Иммунобиологические свойства хламидий, разработка и усовершенствование средств лабораторной диагностики и специфической профилактики хламидиозов сельскохозяйственных животных

Таким образом, серологические исследования вакцинированных животных показали, что внутримышечная вакцинация инактивированной эмульсионной полиштаммовой вакциной против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота создает достаточно высокий уровень специфических противохламидийных антител у привитых животных и у полученного от них молодняка.

Оценку эффективности применения полиштаммовой вакцины проводили на основании фактических данных по количеству абортов и мертворождаемости, а также падежу и вынужденному убою молодняка в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах до и после применения вакцины. Полученные нами данные показали, что до применения вакцины общие потери молодняка в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах в республиках Чувашии и Марий-Эл составляют в среднем 22-33%. В первый год применения полиштаммовой вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота отход молодняка сократился до 17-18%.

При этом количество зарегистрированных абортов и мертворождений уменьшилось на 2-8%, падеж и вынужденный убой телят до 2,5-18%. На втором году использования вакцины в этих хозяйствах эти показатели составили соответственно 3-6% и 8-13%. При этом общие потери молодняка сократились на 5-17%. На третий год применения полиштаммовой вакцины отход молодняка сократился в 1,1-2 раза, количество абортов и мертворождений уменьшились 1,4-2,5 раза, а падеж и вынужденный убой телят в некоторых хозяйствах сократился в 2,0 раза.

Следовательно, в результате применения полиштаммовой инактивированной эмульсионной вакцины в системе противохламидиозных мероприятий в течение последующих трех лет существенно сократилось количество абортов и мертворождений хламидиозной этиологии; в 2,0 раза уменьшилась заболеваемость, сократился падеж и вынужденный убой телят.

Таким образом, проведенные широкомасштабные испытания полиштаммовой инактивированной эмульсионной вакцины в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах показали, что её целесообразно применять систематически до полного оздоровления поголовья крупного рогатого скота от этой инфекции.

7. Разработка инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза свиней и оценка её эффективности

К настоящему времени накоплен сравнительно большой фактический материал об этиологической роли хламидий в инфекционной патологии свиней в специализированных комплексах и хозяйствах промышленного типа (Г.П.Щербань, 1978; Прудников С.И., 1981; Бортничук В.А., 1991; Leonhard I., 1988). Если при хламидиозе овец разработаны и внедрены в ветеринарную практику эффективные меры борьбы и средства специфической профилактики, то при хламидиозе свиней эти задачи находятся на стадии разработки и апробации.

Приступая к разработке биопрепарата перед нами была цель, получить вакцину, обладающей высокой иммунногенной активностью с широким спектром антигенности для профилактики хламидиоза свиней.

Разработка инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза свиней проводилась с использованием штаммов хламидий "РС-85 и "ЛС-87", адаптированных к размножению на КЭ с инфекционным титром не ниже 10-^5,5-6,5 ЭЛД50 в 0,3 мл. Получение биомассы хламидий, её инактивация, очистка хламидийного антигена осуществляли по разработанной нами технологии. Биомассу после очистки от тканевых компонентов куриных эмбрионов концентрировали и стандартизировали по содержанию специфического хламидийного антигена. Антиген адсорбировали на алюмо-калиевых квасцах и эмульгировали в адъюванте, состоящего из диэтилполисилоксановой жидкости (ПЭС-3) и ланолина. При подборе антигенного состава опытным путем было установлено, что оптимальная концентрация составила 10-15 мг/мл хламидийных антигенов из двух штаммов ("РС-85"и "ЛС-87") взятых в равном соотношении. При таком содержании антигена в вакцине обеспечивается наибольшая иммунологическая устойчивость у более чем 75% зараженных мышей, при 75% гибели интактных мышей в контроле.

Таким образом, в опытах на белых мышах установили, что созданная вакцина на основе выше перечисленных штаммов хламидий обладала высокой иммуногенной активностью, имела наиболее оптимальный антигенный состав, необходимый для создания иммунитета у мышей от экспериментальной хламидийной инфекции.

В испытаниях 10 экспериментальных серий вакцины на стерильность, безвредность была удостоверена её стерильность и безвредность, что является необходимым требованием для вакцинного препарата. Изучение её антигенной активности проводилось на морских свинках. Исследованиями установлено, что уровень КС антител в сыворотке крови у 91% иммуннизированных морских свинок со специфическим антигеном составляет в среднем 1:78±26,4. Таким образом, нами была подтверждена высокая антигенная активность разработанной вакцины.

Контроль иммуногенной активности вакцины против хламидиоза свиней испытывали на белых мышах. Контрольное заражение опытных и интактных мышей проводили штаммами хламидий "РС-85" и "ЛС-87" внутрибрюшинно, в дозе 0,5 мл через 30 дней после иммунизации. Выживаемость белых мышей после контрольного заражения вирулентными культурами хламидий штаммом "РС-85" и "ЛС-87" колебалась в пределах 79,64,3% и 76,62,4% соответственно. Средний процент выживаемости вакцинированных мышей составил 78,22,1%. В контрольных группах мышей, подвергнутых заражению, отмечалось 100%-ное клиническое переболевание и гибель 60-80% животных. Выживаемость интактных мышей после заражения штаммами хламидий "РС-86" и "ЛС-88" была в пределах 242,4% и 35,64,7% соответственно.

Таким образом, при испытании вакцин в лабораторных условиях была установлена стерильность, безвредность, выраженная антигенная и иммуногенная активность разработанной вакцины против хламидиоза свиней.

8. Оценка антигенной и иммунногенной активности вакцины против хламидиоза свиней на супоросных свиноматках

Иммуногенную эффективность разработанной вакцины против хламидиоза свиней испытывали в остром опыте на 10 (серонегативных в РНГА на хламидиоз) подсвинках с 1-1,5 месячным сроком беременности. Контрольное заражение вакцинированных и интактных подсвинок проводили через 21 день после вакцинации. Возбудитель хламидиозного аборта свиней (штамм "РС-85") был введен двум опытным и трем контрольным животным; возбудитель пневмонии свиней (штамм "ЛС-87")-также двум опытным и трем контрольным свиньям внутривенно по 5 мл 10^-6,5 ЭЛД₅₀ в 0,3 мл.

После заражения за подсвинками вели клиническое наблюдение, проводили серологические, микроскопические и микробиологические исследования. Установлено, что характер изменения температуры тела и проявления клинических признаков заболевания у вакцинированных и контрольных животных, подвергнутых заражению, был неодинаковым: у животных контрольной группы отмечались кратковременная температурная реакция и клинические признаки острого заболевания: угнетение, отказ от корма, нарушение координации движения, слабость, слезо-, слюнотечение. У вакцинированных свиней симптомы заболевания не наблюдали. Пробы сывороток крови параллельно исследовались в РСК и РНГА. Через 21 день после вакцинации происходило накопление специфических хламидийных антител в сыворотке крови иммунизированных свиней. В эти сроки КС антитела выявлялись в высоких титрах 1:40±23,3. Титры ГА - антител были в пределах 1:90±29. У контрольных животных до заражения хламидийные антитела не обнаруживали. Следовательно, инактивированная эмульсионная вакцина против хламидиоза свиней обладает высокой антигенной активностью и индуцирует при однократном внутримышечном её введении максимальный уровень специфических антител.

Свинки опытной группы опоросились в срок. Полученные поросята (36 голов) были жизнеспособны, подвижны, имели среднюю живую массу 12250,5г. При микроскопическом исследовании мазков-отпечатков из котиледонов плаценты этих свиноматок наличие хламидий не обнаруживали. В контрольной группе из 76 народившихся поросят 56 (73%) были мертворожденные, остальные 20 поросят были слабые и нежизнеспособные, их вес составил 9080,5 г., наблюдались признаки гипотрофии. Из котиледонов плаценты, паренхиматозных органов плодов, мертвых и слаборожденных поросят, на КЭ был реизолирован возбудитель хламидиоза свиней.

Таким образом, однократное введение свиноматкам инактивированной эмульсионной вакцины в дозе 2 мл обеспечивало формирование стойкого иммунитета, способного защитить супоросных свиноматок от экспериментального заражения вирулентными штаммами хламидий, вызывающих аборты и пневмонию у свиней.

9. Иммуноморфологическая оценка эффективности инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза свиней

Иммуноморфологическая перестройка организма привитых супоросных подсвинок сопровождалась выраженной лимфоидно-гиперпластической, макрофагальной и плазмоклеточной реакциями в лимфоидных органах и активацией клеточных элементов системы мононуклеарных фагоцитов во внутренних органах, а также резким повышением уровня гуморальных антител в периферической крови к 3-45 дням после вакцинации. Результаты исследований позволили заключить, что испытуемая экспериментальная вакцина против хламидиоза свиней обладает способностью создавать достаточно напряженный иммунитет у животных, позволяющий противостоять к заражению эпизоотическими штаммами хламидий, не обладает побочным действием, вызывающим глубокие необратимые структурные изменения в их организме.

С 1995 года нами в ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» было организовано опытное мелкосерийное производство эмульсионной вакцины против хламидиоза свиней для оценки её эффективности в производственных условиях. За период с 1995 по 2006 годы было изготовлено более 500 тыс. доз вакцины против хламидиоза свиней.

Изготовленные серии вакцины прошли контроль на стерильность и безвредность. Изучением антигенной активности вакцины было обнаружено, что средние арифметические титры в РСК у морских свинок, вакцинированных опытными сериями вакцин, составляют от 1:57 до 1:100. Полученные результаты свидетельствуют о высокой иммуногенной активности опытных серий вакцины против хламидиоза свиней изготовленных по разработанной технологии.

10. Изучение эффективности применения инактивированной эмульсионной против хламидиоза свиней в неблагополучных по хламидиозу свиноводческих хозяйствах Среднего Поволжья

Производственные испытания результативности опытных серий вакцины проводились в неблагополучных по хламидиозу свиноводческих хозяйствах с участием специалистов Государственной ветеринарной службы республик Татарстана, Марий-Эл, Чувашии; Ульяновской и Тамбовской областей. При этом ежегодно вакцинировалось 22388 голов свиней, том числе 21355 -свиноматки и 934 хряка-производителя. Анализ состояния иммунизированного поголовья свиней в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах показал, что введение вакцины не оказывает существенного влияния на общее состояние привитых свиней, показатели температуры тела, пульса и дыхания, как в близкие, так и отдаленные сроки после вакцинации. На месте введения вакцины наблюдали местную реакцию виде небольшой припухлости, которая исчезала в течение 2-4 недель.

По уровню накопления специфических хламидийных антител в крови у привитых свиней косвенно определяли напряженность поствакцинального иммунитета. На 21-й день после вакцинации в крови 96% свиней были выявлены специфические КС - антитела в титрах 1:5-1:40 (при титре 3,12±0,14 Лог₂). Максимальный уровень специфических антител у свиней был выявлен на 45-й день после вакцинации. При этом в РСК реагировало положительно 98% вакцинированных свиней с титром 3,24 ±0,08 Лог₂. В дальнейшем, через 3 месяца после вакцинации в РСК реагировало положительно 96% вакцинированных свиней в титрах 1:5-1:20 в среднем 2,96±0,08 Лог₂. При исследовании тех же сывороток крови свиней в РНГА, процент положительно реагирующих животных, так и титры специфических хламидийных антител были несколько выше, чем в РСК. Так, на 45-день после вакцинации в РНГА реагировало положительно 100% вакцинированных свиней в титрах в 4,64±0,14 Лог₂.

Таким образом, результаты производственных испытаний показали, что однократная вакцинация инактивированной эмульсионной вакциной против хламидиоза свиней в дозе 2 мл способствует формированию стойкого иммунитета против указанной инфекции.

Об эффективности испытания вакцины судили на основании сравнения фактических данных по количеству абортов и мертворождений среди свиноматок, а также падежа и вынужденного убоя поросят до 2-х месячного возраста в 7 неблагополучных по хламидиозу свиноводческих хозяйствах РФ до и после применение вакцины.

Количество абортов и мертворождений в 7-ми неблагополучных свиноводческих хозяйствах до вакцинации устанавливали в пределах 10,6-66% (в среднем 29%), падеж и вынужденный убой поросят от 8-43%, в среднем (24%). В результате применения вакцины количество абортов и мертворождений в этих хозяйствах снизились от 1,0-16%, т.е. уменьшилось в 5,5 раз, одновременно снижением заболеваемости, падежа и вынужденного убоя молодняка с 8-43% до 2-30% в среднем более чем два раза от хламидиозной инфекции.

Таким образом, испытание вакцины в лабораторных и производственных условиях показало, что биопрепарат обладает всеми свойствами антигенного раздражителя, обуславливающего иммуноморфологическую перестройку организма животных и обеспечивающего иммунологическую защиту свиней от заражения возбудителем хламидиоза.

ВЫВОДЫ

1. Клинико-эпизоотологическими и лабораторными исследованиями установлено широкое распространение хламидийной инфекции с.-х. животных в животноводческих комплексах и племпредприятиях Ульяновской, Кировской, Пермской областей, республик Чувашии, Башкортостана, Удмуртии, Татарстана и Марий-Эл. Серопозитивность к антигену возбудителя хламидиоза выявлена у крупного рогатого скота от 29 до 75%, свиней от 14 до 28%, лошадей от 18 до 31%. Впервые в этом регионе от различных половозрастных групп больных хламидиозом животных (крупного рогатого скота, свиней и лошадей) и клинически проявляющиеся в виде абортов, пневмоний, энцефалитов, полиартритов и конъюнктивитов, выделено 9 новых штаммов хламидий. Выделенные штаммы являются этиологическими агентами у этих видов животных, которые по своим иммунобиологическим характеристикам, а некоторые по анализу проб ДНК со специфическими праймерами идентифицированы как представители рода Chlamydia (Chlamydophila).

2. Сравнительным изучением биологических свойств 7 штаммов возбудителей хламидиозов с.-х. животных, выявлены различия по токсичности, патогенности для белых мышей и морских свинок при различных способах заражения и по характеру проявления экспериментальной инфекции на естественных хозяевах. Все изученные штаммы хламидий одинаково размножались в эпителиальных клетках желточной оболочки 6-7 суточных развивающихся куриных эмбрионов, вызывая генерализованную инфекцию и накапливались в титрах 10^-5,5-10^-6,5 ЭЛД₅₀/0,3 мл. По степени антигенной и иммуногенной активности, накопления хламидий в процессе длительного культивирования в куриных эмбрионах, отобраны 4 штамма хламидий ("СК-89", "МЗ-89", "РС-85" и "ЛС-87"), которые депонированы в коллекции штаммов микроорганизмов ФГУ ВГНКИ и признаны пригодными для использования в качестве производственных для изготовления средств диагностики, специфической профилактики хламидиозов с.-х. животных.

3. Разработана технология изготовления хламидийного эритроцитарного диагностикума на основе корпускулярного хламидийного антигена штамма "СК-89" и создан "Набор препаратов для диагностики хламидиоза животных в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)" (ТУ 9388-005-00492374-01). Подтверждена его высокая активность, специфичность и чувствительность.

4. Изыскан способ повышения выхода биомассы хламидий с инфицированного КЭ по сравнению с существующей технологией (авторское свидетельство №1641883 с приоритетом от 24.10.88 г.)

5. Усовершенствована технология изготовления и способ применения моновакцины против хламидиоза крупного рогатого скота: внедрен способ очистки хламидийного антигена от балластных веществ КЭ, позволяющий повышать иммуногенную активность вакцины, установлено оптимальное количество специфического хламидийного антигена в составе вакцины, изыскан способ и кратность её инъекции, индуцирующий формирование напряженного противохламидийного иммунитета в течение 12 месяцев.

6. Впервые разработана новая полиштаммовая инактивированная эмульсионная вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота сконструированная на основе штаммов "250", "МЗ-89", "СК-89", обладающая широким спектром набора антигенов, иммуногенной активностью и обеспечивающая эффективную защиту вакцинированных животных от различных форм клинико-анатомического его проявления. (Решение ФИПС РФ о выдаче патента с приоритетом от 06.12.2005г.)

7. Испытание полиштаммовой инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота с целью защиты овцематок показало, что она также способна формировать напряженный иммунитет у мелкого рогатого скота против возбудителя хламидиозного аборта.

8. На основе результатов производственных испытаний опытных серий полиштаммовой инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота в различных регионов РФ установлено, что биопрепарат обладает высокой эффективностью и при систематическом применении (в течение не менее трех лет) обеспечивает стабилизацию эпизоотической ситуации и оздоровление животных в неблагополучных хозяйствах.

9. Впервые разработана "Вакцина для специфической профилактики хламидиоза свиней", имеющая в единице дозы вакцины оптимальное соотношение и концентрацию хламидийных антигенов двух штаммов, которая защищает свиней от развития экспериментальной хламидийной инфекции (патент на изобретение № 2247577 с приоритетом от 20.12.2002 г.).

10. Комплексными иммуноморфологическими, цитосерологическими и микробиологическими исследованиями установлено, что инактивированная эмульсионная вакцина против хламидиоза свиней вызывает выраженную иммуноморфологическую перестройку в организме привитых свиней, проявляющуюся усилением структурно-функциональной активности иммунокомпетентных клеток лимфоидных органов в виде лимфоидно-гиперпластической, плазмоцитарной и макрофагальной реакций, создавая тем самым морфологическую основу для формирования у них напряженного иммунитета.

11. Результаты производственных испытаний "Вакцины для специфической профилактики хламидиоза свиней", показали её высокую антигенную, иммуногенную активность и эффективность. Однократное введение биопрепарата супоросным свиноматкам обуславливает продукцию хламидийных антител у 94-98% животных, которые достигают максимальных титров на 30 день и сохраняются на достаточно высоком уровне в течение 3-4х месяцев. Применение вакцины в системе противохламидийных мероприятий, в хозяйствах неблагополучных по хламидиозу свиней, сокращает количество абортов и мертворождаемость в среднем в 5 раз и уменьшает падеж и вынужденный убой поросят в более чем в 2 раза от хламидийной инфекции.

12. Итоги сравнительного изучения иммунобиологических свойств ранее неизвестных инфекционных агентов, изолированных от крупного рогатого скота, свиней и лошадей, явились научной предпосылкой для разработки и усовершенствования средств лабораторной диагностики и специфической профилактики хламидиозов. Впервые разработана научная основа технологии, налажено серийное производство и внедрены в ветеринарную практику набор препаратов для диагностики и полиштаммовые инактивированные эмульсионные вакцины против хламидиозов с.-х. животных. Решена проблема их специфической профилактики.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

По результатам проведенных исследований разработаны следующие нормативно-технические документы:

1. Инструкция по профилактике и ликвидации хламидиоза животных, утвержденная ГУВ Госагропрома СССР от 08.08.89г.;

2. Рекомендации по обеспечению эпизоотического благополучия свиноводческих хозяйств по хламидиозу, утвержденные ГУВ КМ РТ от 07.05.97г.;

3. Временная инструкция по изготовлению и контролю набора препаратов для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), утвержденная директором ВНИВИ от 28. 11.94 г;

4. Технические условия на "Набор препаратов для диагностики хламидиоза животных в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)" (ТУ 9388-005-00492374-01) на опытную партию (согласовано департаментом ветеринарии МСХ РФ и утвержденная директором ВНИВИ от 15.03.01г.);

5. Временное наставление по применению набора препаратов для диагностики хламидиоза животных в реакции непрямой гемагглютинации РНГА (в порядке широких производственных испытаний в 2001-2003 гг.), утвержденное Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ от 10.07.01г. и одобрено Советом по ветеринарным препаратам 15 мая 2001 года, (протокол № 2, №001257-ОП);

6. "Набор препаратов для диагностики хламидиозов животных в РНГА" от 28.11.94 г.;

7. Временное наставление по применению вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота инактивированной эмульсионной, утвержденное ГУВ при Госкомиссии Совета Министров СССР по продовольствию и закупкам от 08.02.90г;

8. Инструкция по изготовлению и контролю вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота инактивированной эмульсионной, утвержденная ГУВ МСХ СССР от 13 11.91 г.;

9. Технические условия на вакцину против хламидиоза крупного рогатого скота инактивированную эмульсионную (ТУ 10-07-253-91), утвержденные ГУВ МСХ СССР от 13.11.91г.;

10. Наставление по применению вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота инактивированной эмульсионной, утвержденное ГУВ МСХ РФ от 02.02.93г.;

11. Временная инструкция по изготовлению и контролю вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота полиштаммовой инактивированной эмульсионной утвержденная директором ВНИВИ (г.Казань) от 28.11.94 г.;

12. Временное наставление по применению вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота полиштаммовой инактивированной эмульсионной утвержденное ГУВ КМ РТ 30.11.94 г.;

13. Временная инструкция по изготовлению и контролю вакцины против хламидиоза свиней инактивированной эмульсионной, утвержденная директором ВНИВИ (Казань) 28.03.95 г.;

14. Технические условия на вакцину против хламидиоза свиней инактивированную эмульсионную (ТУ9388-003-00-00492374-00), утвержденные директором ВНИВИ (г.Казань) от 05.06.99г., согласовано ВГНКИ, Департаментом ветеринарии МСХ РФ;

15. Наставление по применению вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота инактивированной эмульсионной утвержденное Минсельхозпрода России департаментом ветеринарии от 14.07.99г.;

16. Временное наставление по применению вакцины против хламидиоза свиней инактивированной эмульсионной, утвержденное департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России от 16.05.2000г.;

17. Временное наставление по применению вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота полиштаммовой, инактивированной, эмульсионной, утвержденное ГУВ КМ РТ от 14.03.2002 г.;

18. Временное наставление по применению вакцины против хламидиоза рогатого скота и лошадей полиштаммовой инактивированной эмульсионной утверждено ГУВ КМ РТ от 23.08.02г.;

19. "Способ получения биомассы хламидий" (авторское свидетельство № 1641883 с приоритетом от 24.10.88 г.);

20. "Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота" (патент на изобретение №2092188 с приоритетом от 29.10.1991г.);

21. "Вакцина для специфической профилактики хламидиоза свиней" (патент на изобретение № 2247577 с приоритетом от 20.12.2002г.);

22. "Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота" решение о выдаче патента с приоритетом от 06.12.2005г.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Авторское свидетельство, №1641883 СССР. Способ получения биомассы. / Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, А.З.Равилов - №1641883; заявл.24.10.88.

2. Авзалов, Ф.З. Изучение иммуноморфогенеза при вакцинации свиней противохламидиозной вакциной /Ф.З.Авзалов, Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов //Матер. по актуальные проблемы живот. и ветеринарии.-Казань, 1999.-С.45-47

3. Евстифеев, В.В. Разработка средств специфической профилактики хламидиоза свиней/ В.В.Евстифеев, Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов //Матер. Международной научно-практической конференции, "Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов" посвященной 35-летию института- Щелково, 2005.-С.382-384.

4. Евстифеев, В.В. Разработка средств специфической профилактики хламидиоза свиней /В.В.Евстифеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.] //Матер.Международного симпозиума "Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний", посвященного 45-летию образования института-Казань, 2005.- С. 382-386

5. Пат. № 2092188. Российская Федерация, МПК А61К39/Хусаинов Ф.М.; заявитель и патентообладатель Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт№5008246; заявл.29.10.91; опубл.27.04.92.Бюл.№18.-3с.

6. Пат. 2247577 Российская Федерация, МПК А61К39/Хусаинов Ф.М. [и др.]; заявитель и патентообладатель Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт (RU) №2002135, заявл. 20.12.2002; публ.27.04. 2002, Бюл.№18.-3с.

7. Равилов, А.З. Разработка биологических препаратов и методов диагностики, лечения и профилактки хламидиозов сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц/ А.З.Равилов, Ф.М.Хусаинов, [и др.] / Материалы на соискание Государственной премии РТ 1995 года в области науки и техники.- Казань, 1995.-165 с.

8. Хамадеев, Р.Х., Специфическая профилактика хламидиозного аборта крупного рогатого скота /Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, А.З.Равилов, [и др.] //Матер. респ. науч.-произв.конф.- Казань, 1989.-С.17-19.

9. Хусаинов, Ф.М. Хламидиоз крупного рогатого скота / Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев // Матер. зональной. науч. - техн. конф.- Троицк,-1989,- С.22-24.

10. Хамадеев, Р.Х. Хламидиоз крупного рогатого скота / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, А.З.Равилов // Ветеринария, 1990.-№2,-С.42-45.

11. Хамадеев, Р.Х. Изучение поствакцинального иммунитета у коров, вакцинированных против хламидиоза крупного рогатого скота /Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Тез. Докл. ІІІ Всесоюзной конференции по эпизоотологии. - Новосибирск., 1991.-С.412-413.

12. Хамадеев, Р.Х. Экспериментальная оценка инактивированной вакцины против хламидиозного аборта крупного рогатого скота / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.] // Матер. ІУ Всесоюзн. конф.- Москва, 1991. -С.26-28.

13. Хамадеев, Р.Х. Специфическая профилактика крупного рогатого скота/Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов., [и др.]// Матер. Всесоюзн. конф., посвящ.,140-летию Харьковского зооветеринарного института.- Харьков, 1991.-С.151-153.

14. Хамадеев, Р.Х. Оценка иммуногенной активности полиштаммовой вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота/ Р.Х. Хамадеев, Ф.М.Хусаинов,[и др.] //Матер. науч.-произв. конф. по проблеме ветеринарии и животноводства.- Казань, 1995.-С.42-44.

15. Хусаинов, Ф.М. Клинико-эпизоотологическое проявление хламидиозов крупного рогатого скота и свиней в хозяйствах Среднего Поволжья / Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]//Матер.науч.-произв. конф. по проблеме ветеринарии и животноводства.- Казань, 1995.-С.41-43.

16. Хусаинов, Ф.М. Диагностика хламидиоза свиней и крупного рогатого скота методом ИФА / Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]// Матер. науч.-произв. конф. по проблеме ветеринарии и животноводства.- Казань, 1995.-С.46-48.

17. Хамадеев, Р.Х. Разработка диагностикума для РНГА при хламидиозах / Р.Х. Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Матер. науч.-произв. конф. по проблеме ветеринарии и животноводства.- Казань,1995.-С.47-49.

18. Хусаинов, Ф.М. Использования иммуноферментного анализа для диагностики хламидиоза свиней / Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]// Вирусные болезни с.-х. животных. - Владимир, 1995.-С.67-68.

19. Хамадеев, Р.Х. Использования РНГА для оценки поствакцинального иммунитета при хламидиозах / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]// Вирусные болезни с.-х. животных.- Владимир, 1995.-С.132-133.

20. Хамадеев, Р.Х. Разработка инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза свиней/ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Вирусные болезни с.-х. животных. - Владимир, 1995.-С.151.

21. .Хамадеев, Р.Х. Вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]// Ветеринария, 1996. №6 -С.22-24.

22. Хусаинов, Ф.М. Сравнительная оценка серологических методов РСК, РНГА и ИФА при диагностике хламидиозной инфекции крупного рогатого скота и свиней/ Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]//Всерос.науч.конф. Инфекц.болезни молодняка с.-х. животных. Тез докл..-М., 1996.-С.12-14.

23. Хамадеев, Р.Х. Клинико-эпизоотическое проявление хламидиозов крупного рогатого скота и свиней в зоне Среднего Поволжья/ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов, Матер. V Всероссийской конференции.- Щелково, 1996.- С.153-154.

24. Хусаинов, Ф.М. Деконтаминация спермы при генитальном хламидиозе быков-производителей/ Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]// ІІ Респуб. Тез.докл. Науч. конф. молодых ученых и специалистов., - Казань, 1996.-С.59.

25. Хамадеев, Р.Х. Клинико-эпизоотическое проявление хламидиозов крупного рогатого скота и свиней в зоне Среднего Поволжья / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов. Тезисы докладов V Всероссийской конференции.- Щелково, 1996, С.153-154.

26. Хамадеев, Р.Х. Получение эритроцитарного диагностикума для выявления антител при хламидиозе/ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Науч. основы технологии пром. пр-ва вет. биол.препаратов -Щелково, 1996 -С.153-154.

27. Хамадеев, Р.Х. Эффективность полиштаммовой вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]/Науч.основы технологии пром.пр-ва вет.биол.препаратов-Щелково, 1996 - С.178-179.

28. Хамадеев, Р.Х. Профилактика хламидиоза в условиях промышленного свиноводства./ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.] //Матер. Всерос. научно-метод.конф. по патологической анатомии с.-х.животных. Казань. 1998.-С.99-100.

29. Хамадеев, Р.Х. Эпизоотологические особенности хламидиоза в условиях промышленного свиноводства./ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Матер. Всерос. научно-метод. конф. по патологической анатомии с.-х.животных. Казань. 1998.-С.100-101.

30. Авзалов, Ф.З. Иммуноморфологическая перестройка организма телят при введении полиштаммовой вакцины против хламидиоза/ Ф.З.Авзалов, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Матер. Всерос. научно-метод. конф. по патологической анатомии с.-х. животных. Казань. 1998.-С44-48.

31. Хусаинов, Ф.М Хламидиозы свиней и крупного рогатого скота в Среднем Поволжье/ Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев [и др.]// Матер.науч.конф. посвященной 125-летию академии Ч.1.- Казань, 1998,-С.113-114.

32. Хамадеев, Р.Х. Распространение, диагностика хламидиозов сельскохозяйственных животных и меры борьбы / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]// Диагностика, лечение и профилактика опастных инфекционных заболеваний. Матер. юбил. научн.-произв.конф., посвященные 70 летию НИИ микробиологии МО РФ.-Киров, 1998.-С.249-250.

33. Хамадеев, Р.Х Диагностика хламидиоза лошадей/ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.] / Матер. по актуальные проблемы живот. и ветеринарии. - Казань, 1999.-С.56-57.

34. Хамадеев, Р.Х. Эритроцитарный диагностикум для обнаружения и идентификации возбудителя хламидиоза// Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов [и др.]// Матер. по актуальные проблемы живот. и ветеринарии.-Казань, 1999.-С.68-69.

35. Хусаинов, Ф.М. Разработка эритроцитарного диагностикума для обнаружения и идентификации возбудителя хламидиоза /Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]// Матер. юбилейной научной конференции посвященной 50-летию Центра военно-технических проблем биологической защиты НИИ Микробиологии МО РФ. Диагностика, лечение и профилактика инфекционных заболеваний. Биотехнология. Ветеринария.-Екатеринбург ,1999.-С.259-260.

36. Хусаинов, Ф.М. Профилактика и лечение хламидиоза крупного рогатого скота и свиней / Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]//Ж. «Ветеринарный врач», №4, 2000г.

37. Хамадеев, Р.Х. Эпизоотологические факторы хламидиоза и основные принципы противохламидиозных мероприятий /Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, //Матер. Межрегиональной научно-практической конф. По актуальным проблемам исследований в области зоотехнии и ветеринарной медицины в современных условиях.-Чебоксары, 2000.-С.129.

38. Хусаинов, Ф.М. Профилактика хламидиозного аборта овец полиштаммовой инактивированной вакциной против хламидиоза крупного рогатого скота/Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]/ Матер. Международной научн. конф. посвященной 70-летию образования зооинженерного факультета "Инфекционные и инвазионные болезни"- Казань.-2000.-С.8.

39. Хамадеев, Р.Х. Противоэпизоотические мероприятия при хламидиозе свиней / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.]//Матер. Международной научн.конф. посвященная 70-летию образования зооинженерного факультета "Инфекционные и инвазионные болезни".-Казань.-2000.-С.78.

40. Хамадеев, Р.Х. Эпизоотические особенности хламидиоза у животных и основные принципы противохламидиозных мероприятий / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.] // Матер. Международной научн.конф. посвященная 70-летию образования зооинженерного факультета "Инфекционные и инвазионные болезни".-Казань.-2000.-С.99.

41. Хусаинов, Ф.М. Профилактика хламидиозного аборта овец полиштаммовой инактивированной вакциной против хламидиоза крупного рогатого скота / Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.] Матер.// Международной научн.конф. посвященная 70-летию образования зооинженерного факультета "Инфекционные и инвазионные болезни".-Казань.-2000.-С.100-101.

42. Хамадеев, Р.Х. Течение хламидиоза и его профилактика на свинокомплексе / Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.] // Ветеринария, №2, 2000г. С.14-17.

43. Хамадеев, Р.Х. Разработка и испытание набора препаратов для диагностики хламидиоза животных в РНГА/ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов [и др.] /Матер. Всеросс. научн. практ. конф., посвященной 30-летию института. Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов. - Щелково.-2001.-С.56-58.

44. Хусаинов, Ф.М. Изучение хламидиоза сельскохозяйственных животных в зоне Среднего Поволжья/ Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев [и др.]// Матер. Всеросс. научн.- производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии Ч.1.-Казань.-2002.-С.130.

45. Хусаинов, Ф.М. Испытание на овцах в производственных условиях полиштаммовой вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота/Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев [и др.] // - Матер. Всеросс. научн.- производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии Ч.1.-Казань.-2002.-С.126.

46. Хамадеев, Р.Х. Совершенствование диагностики, мер борьбы и специфической профилактики хламидиозов/ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов // Уч. Зап. КГАВМ , т.174, 2003, С.177-184.

47. Хамадеев, Р.Х. Основные факторы эпизоотического процесса и разработка средств специфической профилактики хламидиоза/ Р.Х.Хамадеев, Ф.М.Хусаинов, [и др.] /Сельскохозяйственная биология - М.,2004.- С.70-77.

48. Хусаинов, Ф.М. Разработка ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной и хламидийной инфекции свиней и оценка её эффективности/ Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.] // Матер. Международного симпозиума "Научные основы обеспечения защиты от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний", посвященного 45-летию образования института - Казань, 2005.- С.388-393.

49. Хусаинов, Ф.М. Разработка средств специфической профилактики хламидиоза сельскохозяйственных животных/ Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.] // Матер. Международного симпозиума "Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний", посвященного 45-летию образования института - Казань, 2005- С. 393-395.

50. Хусаинов, Ф.М. Изучение распространения хламидиоза голубей, обитающих на территории г.Казани/ Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.] //Материалы Международного симпозиума "Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний", посвященного 45-летию образования института - Казань, 2005.- С.385-387.

51. Хусаинов, Ф.М. Клинико-эпизоотологическое проявление хламидиозов крупного рогатого скота в хозяйствах Среднего Поволжья и Предуралья//Ф.М.Хусаинов, Р.Х.Хамадеев, [и др.]// Ж.«Ветеринарный врач». №1-2006, С.32-37.

Размещено на Allbest.ru