Интегральная оценка и коррекция тиреоидзависимых морфофункциональных нарушений у животных

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

ИНТЕГРАЛЬНАЯ ОЦЕНКА И КОРРЕКЦИЯ ТИРЕОИДЗАВИСИМЫХ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ У ЖИВОТНЫХ

Козлов В.Н.

Москва - 2008

Работа выполнена на кафедре патологической физиологии ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»

Научный консультант: заслуженный деятель науки РБ, доктор ветеринарных наук, профессор Байматов Валерий Нурмухаметович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Поляков Виктор Филиппович заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Журавлев Александр Иванович заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессорТельцов Леонид Петрович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Оренбургский государственный аграрный университет

Защита диссертации состоится «___» 2008 года в____часов на заседании диссертационного совета Д 220.042.02 при ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина» по адресу: 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; тел. 377-93-83

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»

Автореферат разослан «__» __________ 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета А.И. Торба

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Республика Башкортостан относится к биогеохимической зоне с дефицитом йода, кобальта, меди в почвенных и водных экосистемах [Поляков В.Н., 1964; Аскарова Я.Н., 1966; Ивановский С.А., 1980; Мамцев А.Н., 2005; Байматов В.Н., 2006]. В условиях дефицита струмотропных микроэлементов наблюдается увеличение удельного веса тиреоидной патологии в общей структуре незаразных болезней у животных, что негативно влияет на продуктивность, воспроизводительную способность, реактивность и резистентность популяций животных [Клевец Е.И., 1995; Маннапова Р.Т., Аухатова С.Н., 2004; Исмагилова Э.Р., 2006; Salmen I.A., Kamel G.M., Ali A.M., 1975; Roche D., 1982]. Низкая эффективность мероприятий по профилактике нарушений обмена микроэлементов в организме животных связана как с отсутствием четко отработанных методов диагностики этих расстройств, так и ограниченным спектром препаратов, содержащих стабильные и биодоступные формы йода [Шарабрин И.Г., 1975; Уразаев Н.А., 1978; Самохин В.Т., 2003].

Несмотря на многочисленные исследования в области тиреоидологии, проблемы йододефицитных состояний в животноводстве не получили окончательного решения и остаются актуальными. К числу наиболее перспективных направлений следует отнести разработку новых способов стабилизации йода в составе рационов путем его связывания с субстанциями органического генеза, в частности с полисахаридами, наделенными энтеросорбционной активностью к струмогенам. Остаются актуальными вопросы регуляции системы цепного свободнорадикального перекисного окисления липидов при заболеваниях щитовидной железы. Показано, что в условиях хронического и острого воздействия струмогенов выявляются патофизиологические сдвиги в функциональном состоянии окислительного гомеостаза [Гильманов А.Ж., 2000; Камилов Ф.Х., 2000; Журавлёв А.И., 2003; Кармолиев Р.Х., 2005; Capen C.C. et al, 1991; Kelly G.S., 2000; Walsh P.H., 2001]. Показано, что явления гипо- и гипертиреоза сопровождаются накоплением продуктов липидпероксидации в тканях, а также повышенным уровнем хемилюминесценции плазмы крови [Rom-Bugoslavskaia E.C. et al, 1998; Sewerynek J. et al., 2000]. Изучению анти- и прооксидантных свойств йодосодержащих препаратов и биологически активных добавок посвящены немногочисленные исследования [Мамцев А.Н., 2006]. Между тем без выяснения роли струмотропных микроэлементов в формировании функционального состояния окислительного гомеостаза невозможна разработка патогенетически обоснованных методов предупреждения и лечения эндемического зоба.

В целях получения моделей тиреоидной патологии по типу эндемического эффекта используют тиреостатик мерказолил в суточной дозе от 1,0 до 20,0 мг/100 г МТ животного [Кузьмак Н.И., 1978; Москвина Н.И. и др., 1993; Конопля Е.Ф. и др., 1993; Лобанок Л.М. и др., 2002]. Следовательно, необходимы исследования по совершенствованию модели экспериментального гипотиреоза, направленные на определение оптимальной дозы тиреостатика, которая, с одной стороны, сводит к минимальному побочные эффекты тиреостатика, с другой - обеспечивает наиболее полное воспроизведение морфофункциональных нарушений, свойственных гипотиреоидному состоянию. Кроме того, остаются актуальными вопросы хронодиагностики гипотиреоидных состояний у животных.

Цель работы состояла в разработке модели экспериментального гипотиреоза у животных с изучением у них биохимических и морфологических показателей, а также после применения органически связанных форм йода в составе рационов.

Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить характер морфофункциональных нарушений при экспериментальной гипофункции щитовидной железы, вызванной введением мерказолила в суточных дозах - 1,0; 2,5; 5,0; 10,0 и 20,0 мг на 100 г массы тела.

2. Усовершенствовать способ экспериментального моделирования гипотиреоза на лабораторных животных.

3. Оценить диагностическую ценность хронобиологических исследований в экспериментальной тиреоидологии.

4. Выявить функциональные зависимости между уровнями содержания тиреоидных гормонов (сТ4, оТ3), ТТГ и кортизола у клинически здоровых и гипотиреоидных животных.

5. Установить направленность морфофункциональных изменений у крыс и кроликов при введении органически связанных форм йода в рацион соответственно в суточных дозах 3 мкг и 10 мкг/100 г массы тела.

6. Показать интенсивность реакций свободнорадикального окисления в фагоцитирующих клетках крови методом хемилюминесцентного анализа у здоровых животных и при коррекции экспериментального гипотиреоза.

7. Изучить состояние коры надпочечников в условиях применения мерказолила и йод-пектиновых соединений.

8. Оценить влияние «Йодпектина» и «Йодказеина» на функциональное состояние системы свободнорадикального окисления в гомогенатах почки крыс.

9. Определить возможность коррекции тиреоидзависимых метаболических нарушений путем использования рационов, обогащенных стабильными формами йода.

Научная новизна.

· Определены в эксперименте на крысах дозы антитиреоидного препарата, обеспечивающие получение модели гипотиреоза по эндемическому типу.

· Впервые проведена интегральная оценка структурно-функциональных изменений в органах у животных при тиреоидзависимых нарушениях. Предложена коррекция метаболизма йод-пектиновыми соединениями (патент № 2265377).

· Впервые разработан «Способ диагностики экспериментального гипотиреоза у лабораторных животных с использованием хронобиологических методов исследования» (патент № 2290859).

· Впервые установлены функциональные зависимости между уровнями содержания сТ4, оТ3, ТТГ и кортизола методом регрессионного анализа у клинически здоровых и гипотиреоидных животных.

· Определено состояние клеточного звена иммунитета у животных при коррекции гипотиреоза органически связанными формами йода.

· Дана оценка процессов свободнорадикального окисления при экспериментальном гипотиреозе и его коррекции «Йодпектином».

Научно-практическая значимость работы. На крысах установлены оптимальные суточные дозы тиреостатика, которые обеспечивают наиболее полное воспроизведение морфофункциональных нарушений при гипотиреозе.

Детальное изучение механизмов формирования биологических ритмов терморегуляции у крыс позволило разработать способ хронодиагностики экспериментального гипотиреоза. На усовершенствованных моделях гипотиреоза показана возможность патогенетической коррекции тиреоидзависимых нарушений органически связанными формами йода.

Работа включена в государственную научно-техническую программу Академии Наук Республики Башкортостан: «Профилактика заболеваний, медицинские технологии, здоровый образ жизни» в рамках подпрограммы «Разработка пищевых технологий для производства продуктов, обогащенных йодосодержащими органическими соединениями и пищевыми волокнами».

Внедрение результатов исследования в практику. Результаты работы легли в основу методических рекомендаций Министерства сельского хозяйства РФ «Диагностика нарушений минерального обмена у крупного рогатого скота» (Уфа, 2005), Российской академии сельскохозяйственных наук: «Диагностика и профилактика нарушений минерального обмена у крупного рогатого скота» (Москва, 2005) и «Хемилюминесцентные методы оценки функционального состояния животных» (Москва, 2005) - издания рассмотрены, обсуждены и рекомендованы к печати решением секции «Патология, фармакология и терапия» РАСХН, протокол №7 от 20 января 2005 г. По материалам диссертации получено семь патентов Российской Федерации, издана монография.

Материалы диссертации используются в учебном процессе при чтении лекций студентам филиала Московского государственного университета технологий и управления в г. Мелеузе, Башкирского государственного педагогического университета, ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина».

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на ряде научных форумов: XII Всероссийском конгрессе «Политика здорового питания в России» (Москва, 2003); Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы и перспективы обеспечения продовольственной безопасности регионов России» (Уфа, 2003); Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы развития промышленности на современном этапе» (Мелеуз, 2003); научно-практической конференции «Достижения аграрной науки - производству» (Уфа, 2004); научно-практической конференции «Наука, техника и высшее образование: проблемы и тенденции развития» (Ростов-на-Дону, 2004); Российской научно-практической конференции «Интеграция науки и производства как важнейшее условие повышения качества подготовки специалистов» (Уфа, 2004); III Российском конгрессе по патофизиологии «Дизрегуляционная патология органов и систем» (Москва, 2004); X Международной научно-практической конференции «Стратегия развития пищевой промышленности» (Москва, 2004); VII конгрессе Международной ассоциации морфологов (Казань, 2004); Всероссийской научно-практической конференции «Перспективы развития пищевой промышленности России» (Оренбург, 2005); Всероссийской конференции «Трансформация общества: наука, педагогика, производство» (Уфа, 2005); Международной научной конференции по патофизиологии животных (Санкт-Петербург, 2006); 3-й конференции по учебно-методической, воспитательной и научно-практической работе академии (Москва, 2006); Всероссийской научно-практической конференции «Интеграционные евразийские процессы в науке, образовании и производстве» (Кумертау, 2006); V Международной научной конференции студентов и молодых ученых (Москва, 2006); Всероссийской научной конференции «Инновации в интеграционных процессах образования, науки, производства» (Мелеуз, 2007); Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы и перспективы развития инновационной деятельности в агропромышленном производстве» (Уфа, 2007); XIII Международной научно-практической конференции «Стратегия развития пищевой промышленности» (Москва, 2007).

Публикации результатов исследования. Основные положения работы опубликованы в 65 научных работах, из них 1 монография (Уфа, 2005), 11 публикаций в центральной печати (журнал «Морфология», № 4, 2004; «Вестник Оренбургского государственного университета», № 12, 2005; «Сибирский медицинский журнал», № 5, 2006; «Ветеринария», № 11, 2006; «Российский ветеринарный журнал», № 1, 2, 3, 2007; «Эфферентная терапия», № 2, 2007; «Вестник Башкирского университета», № 3, 2007; «Достижения науки и техники АПК», № 12, 2007; 7 патентов ФИПС.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 370 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, обсуждения полученных результатов исследований, выводов и практических предложений. Работа иллюстрирована 162 рисунками, 47 таблицами и диаграммами. Список литературы включает 526 источников (311 отечественных и 215 зарубежных авторов).

Положения и результаты, выносимые на защиту.

1. Высокие суточные дозы мерказолила (10 и 20 мг на 100 г массы тела) вызывают симптомы острой интоксикации у крыс, способствуют развитию выраженных деструктивных процессов в органах, искажая модель тиреоидной патологии.

2. Тиреостатик мерказолил, вводимый белым крысам в суточной дозе 1,0 - 5 мг/100 г массы тела в течение 21-х суток, позволяет получить модель гипотиреоза по типу эндемического эффекта в эксперименте.

3. Структура и уровень суточных ритмов терморегуляции отражают функциональную активность щитовидной железы, что позволяет использовать хронобиологические методы исследований в диагностике гипотиреоза (патент № 2290859).

4. Применение математических расчетов, с использованием метода наименьших квадратов, позволяет с высокой точностью определить уровни сТ4 и кортизола у клинически здоровых крыс по известным уровням оТ3, ТТГ и сТ4, оТ3 соответственно, а у гипотиреоидных - ТТГ от концентраций оТ3 и сТ4.

5. «Йодпектин» в составе рационов крыс и кроликов обладает биологической активностью, способствует улучшению структуры тканей гипотиреоидных животных.

6. «Йодпектин» в составе рационов оказывает стимулирующее влияние на функциональное состояние системы свободнорадикального окисления в фагоцитах. Йод-пектиновые соединения в составе рациона увеличивают интенсивность хемилюминесцентного ответа фагоцитов у гипотиреоидных животных в эксперименте.

7. Йод-пектиновые соединения в составе рационов нормализуют глюкокортикоидную функцию коры надпочечников.

8. Физиологические эффекты биологически активной добавки, содержащей органически связанные формы йода, проявляются в регуляции скорости и интенсивности реакций перекисного окисления липидов в тканях.

9. При сравнительном изучении физиологических эффектов органически связанных форм йода установлено, что «Йодпектин» по показателям биодоступности не уступает аналогу «Йодказеину» и является патогенетическим средством для восстановления гематологических и биохимических показателей у крыс и кроликов при тиреоидзависимых морфофункциональных нарушениях.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Настоящая работа выполнена в комплексе с сотрудниками научно-исследовательской лаборатории «Пищевые технологии» филиала МГУТУ в г. Мелеузе в рамках выполнения программы исследований Академии Наук Республики Башкортостан за № 19/3 от 15.01.2004 г по теме: «Разработка пищевых технологий для полноценного питания в условиях природноочаговой зобной эндемии населения Южного региона Республики Башкортостан». Нами выполнялся самостоятельный раздел. В период с 2000 по 2007 года в условиях вивария филиала МГУТУ в г. Мелеузе было проведено 3 серии опытов на 360 беспородных крысах-самцах массой 180-240 г, 40 кроликах в возрасте 2,5 месяца и 10 козах. Кормление животных проводили по стандартному рациону вивария.

I-я серия опытов включала проведение экспериментов на крысах с целью определения оптимально-допустимых суточных доз тиреостатика, обеспечивающих, с одной стороны, получение модели гипотиреоза по типу эндемического эффекта, с другой - исключающих развитие симптомов острой интоксикации мерказолилом.

II-я серия экспериментов проводилась в два этапа:

I-й этап - экспериментальное воспроизведение гипотиреоза с помощью мерказолила. Препарат вводили ежедневно в желудок животных с помощью металлического зонда. Суточная доза тиреостатика и продолжительность его введения варьировали в зависимости от поставленных задач - схема проведения опытов представлена в таблице 1.

II-й этап - оценка морфофункционального статуса животных при коррекции экспериментального гипотиреоза органически связанными формами йода - «Йодпектином» и «Йодказеином» согласно схемы, представленной в таблице 1.

Гипотиреоз у коз индуцировался ежедневным введением мерказолила из расчета 5,0 мг/100 г МТ на протяжении 30-и суток. У клинически здоровых и гипотиреоидных коз рассчитывали уровни оТ3, сТ4 и ТТГ методом регрессионного анализа.

Таблица 1 Схема проведения опытов

Группа животных	Количество животных в группе	Продолжи- тельность введения тиреостатика (сутки)	Срок содержания на йодобогащенном или общевиварном рационе (сутки)
I-я серия опытов: определение оптимально-допустимой дозы введения мерказолила на крысах
I-я - контроль	36
II-я - экспериментальный гипотиреоз, индуцированный ежедневным введением мерказолила в дозе 20 мг/100 г МТ	36	14
III-я - экспериментальный гипотиреоз, индуцированный ежедневным введением мерказолила в дозе 10 мг/100 г МТ	36	14
IV-я - экспериментальный гипотиреоз, индуцированный ежедневным введением мерказолила в дозе 5 мг/100 г МТ	36	21
V-я - экспериментальный гипотиреоз, индуцированный ежедневным введением мерказолила в дозе 1,0 мг/100 г МТ	36	21
II-я серия опытов: изучение биологической активности «Йодпектина» и «Йодказеина» на крысах
I-я - контроль	36
II-я - экспериментальный гипотиреоз, индуцированный ежедневным введением мерказолила в дозе 2,5 мг/100 г МТ	36	21
III-я - содержание на общевиварном рационе	36		30
IV-я - содержание на рационах, обогащенных «Йодпектином»	36		30
V-я - содержание на рационах, обогащенных «Йодказеином»	36		30
III-я серия опытов: изучение биологической активности "Йодпектина" на кроликах
I-я - контроль	10
II-я - экспериментальный гипотиреоз, индуцированный ежедневным введением мерказолила в дозе 2,5 мг/100 г МТ	10	30
III-я - содержание на общевиварном рационе	10		30
IV-я - содержание на рационе, обогащенном «Йодпектином»	10		30

Интегральную оценку морфофункционального статуса животных проводили при коррекции экспериментального гипотиреоза «Йодпектином», содержащим йод в органической связи с полисахаридами растительного генеза, в частности с пектином в соответствии с формулой изобретения по патенту № 2265377 «Биологически активная добавка к пище для профилактики йодной недостаточности и способ ее получения» от 10.12.2005 г. Исследуемое йодосодержащее органоминеральное соединение имеет следующий химический состав: пектин - 23,1-25,0 мас. %; йод кристаллический (I2) - 5,0-10,25 мас. %; йодид калия (KI) - 10,0-20,5 мас. %; вода дистиллированная - остальное.

«Йодказеин» - биологически активная добавка к пище на основе йодированных белков молока, изготовленная по патенту РФ № 2192150 от 14.05.2001 г.

В биологически активной добавке «Йодпектин» определяли содержание органического йода с использованием метода инверсионной постояннотоковой вольтамперометрии с углеродным электродом на вольтамперометрическом анализаторе «Экотест-ВА» по 3-х электродной схеме (Методические указания по выполнению измерений массовой концентрации йода в пищевых продуктах, продовольственном сырье, пищевых и биологически-активных добавках, разработанные ООО «Эконикс-Эксперт», Москва, 2001 г).

Метод связан с изучением поляризации микроэлектрода на основании кривых «ток - напряжение», называемых вольтамперными полярографическими волнами. Измерение массовой концентрации йода в пробах проводят после их минерализации и перевода йода из всех степеней окисления в йодид-ионы (степеь окисления -1).

В сыворотке крови животных определяли содержание тиреоидных гормонов - общего 3,5,3'-трийодтиронина (оТ3), свободного тироксина (сТ4), а также тиреотропного гормона (ТТГ) и кортизола методом иммуноферментного анализа с использованием стандартных наборов тест-систем ОАО «Алкор-Био» (Санкт-Петербург, Россия) на иммуноферментном автоматическом анализаторе УНИПЛАН (Россия).

Выявление взаимосвязей между содержанием гормонов щитовидной железы и коры надпочечников осуществляли методом регрессионного анализа (Прохоров Ю.В., 1998) c использованием полиномиальной модели: . Оценку неизвестных коэффициентов регрессии осуществляли методом наименьших квадратов на основе экспериментальных данных.

Суть метода заключается в рассмотрении семейства

и решении экстремальной задачи (где m?n-1)

для поиска значения параметров . Оптимальный набор параметров находили из системы

представляющей необходимые условия экстремума функции , в силу ее специфики являющиеся достаточными условиями ее минимума. Используя найденную зависимость, прогнозировали значения g(x) во всех точках.

Исследование крови проводили по общепринятым методам [Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф., 1995].

Для исследования люминол-зависимого свечения цельной крови крыс использовали метод регистрации хемилюминесценции - свечения, возникающего при взаимодействии радикалов. Также в качестве биологических моделей использовали гомогенаты почек крыс, где имитировали процессы перекисного свободнорадикального окисления липидов [Фархутдинов Р.Р., 2004].

Исследования суточных биоритмов температуры тела у крыс проводили в течение двух суток с 0700 до 2300 ч: 700, 1100, 1500, 1900, 2300 [Асланян Н.Л. и др., 1978]. В конце опыта животных выводили из эксперимента одномоментным декапитированием с соблюдением правил эвтаназии, согласно Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным. Кусочки органов фиксировали в 10 %-ном нейтральном водном растворе формалина, срезы изготавливали толщиной 7 мкм и окрашивали гематоксилином и эозином по общепринятой методике [Афанасьев Ю.И., 1967]. Гистохимические исследования включали определение в тканях гликогена по Мак-Манусу, гликозаминогликанов - по Хейлу и железа - по методу Перлса [Кононский А.И., 1976].

Результаты экспериментов подвергали вариационно-статистической обработке с использованием описательной статистики в программе Microsoft Excel. По всем количественным данным определяли критерий достоверности tst по Стьюденту.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Особенности терморегуляции у крыс при тиреоидной патологии

Нами изучены особенности воспроизведения тиреоидной патологии при суточных дозах мерказолила: 1,0; 5,0; 10,0 и 20,0 мг на 100 г МТ.

Установлено, что в течение эксперимента значения температуры тела у крыс претерпевают значительные колебания в течение суток. Размах этих колебаний у здоровых животных может достигать от 35,9 0С до 38,9 0С. Показатель температуры тела у здоровой крысы в одних случаях можно расcматривать как признак гипотиреоза, (35,9 0С при измерении в 0700 ч), а в других - как признак гипертиреоза (38,7 0С и 38,9 0С при измерении соответственно в 1900 ч и 2300 ч). При сохранении общей структуры температурной кривой отмечали значительную разницу в показаниях температуры тела, измеренных в одно и тоже время. Более того, акрофаза и батифаза ритма могут смещаться в течение суток.

Крысам 2-й группы вводили мерказолил из расчета 20 мг/100 г МТ. Особенности поведения животных в ходе эксперимента: на вторые сутки от начала эксперимента крысы снизили свою повседневную активность - не реагировали на обычные внешние раздражители, отказывались от грубых кормов (пшеница, овёс, семена подсолнечника), большую часть времени проводили в состоянии сна; на третьи сутки у животных отмечали агрессивное поведение; на 9-е сутки у 2-х крыс наблюдали расстройство двигательных функций, у 3-х крыс был отмечен летальный исход. Через семь дней от начала введения мерказолила у крыс изучали структуру суточных ритмов терморегуляции. У крыс 2-й группы наблюдали десинхроноз терморегуляции. Кроме того, в этой группе во все фазы исследования имели место более высокие значения температуры тела на 9-е сутки. Рисунок температурной кривой не был аналогичен контролю. Наблюдалось смещение акрофазы и батифазы, что свидетельствует о патофизиологических сдвигах в системах химической и физической терморегуляции. Содержание общего 3,5,3/-трийодтиронина (оТ3) в сыворотке крови гипотиреоидных животных составляло 1,44 ± 0,10 нмоль/л против 1,88 ± 0,13 нмоль/л у животных контрольной группы (р < 0,05), а свободного тироксина (сТ4) - 6,0 ± 0,23 пмоль/л и 16,68 ± 0,50 пмоль/л соответственно (р < 0,001). При этом уровень ТТГ у крыс 2-й группы составил 0,196 ± 0,02 мкМЕ/мл, а у контрольных - 0,124 ± 0,01 мкМЕ/мл (р < 0,01). Животные с такими функциональными нарушениями, безусловно, не пригодны в качестве моделей гипотиреоза по типу эндемического эффекта.

Животным 3-й экспериментальной группы вводили мерказолил из расчета 10 мг/100 г МТ. При наблюдении у них отмечали явления, присущие животным предыдущей группы: выпадение волос в области хвоста, задних лапок и грудной клетки, агрессивность, однако они были менее выраженные. На 14-е сутки эксперимента наблюдали летальный исход у 2-х крыс; симптомы острой интоксикации тиреостатиком не позволяют рассматривать данный вариант для моделирования тиреоидной дисфункции в эксперименте.

Животным 4-й экспериментальной группы вводили мерказолил из расчета 5 мг/ 100 г МТ. Крысы на протяжении всего исследования вполне удовлетворительно переносили эту дозу препарата. Они не отказывались от привычного для них корма, были спокойны и уравновешены. В этой группе, в отличие от двух предыдущих, не отмечали таких осложнений, как алопеция, паралич конечностей, выпадение волос и зубов. Хронобиологические исследования, проведенные на 22-е и 23-и сутки эксперимента, позволили прогнозировать развитие гипотиреоза: развивался симптом относительной гипотермии во все фазы ритма при совпадении положений акрофаз и батифаз в опыте и контроле. Мезор температуры тела у гипотиреоидных крыс был на 3,5 % ниже по отношению к аналогичному показателю клинически здоровых животных. В свою очередь данные иммуноферментного анализа сыворотки крови свидетельствовали о получении в данной группе крыс модели тяжелой формы гипотиреоза с дефектом конверсии Т4 в Т3 при дефиците йода: концентрация оТ3 в сыворотке крови гипотиреоидных животных составляла 1,6 ± 0,02 нмоль/л против 1,88 ± 0,13 нмоль/л в контроле (р < 0,05), а содержание сТ4 - 3,4 ± 0,12 пмоль/л и 16,68 ± 0,50 пмоль/л соответственно (р < 0,001). При этом уровень ТТГ у крыс 5-й группы составил 0,164 ± 0,01 мкМЕ/мл, а в контроле - 0,124 ± 0,01 мкМЕ/мл (р < 0,01).

Животным 5-й группы вводили мерказолил из расчета 1,0 мг/100 г МТ. Крысы сравнительно легко переносили малую дозу тиреостатика: как в общем физическом статусе животных, так и в их поведении не было замечено явных отклонений. При этом на 22-е сутки эксперимента наблюдали снижение температуры тела у гипотиреоидных крыс во все фазы ритма при сохранении положений акро- и батифаз по отношению к контролю. Мезор температуры тела гипотиреоидных крыс снизился на 2,45 % по отношению к аналогичному показателю клинически здоровых животных. Структура, уровень, а также положения акрофазы и батифазы суточных ритмов терморегуляции отражают функциональное состояние гипофизарно-тиреоидной системы, что позволяет рекомендовать хронобиологические методы исследования для диагностики гипотиреоидных состояний (патент № 220859). Концентрация оТ3 у крыс 5-й группы составляла 2,32 ± 0,07 нмоль/л против 1,88 ± 0,13 нмоль/л в контроле (р < 0,01), содержание сТ4 - 8,19 ± 0,80 пмоль/л и 16,68 ± 0,50 пмоль/л соответственно (р < 0,001). Уровень ТТГ у крыс 5-й группы составил 0,216 ± 0,01 мкМЕ/мл, а в контроле - 0,124 ± 0,01 мкМЕ/мл (р < 0,001). Уровни гормонов гипофизарно-тиреоидной системы в данной группе крыс характерны для легкой формы гипотиреоза.

Моделирование определения гормонов гипофизарно-тиреоидной системы у крыс, кроликов и коз

Гормон сТ4 является основным в оценке функционального состояния щитовидной железы, а тиреотропный гормон - стратегический маркер при ее оценке. Для прогноза уровня ТТГ в крови животных необходима количественная информация, отражающая связи в гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной системе. В этой связи нами проведены исследования зависимости содержания ТТГ от содержания оТ3 и сТ4, оТ3 от сТ4 и ТТГ, сТ4 от оТ3 и ТТГ и кортизола от оТ3 и сТ4. Для исследования взаимосвязи гормонов в данной работе использована регрессионная зависимость в виде полинома второй степени.

Обозначим уровень содержания гормонов оТ3, сТ4, ТТГ и кортизола в крови соответственно и исследуем зависимости между гормонами:

,

где (1) - зависимость уровня гормона оТ3 от сТ4 и ТТГ, (2) - зависимость уровня гормона сТ4 от оТ3 и ТТГ, (3) - зависимость уровня гормона ТТГ от оТ3 и сТ4, (4) - зависимость уровня кортизола от оТ3 и сТ4. Находим неизвестные коэффициенты kij с приведением данных к одному порядку нормировкой (5):

Полученные данные представлены в таблицах 2, 3.

Таблица 2 Средние значения данных по уровням тиреоидных гормонов, ТТГ и кортизола у клинически здоровых и гипотиреоидных крыс; (М ± m, n=12)

оТ3 нмоль/л	cТ4 пмоль/л	ТТГ мкМЕ/мл	кортизол нмоль/л
Клинически здоровые
0,3376 ± 0,0235	0,3353 ± 0,0251	0,3106 ± 0,0415	0,3020 ± 0,0494
Гипотиреоидные
0,2797 ± 0,0215	0,2710 ± 0,0299	0,2536 ± 0,0415	0,2549 ± 0,0408

Таблица 3 Коэффициенты расчета содержания тиреоидных гормонов, ТТГ и кортизола у клинически здоровых и гипотиреоидных крыс

	k1	k2	k3	k4	k5	k6	Относительная погрешность
Клинически здоровые
(1)	-9,685	18,798	6,640	-0,462	-7,339	1,252	6,04 %
(2)	-9,992	-2,705	-2,398	6,640	2,608	-1,046	4,53 %
(3)	7,390	-15,428	-22,144	-0,456	18,712	-2,414	12,92 %
(4)	-38,133	-55,970	-86,050	36,541	63,602	-13,155	1,42 %
Гипотиреоидные
(1)	-2,014	-0,940	-3,890	1,279	3,200	-0,327	9,88 %
(2)	-9,414	-6,626	2,054	8,147	1,329	-1,313	3,01 %
(3)	-61,351	67,886	52,387	23,217	-48,396	2,342	0,84 %
(4)	-88,673	79,312	63,784	37,337	-59,344	1,796	11,65 %

Таблица 4 Значения коэффициентов для клинически здоровых и гипотиреоидных коз

	k1	k2	k3	k4	k5	k6	Относительная погрешность
Клинически здоровые
(1)	-0,531	7,848	-6,810	-3,349	5,158	-0,502	7,23 %
(2)	76,050	19,168	-0,300	-67,777	-8,590	15,537	0,64 %
(3)	120,370	156,148	134,576	-159,063	-190,305	74,005	2,81 %
Гипотиреоидные
(1)	104,846	52,495	-311,824	-114,236	274,162	-40,460	2,17 %
(2)	53,154	43,491	-17,190	-65,755	0,727	13,556	0,04 %
(3)	-34,148	-86,803	181,864	78,726	-129,483	10,700	6,87 %

Таблица 5 Значения коэффициентов для клинически здоровых и гипотиреоидных кроликов

	k1	k2	k3	k4	k5	k6	Относительная погрешность
Клинически здоровые
(1)	1,940	24,533	-0,506	-7,512	-2,927	1,177	4,3%
(2)	0,462	-9,209	-0,046	2,237	2,435	-0,344	0,63%
(3)	136,918	-453,743	330,963	50,799	-61,533	2,074	4,83%
Гипотиреоидные
(1)	-0,297	6,857	-3,129	-2,102	0,674	0,422	8,68 %
(2)	4,936	6,045	-2,221	-4,416	-0,292	0,950	1,51 %
(3)	88,307	-88,066	-36,413	-24,279	52,760	-5,082	9,13 %

Сравнение расчетных и экспериментальных данных для контрольной группы крыс приведено в таблице 6.

Таблица 6 Содержание оТ3, сТ4, ТТГ и кортизола у клинически здоровых крыс; (М ± m, n=12)

оТ3 нмоль/л	cТ4 пмоль/л	ТТГ мкМЕ/мл	кортизол нмоль/л
Опыт	Расчет	Опыт	Расчет	Опыт	Расчет	Опыт	Расчет
2,35 ± 0,13	2,58 ± 0,19	10,35 ± 0,67	10,89 ± 0,64	0,022 ± 0,002	0,021 ± 0,002	19,08 ± 2,96	20,14 ± 2,72

Сравнение расчетных и экспериментальных данных для крыс в состоянии гипотиреоза приведено в таблице 7.

Метод регрессионного анализа позволил с высокой точностью рассчитать концентрацию сТ4 как у клинически здоровых крыс, так и гипотиреоидных животных при значениях относительной погрешности в пределах от 0,04 % до 4,53 % (табл. 4). Коэффициенты (k1 - k6) позволяют устанавливать расчетным путем уровни содержания ТТГ (относительная погрешность не превышает 0,84 %) при известных оТ3 и сТ4 у крыс, введенных в состояние гипотиреоза мерказолилом в дозе 2,5 мг/100 г МТ (табл. 5).

У крыс в состоянии гипотиреоза повышается точность определения оТ3 до 3,01 %, что в свою очередь уменьшает значение относительной погрешности для ТТГ до 0,84 % (табл. 5). Уменьшение погрешностей определения сТ4 и ТТГ у гипотиреоидных крыс соответственно до 3,01 % и 0,84 % обусловлено тем, что тиреостатик уменьшает диапазон колебаний уровней содержания этих гормонов. Дистрофические процессы в печени, а также снижение активности ферментативных систем в условиях дефицита тиреоидных гормонов при экспериментальном гипотиреозе оказывают ингибирующее влияние на процессы периферического дейодирования Т4, соответственно, увеличивается разброс значений оТ3 и повышается погрешность в расчете до 9,88 % у гипотиреоидных крыс, тогда как у клинически здоровых крыс этот показатель составлял 6,04 % (табл. 4 и 5).

Таблица 7 Содержание оТ3, сТ4, ТТГ и кортизола у крыс при гипотиреозе, индуцированном мерказолилом в дозе 2,5 мг/100 г МТ; (М ± m, n=12)

оТ3 нмоль/л	сТ4 пмоль/л	ТТГ мкМЕ/мл	кортизол нмоль/л
Опыт	Расчет	Опыт	Расчет	Опыт	Расчет	Опыт	Расчет
2,52 ± 0,19	2,85 ± 0,22	4,78 ± 0,52	4,35 ± 0,48	0,030 ± 0,004	0,031 ± 0,006	13,25 ± 2,12	13,61 ± 2,25

Увеличение дозы мерказолила усиливает выраженность дистрофических процессов в печени и почках, где преимущественно протекают процессы периферического дейодирования Т4 с образованием Т3. Функциональное истощение этих органов ведет к увеличению диапазона колебаний оТ3, что увеличивает относительную погрешность расчетов оТ3 с 7,19 % до 24,76 % при введении соответственно 1,0 мг и 20,0 мг мерказолила на 100 г МТ. У крыс с тяжелой формой гипотиреоза, вызванного мерказолилом в дозе 20,0 мг/100 г МТ, резко снижается уровень оТ3 по отношению к контрольной группе: концентрация общего 3,5,3/-L-трийодтиронина в сыворотке крови гипотиреоидных крыс составляла 1,44 ± 0,10 нмоль/л против 1,88 ± 0,13 нмоль/л в контроле (р < 0,01). При гипотиреозе, вызванном мерказолилом в дозе 1,0 мг/100 г МТ, у крыс наблюдаются адаптивные реакции: на фоне дефицита сТ4 повышается концентрация оТ3 до 2,32 ± 0,07 нмоль/л против 1,88 ± 0,13 нмоль/л в контроле (р < 0,05). При этом относительная погрешность при расчетах сТ4 в этих же группах крыс не превышала 2,15 %, составляя 1,64 %, 1,34 %, 0,36 % и 2,15 % соответственно при введении 20,0; 10,0; 5,0 и 1,0 мг антитиреоидного препарата. С уменьшением дозы тиреостатика повышалась и точность расчетов по определению уровня ТТГ: при применении высоких доз тиреостатика (20 мг/100 г МТ) относительная погрешность составляла 6,86 %, а при дозах 10,0; 5,0 и 1,0 мг мерказолила этот показатель соответственно составил 2,53 %, 1,52 % и 3,17 %. Важно, что параметры (k), вычисленные методом регрессионного анализа, позволяют с высокой точностью рассчитывать у крыс значения ТТГ и сТ4. У клинически здоровых коз и кроликов относительная погрешность расчетов среднеарифметической для сТ4 составляла соответственно 0,63 % и 0,64 %. При экспериментальном гипотиреозе уменьшался показатель относительной погрешности расчетов сТ4 - до 0,04 % и 1,51 % соответственно. При этом как у коз, так и у кроликов в состоянии экспериментального гипотиреоза увеличивался диапазон колебаний уровня содержания оТ3 - продукта ферментативного дейодирования Т4. Относительная погрешность при расчетах оТ3 у гипотиреоидных коз составляла 2,17 % против 7,23 % в контроле, а у кроликов - 8,68 % и 4,3 % соответственно. Увеличение амплитуды колебаний содержания оТ3, оказывающего регуляторное влияние на продукцию ТТГ, в свою очередь увеличивает погрешность среднеарифметических значений ТТГ у коз в состоянии гипотиреоза до 6,87 % (в контроле 2,81 %), а у гипотиреоидных кроликов до 9,13 % (в контроле - 4,83 %). Следовательно, нами установлены изменения в функционировании гипофизарно-тиреоидной системы у крыс, кроликов и коз при экспериментальном гипотиреозе.

Морфологические изменения в органах крыс при введении разных доз мерказолила

Структура щитовидной железы у крыс. У животных контрольной группы фолликулы представлены в виде замкнутых полостей, выстланных однослойным эпителием. Тироциты имеют кубическую форму, содержат ядро на базальной половине клетки. Глыбки хроматина распределяются равномерно. Полость фолликулов заполнена коллоидом (тироглобулин), а снаружи фолликулы оплетены сетью кровеносных капилляров. Между фолликулами встречаются малодифференцированные клетки - тироциты, образующие интерфолликулярные островки.

После введения мерказолила в дозе 20 мг/100 г МТ возникают микроморфологические изменения. Имеются отдельные деструктивно измененные тироциты, которые расположены на базальной мембране и имеют цитоплазматические выросты различной конфигурации, направленные в полость фолликула. Ядра деформированных тироцитов подвергаются кариопикнозу и уменьшены в размерах. Часть деформированных тироцитов лишена связей с базальной мембраной и свободно располагается в виде скоплений в интрафолликулярной полости.

При введении мерказолила в суточной дозе 10 мг/100 г МТ отмечали единичные фолликулы, которые содержат небольшое количество коллоида. В подавляющем числе фолликулов сохранены основные структурные элементы. Часть фолликулов подвержена деструктивным процессам - фрагменты цитоплазмы тироцитов располагаются в свободной от коллоида полости.

Структура щитовидной железы при применении мерказолила в суточной дозе 5 мг/100 г МТ: часть фолликулов содержит незначительное количество коллоида, другая - представляет полости, свободные от тироглобулина. В подавляющем большинстве фолликулов сохранены основные структурные элементы - они имеют стенку, выстланную однослойным кубическим эпителием. Для тироцитов характерно наличие оксифильной цитоплазмы, центрально расположенного ядра с гомогенным хроматином. При этом в части фолликулов наблюдали дистрофические процессы, затрагивающие фактически все элементы тиреоидной паренхимы.

Структура щитовидной железы у крыс при экспериментальном гипотиреозе, индуцированном мерказолилом в дозе 2,5 мг/100 г МТ. В тироцитах крыс данной группы определялись незначительно выраженные гистологические трансформации, что указывает на достаточную функциональную активность железы. В кровеносных капиллярах в незначительной степени выявляются застойные явления. В различных участках паренхимы и интерфолликулярном пространстве наблюдаются небольшие скопления лимфоидных клеток.

Щитовидная железа крыс при применении мерказолила в дозе 1,0 мг/100 г МТ. В центральной части фолликулов, свободных от коллоида, стенка состоит из плотно прилегающих друг к другу тироцитов кубической или цилиндрической формы. В подкапсулярной зоне встречаются фолликулы, содержащие разное количество коллоида. Между фолликулами, в рыхлой соединительной ткани, выявляются небольшие скопления лимфоцитов, а также интерфолликулярных клеток. Часть фолликулов, особенно в краевой части органа, продолжает функционировать, обеспечивая процессы синтеза тиреоидных гормонов.

У крыс контрольной группы гепатоциты имеют кубическую или полигональную форму. В центре гепатоцитов располагается округлой формы ядро. Хроматин ядра располагается равномерно. Внутридольковые синусоидные гемокапилляры умеренного кровенаполнения. Лимфоидная ткань представлена в виде мелких очагов, диффузно расположенных по ходу синусоидных капилляров.

У крыс, получавших тиреостатик в дозе 20 мг/100 г МТ, отмечали выраженные деструктивные процессы в печеночной ткани. Наблюдали нарушение целостности печеночных пластин с разрушением внутридольковых синусоидных гемокапилляров без выраженных признаков кровоизлияния. В кровеносных сосудах долек печени наблюдаются явления застоя, что связано, видимо, с расширением венозной системы печени. Введение крысам мерказолила вызывает реакцию со стороны иммунокомпетентных клеток.

У животных, получавших мерказолил в суточной дозе 10 мг/100 г МТ, выявлялись гистологические изменения в печени. В первую очередь разрушаются печеночные балки и сами гепатоциты. Ядра уменьшаются в размерах, хроматин уплотняется, границы печеночных клеток четко не определяются. В синусоидных гемокапиллярах наблюдали явления застоя крови. По ходу кровеносных сосудов, особенно в зоне расположения триады печени, выявляли небольшие скопления диффузно расположенных лимфоцитов.

Структура печени при введении мерказолила в суточной дозе 5 мг/100 г МТ: в органе отмечается застой крови во внутридольковых синусоидных гемокапиллярах, при этом синусоидные капилляры расширены, между эндотелиоцитами появляются щели, создающие условия для выхода плазмы крови в периваскулярную зону.

Мерказолил в суточной дозе 1,0 мг/100 г МТ вызывал незначительные изменения в тканевых структурах печени: установлены слабо выраженные явления застоя крови в синусоидных гемокапиллярах отдельных долек и небольшие очаги скоплений лимфоцитов и макрофагов по ходу крупных кровеносных сосудов. В тоже время отсутствуют деструктивные процессы как в гепатоцитах, так и в междольковой соединительной ткани.

Структура почек после введения мерказолила в разных дозах. В почках у крыс контрольной группы среди канальцев нефрона выявляются почечные тельца, представленные двухслойной капсулой и сосудистым клубочком. Проксимальный отдел нефрона образован из нефроцитов кубической формы. Узкая часть нефрона построена из плоских клеток, дистальный отдел - из кубических клеток, а собирательные трубочки - из цилиндрических.

Введение мерказолила в возрастающих дозах - 5,0; 10,0 и 20,0 мг /100 г МТ - сопровождается изменениями структуры нефрона и кровообращения. В корковом веществе определяются не функционирующие почечные тельца, образованные интенсивно окрашенными плотно расположенными клетками. Они уплотнены, а полость капсулы расширена. Эпителий неравномерно расширенных канальцев находится в состоянии гиалиново-капельной дистрофии. Наряду с тубулопатией отдельных нефронов отмечали венозный стаз и скопление лимфоцитов, характеризующееся диффузным распределением клеток. При применении мерказолила в дозе 5 мг/100 г определяются нарушения сосудистой системы органа. В мозговом веществе почки обнаруживаются очаговые полнокровные сети кровеносных капилляров, окружающих почечные канальцы. У животных 5-й группы, которым вводили мерказолил из расчета 1,0 мг/100 г МТ, выявляли почечные тельца с запустевшими кровеносными капиллярами и лимфоидные скопления небольших размеров и в малом количестве.

Высокие дозы тиреостатика (20,0 и 10,0 мг/100 г МТ) способствуют развитию деструктивных процессов как в почечных тельцах, так и в канальцах нефронов. Дозы препарата, введенные из расчета 5,0 и 1,0 мг/100 г МТ, оказывают менее выраженный нефротоксический эффект, гистологические трансформации встречаются редко.

Гистохимические изменения у крыс под влиянием мерказолила

Нами проведены гистохимические исследования, включающие качественную оценку количества гликогена и кислых гликозаминогликанов. Гликоген проявляет высокую реакцию в печеночных клетках контрольной группы животных. Он равномерно распределяется по всей цитоплазме гепатоцитов, а ядра печеночных клеток остаются инактивными и выглядят в виде светлых образований. Междольковая соединительная ткань, а также триада печени проявляют высокую реакцию на гликоген. При введении крысам мерказолила в суточной дозе 5 мг/100 г МТ в гепатоцитах обнаружена высокая реакция на гликоген, а область триады печени и кровеносные сосуды с окружающей соединительной тканью проявляли умеренную реакцию. При более высоких дозах мерказолила происходит уменьшение количества гликогена в гепатоцитах. Отмечается его неравномерное распределение в центральных и периферических зонах долек.

У крыс, получавших мерказолил в дозе 1 мг/100 г МТ, надпочечники характеризовались нормальным гистологическим строением, а при увеличении дозы антитиреоидного препарата (5, 10 и 20 мг/100 г МТ) наблюдали явления застойной гиперемии в корковом и мозговом веществе. В надпочечниках у клинически здоровых крыс обнаружена высокая реакция на гликоген соединительнотканной капсулы и умеренная реакция паренхимы (корковое и мозговое вещество) железы. При введении крысам мерказолила в дозе 20 мг/100 г массы тела в корковом веществе надпочечников количество гликогена существенным образом не меняется, а хромаффинные клетки проявляют высокую реакцию на гликоген. При этом гранулы гликогена интенсивно окрашивают цитоплазму хромаффиноцитов. Мерказолил в дозе 10 мг/100 г массы тела не влияет на содержание гликозаминогликанов в надпочечниках. У клинически здоровых крыс, так и у крыс в состоянии гипотиреоза обнаружена умеренная реакция на кислые гликозаминогликаны в корковом веществе и высокая - в мозговом веществе.

Экспериментальный гипотиреоз сопровождается нарушениями гемодинамики в селезенке, что выражается в расширении просвета вен и капилляров, приводящих к застойной гиперемии. В результате происходит избыточное образование гемосидерина в клетках ретикулоэндотелиальной системы из-за усиленного разрушения эритроцитов и гемоглобина. В красной пульпе селезенки клинически здоровых крыс определялись гранулы железа темно-синего цвета, а белая пульпа не проявляла реакцию на железо. Мерказолил в дозе 10 мг/100 г массы тела способствовал накоплению гемосидерина в тканях селезенки, в частности в цитоплазме макрофагов. При проведении качественной гистохимической реакции на железо в легких клинически здоровых крыс также обнаруживаются сидерофаги, но в меньшем количестве, чем у крыс в состоянии экспериментального гипотиреоза.

Сравнительная оценка эффективности биологически активных добавок - «Йодпектина» и «Йодказеина» - на моделях гипотиреоза у крыс

Полученные материалы показывают, что гипотиреоз, индуцированный мерказолилом в дозе 2,5 мг/100 г МТ позволяет получать объективные биохимические и морфологические данные у крыс, характерные для этой патологии. Поэтому в дальнейших экспериментах на крысах нами для получения модели гипотиреоза была применена эта доза, а в следующей серии, на этих же животных, определяли эффективность воздействия йодосодержащих препаратов.

Исследования показали, что при гипотиреозе наиболее подвержены гистологическим трансформациям печень, почки и легкие. В этих органах наряду с деструктивными явлениями отмечали нарушения периферического кровоснабжения с морфологическими признаками реакций иммунной системы. При применении йодосодержащих рационов вышеописанные признаки деструктивных процессов нивелируются.

Влияние «Йодпектина» и «Йодказеина» на кровь крыс c экспериментальным гипотиреозом

На 22-е сутки от начала введения тиреостатика отмечали изменение состава периферической крови у крыс 2-й группы (экспериментальный гипотиреоз). Как видно из данных, представленных в таблице 8, содержание гемоглобина у гипотиреоидных животных составило 126,75 ± 0,86 г/л против 136,75 ± 1,76 г/л в контроле (р < 0,001). При подсчете числа эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов у животных 2-й группы установлено, что среднеарифметические значения количества названных форменных элементов входят в коридор нормы, существенно не отличаясь от аналогичных показателей клинически здоровых крыс.

На втором этапе, при оценке эффектов йодосодержащего рациона, гематологические показатели крыс 3-й группы претерпевают изменения: содержание гемоглобина у крыс 4-й и 5-й групп составило соответственно 112,50 ± 1,92 г/л и 112,70 ± 2,13 г/л против 106,25 ± 2,60 г/л в 3-й группе (табл. 8). Кроме того, у крыс в 3-й группе выявлена тенденция к уменьшению числа эритроцитов: при содержании на йодобогащенном рационе количество эритроцитов составило 6,11 ± 0,16•1012/л (4-я группа) и 6,14 ± 0,15•1012/л (5-я группа), а на общевиварном - 5,90 ± 0,24•1012/л. При подсчете общего количества лейкоцитов и тромбоцитов у крыс 4-й и 5-й групп не выявлены существенные различия по отношению к аналогичным показателям в 3-й группе животных. В лейкограмме процентное содержание лимфоцитов составляло: в 4-й группе - 69,1 ± 3,01 %, в 5-й группе - 70,3 ± 1,92 %, а в 3-й - 61,7 ± 2,74 %.

Таблица 8 Показатели крови у крыс; (М ± m; n = 12)

Показатели	Контрольная (1-я группа)	Эксперимен-тальный гипотиреоз (2-я группа)	Общевиварный рацион (3-я группа)	Рацион, обогащенный «Йод-пектином» (4-я группа)	Рацион, обогащенный «Йод-казеином» (5-я группа)
Гемоглобин, г/л	136,75 ± 1,76	*** 126,75 ± 0,86	*** 106,25 ± 2,60	*** 112,50 ± 1,92	*** 112,70 ± 2,13
Эритроциты, 1012/л	4,78 ± 0,16	* 4,34 ± 0,12	*** 5,90 ± 0,24	*** 6,11 ± 0,16	*** 6,14 ± 0,15
Лейкоциты, 109/л	4,06 ± 0,31	4,78 ± 0,36	3,50 ± 0,21	3,98 ± 0,31	3,91 ± 0,25
Тромбоциты, 109/л	186,66 ± 8,90	183,33 ± 8,29	*** 487,25 ± 13,96	*** 525,50 ± 14,42	*** 475,66 ± 23,79
Базофилы, %	0,00	0,00	0,00	0,00	0,00
Эозинофилы, %	0,50 ± 0,15	0,40 ± 0,25	1,20 ± 0,34	* 2,20 ± 0,62	** 1,10 ± 0,14
Палочкоядер-ные нейт-...

Подобные документы

• Нормы и рационы кормления кролей

  Хозяйственно-биологические особенности кроликов. Состав кормов для этих животных. Типы, техника и гигиена кормления. Потребность кроликов в энергии и питательных веществах. Откорм и кормление взрослых кроликов и молодняка. Методика составления рационов.
  
  реферат [41,2 K], добавлен 24.01.2012
  

• Селекция животных

  Принципы селекции животных. Отбор родительских форм и типы скрещивания животных. Отдаленная гибридизация домашних животных. Восстановление плодовитости у животных. Успехи селекционеров России в создании новых и улучшении существующих пород животных.
  
  презентация [2,6 M], добавлен 04.10.2012
  

• Научные основы и организация кормления кроликов

  Кролиководство - наиболее скороспелая отрасль животноводства. Составление рационов для половозрастных групп животных, определение их структуры. Основные элементы полноценных рационов и их роль в питании кроликов. Контроль качества и полноценности кормов.
  
  курсовая работа [100,7 K], добавлен 18.10.2012
  

• Изучение оценки биологической безопасности продукции птицеводства на лабораторных животных

  Токсикологическая характеристика соединений свинца и кадмия, пути их поступления, распределения и накопления в организме животных. Исследование патологоанатомических и морфологических изменений в органах и тканях крыс при отравлении тяжелыми металлами.
  
  дипломная работа [969,1 K], добавлен 10.12.2010
  

• Зоогигиенические требования для кроликов при проектировании животноводческих объектов

  Влияние отдельных параметров микроклимата на здоровье и продуктивность животных. Гигиенические требования к объемно-планировочным и конструктивным решениям зданий для содержания животных. Ветеринарная защита кролиководческих ферм, меры общей профилактики.
  
  курсовая работа [53,9 K], добавлен 26.10.2015
  

• Основы содержания и разведения сельскохозяйственных животных

  Строение скелета крупного рогатого скота на примере коровы. Схема пищеварительного аппарата, строение кожи. Способы скрещивания сельскохозяйственных животных, их нормированное кормление. Содержание кроликов. Технология заготовки сенажа, учет кормов.
  
  контрольная работа [1,1 M], добавлен 24.12.2013
  

• Кормление быков

  Потребности сельскохозяйственных животных в питательных веществах, энергии. Нормы кормления быков-производителей. Рацион и его структура, оптимальные варианты. Влияние структуры рационов на пищеварение, обмен веществ, воспроизводительные функции животных.
  
  отчет по практике [382,2 K], добавлен 20.08.2015
  

• Основы нормированного кормления сельскохозяйственных животных

  Эффективность нормированного кормления сельскохозяйственных животных. Поддерживающее кормление животных, величина поддерживающей части нормы. Структура и составление рационов для животных. Особенности кормления стельных сухостойных коров и нетелей.
  
  реферат [24,4 K], добавлен 13.12.2011
  

• Влияние кратко- и долговременной физической нагрузки на изменение количества содержания сахара в различных тканях у 6- и 12-месячных животных до и после ионизирующей радиации

  Проблема изучения механизмов влияния ионизирующей радиации на организм животных и человека, ее актуальность на современном этапе, направления исследования. Исследование данной тематики на примере облученных крыс при 10- и 60-минутной физической нагрузке.
  
  статья [19,9 K], добавлен 18.07.2013
  

• Особенности ухода за копытцами при различных методах содержания

  Состояние копытец животных, формы их заболевания. Ножные жидкие и сухие ванны для профилактики. Правила содержания животных. Профилактическая расчистка и обрезка копытец (хироподия), применяемый инструментарий. Обработка копытец у беспокойных животных.
  
  реферат [16,4 K], добавлен 11.09.2009
  

• Кормление сельскохозяйственных животных

  Научные основы кормления животных, определение их потребности в питательных веществах и составление оптимального рациона и схемы кормления. Анализ кормления разных половозрастных групп животных. Передовые способы приготовления кормовых к скармливанию.
  
  курсовая работа [57,1 K], добавлен 12.03.2011
  

• Корма для животных

  Классификация, химический состав и питательность кормов для животных. Заготовка высококачественных кормов. Заготовка сенажа в траншее. Заготовка силоса. Подготовка кормов к скармливанию. Нормированное кормление и составление суточного рациона животных.
  
  реферат [31,5 K], добавлен 11.07.2015
  

• Эффективность различных систем содержания кроликов в условиях Кузбасса

  Способы содержания кроликов породы советская шиншилла в условиях Кузбасса. Показатели эффективности содержания кроликов в крольчатниках и в шедах на улице. Характеристика пушно-меховой продуктивности в традиционном и акселерационном кролиководстве.
  
  презентация [71,6 K], добавлен 24.01.2011
  

• Кормление сельскохозяйственных животных

  Учет фактической переваримости и усвояемости кормов при расчете рационов, комбикормов и премиксов. Оценка питательности кормов по химическому составу, балансу азота, углерода и энергии. Минеральные вещества в кормлении сельскохозяйственных животных.
  
  контрольная работа [277,6 K], добавлен 12.09.2011
  

• Транспортирование животных. Ветеринарно-санитарный контроль на транспорте

  Задание службы ветеринарной медицины во время транспортировки. Подготовка убойных животных к перевозке, оформление транспортной документации. Требования к погрузке и содержанию животных. Профилактика травматизма и болезней, связанных с перевозкой.
  
  реферат [24,8 K], добавлен 13.02.2015
  

• Система нормированного кормления лактирующих коров в период раздоя и осеменения в условиях стойлового содержания

  Элементы системы нормированного кормления животных, их потребности в питательных веществах и энергии. Выбор типа кормления для животных с учётом их вида, возраста, продуктивности. Оптимальные варианты типов кормления и рационов для лактирующих коров.
  
  курсовая работа [2,1 M], добавлен 22.01.2012
  

• Теоретические аспекты кормления животных

  Оценка питательности кормов в скандинавских кормовых единицах. Ее сущность и недостатки. Режим и рацион кормления щенков, рабочих лошадей. Энергетические потребности животных. Расчет годовой потребности в кормах для крупного рогатого скота стада.
  
  контрольная работа [62,0 K], добавлен 14.08.2013
  

• Технология содержания животных на ферме

  Влияние микроклимата на физиологическое состояние и продуктивность животных. Планирование территории животноводческой фермы. Защита от проникновения инфекции на территорию предприятия. Поение животных, навозоудаление, освещение и вентиляция помещения.
  
  курсовая работа [547,1 K], добавлен 13.05.2013
  

• Гигиена содержания сельскохозяйственных животных

  Основные системы содержания сельскохозяйственных животных и их характеристика. Гигиена содержания свиней, овец, лошадей и сельскохозяйственной птицы. Санитарно-гигиенические требования к участку для строительства животноводческих ферм и комплексов.
  
  контрольная работа [62,0 K], добавлен 02.08.2015
  

• Технология кормления и содержания кроликов

  Биологические и хозяйственные особенности кроликов: рост, развитие, особенности пищеварения и размножения. Продуктивность мясо-шкурных, мясных и пушных пород. Гигиена содержания, кормление и разведение кроликов. Заразные болезни, лечение и профилактика.
  
  курсовая работа [135,5 K], добавлен 24.02.2016
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам