Иммунобиологические свойства хламидий, разработка и усовершенствование средств лабораторной диагностики и специфической профилактики хламидиозов сельскохозяйственных животных

Размещено на http://allbest.ru

На правах рукописи

Автореферат диссертации

на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Иммунобиологические свойства хламидий, разработка и усовершенствование средств лабораторной диагностики и специфической профилактики хламидиозов сельскохозяйственных животных

03.00.07.-микробиология; 16.00.03.-ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология.

Хусаинов Фидаиль Миннигалеевич

Казань-2007

Работа выполнена в лаборатории контроля и индикации возбудителей вирусных и хламидийных инфекций в объектах ветеринарного надзора ФГУ "Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных", на кафедре патологической анатомии имени К.Г.Боля Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана.

Научные консультанты: -доктор ветеринарных наук, профессор, Х.З. Гаффаров

-доктор ветеринарных наук, профессор, Ф.З. Авзалов

Официальные оппоненты:

-доктор ветеринарных наук, профессор П.М. Митрофанов

-доктор ветеринарных наук, профессор К.М. Салмаков

-доктор ветеринарных наук, профессор М.В. Харитонов

Ведущее учреждение: - Пермская государственная сельскохозяйственная академия

Защита состоится " 25 " сентября 2007 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д-220.012.01 при ФГУ "Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных" (ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") (420075, г. Казань, Научный городок-2).

С диссертацией можно ознакомиться библиотеке ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ" (г. Казань).

Автореферат разослан "____"_____________2007 года

Ученый секретарь диссертационного совета

к.в.н., с.н.с. Степанов В.И.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Хламидиозы с.-х. животных относятся к группе заболеваний зооантропонозов и представляют потенциальную угрозу здоровью человека из-за возможности заболевания людей в результате контакта с животными и птицами, пораженными ими (Шаткин А.А., 1989).

Паразитируя в организме, хламидии вызывают обширный спектр проявлений болезней: аборты, пневмонии, энтериты, артриты, конъюнктивиты, энцефалиты и др. У животных они способствуют бесплодию, снижению продуктивности, племенной ценности, нередко и гибели.

В 70-80 годы прошлого века, отечественными учеными описаны и изучены большинство хламидийных инфекций с.-х. животных (Терских И.И. 1964; Гаффаров Х.З., 1969,1986; Боровик Р.В. и др. 1975; Митрофанов П.М., 1980; Караваев, Ю.Д., Налетов Н.И., 1981; Авзалов Ф.З., Курбанов И.А. и др.,1980; Шафикова Р.А. и др.,1987; Хамадеев Р.Х., 1990). Однако, несмотря на очевидные успехи в изучении хламидиозов животных, уровень массовой диагностики и имеющиеся эффективные средства специфической профилактики хламидиозов не удовлетворяют требованиям практической ветеринарии.

Приоритетным в профилактике и ликвидации хламидиозов с.-х. животных остается применение вакцинных препаратов. Использование антибиотиков с профилактической и лечебной целью при хламидиозах животных экономически не оправдано и далеко не всегда эффективно (Караваев Ю.Д. и др. 2006).

В настоящее время проблема по созданию высокоэффективных биопрепаратов против хламидиозов крупного рогатого скота, свиней и лошадей приобретают особую актуальность.

Таким образом, разработка и усовершенствование средств и методов лабораторной диагностики и специфической профилактики хламидиозов с.-х. животных, а также внедрения их в ветеринарную практику остаются в центре внимания научного поиска.

Цель и задачи исследований. Цель исследований _ изучить иммунобиологические свойства выделенных нами штаммов хламидий и на их основе разработать и усовершенствовать средства лабораторной диагностики и специфической профилактики хламидиозов сельскохозяйственных животных.

При этом предусматривалось решить следующие задачи:

_изучить клинико-эпизоотологические проявления различных форм хламидиозов крупного рогатого скота, свиней и лошадей в хозяйствах региона Среднего Поволжья и Предуралья;

_выделить хламидий и изучить их иммунобиологические свойства, отобрать штаммы, обладающие антигенными и иммуногенными свойствами для возможного использования в качестве производственных;

-разработать технологию изготовления набора препаратов для диагностики хламидиозов животных в РНГА, испытать его эффективность в лабораторно-производственных условиях;

-разработать научную основу технологии производства моно- и полиштаммовых вакцин для специфической профилактики хламидиозов крупного рогатого скота и свиней;

_испытать экспериментальные и опытно-промышленные серии моно- и полиштаммовых противохламидиозных вакцин в различных регионах РФ и внедрить их в производство.

Научная новизна. Впервые выделены ранее неизвестные инфекционные агенты, являющиеся возбудителями болезней крупного рогатого скота, свиней и лошадей в хозяйствах региона Среднего Поволжья и Предуралья, которые по своим иммунобиологическим характеристикам (морфо-тинкториальным свойствам, патогенность для лабораторных животных, токсичность, групповая антигенная специфичность), а некоторые из них по фрагментам ДНК, выявленным специфическими праймерами (ПЦР), идентифицированы как представители рода Chlamydia (Chlamydophila).

Разработана технология получения эритроцитарного корпускулярного хламидийного антигена на основе возбудителя хламидиозного конъюнктивита крупного рогатого скота (штамм "СК-89") для изготовления "Набора препаратов для диагностики хламидиозов животных в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)". Подтверждена его высокая активность, специфичность и чувствительность (в 2-3 раза) по сравнению с существующим диагностикумом _ "Набором для серологической диагностики с.-х. животных в РСК".

Разработан способ повышения выхода биомассы хламидий, отличающийся от существующей технологии её получения (авторское свидетельство № 1641883 с приоритетом от 24.10.88 г.)

Усовершенствована технология изготовления и применения инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота, позволяющей повысить иммуногенную активность вакцины путем установления оптимальной концентрации хламидийного антигена и дозу вакцины, обеспечивающей формирование напряженного противохламидийного иммунитета у животных в период беременности и в первые дни жизни молодняка (патент на изобретение № 2092188 с приоритетом от 29.10.1991г.).

Впервые, на основе антигенов штаммов хламидий "МЗ-89", "СК-89" и "250", выделенных, соответственно, при менингоэнцефалите, конъюнктивите и аборте крупного рогатого скота, разработана полиштаммовая инактивированная эмульсионная вакцина против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота, обладающая широким антигенным спектром, обеспечивающая максимальную иммунологическую защиту вакцинированных животных от различных клинических форм проявления хламидийной инфекции (положительное решение ФИПС РФ о выдаче патента с приоритетом от 06.12.2005г.).

Используя антигены двух штаммов хламидий "РС-85" и "ЛС-87", выделенных при абортах и пневмонии свиней, впервые разработана инактивированная эмульсионная вакцина для специфической профилактики хламидиоза у свиней, содержащая оптимальное соотношение и концентрацию хламидийных антигенов в одной дозе вакцины и обеспечивающая при однократной инъекции стойкий иммунитет в период супоросности (патент на изобретение № 2247577 с приоритетом от 20.12.2002 г.).

Комплексными иммуноморфологическими исследованиями установлено, что инактивированная эмульсионная вакцина против хламидиоза свиней вызывает выраженную иммунологическую перестройку в организме привитых свиней, проявляющаяся усилением структурно-функциональной активностью иммунокомпетентных клеток в лимфоидных органах в виде лимфоидно-гиперпластической, плазмоцитарной и макрофагальной реакции, создавая тем самым морфологическую основу для формирования у них напряженного иммунитета против заражения хламидиями и не обладает побочным действием.

Практическая значимость. В результате проведенных исследований разработана и усовершенствована технология изготовления и применения моно-полиштаммовых вакцины для специфической профилактики хламидиозов крупного и мелкого рогатого скота и свиней. Использование их в системе противохламидийных мероприятий в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах, способствует сокращению количества абортов и мертворождаемости у маточного поголовья и увеличению в 2-4 раза рождаемости и сохранности молодняка.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на ежегодных отчетных научных конференциях ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ" (1987-2006гг.); региональных и республиканских научно-практических конференциях (Казань, 1987,1988,1989,1990; Троицк,1989; Киров, 1998); Всесоюзных и Всероссийских научных конференциях (Москва, 1987; Новосибирск, 1991; Харьков 1991; Владимир, 1995; Щелково, 1996,2001;2005; Казань 2002; Екатеринбург,1999); Международных научных конференциях (Москва, 1991; Воронеж, 1997; Казань, 1998, 2000; Ульяновск, 2006); съездах (Казань, 1995, 2000).

Результаты основных этапов исследований прошли комиссионную проверку с участием представителей ВГНКИ ветпрепаратов и ЦВЛ (г.Москва), заслушивались на заседаниях Ученых Советов ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (1994-2000 гг.).

На ВДНХ СССР в 1991г. "Вакцина против хламидиозов крупного рогатого скота" была отмечена серебряной медалью № 8092; "Вакцина полиштаммовая против хламидиоза крупного рогатого скота" представленная на ВВЦ в (1994г.) была удостоена медали "ЛАУРЕАТ ВВЦ" № 2357; "Вакцина против хламидиоза свиней"(1999г.) удостоена медали "ЛАУРЕАТ ВВЦ" №1983.

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликована 51 работа, получены три патента на изобретение РФ, одно авторское свидетельство.

На защиту выносятся следующие основные положения:

-результаты выделения и изучения иммунобиологических свойств хламидий, являющиеся этиологическими агентами болезней крупного рогатого скота, свиней и лошадей в хозяйствах Среднего Поволжья и Предуралья;

-разработка лабораторного регламента получения эритроцитарного хламидийного антигена и испытание "Набора препаратов для диагностики хламидиозов с.-х. животных в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)";

-разработка и усовершенствование технологии изготовления и применения вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота и оценка её эффективности в производственных условиях;

-разработка научной основы технологии изготовления и испытание эффективности полиштаммовой инактивированной вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота и овец и свиней в различных регионах РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 350 страницах и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований (6 глав), обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения и список использованной литературы (всего 532 источника, в том числе 265 иностранных). Диссертация иллюстрирована 80 таблицами, 22 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнялась в период 1987-2006 гг. в соответствии с государственным планом НИОКР в лаборатории контроля и индикации возбудителей вирусных и хламидийных инфекций в объектах ветеринарного надзора ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ" (Казань), на Херсонской биофабрике и на кафедре патологической анатомии КГАВМ им. Н.Э.Баумана, и апробирована в хозяйствах, неблагополучных по хламидиозам с.-х.животных в регионах Среднего Поволжья и Предуралья.

В опытах были использованы 70000 шести-семи суточные развивающиеся КЭ, экспериментально зараженные и естественно больные животные, белые мыши -1620, морские свинки - 400, овцы- 1510, крупный рогатый скот -112020, свиньи -21661, лошади -990.

При выполнении работы были использованы 12 штаммов хламидий, адаптированных к размножению на КЭ.

При эпизоотологическом обследовании хозяйств, руководствовались "Методическими указаниями по эпизоотологическому обследованию? (И.А.Бакулов, Г.Г.Юрков и др.,1986).

Исследованию было подвергнуто 400 проб патологического и клинического материала, 2914 проб сывороток крови, полученных от крупного рогатого скота, 464 _ от свиней и 350 проб _ от лошадей.

Для изоляции и индикации хламидий использовали КЭ, реакцию иммунофлюоресценции (РИФ) и иммуноферментный анализ (ИФА). Хламидийные антитела выявляли в реакциях связывания комплемента (РСК, РДСК), непрямой гемаглютинации (РНГА) и в тест - системе ИФА.

Молекулярно-генетическую идентификацию штаммов хламидий ?250?, "СК?89?, ?МЗ?89?, ?ЛС?87?, ?РС?85? проводили методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР). ДНК хламидий экстрагировали гуанидининизотиоцианатным методом («Рибосорб» ЦНИИЭМ, Россия). ПЦР осуществляли с использованием специфичных к Chlamydia psittaci олигонуклеотидных праймеров, сконструированных (R.G.Hewinson еt. al., 1997). CPF: 5^/-GAAGACACTCCTCAAAGCC-3^/ и CPR:5^/-CCTTCCCACATAGTGCCCATC-3^//

Патогенность, иммуногенность и перекрестный иммунитет между штаммами хламидий, определяли на белых мышах, морских свинках, используя разные способы введения 10% -ной взвеси хламидий с инфекционным титром не ниже 10^-5,0 10^-6,5 ЭЛД₅₀/0,3 мл. Токсичность штаммов хламидий, выделенных от крупного рогатого скота и свиней проверяли на белых мышах общепринятым методом.

При получении хламидийного эритроцитарного антигена использовали способ культивирования хламидий разработанный нами (Р.Х.Хамадеев с соавт.,1990), а хламидиосодержащий материал очищали методом Poffenroth L., с соавт. (1973). Корпускулярный хламидийный антиген готовили из аллантоисной жидкости РЭК (Хамадеев Р.Х соавт., 1995). Стандартизацию антигенов проводили по оптической плотности на ФЭК?56М. Танизацию эритроцитов осуществляли по методу описанному Г.Фримелем (1984). Специфические хламидийные и контрольные сыворотки получали на овцах и крупном рогатом скоте. Активность и специфичность хламидийных сывороток оценивали в РСК, РНГА и ИФА. Очистку хламидийных сывороток от неспецифических антител выполняли, используя иммуносорбент (А.Е.Гурвич, 1986).

Опытные серии ?Набор препаратов для диагностики хламидиоза животных в РНГА? изготавливались согласно НТД (утв. директором ВНИВИ и согласовано с департаментом ветеринарии МСХ РФ от 15.03.01.). "Набор препаратов для диагностики хламидиоза с.-х. животных в РНГА" испытывались комиссионно в областных и республиканских ветлабораториях Пермской, Кировской, Ульяновской областей, Республики Татарстан и в Центральной научно-методической ветеринарной лаборатории (г. Москва).

Иммуногенные и антигенные свойства инактивированных эмульсионных моно- и полиштаммовых вакцин против хламидиозов крупного рогатого скота и свиней изучали на крупном рогатом скоте, овцах и свиньях.

Экспериментальные исследования по усовершенствованию технологии изготовления и способа применения вакцины против хламидиозов крупного рогатого скота, выполненные в условиях лаборатории и неблагополучных по хламидиозу хозяйствах нашли отражение в НТД, утвержденных ГУВ МСХ СССР от 13.10.91г. У вакцинированных животных наблюдали поствакцинальную реакцию на введения биопрепарата и изучали в динамике накопления специфических противохламидийных антител.

Полиштаммовую вакцину против хламидиоза крупного рогатого скота, овец и свиней применяли и изготавливали согласно НТД, утвержденных Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России от 14.07.99г., 16.05.2000г. и директором ВНИВИ (г. Казань) от 28.11.94 г., 28.03.95 г. (ТУ 9388-003-00-00492374-00).

Иммуногенные и антигенные свойства инактивированных эмульсионных моно- и полиштаммовых вакцин, изучали в лабораторных опытах на нетелях, телятах, овцах и свиньях. Контроль вакцин на стерильность и безвредность осуществляли согласно ТУ 10-07-253-91.

Иммуноморфологическую оценку иммуногенных свойств, аллергизирующих и других побочных влияний инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза свиней прослеживали патологоанатомическими, гистологическими и гистохимическими методами.

Гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по Романовскому-Гимза, Ван-Гизону (Г.А.Меркулов, 1969). Наличие РНК определяли по Браше, ДНК - по Фельгену, жиры - суданом-III, гликоген ШИК-реакцией по Шабадашу.(1947). Кислую и щелочную фосфатазы определяли по Гомори.

Широкие производственные испытания эффективности моно-полиштаммовых инактивированных эмульсионных вакцин против хламидиозов рогатого скота и свиней, изготовленной в ФГУ ?ФЦТРБ-ВНИВИ?(г.Казань), проводили в условиях 24-х неблагополучных по хламидиозу хозяйствах зоны Среднего Поволжья и Предуралья РФ.

Оценку иммуногенной эффективности моно- и полиштаммовых вакцин проводили в неблагополучных хозяйствах на основании фактических данных по количеству абортов и мертворождаемости, а также вынужденному убою животных до и после применения вакцины.

В выполнении отдельных этапов научно-исследовательской работы принимали участие Ф.З. Авзалов, В.В.Евстифеев, Л.А.Барбарова, Р.М. Ахмадеев, Р.Р.Вафин, Р.Х.Хамадеев, А.З.Равилов.

Статистическую обработку цифрового материала, полученного в процессе исследований, проводили общепринятыми методами вариационной статистики согласно критерия Стьюдента при помощи прикладных программ Microsoft Excel 2000.

хламидиоз скот полиштаммовый вакцина

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Выделение и идентификация хламидий из патологического материала при различных клинических формах проявления заболеваний крупного рогатого скота, свиней и лошадей в хозяйствах региона Среднего Поволжья и Предуралья

Изучение и анализ эпизоотической ситуации по хламидиозу с.-х. животных проводили в хозяйствах Ульяновской, Кировской, Пермской областей; республик Чувашия, Башкортостан, Удмуртия, Татарстан, Марий-Эл. В результате было установлено, что при исследовании в РСК сывороток крови на хламидиоз, в диагностических титрах реагировали крупный рогатый скот - от 4 до 18%, свиньи - от 1 до 6% и овцы - от 2,0 до 20%.

Этиологическая роль хламидий в патологии крупного рогатого скота, свиней и овец в регионе была подтверждена выделением возбудителя из патологического материала: в среднем у крупного рогатого скота от 3 до 37% случаев, у свиней от 1 до 35 и у овец до 25% случаев из числа исследованных животных.

В ряде хозяйств Республики Татарстан ежегодно регистрировался высокий процент заболеваемости и падежа среди телят. Лабораторными исследованиями были исключены общеизвестные бактериальные и вирусные инфекции. Серопозитивность к возбудителю хламидиоза у телят в этих хозяйствах, где наблюдались заболевания, проявляющиеся полиартритами, конъюнктивитами, энцефаломиелитами и пневмоэнтеритами, колебалась в пределах 50-52% в титре 3,8±0,6 лог_2. Из патологического материала от павших и вынуждено убитых телят в 65% случаев наличие хламидий было подтверждено микроскопически и в РИФ, а в 42% проб были выделены патогенные изоляты хламидий, условно названные "УП-89", "СК-89", "МЗ-89", и идентифицированы в последующем как представители рода Chlamydia (Chlamydophila).

Изучение этиологии различных клинических форм патологии свиней проводили в хозяйствах республики Татарстан, Марий-Эл, Башкортостана и Ульяновской области. Клинико-эпизоотологически было обследовано три крупных свиноводческих комплекса ("Сосновоборский", "Звениговский", "Рощинский"), где регистрировались аборты, мертворождения и респираторно-кишечные заболевания невыясненной этиологии у 3,2-10% животных. При этом имели место бронхопневмонии, полиартриты, конъюнктивиты и гибель животных разных половозрастных групп от 10 до 14%. У хряков производителей заболевание чаще всего протекало бессимптомно.

При серологическом исследовании в РДСК с хламидиозным антигеном 604 пробы сыворотки крови, полученные из 24 хозяйств, у 29% взрослых свиней выявили специфические хламидийные антитела в титрах 1:5-1:40. Эти показатели у свиноматок составили 28%, у хряков-производителей - 21% и у поросят- 14%. В большинстве случаев хламидиоз свиней подтверждали выделением возбудителя от абортированных плодов и пораженного участка легочной ткани вынуждено убитых и павших поросят. В результате комплексного изучения этиологии респираторно-кишечных заболеваний свиней в хозяйствах Среднего Поволжья и Предуралья нами выделены и идентифицированы патогенные штаммы хламидий: "РС-85", "ЛС-87"и "ПСС-89".

Заболевание лошадей неизвестной этиологии изучали в трех хозяйствах Пермской области и республики Татарстан, которое клинически проявлялось в виде спорадических абортов, рождением мертвых и нежизнеспособных жеребят у 11-35% кобыл, а у 7 _ 23% народившегося молодняка с признаками полиартрита и бронхопневмонии.

При серологическом исследовании 26 проб сывороток крови, полученных от жеребцов-производителей и кобыл с неблагополучным потомством, в РСК с хламидиозным антигеном положительно реагировали 8 (30%) исследованных проб и составил 1:8,1±0,12 Лог₂. Исследование этих сывороток крови в РНГА в 23 (88,5%) пробах были выявлены специфические хламидийные антитела со средним титром 1:320±0,5 Лог₂. При заражении КЭ взвесями патологических и клинических материалов удавалось выделять инфекционные биологические агенты из спермы 3-х жеребцов-производителей, а также паренхиматозных органов (легкие, печень) и суставной жидкости павшего жеребенка, которые по морфологическим признакам оказались сходными с хламидиями. На основании морфологических признаков, тинкториальных особенностей и некоторых биологических свойств, выделенный из суставной жидкости скакательного сустава жеребенка изолят, условно названный "КС-98", нами был идентифицирован как представитель рода Chlamydia (Chlamydophila).

Таким образом, по результатам лабораторных исследований у лошадей конезавода Пермской области и в двух других неблагополучных хозяйствах была установлена хламидиозная инфекция, сопровождаемая энзоотически протекающими абортами, мертворождаемостью и рождением нежизнеспособного приплода. У жеребят заболевание проявлялось в виде полиартритов, пневмоний, конъюнктивита и гибелью, у жеребцов-производителей _ поражением половых органов и контаминацией спермы хламидиями.

2. Биологические свойства и молекулярно-генетический анализ штаммов хламидий, изолированных от крупного рогатого скота, свиней и лошадей

Из лабораторных животных наиболее чувствительными к выделенным штаммам хламидий оказались белые мыши и морские свинки. С их помощью устанавливали вирулентность, антигенные и иммуногенные свойства хламидий.

При этом степень вирулентности хламидий к белым мышам зависела от вида животного, у которого они выделены, и способах их заражения. Мыши были наиболее чувствительны к штаммам, выделенным от крупного рогатого скота, свиней и лошадей. Более эффективными оказались (в порядке убывания) внутривенный (в/в), интрацеребральный (и/ц), интраназальный (и\н), внутрибрюшинный (в/б) и подкожный (п/к) способы инъекции инфекционного материала. Так, процент гибели белых мышей от различных штаммов при в/в инъекции варьировал от 80 до 100, при и/ц - 25-98, и/н- 50-80, в/б - 10-93, п/к -от 5 до 40.

Эксперименты по изучению спектра патогенности изучаемых штаммов хламидий по отношению к морским свинкам, также показали неодинаковую их чувствительность при разных способах введения: интраназальном и внутрибрюшинном заражении - лишь штамм "СК-89" оказался патогенным для морских свинок (установлена гибель 40-50 % животных): интраназальном способе введения штаммы хламидий "УП-89" и "КС-98" вызывали гибель 50-80% животных. Некоторые штаммы хламидий ("Г-88","МЗ-89","РС-85","ЛС-87") при внутрибрюшинном способе заражении не вызывали гибель морских свинок.

Существенные различия в течении заболевания наблюдали при внутривенном заражении телят и свиноматок соответственно штаммами "МЗ-89", "СК-89","УП-89"и "РС-85","ЛС-87". У животных, зараженных штаммами хламидий "МЗ-89", при заболевании доминировали признаки менингоэнцефалита, ?СК-89??конъюнктивита, "УП-89"- полиартрита, у супоросных свиноматок, зараженных штаммом "РС-85"? наблюдали аборты, рождение нежизнеспособных поросят, а штаммом ?ЛС-87?? пневмонию и рождение мертвых поросят.

Таким образом, при изучении биологических свойств штаммов "РС-85" и "ЛС-87" были установлены различия в патогенности и вирулентности по отношению к экспериментальным и естественным хозяевам. Результаты экспериментальных исследований обобщены в таблице 1.

Таблица 1

Спектр патогенности новых штаммов хламидий

Штаммы	С.-х. животное, клиника	Способ заражения	Патогенность
			Гибель, (%)	клиника заболевания
			б.мыши	морские свинки	круп. рог. скот	свиньи
"МЗ-89"	круп. рог. скот менингоэнцефалит	интраназально	70?80	0	менингоэнцефалит	-
		подкожно	40?50
		внутрибрюшинно	60-67
		внутривенно	100
		интрацеребрально	75-98
		Итого	69-79
"СК-89"	круп. рог. Скот конъюнктивит	интраназально	90?100	40-50	- конъюнктивит -	-
		подкожно	40?50
		внутрибрюшинно	82?93	40?50
		внутривенно	100	0
		интрацеребрально	73-98
		Итого	77-88
"УП-89"	круп рог.скот полиартрит	интраназально	70-80	40-50	полиартрит	-
		подкожно	30-40	0
		внутрибрюшинно	64-67
		внутривенно	100
		интрацеребрально	75-98
		итого	68-77
"Г-88"	круп. рог.скот аборт	интраназально	70-80	0	аборт	-
		подкожно	10-50
		внутрибрюшинно	82-97
		внутривенно	80-86
		интрацеребрально	70-98
		Итого	64-82
"КС-89"	лошадь артрит	интраназально	90-100	50-80	-	-
		подкожно	5-6	0
		внутрибрюшинно	10-20
		внутривенно	80-86
		интрацеребрально	40-50
		итого	45-62
"ЛС-87"	свинья пневмония	интраназально	80-100	0	-	пневмония, рождение мертвых поросят
		подкожно	30-40
		внутрибрюшинно	30-40
		внутривенно	80-86
		интрацеребрально	30-40
		итого	56-61
"РС-85"	свинья аборт	интраназально	50-60	0	-	аборты, рождение нежизнеспособных поросят
		подкожно	40-50
		внутрибрюшинно	60-70
		внутривенно	80-86
		интрацеребрально	25-30
		итого	51-60

Обозначения: - не изучалось.

Сравнительное изучение антигенной активности выделенных нами штаммов хламидий в перекрестном исследовании в РСК с использованием гипериммунных сывороток морских свинок, полученных от возбудителей хламидиозов крупного и мелкого рогатого скота, свиней и птиц, с группоспецифическим антигеном из этих же штаммов, выявило их антигенное родство с эталонными представителями рода Chlamydia (Chlamydophila).

При этом отмечали не высокую активность орнитозного антигена (шт. Лори) и титр комплементсвязывающих антител в гипериммунных сыворотках был на 2_3 порядка ниже, чем при исследовании с антигенами изготовленными из других штаммов хламидий.

Кроме этого, обнаружена более выраженная антигенная активность у штамма хламидий "МЗ-89" выделенного при менингоэнцефалите крупного рогатого скота.

Антигены штаммов хламидий, выделенные от крупного рогатого скота "МЗ-89", "УП-89", "СК-89" и свиней "ЛС-87", "ПСС-89" и "РС-85", реагировали между собой на один или два порядка ниже, чем с гомологичными штаммами, что указывает на возможное существование различных серотипов штаммов хламидий, поражающих крупный рогатый скот и свиней. Обобщенные данные исследований представлены в таблице 2.

Таблица 2

Характеристика антигенных свойств изучаемых и известных штаммов хламидий выделенных от крупного рогатого скота и свиней

№№ п/п	Сыворотки к штаммам	Антигены из штаммов
		?МЗ-89?	"УП-89"	?СК-89?	"Г-88"	"РС-85"	"ПСС-89"	"ЛС-87"	"Рост.-70"	?Лори?
1	"МЗ-89"	80х	40	20х	80	-	80	20
2	"СК-89"	20х	40	80х	80		40	20
3	"УП-89"	40	80	40	80		80	20
4	"Г-88"	80	80	80	80		80	20
5	"РС-85"	-	80	40х	20	40х	20
6	"ПСС-89"		40	40х	80	20х	20
7	"ЛС-87"		20	40х	80	40х	20
8	"Рост.-70"*	40	160	80	80				160	40
9	?Лори?*	20	20	20	20	20	20	20	40	40

В опытах по изучению иммуногенности штаммов хламидий установили (таблица 3), что двукратная внутрибрюшинная иммунизация мышей суспензиями хламидий штаммов "МЗ-89", ?250?,"УП-89" и "СК-89" предохраняет их: от гибели при экспериментальном заражении этими штаммами на 90-98%.

Таблица 3

Характеристика иммуногенных свойств изучаемых и известных штаммов хламидий выделенных от крупного рогатого скота и свиней

Штамм используемый для иммунизации	Процент выживаемости после контрольного заражения штаммами, М±м, %
	?МЗ?89?	?СК?89?	"250"	"УП-89"	"РС-85"	"ПСС-89"	"ЛС-87"
?МЗ?89?	93±9	60±10	90±1	64±7	-
?СК?89?	68±25	98±25	60±2	90±1
?250?	62±10	60±3,5	92±1	90±25
"УП-89"	97±2,5	93±9	64±7	94±1
"РС-85"	-	93±9	92±10	68±1
?ПСС-89"		98±25	98±25	60±25
"ЛС-87"		62±10	60±3,5	92±1
Контроль	8±11	0	20±10	20±26	9±11	0	20±10

При заражении их штаммами хламидий "250" и "МЗ-89" защита мышей, иммунизированных штаммом "СК-89", составляла лишь 60-68%. Аналогичные иммуногенные свойства выявляли у штаммов хламидий, выделенных при хламидиозном аборте ("РС-85", "ПСС-89") и пневмонии свиней ("ЛС-87"). Устойчивость мышей к заражению штаммами хламидий "РС-85", "ПСС-89" и "ЛС-87" составляла 92-93%, а при перекрестном заражении их защита между штаммами, вызывающие аборты "РС-85", "ПСС-89" и "ЛС-87" была значительно ниже и колебалась в пределах 60-68% (табл.3).

Таким образом, в опытах по изучению иммуногенных свойств изучаемых штаммов установили, что изготовленные на их основе препараты обеспечивают у привитых животных формирование разного по напряженности иммунитета. Эти данные свидетельствуют о неоднородности антигенной структуры изучаемых штаммов хламидий крупного рогатого скота и свиней.

В последующем, выше перечисленные штаммы хламидий были отобраны для дальнейшего использования при разработке набора для серологической диагностики хламидиоза с.-х. животных в РНГА и вакцин, предназначенных для специфической профилактики хламидиоза рогатого скота и свиней.

Современные достижения молекулярной биологии открыли перспективы в решении проблем диагностики, основанной на прямой идентификации первичной субстанции, т.е. нуклеиновых кислот. Наибольшее внимание среди этих методов привлекает ПЦР, позволяющий выявлять и дифференцировать геномы возбудителей хламидиоза (Обухов И.Л.,1997; Авзалов Ф.З.,1997; Р.Р.Вафин, 2003; Everett K.D.,1999; Hartley J.C., 2001).

В нашей работе результатом ПЦР со специфичными праймерами к Chlamydia psittaci CPF и CPR проб ДНК штаммов хламидий "СК-89", "МЗ-89" "ЛС-87", "РС-85" явилась амплификация специфичного фрагмента ДНК хламидий длиной 264 пар нуклеотидов. В результате установлена их генетическая однородность. Следовательно, из изученных нами хламидий штаммы "СК-89", "МЗ-89" "ЛС-87", "РС-85" выделенные, соответственно от крупного рогатого скота, свиней и лошадей, обладали наиболее выраженной патогенностью для лабораторных и естественно восприимчивых животных, а также антигенной и иммунногенной активностью.

3. Усовершенствование методики получения эритроцитарного хламидийного антигена для серологической диагностики хламидиозов в РНГА

Одной из задач наших исследований была разработка серологической диагностики хламидиозов с.-х. животных с помощью метода реакции непрямой гемагглютинации (РНГА). С этой целью нами была предложена методика получения эритроцитарного антигена для РНГА с использованием группоспецифического корпускулярного хламидийного антигена.

Для изготовления эритроцитарного хламидийного антигена был отобран наиболее активный для данного метода штамм хламидий "СК-89" обеспечивающий стабильный результат при постановке РНГА с эритроцитарным антигеном.

Антигены, изготовленные из этого штамма, проявляли стабильность результата, выявляя наибольший титр специфической хламидийной сыворотки при отсутствии агглютинации с негативной сывороткой и разбавителем. Результаты этих опытов представлены в таблице 4.

Таблица 4

Сравнительная оценка в РНГА специфичности и чувствительности эритроцитарных антигенов изготовленных из штаммов хламидий, выделенных от крупного рогатого скота и свиней.

№ серии опыта	Штамм хлам.	Сыв?ки полож .и отриц	Активность сывороток в РСК	Титры сыв. в РНГА с эритр. хлам. антигеном	Контр. с разбавит
1.	"250"	S	1:160	1:640	полож.
		N	0	1:10
	"МЗ?89"	S	1:160	1:5120	полож.
		N	0	1:5120
	"СК?89"	S	1:160	1:640	полож.
		N	0	1:5
	"РС?85"	S	1:160	1:160	полож.
		N	0	1:10
	"ЛС?88"	S	1:160	1:160	полож.
		N	0	1:5
	Контр.	S	1:160	0	отриц.
		N	0	0
2.	"250"	S	1:320	1:640	полож.
		N	0	1:80
	"МЗ?89"	S	1:320	1:1280	полож.
		N	0	1:5120
	"СК?89"	S	1:320	1:1280	полож.
		N	0	1:5
	"РС?85"	S	1:320	1:320	полож.
		N	0	1:10
	"ЛС?88"	S	1:160	1:160	полож.
		N	0	1:5
	Контр.	S	1:160	0	отриц.
		N	0	0
3.	"250"	S	1:160	1:320	отриц.
		N	0	0
	"МЗ?89"	S	1:160	1:320	отриц.
		N	0	1:10
	"СК?89"	S	1:160	1:640	отриц.
		N	0	0
	"РС?85"	S	1:160	1:320	отриц.
		N	0	1:5
	"ЛС?88"	N	1:160	1:320	отриц.
		S	0	0
	Контр.	S	1:160	1:320	отриц.
		N	0	0

Контроль специфических свойств и активность экспериментальных серий эритроцитарного хламидийного антигена проводили в сравнении с РСК путем титрования гомологичных и гетерологичных иммунных сывороток крови против хламидийного антигена. Наряду с этим были использованы "полевые" сыворотки крови различных видов животных: свиней, рогатого скота и лошадей из неблагополучных по хламидиозу хозяйств. Исследования показали высокую чувствительность и групповую специфичность диагностикума для РНГА. Положительная реакция была получена со всеми гомологичными сыворотками крови: контрольной хламидийной сывороткой крупного рогатого скота, стандартной орнитозной сывороткой и с сывороткой иммунизированной против хламидиоза овец. Отрицательная реакция наблюдалась с отрицательной контрольной сывороткой, бруцеллезной и сывороткой, позитивной к вирусу ринотрахеита. При исследовании полевых сывороток различных видов животных хламидийные антитела выявлялись в титрах 1:5 - 1:320. При сравнении результатов РСК и РНГА наблюдалась корреляция полученных данных.

На основе эритроцитарного хламидийного антигена был создан "Набор препаратов для диагностики хламидиозов животных в РНГА".

Производственные испытания этого набора были проведены в 1999-2001 годы в республиканских и областных ветеринарных лабораториях республики Татарстан, Мари-Эл и Пермской области. Было исследовано более 3925 проб сыворотки крови от крупного рогатого скота, свиней и лошадей, полученных из хозяйств, в которых проявлялись клинические симптомы, характерные для хламидиозной инфекции животных. В результате исследований получено 225 положительных результата, что составило 5,6% от общего числа исследованных проб. Результаты обобщены в таблице 5.

Таблица 5

Результаты испытаний опытных серий "Набор препаратов для диагностики хламидиоза животных в РНГА"

№ п.п.	С.-х. животные	Города	Всего	Реагировало в РНГА
				кол-во	%
1	к.р.с.	Казань	2801	84	3
2	свиньи		473	5	1,0
3	овцы		102	5	5
4	лошади	Пермь	453	46	10
5	свиньи	Йошкар-Ола	75	75	100
6	к.р.с.		19	8	42
Итого	3925	225	5,6

Проведенные испытания 44 наборов для РНГА, показали, что предлагаемый метод прост, удобен позволяет проводить массовые серологические исследования поголовья с.-х. животных на хламидиоз.

4. Разработка и испытание эффективности инактивированной вакцины против хламидиозов крупного рогатого скота

Следующей задачей наших исследований явилась разработка вакцинных препаратов, предназначенных, в первую очередь, для специфической профилактики абортов хламидиозной этиологии у крупного рогатого скота и предупреждения заражения быков-производителей, являющихся основными потенциальными источниками распространения возбудителя инфекции (Курбанов И.А., Авзалов Ф.З. др.,1982; Щербань Г.П.,1986; Хамадеев Р.Х.,1991; Караваев Ю.Д., 2006).

На первоначальном этапе разработки противохламидиозных вакцин для рогатого скота, в экспериментальных опытах выявились преимущества и перспективность эмульгированной вакцины по сравнению с другими формами вакцинных препаратов. При испытании эффективности экспериментальной эмульсионной вакцины против хламидиозного аборта коров в межлабораторном комиссионном опыте на нетелях нами было установлено, что разработанная вакцина является стерильной, безвредной, антигенно активной и иммунногенной. Подкожное введение препарата крупному рогатому скоту в дозе 3 мл защищала его от развития экспериментальной хламидийной инфекции.

В дальнейшем в условиях Херсонской биофабрики с использованием штамма хламидий "250" (И.А. Курбанов, 1971) согласно НТД (утв. ГУВ МСХ СССР от 8 февраля 1990 г.) было изготовлено более 32 тыс. доз опытно-промышленных серий и использованы для производственных испытаний в неблагополучных по хламидиозу регионах РФ.

5. Производственное испытание опытно-промышленных серий вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота и усовершенствование технологии изготовления и способа её применения

Производственное испытание опытно-промышленных серий вакцины в условиях производства проводили в девяти хозяйствах Татарстана и Владимирской области. Всего было привито 6862 голов крупного рогатого скота, в том числе 3715 коров, 79 быков-производителей и 3068 телят, телок случного возраста. Поствакцинальный и колостральный иммунитет у привитых коров, нетелей и колостральный иммунитет телят изучали в динамике по накоплению специфических комплементсвязывающих антител в крови у вакцинированных животных. Через один месяц после вакцинации была выявлена положительная реакция к хламидийному антигену у 97-100% вакцинированных животных со средним титром антител 1:65-1:87, что соответствовало максимальному уровню накопления специфических антител. Через шесть месяцев положительно реагировали в РСК на хламидийный антиген от 90 до 93,6% вакцинированных животных со средним арифметическим титром 1:12-1:14. В последующие сроки исследования (через 9 и 12 месяцев) установлено постепенное снижение числа положительно реагирующих животных до 41,9-60%. При этом средние арифметические титры специфических антител были в пределах 1:7-1:10, что примерно соответствовало фоновому уровню титров антител в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах (1:6-1:1:7).

Следовательно, серологическими исследованиями было установлено, что наиболее высокий уровень специфических противохламидийных антител формируется у животных к месячному сроку после однократной подкожной вакцинации инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота. Эти показатели уровня антител сохраняются в течение последующих 6 месяцев, а затем происходит постепенное снижение специфических антител в крови. При исследовании в РСК сывороток крови телят, родившихся от вакцинированных коров и нетелей, была установлена положительная реакция с хламидиозным антигеном в титрах 1:5-1:80 у 63,3% телят в возрасте до 1 месяца, у 40%-возрасте до 2-х месяцев и у 23,3% животных в возрасте до 3-х месяцев. Полученные данные свидетельствуют о передаче телятам колостральных антител вакцинированными животными.

Результаты испытаний показали, что "Вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота инактивированная эмульсионная", изготовленная на основе возбудителя хламидиозного аборта крупного рогатого скота "250", проявляет неодинаковую эффективность при различных клинических формах (полиартрите, конъюнктивите, менингоэнцефалите и др.) течения хламидийных инфекций крупного рогатого скота. О существовании различий в индицировании защиты от кишечной и плацентарной формы хламидиоза у овец и наличии неоднородности антигенной структуры хламидий, выделяемых у крупного рогатого скота и свиней сообщали В.А.Бортничук, (1991), F.W.A.Johnson, (1984), J. A. Perez- Martinez и Storz J., (1985). Поэтому в решении задачи по созданию вакцины против хламидиозов крупного рогатого скота с широким антигенным набором, способной индуцировать у них иммунный ответ при различных формах хламидиоза, подбор оптимального антигенного состава активных штаммов для нас являлся приоритетным. Однако, испытания вакцины на начальном этапе показали, что в отдельных неблагополучных по хламидиозу хозяйствах инъекция вакцины вызывает у некоторых животных повышенную чувствительность, которая характеризуется постепенным увеличением гранулемы на месте инъекции вакцины до размеров 6Ч8 см в течение 2-3 месяцев. Количество животных, проявивших такую реакцию на введение вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота, составило по отдельным хозяйствам от 2 до 10% привитого поголовья и появление её, по-видимому, объясняется аллергической реакцией замедленного типа у некоторых животных _ хламидионосителей, так как серопозитивность поголовья крупного рогатого скота к возбудителю хламидиоза в этих хозяйствах составляла от 10,2 до 47%. Результаты наших наблюдений подтверждаются данными некоторых авторов (RidgwayG.L., et.al. 1997) указывающих, что у животных как при естественном переболевании хламидиозом, так и после вакцинации проявляется гиперчувствительность замедленного типа к введению хламидийного антигена. Другой причиной аллергической реакции является содержание в составе вакцины неспецифических компонентов куриного эмбриона. Уменьшение реактогенных свойств вакцины были достигнуты путем введения, в технологический цикл предложенного нами метода по очистки биомассы хламидий от компонента вакцины от неспецифических антигенов, а также подбором оптимальной дозы и способа её введения. Это позволило оптимизировать концентрацию хламидийного антигена в составе вакцины и дозу иммунизации, соответственно, 8-10 мг/мл и 1-2 мл.

Выше перечисленные изменения в технологии изготовления и применения вакцины нашли своё отражение в НТД, утвержденные ГУВ МСХ СССР от 13 ноября 1991 года.

6. Разработка и изучение эффективности применения полиштаммовой вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота на лабораторных животных, телятах и овцах

На первоначальном этапе моделирования полиштаммовой вакцины, на белых мышах были сравнительно испытаны шесть вариантов эмульсионной вакцины. Результаты этих опытов приведены в таблице 6.

Таблица 6

Препарат изготовлен из штаммов хламидий	После заражения штаммом "250" (М±м %)
	погибло	выжило
"250"	24±1	76±1
"УП-89"	23±2	77±2
"МЗ-89"	17±3	84±1
"СК-89"	62±1	38±2
"250","УП-89","МЗ-89","СК-89"(четырех штаммовый)	50±2	50±2
"250","МЗ-89","СК-89" (трехштаммовый)	25±1	85±1

Подобные документы

• Кормление сельскохозяйственных животных

  Контроль качества и учет кормов. Кормовые добавки: понятие, состав и основные элементы, значение в питании и функциональные особенности. Диетические кормовые средства. Основы нормированного кормления животных: крупного рогатого скота, свиней, лошадей.
  
  методичка [117,8 K], добавлен 30.11.2011
  

• Организация разведения крупного рогатого скота на фермах ЗАО "Кривское"

  Разведение и генетика животных. Краткая характеристика холмогорской и голштинской пород крупного рогатого скота. Технологии заготовки и хранения кормов. Структура и анализ рационов различных групп животных. Механизация и электрификация в животноводстве.
  
  отчет по практике [47,0 K], добавлен 01.09.2013
  

• Кормораздатчики для крупного рогатого скота и свиней

  Техническая характеристика, описание рабочих процессов и виды кормораздатчиков для крупного рогатого скота и свиней: односторонние и двухсторонние, одноосные и двухосные. Кормовые рационы и цеха для приготовления общесмешанных кормовых смесей для скота.
  
  реферат [23,6 K], добавлен 15.04.2014
  

• Разработка и совершенствование профилактических и оздоровительных мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота в фермерском хозяйстве "Адад" Пий-Хемского района Республики Тыва

  Проведение эпизоотологического анализа при лейкозе крупного рогатого скота. Разработка мероприятий по профилактике и ликвидации болезни среди молочного скота фермерского хозяйства. Обнаружение у крупного рогатого скота клинических признаков болезни.
  
  презентация [2,9 M], добавлен 20.03.2019
  

• Возбудители хламидиозов

  История изучения хламидийных инфекций. Морфология и жизненный цикл хламидий, их ферментативная активность и антигенная структура, факторы патогенности. Источник возбудителя инфекции, ее клинические признаки, диагностика, профилактика и лечение у животных.
  
  реферат [4,9 M], добавлен 19.11.2014
  

• Эпизоотология крупного рогатого скота

  Методы диагностики, дифференциальная диагностика и лечение при эмфизематозном карбункуле крупного рогатого скота. Лейкоз крупного рогатого скота. Определение, распространение, экономический ущерб и этиология, течение и симптомы цирковирусной болезни.
  
  контрольная работа [25,7 K], добавлен 20.04.2012
  

• Сравнительная характеристика различных способов оценки экстерьера и конституции крупного рогатого скота

  Понятие о конституции, экстерьере и интерьере крупного рогатого скота. Способы оценки крупного рогатого скота по экстерьеру и конституции. Линейный метод оценки телосложения молочного крупного рогатого скота. Метод глазомерной оценки, фотографирование.
  
  курсовая работа [701,9 K], добавлен 11.02.2011
  

• Лабораторная диагностика риккетсиозов сельскохозяйственных животных

  Общая характеристика патогенных риккетсий, биохимические свойства. Возбудитель Ку-риккетсиоза, основные симптомы и патологоанатомические изменения. Возбудитель риккетсиозного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. Возбудитель эперитрозооноза свиней.
  
  курсовая работа [58,4 K], добавлен 15.05.2012
  

• Одомашнивание животных

  Сущность процесса одомашнивания животных. История и особенности доместикации коз и овец. Приручение и разведение собак. Причины одомашнивания кошки. Разведение домашней птицы. Введение в круг хозяйства человека лошадей, крупного рогатого скота и свиней.
  
  презентация [1,5 M], добавлен 09.12.2013
  

• Конституция и экстерьер крупного рогатого скота комбинированного направления

  Методы оценки животных по конституции, экстерьеру и интерьеру, их ведущее место отборе и подборе животных для различных целей (воспроизводительной, продуктивной). Характеристика статей крупного рогатого скота комбинированного направления продуктивности.
  
  курсовая работа [36,1 K], добавлен 10.12.2009
  

• Гипотония преджелудков у крупного рогатого скота

  Исследование рубца, сетки, книжки и сычуги как элементов пищеварительной системы крупного рогатого скота. Этиология, патогенез, клиническая картина, диагностирование и курс лечения гипотонии преджелудков у животных. Методы профилактики заболевания.
  
  курсовая работа [3,2 M], добавлен 04.12.2010
  

• Кролиководческие фермы. Структура стада и воспроизводство свиней

  Условия содержания и кормления кроликов на кролиководческих фермах. Влияние химического состава воздуха на продуктивность сельскохозяйственных животных. Молочные породы крупного рогатого скота. Формирование структуры стада свиней, процесс их разведения.
  
  контрольная работа [4,4 M], добавлен 29.07.2012
  

• Одомашнивание диких животных

  Определение времени одомашнивания, содержания и снабжения кормом мелких домашних животных и крупного рогатого скота в странах Передней Азии и Средней Европы. Дикие предки домашних собак, свиней, овец, коз, коров, лошадей, ослов, курей, гусей и голубей.
  
  реферат [28,8 K], добавлен 30.06.2011
  

• Респираторно-синцитиальная инфекция крупного рогатого скота

  Определение сущности и особенности распространения респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота. Этиология и патогенез заболевания, источники и пути передачи вируса. Течение и симптомы болезни, методы ее диагностики, лечения и профилактики.
  
  реферат [19,5 K], добавлен 15.02.2012
  

• Использование ДНК-анализа в системе противолейкозных оздоровительных мероприятий у крупного рогатого скота

  Экономический ущерб от распространения гемобластозов сельскохозяйственных животных. Роль и результативность применения методов ПЦР и РИД в ранней диагностике лейкоза крупного рогатого скота и проведении противолейкозных оздоровительных мероприятий.
  
  дипломная работа [622,7 K], добавлен 05.09.2012
  

• Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота

  Предпосылки возникновения и клинические проявления инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, его эпизоотология и степень опасности для жизни заболевших животных. Формы проявления и места локации вирусной инфекции, методы лечения и профилактики.
  
  реферат [16,8 K], добавлен 20.09.2009
  

• Воспроизводство крупного рогатого скота

  Совершенствование работ по воспроизводству стада крупного рогатого скота и повышение эффективности в хозяйствах Брестской области. Мероприятия по диагностике, лечению и профилактике акушерско-гинекологической патологии у коров. Акушерские болезни коров.
  
  курсовая работа [56,5 K], добавлен 16.04.2012
  

• Продуктивность сельскохозяйственных животных

  Оценка сельскохозяйственных животных по мясной продуктивности. Питательная ценность белково-витаминно-минеральных добавок и премиксов. Изучение факторов, влияющих на молочную продуктивность крупного рогатого скота. Виды продуктивности в коневодстве.
  
  контрольная работа [37,4 K], добавлен 07.10.2010
  

• Лимфатические узлы сельскохозяйственных животных. Методы проведения послеубойной ветеринарно-санитарной экспертизы

  Строение и основные функции лимфатических узлов, видовые и топографические различия их форм у различных животных. Порядок ветеринарно-санитарного осмотра продуктов убоя крупного рогатого скота. Осмотр туш и шкуры на финальной точке санэкспертизы.
  
  контрольная работа [8,4 M], добавлен 29.04.2009
  

• Диагностика и профилактика травматического перикардита у крупного рогатого скота

  Воспаление околосердечной сумки у крупного рогатого скота. Регистрация больного животного. Дифференциальная диагностика различных перикардитов. Патологоанатомические изменения при нетравматическом перикардита. Неправильный уход и эксплуатация животных.
  
  курсовая работа [181,6 K], добавлен 13.05.2015
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам