Хронические эндометриты у животных

При достаточной резистентности организма коров в толще матки в течение 5-7 дней образуется сплошной лейкоцитарный барьер, который препятствует дальнейшему распространению микробов. Благодаря этому воспалительный процесс купируется, ограничивается внутренней оболочкой матки и в последствии протекает в довольно легкой форме.



4. Клинические признаки

Основным симптомом хронического эндометрита будут маточные кровотечения. Наличие этих кровотечений объясняется неполноценностью базального слоя эндометрия, который отвечает за восстановление функционального слоя. Процесс регенерации функционального слоя происходит медленнее, чем в норме. Менее яркими, но достаточно частыми симптомами хронического эндометрита являются периодические тянущие, ноющие боли внизу живота, небольшое увеличение и уплотнение матки, ее болезненность при исследовании.

У самок наблюдается бесплодие, половые циклы становятся аритмичными или прекращаются. При катаральном эндометрите выделяется экссудат в виде мутной хлопьевидной слизи, при гнойно-катаральном он может быть жидким или густым, мутным с прожилками гноя, а при гнойном сливкообразным желтовато-белого цвета. Рога матки увеличены в 1,5-3 раза, стенка их утолщена, при пальпации болезненная, сократимость понижена, иногда выявляется флюктуация. Состояние животного не изменено, при длительном течении процесса могут появляться признаки хронической интоксикации организма.

Осложнениями хронического эндометрита являются накопления в матке большого количества гноя (пиометра), водянистого (гидрометра) или слизистого (миксометра) содержимого, иногда с примесью крови. Возникает это при закрытии или значительном сужении канала шейки матки, поэтому экссудации наружу практически не происходит. Пальпацией органа ощущается флюктуация, наличие желтого тела на яичнике.

В основе этой патологии лежит расстройство взаимоотношений эстрогенных гормонов и прогестерона. Симптоматология их различная и относится к железисто-кистозной гиперплазии. При гиперсекреции эстрогенов возникает миксометра или гидрометра, а на фоне гиперлютеинизации в связи с задержавшимся желтым телом на яичнике пиометра. В стенке матки развиваются необратимые изменения, иногда возможны разрывы матки и перитонит с сепсисом.

При скрытом эндометрите отсутствуют истечения экссудата в период от одной течки до другой. Зато во время эструса истечения слизи из матки обильные с примесью серовато-белых, желтоватых, иногда нитевидных прожилок гноя. Осеменение или покрытие таких самок безрезультатно и противопоказано.

Клиническая картина хронического эндометрита в значительной степени отражает глубину структурных и функциональных изменений в ткани эндометрия. Неполноценная циклическая трансформация эндометрия на фоне воспалительного процесса, нарушение процессов десквамации и регенерации функционального слоя эндометрия приводят к появлению основного симптома заболевания - маточных кровотечений. Среди клинических симптомов особое место занимает бесплодие и невынашивание беременности.

У животного наблюдается бесплодие, так как дегенеративные изменения в матке обуславливают нарушение нейроэндокринных связей в системе "матка яичники".

Переход воспаления в хроническую форму приводит к развитию устойчивых изменений в слизистой оболочке, мышечных и железистых слоях матки; эти изменения чаще необратимы. А.К. Сеглиньш, А.Я. Дзените и М.В. Емельянова (1974) установили деструктивные и атрофические изменения покровного эпителия слизистой оболочки матки и железистого эпителия маточных желез при хроническом эндометрите.

Половые циклы становятся аритмичными или прекращаются совсем (наступает анафродизия).

При хроническом эндометрите протекающим с клиническими признаками, наблюдается длительное постоянное или периодическое выделение из матки экссудата. При гнойно-катаральном он может быть жидким или густым с прожилками гноя. Рога матки незначительно увеличены, стенка их утолщена и бугристая (иногда, наоборот, истончена), при массаже безболезненна, не сокращается или сокращается слабо, иногда выявляется флюктуация. Общее состояние животного не изменено, однако при длительном течении процесса могут появляться признаки хронической интоксикации организма.

По Г.В. Зверьевой (1972) наряду с сильным отеком, сильной гиперемией и кровоизлияниями в слизистой оболочке матки появляются более или менее обширные очаги размягчения, гнойной инфильтрации, дегенерации, некроза с отторжением ткани. Нередко изъязвление распространяется на мышечные ткани. Слизистая оболочка атрофируется, ее складки сглаживаются. Местами разрастается соединительная ткань в форме бородавчатых, грибовидных возвышений. Иногда значительные участки эндометрия превращаются в сплошную грануляционную поверхность или в зону рубцовых тяжей, образующих большие складки и спайки на внутренней поверхности матки. Из маточных желез формируются кисты различной величины. Полость матки содержит слизисто-гнойный экссудат.

Хронический эндометрит сопровождается рядом характерных признаков, которые можно обнаружить наружным осмотром, вагинальным осмотром, ректальным исследованием.

Проводя вагинальный осмотр, выявляют слабую гиперемию влагалищной части шейки матки и наличие точечных или полосчатых кровоизлияний; цервикальный канал слегка приоткрыт, через него вытекает экссудат.

При ректальном исследовании обращает на себя внимание пониженный тонус матки; рога распрямлены, нечетко контурированы, их верхушки смещены в брюшную полость. Весьма характерный признак оливкообразное утолщение влагалищной части шейки матки, которое является следствием отека и гипертрофированных двух поперечных складок слизистой оболочки.

Микроанатомические изменения включают гибель и десквамацию покровного эпителия слизистой оболочки матки, деструкцию маточных желез, гиалиноз кровеносных сосудов, фиброз компактного слоя эндометрия; карункулы постепенно исчезают.

В зависимости от видового состава микрофлоры и реакции тканей матки на патогенный фактор в одних случаях преобладает альтерация, в других пролиферацией стромы. При хроническом эндометрите альтернативного характера стенка матки постепенно истончается (в результате атрофии мышечного слоя), матка превращается в тонкостенный мешок, находящейся в брюшной полости; по своим размерам и конфигурации она соответствует 3-месячной стельности.

При эндометрите пролиферативного характера матка увеличена незначительно и расположена в тазовой полости; стенки рогов неравномерно утолщены, бугристые. Если в процесс вовлечен миометрий, она превращается в бугристое тело каменистой консистенции.

Столь значительные структурные изменения исключают возможность восстановления способности самки к размножению. Максимальная длительность воспалительного процесса в матке, после устранения, которого возможно оплодотворение, обычно не превышает двух трех месяцев. У животного находящегося в лежачем положении, через половую щель выделяется экссудат слизисто-гнойного характера, без запаха. Полузасохший экссудат обнаруживается в нижнем углу вульвы, на корне хвоста, седалищных буграх (В.И. Полянцев, 2001).

При клиническом исследовании коровы № 2661 было выявлено, что общее состояние животного не отличается от нормы; температура, пульс и дыхание во время всей курации были в пределах физиологической нормы.

При ректальном исследовании половых органов было обнаружено, что матка по своей форме, размеру и консистенции не имеет существенных отличий от нормальной небеременной матки. Матка находится в тазовой полости, слегка вправо от центра лонных костей. Эректабельность матки при массаже через прямую кишку хорошая. В результате массажа из матки через половую щель начала выделяться слизь с редкими прожилками гноя. Количество слизи не превышало 60-80 мл, а в конце курации уменьшилось до 20-30 мл (фото №2). При исследовании яйцеводов и яичников было обнаружено увеличение и сращение левого яйцевода и левого яичника вследствие воспалительного процесса перешедшего с матки.

При вагинальном исследовании мы установили, что слизистая влагалища бледно-розового цвета без наложений и новообразований. Канал шейки матки приоткрыт на 1-2 пальца.

Течение

Течение хронического гнойно-катарального эндометрита длительное от нескольких недель до нескольких месяцев при отсутствии лечения.

В случае коровы № 2661 течение болезни как хронического гнойно-катарального эндометрита началось с марта месяца 2003 года. Болезнь длилась приблизительно 8 месяцев.



5. Диагностика

Хронический эндометрит -- часто встречающееся заболевание матки -- причиняет большой экономический ущерб, поэтому своевременная и точная диагностика различных его форм имеет особо важное значение в системе мероприятий по профилактике бесплодия и лечению больных животных. Своевременная диагностика и квалифицированное лечение позволяют не допустить развития в эндометрии глубоких морфологических, нередко неустранимых изменений и значительно повысить эффективность лечения.

Диагностика хронического эндометрита основана на клинической картине, данных осмотра и лабораторных исследований, иногда применяется выскабливание полости матки, а также новый метод -- гистероскопия, т. е. осмотр полости матки через специальный оптический прибор -- гистероскоп.

5.1 Диагноз

Диагноз скрытого эндометрита более точно можно установить лабораторным экспресс-методом (Н. Калиновского). Для лабораторной пробы берут 0,5%-ный раствор уксуснокислого свинца и 20%-ный раствор едкого натра. Этой пробой в слизи обнаруживаются серосодержащие аминокислоты, которые отмечаются при воспалении.

При диагностировании хронических эндометритов необходимо изучить условия содержания и проанализировать кормление животного, следует тщательно собрать анамнестические сведения. Нужно прежде всего установить, когда у животного были последние роды, как они протекали, какие замечены отклонения в процессе родов, когда отделился послед и не было ли его задержания. Если наблюдалось задержание последа, то следует выяснить применяемые методы его отделения и их эффективность.

Ветеринарный специалист всегда должен располагать точными, объективными данными о течении послеродового периода: не наблюдалась ли атония матки и как протекал процесс инволюции. Следует выяснить также время появления первого эструса после родов и клиническое его проявление, когда животное осеменялось и спермой какого производителя. Важно также установить, был ли в прошлом у животного аборт, болело ли животное острым эндометритом или другими заболеваниями (мастит и пр.).

После сбора анамнестических данных проводят общее, вагинальное и ректальное исследования.

При вагинальном исследовании обращают внимание на состояние слизистой оболочки влагалища. При наличии выделений из матки во влагалище обнаруживают экссудат и нередко устанавливают, что слизистая оболочка влагалища воспалена. Следует особое внимание обратить на состояние каудальной части шейки матки и функциональное состояние цервикального канала.

Во многих случаях данные ректального исследования в комплексе с данными анамнеза и вагинального исследования позволяют с несомненной точностью диагностировать форму хронического эндометрита. Однако нередко общепринятыми методами исследований не удается установить характер изменений матки и яичников. Хронический скрытый эндометрит, по данным Г. А. Кононова, наблюдается у 19,86% животных, у которых бесплодие протекало бессимптомно и диагностировалось методом биопсии эндометрия. Поэтому необходимо это обстоятельство при проведении ректального исследования постоянно иметь в виду. При длительном бесплодии, сопровождающемся отсутствием клинических признаков эндометрита, целесообразно применять биопсию эндометрия и другие специальные методы диагностики.

Диагноз на хронический гнойно-катаральный эндометрит ставится комплексно на основании анамнестических данных, клинического осмотра, лабораторных исследований.

Клинический метод базируется на общем и специальном исследованиях организма, включающих наружный осмотр и внутреннее исследования органов размножения вагинальным и ректальным способами.

Лабораторный метод основан на бактериологическом, цитологическом, физико-химическом, биологическом и гормональном тестах.

Также возможна диагностика хронического эндометрита путем трансректального облучения внутренних половых органов низкоинтенсивным лазерным излучением (Я.С. Стравский, 2000).

Диагноз у курируемого животного ставился комплексно на основании анамнестических данных, клинического и лабораторного методов.

Дифференцированный диагноз

Хронический гнойно-катаральный эндометрит необходимо дифференцировать от других заболеваний матки, таких как хронический катаральный эндометрит, скрытый или субклинический эндометрит.

При хроническом катаральном эндометрите выделяется экссудат в виде мутной хлопьевидной слизи, порой с примесью крови. Ритм половых циклов нарушается, полностью прекращается, иногда бывают регулярными, но отмечается бесплодие.

Скрытый или субклинический эндометрит разновидность катарального эндометрита, характеризуется отсутствием морфологических изменений (при клиническом исследовании), патологических выделений из матки в период от одной течки до другой. Во время течки наблюдается обильное выделение из половых органов прозрачной слизи.

Прогноз

При хорошем лечении, содержании и кормлении животного прогноз исхода заболевания является сомнительным, так как наступает ряд глубоких морфологических изменений в матке, и они остаются необратимыми.

При неблагоприятном прогнозе плодовитость животного не восстанавливается (А.П. Студенцов, 1970).

У курируемого животного прогноз является сомнительным, так как при столь длительном течении болезни восстановление воспроизводительных функций мало вероятно.

Лечение

Лечение любых заболеваний, в том числе и акушерско-гинекологических, должно быть своевременным, курсовым и комплексным, и продолжаться до полного излечения, которое определяется плодотворным осеменением. Немаловажным аспектом в лечении гинекологических заболеваний является уровень ветеринарного обслуживания и обеспеченность всеми необходимыми препаратами и медикаментами.

Улучшают условия содержания и обеспечивают животное полноценными кормами.

Скопившейся в полости матки экссудат удаляют путем ее промывания теплым (40-45єC) 3-10% -ным раствором хлорида натрия, 2-3% -ным раствором двууглекислой соды, 3-4% -ным ихтиолом, раствором йода (1 часть кристаллического йода, 2 части калия йодида и 1000 мл кипяченой воды), 1-3% -ным раствором ваготила и др. Затем в полость матки вводят готовые лекарственные формы (гинекологические свечи с фуразолидоном, экзутер, метромакс и др.) или антибиотики, сульфаниламиды и нитрофурановые соединения в тех или иных комбинациях в форме эмульсий, суспензий, мазей.

По данным В.П. Гончарова для стимуляции сокращений матки назначают окситоцин, питуитрин, прозерин, эргометрин, бревиколлин или другие маточные средства, которые применяют после предварительного введения 2% -ного раствора синестрола или другого эстрогенного препарата.

Особое внимание следует уделять применению средств неспецифической терапии (инъекции растворов ихтиола, АСД-2фр., ПДЭ и др.).

Для повышения тонуса матки и активации функции яичников рекомендуется ректальный массаж матки и яичников путем поглаживания и разминания их в течение 3-5 минут ежедневно или через каждые 2-3 дня, всего 5-6 сеансов. Эффективна озокеритотерапия в виде вагинальных тампонов и аппликаций на пояснично-крестцовую область по методу И.Л. Якимчука, а также лечебные грязи: иловые, торфяные, сапропелевые, в виде вагинальных тампонов по методикам Р.Ф. Венкербец, А.Н. Вяткина и В.Н. Копытина. Озокеритовые или грязелечебные процедуры проводят ежедневно или через день, всего 6-12 сеансов. Применяют внутримышечно простогландин F2б 10-12 мг (Т.Е. Григорьева, 1988).

Для нормализации обменных процессов назначают внутримышечно концентраты витаминов A, D, E тривитамин, организуют лечебно-диетическое кормление, прогулки, инсоляцию больных животных.

При лечении хронического гнойно-катарального эндометрита у коровы № 2661 были применены массаж матки через прямую кишку и следующие препараты: окситоцин, бициллин-3 в растворе новокаина, тривит для инъекций и кофеин-бензоат натрия.

Окситоцин (Oxytocinum) использовался в сочетании с массажем матки через прямую кишку. Окситоцин применяется для повышения тонуса и усиления сокращения гладкой мускулатуры матки при воспалениях матки. Выпускается в виде раствора для инъекций, содержащий в 1 мл 5 ЕД или 10 ЕД окситоцина синтетического аналога полипептидного гормона задней доли гипофиза, в стеклянных флаконах вместимостью 20 и 100 мл. Обычно препарат вводят подкожно или внутримышечно. Если внутримышечное введение не дает результата или нужен незамедлительный эффект, то применяют внутривенное введение окситоцина, который следует вводить медленно и предварительно разбавить физиологическим раствором. При необходимости в комбинации с новокаином вводят эпидурально. Дозируется препарат в ЕД. Для коровы при подкожном или внутримышечном введении доза окситоцина составляет 30-60 ЕД (Г.В. Кирюткин, 1977).

При лечении коровы № 2661 окситоцин применялся для стимуляции сократительной деятельности и повышения тонуса матки. Он использовался в сочетании с массажем матки через прямую кишку. Это позволило стимулировать выведение гнойно-слизистого содержимого матки через приоткрытый канал шейки матки. Препарат применялся в дозе 30-50 ЕД на голову через день 4 раза за 10 дней курации.

Бициллин-3 (Bicillinum-3). Это смесь равных частей бензилпенициллина калиевой (или натриевой) соли, бензилпенициллина новокаиновой соли и N,N'-дибензилэтилендиаминовой соли бензилпенициллина (бициллина-1). Это тонкий белый или белый с слегка желтоватым оттенком порошок, который с водой образует гомогенную суспензию. Применяется только внутримышечно.

Антибиотик Бициллин-3 использовался в лечении для подавления патогенной микрофлоры, которая находится в полости матки. Для разведения антибиотика и обеспечения местной анестезии использовался 0,5% раствор новокаина. Бициллин-3 вводился в дозе 1200000 ЕД на голову через 1 день в течение курации (Е.И. Мозгов, 1971).

Ихглюковит (Ichglucovit) комплексный препарат, содержащий ихтиол, глюкозу, аскорбиновую кислоту, этиловый спирт и дистиллированную воду представляет собой однородную, маслянистую жидкость темно-коричневого цвета с запахом ихтиола.

Ихглюковит обладает антисептическим, противовоспалительным действием, улучшает обмен веществ, уменьшает болезненность и ускоряет регенерацию тканей в пораженном органе, стимулирует обратное развитие матки после родов.

Применяют его для профилактики и лечения эндометрита и субинвалюции матки коров в дозе 10,0 мл на 100 кг массы тела (М.А. Багманов, 2002).

Ихглюковит мы применяли для подавления патогенной микрофлоры в полости матки и повышения резистентности всего организма животного.

Кофеин-бензоат натрия (Coffeinum-natrii bensoas 20%). Это прозрачная бесцветная жидкость, выпускаемая в стеклянных флаконах по 10,20 и 100 мл. Показаниями к применению кофеина является различные болезни, сопровождающиеся снижением резистентности организма и ослаблению сердечной деятельности. Препарат вводят подкожно в дозе 5,0-10,0 мл на голову.

Кофеин в курсе лечения использовался для стимуляции сердечной деятельности и повышения сосудистого тонуса один раз в начале лечения (фото №3).

Тривит (Trivit pro injectionibus). Тривит получают путем растворения синтетических витаминов ретинола ацетата или пальмитата, холекальциферола и альфа-токоферола в масле. В 1мл раствора содержится 30000 МЕ витамина А, 40000 МЕ витамина D3,20 мг витамина Е и стабилизатор. Это прозрачная жидкость от светло-желтого до светло-коричневого цвета, со свойственным растительному маслу запахом. Выпускают стерильно расфасованные во флаконы по 10 и 100 мл. Применяют для профилактики и лечения гипо и авитаминозов А, D3 и Е и заболеваний, развивающихся на их фоне. Рекомендуется использовать при беременности, лактации, а также в период реабилитации организма после болезни. Вводят его внутримышечно или подкожно 1 раз в неделю в течение месяца крупному рогатому скоту в дозе 2,0-5,0 мл

Тривит применялся для повешения резистентности организма, ликвидации витаминной недостаточности.

5.2 Дифференциальный диагноз

При дифференциальной диагностике эндометрита следует учитывать, что нередко хронические эндометриты могут наблюдаться при ряде инфекционных и инвазионных заболеваний (бруцеллез, лепто-спироз и др.). Поэтому если имеются подозрения на наличие только что упомянутых, или других заболеваний, необходимо проводин бактериологические, серологические и аллергические исследования.

При диагностировании хронических эндометритов (особенно пио-, гидро-, миксометры) необходимо исключить беременность, так как последующее введение лекарственных средств беременному животному может вызвать аборт. Следует отметить, что высокая профессиинальная квалификация ветеринарного специалиста, тщательный сбор анамнестических сведений и последовательность в исследовании животного, применение в необходимых случаях специальных методов диагностики позволяют достаточно точно диагностировать форму хронического эндометрита и, следовательно, назначить научно обоснованное лечение.

В настоящее время для диагностики внутриматочной патологии широко используется гистероскопия. Наиболее частыми признаками воспалительного процесса в эндометрии, по нашим данным, являются: неравномерная толщина эндометрия - 31% случаев, полиповидные нарастания - 31,2%, неравномерная окраска и гиперемия слизистой оболочки - 22 и 12,8%, точечные кровоизлияния - 8%, очаговая гипертрофия слизистой оболочки - 8%. Трудности гистероскопической интерпретации данных связаны с отсутствием типичных макроскопических признаков хронического эндометрита, с очаговым характером воспалительного процесса и стертыми формами заболевания. Гистероскопия по макроскопическим признакам позволяет точно идентифицировать хронический эндометрит только в 16-35% случаев. При подозрении на хронический эндометрит гистероскопия важна для исключения всего спектра внутриматочной патологии, но для верификации диагноза во всех случаях необходимо проведение морфологического исследования эндометрия.

“Золотым стандартом” диагностики хронического эндометрита является морфологическое исследование эндометрия, которое должно быть обязательным звеном алгоритма обследования. Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки производят в среднюю и позднюю фазу пролиферации. В последние годы общепринятыми критериями морфологической диагностики хронического эндометрита являются:

1. Воспалительные инфильтраты, состоящие преимущественно из лимфоидных элементов и расположенные чаще вокруг желез и кровеносных сосудов, реже диффузно. Очаговые инфильтраты имеют вид “лимфоидных фолликулов” и располагаются не только в базальном, но и во всех отделах функционального слоя, в состав их входят также лейкоциты и гистиоциты.

2. Наличие плазматических клеток.

3. Очаговый фиброз стромы, возникающий при длительном течении хронического воспаления, иногда захватывающий обширные участки.

4. Склеротические изменения стенок спиральных артерий эндометрия, появляющиеся при наиболее длительном и упорном течении заболевания и выраженной клинической симптоматике.

Различия в трактовке гистологических особенностей хронического эндометрита обусловлены наличием вариантов, которые определяются особенностями общей и тканевой реактивности, этиологическим фактором, продолжительностью заболевания, наличием обострений и степенью их выраженности.

Алгоритм лечения хронического эндометрита должен учитывать все звенья патогенеза заболевания. В условиях постоянного присутствия повреждающего агента в ткани не происходит завершения заключительной фазы воспаления - регенерации, нарушается тканевый гомеостаз и формируется целый каскад вторичных повреждений. Нарушение микроциркуляции в эндометрии приводит к ишемии и гипоксии ткани, активированные макрофаги в очаге воспаления являются источником активных форм кислорода и перекиси водорода и запускают процесс перекисного окисления липидов и повреждение клеточных мембран. Постоянная антигенная стимуляция иммунокомпетентной системы вызывает ее функциональную перегрузку и развитие аутоиммунных реакций.

При дифференциальной диагностике пиометры, как и во всех других случаях, диагноз должен ставится комплексно. С помощью вагиноскопического обследования можно установить наличие или отсутствие выделения гнойного секрета из шейки матки. Если матка имеет толстые стенки и наполнена гнойным секретом, ее можно легко прощупать. Однако при пальпации ожиревших пациентов, крупных собак, в случае если стенки матки тонкие и жидкостного содержимого в ней мало этот метод становится не информативным. Надежная диагностика в этих случаях возможна только путем фронтальной рентгенографии. В каудо-вентральной части брюшной полости видны вздутые петли, по плотности похожие на мягкие ткани, тянущиеся в каудальном направлении между толстой и тонкой кишкой и мочевым пузырем. Очень информативна в таком случае и ультразвуковая диагностика.

Анализ содержания лейкоцитов показывает изменения, типичные для хронической инфекции, т.е. лейкоцитоз средней или высокой степени с нейтрофилией и моноцитиозом. Анализ содержания эритроцитов не показывает никаких изменений. Биохимические показатели в большинстве случаев в норме. Иногда повышен уровень мочевины.

В отдельных случаях пиометра приводит к тяжелой токсемии с угнетением костного мозга, что может выражаться в анемии и лейкопении периферической крови. Кроме того, токсины могут вызывать симптомы шока и приводить к преренальному повышению уровня мочевины. У таких пациентов наблюдаются тяжелые нарушения общего состояния.

Хронический скрытый эндометрит диагностируют по обнаружению во время охоты патологических выделений из матки. Они бывают не прозрачными, как в норме, а мутными с примесью хлопьев гноя и более обильными. Через 1--3 дня после охоты патологические выделения из матки прекращаются и вновь не отмечаются до наступления очередной течки и охоты. Более точно диагностировать хронический скрытый эндометрит, можно только используя один из приведенных ниже лабораторных методов.

Врач-гинеколог может организовать в условиях фермы, пункта искусственного осеменения или ветаптеки проведение лабораторного исследования цервикальной слизи для уточнения диагноза и характера воспалительного процесса у бесплодных животных. Для получения лохий или слизи сначала проводят туалет наружных половых органов, затем руку в полиэтиленовой перчатке вводят во влагалище, берут содержимое около шейки матки и помещают в баночку или пробирку, пишут номер или кличку коровы. Исследование материала проводят сразу, но можно и через 2-3 часа, если хранить в прохладном месте. При необходимости для уточнения причины бесплодия проводят микроскопию мазка шеечно-влагалищной слизи, биопсию эндометрия.

По И.С Нагорному. В лабораторную пробирку помещают 2 мл лохий и добавляют 2 мл 1%-ного раствора уксусной кислоты или 0,1%-ного раствора этакридина лактата. Если лохии получены от коровы с нормальным течением послеродового периода, то в пробирке образуется сгусток муцина, не разбивающийся при встряхивании; осаждающаяся жидкость остается прозрачной. В случае эндометрита образуется осадок, при легком встряхивании пробирки жидкость мутнеет.

Проба по В.С. Дюденко. Основана на выявлении в течковой слизи при наличии воспалительного процесса токсических веществ ароматического ряда (индол, скатол и др.). В пробирку берут 2 мл лохий или слизи и добавляют 2 мл 20% раствора трихлоруксуной кислоты. Смесь фильтруют через бумажный фильтр и к 2 мл безбелкового фильтрата добавляют 0,5 мл азотной кислоты. Содержимое кипятят одну минуту. После охлаждения к смеси добавляют 1,5 мл 33%-ного раствора едкого натрия.

При положительной реакции раствор желтеет. Желто-зеленый цвет указывает на умеренное катаральное воспаление эндометрия, оранжевый на гнойно-катаральное воспаление слизистой оболочки матки.

Проба по Г.М. Калиновскому. Основана на выявлении в слизи серо-содержащих аминокислот, которые отмечаются при воспалении. В пробирку вносят 4 мл 0,5%-ного раствора свинца уксуснокислого, к которому по каплям добавляют 20%-ный раствор едкого натрия до образования осадка (гидрата окиси свинца). Через 15-20 сек. снова добавляют раствор едкого натрия до исчезновения осадка. Затем в пробирку вносят 1,5 - 2,0 мл слизи, взятой у коровы перед осеменением. Содержимое пробирки легко встряхивают и нагревают, не доводя до кипения. При наличии скрытого эндометрита в результате образования сернистого свинца смесь приобретает цвет крепко заваренного чая.

Проба по В.Г. Гавришу. Основана на выявлении при воспалительных процессах гистамина, продуцируемого тучными клетками эндометрия. В пробирку вносят 2 мл мочи животного и добавляют 1 мл 5%-ного водного раствора ляписа. Кипятят в течение 2 мин. Образование черного осадка указывает на воспаление эндометрия, а коричневого или светлого на нормальное состояние.

Проба по Л.Л.Смирновой. Основана на адсорбции гнойного содержимого и позволяет проводить диагностику скрытого эндометрита не дожидаясь течки животного. Ватно-марлевый тампон с ниткой пропитывают ивасдэком (смесь, состоящая из вазелина - 72 части, ихтиола - 20 частей, АСД 3 8 частей), и с помощью корнцанга вводят во влагалище до шейки матки. Через сутки за нитку извлекают. При наличии эндометрита на тампоне будет белое пятно в виде капли гноя.

Использование: ветеринария, способы диагностики дисфункции яичников у коров. Сущность изобретения: способ предусматривает внутрикожное введение в области шеи антигена из тканей желтого тела яичников в дозе 0,2 мл. Диагностический препарат получают по общепринятой методике органных антигенов. Проверку реакции на антиген приводят через 12, 24 и 48 ч после введения. При наличии ограниченной папулы диаметром более 10 мм делают вывод о дисфункции яичников. Использование способа повышает точность диагностики персистентного желтого тела у коров, выявленность патологии, связанной с нарушением половой цикличности, составляет свыше 90% 1 табл.

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам диагностики дисфункции яичников у коров.

Известен способ диагностики персистентного желтого тела у коров, основанный на результатах двукратной (с 3-4 недельным интервалом) ректальной пальпации яичников. Наличие желтого тела в том же яичнике и прежних размеров дает основание поставить диагноз на персистентное желтое тело (В.П. Гончаров и В.А.Карпов. Профилактика и лечение гинекологических заболеваний коров. М. Росагропромиздат, 1991, с. 151).

Недостатком этого способа является продолжительность, после первого исследования необходимо записать местоположение, величину, форму, консистенцию желтого тела и вести повседневное наблюдение за животным. Способ трудоемок, необходимо проводить ректальное исследование.

Известен способ диагностики персистентного желтого тела, включающий применение подкожных и внутривымянных введений питуитрина [1] При наличии в крови гормона желтого тела матка слабо или совершенно не реагирует на массаж. После подкожной инъекции 4 мл питуитрина матка на пальпацию через прямую кишку отвечает сокращениями. После инъекции в сосок вымени 2 мл питуитрина молоко выделяется через катетер струей, а при наличии желтого тела каплями.

Недостатком этого способа является необходимость проведения ректального исследования, что обуславливает трудоемкость, негигиеничность метода. Этот способ требует высокой квалификации специалиста.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому способу является метод, используемый в медицинской гинекологической практике для диагностики дисфункции желтого тела, при котором применяется кожно-аллергический тест [2] Диагноз основан на введении 2,5%-ного масляного раствора прогестерона. Покраснение и увеличение папулы в период предполагаемого максимального функционального состояния желтого тела является положительной реакцией.

Недостатком этого способа является недостаточная точность данного диагностического теста и выявляемость патологического состояния, связанного с задержкой функционирования желтого тела.

Цель изобретения повышение точности диагностики. Животным вводят внутрикожно в область шеи 0,2 мл антигена из тканей желтого тела яичников и проводят проверку реакции через 12,24 и 48 ч после введения. При наличии ограниченной папулы диаметром более 10 мм делают вывод о дисфункции яичников, ставят диагноз персистентное желтое тело.

Для внутрикожного введения испытаны дозы антигена 0,1; 0,15; 0,20; 0,25; 0,30 мл. Положительная аллергическая реакция антигена при введении 0,2 мл; 0,25 мл; 0,30 мл; оптимальной дозой является 0,2 мл.

Наблюдение за проявлением реакции на месте внутрикожного введения аллергена показало, что изменения в виде образования папулы диаметром 10-15 мм происходит в срок от 24 до 48 ч. После указанного времени происходит рассасывание новообразования.

Способ диагностики апробирован на 103 коровах черно-пестрой породы (возраст 3-7 лет).

П р и м е р. Животные были разбиты на три группы по принципу аналогов. В первой группе 45 коровам с задержкой течки и половой охоты свыше 30 дней после отела ввели внутрикожно в область шеи 0,2 мл тканевого антигена. Во второй группе 58 коровам с предварительно установленным клиническим методом диагнозом персистентное желтое тело также ввели внутрикожно 0,2 мл тканевого препарата. В третьей группе 36 коровам с предварительно установленным диагнозом на персистентное желтое тело внутрикожно ввели 0,2 мл 2,5%-ного масляного раствора прогестерона. Третья группа была контрольной.

Проверку реакции на препараты производили через 12, 24 и 48 ч после введения. Положительной считали реакцию при наличии ограниченной папулы на месте инъекции диаметром более 10 мм, отрицательной реакцией отсутствие изменений после введения диагностического препарата.

Результаты диагностических исследований приведены в таблице.

В первой группе положительная реакция на введение антигена из тканей желтого тела яичника была отмечена у 16 коров (35,5%). При клиническом исследовании (ректальной пальпацией) яичников наличие персистентного желтого тела подтвердилось. У 29 коров (64,5%) персистентное желтое тело отсутствовало и нарушение половой цикличности было установлено другими причинами.

Во второй группе с заранее установленным наличием желтого тела на введение антигена реагировало положительно 55 (94,8%) из 58 коров. Отрицательная реакция была у 3 (5,2%) животных. В третьей группе на внутрикожное введение прогестерона реагировали положительно 10 (27,7%) коров. У 26 (72,3%) животных отмечена отрицательная реакция.

Таким образом, применение предложенного способа позволяет повысить точность диагностики персистентного желтого тела у коров. Выявляемость патологии, обусловленной функционированием желтого тела и нарушением функции яичников, с использованием антигена из тканей желтого тела яичников составляет 94,8% Это на 67,1% выше, чем при использовании кожно-аллергического теста, включающего введение 2,5% масляного раствора прогестерона.

Персистентным называется желтое тело, задержавшееся в яичнике небеременного животного свыше 25-30 дней. Оно может образовываться из желтого тела беременности, полового цикла или возникать путем лютеинязации фолликула без овуляции, т.е. как следствие ановуляторного полового цикла. В настоящее время не существует единого мнения о роли желтого тела в этиологии бесплодия и в частоте его распространения. Некоторые авторы считают, что персистентное желтое тело имеет место у 30-60%, другие oTWi?-i;a.oT его наличие даже у 80-90% бесплодных коров. В то же время имеются сведения о наличии пер-систентных желтых тел только у 5,2-7,4% бесплодных коров. Такое различие мнений, очевидно, связано с диагностическими неточностями. В течение года мы диагностировали персистентные желтые тела в яичниках 18% бесплодных коров, однако во второй половине зимнего стойлового содержания эта патология встречается чаще (К. Д. Валюшкин). Этиология. Причины задержания желтых тел в яичниках животных могут быть самыми разнообразными. Чаще всего персистентное желтое тело образуется в результате несбалансированного кормления, обусловливающего истощение, гиповитаминозы, минеральную недостаточность или ожирение. Персистенция желтых тел может быть обусловлена высококонцент-ратным типом кормления жвачных животных, односторонним силосным кормлением, отсутствием моциона, плохими условиями содержания. Зарегистрировано массовое задержание желтых тел у коров-кормилиц при подсосном методе выращивания телят. Частой причиной персистенции желтых тел являются патологические изменения в матке (воспаления, дистрофические процессы), а также другие заболевания животных, возникшие при нарушении обмена веществ, интоксикации и расстройства координирующего влияния центральной нервной системы на функции гипоталамуса, гипофиза и половых органов. Имеются сообщения о предрасположенности к персистенции желтых тел высокопродуктивных коров. В действительности причиной задержания желтых тел у таких коров является не высокая молочная продуктивность, а несбалансированность рационов под более высокий уровень продуктивности. Патогенез. Персистентное желтое тело выделяет в кровь гормон прогестерон, который задерживает развитие и созревание новых фолликулов, так как снижается секреция фолликулостимулирующего гормона передней доли гипофиза. Сократительная функция матки угнетается, чувст вительность к окситоцину резко падает, что приводит к прекращению секреции лютеолитического фактора. Так наступает персистенция желтых тел при неполноцен В яичниках задТрживается рост и созревание фолликулов. Живот-; ые не проявляют половой цикличности в течение 3 меси более после родов. Считают, что причиной персистениии желтых тел могут быть эндометриты, так как приэтом в гипоталамус постоянно поступают импульсы при раздражении матки микробами и токсинами Клинические признаки. Характерным признаком персистенции желтого тела является длительное отсутствие течки и охоты у животных после родов илм предыдущего полового цикла. При ректальн.олт исследовании находят низкую сократительную фуы-;и:-:;о матки. Иногда матка становится атоничной, дряблой, не реагирует на массаж и свисает в брюшную no;;oi"iL. У .молодых коров не всегда можно обнаружит!, изменения функции матки. В одном из яичников (чаще в правом) обнаруживают жалтое тело, выступающее над поверхностью в виде гржювидного возвышения с небольшим углублением в центре. Иногда в этом же или другом яичнике нахо-ЛИ несколько Фолликулов различной вели- Лечение. Нередко после устранения основной причины персистенции желтого тела эта железа перестает функционировать сама по себе и половая цикличность у животных восстанавливается. При наличии сопутствующих заболеваний матки нужно принимать меры по их устранению. Все терапевтические приемы при персистентных желтых телах можно подразделить на симптоматические и оперативные. Для ускорения рассасывания персиетентного желтого тела (рис. 145) прежде всего следует нормализовать условия жизни животного, применять массаж яичников через стенку прямой кишки с интервалом 2-3 дня на протяжении 2-3 недель; корове каждые 2-3 дня инъецировать подкожно по 2000-2500 ЕД фол-'"сулина. Рекомендуется использовать 0,5%-ный ра-< твор прозерина в дозе 2,0-2,5 мл путем подкожных инъекции, а через 1-5 дней 2-3 мл 1%-ного масляного !);" ' ""Ра синестрола. Можно применять СЖК или КЖК (6 МЕ/кг массы животного), а также их сочетание с нейро-тропными препаратами. Достаточный терапевтический эффект получают от применения 2 мл простагландинов, которые обеспечивают рассасывание желтого тела и рост фолликулов. Основным оперативным приемом при удалении желтого тела является энуклеация его через прямую кишку. Для выполнения этой операции руку вводят в прямую кишку и освобождают ее от каловых масс. В краниальной части прямой кишки захватывают яичник так, чтобы яичниковая связка оказалась между указательным и средним пальцами. Большим пальцем создают необходимое давление на ткани между паренхимой яичника и основанием желтого тела и отторгают желтое тело.

Изучали ультраструктурную характеристику желтых тел коров на восьмые -- двенадцатые сутки полового цикла. Установили, что крупные лютеоциты содержат ядро с большим количеством хроматина. Последний расположен не только по периферии, но ив других частях ядра в виде глыбок. Ядро обычно несколько вытянутое. При этом ярко выражена инвагинации оболочки ядра, по сравнению с желтыми телами стельных коров. Ядрышко небольшое, расположено в центре ядра, с хорошо выраженными фибриллярной и гранулярной зонами.

В цитоплазме число митохондрий снижено, но они более крупные. Встречаются гипертрофированные митохондрии с аномальной внутренней структурой, содержащей крупные вакуоли и электронноплотные включения. Преобладают митохондрии округлой формы, реже -- овальной или вытянутой. Внутренняя структура митохондрий несколько меняется. Появляется значительное число органелл с трубчатыми кристами с расширенными профилями и прозрачным содержимым.

Гладкий эндоплазматический ретикулум образован мелкими округлыми пузырьками или небольшими овальными мешочками, наружная мембрана которых не содержит рибосом. Характерно, что эти структуры очень хорошо развиты в инвагинациях ядра. Между пузырьками эндоплазматического ретикулу-ма и митохондриями располагаются группы свободных рибосом, образующих розетки. Этих структур относительно много. Гранулярный эн'доплазматический ретикулум умеренно развит и представлен короткими профилями, расположенными в перинуклеарной зоне клетки.

Комплекс Гольджи крупных лютеоцитов хорошо развит и расположен вблизи ядра. Он представлен параллельно ориентированными плотно расположенными ламеллами с узкими профилями.

Число плотных телец, имеющих различную форму и отграниченных четко выраженной однослойной мембраной, значительное. Во всех клетках, но в разной степени распространенности встречаются липосомы и аутофагосомы.

Четкой дифференциации между крупными лютеоцитами с разной синтетической активностью нет. Различия выражены между функционирующими клетками и гибнущими, структура которых описана ниже.

Тека-лютеиновые клетки желтого тела полового цикла содержат ядро вытянутой формы с хроматином, расположенным по периферии. В других зонах клетки он менее конденсирован и лежит в виде мелких гранул или пылевидной зернистости. Ядрышко хорошо выражено, располагается эксцентрично. Ядерная оболочка с хорошо выраженным трехслойным строением и многочисленными ядерными порами.

Цитоплазма бедна митохондриями, которые собраны группами у одного из полюсов ядра. Но как и в случае с крупными лютеиновыми клетками они очень крупные, с трубчатыми кристами. Внутренняя часть крист светлая, а межкристное пространство темное, содержит пылевидную массу. В отдельных митохондриях обнаруживаются внутримитохондриальные электронноплотные гранулы.

Между митохондриями и ядром располагаются профили гранулярного эндоплазматического ретикулума. Комплекс Гольджи обнаруживается в виде расположенных в узкой части цитоплазмы диктиосом. Это удлиненные, плотно расположенные мембранные структуры, практически не имеющие прослойки гиалоплазмы. Гладкая эндоплазматическая сеть умеренно развита и представлена округлыми, чаще вытянутыми структурами. Свободных рибосом не много. Встречаются единичные лизосомы, электронноплотные телеца, липосомы.

Наружная плазматическая мембрана имеет неглубокие впячивания и выросты, направленные в расширенное межклеточное пространство.

Строма желтого тела полового цикла богата фибробластами, фиброцитами, малодифференцированными макрофагами. Последние содержат части гибнущих клеток и липиды.

В желтом теле полового цикла межклеточные контакты между крупными лютеоцитами имеют вид простого контакта с широкими пространствами. Это характерно и для взаимодействий лютеоцитов не только между собой, но и с другими клетками. В межклеточных пространствах содержатся межклеточное вещество, вакуоли и отростки, редко контактирующие между собой.

Между гибнущими клетками эти пространства еще более широкие и менее электронноплотные. В них наряду с клеточными отростками можно обнаружить миелиноподобные тельца, капли липидов, коллагеновые волокна, фрагменты мембран и ультраструктур.

Строма желтого тела полового цикла представлена более грубыми колла-геновыми волокнами, расположенными в виде плотных пучков, по ходу которых расположены фибробласты, фиброциты и малодифференцированные макрофаги.

Сосуды желтого тела полового цикла развиты. Но капилляры находятся в разном морфофункциональном состоянии. Одни из них сильно расширены, кровенаполнены, в некоторых участках разрушены. Фенестры выражены плохо. Ядра эндотелиальных клеток пикнотизированы, гиперхромные. Цитоплазма также темная. Органеллы малочисленны и представлены единичными митохондриями с темным матриксом, лизосомами и темными профилями эндоплаз-матической сети. Вокруг таких сосудов отмечается выраженный периваскуляр-ный отек.

Часть капилляров, напротив сужены до исчезновения внутреннего просвета. Рисунок микроворсинок сглажен и цитоплазма эндотелия практически не содержит пиноцитозных пузырьков. Выросты и на базальной поверхности эн-дотелиоцита отсутствуют, и межклеточный компонент базального слоя частично разрушен. В некоторых случаях, наряду с периваскулярным отеком, наблюдается контакты с макрофагами. Последние, вероятно, участвуют в разрушении базальной мембраны и стенки капилляра.

Можно описать механизмы лютеолизиса. Прежде всего, это упрошение межклеточных контактов с развитием широких пространств. Таким образом клетки изолируются друг от друга и не способны кооперироваться для выполнения своей функции. Не последнюю роль играет соединительная ткань, которая фиброзно изменяется, становится грубоволокнистой и приводит к атрофии паренхимы железы.

Несомненна роль в лютеолизисе нарушений циркуляции крови в регионе микроциркуляторного русла. Расширение или сужение сосудов, дистрофия, разрушение их стенок и базальной мембраны с последующим фагоцитозом, пе-риваскулярные отеки и нарушения реологических свойств крови, очевидно, является пусковым механизмом последующих атрофических, дистрофических процессов в паренхиме и фиброзных изменений стромы железы.

По нашим данным ранними признаками начавшейся гибели клетки являются: расширения цистерн эндоплазматической сети, отделение рибосом от мембран шероховатой эндоплазматической сети и диссоциация полисом в моносомы. В дальнейшем на поверхности клеток образуются выпячивания, содержащие только цитозоль, происходит потеря микроворсинок.

В цитоплазме клеток и вне их появляются миелиновые фигуры, формирующиеся из вещества цитоплазмы клеток и мембран органелл, наблюдается набухание митохондрий. Все эти описанные изменения обратимы. Необратимые изменения морфологически ассоциируются с выраженной вакуолизацией митохондрий и их крист, повреждением плазматических мембран и набуханием лизосом. Эти картины, наблюдающиеся преимущественно в крупных лютсино-вых клетках, описаны нами выше.

Наряду с этими изменениями, связанными с нарушениями микроцирку-ляторного русла, вызванного гормональными изменениями (простагландины и т.п.), мы наблюдали гибель клеток путем апоптоза.

При этом наиболее характерными признаками являются конденсация и фрагментация ядерного хроматина, а также сморщивание клетки с сохранением целостности органелл. В дальнейшем клетка распадается на апоптозные тельца, представляющие собой мембранные структуры с заключенными внутри органеллами и частицами ядра. Затем апоптозные тельца фагоцитируются и разрушаются при помощи лизосом окружающими клетками-макрофагами.

Ультраструктурная характеристика персистентных желтых тел

Крупные лютеиновые клетки персистентных желтых тел характеризуются небольшим ядром с глубокими и широкими инвагинациями, что придает ему своеобразное крупнолопастное строение. Хроматин расположен по периферии в виде крупных глыбок или заполняет почти всю кариоплазму. Ядрышки обнаруживаются редко и представлены преимущественно гранулярным компонентом. Поры в оболочке ядра обнаруживаются с трудом.

Цитоплазма содержит много жировых капель, представляющих собой нейтральные жиры. Митохондрии гиперплазированные, содержат вакуолизиро-ванные или разрушенные кристы, темные включения, иногда занимающие почти всю органеллу. Гладкий эндоплазматический ретикулум представлен расширенными профилями. Шероховатый эндоплазматический ретикулум не обнаруживается, а рибосомы в небольшом количестве располагаются в цитоплазме в виде небольших скоплений полисом.

Тека-лютеиновые клетки характеризуются вытянутой формой и эксцентрично расположенным ядром. Ядро неправильной формы, с небольшими инвагинациями, глыбками хроматина, расположенного по периферии, и мелкозернистой структурой в центральных зонах кариоплазмы. Ядрышко темное, представлено фибриллярным компонентом.

Цитоплазма содержит капли липидов темного цвета и более светлые лю-теосомы. Митохондрий немного, они располагаются по одной две в участках цитоплазмы, не содержащей липиды. Митохондрии небольшого размера с трубчатыми или разрушенными кристами. Рядом с митохондриями располагаются единичные, короткие профили шероховатого эндоплазматического рети-кулума. В других участках цитоплазмы встречаются небольшие скопления полисом. Гладкий эндоплазматический ретикулум встречается в виде единичных округлых структур. Клеточная мембрана неровная, клетки располагаются на значительном расстоянии друг от друга.

Тека-лютеиновые клетки почти сплющенной формы, содержат вытянутое ядро с глубокими инвагинациями, узким ободком цитоплазмы бедной органел-лами и содержащей капли липидов.

Для персистентных желтых тел характерно обилие клеток соединительной ткани: фибробластов, фиброцитов, макрофагов различной степени дифференцировки. Между клетками формируются своеобразные взаимоотношения. С одной стороны, характерны широкие межклеточные пространства между крупными лютеоцитами. Тека-лютеиновые клетки имеют тенденцию близко располагаться к крупным лютеоцитам и образовывать с ними или другими текалю-теиновыми клетками в небольших участках цитоплазмы простые межклеточные контакты.

В персистентных желтых телах мы обнаружили ярко выраженную активность макрофагов. Макрофаги внедряются в разрушающуюся по типу липофа-нероза крупную лютеиновую клетку. У макрофага клеточная мембрана сохраняется, то у лютеиновой клетки она видна только в отдельных участках межклеточного взаимодействия.

Необходимо подчеркнуть, что гибель клеток в персистентных желтых телах развивается по типу дистрофии, а затем некроза. В начале отмечаются обратимые изменения органелл, в дальнейшем разрушение клеточных мембран, прежде всего у митохондрий, появление крупных капель нейтральных жиров. В дальнейшем развивается фокальный некроз цитоплазмы лютеоцитов, который заканчивается гибелью клетки с последующим фагоцитозом ее остатков макрофагами.

...