Эпизоотологическая характеристика и фармакотерапия основных паразитозов крупного рогатого скота Центральной зоны Российской Федерации авермектинсодержащими препаратами

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Эпизоотологическая характеристика и фармакотерапия основных паразитозов крупного рогатого скота Центральной зоны Российской Федерации авермектинсодержащими препаратами

03.02.11 - паразитология

06.02.03 - ветеринарная фармакология с токсикологией

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

Гусейнов Нажмутдин Гусейнович

Москва 2010

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»

Научные консультанты: Академик РАСХН, доктор биологических наук, профессор Василевич Федор Иванович

доктор биологических наук, профессор Мирзаев Микаиль Нурбагандович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук , профессор Абрамов Вячеслав Евгеньевич

Заслуженный деятель науки РФ, доктор ветеринарных наук, профессор Соколов Михаил Николаевич

доктор ветеринарных наук, профессор Енгашев Сергей Владимирович

Ведущая организация: ФГУ «Всероссийский Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» г. Казань

Защита состоится « » 2010г. в « » ч. на заседании диссертационного совета Д 220.042. 01 в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина». (109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Тел. 377-93-83)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина».

Автореферат разослан « » 2010г.

Ученый секретарь диссертационного совета профессор Грязнева Т.Н.

скот фармакотоксикологический фасциолез

1. Общая характеристика работы

Актуальность проблемы Как известно, инвазионные болезни широко распространены во всем мире и наносят значительные потери животноводству. Несмотря на многочисленные исследования, посвященные изучению наиболее широко распространенных инвазий животных, полностью ликвидировать их и предотвратить негативные последствия не удается. Об этом свидетельствуют работы многих специалистов, отмечающих, что до настоящего времени нерешенной остается проблема многих гельминтозов и эктопаразитозов в популяции крупного рогатого скота (А.М. Сазанов, 1976; В.А. Ромашов, 1979; В.В. Горохов, 1986; М.Ш. Акбаев, 1986; И.А. Архипов, 2005 и др).

Установленное в конце 19-го века «правило Лейкарта» в биологическом цикле развития многих паразитов, до сих пор является основой прижизненной диагностики паразитозов, а характер течения патологического процесса в организме животных при отдельных паразитозах до сих пор остается «научной тайной» (М.В.Арисов, 2008)

Во многих опубликованных работах распространение паразитозов животных объясняется природно-климатическими особенностями территорий и соответствующими технологиями содержания поголовья, но существующие мероприятия по профилактике и терапии паразитозов часто проводятся без учета их эпизоотических показателей и фармакологических особенностей применяемых лекарственных средств.

Как известно, в настоящее время на ветеринарном рынке имеется достаточно широкий набор противопаразитарных препаратов, содержащих в качестве активного начала салициланилиды, пиретроиды, карбаматы, хлорорганические соединения и др. Однако нельзя не отметить, что наиболее востребованными являются препараты авермектинового ряда. Это связано с тем, что препараты на основе авермектинов обладают широким спектром антипаразитарного действия при относительно низких концентрациях.

Ранее во многих странах мира наиболее широко применялся препарат Ивомек, созданный учеными фирмы MSD (W.C. Campbell, V.W. Benz, 1984; W.C. Campbell, M. Easterbrook, 1985; J.C.J.W. Knox, K.S. Marbury and others, 1989) и содержащий в качестве действующего вещества (ДВ) комплекс химически модифицированных, т.е. гидрированных авермектинов B1a и B1b - ивермектин. [Bisset, S.A., Brunsdon, R.V., Forbes, S. 1990; Conder, G.A., Thompson, D.P., Jonnson, S. 1992].Ивермектин используется в качестве действующего начала большинства и других зарубежных противопаразитарных препаратов (ивомек плюс, баймек, пандекс, ивомек пурон и др.).

Исследования по созданию отечественной технологии биосинтеза авермектинов были начаты в конце 80-х годов учеными МГП «Бифидум» (НПО Биотехнология) и успешно завершились созданием препаратов аверсект-1, ниацид, аверсект-2 (В.А.Мосин, В.А.Дриняев, М.Н.Мирзаев,1992; 1994; М.Н.Мирзаев, Д.А.Девришов, Савченков, 1995). В ранних публикациях по авермектиновой проблеме отмечалось, что препараты на основе модифицированных авермектинов менее токсичны и более эффективны, но, как показывают публикации последнего времени, препараты аверсект-2, ниацид, авертин, содержащие в своем составе натуральные авермектины, относятся к IV классу токсичности и в терапевтических дозах безвредны для животных. Это свидетельствует о том, что, выбранное отечественными учеными направление по созданию противопаразитарных препаратов на основе немодифицированных авермектинов, оказалось весьма полезным и перспективным. Сказанное подтверждается и тем, что в настоящее время в Российской Федерации зарегистрирован ряд отечественных авермектинсодержащих препаратов (аверсект-2, авертин, ниацид, ниацид-плюс), хорошо зарекомендовавших себя в ветеринарии при лечении и профилактике широкого спектра паразитозов животных.

В то же время нельзя не отметить, что длительное применение одних и тех же препаратов по «традиционной» технологии ведет к адаптации паразитов к ним, т.е. отбору резистентных форм паразитов.

Кроме того, особого внимания заслуживают опубликованные в последнее время данные некоторых авторов, которые утверждают, что авермектин содержащие препараты оказывают негативное воздействие на кишечную микрофлору животных (Третьяков.,2003 )

Поэтому не вызывает сомнений актуальность исследований, направленных как на создание новых форм и композиций авермектин содержащих препаратов, так и новых методов их применения с учетом эпизоотологических региональных особенностей паразитозов и почвенно-климатических условий животноводства.

Целью данных исследований являлось изучение эпизоотологических особенностей функционирования паразитарных систем в популяции крупного рогатого скота в условиях Центральной зоны Российской Федерации и на этой основе усовершенствовать фармакотерапию основных экономически значимых паразитозов новыми авермектин содержащими препаратами.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

-Выявление территориальных, временных и популяционных эпизоотологических особенностей фасциолеза, псороптоза, диктиокаулеза, сифункулятоза, гиподерматоза и телязиоза крупного рогатого скота в хозяйствах Центральной зоны Российской Федерации ;

-изучить фармакотоксикологические свойства новых отечественных препаратов (ниацид-премикс, ниацид+, ниацид-К);

-определить терапевтическую эффективность, роль и место препаратов на основе натуральных авермектинов в системе противопаразитарных мероприятий в животноводстве.

- изучить эпизоотологию некоторых наиболее часто встречающихся паразитозотов Центральной зоны Российской Федерации, обозначить их экономическую значимость;

- оптимизировать технологию применения авермектин содержащих препаратов;

- изучить фармакологические параметры исследуемых препаратов в производственных условиях;

- изучить действие авермектин содержащих препаратов на микрофлору желудочно-кишечного тракта лабораторных животных и крупного рогатого скота;

-исследовать показатели клеточного и гуморального иммунитета у животных при применении терапевтических и повышенных доз препаратов;

- определить динамику активности гуморального и клеточного иммунитета, факторов неспецифической резистентности при лечении и профилактике паразитарных болезней в производственных условиях;

- изучить фармакокинетику и остаточное количество действующих веществ в крови, молоке и органах крупного рогатого скота;

- оценить препараты на основе авермектинов в производственных условиях по их экономической эффективности.

Научная новизна Впервые проведены мониторинговые исследования, установлена степень экстенс-и интенсинвазированности крупного рогатого скота гиподерматозом, фасциолезом, телязиозом, диктиокаулезом, сифункулятозом, псороптозом (в период с 2000 по 2008 г.г.) в условиях Центральной зоны Российской Федерации, изучена плотность и структура популяции возбудителей паразитозов, выявлена сезонная и возрастная динамика инвазированности животных, разработаны научно обоснованные рекомендации фармакотерапии инвазий препаратами ниацид-премикс, ниацид К, ниацид+. Экспериментально доказано отсутствие негативного влияния авермектин содержащих препаратов на микрофлору желудочно-кишечного тракта телят. Изучены фармакотоксикологические параметры: сохранность и стабильность, острая и хроническая токсичность, переносимость, эмбриотоксическое и тератогенное действие нового авермектинсодержащего препарата ниацид-премикс.

Впервые изучено позитивное или негативное действие ниацид-премикс, ниацид+, ниацид К на параметры иммунной системы организма животных. Изучена динамика содержания авермектинов в молоке и плазме крови коров, органах и тканях телят после применения авермектин содержащих препаратов. Установлена экстенс- и интенсэффективность ранней и поздней химиотерапии основных паразитозов крупного рогатого скота Центральной зоны Российской Федерации. Впервые на основе авермектинов, продуцируемые Streptomycis avermitilis, пшеничных отрубей и биологически активных минералов типа цеолитов разработана технология получения новой композиции противопаразитарного препарата ниацид-премикс, не имеющего аналогов в ветеринарной медицине.

2. Теоретическое и практическое значение работы

Для профилактики и лечения паразитарных болезней животных предложены разработанные на основе данных эпизоотологического анализа, методические рекомендации по профилактике и фармакотерапии основных паразитозов Центральной зоны Российской Федерации препаратами, содержащими в качестве действующего вещества натуральные авермектины, утвержденные отделением ветеринарной медицины РАСХН. (Москва 21.09.2009г.):

1.Методическая рекомендация по технологии получения и применения авермектин содержащего препарата ниацид-премикс против паразитозов сельскохозяйственных животных.

2. Методическая рекомендация по применению авермектин содержащих препаратов против паразитозов сельскохозяйственных животных.

3. Методическая рекомендация по применению комбинированного препарата ниацид-плюс против паразитозов животных. Эскпериментальные данные, полученные в процессе выполнения работы, вошли в нормативно-техническую документацию по применению ниацид-премикс, ниацидК, (Инструкция, стандарт Организации СТО 46392258-0003-2009г.),утвержденные Россельсхознадзором Российской Федерации.

Свидетельство о государственной регистрации лекарственного средства ниацид К для животных № ПВР-2-4/02427.

Материалы диссертационной работы используются при проведении лекционных и практических занятий на курсах повышения квалификации ФГОУ ВПО «Московская Государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина», а так же при проведении тематических семинаров, совещаний с целью повышения квалификации для специалистов учреждений госветсети, акционерных сельскохозяйственных предприятий, занимающихся ветеринарным обслуживанием сельхозживотных.

Основные положения , выносимые на защиту:

- эпизоотологическая характеристика паразитозов Центральной зоны Российской Федерации;

- фармакотоксикологическая характеристика препарата ниацид-премикс, влияние авермектин содержащих препаратов на микрофлору желудочно-кишечного тракта крупного рогатого скота;

- фармакотерапия основных паразитозов Центральной зоны Российской Федерации препаратами на основе натуральных авермектинов ;

- изучение фармакокинетики и остаточного количества действующих веществ в крови , молоке и органах крупного рогатого скота;

- определение экономической эффективности авермектин содержащих препаратов в производственных условиях.

Апробация и публикация результатов исследований

Результаты диссертационной работы представлены на международной и практической конференции, посвященной 80-летнему юбилею ветеринарной службы Монголии, (г. Улан-Батор,2003 г.); на международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины в условиях современного ведения животноводства» (Харьков,2003 г.); на международной конференции «Новые технологии в диагностике, профилактике и лечении болезней сельскохозяйственных животных», (Нижний Новгород, 2006 г); на международных научно - практических конференциях «Аграрная наука - сельскому хозяйству»; «Актуальные проблемы, вопросы ветеринарной медицины», (Махачкала, 2006-2007 г.); на IV международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва , 2007 г.)

Основные положения диссертации опубликованы в 29 печатных работах, в том числе 7 публикаций в изданиях, рекомендованных ВАК Российской Федерации, 3 методических рекомендации.

Объем и структура диссертации диссертационная работа изложена на 302 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, рекомендаций по использованию научных выводов, списка используемой литературы и приложений. Список литературы включает 430 источников, в том числе зарубежных 97. Материал иллюстрирован 20 рисунками, 76 таблицами, 6страниц приложений .

Собственные исследования

Материалы и методы. Работа выполнена в научно-исследовательской лаборатории инфекционной патологии и биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ в период с 2002 по 2010 г.г.

Эпизоотологическую ситуацию по основным паразитозам в Центральной зоне Российской Федерации (Владимирская область, Тамбовская область, Республика Мордовия, Липецкая область, Пензенская область, Рязанская область) оценивали на основе анализа собственных исследований и соответствующих данных районных и областных ветеринарных служб:

материалы клинико-эпизоотологических обследований эпизоотических очагов экто- и эндопаразитозов крупного рогатого скота в изучаемых регионах ;

результаты гельминтологических, капрооволярвоскопических,

паразитологических и иммунологических исследований сельскохозяйственных животных в хозяйствах Центральной зоны Российской Федерации, выполненных по нашей просьбе региональными ветеринарными лабораториями;

ветеринарная отчетность об инвазионных (паразитарных) болезнях животных в подразделениях агропромышленного комплекса и индивидуальных животноводческих хозяйствах конкретных регионов, в т.ч. и базовых хозяйствах, избранных для проведения эпизоотологических экспериментов при выполнении данной работы.

Опыты по изучению эффективности авермектин содержащих препаратов при лечении паразитарных болезней животных проводили в хозяйствах Рязанской области. (колхоз им. Ленина, ООО «Заречное», СПК « Ардабьевский», СПК «Новый путь», СПК « Родина», колхоз «Заветы Ильича», ООО «Беркут» -Касимовского района. СПК «Санское», «Пробуждение»-Шиловского района. СПК «Родина», СПК «Виктория»-Путятинского района. В хозяйствах Пителенского, Шацкого, Старожиловского, Скопинского и других районов области).В хозяйствах Ельниковского района Республики Мордовия, Моршанском районе Тамбовской области, Меленковском и Муромском районе Владимирской области и т.д. Материалом для исследований служили 67000 голов молодняка крупного рогатого скота и 42000 голов коров черно-пестрой породы .

Эпизоотологию, основных наиболее часто встречающихся, экономически значимых паразитозов крупного рогатого скота и закономерности динамики течения эпизоотологического процесса контролировали стандартными методами. Зараженность гельминтами животных изучали путем количественных и качественных гельминтоовоскопических и лярвоскопических анализов проб фекалий. До лечения, а также через 7, 21,35 дней после дегельментизации у всех животных брали пробы фекалий из прямой кишки и исследовали методом флотации с использованием счетной камеры ВИГИС для учета количества яиц и личинок гельминтов в одном грамме фекалий. (Л.Д.Мигачева,Г.А.Котельников,1987г) Полученные результаты обрабатывали статистически с расчетом средних величин и их ошибок. Эффективность препаратов рассчитывали по типу «контрольный тест» (I.B.Wood,1995г.).Так же по результатам неполных гельминтологических вскрытий по К.И. Скрябину печени, желчного пузыря, легких, желудочно - кишечного тракта при убое животных внутри хозяйств, Касимовском, Шацком и других мясокомбинатах Рязанской области. Интенсивность и экстенсивность зараженности животных клещами, вшами, кровососками или личинками подкожного овода определяли по сезонам года (осень, весна, лето) путем визуального осмотра, ощупывания животных в местах обитания паразитов с последующим лабораторным исследованием соскобов кожи и волосяного покрова. Поголовье обработанное против личинок подкожного овода осенью (октябрь, ноябрь), обследовали в апреле - мае, а при более поздней терапии через 30 дней. Физиологическое состояние подопытных животных определяли по гемотологическим показателям. В крови определяли количество гемоглобина, лейкоцитов, эритроцитов, общего белка, белковых фракций. Биохимический состав крови подопытных животных оценивали по содержанию кальция, фосфора, магния, глюкозы, а также по активности ферментов аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотранасферазы (АсАТ). Содержание эритроцитов и гемоглобина определяли при помощи фотоэлектрического эритрогемометра М-065, а лейкоцитов в счетной камере Горяева по общепринятой методике. Уровень общего белка, альбумины, азот мочевины, триглицериды, глюкозу, активность щелочной фосфатазы, амилазу. При проведении биохимических анализов использовали также автоматический анализатор «Экспресс+» фирмы Bayer. Действие авермектин содержащих препаратов на метаболизм молодняка и молочную продуктивность коров определяли путем индивидуального взвешивания подопытных животных через 30 дней и контрольных надоев через 10 дней. На основании полученных результатов определяли абсолютный и среднесуточной прирост живой массы телят, а так же абсолютный и среднесуточный удой подопытных коров и расход кормов на один килограмм прироста и молока. Содержание в молоке жира и белка, в мясе общей влаги, протеина, жира, золы и других физико-химических показателей определяли в областных региональных ветбаклабораториях по общепринятым методикам. Содержание действующих веществ в сыворотке крови, и молоке коров (авермектин, ивермектин, клозантел) определяли методом высокоэффективной жидкостной хромотографии (ВЭЖХ) с нижним пределом измерений 0,001 мг/кг(л). Остаточное количество авермектинов и клозантела в органах и тканях определяли в опытах на телятах 120 - 140кг ж. м. Животных убивали через 5 ,10 и 14, 30 суток при этом отбирали пробы крови, мышечной ткани, печени, почек, сердца, легких. Количество авермектинов определяли также, разработанным в НИЛ инфекционной патологии и биотехнологии МГАВМиБ, спектрофотометрическим методом на СФ 46 PD 304 UV при 243-246нм.

Действие препарата на иммунологические показатели организма животных оценивали по таким параметрам, как бактерицидная активность сыворотки (способность задерживать рост тест - культуры в жидкой среде), активность лизоцима (способность фермента лизировать тест-культуру Micrococcus lysodekticus). Определение количества Т - и В - лимфоцитов в периферической крови подопытных животных, проводили согласно методическим рекомендациям под редакцией академика Л.К.Эрнста. Фагоцитарную активность нейтрофилов определяли модифицированным методом Лейрира. Количественное определение иммуноглобулинов G -и М - классов в сыворотке крови телят проводили в реакции простой радиальной иммунодиффузии по методу Манчини. Биометрическая обработка полученных данных проводилась методом вариационной статистики по Н. А. Плохинскому (1980г.) и Е.А. Меркурьевой (1970 г.) .

Разработка оптимальной рецептуры препарата. При составлении оптимальной композиции готовой лекарственной формы препарата ниацид-премикс были проверены различные ингредиенты, разрешенные для применения в фармакологии, а именно мясокостную, соевую, ржаную, рыбную и пшеничную муку, отруби различных злаковых, различные цеолиты, биомассу S. avermitilis. В процессе оптимизации способа внесения (ДВ) в порошок были апробированы разные варианты: распыление (ДВ) на носители, дозированное нанесение с одновременным размешиванием, размешивание сухого (ДВ) с носителями, размешивание воздушно-сухой биомассы продуцента авермектинов с носителями.

На основе многочисленных испытаний выбраны 2 формы препарата, содержащие 200; 800 мг ДВ на 100гр препарата. Такой порошок удобен при дозированном скармливании мелким и крупным животным. В процессе проверки эффективности препарат скармливали в дозах 2-3 г/50кг и 5-10 г/50кг массы животного. Кратность применения в зависимости от характера заболевания и колеблется от 2 до 7 дней подряд.

Последовательность операции при изготовлении препарата При изготовлении препаратов имеющих форму порошков важно обеспечить, чтобы они не слеживались при хранении, не содержали комков, не обладали излишней гигроскопичностью и ДВ было распределено равномерно по всему объему. В зависимости от объемов производства могут быть использованы различные смесители. Например, при налаживании крупнотоннажного производства может быть использовано отечественное оборудование (СЦЛ-150), предназначенное для сухого смешивания порошкообразных материалов, автомат фасовочно-упаковочный со шнековым дозатором. Это оборудование с дополнительными операциями позволяет фасовать препарат в пакеты до 2000 гр.При изготовлении небольших партий препарата могут быть использованы традиционные лабораторные смесители (гомогенизаторы, мельницы), позволяющие равномерно размешать и измельчить ингредиенты. При изготовлении экспериментального образца препарата мы брали 35%цеолита 64,2%,отрубей пшеничных, 0,8% абамектин-препарата.

Результаты исследований

Мониторинг природно-климатических, производственно - хозяйственных, экономических показателей исследуемых регионов Центральной зоны Российской Федерации

Климат исследуемой территории умеренно континентальный, средняя температура января -10°С, июля +20°С. В год в среднем выпадает 500 мм осадков (25-30% - в виде снега). Агроклиматические условия неоднородны, они изменяются как при продвижении с севера на юг, так и под влиянием рельефа, ландшафта, типа почвы и других природных и местных особенностей. Центральная зона - одна из плотнонаселенных и хорошо освоенных областей России. Средняя плотность населения - (32) человека на квадратный километр, в том числе сельского - 11,6.

Сельское хозяйство. Это важнейшая отрасль, определенный уклад жизни, которая обеспечивает работой большое количество жителей исследуемых регионов. Возделывают зерновые культуры, сахарную свёклу, подсолнечник, кормовые культуры, картофель. Развито садоводство. На базе переработки зерна и картофеля производят спирт, крахмал и патоку. Животноводство регионов специализируется на разведении крупного рогатого скота молочно-мясного направления, свиней, овец и птицы.

Эпизоотологическая характеристика основных паразитозов крупного рогатого скота в Центральной зоны Российской Федерации

Сравнительный анализ данных по оценке инвазированности крупного рогатого скота по областям Центральной зоны Российской Федерации показывает, что общий фон заболеваний паразитарной этиологии имеет примерно одинаковую картину. В исследуемых регионах (Владимирская, Тамбовская, Липецкая, Пензенская, Рязанская и в Республике Мордовия) наиболее экономически значимыми и распространенными паразитозами крупного рогатого скота являются гиподерматоз, саркоптоидозы, фасциолёз, сифункулятозы, диктиокаулёз и телязиоз.

С целью получения наиболее полной картины эпизоотической ситуации по основным экономически значимым и наиболее часто встречающимся паразитозам анализировали ветеринарную отчетность разного уровня подчиненности и проводили более углубленные собственные исследования в хозяйствах Рязанской области (которое рассматривалось как базовое при изучении эпизоотической ситуации по паразитозам изучаемых регионов Центральной Зоны Российской Федерации) Официальные данные дополняли результатами собственных исследований по экстенсивности (ЭИ) и интенсивности инвазии (ИИ) у животных в базовых хозяйствах области. Всего обследовано в 2007-2008 г.г. крупного рогатого скота 32400 голов. Провели гельминтокапроскопические исследования более 800 проб фекалий, исследовали235 сборов гельминтов. Гематологических исследований 782 голов. Биохимические показатели 407 гол. Соскоб кожи и волосяного покрова 935 проб. Вскрыли трупы павших животных 86 голов. Осмотрели в хозяйствах и на мясокомбинатах 3416 туш и комплектов внутренних органов. Параллельно проводилась также работа по анализу данных районных ветеринарных лабораторий, ежегодно фиксировавших динамику паразитозов по хозяйствам области. В итоге этих исследований установлено, что в целом по области так же как в других областях Центральной зоны Российской Федерации, наиболее распространенным паразитозом крупного рогатого скота является гиподерматоз. Результаты многолетних исследований свидетельствуют, что на территории Рязанской области подвержены заражению гиподерматозом ежегодно в среднем, осень-15000 голов или 47% крупного рогатого скота, это только посалые коровы, тесно контактировавшие с оводом, т.е. потенциально больные - пораженные личинками I стадии, которые подвергаются ранней химиотерапии Весна-1200 голов или 8-10% животные, пораженные личинками 2 и 3 стадии гиподерматоза. Инвазированность крупного рогатого скота в исследуемых регионах фасциолами достигает в среднем 17,3%, стронгилятами желудочно-кишечного тракта 72,2%, телязиями 19,2%, монезиями 11,3%, диктиокаулёзом 9,2%, сифункулятозом 13,2%, псороптозом 4,4%. Отмечен высокий уровень заражения клещами рода демодекс - 27,2%. Стронгилоидоз - один из опаснейших зоонозов обнаружен 22,6%. В отдельные годы в весенне-летний период наблюдается массовое нападение гнуса на животных (мошки, комары, мухи, слепни), что нередко приводит к заболеваниям и даже падежу скота. Анализ данных динамики некоторых паразитозов в исследуемых регионах показал, что эти болезни регистрируются круглый год, но пик приходится: сифункулятозы - январь, февраль, март. Псороптоз - октябрь, ноябрь, декабрь. Диктиокаулез - июнь, август, сентябрь. Фасциолез, гиподерматоз - сентябрь, октябрь, март, апрель. Паразитарные болезни животных распространены на территориях регионов повсеместно, но фасциолез и диктиокаулез наиболее часто регистрируют в районах с повышенной влажностью. Распространенность сифункулятоза, псороптоза связана с плохим кормлением и антисанитарными условиями содержания. Распространенность гиподерматоза обусловлена тесными хозяино-паразитарными отношениями, климато-географическими условиями.

При этом экстенсивность инвазии в период 1998-2006 гг. находится примерно на одном уровне.

Фармако-токсикологическая характеристика препарата ниацид- премикс

Сохранность и стабильность препарата Одним из важнейших параметров фармацевтических средств является их стабильность. От этого параметра зависят условия хранения, время хранения и другие важные характеристики, определяющие в целом терапевтические и коммерческие качества препарата. Поэтому представляется естественным то, что при разработке новых лекарственных средств обязательно устанавливаются параметры стабильности, как действующего вещества, так и готовой формы препарата. Для упрощения работ по определению стабильности препаратов предложен метод «ускоренного старения», заключающийся в хранении исследуемых образцов препарата при относительно высоких температурах.

В своих исследованиях мы хранили препарат при 35-400 С и этот режим считали экстремальным для препарата, т.к. уже через 6 месяцев активность снизилась примерно на 50%. При хранении препарата в режимах 5-70 С и 20-250 С активность препарата в течение 12 месяцев сохраняется на исходном уровне. Через 18 месяцев хранения активность снизилась на 20%.

Острая токсичность оценивали на белых беспородных мышах, получавших различную дозу препарата. Доза препарата по ДВ ниже 30-35 мг/кг мало токсична для мышей, а при скармливании препарата в дозе 60 мг/кг наблюдается 100%-ная гибель животных. Среднесмертельная доза, рассчитанная известным методом (Г.Н.Першин,1950), по ДВ составляет 44,875 мг/кг массы животных. Интоксикация у мышей проявлялась в виде следующих признаков: угнетенное состояние, мышечный тремор, судороги, что характерно для отравления авермектинами из-за их нейротоксического действия. Из полученных результатов следует, что ниацид-премикс можно отнести к малотоксичным веществам (IV класс, ГОСТ 12,1-007-76).

Хроническая токсичность препарата проводилось на беспородных белых крысах массой 110-120 г. Опытной группе из 6 животных ежедневно скармливали препарат в дозе 50 мкг/кг. Другой группе из 6 животных скармливали ежедневно по 25 мкг/кг по ДВ, что соответствует примерно 1/1075 от LD50.

Контрольные животные ежедневно получали препарат без ДВ. В течение 3 месяцев наблюдений не отмечено негативного воздействия премикса на физиологическое состояние животных. По внешним признакам и по массе тела опытные и контрольные животные также не отличались. Эти данные свидетельствуют о том, что ниацид-премикс при длительном скармливании не вызывает интоксикации животных и не обладает кумулятивными свойствами.

Изучение влияния препарата на гематологические показатели проводили на подопытных животных (кролики, поросята, телята). При этом контролировали содержание гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и лейкограмму.

Биохимические показатели сыворотки крови оценивали по таким параметрам, как общий белок, глюкоза, биллирубин, холестерин, триглицериды. Анализ полученных результатов показывает, что гематологические и биохимические показатели крови кроликов, которые получали терапевтические дозы препарата, находятся в пределах физиологической нормы.

Относительное количество нейтрофилов на 15-й день возрастало на фоне некоторого снижения количества лимфоцитов, но эти изменения не столь существенны, т.к. они обусловлены в основном индивидуальной реактивностью организма подопытных животных.

Препарат не оказывает существенного воздействия как на метаболизм животных в целом, так и на такие параметры обмена веществ, как углеводный, жировой и белковый обмен.

Таблица 1 Гематологические показатели крови кроликов

Подтверждением сказанному может служить функциональное состояние почек животных, которое контролировалось по основным показателям мочи: содержание белка, рН и плотность. Указанные параметры соответствуют физиологической норме. В опыте использовали 5 кроликов массой 2,0-2,2 кг; 2 группы - контрольная - 2 головы и опытная - 3 головы. Достоверных отличий в физиологическом состоянии почек кроликов после применения терапевтической дозы препарата не выявлено, т.е. препарат не оказывает токсического воздействия на функционирование почек. Переносимость препарата ниацид-премикс изучена в опытах на кроликах и поросятах.

Таблица 2 Биохимические показатели сыворотки крови кроликов

За животными вели наблюдение в течение 5 суток. Результатами клинических наблюдений каких-либо отклонений в поведении и симптомов заболевания у животных не наблюдали. При выборочном убое животных патологоанатомических изменений в паренхиматозных органах не выявлено. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что препарат ниацид-премикс не оказывает токсического воздействия на организм животных в терапевтической дозе, а также в 9 раз превышающей терапевтическую, что указывает на его относительную безвредность и хорошую переносимость животными.

Эмбриотоксическое и тератогенное действие препарата ниацид-премикс

Мы изучили возможное эмбриотоксическое и тератогенное действие противопаразитарного авермектин содержащего препарата ниацид- премикс.

В процессе опыта крысам-самкам, находящимся в физиологической стадии проэструса-эструса подсаживали самцов (4:1). О беременности подопытных животных судили по результатам анализа влагалищных мазков. Первый день беременности соответствовал дню обнаружения спермиев в мазке. Изучаемый препарат давали животным с 7-го по 16-й дни беременности в дозе, превышающей терапевтическую в 3 раза, а именно - 600 мкг/кг массы по действующему веществу. На 20-21-й день беременности животных убивали, вскрывали и контролировали: число желтых тел и мест беременности, число плодов и их массу, постимплантационную и общую смертность эмбрионов. Масса, размеры и другие показатели эмбриогенеза крыс в контроле и опыте не имели статистически достоверных различий и находились в пределах физиологической нормы. Уродливые плоды отсутствовали. Таким образом, препарат ниацид-премикс, содержащий в качестве действующего вещества натуральные авермектины, при введении в критические периоды беременным крысам не оказывает эмбриотоксического и терратогенного действия.

Влияние авермектинсодержащих препаратов на микрофлору желудочно-кишечного тракта крупного рогатого скота

В результате клинико-эпизоотологического анализа телят установлено, что от здоровых телят выделяется более 100 видов культур микроорганизмов, в структуре которых превалируют представители нормальной микрофлоры кишечника. При изучении возможного действия авермектин содержащих препаратов на нормальную кишечную микрофлору мы исследовали соотношение выделяемых культур у телят и поросят (для сравнения и повышения объективности результатов). В таблице представлены данные, показывающие соотношения микробных культур желудочно-кишечного тракта телят, обработанных препаратами ниацид-премикс и ниацид+.

У здоровых телят число микроорганизмов, относящихся к группе условно патогенных, колеблется в пределах 103 - 106 на грамм исследуемого материала из кишечника, а бифидо- и лактобактерии содержатся в количестве 109 - 1011 на 1 грамм.

Из этого ясно, что в кишечнике клинически здоровых телят содержится как симбиотическая, так и условно патогенная микрофлора, но их соотношение находится в эволюционно сложившейся норме. Как видно из приведенных данных, при обработке животных авермектин содержащими препаратами нормальное соотношение микрофлоры никак не нарушается.

Таблица 3 Действие авермектин содержащих препаратов на микрофлору кишечника здоровых телят

Примечание: ЕРЕС- энтеропатогенные, ЕАЕС- энтероадгезивные.

Таким образом, данные о том, что авермектинсодержащие препараты (авермектины) способствуют стимуляции развития условно патогенных микроорганизмов и подавляют рост симбиотической микрофлоры (Третьяков, 2003) не соответствуют истине. В структуре микрофлоры, выделяемой от здоровых животных, обследованных в последние три года (2006 - 2008гг.), превалируют представители нормальной флоры E.coli, Bifidum и Lactobacteria. При количественном подсчете микробных клеток в 1 гр. исследованного материала нормальная E.coli, Proteus vulgaris, Citrobacter, Klebsiella pnenmonica, EPEC, EAEC содержались в концентрации в 2006 году 96 - 9 10; в 2007 году 103-106; в 2008 году 911 - 912 : а бифидо- и лактобактерии в концентрации 10 13 - 1014;109-1011 ; 1014 - 1015.В материалах, полученных от больных животных через 10 дней после лечения ниацидом-премикс, в структуре кишечной микрофлоры ни в количественном, ни в качественном плане статистически достоверных различий не установлено. Приведенные материалы свидетельствует о том, что препарат ниацид-премикс содержащий в качестве действующего вещества комплекс натуральных авермектинов в терапевтической дозе не оказывает угнетающего или стимулирующего действия на кишечную микрофлору животных. Для подтверждения полученных данных был поставлен опыт по прямому выделению микроорганизмов из кишечника телят после обработки препаратами ниацид+ и ниацид-премикс

Таблица 4 Количество бактерий, выделяемых из кишечника телят, обработанных авермектин содержащими препаратами

Как видно из приведенных данных, общее содержание различных видов бактерий в кишечнике телят, а также их соотношение находятся в определенном соотношении, когда симбиотическая флора явно превалирует над условно патогенной флорой. Если бы авермектины, входящие в состав препаратов ниацид+ и ниацид-премикс, обладали стимулирующим действием на патогенные микроорганизмы и подавляли развитие симбиотических культур, то соотношение их было бы совершенно другим. Подводя итоги по данному разделу работы можно с уверенностью утверждать, что появившаяся в печати информация о негативном действии препаратов авермектинового ряда на кишечную микрофлору животных, экспериментально не подтверждается, по крайней мере, относительно препаратов ниацид-премикс, ниацид+.

Фармакотерапия основных паразитозов Центральной зоны Российской Федерации препаратами на основе натуральных авермектинов

В настоящее время для борьбы с инвазиями предложено множество препаратов, но наиболее эффективными по многим параметрам являются авермектин содержащие и поэтому они привлекают внимание во всех странах с развитым животноводством. Для профилактики и фармакотерапии паразитарных болезней мы разработали новые препараты ниацид-премикс, ниацид К, ниацид + на основе натуральных авермектинов, которые стали не только предметом производственных испытаний, но и новыми внедрениями в производство исследуемых регионов Центральной зоны Российской Федерации.

Фасциолез. Терапевтическую эффективность препарата ниацид-плюс при фасциолезе (Fasciola hepatica) крупного рогатого скота исследовали в сравнении с известными аналогами (триклабендазола суспензия 5%, роленол, сантел, сантомектин). Препарат применяли животным в соответствии с Инструкциями их применения, капрологические исследования проводили до опыта и через 30 дней после дегельминтизации. Полученные нами данные по сравнительной оценке фармакологических свойств нового авермектин содержащего препарата ниацид+, свидетельствуют о том, что он по антипаразитарной эффективности не уступает хорошо известным аналогам. Но он обладает несомненными преимуществами, связанными с относительно малым объемом вводимого животным препарата. Как известно, роленол (в качестве ДВ содержит клозантел) вводят крупным животным в объеме до 50 мл на голову (10 мл/50 кг), а ниацид+ (в качестве ДВ содержит абамектин и клозантел) вводят в дозе 1мл/50кг массы животного. Большие объемы вводимого препарата раздражают место инъекции, вызывают стресс и болевую реакцию животных. Препараты сантел (в качестве ДВ содержит клозантел) и сантомектин (в качестве ДВ содержит ивермектин и клозантел) содержат действующие вещества в более высокой концентрации, чем роленол, но меньше, чем ниацид+ и в связи с этим для обеспечения высокого терапевтического эффекта приходится вводит их в относительно больших объемах. Пик зараженности животных фасциолезом приходится на зимнее время, т.е. за пастбищный период животные заражаются дополнительно и в связи с этим следует ожидать, что обработку можно проводить также в ноябре -январе с целью достижения максимального эффекта. В одном из хозяйств Рязанской области экспериментальное изучение эффективности препаратов проведено в декабре -январе 2006 года. Путем предварительного капроскопического анализа было выбрано 28 спонтанно инвазированных фасциолезем и выбракованных из основного стада коров. Животные были разделены на 5 групп: животным первой группы (6 гол.) вводили подкожно в области шеи сантомектин в дозе 2 мл/50 кг массы; животным второй группы (6 гол) вводили препарат ниацид+ в дозе 1мл/50 кг массы; животным третьей группы (6 гол) вводили сантел в дозе 2мл/50 кг массы; животным четвертой группы (6гол) вводили препарат роленол 5мл/50 кг массы; животные пятой группы (4 гол) препаратом не обработаны и служили контролем. Эффективность препаратов учитывали на основании гельминтологических исследований после вскрытия печени и желчного пузыря убитых (по 3 гол) животных опытных и контрольных групп через 12 и 27 дней после введения препарата. При подсчете инвазионных единиц имагинальными считали фасциолы, в матке которых имеются яйца желтого цвета.В печени коров контрольной группы на 12 день после начала опыта содержится, в среднем по 9,54±2,36 преимагинальных и 31,88±5,11 имагинальных Fasciola hepatica.В печени животных, обработанных препаратами, встречаются в основном неполовозрелые формы, а их количество колеблется в пределах 4,27 - 8,52 экземпляров. По истечении 27 суток после обработки препаратами только у отдельных животных в печени выявляются единичные экземпляры фасциол. На 10 сутки после обработки животных наиболее высокую активность проявили ниацид+ и сантомектин, эффективность роленола и сантела значительно ниже. На 27 день после применения препарата от фасциол полностью не освободились только животные обработанные сантелом.Содержащие в своем составе ивермектин и авермектины сантомектин и ниацид+ соответственно проявили 100% эффективность против фасциол всех возрастов. Однако с учетом того, что экспериментальные данные показывают тенденцию о более эффективном подавлении имагинальных фаз фасциол, ясно, что наиболее эффективным со всех точек зрения представляется обработка животных после пастбищного периода зимой. В указанное время, т.е. в декабре-феврале, паразит находится в половозрелом состоянии и наиболее чувствителен к антигельминтикам.

Диктиокаулез. Диктиокаулезную ситуацию молодняка крупного рогатого скота и испытание антигельминтной эффективности препаратов проводили в Ельниковском районе Республики Мордовия в августе-сентябре 2008 года. В эксперимент было привлечено 36 голов молодняка крупного рогатого скота, спонтанно инвазированного Dictyocaulus viviparus

Таблица 5Эффективность авермектинсодержащих препаратов при диктиокаулезе телят

Полученные данные свидетельствуют о высокой эффективности против диктиокаулеза препаратов, содержащих в качестве активного начала авермектины или ивермектин. Препараты при применении в дозе 0,2 мг д.в./ кг массы тела животного обеспечивают практически 80-100% лечебный эффект. В одном из опытов, лечения диктиакаулёза телят в базовых хозяйствах Рязанской области изучили по следующей схеме: все животные были разделены на три группы: Первая опытная группа(40 голов) ниацид - премикс. Препарат 0,2 % скармливали после тщательного смешивания с кормом в дозе 4 гр. на 50 кг. массы два дня подряд. Вторая опытная группа(40 голов) нилверм внутрь в дозе 0,01 г/кг массы двукратно с интервалом одни сутки. Третья опытная группа (40голов)ниаид-плюс внутримышечно в дозе 1мл/50 кг массы. Четвертая опытная группа(40 голов) ниацид-К накожно в дозе 1 капля на 20кг массы животного. Пятая группа(10 голов) контрольная. Эффективность сравниваемых препаратов оценивали по общему состоянию подопытных животных. Ни у одного животного после обработки препаратами каких либо отклонений в физиологическом состоянии не замечено. Результаты диагностических вскрытий убитых на нужды хозяйства через сорок дней опыта отрицательны. Полученные данные свидетельствуют о высокой экстенсэффективности сравниваемых препаратов против диктиакаулёза телят 97-100%. В исследуемых регионах в первые личинки диктиокаул в фекалиях телят обнаруживали в конце июня, т.е. на 8 неделе выпаса с последующим увеличением экстенсивности и интенсивности инвазии, которая достигала своего максимума к 16 неделе выпаса(сентябрь),анализируя представленные данные, следует отметить, что, с целью предотвращения заражения животных диктиокаулами мы считаем наиболее рациональным является двукратное применение антигельминтиков авермектинового ряда, как наиболее эффективные и безвредные в июне и сентябре, т.е на 8 и 16 неделях после выгона телят на пастбище. Результаты наших исследований не согласуются с данными Западной Части Европы, где дегельминтизацию обычно проводят на третий , пятый и тринадцатой неделях выпаса. Учитывая то, что кр.рог.ск. с возрастом приобретают устойчивость к заражению диктиокаулезом, взрослое поголовье не дегельминтизируют.

Гиподерматоз Эффективность ниацид-К при гиподерматозе крупного рогатого скота изучена в опытах, проведенных на коровах различных хозяйств Рязанской области. В работе использовано значительное поголовье животных (470 голов коров, принадлежащих к-зу «Заветы Ильича» Касимовского района, СПК «Санское», В/с «Пробуждение» Шиловского района, СПК «Родина» Путятинского района) спонтанно пораженных гиподерматозом. При этом показано, что эффективность Ниацид-К находится в пределах 100%. Например, в одном из опытов в В/с «Пробуждение» Шиловского р-на была проведена профилактическая обработка коров против гиподерматоза препаратом ниацид-К. Препарат в дозе 1 капля на 50, 100 и 200 кг живой массы наносили в области хвостового углубления. Всего в опыте использовано 185 коров черно-пестрой породы массой 430-450кг. Учет антипаразитарной эффективности препарата проводили путем осмотра животных на наличие желваков и общее состояние коров. Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности изучаемого препарата при гиподерматозе крупного рогатого скота. Ни у одной коровы из 185 обработанных препаратом ниацид-К не обнаружено характерных желваков (личинки гиподерм третьей стадии), что является свидетельством 100% -й эффективности препарата против гиподерматоза. При осмотре подопытных животных установлено, что личинки 3-й стадии развития подкожного овода полностью погибли, мумифицировались или частично лизировали. Общее состояние подопытных животных соответствовало физиологическим нормам. Обращает на себя внимание тот факт, что препарат применяли в дозе не 1 капля на 20 кг массы, а 1 капля на 50,100 и 200 кг массы животных. Это свидетельствует о высокой эффективности препарата против подкожного овода, т.е. даже при снижении концентрации действующего вещества в 10 раз ниацид-К сохраняет практически 100%-ную эффективность против возбудителя гиподерматоза Таким образом, приведенные материалы свидетельствуют о том, что новый противопаразитарный препарат ниацид-К, содержащий в качестве действующего вещества комплекс натуральных авермектинов, обладает биоцидным действием на возбудителей гиподерматоза крупного рогатого скота. Препарат обладает существенным преимуществом перед известными аналогами т.к. для его применения не требуется наличие стерильных шприцов. Препарат капельно наносят на кожу животных, что предотвращает стрессовое воздействие на них, облегчает труд ветеринарных специалистов и удешевляет процесс проведения противопаразитарных лечебно-профилактических мероприятий. По своим лечебно-профилактическим характеристикам ниацид-К не уступает известным авермектинсодержащим аналогам. При гиподерматозе крупного рогатого скота испытание эффективности препаратов авермектинового ряда проводили также при введении различных доз лекарственных средств. В Касимовском районе Рязанской обл. в 2006 году на 146 нетелях 1,5-2-летнего возраста проведено испытание препаратов путем введения препаратов в различных дозах. Эффективность препарата учитывали через 3 месяца после применения изучаемых препаратов.

При снижении используемой дозы препаратов, т.е. при относительно низком содержании действующего вещества в препарате наблюдается соответствующее снижение противопаразитарной эффективности лекарственных средств. Эти данные говорят о том, что стремление некоторых разработчиков противопарпазитарных препаратов включать в состав препаратов минимальные количества субстанций может способствовать к отбору резистентных форм паразитов.А в целом полученные результаты исследований свидетельствуют о высокой эффективности препаратов в терапевтических дозах.

Псороптоз При псороптозе крупного рогатого скота испытание эффективности препаратов проведено в Моршанском районе Тамбовской области на 54 нетелях 1,5-2,5 летнего возраста черно-пестрой породы. Животные были спонтанно инвазированы клещами Psoroptes bovis и у них отмечали клинические признаки псороптоза: очаги поражения у основания рогов, у хвоста, на крестце, расчесы. Подопытные животные были разделены на 8 групп. Схема опыта и результаты представлены в таблице. При двукратной обработке интервал составлял 9 суток.

Проведенные исследования показали, что до лечения в соскобах кожи у животных были обнаружены 12-18 экземпляров клещей на разных стадиях развития.

Таблица 6 Лечебная эффективность препаратов при псороптозе крупного рогатого скота

Результаты опыта свидетельствуют о высокой акарицидной эффективности всех препаратов при двукратном применении их. Однократное применение препаратов все-таки не обеспечивает полного освобождения животных от клещей, что связано с низким действием их на начальные фазы развития возбудителя псороптоза.