Закономерности развития тканей толстой кишки у плодов и новорожденных телят черно-пестрой породы

Размещено на http://www.allbest.ru/

Закономерности развития тканей толстой кишки у плодов и новорожденных телят черно-пестрой породы

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

ЗДОРОВИНИН ВЛАДИМИР АЛЕКСАНДРОВИЧ

Казань - 2007

Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии животных Аграрного института в ФГОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва» (г. Саранск).

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор, Тельцов Леонид Петрович

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана

Муллакаев Оразали Турманович доктор ветеринарных наук, профессор Уральская государственная сельскохозяйственная академия

Дроздова Людмила Ивановна доктор ветеринарных наук, профессор Российский университет дружбы народов Селезнёв Сергей Борисович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Ивановская государственная сельскохозяйственная академия им. Д.К. Беляева»

Защита состоится «____» ______________2007г. в «____» часов на заседании диссертационного совета Д - 220.034.01 при ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана». Адрес: 420074, г. Казань, ул. Сибирский тракт, д.35.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана».

Автореферат разослан «____»__________________2007г.

Учёный секретарь

Диссертационного совета, профессор Ежкова М.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Знание закономерностей развития органов пищеварения в онтогенезе являются биологической предпосылкой для разработки системы полноценного кормления, организации профилактики и диагностики различных заболеваний (Л.Эрнст, 2004). Особый практический интерес представляет изучение органов пищеварения у жвачных, которые наиболее «экономично» трансформируют грубые части растений в продукты питания, требуемые для человека (П.В. Груздев, 1972; П.А. Ильин, 1972; Л.В. Давлетова, 1974; Л.П. Тельцов и др. 1993 - 2001).

Исследование органов пищеварения у сельскохозяйственных животных преследует цель не только раскрыть сущность явления жизни, но и возможность управления жизненными процессами для повышения продуктивности животных. Эти исследования необходимы и для практики, так как гибель новорожденных телят от заболеваний органов пищеварения остаётся высокой (Анохин, 1985; И.И.Тарасов, 1991; К.Х. Папуниди и др. 1996). Однако закономерности структурно-функционального развития пищеварительной системы и её органов до сих пор недостаточно изучены.

Анализ данных литературы показывает, что толстая кишка у плодов и у новорожденных телят (в раннем онтогенезе) черно-пестрой породы с гистологической и цитохимической точек зрения изучена недостаточно. Детального изучения развития тканей стенки толстой кишки у плодов коров и новорожденных телят черно-пестрой породы не проведено.

Познание закономерностей развития тканей стенки слепой, ободочной и прямой кишок необходимы как для теории познания развития, так и для практики (В.Ф. Лысов, 1988; В.И. Ильдутова, 1989).

1.2. Цель и задачи исследования. Целью нашей работы является изучение возрастных морфофункциональных закономерностей развития органов толстой кишки, стенки и ее оболочек и составляющих тканей (эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной и их, клеточных дифферонов) у плодов и новорожденных телят на разных уровнях организации (органном, тканевом, клеточном) для выявления общих закономерностей онтогенеза и породных особенностей.

В соответствии с целью поставлены следующие задачи:

1) изучить динамику роста массы и длины толстой кишки и ее составляющих слепой, ободочной и прямой кишок на фоне роста массы и длины тела плодов и телят от рождения до 15 суток;

2) проследить сравнительную возрастную архитектонику и закономерности развития оболочек кишечной стенки слепой, ободочной и прямой кишок от 2-месячного возраста плода до 15-суточного возраста телят;

3) цито - и гистологическими, цитометрическими, электронно-микроскопическими методами исследования изучить возрастные особенности развития клеточных дифферонов эпителиальной, соединительной, мышечной и нервной тканей стенки толстой кишки;

4) цитохимическими методами изучить возрастную динамику локализации нуклеопротеидных, белковых, углеводных веществ в клеточных дифферонах эпителиальной, соединительной, мышечной и нервной тканей стенки толстой кишки у плодов и телят новорожденного этапа развития;

5) гистохимическими методами исследования изучить динамику и локализацию ферментов в клетках различных тканей стенки толстой кишки: - щелочной фосфатазы (ЩФ), кислой фосфатазы (КФ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), сукцинатдегидрогеназы (СДГ), коферментов никотинамидаденин-динуклеотиддегидрогеназы (НАДН₂ДГ) и никотинамидаденинди-нуклеотидфосфатдегидрогеназы (НАДФН₂ДГ) на плодном и новорожденном этапах развития. нуклеопротеидный белковый нервный дифферон

1.3. Научная новизна. Прослежена динамика роста массы и длины толстой кишки и ее составляющих: слепой, ободочной и прямой кишок на плодном и новорожденном этапах развития. Установлена корреляция между ростом массы и длины тела и толстой кишкой, между толстой кишкой и ее составляющих органов. Впервые выявлены периоды и этапы в развитии толстой кишки в целом как органа и её составляющих: слепой, ободочной и прямой.

Впервые изучены процессы формирования, развития и дана возрастная архитектоника стенки толстой кишки, ее слизистой, мышечной и серозной оболочек и их структур.

Изучена закладка, формирование, дифференциация и развитие по стадиям плодного этапа и у новорожденных телят эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей толстой кишки и их коррелятивная взаимосвязь. Впервые установлены этапы развития тканей стенки толстой кишки в раннем онтогенезе.

Изучена закладка, формирование и специализация иммунных структур стенки толстой кишки в эмбриогенезе и возрастная динамика цитометрических показателей площади ядра и цитоплазмы, цитоплазменно-ядерного отношения, митотического индекса и индекса дегенерации (апоптоза) клеток эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей толстой кишки. Установлены стадии дифференцировки клеточных дифферонов тканей стенки толстой кишки в раннем онтогенезе.

Изучена впервые возрастная динамика нуклеиновых кислот, нуклеопротеидов, кислых и основных белков, белковых групп, в клетках эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей стенки толстой кишки у плодов и телят от рождения до 15-суточного возраста.

Установлена локализация и возрастная динамика ферментов: ЩФ; ЛДГ; СДГ и коферментов НАДН₂ДГ и НАДФН₂ДГ в эпителиоцитах слизистой оболочки на плодном и новорождённом этапах развития.

Впервые предложена периодизация развития эпителиальной, соединительной, гладкой мышечной, нервной тканей стенки толстой кишки в раннем онтогенезе, которая открывает новую проблему в науке - изучение периодизации развития тканей органов организма.

1.4. Практическая значимость работы. Полученные данные расширяют имеющиеся в настоящее время сведения: о возрастной динамике массы и длины тела плодов и телят новорожденного этапа развития чёрно-пёстрой породы; массы и длины толстой кишки и ее составляющих: слепой, ободочной и прямой кишок; о возрастной динамике формирования структур слизистой, мышечной, серозной оболочек толстой кишки; о возрастной динамике закладки, формирования и дифференциации эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей стенки толстой кишки и их, клеточных дифферонов; локализации нуклеопротеидных, белковых, углеводных веществ в клетках эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей; о гистохимической активности аэробного и анаэробного дыхания, митохондриальных и внемитохондриальных энергетических процессов; гистохимической активности щелочной и килой фосфатазы эпителиоцитов слизистой оболочки.

Полученные данные по развитию толстой кишки и ее оболочек, о закономерностях развития эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей стенки толстой кишки у плодов и телят до 15-суточного возраста являются показателем "нормы" и могут быть использованы в ветеринарной и животноводческой практике для: организации системы научно обоснованного полноценного кормления; изучения влияния факторов внешней среды на развитие плода; разработки методов диагностики и способов лечения заболеваний толстого отдела кишечника у телят этапа новорожденности.

Положения диссертации: о развитии оболочек кишечной стенки; развитии и дифференциации клеток эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей; о возрастной динамике локализации нуклеиновых, нуклеопротеидных, белковых, углеводных веществ являются фундаментальными и могут использоваться при подготовке монографий, учебников, учебных пособий и руководств для учебного процесса на ветеринарных, зооинженерных и биологических факультетах.

Установленные закономерности и периодизация развитии эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей толстой кишки открывают новое направление для изучения проблемы гистогенеза и органогенеза.

1.5. Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: Огаревских чтениях (Саранск, 1995, 1998, 2000, 2002, 2003, 2004, 2007); Республиканских научно-производственных конференциях (Казань, 1995, 1996, 2000, 2006); на Международных конференциях по актуальным проблемам биологии и ветеринарии (Барнаул, 1995; Ульяновск, 2003; Троицк, 2005); на Международном координационном совещании (Воронеж, 1997), на Российской конференции по инновационным технологиям (Ульяновск, 2003); по патологической анатомии животных (Москва, 2003), по актуальным проблемам интенсивного развития животноводства (Пенза, 2005); по приоритетным направлениям (Киров, 2005), по проблемам биологии в животноводстве (Боровск, 2006); конференции, посвященной 75-летию профессора С.А. Лапшина (2003); на конференции ветеринарных морфологов (Улан-Удэ, 1998); на съездах АГЭ Российской Федерации (Тюмень, 1994; Казань, 2004); на Международной научно-практической конференции, посвященной памяти профессора В.М.Куликова (Волгоград, 2005), профессора А.И. Бабухина (Орел, 2006); на конгрессах Международной ассоциации морфологов (Тверь, 2006); на 3-ей научной конференции морфологов (Симферополь, 1995); на юбилейной конференции РАЕ (Москва, 2005); на Юбилейной научной общероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы науки и образования» (Москва, 2006).

1.6. Реализация результатов исследования. Основные положения диссертации опубликованы в 45 научных работах, в том числе 7 в журналах рекомендованных ВАК, в монографии Л.П. Тельцов, В.А. Здоровинин, О.В. Красовитова "Функциональная морфология толстой кишки в эмбриогенезе. - Саранск: Изд-во Мордов. ун-та, 2001. -173 с. и в центральных журналах: Морфология, 2002. Т 121. №2-3; Морфология, 2004. №4; Морфология, 2006. №1-2; Морфология, 2006. №4, №5; Морфологические ведомости, 2004. №1-2; Морфологические ведомости, 2005. №3-4; Морфологические ведомости, 2006. №1-2; Материалы Всероссийской конференции. Казань, 1995, 1996, 2000, 2002, 2006.

1.7. Внедрение результатов исследования. Материалы исследования используются в научных и учебных целях на кафедрах анатомии и физиологии, гистологии и эмбриологии: Московской, Казанской, Санкт-Петербургской академиях ветеринарной медицины; Брянской, Ивановской, Костромской, Нижегородской, Чувашской, Ульяновской, Ставропольской, Якутской государственных сельскохозяйственных академиях; Алтайского, Воронежского; Кубанского, Омского, Оренбургского, Саратовского агроуниверситетов; Мордовского и Хакасского государственных университетов.

1.8. Основные положения, выносимые на защиту 1. Асинхронность и корреляцию развития массы и длины тела, массы и длины толстой кишки, а также слепой, ободочной и прямой кишок у плодов и телят новорожденного этапа развития черно-пестрой породы;

2. Возрастную архитектонику и специфичность строения кишечной стенки и ее оболочек (слизистой, мышечной, серозной) и структур (ворсинок, крипт, лимфоузелков, межмышечного и подслизистого нервных сплетений) слепой, ободочной и прямой кишок (по стадиям и этапам развития);

3. Специфичность закладки, дифференциации и развития эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей и их, клеточных дифферонов стенки толстой кишки у плодов и телят новорожденного этапа развития;

4. Динамику нуклеиновых кислот, белков, полисахаридов в клеточных дифферонах эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей толстой кишки у плодов и телят новорожденного этапа развития;

5. Периодизацию развития эпителиальной, соединительной, мышечной, нервной тканей стенки толстой кишки на раннем онтогенезе крупного рогатого скота черно-пестрой породы.

1.9. Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 513 страницах машинописного текста и включает разделы: общая характеристика работы, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследования, выводы, практические предложения, список использованной литературы, который включает 531 источник, в том числе 94 зарубежных. Работа иллюстрирована 101 таблицами и 183 рисунками (графиками и микрофотографиями).

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Данная работа выполнена по теме РАН, рекомендации Минобразования, Мордовского госуниверситета и кафедры анатомии и физиологии животных «Механизмы и закономерности индивидуального развития животных и птиц (в норме и при патологии)» № госрегистрации 01870009151. Работа посвящена развитию толстой кишки крупного рогатого скота в раннем онтогенезе (у плодов и новорожденных телят черно-пестрой породы).

Исследования проведены на 89 датированных плодах и 39 телятах чёрно пёстрой породы новорожденного этапа развития, от рождения до 15 суточного возраста, разводимых в хозяйствах Республики Мордовия. Гистологические и гистохимические исследования проводились в научно-исследовательской лаборатории «Гистофизиология» кафедры анатомии и физиологии животных Аграрного института Мордовского госуниверситета. Материалом для исследований служили толстая кишка и её составляющие: слепая, ободочная и прямая кишки. У плодов и телят определяли пол животного, измеряли затылочно-копчиковую длину тела и его массу.

Для гистологических и гистохимических исследований кусочки материала брали: в слепой - из среднего участка; в ободочной - из краниального, среднего и каудального участков; в прямой - из краниального и каудального участков. Отобранный материал фиксировали в 12,0 % растворе формалина, в жидкости Карнуа и в фиксаторе по Максимову, уплотнение материала проводили путем заливки в парафин (Меркулов, 1969; Кононский, 1976).

Для исследования динамики активности ферментов в кишечных энтероцитах материал подвергали ускоренному замораживанию жидким азотом в сосуде Дьюара, во время взятия, затем доставляли в лабораторию и готовили срезы на криостате.

Динамику роста массы и длины толстой кишки изучали на фоне роста массы и длины тела плодов и телят новорожденного этапа развития. Динамику роста массы и длины слепой, ободочной и прямой кишок изучали на фоне роста массы и длины толстой кишки.

Изучение специфичности возрастных особенностей строения кишечной стенки и составляющих ее оболочек в слепой, ободочной и прямой кишках проводили на депарафинизированных срезах, полученных на роторном микротоме МПС-2, окрашенных гематоксилин-эозином (Роскин,1951; Меркулов, 1969; Кононский, 1976). Кишечные эндокриноциты выявляли диазометодом по Пирсу (1962) и импрегнацией по Футу (Меркулов, 1969). Ретикулярные (аргирофильные) волокна соединительной ткани импрегнацией по Футу и Тибор-Пан-Снесареву. Эластические волокна окрашивали по Вейгерту, коллагеновые (незрелые и зрелые) по Маллори и Ван-Гизону. Нервные клетки выявляли импрегнацией по Бильшовскому-Гросс, и азотокислым свинцом по Чилингаряну (Меркулов, 1969). Хроматиновые вещества нервных клеток окрашивали по Нисслю, нейрофиламенты - по Кахалю-Бильшовскому.

Толщину всей кишечной стенки, кишечной стенки без ворсинок, высоту и ширину ворсинок, глубину и ширину крипт, толщину слизистой, мышечной и серозной оболочек измеряли при помощи окуляр-микрометра ОК - 15, во всех возрастных группах. Кроме того определяли относительный рост в процентах (Б₁) и относительный прирост (Б₂) по Броди толщины слизистой, мышечной и серозной оболочек ко всей кишечной стенке.

Цито- и гистохимическими методами исследования выявляли рибонуклеопротеиды (РНП) и дезоксирибонуклеопротеиды (ДНП) РНК и ДНК метиловым зеленым-пиронином по Браше, ДНК- по Фельгену-Розенбеку (Пирс, 1962; Лилли, 1969; Кононский, 1976).

Реакции на основные, кислые и суммарные белки проводили в водном и сулемовом растворе бромфенолового синего (Елисеев, 1967), сулемабромфеноловым синим по Бонхегу (Пирс, 1962).

Сульфгидрильные (-SH-) группы белков определяли по Барнетту-Зелигману, дисульфидные (-SS-) - реакцией с надмуравьиной кислотой, альциановым синим по Адамсу и Слоперу. Совместное выявление этих групп проводили реакцией по Барнетту-Зелигману. Аминогруппы (-NH-) белков выявляли по Ясума и Ичикава, по Берстону, карбоксильные (-СООН-) группы - по Барнету-Зелигману (Пирс, 1962; Кононский, 1976).

Гликоген и гликопротеиды выявляли ШИК-реакцией (Шифф, или РАЗ) по Шабадашу (Меркулов, 1969). Контролем при проведении реакции на гликоген служили препараты, предварительно обработанные б-амилазой. Гликопротеиды исключались из реакции обработкой препарата абсолютным спиртом или хлороформом.

Гликозаминогликаны (ГАГ - углеводные компоненты протеогликанов) выявляли 0,1 % водным раствором толуидинового синего при различных значениях рН (2,2; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; 7,0, 7,5), коллоидным железом по Хейлу (пропись Виноградова, Черемых, 1957; Мюллера-Митина, 1966), основным коричневым по Шубичу (Шубич, 1961), альциановым синим по Стидману и сульфатированием по Елисееву.

Электронно-микроскопические исследования (ЭМИ) слепой, ободочной, прямой кишок проводились на ультратонких срезах в лаборатории электронной микроскопии медицинского факультета МГУ им. Н.П. Огарева, при консультации профессора П.П. Круглякова. Материал предварительно исследовался на полутонких срезах, окрашенных толуидиновым синим. Ультратонкие срезы делали на ультрамикротоме Ultrakut с помощью стеклянных ножей. Срезы, смонтированные на сетках или блендах, окрашивались уранил-ацетатом (5,0% раствором в метиловом спирте) в течение 10-12 минут, контрастировались цитратом свинца по E.Reynolds (1963) 3-5 минут или по J.Verable, R.Coggeshae (1965) 1-1,5 минуты и просматривались в электронном микроскопе ЭМВ-125.

Гистохимические исследования активности окислительно-восстановительных ферментов (Диксон, Уэбб, 1982) эпителиоцитов ворсинок и крипт проводили на криостатных срезах. Фермент сукцинатдегидрогеназу (СДГ - КФ 1.3.99.1) выявляли по методу Нахласа, Валькера и Зелигмана (Кононский, 1976), фермент лактатдегидрогеназу (ЛДГ - КФ 1.1.1.27) по методу Гесса, Скарнели и Пирса (Пирс, 1962), ферменты никотинами-дадениндинуклеотиддегидрогеназу (НАДН₂ДГ - КФ 1.6.99.3) и никотинами-дадениндинуклеотидфосфатдегидрогеназу (НАДФН₂ДГ - КФ 1.6.99.1) по методу Нахласа, Уокера и Зелигмана (Лойд, 1982). Количественную оценку активности ЛДГ, СДГ, НАДН₂ДГ и НАДФН₂ДГ проводили методом подсчета гранул диформазана по В.В. Семеновой-Тян-Шанской и Л А Сайковой (1975). Активность щелочной фосфатазы (ЩФ) определяли по Гомори в модификации Фредиксона и методом азосочетания с применением соли диазония 5-хлортолуидин (Пирс, 1962), кислую фосфатазу (КФ) выявляли по Burstone (1962) в модификации З. Ллойда (1982) с 1-нафтилфосфатом, также в нефиксированных срезах с инкубацией 60 минут при 37^о С.

Полученные цифровые данные обрабатывали методом вариационной статистики с использованием критерия t Стьюдента. Вычисления производили на CЕLERON - 1700, с помощью программы MegСTAT. Использован текстовой процессор Microsoft Word 2003. Динамика показателей отражена на графиках, построенных с использованием программы Microsoft Word 2003.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1.Морфология толстой кишки на плодном этапе развития и у новорожденных телят

Познание законов индивидуального развития является биологической предпосылкой для животноводства при разработке системы полноценного питания, организации профилактики и диагностики различных заболеваний. Научная школа профессора Л.П. Тельцова занимается изучением развития пищеварительной системы. Впервые разработана периодизация развития пищеварительной системы у животных в онтогенезе.

Полученные данные по исследованию динамики роста, массы и длины тела, массы и длины толстой кишки у плодов от 2 мес. до 15-сут. возраста телят свидетельствуют о неравномерности их роста и асинхронности. Масса тела плодов и телят увеличивается в 1637,1 раза, длина тела - в 11,9 раза. Масса толстой кишки увеличивается - в 113,6 раза, длина - в 14,8 раз. Наиболее четко неравномерность роста массы и длины тела, массы и длины толстой кишки у плодов и телят прослеживается при изучении относительного прироста по напряженности роста в % по Броди. Максимальная интенсивность роста массы и длины тела плодов крупного рогатого скота установлена на раннеплодной стадии (от 2 до 5-месячного возраста) (В.А.Здоровинин 1994; Л.П. Тельцов, В.А. Здоровинин, О.В. Красовитова 2001). Снижение напряженности роста массы и длины тела и толстой кишки наблюдается на 1 сутках, увеличение - на 8 и 10 сутках и снижение у телят в возрасте 15 сут. В то время как в абсолютных величинах масса и длина тела плода и его толстой кишки интенсивно увеличивается на позднеплодной стадии (от 7-мес. плода до рождения) и несколько меньше на новорожденном этапе. О неравномерности роста массы и длины тела у плодов и телят крупного рогатого скота отмечали на других породах С.Н. Боголюбский (1968), Л.K. Хабибуллина (1972), Л.П. Тельцов (1984) и др. Проведенные исследования по черно - пестрой породе показали, что имеются породные особенности в характеристике динамики прироста массы и длины тела в абсолютных и относительных (в % по Броди) величинах. Динамика роста массы и длины толстой кишки у плодов и телят, коррелятивная связь изучена впервые. Морфофункциональная зрелость относительного роста массы толстой кишки выявляется: в слепой кишке на 7 мес., ободочной - на 6 мес., прямой - на 5 мес. По линейному показателю относительного роста длины толстой кишки выявляется: для слепой кишки на 9 мес.; ободочной - на 8 мес.; прямой - на 7 мес.

Установлено, что развитие массы толстой кишки и её отделов - слепой, ободочной и прямой имеет одинаковый биологический ритм. Он равен 2 месяцам, как и роста массы тела, хотя во времени они не совпадают. В динамике роста длины тела и толстой кишки установлен биологический ритм - около 3 -4 месяцев. Коэффициент корреляции между динамикой роста массы тела и массы толстой кишки за плодный и за этап новорожденности составляет r = +0,58, между массой тела и длиной тела - r = +0,52, между ростом массы толстой кишки и ее отделов составляет: для слепой кишки r = +0,60, ободочной - r = +0,68, прямой - r = +0,57. Коэффициент корреляции между динамикой роста длины толстой кишки и длины тела у телят на этапе новорожденности составляет r = +0,96, между длиной толстой кишки и ее составляющих: для слепой r = +0,89, ободочной - r = +0,94, прямой - r = +0,87.

Мы разделяем мнение Л.П. Тельцова (2000), что в плодном этапе развития крупного рогатого скота необходимо выделять три стадии развития: раннеплодную (от 2 до 5 месяцев), среднеплодную (от 5 до 7 мес.), позднеплодную (от 7 мес. до рождения) и этап новорожденности (у телят от рождения до 10-15 суток), вместо предложенных Г.А. Шмидтом (1961 - 1968) двух периодов - раннего (от 2 до 4 мес.) и позднеплодного (от 4 мес. до рождения) и С.Н. Боголюбского (1968) - двух предпериодов: раннего (от 2 до 6 мес.) и позднего (от 6 мес. до рождения).

3.2. Развитие стенки толстой кишки её оболочек и структур.

Полученные данные по развитию стенки толстой кишки и ее оболочек у плодов и телят новорожденного этапа развития крупного рогатого скота черно-пестрой породы показали: во-первых, что на среднеплодной (от 5 до 7 мес. плода), позднеплодной (от 7 мес. до рождения) стадиях и на новорожденном этапе развития (от рождения до 15 - сут.) толстая кишка специализируется на слепую, ободочную и прямую кишку. Специализация происходит по следующим показателям: 1) по динамике роста и развитию слизистой, мышечной и серозной оболочек кишечной стенки; 2) по росту толщины, всей кишечной стенки и ее слизистой, мышечной и серозной оболочек; 3) по формированию ворсинок, по формированию крипт, по количеству ворсинок и крипт на единицу длины измерения.

Установлено, что формирование кишечных ворсинок происходит по схеме как и в тонкой кишке: образования эпителиальных выпячиваний (40 - 50 сут) > эпителиально-соединительнотканных выростов или временных ворсинок (50 - 70 сут) > истинных кишечных ворсинок 1 генерации > ворсинки 2 генерации. Процесс смены истинных ворсинок на плодном этапе развития происходит с биологическим ритмом 2-3 мес. Установлено, что образование "зрелых" ворсинок 1, 2 генерации в разных отделах толстой кишки, происходит неодновременно. В прямой кишке происходит формирование ворсинок 1 и 2 генераций у (плодов на 2,5 - 5,5 мес., а в слепой и ободочной кишках соответственно - на 3, 7 мес.). Вершины "зрелых" ворсинок подвергаются деструкции и экструзии эпителия в просвет кишечника. Процесс деструкции ворсинок в толстой кишке у плодов коров отмечали в своих работах К.Г. Щелканов (1972) по красной степной, J.H. Abell (1969) - по остфризской породе. Процесс закладывания крипт толстой кишки формируется в два этапа: первоначально временные первичные крипты (как и в тонкой кишке), позднее истинные (дефинитивные) кишечные крипты толстой кишки первой генерации. Первичные крипты формируются у плодов 3 - 4 мес., вторичные - 5 - 7,5 мес. Нами установлено, что вторичные крипты образуются путем трансформации основания дегенерирующих ворсинок и роста в глубь первичных крипт. Специфические крипты в толстой кишке активно участвуют в процессах полостного эмбрионального пищеварения (Криницин, Ильин, Тельцов, 1972; К.Г. Щелканов, 1972; Дзигилевич, 1974). Нами предложена новая концепция формирования крипт в толстом отделе кишечника двухэтапного формирования и новый механизм трансформации прежних ворсинок и крипт в новые истинные крипты толстой кишки. Первый этап формирования крипт стенки толстой кишки - это закладка желез по типу тонкой кишки Л.П. Тельцов, П.А. Ильин, В.А. Столяров (1993). От основания ворсинок в слизистую оболочку внедряются эпителиальные тяжи, которые и формируют крипты и ее отделы (дно, боковые поверхности, устье). Второй этап формирования крипт - это образование дефинитивных крипт. Механизм формирования их имеет следующие особенности. После атрофии вершины ворсинок первой генерации стенки толстой кишки, от основания этих ворсинок первичная крипта превращается в устье новой крипты второй генерации. Дно крипт первой генерации углубляется в слизистую оболочку и формирует боковую поверхность (тело) и в дно железы второй генерации.

Цитометрическими исследованиями впервые установлено, что в развитии стенки толстой кишки имеются различные темпы роста ее толщины, как и составляющих оболочек. Это выявляется при обработке данных по Броди. В слепой кишке наблюдаются повышенные темпы роста толщины стенки на 3, 9 месяцах, в проксимальном участке ободочной - на 3, 5, 7, в среднем участке этой кишки - на 3, 5, 7, в дистальном - на 3, 5, 7, 9 мес., а в прямой в проксимальном - на 3, 5 мес., в дистальном - на 5, 7 мес. Несмотря на разные возрастные сроки повышенных темпов роста стенки и ее оболочек в слепой, ободочной и прямой кишок, в целом, устанавливается биологический ритм в 2 месяца. Развитие толстой кишки (как органа), ее стенки и оболочек подчинено каудально-краниальному и брыжеечно-дистальному градиентам асинхронного развития.

Критической фазой развития толстой кишки и ее органов является возраст плода от 5 до 7 мес. и 5-7 суток до рождения. В этом возрасте установлено: 1) специфическая перестройка кишечной стенки; 2) дегенерация и деструкция вершин зрелых ворсинок; 3) образование специфических крипт (первой дегенерации); 4) интенсивное формирование пучков мышечной оболочки, жировых образований, солитарных фолликул; 5) асинхронность развития оболочек кишечной стенки. Диффенерация стенки и ее тканей прямой кишки происходит раньше, чем в ободочной и слепой. На становление каудально-краниального градиента развития кишечной стенки и ее тканей указывает А.А. Поляков (1959), А.П. Амвросьев (1970). Ф.И. Намазов (1965), К.Г. Щелканов (1972), К.И. Дзигилевич (1974).

3.3. Закономерности развития эпителиальной ткани стенки толстой кишки.

Гистогенез эпителиальной ткани стенки толстой кишки сопровождается клеточной дифференцировкой. У плодов на 80 - 95 сутки в слизистой оболочки, среди эпителиоцитов, выявляются бокаловидные клетки дифференцирующиеся из молодых "несозревших" призматических каемчатых клеток. На 80 - 100 сут. выявляются пирамидальные (клиновидные) клетки. В их цитоплазме выявляются мелкие гранулы, локализованные ближе к базальной мембране (базально-зернистые клетки). Дифференциация клеток сопровождается изменением их формы - призматические клетки превращаются в конусовидные (бокаловидные) клетки, имеющие щеточную каемку (Здоровинин 1994; Тельцов, Здоровинин, Красовитова 2001). На неоднородность состава эпителиального слоя слизистой оболочки толстого отдела кишечника пренатальном онтогенезе указывают у животных - Л.К. Хабибуллина (1972), К.И. Дзигилевич (1974), Л.В. Давлетова (1974), И.А. Кравцов (1986), А.Л. Уханаева (1991), В.В. Мартьянов (1996), О.В. Красовитова (2001).

Впервые установлено, что высота щеточной каемки энтероцитов слепой кишки, лежащих на вершине, боковых поверхностях, основания ворсинок различная от 1,9 ± 0,2 до 2,6 ± 0,1 мкм. Ядра энтероцитов основания ворсинок крупнее в области основания ворсинок (до 48,8 ± 2,0 мкм²), по сравнению с эпителиоцитами области вершины (22,7 ± 2,5 мкм²), как и высота соответственно - 31,8 ± 1,0 мкм и 19,1 ± 2,3 мкм, а также площадь - 127,0 ± 6,5 мкм и 94,5 ± 2,7 мкм (P < 0,05). Эта закономерность сохраняется для энтероцитов ободочной и прямой кишок, но размеры иные. Причем изменения абсолютных показателей происходят по стадиям развития в плодный период и у новорожденных телят. ЦЯ отношение имеет волнообразный характер по стадиям исследования. Митотический индекс (МИ) эпителиоцитов вершины ворсинок стенки толстой кишки от 3 до 6 мес. снижается от 15,6 ± 0,8 до 2,0 ± 0,1 ‰, эпителиоцитов боковых поверхностей - от 16,4 ± 0,8 до 8,2 ± 0,4 ‰, основания - от 17,8 ± 0,8 до 12,0 ± 0,6 ‰. Индекс дегенерации наоборот увеличивается: в энтероцитах вершины ворсинки от 4,4 ± 0,2 ‰ до 7,8 ± 0,3 ‰, боковых поверхностей - от 4,4 ± 0,2 ‰ до 6,0 ± 0,3 ‰, а основания уменьшается - от 4,4 ± 0,2 до 2,2 ± 0,1 ‰. Суммарное отношение МИ к ИД в энтероцитах устья крипт у новорожденных телят от рождения до 15-суточных телят повышается от 3,67 до 15,4, в области боковых поверхностей крипт - от 3,67 до 15,4, дна крипт наоборот повышается от 27,0 до 25,0. это косвенно свидетельствует о различной функции эпителия ворсинок и крипт кишечника в раннем онтогенезе. Об этом свидетельствует динамика становления ультраструктурных компонентов призматических эпителиоцитов разных отделов толстого кишечника. В ядрах клеток происходило снижение степени конденсации хроматина и оформление ядрышек, выравнивание контуров ядерной оболочки, повышение электронной плотности цитоплазматического матрикса (особенно выраженная на 12 сутки постнатального периода), уменьшение количество элементов гладкой эндоплазматической сети тубуло-везикулярной системы. Длина канальцев гранулярной эндоплазматической сети с возрастом плодов и телят увеличивается и одновременно возрастает число свободных рибосом, количество и размеры митохондрий, появление органелл с большим числом трубчатых крист, значительное повышение число микроворсинок и их высоты.

Впервые установлены ЭМ особенности развития бокаловидных клеток толстого кишечника у плодов коров и телят новорожденного этапа развития. У новорожденных телят после приема молозива увеличивается объем секреторных гранул, с параллельным повышением размера пластинчатого комплекса Гольджи и происходит увеличение количества канальцев гранулярной эндоплазматической сети. Установлена возрастная динамика перестройки межклеточных контактов в эпителии толстого кишечника у плодов и телят новорожденного этапа развития. Отмечено закономерное увеличение межклеточных щелей, связанное с интенсификацией всасывания жидкости. Повышалась плазмалеммальная поверхность латеральных отделов эпителиоцитов, что проявилось в развитии интердигитаций соседних клеток и формировании контактов типа «замок». Следует отметить, что эпителиоциты толстого отдела кишечника плодов и телят новорожденного этапа развития дифференцированы, покрыты микроворсинками и выполняют всасывательную, секреторную и экскреторную функции. Об этом свидетельствует хорошо развитая тубуло-везикулярная и супрануклеарная системы эпителиоцитов.

Наличие тубулярной и супрануклеарной систем энтероцитах новорожденных животных наблюдали многие ученые (B. Veress, K. Brintner, 1971; T. Staley et al., 1972; Морозова, 2006; Чучкова, 2006). Принято считать, что эти системы являются производными пластинчатого комплекса, о чем свидетельствует выявленная в трубочках и вакуолях тиоминпирофосфатаза (Staley et al., 1973). Связь тубуло-везикулярной системы с супрануклеарной, с одной стороны, и пиноцитозными инвагинациями энтероцитов - с другой, указывает на сформированный мощный механизм проведения микромолекулярного белка через кишечный барьер.

Локализация и динамика нуклеопротеидных веществ эпителиоцитов толстой кишки на плодном и новорожденном этапах развития свидетельствует о наличии 5 стадий. Первая - у плодов до 90 суток интенсивной реакции на содержание ДНК в ядре и накопление в цитоплазме РНК. Вторая - у плодов 3-5 мес. наблюдается неравномерность реакции и распределения ДНК в эпителиоцитах разных участков ворсинок и крипт (становление криптально - ворсиночного градиента концентрации НК) и уменьшение концентрации РНК в ядре и цитоплазме. Третья - у 5 - 7-мес. плодов увеличивается интенсивность реакции на РНК в ядре и цитоплазме. Устанавливается каудально - краниальный градиент распределения РНК в эпителии разных участках толстой кишки. Четвертая - от 7 мес. до рождения - наблюдается увеличение интенсивности реакции на РНК в ядре и цитоплазме и стабильности реакции на ДНК. Пятая - у телят от рождения до 15-суточного возраста наблюдается неравномерность реакции на ДНК в ядре эпителиоцитов вершины и боковых поверхностей ворсинок, при стабильной реакции на ДНК в эпителиоцитах основания ворсинки и шейки крипт (в камбиальной зоне). На это дополнительно указывают динамика ЦЯО, МИ и ИД, соотношение МИ к ИД. Увеличение интенсивности реакции на РНК в ядре и цитоплазме. В эпителиоцитах выявляются три фракции РНК - диффузная, зернистая и перинуклеарная. По интенсивности реакции на РНК в энтероцитах в толстой кишки проявляется проксимально-дистальный градиент. О более интенсивной реакции на РНК в двенадцатиперстной кишке, по сравнению с тощей и подвздошной кишками, в прямой кишке по сравнению с ободочной и слепой кишками у млекопитающих, указывают в своих работах З.П. Скординский и др, (1970), В.П. Романишин и др. (1970), С.В. Стояновский, В.П. Фрич (1977), Л.П. Тельцов (1984), В.В. Мартьянов (1996),Т.А. Романова (1999), О.В. Красовитова (2001).

Исследованиями локализации и динамики углеводного обмена обнаружено большое количество Шик-положительных веществ в энтероцитах слизистой оболочки толстой кишки у плодов 2-9 мес. Неблокируемые б-амилазой вещества локализуются в области щеточной каемки и мембран энтероцитов. Одновременно происходит накопление нейтральных ГАГ (ХС-4, ХС-6). С увеличением возраста плода повышается концентрация гликопротеинов и ГАГ в энтероцитах толстой кишки. Эту закономерность отмечала в своих работах О.В. Красовитова (2001). В динамике углеводных компонентов в эпителиоцитах толстой кишки прослеживается 4 стадии. Первая - до 2,5 - 3-мес. возраста плода характеризуется содержанием большого количества гликогена и низкого протеогликанов (ГК). Вторая - у плодов 3-5 мес. - характеризуется накоплением протеогликанов, ГАГ (ГК, ХС-4, ХС-6). Закладывается специфическая дифференциация углеводного обмена энтероцитов. Третья - у плодов от 5 - 5,5 мес. до рождения происходит дифференциация углеводного обмена клеточных дифферонов энтероцитов с учетом органотипичности развития и локализации. Четвертая - от рождения до 15-сут. возраста телят увеличивается концентрация протеогликанов, ГАГ типа ГК.

В динамике белковых веществ, клеточных дифферонов эпителиоцитов толстой кишки на плодном и новорожденном этапах развития также прослеживаются четыре последовательные стадии. Первая - у плодов до 3 - 4 мес. происходит увеличение концентрации кислых и суммарных (основных) белков. Вторая - у плодов от 3 - 4 до 6 мес. уменьшается концентрация кислых и увеличивается содержание суммарных белков. Третья - у плодов от 6 мес. до рождения наблюдается накопление в энтероцитах суммарных белков. Четвертая - от рождения до 15-суточного возраста телят в энтероцитах увеличивается концентрация суммарных белков и снижается содержание кислых белков. Формирование криптально - ворсиночного градиента распределения суммарных белков происходит на 2 - 5-мес. развития плода, а каудально - краниального градиента - у плодов на 5 - 7 мес.

ГХИ установлено, что ЛДГ фермент в основном локализован в эндоплазматической сети и находится в перинуклеарной зоне энтероцитов диффузно по всей цитоплазме, в меньшей степени в митохондриях. Это связано с деструктивными процессами слизистой оболочки толстой кишки на этом этапе развития. Следовательно, установленная закономерность - нахождения стенки толстой кишки у плодов 5-7 мес. в критической фазе развития подтверждается на клеточном уровне при исследовании ЛДГ. Снижение количества гранул диформазана в эпителиоцитах слепой кишки протекает неравномерно с биологическим ритмом в 2 мес. (на 3, 5, 7 мес.). В эпителиоцитах ободочной кишки снижение ЛДГ наблюдается на 6 мес., а увеличение наоборот - на 3 и 5 мес. Иная динамика ЛДГ в эпителиоцитах прямой кишки. Асинхронность содержания ЛДГ в энтероцитах толстой кишки разных отделов свидетельствует о различной интенсивности функций уже в эмбриогенезе. Низкая активность ЛДГ в энтероцитах выявлена и у новорожденных телят. В целом активность фермента ЛДГ достоверно снижается (Р<0,05) у плодов от 4 мес. до рождения во всех отделах и в различных участках крипт в 1,5-1,9 раз. Гистохимическая активность ЛДГ в эпителиоцитах толстой кишки у телят на этапе новорожденности уменьшается. Наиболее выраженное уменьшение гистохимической активности фермента установлено к концу первых суток постнатального развития (после приема молозива) и в дальнейшем этот процесс стабилизируется. В эпителиоцитах устья крипт гистохимическая активность ЛДГ выше, чем в эпителиоцитах боковых поверхности и дна крипт. Наибольшая гистохимическая активность ЛДГ у новорожденных телят наблюдается в эпителиоцитах прямой кишки, меньшая - в слепой и наименьшая - в ободочной. Возрастная динамика ЛДГ в энтероцитах слепой, ободочной (разных отделов), прямой (разных отделов) кишок в эмбриогенезе описана нами впервые.

Гистохимические исследования показали, что фермент СДГ локализован в митохондриях эпителиоцитов толстой кишки диффузно по всей цитоплазме. Относительное снижение фермента наблюдается в энтероцитах слепой кишки у плодов на 3, 5 мес., ободочной и прямой кишках - на 3 мес. Самая высокая активность СДГ в эпителиоцитах ворсинки наблюдается во время деструкции и атрофии их, то есть в 6-месячном возрасте плодов. В целом, количество гранул в эпителиоцитах ворсинки слепой и ободочной кишок у плодов от 3 до 7 мес. увеличивается (Р<0,05) от 2,1 до 3,2 раза, а в прямой кишке - от 3,5 до 5,3 раза. За раннеплодную стадию количество гранул диформазана в эпителиоцитах крипт во всех отделах толстой кишки увеличивается. На среднепдлодной стадии установлена асинхронность динамики активности фермента СДГ в энтероцитах устья, тела и дна крипт. Это связано с интенсивной морфофункциональной перестройкой и формированием дефинитивных крипт. За позднеплодную стадию развития содержание СДГ в энтероцитах вновь повышается во всех отделах толстой кишки от 1,2 до 3,1 раза. В целом за плодный этап развития происходит увеличение СДГ в энтероцитах крипт от 2,4 до 3,4 раз, что свидетельствует об увеличении энергетического обмена клеток крипт толстой кишки в эмбриогенезе. Гистохимическая активность СДГ в эпителиоцитах толстой кишки в целом за этап новорожденности увеличивается в 1,9 раза. Наибольшая гистохимическая активность СДГ выявляется в эпителиоцитах ободочной кишки. Наибольшее количество гранул диформазана выявляется в устьях крипт, по сравнению с эпителиоцитами боковой поверхности и дна. Повышение гистохимической активности СДГ в эпителиоцитах наблюдается после приема молозива (к концу первых суток), снижение к 3 сут. и постепенное увеличение к 15-суточному возрасту телят. Это обусловлено различным уровнем аэробного дыхания эпителия толстой кишки. Сведения о динамике СДГ в энтероцитах толстой кишки крупного рогатого скота в эмбриогенезе получены нами впервые.

НАДН₂ДГ и НАДФН₂ДГ относятся к ферментам осуществляющим функцию переносчика. Гистохимическими исследованиями установлено, что эти ферменты локализованы в митохондриях энтероцитов, которые расположены диффузно по всей цитоплазме и в эндоплазматической сети и на оболочке митохондрий. За раннеплодную стадию развития в эпителиоцитах содержание НАДН₂ДГ вершины и основания ворсинок во всех отделах толстой кишки увеличивается в 1,9 и в 2,3 раза. За среднеплодную стадию развития происходит снижение количества гранул диформазана в эпителиоцитах ворсинки. Это указывает на снижение функций переноса энтероцитов в критическую фазу развития плода и толстой кишки. Самая высокая концентрация гранул диформазана (НАДН₂ДГ) в энтероцитах ворсинки установлена на 5 месяце плода. В слепой кишке содержание НАДН₂ДГ у 5-месячных плодов составляет в эпителиоцитах вершины ворсинок 14,3 ± 0,4, основания ворсинок - 13,2 ± 0,5. В эпителиоцитах крипт (устья, тела и дна) слепой кишки за раннеплодную стадию НАДН₂ДГ уменьшается соответственно в 1,5, 1,3 и 1,6 раза. За среднеплодную стадию содержание остается без изменения и значительно возрастает на позднеплодной стадии в эпителиоцитах области устья от 6,9 ±0,7 до 16,4 ±2,6 раза, тела - от 8,4 ±0,6 до 15,4 ±1,6, дна - от 7,9 ±0,5 до 11,1 ±1,6. В целом эта динамика НАДН₂ДГ сохраняется в эпителиоцитах крипт в ободочной и прямой кишках, с наибольшими локальными особенностями. За весь плодный этап от 4 мес. до новорожденного в эпителиоцитах слепой кишки устья, тела и дна крипт количество гранул диформазана увеличивается (Р<0,05) в 3,9, 3,0 и 2,6 раза, ободочной - в 4,5, 4,6 и 4,6 раза, в прямой - в 2,6, 3,8 и 3,3 раза. За раннеплодную стадию развития содержание фермента НАДФН₂ДГ в эпителиоцитах вершины и основания ворсинок во всех отделах слепой кишки увеличивается в 1,2 и в 1,6 раза. На среднеплодной стадии установлена асинхронность содержания НАДФН₂ДГ в эпителиоцитах ворсинок в разных отделах толстой кишки, но в целом реакция идет на повышение. У плодов от 3 до 7 мес. (пока не полностью исчезли ворсинки) количество гранул диформазана в эпителиоцитах вершины ворсинок увеличивается от 6,5±0,7 до 9,5±0,6, в эпителиоцитах основания ворсинок - от 5,6±0,6 до 8,1±0,7.Содержание НАДФН₂ДГ в эпителиоцитах устья, тела и дна крипт на раннеплодной стадии уменьшается в слепой и ободочной, а в прямой, наоборот, незначительно увеличивается. На среднеплодной стадии увеличение гранул диформазана в энтероцитах крипт отмечается во всех отделах, как и на позднеплодной стадии. За весь плодный этап от 4 мес. до новорожденных в эпителиоцитах крипт (устье, тело и дно) количество гранул диформазана увеличивается достоверно (Р<0,05). Динамика активности НАДН₂ДГ и НАДФН₂ДГ в энтероцитах толстой кишки описана нами впервые.

Щелочная фосфатаза (ЩФ) выявляется в щеточной каемке эпителиоцитов вершины, боковых поверхностей и основания ворсинок. Интенсивно окрашивается ЩФ в эндотелии капилляров ворсинок, собственного слоя и под слизистой основы слизистой оболочки, мышечной и серозной оболочки. Аналогичная локализация фермента описана Л.П. Тельцовым (1969) и К.Г. Щелкановым (1972), В.А. Столяровым (2001) в энтероцитах тонкой и толстой кишок. Активность фермента в энтероцитах и эндотелии капилляров кишечной стенки возрастает на раннеплодной стадии (2-5) и остается на том же уровне или даже уменьшается в разных отделах на среднеплодной стадии. В энтероцитах крипт на всех стадиях развития ЩФ не выявляется. В связи атрофией и отторжением ворсинок на позднеплодной стадии ЩФ в энтероцитах толстой кишки не выявляется. Щелочная фосфатаза в толстой кишке новорожденных телят выявляется в основном в эндотелии капилляров кишечной стенки. В эпителиоцитах устья крипт отмечаются «следы реакции», которые исчезают к 15-сут. возрасту.

Кислая фосфатаза (КФ) локализована в лизосомах цитоплазмы эпителиоцитов. Около щеточной каемки эпителиоцитов содержание КФ повышено. Нами впервые установлено, что на раннеплодной стадии развития количество гранул фермента в эпителиоцитах вершины и основания ворсинок в слепой кишке уменьшается от 17,4±1,5 до 15,6±2,4, от 14,0±1,5 до 12,7±2,1 ус. ед. Аналогичная динамика проявляется при исследовании КФ в эпителиоцитах ворсинок стенки ободочной и прямой кишок. На позднеплодной стадии развития содержание КФ в эпителиоцитах ворсинки пока они имеются асинхронно снижается. В эпителиоцитах крипт (устье, тело, дно) КФ на раннеплодной стадии в целом снижается в 1,2 раза, за среднеплодную стадию снижение наблюдается в слепой и ободочной кишках в 1,3 и 1,9 раз, а в прямой кишке увеличение - в 1,3 раз, что свидетельствует об опережающем развитии слизистой оболочки этой кишки. На позднеплодной стадии развития происходит увеличение содержания фермента в эпителиоцитах крипт (устье, тело, дно).

Комплексными исследованиями закономерностей развития эпителиальной ткани толстого отдела кишечника на плодном и новорожденном этапах развития крупного рогатого скота черно-пестрой породы установлены периоды развития. 1. Доспецифический или закладки ткани - до 3 мес. возраста плода. 2. Формирования временной специфической ткани - у плодов от 3 до 5,5 мес.. 3. Дефинитивный специфический - у плодов от 6 мес. до 15-сут. возраста телят. Дефинитивный специфический период развития, с учетом условий развития, питания, дыхания и т.д., имеет два этапа: начальный дефинитивный - у плодов от 6 мес. до рождения и промежуточный дефинитивный - от рождения до 15-сут. возраста телят.

3.4. Закономерности развития соединительной ткани стенки толстой кишки у плодов и телят новорожденного этапа развития.

Проведенными исследованиями по изучению закономерностей развития соединительной ткани (СТ) стенки толстой кишки на плодном и новорожденном этапах развития крупного рогатого скота установлено:

1). Развитие СТ стенки толстой кишки в раннем онтогенезе, у крупного рогатого скота черно-пестрой породы, подчинено общим закономерностям развития тканей и органов (Клишов, 1981; Тельцов, 1984), а именно каудально - краниальному градиенту развития (Круцяк, 1981; Билич, Назарова, 1993). СТ стенки прямой кишки опережает развитие в ободочной и слепой кишках. Развитие структур кишечной стенки подчинено брыжеечно-дистальному градиенту и происходит асинхронно. СТ различных оболочек кишечной стенки дифференцируется несколько раньше в области прикрепления брыжейки. Развитие СТ стенки толстой кишки находится во взаимосвязи и зависимости с развитием эпителиальной, мышечной и нервной тканями.

2). Развитие клеточных дифферонов СТ стенки толстой кишки (фибробластов; макрофагов; ретикулярных, тучных, плазматических, жировых клеток) происходит детерминированно, асинхронно и интегрировано. Для каждого клеточного дифферона свойственно: определенная динамика роста площади ядра и цитоплазмы, ЦЯО, МИ и ИД, определенная корреляция между ними; специфическая локализация нуклеопротеидных, белковых и углеводных веществ; детерменированная схема развития и дифференцировка; интеграция, обеспечивающая гомеостаз всех тканей стенки толстой кишки.

3). Детерминированное развитие MB проявляется общей динамикой. Первоначально в MB накапливается гликоген, протеогликаны, гликозаминогликаны, основные и кислые белки и белковые группы. Позднее происходит формирование коллагеновых волокон (Антипов, 1996). Асинхронность и интегрированность в развитии формирует специализацию СТ. В собственной пластине слизистой оболочки толстой кишки СТ развивается по типу ретикулярных тканей, а в подслизистой основе, мышечной и серозной оболочках - по типу рыхлой неоформленной СТ.

4). Процесс формирования KB в СТ находится в тесной взаимосвязи с развитием MB и фибробластов. В данном процессе выделено 4 этапа. Первый - до 1,5 - 2,5 мес. - предшествующий этап коллагеногенезу. Для него характерно: рост площади ядра и цитоплазмы фибробластов; низкое ЦЯО (до 1,8); высокий ИД и низкий МИ фибробластов; накопление в них РНК, основных и кислых белков, дисульфидных, сульфгидрильных, карбоксильных и аминных групп белков, аминокислот - тирозина, триптофана, аргинина; накопление протеогликанов, содержащих ГАГ типа ГК, ХСК. В межклеточном веществе (MB) CT в эмбриогенезе происходит накопление: ГАГ типа ГК; ХСК; основных и кислых белков, -SH-, -SS-, -СООН-, -NH₂- белковых групп и аминокислот. Второй - интенсивного коллагеногенеза у плодов от 2,5 - 3,5 до 7 - 7,5 мес. Он характеризуется: увеличением содержания основных и кислых белков, -SH-, -SS-, -СООН-, -NH₂- белковых групп и аминокислот в MB; уменьшением ГАГ в MB; снижением площади ядра и цитоплазмы фибробластов, изменением ЦЯО, уменьшением в них РНК и кислых белков; увеличением на 4 и 8,5 мес. и уменьшением на 6 мес. -SH- белковых групп, накоплением основных белков, -SS- и -NH₂- белковых групп. Третий - у плодов от 7,5 до 9 мес. стабилизации коллагеногенеза. Этому этапу свойственно: увеличение ГАГ в MB и уменьшение кислых белков и -SH-групп; стабильный рост площади ядра и цитоплазмы фибробластов; накопление основных, кислых белков и -SH-групп в фибробластах. Четвертый - у плодов от 9 мес. до 15-сут. возраста телят - формирования коллагеновых пучков в MB СТ. Для него характерно: снижение активности ГАГ, накопление кислых белков и -SH- белковых групп в MB; уменьшение роста площади ядра и цитоплазмы, ЦЯО фибробластов, уменьшение в них концентрации кислых белков и -SH- белковых групп.