Становление микроциркуляторных функций эритроцитов и тромбоцитов в раннем онтогенезе телят

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

становление микроциркуляторных функций эритроцитов и тромбоцитов в раннем онтогенезе телят

03.03.01 - физиология

Белова Татьяна Александровна

Боровск 2011

Работа выполнена в Калужском филиале Российского государственного аграрного университета - МСХА им. К.А. Тимирязева.

Научные консультанты: доктор биологических наук, профессор

Медведев Илья Николаевич;

доктор биологических наук

Гpушкин Александр Георгиевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Решетов Вадим Борисович

доктор биологических наук, профессор

Иржак Лев Исаакович

доктор биологических наук

Куликов Александр Владимирович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина».

Защита диссертации состоится «____» _______ 2011 в ___ часов на заседании диссертационного совета Д006.030.01 при Всероссийском научно-исследовательском институте физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных.

Адрес института: 249013, г. Боровск Калужской области., п.Институт, ВНИИФБиП Е-mаil: bifip@kаlugа.ru. Телефон (48438) 4-30-26 факс: (48438) 4-20-88

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных.

Автореферат разослан «___» ___________ 2011 г.

Учёный секретарь

диссертационного совета,

кандидат биол. наук В.П. Лазаренко

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. На современном этапе развития в биологии продуктивных животных сохраняется практическая потребность в дальнейшем получении и систематизации знаний по их возрастной физиологии. Сохраняется актуальность глубокого изучения вопросов становления системы микроциркуляции у продуктивных животных в течение раннего онтогенеза [В.Ф. Лысов, В.И. Максимов, 2003] под действием на нее различных факторов внешней среды [В.И. Максимов, И.Н. Медведев, 2009], что во многом способствует либо адаптации организма, либо его разнообразным дисфункциям [В.В. Алексеев, А.А. Шуканов и др., 2004].

В настоящее время область микроциркуляции рассматривается как зона, состояние кровотока в которой во многом определяет функциональную активность организма, т.к. именно на уровне микроциркуляторного русла осуществляются жизненно важные процессы, обеспечивающие гемодинамический и метаболический гомеостаз [А.А. Мельников, А.Д. Викулов, 2004; А.В. Муравьев и др., 2004; Б.И. Кузник, 2010].

Являясь важными компонентами обеспечения микроциркуляции и поддержания оптимума внутренней среды в целом, эритроциты и тромбоциты определяют жидкостные свойства крови за счет агрегационной активности и изменения формы, влияя на реализацию различных адаптивных реакций организма.

При низкой выраженности активирующих влияний в сосудистом русле подавляющее большинство эритроцитов и тромбоцитов являются интактными, что является физиологической основой оптимальной реологии крови. Агрегация эритроцитов и тромбоцитов может усиливаться при многих экзогенных влияниях, отражая определенные процессы их внутренней ультраструктурной и биохимической перестройки. Становится ясно, что при возникновении в организме теленка отклонений от физиологического оптимума может отмечаться изменение активности эритроцитов и тромбоцитов, что способствует ухудшению гемореологических и гемостатических свойств крови, снижающее эффективность микроциркуляции в растущих тканях.

Развитие отклонений от физиологического состояния у телят нередко отмечается в фазу новорожденности. При этом, видное место в их числе занимает дефицит железа и функциональные нарушения в системе пищеварения [Р.Г. Иксанов, М.П. Неустроев, 1987; В.Н. Мозжерин и др., 2006], которые способны приводить к различным дисфункциям и нередко к гибели животного.

Наблюдения за телятами с дефицитом железа или ФНП показали, что у них имеются не только анемия или диарея с обезвоживанием, но и ряд общих изменений в организме: дисфункции клеток крови, формируются признаки тканевой гипоксии, сердечной недостаточности, понижение общей резистентности и др. [А.В. Иванов, 2000; И.П. Кондрахин, 2003; Р.Е. Киселева, 2005; А.С. Сергатенко, 2007; А.В. Бушов и др., 2007].

Не смотря на большие успехи биологической науки, до сих пор остается не выяснена цитоархитектоника эритроцитов и степень активации тромбоцитов in vivо, выраженность их агрегации, определяющие микроциркуляцию в тканях здоровых телят в течение всего раннего онтогенеза. Остаются не оценены возникающие сдвиги в реологических свойствах эритроцитов и тромбоцитов и тонкие механизмы их формирования у телят с нарушениями гомеостаза в фазу новорожденности. Не исследованы причинные факторы и пути развития у них эритроцитарных и тромбоцитарных изменений. Не выяснена степень поверхностных изменений эритроцитов и внутрисосудистой активности тромбоцитов и их способность к агрегации, состояние ПОЛ эритроцитов и тромбоцитов и активность их антиокислительных ферментов у новорожденных телят с дефицитом железа и ФНП. Не разработаны физиологически обоснованные подходы к их нивелированию, способные одновременно оптимизировать микрореологические свойства эритроцитов и тромбоцитов. У новорожденных телят с дефицитом железа не оценено влияние препарата железа и его сочетаний с современными биологически активными средствами на эритроцитарную и тромбоцитарную активность. До настоящего времени у телят с ФНП в фазу новорожденности не определялись возможности воздействия энтеросорбентов и современных стимуляторов анаболизма при их изолированном применении и при различном их сочетании на микрореологические свойства эритроцитов и кровяных пластинок.

В связи с этим вполне очевидна актуальность и целесообразность для современной биологии изучение онтогенетической динамики микрореологических функциональных особенностей эритроцитов и тромбоцитов на доступной и удобной для изучения и важной для практики модели телят первого года жизни.

Исходя из этого, были сформулированы цель и задачи настоящих исследований.

Цель исследований. Выяснить особенности становления микрореологических свойств эритроцитов и тромбоцитов у телят в течение раннего онтогенеза и их динамику в условиях нередко развивающихся отклонений от гомеостаза в фазу новорожденности у молодняка крупного рогатого скота (дефицит железа и функциональные нарушения пищеварения) до и после корректирующего вмешательства по устранению данных состояний.

Для реализации намеченной цели были поставлены следующие задачи исследований:

1. Оценить особенности возрастной динамики цитоархитектоники и агрегационной активности эритроцитов, липидного состава их мембран, интенсивности ПОЛ, выраженности антиоксидантной защиты красных кровяных телец у здоровых телят в течение раннего онтогенеза.

2. Установить возрастную динамику тромбоцитарной активности, выраженности антиоксидантной защиты плазмы крови и тромбоцитов, ПОЛ в них и липидного состава мембран кровяных пластинок на протяжении отдельных фаз раннего онтогенеза здоровых телят.

3. Определить взаимосвязь выраженности эритроцитарной цитоархитектоники и агрегации и активности тромбоцитов, проявляемой in vitrо и in vivо у телят в течение раннего постнатального онтогенеза.

4. Выявить выраженность изменений микрореологических свойств эритроцитов и тромбоцитов, динамику их липидного состава, интенсивности в них ПОЛ и степени их антиоксидантной защищенности при железодефицитном состоянии или функциональных нарушениях пищеварения у новорожденных телят.

5. Установить особенности поверхностной геометрии эритроцитов, способности их к агрегации и активности тромбоцитарных функций, интенсивность ПОЛ, степень антиоксидантной защищенности и липидный состав эритроцитов и тромбоцитов у новорожденных телят с дефицитом железа при изолированном использовании железосодержащего средства (ферроглюкин) и в сочетании с полизоном и/или крезацином.

6. Выяснить степень оптимизирующего воздействия ряда вариантов коррекции ФНП у новорожденных телят (традиционная коррекция, фоспренил, сорбент «Экос», полизон, крезацин, сочетание «Экоса» и «Фосфопага», сочетание «Фосфопага», «Экоса» и кальция глюконата и сочетание полизона и крезацина) на микрореологические свойства эритроцитов и тромбоцитов, интенсивность в них ПОЛ, степень их антиоксидантной защищенности и липидный состав.

Научная новизна. Впервые оценена динамика микрореологических свойств и липидного состава мембран эритроцитов, интенсивности в них ПОЛ и выраженности антиоксидантной защиты плазмы крови и красных кровяных телец у здоровых телят на протяжении раннего онтогенеза.

Выявлены впервые особенности тромбоцитарной активности в условиях близких к внутрисосудистым, состояние их антиоксидантной защиты, ПОЛ и липидного состава мембран у здоровых телят в течение отдельных фаз раннего онтогенеза.

У новорожденных телят с дефицитом железа или ФНП, впервые определены микрореологические свойства красных кровяных телец и кровяных пластинок, их липидный состав, интенсивность в них ПОЛ и степень их антиоксидантной защищенности.

Впервые у новорожденных телят с дефицитом железа установлена степень коррекции эритроцитарной цитоархитектоники, внутрисосудистой активности кровяных пластинок, способности к агрегации эритроцитов и тромбоцитов, интенсивности в них ПОЛ, антиоксидантной защищенности и липидного состава с помощью железосодержащего средства (ферроглюкин) и его сочетаний с полизоном и/или крезацином с выявлением возможности полной нормализации учитываемых показателей на фоне одновременного применения трех препаратов.

Оценена впервые степень оптимизирующего воздействия отдельных вариантов коррекции (традиционная коррекция, фоспренил, сорбент «Экос», полизон, крезацин, сочетание «Экоса» и «Фосфопага», сочетание «Фосфопага», «Экоса» и кальция глюконата и сочетание полизона и крезацина) на микрореологические свойства эритроцитов и тромбоцитов, их липидный состав, интенсивность в них ПОЛ и степень их антиоксидантной защищенности у новорожденных телят с ФНП с выявлением возможности полной их нормализации при одновременном применении полизона и крезацина.

Научная новизна исследований подтверждена 9 патентами РФ на изобретение (№2383131, приоритет от 11.03.2009г.; №2383130, приоритет 02.03.2009г.; №2393475, приоритет от 18.02.2009г.; №2393485, приоритет 18.02.2009г.; №2403031, приоритет 10.03.2009г.; №2403021, приоритет 11.03.2009г.; №2402317, приоритет 08.05.2009г.; №2404753, приоритет 08.05.2009г.; №2412696, приоритет 15.10.2009г.), одном патентом РФ на полезную модель №107357, приоритет 22.02.2011г. и 5 зарубежными (Германия) патентами на полезную модель Nr. 20 2011 002 870.4, Tаg dеr Еintrаgung 05.05.2011; Nr. 20 2011 002 867.4, Tаg dеr Еintrаgung 05.05.2011; Nr. 20 2011 002 869.0, Tаg dеr Еintrаgung 05.05.2011; Nr. 20 2011 002 868.2, Tаg dеr Еintrаgung 05.05.2011; Nr. 20 2011 002 871.2, Tаg dеr Еintrаgung 26.05.2011.

Практическая значимость. Установленные в работе возрастные нормы микрореологических свойств эритроцитов и тромбоцитов у телят первого года жизни являются основой для широкого внедрения подготовленных методических рекомендаций по их оценке в животноводческих хозяйствах.

Произведенный в работе расчет величины реологического потенциала крови на основе значений поверхностной геометрии и агрегационной активности красных кровяных телец и кровяных пластинок, выраженности ПОЛ, антиоксидантной защищенности плазмы крови, эритроцитов и тромбоцитов и показателей их липидного состава у новорожденных телят с дефицитом железа или ФНП позволяет точно диагносцировать развитие микрореологических нарушений крови для своевременного начала эффективной коррекции.

Найдена возможность полной коррекции цитоархитектоники эритроцитов, внутрисосудистой активности тромбоцитов, способности их к агрегации, липидного состава, уровня эритроцитарного и тромбоцитарного ПОЛ и их антиоксидантной защищенности у новорожденных телят с дефицитом железа при помощи сочетания железосодержащего средства (ферроглюкин) с полизоном и крезацином.

Разработан, апробирован и предложен практике способ к нормализации микрореологических свойств эритроцитов и тромбоцитов, их липидного состава, интенсивности в них ПОЛ и их антиоксидантной защищенности у новорожденных телят с ФНП, включающий сочетание полизона и крезацина.

Реализация результатов исследования. Полученные данные внедрены в работу СПК «Память Ленина» Дмитровского района Орловской области, СПК «Заря мира» и СПК «Восход» Советского района Курской области, в Калужской области на базе филиала ПСХ «Щелканово» ФГБУ ОК Бор управления делами Президента РФ и используются в педпроцессе в Калужском филиале РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева, ФГОУ ВПО Костромской ГСХА и ФГОУ ВПО Российского государственного аграрного заочного университета, а также в работу Центра гемостазиопатий Курской областной станции переливания крови.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на: международной научно-практической конференции «Теоретические и прикладные проблемы социально-правовых, медико-биологических, технико-экономических сфер жизни общества» (Курск, 2006, 2007, 2008, 2009); 19 Международной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2007); первом международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства» посвященного 200-летию высшего ветеринарного образования и Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины (Санкт-Петербург, 2008); международном симпозиуме, посвященном 80-летию академика РАМН Н.А. Агаджаняна «Адаптационная физиология и качество жизни: проблемы традиционной и инновационной медицины» (Москва, 2008); международном научно-практическом симпозиуме «Адаптивные реакции в социальной сфере, биологии и медицине» (Курск, 2008); международной конференции «Медико-социальная и биологическая адаптация» (Сухум, 2009); международной научно-практической конференции «Теоретические и прикладные проблемы современной науки и образования» (Курск, 2010); международной научно-практической конференции «Физиологические механизмы становления и поддержания функций организма» (Сухум, 2010); международной научно-практической конференции «Физиологические механизмы живых систем» (Сухум, 2010); международной научно-практической конференции «Механизмы адаптивных реакций» (Сухум, 2010), III Съезде фармакологов и токсикологов России «Актуальные проблемы ветеринарной фармакологии, токсикологии и фармации» (Санкт-Петербург, 2011); международной научно-практической конференции «Физиологические механизмы адаптации живых систем» (Сухум, 2011); заседании Совета зооинженерного факультета Калужского филиала Российского государственного аграрного университета - МСХА им. К.А. Тимирязева 24.05.2011г. (протокол №8).

1.1 Научные положения, выносимые на защиту

тромбоцит пищеварение цитоархитектоника эритроцитарный

1. Для здоровых телят в течение раннего онтогенеза характерно невыраженное нарастание цитоархитектонических изменений и способности к агрегации эритроцитов на фоне некоторого увеличения в них содержания холестерина и соотношения ХС/ОФЛ.

2. В течение первого года жизни у здоровых телят регистрируется небольшое постепенное повышение тромбоцитарной активности за счет роста в их мембранах уровня ХС и градиента ХС/ОФЛ.

3. Для новорожденных телят, имеющих дефицит железа или функциональные нарушения пищеварения, характерно выраженное ухудшение микроциркуляторных свойств красных кровяных телец и кровяных пластинок, развивающееся на фоне высокой интенсивности в них ПОЛ, ослабления их антиоксидантной защищенности и резкого увеличения в них градиента ХС/ОФЛ.

4. У новорожденных телят возможно нормализовать микрореологические свойства эритроцитов и тромбоцитов, интенсивность в них ПОЛ, их антиоксидантную защиту и липидный состав при ФНП путем одновременного применения полизона и крезацина, а при дефиците железа с помощью их сочетания с железосодержащим средством (ферроглюкин).

Публикации. По теме диссертации имеется 64 работы, в т.ч. 20 статей в журналах, вошедших в перечень, рекомендованный ВАКом РФ, получено 9 патентов РФ на изобретение, 1 патент РФ на полезную модель, 5 патентов на полезную модель в Германии.

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 376 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав (обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований и обсуждение), выводов, практических рекомендаций, списка литературы из 387 источников (281 отечественных и 106 зарубежных авторов). Работа иллюстрирована 198 таблицами, 38 рисунками и одной схемой.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и методы исследований

Работа над диссертацией проводилась в период с 2004г. по 2011г., включительно, при прикреплении к Калужскому филиалу Российского государственного аграрного университета - МСХА им. К.А. Тимирязева.

Исследования, положенные в основу диссертационной работы, проведены на телятах симментальской и черно-пестрой пород хозяйств Калужской, Курской и Орловской областей. Под наблюдение взято 130 здоровых, физиологически зрелых телят, в т.ч. 27 новорожденных телят, 33 теленка молочного питания, 34 теленка молочно-растительного питания и 36 телят раннеонтогенетической фазы растительного питания, полученных от находившихся на сбалансированном питании [А.П. Калашников, 2003] здоровых коров 1-3 отела при условии нормальной беременности и нормальных результатах обследования, согласно примененных в проведенной работе методов. Здоровые телята осматривались и обследовались в течение фазы молозивного питания ежесуточно - 10 раз. В течение фазы молочного питания телята осматривались и обследовались 5 раз - на 11-е, 15-е, 20-е, 25-е и 30-е сутки жизни. На протяжении фазы молочно-растительного питания животные проходили пятикратный осмотр и обследование на 31-е, 45-е, 60-е, 75-е и 90-е сутки жизни. В фазу растительного питания раннего онтогенеза телята подвергались осмотру и обследованию 4 раза - на 91-е сутки, в возрасте 6 мес., 9 мес. и 12 мес. жизни.

В качестве факторов, нарушающих гомеостаз у телят, в фазу новорожденности в проведенном исследовании избраны дефицит железа с признаками врожденной железодефицитной анемии (225 голов) и функциональные нарушения пищеварения неинфекционной природы (398 голов), проявляющиеся уже на 1-е сутки жизни. Все новорожденных телят с дефицитом железа или функциональными нарушениями пищеварения имели массу тела при рождении не менее 32 кг, продольный размер тела теленка не менее 70 см, наличие не менее 4 резцов и не менее 12 коренных зубов, отпадение пуповины у них происходило не позднее, чем через 10 суток жизни.

Все наблюдаемые новорожденные телята содержались в стандартных условиях телятника. Развитие дефицита железа у новорожденных телят, находившихся под наблюдением, было связано с неполноценностью пищевого рациона стельных коров, которым во время беременности скармливалось недостаточное количество сена, комбикормов, минеральных добавок при неоправданном увеличении в их рационе силоса плохого качества и соломы. Кроме того, стельные коровы, от которых в последующем были получены новорожденные телята с дефицитом железа и ФНП, ставились на сухостой на 2-3 декады позже положенного срока. Кроме того, развитие ФНП у новорожденных телят в проведенном исследовании связано с выпаиванием молозива в избыточном количестве и из ведра.

При наличии у новорожденного теленка признаков дефицита железа или функциональных нарушений пищеварения не позднее, чем через 3 часа после их обнаружения, определялись все учитываемые показатели. Повторный их полный учет у телят с ФНП производился в конце назначаемого 10 суточного применения одной из испытанных разновидностей коррекционных влияний, а у телят с дефицитом железа в конце коррекции и через 5 суток после ее окончания.

Все проведенное исследование представлено на схеме 1.

Все обследованные здоровые телята были подразделены на 4 группы животных, соответствующие 4 фазам раннего онтогенеза и на 12 групп новорожденных телят, имеющих отклонения от гомеостаза.

Деление на группы телят с отклонениями от гомеостаза было произведено с учетом имеющегося нарушения в организме и примененного способа его коррекции. Так, новорожденные телята с дефицитом железа были разделены на 4 группы, животные с функциональными нарушениями пищеварения были подразделены на 8 групп. Количество новорожденных телят с дефицитом железа в группах составляло 52(23,1%), 61(27,1%), 54 (24,0%) и 58 (25,8%), соответственно, с функциональными нарушениями пищеварения в группах составило соответственно 42(10,6%), 56(14,1%), 44(11,0%), 63(15,8%), 51(12,8%), 48(12,1%), 45(11,3%) и 49(12,3%).

Коррекция дефицита железа в первой группе телят (52 животных) с отклонениями от гомеостаза осуществлялась ферроглюкином по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом между инъекциями 10 суток.

Во второй группе (61 теленок) животных с отклонениями от гомеостаза (дефицит железа) с целью коррекции признаков анемии назначался ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток и полизон 5 мг/кг при включении его в схему выпаивания утром на 10 суток.

В третьей группе с отклонениями от гомеостаза (54 животных с дефицитом железа) коррекция проводилась ферроглюкином 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток и крезацином 3 мг/кг при включении его в схему выпаивания.

В четвертой группе новорожденных телят с отклонениями от гомеостаза (58 животных с дефицитом железа) коррекция проводилась ферроглюкином 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток, полизоном 5 мг/кг при включении его в схему выпаивания утром на 10 суток и крезацином 3 мг/кг при включении его в схему выпаивания (схема опытов).

В пятой группе новорожденных телят с отклонениями от гомеостаза (функциональные нарушения пищеварения) коррекцию состояния производили с помощью традиционного для данных хозяйств подхода с наблюдением в течение 10 суток. Коррекция включала в себя голодание на 10-12 часов с последующим назначением небольших доз молозива (1/4 от обычного количества) 5-6 раз в сутки с постепенным доведением объема молозива до нормы. За 15 мин до выпаивания телятам давали 50,0 мл натурального желудочного сока, разбавленного 50,0 мл теплой воды.

Шестую группу животных с отклонениями от гомеостаза составили телята с ФНП, которым с целью коррекции их состояния назначался фоспренил 0,8 мл/кг внутримышечно в течение 10 суток.

Седьмую группу новорожденных телят с отклонениями от гомеостаза составили животные с ФНП, которым в схему выпаивания вечером включали в виде водной взвеси гидроалюмосиликатный сорбент - «Экос» (производство Белгородского государственного университета) 150 мг/кг живой массы в течение 10 суток на ночь с целью снижения сорбции питательных веществ из рациона.

СХЕМА ПРОВЕДЕННЫХ ОПЫТОВ

Объект изучения

телята черно-пестрой и симментальской породы n=753
здоровые раннего онтогенеза, n=130	новорожденные с отклонениями от гомеостаза, n=623

Научно-хозяйственные опыты

фаза новорожденности, n=27

дефицит железа, n=225

функциональные нарушения пищеварения, n=398

коррекция отклонений от гомеостаза

фаза молочного питания, n=33

Ферроглюкин, n= 52

Ферроглюкин+ Полизон, n= 61

Ферроглюкин+ Крезацин, n= 54

Ферроглюкин+ полизон +крезацин, n= 58

Традиционная коррекция, n= 42

Фоспренил, n= 56

Экос, n= 44

Полизон, n=, 63

Крезацин, n= 51

Экос+фосфопаг, n= 48

Экос + фосфопаг + глюконат кальция, n= 45

Полизон + крезацин, n= 49

фаза молочно-растительного питании, n=34

фаза растительного питания, n=36

Методы исследования

общие физиологические	гематологические	биохимические	математические

Внедрение результатов научных исследований в

учебный процесс	лабораторно-диагностическую деятельность	производственную деятельность
РГАЗУ	Калужский филиал РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева	Костромс-кая ГСХА	Центр гемостазиопатий Курской областной станции переливания крови	СПК Калужской, Курской, Орловской областей

Восьмую группу животных с отклонениями от гомеостаза составили новорожденные телята с ФНП, которым с целью коррекции назначался полизон по 5 мг/кг при включении его в схему выпаивания утром на 10 суток.

В девятой группе новорожденных телят с отклонениями от гомеостаза (ФНП) коррекцию проводили крезацином 3 мг/кг утром в течение 10 суток, включая его в схему выпаивания.

В десятой группе новорожденных телят с отклонениями от гомеостаза (ФНП) в течение 10 суток применялось сочетание «Экоса» и «Фосфопага» с распределением их в течение суток следующим образом: 0,01% 100,0 «Фосфопага» в утренние часы, 150 мг/кг «Экоса» на ночь для исключения сорбции «Экосом» «Фосфопага».

В одиннадцатой группе новорожденных телят с отклонениями от гомеостаза (ФНП) в течение 10 суток было применено сочетание «Фосфопага», глюконата кальция и «Экоса» с распределением их с течение суток: утром 0,01% 100,0 мл «Фосфопага», в обед 10% 10,0 мл глюконат кальция и 150 мг/кг «Экос» вечером.

Двенадцатую группу составили новорожденные телята, имевшие отклонения от гомеостаза в виде ФНП, у которых применялся полизон по 5 мг/кг и крезацин по 3 мг/кг утром при включении их в схему выпаивания на 10 суток.

В качестве группы контроля при оценке динамики состояния телят с отклонениями от гомеостаза использованы обследованные в работе 27 здоровых новорожденных телят.

Для достижения поставленной в работе цели и решения намеченных задач применены следующие методы исследования.

Исследование включало определение общефизиологических показателей -температуры тела, частоты сердечных сокращений и частоты дыхания.

Взятие крови для запланированных исследований у телят осуществлялось в утренние часы из яремной вены.

Проводимый у животных морфо-биологический анализ крови состоял из определения количества эритроцитов, сидероцитов, ретикулоцитов и лейкоцитов [И.П. Битюков, В.Ф. Лысов и др, 1990], гемоглобина [И.П. Битюков, В.Ф. Лысов и др, 1990], гематокритной величины [И. Тодоров, 1963], а также содержания в крови общего белка [В.Г. Колб, В.С. Камышников, 1982] и концентрации сывороточного железа [В.С. Камышников, 2000].

Интенсивность процессов перекисного окисления липидов в жидкой части крови оценивали по содержанию в ней ТБК-активных продуктов при помощи набора „Агат-Мед”и по количественному содержанию ацилгидроперекисей [В.Б. Гаврилов, М.И. Мишкорудная, 1983]. Велась оценка антиокислительной активности плазмы крови [И.А.Волчегорский и др., 2000].

Для оценки активности биохимических процессов в эритроцитах и тромбоцитах производились их отмытие и ресуспендирование [Г.Н.Ястребов, 1985]. Активность ПОЛ, протекающего внутри эритроцитов и тромбоцитов, регистрировали по уровню базального МДА в реакции восстановления тиобарбитуровой кислоты в отмытых и ресуспендированных красных кровяных тельцах и кровяных пластинках по принципу метода Shmith J.B. еt аl. (1976) в модификации Кубатиева, А.А., Андреева С.В. (1979) и по количеству в них ацилгидроперекисей [В.Б. Гаврилов, М.И. Мишкорудная, 1983]. В отмытых и ресуспендированных эритроцитах и тромбоцитах энзиматическим колориметрическим методом с помощью набора фирмы „Витал Диагностикум” количественно было определено содержание холестерина, а по уровню в их мембранах фосфора было оценено количество общих фосфолипидов [В.Г. Колб, В.С. Камышников, 1982] с вычислением на основе полученных данных соотношения ХС/ОФЛ. Функциональная активность внутриэритроцитарных и внутритромбоцитарных ферментов антиокисления определялась для каталазы и супероксиддисмутазы [С.Чевари, Т.Андял и др., 1991].

Тромбоцитарная активность выявлялась с учетом количественного содержания кровяных пластинок в крови в камере Горяева по их способности к агрегации (АТ) визуальным микрометодом по А.С.Шитиковой (1999) с использованием в качестве индукторов агрегации АДФ (0,5Ч10-4М), коллагена (разведение 1:2 основной суспензии), тромбина (0,125 ед/мл) и ристомицина (0,8 мг/мл) (НПО „Ренам”).

Состояние внутрисосудистой активности тромбоцитов оценивали по методу Шитиковой А.С. и соавт. (1997) при помощи фазового контраста.

Оценка микрореологических свойств эритроцитов велась путем определения их цитоархитектоники с применением световой фазовоконтрастной микроскопии. Для исследования поверхностной геометрии эритроцитов кровь фиксировали в 1% растворе глутарового альдегида («Flukа», Switzеrlаnd) на среде 199 (рН 7,4) при температуре 4єС в течение одних суток, после чего готовился препарат «раздавленная капля». Подсчет клеток производился в процентах на 200 эритроцитов. Регистрируемые эритроциты типировались согласно классификации предложенной Г.И. Козинцем с соавт. [Козинец Г.И. и др., 1977], подразделяющей их на десять классов (дискоциты, дискоциты с одним выростом, дискоциты с гребнем, дискоциты с множественными выростами, эритроциты в виде тутовой ягоды, куполообразные эритроциты (стоматоциты), сфероциты с гладкой поверхностью, сфероциты с шипиками на поверхности, эритроциты в виде «спущенного мяча», дегенеративные формы эритроцитов.

Первые пять классов эритроцитов (с признаками эхиноцитарной трансформации) считались обратимо деформированными в виду их способности спонтанно восстанавливать форму. Остальные классы эритроцитов относили к группе необратимо деформированных или предгемолитических форм [Козинец Г.И. и др., 1984].

С учетом соотношения обратимо и необратимо измененных форм эритроцитов рассчитывали ряд индексов:

Индекс трансформации (ИТ):

ИТ = (ОД + НД) / Д, где

Д - процент дискоцитов; ОД - процент обратимо деформированных эритроцитов;

НД - процент необратимо деформированных эритроцитов.

Индекс обратимой трансформации (ИОТ) рассчитывали:

ИОТ = ОД / Д,

Индекс необратимой трансформации (ИНОТ):

ИНОТ = НД / Д,

Индекс обратимости (ИО):

ИО = ОД / НД

Агрегационную активность эритроцитов регистрировали с помощью светового микроскопа путем подсчета в камере Горяева количества агрегатов, агрегированных и неагрегированных эритроцитов во взвеси отмытых эритроцитов в плазме крови с вычислением среднего размера агрегата (СРА):

СРА = СЭА / КА, где

СЭА - сумма всех эритроцитов в агрегате; КА - количество агрегатов.

Показатель агрегации (ПА) рассчитывали:

ПА = (СРА х КА + КСЭ) / (КА + КСЭ), где

КСЭ - количество свободных эритроцитов.

Процент неагрегированных эритроцитов (ПНА) определяли:

ПНА = (КСЭ х 100) / (СРА х КА + КСЭ).

Математическая обработка полученных в работе научных результатов вели с помощью критерия (t) Стьюдента, корреляционного и системного многофакторного анализа [А. Бредерфорд Хилл, 1958; М.В.Углова и др., 1982].

2.2 Динамика состояния здоровых телят в раннем онтогенезе

2.2.1 Общефизиологические и общехимические показатели

Результаты исследований показали, что учитываемые общие физиологические показатели у обследованных здоровых телят в течение раннего онтогенеза испытывали закономерную физиологическую динамику.

У наблюдаемых животных в течение первого года жизни отмечалось достоверное нарастание уровня эритроцитов на 15,5% и гемоглобина на 12,8% при незначимых колебаниях в крови уровня сидероцитов и постоянстве содержания в сыворотке железа. В крови здоровых телят в течение всего раннего онтогенеза достоверно повышалось содержание ретикулоцитов на 7,4% и общего белка на 9,0%, сопровождаясь тенденцией к увеличению уровня лейкоцитов и постоянством гематокритной величины.

В течение раннего онтогенеза в крови телят отмечено постепенное понижение АГП на 17,8% и ТБК-активных соединений 9,5%.

Найденное ослабление интенсивности пероксидации стало возможным в результате достоверного усиления в течение первых 12 месяцев жизни активности антиоксидантной защиты организма животных. При этом, уровень микровезикуляции у них за период наблюдения понизился на 6,0%.

Таким образом, у здоровых телят в течение первого года жизни выявляется физиологическая динамика всех учитываемых общих показателей их состояния.

2.2.2 Биохимические показатели эритроцитов и тромбоцитов

У здоровых телят в раннем онтогенезе выявляется достоверная динамика липидного состава эритроцитов. Так, начиная с фазы молочного питания содержание ХС в красных кровяных тельцах испытывало достоверный рост до 1,060,003 мкмоль/1012эр. при повышении ОФЛ до 0,740,005 мкмоль/1012эр., обеспечивая, тем самым, за первый год жизни увеличение градиента ХС/ОФЛ в их мембранах до 1,440,005.

У телят в течение всех 4-х фаз раннего онтогенеза достоверно снижается уровень внутриэритроцитарного ПОЛ в результате усиления от фазы к фазе антиоксидантной защиты красных кровяных телец. Так, в фазу молочного питания у телят активность каталазы эритроцитов составляла 10710,0±14,6 МЕ/1012эр., СОД - 1818,0±5,77 МЕ/1012эр., испытывая к году жизни достоверное повышение, составляя в фазу растительного питания раннего онтогенеза 10990,0±12,6 МЕ/1012эр. для каталазы и 1970,0±5,55 МЕ/1012эр. для СОД. В результате найденной динамики антиоксидантной защиты эритроцитов у телят первого года жизни отмечено постепенное снижение АГП до 2,74±0,07 Д233/1012эр., МДА до 0,87±0,05 нмоль/1012 эр.

Таким образом, у здоровых телят до 12 мес. жизни в эритроцитах постепенное повышение соотношения ХС/ОФЛ сопровождается неуклонным ослаблением интенсивности ПОЛ вследствие нарастания активности в них ферментов антиокисления.

В составе мембран кровяных пластинок у молодняка крупного рогатого скота начиная с фазы молочно-растительного питания и до конца 12 мес. жизни количество холестерина возрастало на 12,5% при одновременном повышении с фазы молочного питания ОФЛ до конца наблюдения на 8,5%, обеспечив рост соотношения ХС/ОФЛ на 3,2%.

Начиная уже с фазы молочного питания, концентрация АГП в тромбоцитах здоровых телят начинает уменьшаться до уровня 2,84±0,10 Д233/109тр. при сохранении его содержания в следующую фазу индивидуального развития, дополнительно снижаясь на растительном питании до уровня 2,66±0,09 Д233/109тр. При этом, содержание МДА в тромбоцитах в течение всего раннего онтогенеза у телят плавно понижалось на 40,9%, достигая 0,66±0,06 нмоль/109тр. Ослабление выраженности ПОЛ в тромбоцитах здоровых телят в течение раннего онтогенеза обуславливалось нарастанием их антиоксидантной защищенности, о котором судили по увеличению активности каталазы и супероксиддисмутазы. Их уровни в кровяных пластинках у животных нарастали за первый год жизни на 4,6% и 13,4%, достигая 10045,0±10,30 МЕ/109тр. и 1875,0±1,78 МЕ/109тр., соответственно.

Таким образом, в раннем онтогенезе здоровых телят в мембранах тромбоцитов, отмечается нарастание соотношения ХС/ОФЛ, сопровождающиеся усилением актиоксидантной защищенности кровяных пластинок и понижением в них уровня ПОЛ.

2.2.3 Микрореологические свойства эритроцитов и тромбоцитов

В крови здоровых телят в течение первого года жизни отмечается постепенное снижение уровня эритроцитов дискоидной формы, достигающее уровня достоверности в фазу молочно-растительного питания.

Таблица 1. Цитоархитектоника эритроцитов у телят раннего онтогенеза

Учитываемые показатели	Ранний онтогенез, n=130, M±m
	фаза новорожденности, n=27	фаза молочного питания, n=33	фаза молочно-растительного питания, n=34	фаза растительного питания, n=36
Дискоциты, %	86,5±0,16	86,2±0,19	83,0±0,27 p<0,01	82,7±0,20
Обратимо измененные эритроциты, %	9,7±0,14	10,3±0,09 p<0,05	12,4±0,11 p<0,01	13,0±0,12 p<0,05
Необратимо измененные эритроциты, %	3,8±0,10	3,7±0,07	4,6±0,05 p<0,01	4,3±0,03
Индекс трансформации	0,16±0,008	0,16±0,006	0,20±0,007 p<0,01	0,21±0,006 p<0,05
Индекс обратимой трансформации	0,11±0,005	0,12±0,006	0,14±0,005 p<0,05	0,16±0,003 p<0,05
Индекс необратимой трансформации	0,04±0,003	0,04±0,005	0,05±0,006	0,05±0,004
Индекс обратимости	2,59±0,012	2,79±0,007 p<0,05	2,69±0,005 p<0,05	3,02±0,005 p<0,05

Условные обозначения: р - достоверность динамики учитываемых показателей в раннем онтогенезе. В последующих таблицах обозначения сходные.

Это сопровождается увеличением в их крови суммарного количества обратимо и необратимо измененных форм эритроцитов на 34,0% и 13,1%, достигая в фазе растительного питания 13,0±0,12% и 4,3±0,03%. У обследованных животных отмечено постепенное повышение к году жизни ИТ (0,21±0,006) при нарастании ИОТ до 0,16±0,003 и невыраженном увеличении ИНОТ и ИО (табл.1).

Оценка показателей агрегации эритроцитов в раннем онтогенезе здоровых телят выявила ее постепенное повышение (табл. 2). У животных отмечено общее нарастание уровня суммарной вовлеченности эритроцитов в агрегаты, их количества в кровотоке при тенденции к повышению СРА (до 4,7±0,03 клеток) на фоне снижении содержания в крови свободно перемещающихся эритроцитов.

Таким образом, у телят в течение раннего онтогенеза отмечается небольшое усиление цитоархитектонических изменений мембран эритроцитов с повышением их агрегации.

Оценка тромбоцитарной активности у здоровых телят в течение раннего онтогенеза выявила постепенное повышение выраженности оцениваемых функций кровяных пластинок при сохранении содержания количества тромбоцитов в кровотоке животных в границах нормы.

Таблица 2. Показатели агрегации эритроцитов у телят в раннем онтогенезе

Учитываемые показатели	Ранний онтогенез, n=130, M±m
	фаза новорожден-ности, n=27	фаза молочного питания, n=33	фаза молочно-растительного питания, n=34	фаза растительного питания, n=36
Сумма всех эритроцитов в агрегате	36,3±0,07	36,6±0,09	39,7±0,09 p<0,05	39,8±0,06
Количество агрегатов	7,8±0,06	8,0±0,05	8,3±0,06 p<0,05	8,6±0,04
Количество свободных эритроцитов	261,3±0,19	257,4±0,14	251,7±0,13 p<0,05	245,3±0,07 p<0,05
Показатель агрегации	1,10±0,14	1,11±0,11	1,12±0,13	1,12±0,11
Процент не агрегированных эритроцитов	87,9±0,18	87,5±0,12	86,4±0,12	86,0±0,06
Средний размер агрегата, клеток	4,6±0,05	4,6±0,03	4,7±0,04	4,7±0,03

Исследование агрегации тромбоцитов телят под действием ряда индукторов позволило установить достоверное повышение чувствительности к внешним стимулам в течение всего раннего онтогенеза (табл.3).

У молодняка крупного рогатого скота в первой фазе онтогенеза время развития АТ под влиянием коллагена составляло 31,1±0,07с., в последующем постепенно укорачиваясь до 25,7±0,07с к концу наблюдения. Аналогичная динамика АТ у здоровых животных отмечена под влиянием АДФ, ристомицина и тромбина.

Научные сведения, полученные при исследовании АТ у телят в течение раннего онтогенеза, были подтверждены результатами оценки внутрисосудистой активности тромбоцитов.

Уровень дискоцитов в крови у здоровых новорожденных телят составил 78,5±0,08%, снижаясь к году жизни до 73,5±0,08%. При этом, общее количество активных форм тромбоцитов на протяжении раннего онтогенеза суммарно увеличивалось на 23,7%, составляя к году жизни 26,6±0,05%.

Таблица 3. Функциональная активность тромбоцитов у здоровых телят в раннем онтогенезе

Учитываемые показатели	Ранний онтогенез, n=130, M±m
	фаза новорожденности, n=27	фаза молочного питания, n=33	фаза молочно-растительного питания, n=34	фаза растительного питания, n=36
АТ АДФ, с.	40,1±0,10	38,9±0,09 p<0,05	35,9±0,09 p<0,05	35,4±0,11
АТ с коллагеном, с.	31,1±0,07	28,7±0,09 p<0,05	26,2±0,09 p<0,05	25,7±0,07 p<0,05
АТ с тромбином, с.	54,4±0,08	53,2±0,10 p<0,05	50,7±0,08 p<0,05	49,6±0,07 p<0,05
АТ с ристомицином, с.	47,7±0,11	46,9±0,14 p<0,05	43,6±0,13 p<0,05	42,9±0,13 p<0,05
Количество дискоцитов, %	78,5±0,08	77,8±0,06 p<0,05	74,0±0,08 p<0,05	73,5±0,08 p<0,05
Сумма активных форм, %	21,5±0,13	22,2±0,04 p<0,05	26,0±0,06 p<0,05	26,6±0,05 p<0,05
Количество малых агрегатов по 2-3 тромбоцита, на 100 свободно лежащих тромбоцитов	3,6±0,05	4,4±0,06 p<0,05	5,4±0,05 p<0,05	6,2±0,05 p<0,05
Количество средних и больших агрегатов, 4 и более тромбоцита, на 100 свободно лежащих тромб.	0,12±0,05	0,14±0,05 p<0,05	0,20±0,03 p<0,01	0,22±0,05 p<0,01

В кровотоке животных первого года жизни количество свободно циркулирующих малых и больших агрегатов тромбоцитов повышалось на 72,2% и 83,3%, соответственно, составляя в фазу растительного питания 6,2±0,05 и 0,22±0,05 на 100 свободнолежащих тромбоцитов.

Таким образом, у здоровых телят первого года жизни отмечается небольшое постепенное повышение активности кровяных пластинок, обеспечивающее необходимый уровень функционирования гемостаза при оптимальности их реологических свойств в системе микроциркуляции.

Для комплексной оценки динамики микрореологических свойств эритроцитов и тромбоцитов у здоровых телят в раннем онтогенезе все полученные их параметры обработаны с помощью системного многофакторного анализа

В реологическом потенциале крови здоровых телят на протяжении раннего онтогенеза наиболее весомыми оказались показатели агрегации эритроцитов и тромбоцитов (Рi от 685,2 до 426,3). Достаточно высокие коэффициенты влияния в РПК принадлежали активности ПОЛ в плазме, тромбоцитах и эритроцитах и уровням их антиоксидантной защиты. Остальные учитываемые параметры эритроцитов и тромбоцитов были менее весомы. Значимость их существенно не различалась между собой, играя в РПК менее важную роль.

Взвешенная средняя реологического потенциала крови, характеризующая динамику ее жидкостных свойств у здоровых телят в течение раннего онтогенеза составила = 0,0051.

Таким образом, для здоровых телят в раннем онтогенезе характерна низкая положительная величина РПК, что указывает на отлаженность механизмов обеспечения микрореологических свойств эритроцитов и тромбоцитов, поддерживающих гомеостаз организма в процессе активного роста теленка на оптимальном уровне, несмотря на меняющиеся условия внешней среды.

2.3 Функциональное состояние новорожденных телят с признаками дефицита железа

2.3.1 Общефизиологические и общебиохимические показатели

Оцениваемые перед включением в исследование у каждого теленка с дефицитом железа общефизиологические показатели (температура, частота сердечных сокращений, частота дыхательных движений, гематокрит и общий белок) оказались в пределах нормы.

У телят с признаками анемии отмечалось нарушение эритропоэза на фоне снижения уровня содержания железа в их крови в 2,5 раза при уменьшении в ней гемоглобина и эритроцитов.

У новорожденных телят с дефицитом железа число сидероцитов было снижено в 5,4 раза, полностью исчезая у некоторых животных из периферической крови. Уровень ретикулоцитов при этом был снижен в 2,4 раза, что вместе со снижением количества эритроцитов указывает на неэффективность эритропоэза.

Таким образом, у включенных в исследование новорожденных телят отмечался изолированный дефицит железа с признаками анемии.

У обследуемых животных обнаружена достоверная активация ПОЛ плазмы. Уровень ТБК-активных продуктов в жидкой части крови у них был в 1,48 раза выше, чем в группе контроля. Содержание АГП в плазме также превышало уровень контроля в 2,07 раза. Усиление пероксидации стало возможным в результате ослабления антиоксидантной защиты организма - антиокислительный потенциал плазмы у новорожденных телят с дефицитом железа достигали уровня 21,0±0,19% (у здоровых животных - 30,5±0,14%). При этом, у этих телят интенсивность микровезикуляции оказалась повышенной на 31,7%.

Таким образом, для новорожденных телят с дефицитом железа характерно выраженное ослабление антиоксидантной защиты плазмы, ведущее к нарастанию в ней ПОЛ и микровезикуляции.

2.3.2 Биохимические показатели эритроцитов и тромбоцитов

При исследовании липидного состава эритроцитов новорожденных телят с дефицитом железа выявлены статистически значимые его изменения.

Установлено, что в составе мембран эритроцитов новорожденных телят с дефицитом железа содержание холестерина повышено в 1,36 раза и ОФЛ снижено в 1,68 раза (р<0,01). Изменения уровней ХС и ОФЛ в мембранных структурах эритроцитов животных обуславливали увеличение в них соотношения ХС/ОФЛ (3,09±0,005).

Концентрация первичных продуктов ПОЛ - АГП в эритроцитах животных с признаками анемии оказалась повышенной по сравнению с таковой у здоровых телят, свидетельствуя об активации в них начальных этапов ПОЛ. Уровень МДА в тромбоцитах - конечного продукта ПОЛ также был увеличен на 52,3%.

Нарастание процессов ПОЛ в эритроцитах новорожденных телят с дефицитом железа было обусловлено снижением их антиоксидантной защиты и, в первую очередь, каталазы и супероксиддисмутазы, уровни которых в красных кровяных тельцах, находившихся под наблюдением телят, оказались снижены в 1,44 раза и 1,15 раза, соответственно.

Таким образом, в мембранах эритроцитов новорожденных телят с дефицитом железа отмечено увеличение содержания ХС при снижении уровня ОФЛ, сопровождающееся ослаблением их антиоксидантной защиты и активацией ПОЛ.

При оценке липидного состава тромбоцитов новорожденных телят с дефицитом железа выявлена его статистически значимая динамика.

Установлено, что в составе мембран тромбоцитов новорожденных животных, имеющих врожденный дефицит железа содержание холестерина было повышено в 1,28 раза при снижении ОФЛ в 1,52 раза (р<0,01).

Динамика уровней ХС и ОФЛ в мембранных структурах кровяных пластинок животных характеризовались увеличением в них соотношения ХС/ОФЛ (3,02±0,21), создавая условия для усиления ПОЛ в кровяных пластинках, в конечном итоге, повышая их активность.

Концентрация первичных продуктов ПОЛ - АГП в тромбоцитах животных с признаками анемии оказалась повышенной по сравнению с таковой у здоровых телят на 19,2%, свидетельствуя об активации в них начальных этапов ПОЛ. Уровень базального МДА в тромбоцитах - конечного продукта ПОЛ также был увеличен на 46,2%, косвенно указывая на активацию обмена арахидоновой кислоты и повышении образования тромбоксана.

Усиление ПОЛ в тромбоцитах новорожденных телят с дефицитом железа было обусловлено снижением их антиоксидантной защиты и, в первую очередь, каталазы и супероксиддисмутазы. Так, уровень каталазы в кровяных пластинках оказался снижен в 1,42 раза по сравнению с контролем. Активность СОД тромбоцитов у них также была ослаблена в 1,35 раза (р<0,01).

Таким образом, в мембранах тромбоцитов новорожденных телят с дефицитом железа увеличивается содержание ХС, снижается уровень ОФЛ при ослаблении их антиоксидантной защиты и активации ПОЛ.

2.3.3 Микрореологические показатели эритроцитов и тромбоцитов

У новорожденных телят с дефицитом железа отмечено выраженное снижение в крови уровня эритроцитов дискоидной формы. Это сопровождалось достоверным повышением суммарного содержания в крови количества обратимо и необратимо измененных форм эритроцитов на 52,6% и 2,89 раза, соответственно.

У обследованных животных зарегистрировано повышение ИТ в 2,1 раза, составляя 0,34±0,011. Значительное увеличение у телят с признаками анемии содержания в крови обратимо измененных эритроцитов определяло у них высокий уровень ИОТ (0,20±0,005). Повышение количества необратимо измененных форм эритроцитов обеспечивало в крови у новорожденных телят с дефицитом железа нарастание ИНОТ в 3,7 раза (табл. 4).

Таблица 4. Цитоархитектоника эритроцитов у новорожденных телят с дефицитом железа

Учитываемые показатели	Дефицит железа, n = 225, М ± m	Контроль, n=27, Мm
Дискоциты, %	74,3±0,14	86,5±0,16 р1<0,01
Обратимо изм. эритроциты, %	14,8±0,19	9,7±0,14 р1<0,01
Необратимо изм. эритроциты, %	11,0±0,07	3,8±0,10 р1<0,01
Индекс трансформации	0,34±0,011	0,16±0,008 р1<0,01
Индекс обратимой трансформации	0,20±0,005	0,11±0,005 р1<0,01
Индекс необратимой трансформации	0,15±0,008	0,04±0,003 р1<0,01
Индекс обратимости	1,35±0,004	2,59±0,012 р1<0,01

Условные обозначения: р1 - достоверность различий контроля и исходного состояния телят с отклонением от гомеостаза. В последующих таблицах обозначения сходные.

Сниженный в 1,92 раза ИО у телят с дефицитом железа обуславливался достоверным повышением в их кровотоке содержания обратимо деформированных эритроцитов на фоне высокого удельного веса необратимо измененных их форм.

У животных с дефицитом железа выявлено усиление агрегации эритроцитов (табл. 5). Так, у этих телят отмечено выраженное повышение уровня суммарного вовлечения эритроцитов в агрегаты (на 35,8%) и количества этих агрегатов в кровотоке (на 21,8%) при понижении на 13,7% содержания в крови свободно перемещающихся эритроцитов.

Таблица 5. Агрегации эритроцитов у новорожденных телят с дефицитом железа

Учитываемые показатели	Дефицит железа, n = 225, М ± m	Контроль, n=27, Мm
Сумма всех эритроцитов в агрегате	49,3±0,15	36,3±0,07 р1<0,01
Количество агрегатов	9,5±0,06	7,8±0,06 р1<0,01
Количество свободных эритроцитов	229,8±0,15	261,3±0,19 р1<0,05
Показатель агрегации	1,18±0,17	1,10±0,14 р1<0,05
Процент не агрегированных эритроцитов	82,3±0,14	87,9±0,18 р1<0,05
Средний размер агрегата, клеток	5,2 ±0,09	4,6±0,05 р1<0,01

У животных, имевших при рождении дефицит железа, отмечено достоверное увеличение СРА, достигающее уровня 5,2±0,09 клеток.

Кроме того, у этих телят найдено достоверное повышение ПА до 1,18±0,17 при понижении ПНА.

Таким образом, у новорожденных телят с дефицитом железа, отмечается достоверное ухудшение реологических свойств эритроцитов по всем учитываемым показателям.

Оценка функциональных свойств кровяных пластинок у телят с дефицитом железа выявила их активацию на фоне стабильности содержания в крови тромбоцитов.

Уровень дискоцитов в крови новорожденных телят с дефицитом железа оказался ниже контрольных значений в 1,46 раза (табл.6). Сумма активных форм тромбоцитов у них превышала контроль в 2,1 раза. Малых и больших агрегатов в крови животных содержалось 14,4±0,03 и 4,45±0,03, соответственно, причем количество тромбоцитов в агрегатах у них было увеличено в 2,6 раза.

Исследование АТ под действием ряда индукторов выявило высокую чувствительность тромбоцитов анемизированных животных к внешним стимулам и активацию их агрегационной способности (табл.6).

Таблица 6. Функциональная активность тромбоцитов у новорожденных телят с дефицитом железа

Учитываемые показатели	Дефицит железа, n = 225, М ± m	Контроль, n=27, Мm
АТ с АДФ, с.	25,1±0,16	40,1±0,10 р1<0,01
АТ с коллагеном, с.	21,1±0,18	31,1±0,07 р1<0,01
АТ с тромбином, с.	38,9±0,18	54,4±0,08 р1<0,01
АТ с ристомицином, с.	24,3±0,14	47,7±0,11 р1<0,01
Количество дискоцитов, %	53,7±0,07	78,5±0,08 р1<0,01
Сумма активных форм, %	46,3±0,02	21,5±0,13 р1<0,01
Содержание малых агрегатов по 2-3 тромбоцита, на 100 свободно лежащих тромбоцитов	18,4±0,03	3,6±0,05 р1<0,01
Содержание средних и больших агрегатов, 4 и более тромбоцита, на 100 свободно лежащих тромбоцитов	4,45±0,03	0,12±0,05 р1<0,01

У новорожденных телят с признаками дефицита железа отмечалось наибольшее ускорение АТ под влиянием коллагена. Несколько медленнее АТ развивалась у них под влиянием АДФ, ристомицина и тромбина.

Повышение способности кровяных пластинок к агрегации in vivо при анемии сочеталась с усилением АТ in vitrо.

Таким образом, повышение активности кровяных пластинок у новорожденных телят с дефицитом железа способствует усилению ВАТ, увеличивая, тем самым, риск микротром...