05	50	45, 52, 59

Целью нашего следующего опыта явилось изучение влияния нового биогенного стимулятора на воспроизводительные качества и показатели резистентности организма у взрослых самцов и самок норок. В задачи исследования входило: подобрать оптимальные дозы и кратность введения комплексного иммунного модулятора (КИМ); изучить показатели резистентности организма самцов норок при использовании препарата (КИМ); проанализировать результаты проведения гона норок и качество спермы самцов.

Таблица 3

Схема испытание препарата на самцах норок

Наименование группы	Количество голов	Наименование препарата	Доза введения, мл/кг	Кратность введения
I контрольная	60	Физиологический раствор	0,1	3-х кратно, ч/з 7 суток
II опытная	60	КИМ	0,1	3-х кратно, ч/з 7 суток

Для контроля использовали стерильный физиологический раствор. Животные были обработаны препаратом за один месяц до начала гона. Для учетов результатов опыта нами были собраны и обработаны следующие данные количества падежа по группам; готовность зверей к гону (готовность самок к спариванию, количество покрытий у самцов).

Самки норок были обработаны препаратом по аналогичной с самцами схеме также за 1 месяц до гона.

Таблица 4

Схема испытание препарата на самках норок

Наименование группы	Количество голов	Наименование препарата	Доза введения, мл/кг	Кратность введения
I контрольная	248	Физиологиче-ский раствор	0,1	3-х кратно, ч/з 7 суток
II опытная	276	КИМ	0,1	3-х кратно, ч/з 7 суток

Для выявления влияние препарата на протекание у самок норок лактационного истощения нами были созданы две группы зверей. Опытная группа из 20 самок получала внутримышечно препарат КИМ в дозе 0,1 мл на кг живой массы двукратно через сутки. Контрольной группе животных из 20 самок вместо КИМа вводили физиологический раствор.

Таблица 5

Схема испытания препарата на самках норок, страдающих лактационным истощением

Наименование группы	Количество голов	Наименование препарата	Доза введения, мл/кг	Кратность введения
I контрольная	20	Физиологи-ческий раствор	0,1	2-х кратно, ч/з сутоки
II опытная	20	КИМ	0,1	2-х кратно, ч/з сутки

В подопытную и контрольную группы были подобраны звери одного возраста (второго года с отрицательной реакцией по РИЭОФ на плазмоцитоз, одного срока щенения) и с одинаковым количеством щенков в помете. Все звери находились на общехозяйственном рационе и обслуживались одной работницей. Как в опытной, так и в контрольной группах щенки были отсажены в возрасте 45 дней. В течение опытного периода за зверями вели наблюдение, учитывая поедаемость корма животными, а также падеж и его причину.

У взрослых самцов после введения препарата учитывалось: количество садок в день, качество спермы, количество покрытых самок, количество щенков, продолжительность периода восстановления после гона естественная резистентность и биохимические показатели крови. У самок учитывалось физиологическое состояние, количество мертворожденных щенков, количество щенков к отсадке, количество щенков на деловую самку, молочность самок, устойчивость к лактационному истощению.

Кровь получали из вены хвоста путем надреза, место надреза обстригали и обрабатывали 70% спиртом.

В крови и ее сыворотке определяли следующие показатели: общий белок, количество гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, лейкограмма, глобулины, бактерицидная и лизоцимная активности, кроме того, учитывали прирост живой массы, определяли следующие биохимические показатели: кальций, фосфор. Исследовали корма и воду из рациона норок на содержание в нем сырого протеина; на влажность, кальций, фосфор; дерть пшеничную - на кислотность, влажность, кальций, фосфор, а также Исследования проводили в лаборатории УНИЛ г. Ставрополя.

Содержание минеральных веществ определяли атомно-абсорбционным методом с использованием атомно-абсорбционного спектрофотометра.

При определении гематологических и биохимических показателей крови пользовались методиками представленными И.П. Кондрахиным, Н.В. Куриловой и др. (1985).

Гемоглобин определяли методом Сали с помощью гемометра ГС-3.

Число эритроцитов и лейкоцитов подсчитывали в камере с сеткой Горяева.

Лейкограмма в мазках крови окрашенных по Романовскому-Гимзе определяли четырехполосным методом с подсчетом не менее 200-300 клеток.

Общий белок определяли рефрактометрическим методом на приборе УРЛ-1.

Фосфор - в реакции с молибденово-кислым аммонием.

Кальций определяли комплексометрическим методом. Метод основан на титрования двунатриевой солью этилендиаминтетрауксусной кислоты.

Иммунологические исследования. Общее количество иммуноглобулинов определяли методом осаждения сульфатом натрия.

Бактерицидную активность сыворотки крови определяли методом фотонефелометрии, основанном на изменении оптической плотности мясо-пептонного бульона при росте в нем кишечной палочки (Е. сoli, серотип 0-2) с добавлением и без добавления испытуемой сыворотки.

Определение лизоцимной активности сыворотки крови проведено нефелометрическим методом. Об активности лизоцима судили по изменению светопроницаемости опытной микробной взвеси Micrococcus lisodekticus (штамм 19) по сравнению с исходной.

Исследование на безвредность препарата при его подкожном введении, проводилась путем определения острой токсичности, предусматривающее изучения симптомокомплекса отравления, общей и местной реакции у лабораторных животных при поступлении препарата в организм в различных дозах.

Статистическая обработка результатов исследований.

Результаты экспериментов подвергали вариационно-статистической обработке.

Для создания одномерного статистического отчета, содержащего информацию о центральной тенденции и изменчивости входных данных, использовали описательную статистику Microsoft Excel на базе компьютера IBM PENTIUM.

Вариационные ряды, полученные в эксперимента, были охарактеризованы по следующим показателям:

1) средняя арифметическая величина (М);

2) квадратическое отклонение ();

3) ошибка средней арифметической величины или средняя квадратическая ошибка (м).

Вычислялся показатель существенной разности (t) и, учитывая число измерений по таблице t - распределения Стьюдента, определялась вероятность различия (Р). Различие считалось статистически достоверным, начиная со значений Р0,05. В этом случае правильность вывода о существовании различий величин может быть подтверждена в 95% случаев.

Экономическую эффективность проводимых мероприятий рассчитывали по методике разработанной И.Н. Никитиным и В.Ф. Воскобйником (1999).

В биохимических методах исследований определяли: общее количество белков в сыворотке крови (рефрактометрическим методом); концентрацию мочевины, активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ), аланинаминотрансферазы (АлАТ) - с помощью биотестов фирмы Lachema, на спектрофотометре СФ - 46.

Всех подопытных животных убивали инъекцией дитилина (Смирнов, 2001). После убоя и съема шкурки провели патологоанатомическое вскрытие тушек норок, извлекали внутренние органы: сердце, печень, селезенку, желудок, почки, которые обследовали с целью определения влияния препарата КИМ на здоровье зверей. После очистки и подготовки органов определяли их массу.

Первичную обработку и правку шкурок проводили в соответствии с требованиями ГОСТов 7908-69.27769-88 Шкурки норок невыделанные. После обработки измеряли их длину (от междуглазья до корня хвоста), площадь находили удвоенным умножением длины на ширину. Качество шкурок оценивали комиссионно с описанием дефектов по каждой шкурке. Опреде6ляли размер, цвет, группу дефектов. По итогам сортировки устанавливали зачет по качеству.

3. Результаты исследований

3.1 Технология приготовления и состав комплексного иммунного модулятора КИМ

3.1.1 Технология приготовления комплексного иммунного модулятора КИМ

Для современной практической ветеринарной медицины важное значение имеет создание иммуномодулирующих средств, применение которых способствует лечению и профилактики целого ряда заболеваний и патологических состояний животных сопровождающихся снижением иммунобиологических свойств организма. Отдельные от организма животного или растения ткани при воздействии на них неблагоприятных факторов среды активного борются за свое существование и при этом вырабатывают вещества, стимулирующие биологические процессы в таких тканях. Эти вещества, помогающие тканям сохранять жизнь в неблагоприятных условиях, названы стимуляторами биологического происхождения. Учитывая актуальность данной темы, направленной, прежде всего на необходимость приготовления дешевых и эффективных иммуномодуляторов была поставлена цель приготовить препарат в качестве основного субстрата в который входит оплодотворенное яйцо. При разработке препарата используются рациональные приемы направленные на сохранение исходных свойств субстрата.

На этом этапе осуществляли закладку яиц в темную холодильную камеру при температуре 2-4Сє на 5-7 дней, что приводило к медленной гибели эмбриона с выработкой биогенных веществ в неблагоприятных условиях. После извлечения из холодильной камеры яиц и обработки скорлупы спиртовым раствором йода для дополнительной стерилизации вскрываем яйцо осматривают желток на предмет наличия зародыша, отмечаем объем массы гомогенизируем яичную массу. Разводим 0,9% раствором натрия хлорида в соотношении 1:5. Выдерживаем полученный гомогенизат на водяной бане при температуре 70-80Сє в течение 1часа, затем помещают бактерицидную камеру на 40 минут.

Затем фильтруют и разливают в стерильные флаконы. Для консервации используется - 0,05 % фенол (из расчета 0,5мл на 100мл объема гомогенизата). Для сохранения стерильности флаконы закрывают резиновыми пробками и закатывают металлическими крышками. Готовый гомогенизат проверяют на стерильность, пробу выдерживают в термостате в течение 1суток при температуре 37Сє. При изготовлении экспериментальной партии проводили биологическую пробу на безвредность на лабораторных мышах.

3.1.2 Состав комплексного иммунного модулятора (КИМ)

Биохимический анализ препарата имеет важное значение как показатель их качества. По данным многих ученых целый ряд соединений обладает высоким биологическим потенциалом и могут обуславливать основную биостимулирующую функцию препарата.

Таблица 6

Химический состав препарата КИМ, %

Наименование	Общая влага	Зола	Азот	Протеин	Жир	Ph
Препарат КИМ	94,79	1,10	2,90	18,125	1,91	7,0

Количественный состав препарата

В 100мл препарата входит:

20мл биологически активной яичной массы;

79,7 мл раствора хлорида натрия 0,9%;

0,3 мл консерванта.

Одной из основных качественных характеристик препарата является наличие в нем аминокислот.

Аминокислотный состав препарата показан в таблице 7.

Таблица 7

Аминокислотный состав препарата КИМ

Аминокислоты	мг %
Заменимые
Аспарагиновая кислота	5,4
Серин	3,4
Глютаминовая кислота	10,0
Аланин	7,6
Тиразин	3,2
Всего	29,6
Незаменимые
Трианин	3,8
Глицин	4,9
Валин	6,2
Метианин	1,5
Изолейцин	5,2
Лейцин	9,2
Фенилаланин	5,2
Гистидин	3,7
Лизин	3,3
Аргинин	4,0
Всего	47,0

Для характеристики биологической ценности данного препарата, пользуются таким понятием как аминокислотный индекс, который определяет аминокислотную полноценность, он равен соотношению незаменимых аминокислот к заменимым. В биологически полноценных веществах он выше 1, аминокислотный индекс (КИМа) = 47,0/29,6=1,59.

В препарате КИМ содержится следующие гормоны (табл. 8).

Таблица 8

Содержание гормонов в препарате КИМ

Наименование гормонов	Количество
ТТГ (тиреотропный гормон), мМед/л	0,09
ФСГ (фолликулостимулирующий гормон), мМЕ/мл	1,5
Свободный Т4 (L-тироксин), пмоль/л	0,2
ЛГ (лютенизирующий гормон), мМЕ/мл	2,2
Прогестерон, нмоль/л	> 100,0
Тестостерон, нмоль/л	5,8
Корнизол, нмоль/л	0,1
Пролактин, мМЕ/мл	75,0
СТГ (соматотропный гормон), мМЕд/л	10,0
ДГЭАс (дегидроэпиандростерон), мкг/мл	0,26
АКТГ (адренокортикотропный гормон), пг/мг	0,9

Данный препарат применяют в пушном звероводстве, для снижения иммуннодефицитных состояний связанных с ростом и линькой щенков. Также данный препарат хорошо себя зарекомендовал при подготовке зверей к гону и щенению.

Таким образом, полученный иммуномодулятор обладает высоким эффектом повышения общей и специфической резистентности организма.

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:

- биостимулятор, полученный с помощью предлагаемого изобретения, обладает эффектом тканевой терапии, бактерицидным эффектом;

- способ приготовления позволяет не только получить препарат с эффектом тканевой и других видов терапии, но и позволяет сохранить полезные свойства яйца: высокий аминокислотный состав, витамины и гормоны, высокие иммунные показатели, активизацию уровня метаболизма;

- более дешевое изготовление;

- основные методики, препараты, аппараты, используемые в приготовлении препарата КИМ легко доступны.

3.1.3 Испытание препарата КИМ на лабораторных животных

Разработка и применение препаратов-биостимуляторов, используемых для повышения иммунобиологической реактивности у животных в качестве профилактики и в составе различных лечебных схем, представляют собой серьезную задачу. Новый препарат (КИМ) нуждается в серьезной экспериментальной проверке и клинической апробации.

Результаты приростов живой массы мышей при использовании КИМ приводятся в таблице 9.

Таблица 9

Испытание препарата КИМ на белых лабораторных мышах

Дата введения	Группа
	Контрольная	Опытная
	Живая масса, г	Абсол. при-рост, г	Сред-несу-точ-ный при-рост, г	Отно-ситель-ный при-рост, %	Живая масса, г	Абсол. при-рост, г	Сред-несу-точ-ный при-рост, г	Отно-ситель-ный при-рост, %
23.01. 2003г	14,20	-	-	-	13,20	-	-	-
24.01. 2003г	14,70	0,50	0,50	3,52	13,90	0,70	0,70	5,30
27.01. 2003г	15,10	0,40	0,13	2,72	14,11	0,20	0,07	1,44
29.01. 2003г	15,40	0,30	0,15	1,99	15,80	1,70	0,85	2,10
За весь пери-од	-	1,20	0,20	8,45	-	2,60	0,43	19,70

Животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления. Взвешивание животных проводились перед постановкой на опыт и через каждые два дня. Наблюдение за физиологическим состоянием животных велось ежедневно.

Результаты наших исследований показали, что мыши, которым был введен комплексный иммунный модулятор (КИМ), превосходили животных контрольной группы по абсолютному приросту живой массы за весь период опыта на 1,4 грамма, по среднесуточному приросту на 0,23 грамма, по относительному приросту, показывающему энергию роста животного на 18,5%, таким образом можно заключить, что инъекция комплексного иммунного модулятора способствовала увеличению массы подопытных мышей. Патологических изменений у мышей не выявлено, это говорит о безвредности препарата (КИМ) и его положительном влиянии на процессы, связанные с белковым обменом.

3.2 Влияние комплексного иммунного модулятора на рост, развитие и сохранность молодняка в подсосный период

Масса норчат при рождении составляет 8-12 г, длинна их тела не превышает 5-7 см. Молодняк норок растет быстро. Половой диморфизм выражен сразу после рождения, или проявляется на 10 сутки. В нашем опыте норчат взвешивали при рождении и при отсадки и в 2 месяца.

Таблица 10

Динамика живой массы щенков в подсосный период при использовании препарата КИМ

Группа	Живая масса при рождении, г	Живая масса после отсадки, г	Через 2 мес., г
	>	+	>	+	>	+
Контроль	8,0±0,42	7,0±0,58	775,0± 1,13	602,0± 1,95	1770,0± 2,11	1031,0± 1,75
Опытная	8,0±0,66	7,0±0,71	937,75± 0,99	680,9± 2,11	2055,0+ 1,49	1137,2± 2,11
% к контролю	100,0	100,0	121,0	113,1	116,1	110,3

После отсадки масса щенков при использовании КИМа была больше, чем у зверей контрольной группы, у самцов на 21%, а у самочек - на 13,1%. На 60-й день опыта живая масса опытной группы была больше на 16,1%, а у самок на 10,3% чем у норчат контрольной группы.

Таблица 11

Показатели сохранности щенков

Показатели	Группа
	Контрольная	Опытная
Кол-во гнезд, шт.	20	20
Кол-во щенков при рождении, В гнездах всего	4,5± 1,13	4,4± 1,05
	90± 1,25	88 ±1,4
Кол-во щенков через 10 дней, гол %	84± 1,4	86 ±1,3
	93± 0,5	98± 0,3
Кол-во щенков через 20 дней, гол %	77 ±1,05	85± 1,1
	85±0,3	96,5± 0,6
Кол-во щенков к отсадке (45 дней) гол. %	71± 1,4	84± 1,2
	79,4± 0,4	95,2± 0,8

Сохранность щенков опытной группы была выше через 10 дней после рождения на 5,3% по сравнению с контрольной группой, через 20 дней выше на 11,5%, а к отсадке на 15,8% соответственно.

Анализируя причины падежа зверей в подопытных группах, можно констатировать, что гибель зверей происходила от различных болезней (пневмония, гастроэнтерит), причем патологоанатомическая картина была выражена в каждом случае по-разному, что свидетельствует о полиэтиологическом факторе патологии.

Наиболее лучшие результаты получены при назначении препарата КИМ в дозе 0,05 мл на 1 кг живой массы, щенки опережали своих сверстников (контрольная группа) по весу и развитию и имели лучшее опушение.

3.3 Использование комплексного иммунного модулятора (КИМ) на отсаженном молодняке норок

3.3.1 Весовой и линейный рост молодняка норок

Составление полноценного рациона играет огромное значение в содержании и выращивании пушных зверей. В особенности это относится к хищным зверям (в данном случае к норкам). Введение в корм полноценного протеина является гарантией получения качественного меха. Так же большое значение играет кормление зверей в такие важные физиологические периоды как подготовка к гону, гон, беременность, щенения, выращивание молодняка.

Для нормальной жизнедеятельности и размножения, хищных зверей необходимо полноценное и разнообразное питание. Корм должен содержать в достаточном количестве и необходимой пропорции белки, жиры, углеводы, витамины и минеральные вещества, которые расходуются в организме зверька на образование энергии, рост новых клеток и тканей, живому организму они нужны ежедневно в необходимом количестве. Ни один вид корма, взятый в отдельности, не имеет набора всех питательных веществ, необходимых для нормальной жизнедеятельности организма. Получить их зверек может лишь в том случае, если будет правильно составлен рацион. А для этого необходимо составить рацион с учетом времени года, способа содержания (в клетке, вольере, в отапливаемом или не отапливаемом помещении), физиологического состояния и биологических особенностей пушных зверей.

В таблице 12 представлены данные рациона кормления норок после отсадки молодняка зверохозяйства «Лесные ключи».

Таблица 12

Рацион кормления норок после отсадки молодняка

Наимено-вание ингриди-ента	Кол-во, гр	Содержится в 100 гр корма	Содержится в рационе, г
		Про- теин	Жир	БЭВ	Ккал	Про- теин	Жир	БЭВ	Ккал
Конина	1	18,5	5,5	0,5	137	0,19	0,06	-	1,37
Печень	2	16	2,9	3,7	114	0,32	0,06	0,07	2,28
Щекови-на	2	16	4,0	0,5	111	0,32	0,08	0,01	2,22
Суб. прод. говяжьи	8	11,1	4,5	-	100	0,89	0,36	-	8,0
<...