Обоснование методов функциональной диагностики животных на предубойном этапе и оценки безопасности мяса при пищевых зоонозах

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

06.02.05 - ветеринарная санитария, экология, зоогигиена

и ветеринарно-санитарная экспертиза

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

ОБОСНОВАНИЕ МЕТОДОВ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЖИВОТНЫХ НА ПРЕДУБОЙНОМ ЭТАПЕ И ОЦЕНКИ БЕЗОПАСНОСТИ МЯСА ПРИ ПИЩЕВЫХ ЗООНОЗАХ

Нечаев Андрей Юрьевич

Санкт-Петербург - 2010



Работа выполнена на кафедре ветеринарно-санитарной экспертизы ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»

Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Алтухов Николай Михайлович

доктор ветеринарных наук, профессор

Долгов Виктор Андреевич

доктор ветеринарных наук, профессор

Мухина Нина Васильевна

Ведущая организация ФГОУ ВПО «Московский государственный университет прикладной биотехнологии»

Защита диссертации состоится «___» _____________ 2010 г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 220.059.02 при ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу: 196084, г. Санкт-Петербург, ул. Черниговская, д. 5.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»

Автореферат разослан «___» _____________ 2010 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Урбан В.Г.



ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Пищевые зоонозы входят в число наиболее опасных для человека и животных заболеваний. Они распространены как на территории Российской Федерации, так и в странах ближнего и дальнего зарубежья (В.П. Сергеев, 2001; Е.Н. Морозова, 2003; В.А. Долгов, 2005; Г.Г. Онищенко, 2005).

Постоянно меняющаяся ситуация, связанная с экологическими проблемами внешней среды, изменением резистентности организма животных и адаптации возбудителей к условиям обитания требует разработки новых методических подходов, отражающих динамику перемен в сообществе живых организмов и природы (В.В. Макаров, А.М. Смирнов, В.В. Сочнев, А.А. Алиев, 2004).

Работами F. Feldhusen, J. Hartung(1997), K. Fehlhaber, T. Alter (1999) показано, что изменения условий внешней среды, воздействия стрессовых и физических нагрузок снижают защитные функции организма животных и создают условия, стимулирующие жизнедеятельность патогенных микроорганизмов. В таком сообществе только за счет специфической и неспецифической резистентности живой организм способен сохранить гомеостаз и обеспечить в процессе эволюции своё видовое постоянство.

Подобные, но более кратковременные, внешние и внутренние повреждающие факторы воздействуют на животных на предубойном этапе. Установлено, что у 15 - 30 % животных в этот период снижается качество самых ценных частей туши (A. Schьtte, 1994; K. Troeger, 1995; F. Feldhusen, J. Hartung, 1997; C. Бbraham, 2006).

Пункт 1.2. «Правил ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов» (1983) определяет различное отношение к убою животных в зависимости от их состояния, однако, до настоящего времени объективные критерии для определения предубойного состояния животных отсутствуют.

В литературе имеются сведения о снижении резистентности в условиях воздействия различных повреждающих факторов, но исследования показателей гомеостаза у животных на предубойном этапе не проводились (N.N. Lizko, 1987; E. Fazio, A. Ferlazzo, 2003).

Современные требования к качеству и безопасности продуктов питания предполагают всестороннюю комплексную оценку факторов, воздействующих не только на состояние защитных функций животного, но и на здоровье человека. Наиболее значимой опасностью для благополучия населения является микробное загрязнение продуктов возбудителями инфекций с пищевым путем передачи. Предупреждение пищевых зоонозов требует разработки новых подходов и критериев в системе ветеринарно-санитарного контроля, в том числе и внедрение высокочувствительных и эффективных методов микробиологического и молекулярно-генетического анализа (Б.Д. Маккреди, Д.А. Чимера, 1999; Ю.К. Ерофеева, К.С. Янковский, Ю.Г. Костенко, 2003; С.А. Шевелева, И.М. Нитяга и соавторы, 2005; Н.Р. Ефимочкина, 2008).

С ростом распространенности и опасности пищевых зоонозов связана необходимость совместных усилий по изучению и оценке методов их выявления. Существующая в России система контроля за качеством и безопасностью продуктов животноводства существенно отличается от системы, принятой в странах ЕС и США (ФЗ №184 - ФЗ «О техническом регулировании» от 27.12.2002; СанПин 2.3.2.1078 - 01; Л.Г. Подунова, 1996; Р.К. Шарма, 1999; В.И. Белоусов, А.С. Герасимов, 2004; Е.Н. Морозова, 2005; А.Н. Иванкин, Т.Г. Кузнецова, 2005).

Для улучшения доступа животноводческой продукции России на мировой рынок требуется совершенствование и гармонизация международных и национальных методов ветеринарно-санитарной экспертизы. Оценка мяса и мясопродуктов в системе международных координат позволит более эффективно решать задачи ветеринарно-санитарной экспертизы по обеспечению стабильного благополучия и безопасности здоровья населения. Объединяющей основой содружественного решения проблем является разработка новых и использование унифицированных методов, основанных на достижениях биохимии, физиологии, патофизиологии, микробиологии, генетики и применении современного аппаратурного оснащения. Это и определяет актуальность темы. Настоящая работа является результатом выполнения научно-исследовательских тем Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины с 1998 по 2008 гг. по кафедрам оперативной хирургии и ветеринарно-санитарной экспертизы.

Цель работы. Целью проведенных исследований является обоснование методов функциональной диагностики для определения состояния животных на предубойном этапе и оценки безопасности мяса при пищевых зоонозах.

Задачи исследования. В соответствии с поставленной целью в работе были определены следующие задачи:

1. Провести комплексное исследование функции систем и органов, определяющих их способность сохранять один из показателей гомеостаза (рН крови) у животных в условиях функциональных нагрузок.

2. Определить степень и характер нарушений показателей кислотно-щелочного баланса (КЩБ) у животных при дозированных функциональных нагрузках на предубойном этапе.

3. Изучить механизмы компенсации физиологических систем и органов, обеспечивающих сохранение функционального гомеостаза;

4. По интенсивности развития нарушений установить факт наличия и степени недостаточности функциональных систем, обеспечивающих постоянство рН крови.

5. Разработать и обосновать методические подходы для проведения функциональных исследований у животных на предубойном этапе.

6. Определить взаимосвязь изменений показателей КЩБ при функциональных нагрузках с результатами бактериологических исследований мезентериальных лимфоузлов.

7. Исследовать влияние функциональных нагрузок, полученных животными на предубойном этапе, на физико-химические показатели мяса.

8. Определить эффективность методов, применяемых при экспертизе мяса на Tr. spiralis при наличии слабой инвазии.

9. Провести сравнительную оценку методов по выявлению по выявлению L. monocytogenes и сальмонелл в мясе и мясопродуктах.

10. Сопоставить результаты первичных посевов для избирательного роста листерий и определить возможности для количественного определения L. monocytogenes в колбасных изделиях и продуктах из мяса.

Научная новизна работы. Впервые на основании комплексного физиологического исследования проведена оценка состояния функции систем и органов, обеспечивающих постоянство одной из важнейших констант организма - рН крови в условиях воздействия различных повреждающих факторов внешней и внутренней среды (физических, биологических, стрессовых и др.) на различных стадиях предубойного этапа, связанного с транспортировкой животных к месту убоя. Установлено, что количественная характеристика критериев, обеспечивающих кислотно-щелочной баланс, позволяет не только выявить факт нарушения функционального гомеостаза, но и определить градации степеней недостаточности функциональных систем и органов, обеспечивающих постоянство рН крови. предубойный нагрузка мясо экспертиза

Впервые показано, что при различных функциональных нагрузках, обусловленных расстоянием от фермы (хозяйства) до убойного пункта и временем транспортировки, в организме животных имеет место тесная связь между соотношением аэробных и анаэробных механизмов энергообразования и величиной рН крови.

Установлена взаимосвязь между физиологическими параметрами, характеризующими функцию систем и органов, лимитирующих окислительные процессы в организме свиней в условиях различных нагрузок, и физико-химическими и микробиологическими показателями мяса.

Впервые введены количественные и качественные критерии, позволяющие определить резистентность (устойчивость) систем и органов, опираясь на их функциональное состояние. Это даст возможность предопределить и объективизировать экспертное заключение о состоянии животного, своевременно устранить выявленные нарушения и в конечном итоге обеспечить выпуск качественной и безопасной мясной продукции.

Предложен унифицированный подход к результатам исследований, полученных различными методами, применяемыми для выявления трихинелл при слабой инвазии, сальмонелл и L. monocytogenes на основе критериев эффективности, специфичности и чуствительности.

Определены пути совершенствования при выборе питательных сред для идентификации бактерий L. monocytogenes и их количественного определения в колбасных изделиях и продуктах из мяса в соответствии с международными требованиями.

Практическая значимость и реализация результатов работы. Установленные функциональные критерии определения состояния животных и проведение сравнительной оценки методов по выявлению патогенных листерий, сальмонелл и трихинелл в мясе позволяют:

- в комплексе с клинической картиной выявить функциональные нарушения, обеспечивающие гомеостаз, и дать объективную оценку состояния резистентности животного;

- провести коррекцию выявленных нарушений физиологических систем, обеспечивающих постоянство рН крови, у животных до убоя под контролем показателей кислотно-щелочного баланса;

- предупредить микробную контаминацию туш;

- повысить качество и безопасность мяса;

- использовать функциональные методы в практике ветсанэкспертизы на пред-убойном этапе, ввести количественную характеристику показателей, определяющих функциональное состояние животного и устанавливать не только наличие факта недостаточности той или иной физиологической системы, ответственной за гомеостаз, но и определить степень нарушений;

- обобщить опыт, выбрать и усовершенствовать методы для выявления листерий и сальмонелл, а также для определения трихинелл в условиях слабой инвазии мяса.

Применение современного технического оснащения позволяет в полевых условиях контролировать функцию физиологических систем и органов животных, обеспечивающих резистентность организма. Их применение объективизирует заключение о состоянии животных и дает возможность провести мероприятия, направленные на предупреждение пищевых зоонозов. Суммы средств, вложенных на приобретение такой аппаратуры, значительно меньше, чем суммы затрат на рабочие и лабораторные издержки при выявлении возбудителей и значительно уступают экономическим потерям, связанным с борьбой и ликвидацией последствий заболеваний.

По результатам исследования выпущены методические рекомендации:

Исследование мяса и мясопродуктов на цистицеркоз и трихинеллез (утв. методическим советом Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины (СПбГАВМ), протокол №4 от 19.06.2001 г.)

Метод полимеразной цепной реакции (утв. методическим советом СПбГАВМ, протокол №1 от 30.11.2005 г.)

3. Применение метода ПЦР в ветеринарной практике (утв. методическим советом СПбГАВМ, протокол № 1 от 30.11.2005 г.)

Показатели кислотно-щелочного баланса и рН-метрия в практике ветеринарно-санитарной экспертизы (утв. методическим советом СПбГАВМ, протокол №2 от 28.02.2007 г.)

Оценка предубойного состояния животных на основе показателей кислотно-щелочного баланса (утв. Отделением ветеринарной медицины РАСХН 24.06.2009 г.).

Количественное определение Listeria monocytogenes в колбасных изделиях и продуктах из мяса (утв. Отделением ветеринарной медицины РАСХН 24.06.2009 г.).

Материалы работы использованы в учебном процессе на кафедре ветеринарной санитарии и гигиены ФГОУ ВПО СПбГАВМ, на кафедре ветсанэкспертизы и акушерства Якутской государственной сельскохозяйственной академии, на кафедре ветеринарно-санитарной экспертизы Витебской ордена «Знак Почета» государственной академии ветеринарной медицины и Московского государственного университета прикладной биотехнологии.

Результаты исследований с положительным эффектом применяются в хозяйствах Ленинградской области и госветучреждениях Санкт-Петербурга при определении предубойного состояния животных и оценке методов выявления возбудителей пищевых зоонозов по критериям чувствительности и специфичности.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на ежегодных научных конференциях профессорско-преподавательского состава Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины (1997-2009гг.), на заседаниях методической комиссии и ученого совета СПбГАВМ (1998-2009гг.), на заседании издательских советов СПбГАВМ (2001-2009), на межкафедральных заседаниях профессорско-преподавательского состава СПбГАВМ (2000-2008), на 48-й и 49-й международных научных конференциях «Гигиена продуктов животного происхождения» (Гармиш-Партенкирхен, Германия 25-28.09.2007г. и 29.09-02.10.2008 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

«Функциональная диагностика» - новое направление в проведении клинико-функционального заключения при оценке состояния животных на предубойном этапе.

Методы функциональной диагностики обеспечивают индивидуальную оценку функционального состояния органов и систем, определяющих рН крови.

Показатель гомеостаза рН крови позволяет оценить резистентность организма животного в меняющихся условиях внешней среды и воздействия различных повреждающих факторов.

Имеется взаимосвязь между величиной рН крови у животного на предубойном этапе и безопасностью и качеством мяса.

Информация о состоянии кислотно-щелочного баланса по поддержанию гомеостаза позволяет провести коррекцию рН крови у животных на предубойном этапе.

Критерии рациональных подходов и методов ветеринарно-санитарной экспертизы при оценке безопасности мяса:

- при слабой инвазии мяса личинками Tr. spiralis;

- при выборе методов для выявления в мясопродуктах сальмонелл и L.monocytogenes

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 40 научных работ, 10 из которых связаны с методами функциональной диагностики по определению состояния животных и возможности его коррекции при воздействии повреждающих факторов (оперативных вмешательств, физических, химических и стрессовых нагрузок), 30 посвящены вопросам оценки безопасности мяса при пищевых зоонозах, включая 2 статьи в зарубежных изданиях. Выпущено 1 учебное пособие и 6 методических рекомендаций. В изданиях, регламентированных ВАК РФ для докторских диссертаций, опубликовано 11 работ, в которых изложены основные положения и выводы по изучаемой проблеме.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 291 странице компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и приложений. Список литературы включает 437 источников, в том числе 210 отечественных и 227 иностранных авторов. Материал иллюстрирован 44 таблицами и 25 рисунками.



СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследований

Объекты, методы и объемы исследований. Работа выполнена на кафедре ветеринарно-санитарной экспертизы ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».

Для определения функциональных методов исследования при экспертном заключении о состоянии животного было обследовано на различных стадиях предубойного этапа 96 молодых свиней. Свиньи относились к стресс-устойчивой белой латвийской породе и принадлежали фермерским хозяйствам Краславского района. Они были представлены различным полом (40-+ и 56->), подбирались по сходной зоотехнической характеристике: возрасту (от 6 до 9 месяцев) и массе (80 - 100 кг). В качестве дозированной по длительности и интенсивности функциональной нагрузки выбраны естественные физические и стрессовые факторы, действующие на животных при транспортировке к месту убоя. Животные транспортировались из ферм и хозяйств, находящихся в радиусе до 3 км; 50км и 70 км. Время в пути при этом составляло соответственно до 0,5 часа; 1,0 часа и 1,5 часа. По степени различали легкую, среднюю (умеренную) и тяжелую функциональную нагрузку и соответственно выделяли три группы свиней: I группу, получивших легкую нагрузку, составляли 35 животных; II группа, перенесших среднюю нагрузку, включала 31 животное; III группа, которым предъявлялась тяжелая нагрузка, состояла из 30 животных.

Для определения реакции физиологических систем и органов на функциональную нагрузку выбран комплекс функциональных показателей, который наиболее отчетливо характеризовали исследуемую систему или орган, отвечали цели исследования при работе с животными в естественных производственных условиях (табл.1).



Таблица 1 - Комплекс функциональных показателей для характеристики физиологических систем и органов, обеспечивающих резистентность животных при транспортировке

Исследуемые физиологические реакции	Характеристика показателей
Резистентность организма	рН крови
Уровень энергообмена	HL - концентрация молочной кислоты (ммоль/л) НGl - концентрация глюкозы (ммоль/л) ВЕ - дефицит буферных оснований (мэкв/л)
Степень оксигенации крови	SаO2 - насыщение крови кислородом (%) РаО2 - напряжение кислорода крови (мм рт.ст.)
Эффективность легочного газообмена и кровообращения	РаСО2 - напряжение углекислого газа в крови (мм рт.ст.) ЧД - частота дыхания в минуту ЧП - частота пульса в минуту

Физиологические параметры регистрировали на каждой из стадий предубойного периода: перед транспортировкой (исходная стадия); после транспортировки - стадия прибытия на убойный пункт; предубойная стадия - непосредственно перед убоем. Продолжительность предубойной стадии составляла во всех группах в среднем 1 час.

Резистентность организма животных оценивали по их способности сохранять один из интегральных показателей гомеостаза - рН крови. Зависимость рН от функции систем и органов, определяющих метаболический и дыхательный компоненты, представлена в формуле (1), вытекающей из уравнения Гендерсона-Гассельбаха:

Это отношение отражает важность физиологических и химических буферных систем, обеспечивающих регулировку концентрации ионов водорода. О возможностях этих систем выполнить гомеостатическую задачу в условиях функциональных нагрузок судили по показателям кислотно-щелочного баланса в артериальной крови: напряжению углекислого газа (РаСО2, мм.рт.ст), дефициту буферных оснований (ВЕ, мэкв/л), отражающих соответственно дыхательный и метаболический компоненты в формуле (1).

Показатели КЩБ определяли микрометодом Аструпа в модификации Зиггард-Андерсона на газоанализаторе АВL - 520, позволявшим одновременно регистрировать напряжение кислорода (РаО2, мм.рт.ст) в артериальной крови.

Взятие крови осуществлялось в гепаринизированные микрокапилляры (? 0,7 мл) или шприцы (? 1,0 мл). В последнем случае вместо прокола кожи выполняли пункцию ушной артерии. После взятия проб крови капилляр или шприц герметизировали. Консервация проб гепарином позволяла проводить исследование в течение 24 часов после их отбора.

Источником энергии, обеспечивающим функцию органов и систем животного, являются окислительные процессы. Достаточность обеспечения окислительных процессов кислородом до и после функциональных нагрузок определяли по показателям насыщения крови кислородом(SaO2%) и напряжения кислорода (РаО2,мм.рт.ст) в артериальной крови. Для наблюдения за динамикой изменения величины SaO2% использовали пульсоксиметр.

Интенсивность окислительных процессов и соотношение аэробных и анаэробных механизмов энергообразования в условиях воздействия функциональных нагрузок оценивали по показателям лактатметра (Lactate Scout) и глюкометра (Smart Scan), определяющих концентрацию молочной кислоты (HL, ммоль/л) и концентрацию глюкозы (HGl, ммоль/л) в крови.

Таким образом, выбранные для функциональных исследований методы базировались на применении современной доступной и распространенной в медицине, но недостаточно используемой при обследовании животных, диагностической технике. Техническое исполнение многих из приборов предусматривало их применение в полевых условиях (рН-метр, газоанализатор КЩБ, пульсоксиметр, глюкометр, лактатметр). Возможность калибровки приборов, количественный характер регистрируемых био-параметров обеспечивали сравнение полученных данных на различных стадиях предубойного этапа. Применение стандартизированной аппаратуры позволило провести унификацию подходов к анализу результатов исследования.

Результаты применения функциональных исследований в практике клинических и экспертных дисциплин в медицине (С.П. Боткин, 1888; С.С. Зимницкий, 1927; М.В. Черноруцкий, 1954; J.H. Comroe, 1957; И.И. Лихницкая, 1960), всё более широкое их использование в ветеринарии для решения задач, связанных с определением и коррекцией нарушений жизнеобеспечивающих систем и органов при неотложных состояниях и оперативных вмешательствах в условиях воздействия различных анестетиков (Б.С. Семенов, А.В. Яшин, А.Ю.Нечаев, 2000; М. Marahrens, 1994), позволили сформулировать следующие принципы применения функциональных методов для животных:

1. Функциональная нагрузка, дозированная по длительности и интенсивности, применяется там, где есть необходимость выяснения реакции физиологических систем или органа.

Для учета реакции на функциональную нагрузку выбираются методы, которые наиболее отчетливо характеризуют исследуемую систему или орган.

Трактовка данных функциональных исследований основана на сопоставлении нормативных (исходных) данных и физиологических параметров, полученных после функциональной нагрузки.

В целом при функциональном исследовании на различных стадиях предубойного периода у 96 животных проведена регистрация 2870 физиологических параметров.

Для определения степени контаминации сальмонеллами проводилось бактериологическое исследование мезентериальных лимфоузлов 95 туш сразу после убоя. Исследование осуществляли согласно ГОСТ 30519 - 97/ ГОСТ Р 50480 - 93 «Продукты пищевые. Методы выявления бактерий рода Salmonella», ГОСТ 21237 - 75 «Мясо. Методы бактериологического анализа» и международному стандарту ISO 6579 : 2002.

В послеубойный период было снято 475 физико-химических показателей мяса. Определение рН проводили потенциометром в водной вытяжке проб мяса по общепринятой методике с помощью лабораторного рН-метра «Статус». Для исследования брали пробы из m.semimembranosus. Измерения проводили в течение 24 часов после убоя в интервалах 0,5; 1; 2; 6; 24 часа у 95 туш. Данные измерений рН мяса в водной вытяжке сопоставляли с результатами исследований, полученных при определении рН внутри куска мяса электропотенциальным методом с помощью электрода, встроенного в клинок ножа (рН-метр «Статус-2»), применение которого позволяло исключить предварительную пробоподготовку и ускорить исследование.

С целью сравнительного анализа и оценки эффективности различных методов, используемых в отечественной и зарубежной практике ветсанэкспертизы, проводили лабораторные исследования 50 проб мяса и мясопродуктов на наличие бактерий рода Listeria и бактерий рода Salmonella. Материалом для определения листерий и сальмонелл служили образцы мясного сырья, мясных полуфабрикатов и готовых мясопродуктов. Отбор проб и их исследование на микробиологические показатели качества и безопасности оценивали по характеристикам, нормируемым ГОСТ 26668 - 85 «Продукты пищевые и вкусовые. Методы отбора проб для микробиологических анализов». В процессе работы применялись: культуральные методы с использованием хромогенных сред; иммуноферментный метод определения на автоматическом анализаторе VIDAS; молекулярно-биологический метод.

Оценка морфологических, культуральных и серологических признаков осуществлялась в соответствии с нормативными документами: ГОСТ 21237 - 75 «Мясо. Методы бактериологического анализа», ГОСТ 30519 - 97/ ГОСТ Р 50480 - 93 «Продукты пищевые. Методы выявления бактерий рода Salmonella» и ГОСТ Р 51921-2002 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения бактерий Listeria monocytogenes». Подтверждение положительных результатов и идентификацию выделенных бактерий проводили с использованием биохимических панелей API Listeria, API 20 E - Testkit («BioMerieux») и Enterotube (ISO 6579: 2002). Исследования выделенных культур на хромогенных средах XLD (Xylose-Lysin-Desoxycholat Agar) и ALOA (Agar Listeria Ottaviani Agosti) производства фирмы «BioMerieux» (Франция) выполняли согласно инструкциям по их применению.

Иммуноферментный метод (фермент-связанного флуоресцентного анализа) определения патогенных листерий и сальмонелл проводили на автоматическом анализаторе VIDAS с использованием наборов тестов VIDAS Salmonella (SLM) и VIDAS Listeria monocytogenes II (LMO 2) производства фирмы «BioMerieux» (Франция).

Молекулярно-биологический метод в реакции полимеразно-цепной реакции (ПЦР) использовали для индикации сальмонелл и патогенных листерий. При выполнении метода Real-Time PCR применяли праймеры (iQ-Check-Salmonella Kit; iQ-Check- Listeria monocytogenes Kit) и реагенты фирмы «Bio-Rad», Германия.

Для сравнения эффективности регламентированных методов по выявлению трихинелл при слабом заражении мяса исследовано 144 мышечных пробы. Пробы отбирали из жевательных мышц, ножек дифрагмы, межреберных мышщ, мышц живота, мышц сгибателей и разгибателей плечевого пояса инвазированной трихинеллами свиной туши. Исследования проводили согласно МУК по лабораторной диагностике трихинеллёза животных (утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 28.10.1998 г.) и Предписания Комиссии ЕС № 2075/2005 от 5.12.2005 г.

При компрессорной трихинеллоскопии из исследуемых проб по ходу мышечных волокон вырезались срезы (56 срезов с каждой пробы) величиной с овсяное зернышко (20 мм2), которые раздавливали между стеклами компрессориума и просматривали под микроскопом при 60-кратном увеличении.

Для исследования методом переваривания в искусственном желудочном соке была использована принятая в странах ЕС в качестве стандартной методика автоматического переваривания в аппарате для выделения личинок трихинелл Trichomatic-35®. Одновременно в аппарате исследовались до 35 мышечных проб массой 1,0 г. Состав искусственного желудочного сока был следующим: медицинский пепсин - 7г., 8,5% соляная кислота - 30 мл, вода - 400мл. Время переваривания составляло 10 минут. По истечении этого времени под микроскопом исследовалось наличие личинок трихинелл на мембранном фильтре аппарата.

В целом при сравнительном анализе и оценке различных методов для выявления возбудителей трихинеллеза, сальмонеллеза, листериоза в исследуемых пробах было использовано 5 методик, принятых в отечественной и зарубежной практике ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясопродуктов.

Результаты проведенных исследований обрабатывались с использованием методов вариационной статистики на персональном компьютере с использованием программы: Microsoft Excel 2003, «БИОСТАТ». Достоверность различий показателей в сопоставляемых результатах определялась по критерию Стьюдента. Статистически значимыми считали различия при значениях р‹0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Комплексная функционально-диагностическая оценка показателей дыхания, кровообращения и энергообмена у свиней на предубойном этапе

В соответствии с принципами проведения функциональных исследований на всех стадиях предубойного этапа проведена сравнительная оценка физиологических показателей, характеризующих возможности органов и систем животных по обеспечению постоянства рН крови в условиях различных дозированных нагрузок, связанных с транспортировкой к месту убоя.

Полученные исходные физиологические параметры (перед транспортировкой) и их динамика по прибытии на убойный пункт и перед убоем у животных, получавших легкую (I группа), умеренную (II группа) и тяжелую нагрузку (III группа), представлены в таблице 2.

Содержание глюкозы в крови перед транспортировкой составляло у свиней I группы 5,1 ± 0,1 ммоль/л, во II группе - 4,7 ± 0,3 ммоль/л, в III группе - 5,3 ± 0,2 ммоль/л. Статистическая достоверность между значениями I-й и II-й групп составляла p>0,05 при tSt=1,38, I-й и III-й групп - p>0,05 при tSt=1,16, II-й и III-й групп p>0,05 при tSt=1,66. Таким образом, существенных различий в исходной концентрации глюкозы в крови у животных всех групп до транспортировки не выявлено.

Таблица 2 - Функциональные показатели физиологических систем и органов у свиней на различных стадиях предубойного этапа

Стадии предубойного этапа Показатели	Перед транспортировкой- А	По прибытии на убойный пункт - В	Перед убоем - С	Достоверность различий А-В А-С В- С
НGl, ммоль/л HL, ммоль/л ВЕ, мэкв/л ЧД в 1 мин. РаСО2, мм рт.ст. ЧП в 1 мин. РаО2, мм рт.ст. SаO2, %	ЛЕГКАЯ НАГРУЗКА
	5,1 ± 0,1 5,6 ± 0,1 -0,3 ± 0,28 14 ± 0,6 41,5 ± 0,7 69 ± 1,0 96,4 ± 0,1 97,7 ± 0,07	8,0 ± 0,2 7,7 ± 0,3 -1,6 ± 0,24 28 ± 0,7 38,7 ± 0,9 88 ± 1,0 92,7 ± 0,2 95,1 ± 0,13	7,4 ± 0,4 6,4 ± 0,1 -0,9 ± 0,32 21 ± 0,4 39,5 ± 0,7 77 ± 1,0 94,6 ± 0,2 96,4 ± 0,18	* * * * NS * * * * * * * * NS NS * * * * * * * * NS * * * * * * * * * * * * * * * * * *
НGl, ммоль/л HL, ммоль/л ВЕ, мэкв/л ЧД в 1 мин. РаСО2, мм рт.ст. ЧП в 1 мин. РаО2, мм рт.ст. SаO2, %	УМЕРЕННАЯ НАГРУЗКА
	4,7 ± 0,3 5,5 ± 0,1 -0,4 ± 0,26 15 ± 0,4 42,3 ± 0,4 70 ± 1,3 96,4 ± 0,1 97,5 ± 0,07	8,4 ± 0,3 10,2 ± 0,3 -1,8 ± 0,64 36 ± 1,3 37,6 ± 2,3 94 ± 0,8 91,4 ± 0,1 94,8 ± 0,05	7,0 ± 0,2 12,9 ± 0,4 -1.2 ± 0,57 27 ± 1,0 38,1 ± 1,0 80 ± 0,9 93,8 ± 0,1 96,1 ± 0,07	* * * * * * * * * * * * * * NS * * * * * * * * * NS * * * * * * * * * * * * * * * * * *
НGl, ммоль/л HL, ммоль/л ВЕ, мэкв/л ЧД в 1 мин. РаСО2, мм рт.ст. ЧП в 1 мин. РаО2, мм рт.ст. SаO2, %	ТЯЖЕЛАЯ НАГРУЗКА
	5,3 ± 0,2 5,8 ± 0,3 -0,3 ± 0,40 14 ± 0,5 40,7 ± 0,4 70 ± 1,1 96,6 ± 0,1 97,7 ± 0,08	10,0 ± 0,1 12,9 ± 0,4 -2,2 ± 0,54 45 ± 1,8 34,4 ± 1,6 98 ± 1,1 89,1 ± 0,3 94,3 ± 0,18	8,4 ± 0,2 9,1 ± 0,4 -1,7 ± 0,39 29 ± 0,6 37,1 ± 0,7 84 ± 1,0 91,3 ± 0,1 94,8 ± 0,13	* * * * * * * * * * * * * * NS NS * * * * * * * * * * NS * * * * * * * * * * * * * * * * *

Уровни значимости: NS - p? 0,05 - незначимый; * - p < 0,05 - значимый;

* * - p < 0,01 - высокозначимый

По прибытии на убойный пункт во всех трех группах отмечалось увеличение содержания глюкозы в крови. После легкой функциональной нагрузки (I группа) концентрация глюкозы составляла 8,0 ± 0,2 ммоль/л. Во II группе животных, перенесших среднюю нагрузку величина НGl увеличилась до 8,4 ± 0,3 ммоль/л. Наиболее существен-ное увеличение концентрации глюкозы в крови отмечалось после интенсивной и длительной нагрузки, связанной с транспортировкой, у свиней III группы. Содержание глюкозы составляло 10,0 ± 0,1 ммоль/л. В I группе концентрация глюкозы в крови повысилась на 56,8% (p < 0,01 при tSt=13,18), во II группе - 78,7% (p < 0,01 при tSt=8,81), в III группе животных превышение величины НGl составляло 88,7% (p < 0,01 при tSt=21,36).

Полученные данные свидетельствуют о высоко значимых (p < 0,01) превышениях исходных значений величины содержания глюкозы в крови в каждой из трех групп животных после транспортировки. При этом наибольшее увеличение (на 88,7%) отмечалось у свиней, получавших тяжелую нагрузку.

Такая динамика изменений концентрации глюкозы в крови связана с возрастающими энергетическими потребностями организма свиней. По данным W. Kraft, N. M. Dьrr (1999), T. Horsch (2003), Hambrecht et al. (2004) выброс в кровь дополнительного количества глюкозы происходит за счет усиления печеночного гликолиза и направлен на увеличение мышечного гликогена. Последний необходим для более интенсивного метаболизма в мышечной ткани у животных, получавших длительные физические и стрессовые нагрузки.

Результаты исследований показали, что через час после транспортировки во всех трех группах концентрация глюкозы в крови упала в среднем на 13,7%, но оставалась достоверно выше средних исходных величин. В первой группе животных показатель HGl оставался на 45,1% (р<0,01 при tSt= 5,61), во второй - на 48,9% (р<0,01 при tSt= 6,39) и в третьей - на 58,5% (р<0,01 при tSt= 11,07) выше исходных значений.

Таким образом, и после транспортировки окислительные процессы находились на более высоком энергетическом уровне.

Но для окислительных процессов, обеспечивающих аэробное энергообразование и нормальное функционирование органов и тканей в условиях нагрузок, необходимо достаточное количество кислорода. Кислород в организм животных поступает за счет легочного газообмена, кислородсвязывающей функции крови и системы кровообращения.

Приведенные в таблице 2 данные показывают, что частота дыхания у животных по мере увеличения времени в пути и расстояния до убойного пункта возросла в I группе в 2 раза, во II-й - в 2,4 раза, в III-й - в 3,2 раза по сравнению с исходными величинами до транспортировки. Но наблюдаемое изменение частоты дыхания у животных в ответ на физические и стрессовые нагрузки не указывает на повышение эффективности легочного газообмена.

Как свидетельствуют ранее проведенные работы, наиболее информативным показателем эффективности газообмена в условиях воздействия на животных повреждающих факторов является величина напряжения углекислого газа в артериальной крови (Д.П. Дворецкий, 1994; Б.С. Семенов, А.Ю. Нечаев, 2002).

Проведенные исследования показали, что у всех животных увеличение нагрузки сопровождалось различной степенью снижения напряжения СО2 (РаСО2) в артериальной крови. Наиболее статистически достоверные различия в динамике этого показателя выявлены у свиней III группы (табл.2). По сравнению с исходным значением (40,7 ± 0,4 мм рт.ст.) величина РаСО2 в этой группе составляла после транспортировки 34,4 ± 1,6 мм рт.ст., p < 0,01 при tSt=3,82. За период восстановления показатель РаСО2 увеличился до 37,1 ± 0,7 мм рт.ст., но достоверные различия сохранились только с исходной величиной (p<0,01 при tSt=4,50). Анализ динамики величины РаСО2 свидетельствует об изменении функции внешнего дыхания у животных при тяжелой нагрузке в сторону гипервентиляции, более выраженной сразу после транспортировки.

О гипервентиляционном сдвиге в функции легких при предъявлении животным легких и средних нагрузок указывают достоверное снижение показателя РаСО2. В I группе величина напряжения углекислого газа снизилась после транспортировки по сравнению с исходной величиной на 2,8 мм рт.ст. (р<0,05 при tSt=2,46), а во II группе на 4,7 мм рт.ст. (р<0,05 при tSt=2,07). В этих группах, как и при тяжелой нагрузке, уровень вентиляции оставался повышенным и не восстановился до исходного уровня перед убоем.

Обобщение полученных данных по исследованию респираторного компонента, определяющего величину рН крови (формула 1), свидетельствует о том, что регулирующие механизмы в условиях различных дозированных нагрузок стремятся за счет увеличения частоты дыхания и гипервентиляции легких обеспечить сохранение постоянства рН крови животных.

Вторым функциональным звеном, обеспечивающим в процессе дыхания доставку кислорода к тканям, является кровь. Для характеристики крови как газотранспортной системы у животных проведено исследование частоты сердечных сокращений (ЧСС), напряжения кислорода в артериальной крови (РаО2) и степени насыщения крови кислородом (SаО2) на различных стадиях предубойного этапа (табл. 2).

Данные, полученные при исследовании ЧСС, указывают на высокодостоверную разницу в величине пульса до и после транспортировки. Наиболее значимое различие отмечалось у свиней, преодолевших наибольшее расстояние до убойного пункта. У них частота сердечных сокращений увеличилась на 40% (с 70 ± 1,1 до 98 ± 1,1, p < 0,01 при tst=17,94). По мере снижения функциональной нагрузки отмечалось меньшее увеличение величины ЧСС: во II группе на 34% (с 70 ± 1,3 до 94 ± 0,8, p < 0,01 при tst=15,69), в I группе на 28% (с 69 ± 1,0 до 88 ± 1,0, p < 0,01 при tst=13,48). Такую динамику физиологических параметров подтверждает опыт других исследователей, свидетельствующий о том, что регистрация того или иного показателя в условиях нагрузок в процентах исходной величины дает возможность наиболее точно выражать результаты функциональных исследований (Н.А. Агаджанян, А.И. Ефимов, 1986).

Анализ данных, представленных в таблице 2, свидетельствуют о прямой зависимости увеличения частоты пульса от величины нагрузки. Следует отметить, что после тяжелой нагрузки у животных не происходило восстановление ЧСС до исходного уровня. После восстановительного периода (перед убоем) его величина оставалась достоверно выше исходного уровня (84 ± 1,0 против 70 ± 1,1, p < 0,01 при tst=10,74), то есть оставалось компенсаторное напряжение системы кровообращения, связанное с необходимостью дополнительного снабжения тканей кислородом.

Результаты исследования напряжения кислорода в крови, полученные у свиней после транспортировки, показали изменение её величины по мере возрастания функциональной нагрузки. Различия в сторону уменьшения по сравнению с исходными величинами были выявлены у всех групп животных. В I группе наблюдалось падение величины РаО2 на 3,8% (с 96,4 ± 0,1 мм рт. ст. до 92,7 ± 0,2 мм рт.ст., p < 0,01 при tst=16,82), во II группе РаО2 уменьшилось по прибытии на убойный пункт на 5,2% (с 96,4 ± 0,1 мм рт. ст. до 91,4 ± 0,1 мм рт.ст., p<0,01 при tst=35,71). При тяжелой нагрузке отмечалось наиболее значимое уменьшение показателя напряжения кислорода в крови и составляло 7,8% (с 96,6 ± 0,1 мм рт. ст. до 89,1 ± 0,3 мм рт.ст., p < 0,01 при tst=23,44).

Таким образом, с возрастанием нагрузки уменьшалась величина РаО2. Наибольшие изменения отмечались у свиней, перенесших при транспортировке наиболее тяжелую нагрузку.

Анализируя полученные данные, следует отметить, что все регистрируемые физиологические параметры (частота дыхания, напряжение углекислого газа в артериальной крови, частота сердечных сокращений, напряжение кислорода в артериальной крови) характеризуют реакцию органов и систем, составляющих функциональные звенья, определяющие уровень насыщения крови кислородом. Сравнительный анализ динамики изменения полученных показателей по количественным характеристикам позволяет выделить гипердинамическую и гиподинамическую реакцию органов и систем в ответ на предъявленную организму нагрузку. Реакцию легких, малого и большого круга кровообращения по полученным физиологическим параметрам следует оценить как гипердинамическую. Она направлена на пополнение возросших потребностей организма в кислороде в условиях нагрузки и стресса и свидетельствует о наличии резервных возможностей органов и систем, обеспечивающих доставку кислорода к тканям.

Но резервы органов и систем ограничены. Снижение функциональных возможностей организма животных связано как с явной и скрытой патологией, так и с тяжестью перенесенных нагрузок.

Полученные результаты, представленные в таблице 2, свидетельствуют, что на фоне выраженной гипердинамической функциональной реакции звеньев, обеспечивающих напряжение кислорода в крови при тяжелой нагрузке, наблюдается достоверное различие в сторону снижения этого показателя с исходным значением после восстановительного периода. Величина РаО2 перед убоем у животных после тяжелой нагрузки составляла 91,3 ± 0,1 мм рт.ст. и достоверно (p < 0,01 при tst=37,86) отличалась от исходного уровня (96,6 ±0,1 мм рт.ст.). За период нахождения на убойном пункте величина РаО2 не восстановилась до начального значения.

У животных, перенесших легкую и среднюю нагрузку, за восстановительный период показатель достоверности различий напряжения кислорода в крови соответственно составлял tst = 8,18 и tst = 18,57 и отличался от исходной величины (p < 0,01).

Такое различие в величине РаО2 перед убоем указывает на гиподинамическую реакцию и связано со снижением функциональных возможностей у свиней по мере возрастания нагрузок.

Одним из механизмов компенсации, направленном на достаточное обеспечение тканей кислородом, в условиях изменения величины РаО2 является доставка его к тканям не за счет растворения в крови, а путем связывания с гемоглобином.

Принимая во внимание S-образную форму кривой диссоциации оксигемоглобина с очень крутым подъемом (между РаО2 10-15 мм рт.ст.) и пологой частью (между РаО2 70-100 мм рт.ст.), можно ожидать, что взаимоотношение колебаний между величинами РаО2 и SаО2 будет определяться пологой частью.

Исследования SаО2 подтвердили такое предположение. Средний уровень насыщения артериальной крови кислородом у животных I группы после транспортировки снизился на 2,5% (р<0,01 при tSt= 16,00), II группы - на 2,8% (р<0,01 при tSt= 31,40) и III группы на 3,5% (р<0,01 при tSt= 17,9) по сравнению с исходными значениями в каждой группе.

Сравнение динамики изменений величины напряжения кислорода и насыщения крови кислородом показывает, что в последнем случае во всех группах наблюдается в меньшей степени выраженная вариабельность. Сопоставление полученных данных показывает, что при одной и той же функциональной нагрузке большему изменению по величине РаО2 соответствует меньшее изменение SаО2.

Таким образом, величина напряжения кислорода более чувствительна к нагрузкам, получаемым животным при транспортировке, чем степень насыщения крови кислородом.

Такая форма зависимости по мнению И.И. Лихницкой(1973), В.А. Березовского (1975), М.А. Гриппи (1997), J.N. Cameron (1989) обеспечивает достаточную оксигенацию тканей, даже если РаО2 снизится до 70 мм рт.ст.

Полученные и представленные в таблице 2 результаты свидетельствуют, что при стрессовых и физических нагрузках, воздействующих на свиней при транспортировке, увеличиваются требования к физиологическим системам и органам, обеспечивающим доставку глюкозы и кислорода. Возрастание энергетических потребностей у животных осуществляется двумя путями окислительного распада глюкозы: аэробным и анаэробным энергообразованием. Конечным компонентом энергообразования является молочная кислота. По изменению её концентрации в крови определялось соотношение аэробных и анаэробных реакций.

При кратковременных нагрузках, в условиях достаточного кислородного обеспечения и запаса мышечного гликогена в работающих мышцах, энергообразование идет в основном за счет аэробного гликолиза. Это определило увеличение концентрации молочной кислоты в крови [HL] у животных I группы на 37,5% и её возрастание с 5,6 ± 0,1 ммоль/л в исходном состоянии до 7,7 ± 0,3 ммоль/л (р<0,01 при tSt= 6,56).

По мере увеличения тяжести функциональных нагрузок в организме животных происходило ограничение резервных возможностей кровообращения, компенсаторное напряжение вентиляции и снижение насыщения крови кислородом. Такая перестройка физиологических систем и органов обусловила сдвиг энергообразования в сторону анаэробного пути. В условиях недостаточного окисления молочная кислота накапливается в мышцах. Выбросом её в кровь объясняется увеличение HL в 1,8 раза у свиней II группы и в 2,2 раза у животных III группы по сравнению с исходными значениями. Величина концентрации молочной кислоты после транспортировки соответственно составляла 10,2 ± 0,3 ммоль/л и 12,9 ± 0,4 ммоль/л. Разность между этими величинами оставалась статистически достоверной (р<0,01 при tSt= 5,40), хотя была значительно меньше, чем их отличие от исходных показателей.

Накопление недоокисленных продуктов обмена веществ определило достоверность изменений показателя дефицита оснований в крови (ВЕ) при различных нагрузках по сравнению с исходными данными.

В I группе свиней дефицит оснований увеличился с -0,3±0,28 мэкв/л перед транспортировкой до -1,6±0,24 мэкв/л по прибытии на убойный пункт (р<0,01при tSt= 3,59). У животных III группы за счет поступления в кровь кислых продуктов дефицит оснований увеличился ещё больше с -0,3±0,40 мэкв/л до -2,2±0,54 мэкв/л (р<0,01 при tSt=2,73). Во II группе показатель ВЕ по прибытии на убойный пункт составил -1,8±0,64 мэкв/л против -0,4±0,26 мэкв/л в состоянии относительного покоя до транспортировки (р<0,05 при tSt=2,02).

Таким образом, у животных после транспортировки наблюдалось накопление недоокисленных продуктов, что повлияло на увеличение величины дефицита оснований в крови свиней во всех группах.

Анализ величины дефицита оснований у животных перед убоем показал, что средние значения во всех группах были выше исходных величин, хотя достоверного различия в I группе животных не выявлено (табл.2). Достоверная разница р<0,05 при tSt=2,51 величины ВЕ в восстановительный период (-1,7±0,39 мэкв/л) по сравнению с исходным значением (-0,3±0,40 мэкв/л) отмечалась у свиней III группы и у животных, перенесших среднюю нагрузку. В последнем случае показатель ВЕ за время пребывания на убойном пункте не успел восстановиться и составлял -1,2±0,57 мэкв/л, что достоверно (р<0,05 при tSt=2,03) отличалось от исходного значения (-0,4±0,26 мэкв/л).

Полученные данные свидетельствуют, что реакция на нагрузку, связанную с транспортировкой к месту убоя, по показателю ВЕ, отражающему метаболический компонент рН (формула 1), выражена у всех групп животных, но у свиней, перенесших среднюю и тяжелую нагрузку, количество недоокисленных продуктов обмена перед убоем оставалось высоким и не восстановилось до исходного уровня.

Обобщение результатов исследования физиологических параметров, представленных в таблице 2, указывает на то, что по мере возрастания функциональных нагрузок, то есть увеличения времени транспортировки и расстояния до убойного пункта, растет напряжение физиологических систем и органов, обеспечивающих дыхательный и метаболический компонент рН крови.

Анализ величин, характеризующих динамику физиологических параметров, свидетельствует, что увеличение функциональной нагрузки переводит организм животного на анаэробное энергообразование, сопровождается несоответствием поступления кислорода с интенсивностью обменных процессов, что и определяет изменение величины метаболического компонента. Но наличие в крови кислых продуктов, в частности молочной кислоты, снижает способность гемоглобина связывать кислород в крови. Об этом свидетельствует снижение уровня насыщения крови кислородом, особенно у свиней III группы. Такой физиологический механизм у животных, получивших тяжелую нагрузку, способствует более полной отдаче кислорода мышечной ткани.

Таким образом, динамичность физиологических функций, систем и органов, определяющих у животных респираторный и метаболический компоненты, обеспечивает постоянство величины рН крови и её устойчивость к воздействию различных физических, химических и биологических факторов. Опыт практического использования подтверждает, что при трактовке патофизиологических состояний у животных, связанных с изменением концентрации ионов водорода в крови, важно учитывать не их абсолютную величину, а соотношение этих компонентов (Л.Л. Шик, Н.Н. Канаев, 1980; Б.С. Семенов, А.Ю. Нечаев, 2000; J.N. Cameron, 1989).

рН крови как показатель резистентности организма при функциональных нагрузках

Количественное представление, стандартность и технологичность принципов измерения показателей КЩБ и их аналогичная техническая реализация в различных странах дают возможность гармонизировать результаты исследований и выработать единые количественные критерии для объективной оценки состояния резистентности животного на предубойном этапе.

В ходе проведенных исследований показателя рН крови в условиях относительного покоя не выявлено достоверной разницы в его величине в зависимости от пола. У хрячков этот показатель составлял 7,42 ± 0,007 против 7,43 ± 0,009 (р>0,05 при tSt= 0,91) у свинок. Не обнаружилось различия и по возрастным группам. Средние величины рН крови у свиней 6-7 месячного и 8-9 месячного возраста составляли соответственно 7,42 ± 0,008 и 7,43 ± 0,010 (р>0,05 при tSt= 0,76).

В исходном состоянии до транспортировки к месту убоя величина рН крови колебалась от 7,36 до 7,55 и в среднем по всем группам составляла 7,43 ± 0,01.

Полученные данные, обобщение накопленного материала и опыта зарубежных коллег позволило выделить следующие градации в изменении параметров рН крови, показателей респираторного (рСО2) и метаболического (ВЕ) компонентов (Д. Робинсон, 1969; Р. Хашен, Д. Шейх, 1981; А.Ю. Нечаев, 2001). Наличие этих трех показателей дает возможность определить величину и генез нарушений. Отклонения нормальных величин КЩБ представлены в таблице 3.

Соответственно значениям рН выделяются ацидоз компенсированный (рН=7,55-7,35); субкомпенсированный (рН=7,34-7,30); декомпенсированный (рН=7,29-7,21) и алкалоз компенсированный (рН=7,35-7,55); субкомпенсированный (рН=7,56-7,60); декомпенсированный (рН=7,61-7,68).

При клиническом осмотре и результатам исследования показателей рН крови в условиях относительного покоя у 95 обследованных животных перед транспортировкой на убойный пункт отклонений от нормы выявлено не было.

Таблица 3 - Отдельные показатели кислотно-щелочного баланса крови у свиней в норме и при патологии

Показатели	Норма	Степень нарушений	Ацидоз	Алкалоз
рН	7,35 - 7,55	умеренная выраженная тяжелая	7,34 - 7,30 7,29 - 7,21 7,20 и ниже	7,56 - 7,60 7,61 - 7,68 7,69 и выше
рСО2, мм рт. ст.	35,0 - 45,0	умеренная выраженная тяжелая	45,1 - 50,0 50,1 - 60,0 61,0 и ниже	34,9 - 28,0 27,9 - 20,0 19,9 и ниже
ВЕ, мэкв/л	+2,5 - - 2,5	умеренная выраженная тяжелая	-2,6 - - 5,2 -5,3 - -7,5 -7,6 и ниже	+2,6 - + 6,5 +6,6 - +12,0 +12,1 и выше

Анализ полученных данных после транспортировки показал, что только у 36 животных (38%) постоянство рН крови обеспечивалось без дополнительного привлечения резервных возможностей физиологических систем и органов, то есть все показатели КЩБ находились в пределах нормы. В 41 случае (43,1%) при нормальном значении рН крови наблюдались изменения дыхательных и метаболических компонентов, то есть имели место компенсированные нарушения систем и органов, обеспечивающих постоянство этого показателя гомеостаза. Субкомпенсированные нарушения величины рН наблюдались у 18 животных (18,9%).

Компенсированный дыхательный ацидоз отмечался в 16 случаях, компенсированный дыхательный алкалоз зарегистрирован у 18 свиней и в 7 случаях имел место компенсированный метаболический ацидоз. При компенсированных расстройствах КЩБ (рН в норме) одновременно наблюдались две противоположно направленных формы сдвигов, из которых одна причинная, другая компенсаторная. Так метаболический ацидоз компенсировался дыхательным алкалозом, дыхательный ацидоз - метаболическим алкалозом. Для определения тяжести предубойного состояния животных, возможности коррекции и прогноза учитывалось, какие из этих нарушений являются причиной, а какие следствием. Заключение основывалось на том, что причинные сдвиги КЩБ выражены значительнее, чем компенсаторные. Так, у одного из животных после транспортировки рН=7,36; РаСО2=32,9 мм рт.ст.; ВЕ = -5,5 мэкв/л, то есть при нормальном рН сдвиг метаболического компонента ВЕ выражен больше, чем дыхательного показателя РаСО2. В другом случае по прибытии на убойный пункт у поросенка зарегистрированы следующие показатели: рН=7,47; РаСО2=27,2 мм рт.ст.; ВЕ = -3,1 мэкв/л. В этом случае выражено увеличение РаСО2, а метаболический параметр ВЕ изменен умеренно. Таким образом, в первом наблюдении имеется метаболический ацидоз, компенсированный дыхательным алкалозом, а во втором - дыхательный алкалоз, компенсированный метаболическим ацидозом.

...