Морфофункциональные особенности лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных в постнатальном онтогенезе, при уролитиазе и лимфотропной коррекции

Как и в экстраорганных лимфангионах в структуре капсулы лимфатических узлов мочевого пузыря домашних плотоядных были выделены три слоя: внутренний, представленный слоем эндотелиальных клеток, средний, содержащий в своем составе гладкомышечные и соединительнотканные элементы и наружный, состоящий из соединительнотканных волокон и клеток.

Главным элементом сократительной активности лимфоузлов являются миоциты их капсулы. Миоциты среднего слоя капсулы лимфатических узлов залегают вдоль поверхности капсулы неравномерно. Было отмечено, что наибольшее количество миоцитов содержится в области расположения трабекул капсулы (зона мышечно-соединительнотканных тяжей), причем в этой зоне они формируют длинные пучки, лежат в два-три слоя и ориентированы по направлению трабекул, формируя мышечное кольцо вокруг зоны прилегания лимфатического фолликула. Постепенно миоциты капсулы лимфоузла воронкообразно переходят с нее в трабекулы, где они ориентируются вдоль их оси и залегают в непосредственной близости с коллагеновыми и эластическими волокнами. В зоне прилегания лимфатических фолликулов капсула гораздо тоньше и содержит меньшее количество миоцитов (зона разрежения), чем в области расположения трабекул. Миоциты данной зоны залегают в один-два слоя пучками или одиночно, в различных направлениях.

Отмечено, что все слои капсулы лимфатических узлов мочевого пузыря домашних плотоядных пронизаны пучками тонких эластических волокон, а также коллагеновыми волокнами с хорошо выраженными запасными складками. В глубоких слоях капсулы залегают более толстые эластические волокна. В трабекулах коллагеновые и эластические волокна, также формируют сеть с петлями различной формы и величины и длинниками, ориентированными вдоль продольной оси трабекул. Такое устройство соединительно-тканного каркаса капсулы лимфатических узлов позволяет ей достаточно сильно растягиваться при заполнении лимфой, а при сокращении миоцитов принимать исходную форму. Кроме того, наличие запасных складок на не способных к растяжению коллагеновых волокнах определяет максимальный предел растяжимости капсулы. Необходимо отметить, что на всех препаратах соединительнотканные волокна тесно контактировали с гладкими миоцитами, что дало основание объединить их структурно-функциональный синцитий.

В постнатальном онтогенезе у собак и кошек отмечаются значительные изменения миоархитектоники и структуры соединительнотканного каркаса регионарных лимфатических узлов мочевого пузыря. Так число миоцитов на тотальных препаратах из капсулы лимфатических узлов мочевого пузыря домашних плотоядных в постнатальном онтогенезе увеличивается прямо пропорционально возрасту животных (P?0,001) вплоть до достижения ими физиологической зрелости. Данная закономерность характерна как для зоны мышечно-соединительнотканных тяжей, так и для зоны разрежения. С наступлением старческого возраста отмечается значительное разрастание соединительной ткани в капсуле регионарных лимфатических узлов мочевого пузыря домашних плотоядных, при этом превалирует рост коллагеновых волокон, которые постепенно замещают гладкие миоциты. Все это приводит к значительному утолщению капсулы лимфатических узлов, сдавливанию интерстициальных каналов и паренхимы и соответственно нарушению внутриузлового лимфотока и падению активности лимфоидной ткани.

Следовательно, наиболее активной является капсула регионарных лимфатических узлов мочевого пузыря домашних плотоядных зрелого возраста, что подтверждается также специфической извитой формой ядер ее миоцитов. Кроме того, лимфатические узлы домашних плотоядных зрелого возраста обладают максимальной депонирующей способностью, так как их коллагеновые волокна содержат большее количество запасных складок, а, следовательно, способны сильнее растягиваться. В молодом и старческом возрасте сократительная и депонирующая способность капсулы лимфатических узлов минимальна, в первом случае, в результате ее структурной незрелости, а во втором - в результате инволюционной регрессии мышечных структур и излишней коллагенизации стромы.

3.3 Лимфангионы мочевого пузыря домашних плотоядных в постнатальном онтогенезе

Согласно последним исследованиям, лимфангионом следует считать межклапанный сегмент лимфатического сосуда с гладкими миоцитами в стенке.

Форма лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных варьирует в зависимости от возраста животного, а также вида лимфатического сосуда.

Количество лимфангионов, составляющих лимфатический сосуд напрямую зависит от порядка и вида лимфатического сосуда.

Емкостная функция лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных, количественной характеристикой которой является их объем, изменяется прямо пропорционально порядку лимфатического сосуда и возрасту животного вплоть до достижения ими периода физиологической зрелости (высокая степень достоверности (P?0,001) (рис. 1).

Наиболее интенсивный рост как линейных, так и объемных показателей лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных отмечается в период полового созревания. Самой большой депонирующей функцией обладают экстраорганные лимфангионы мочевого пузыря собак среднего возраста. С наступлением периода выраженных старческих изменений объем лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных снижается в основном за счет уменьшения их калибра.

В стенке лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных миоциты залегают слоями, неравномерно в двух плоскостях и ориентированы спирально по отношению к продольной оси лимфангиона. Продольная и поперечная ориентации миоцитов в лимфангионах мочевого пузыря домашних плотоядных нами обнаружены не были.

Соединительная ткань, является структурным элементом всех трех оболочек лимфангионов, формирует их каркас и находится в тесной структурно-функциональной связи с гладкими миоцитами. Для пучков коллагеновых волокон характерно наличие большого количества «запасных складок». Эластические волокна во всех слоях стенки лимфангионов формируют мелкопетлистые сети. В момент заполнения лимфой лимфангиона происходит растяжение эластических волокон и расправление «запасных складок» коллагеновых волокон. Последние практически не способны растягиваться и определяют предел растяжимости лимфангиона. Возвращение лимфангиона в исходное состояние происходит за счет эластической тяги, развиваемой эластическими волокнами без затрат дополнительной энергии.

Клапаны лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных представляют собой в большинстве случаев парные складки интимы лимфангиона и имеют полулунную форму. В некоторых лимфатических посткапиллярах и мелких интраорганных лимфатических сосудах мочевого пузыря как собак, так и кошек нами были обнаружены одностворчатые клапаны. Трехстворчатые клапаны в лимфангионах мочевого пузыря нам не встречались. В клапанном валике содержится большее количество соединительно-тканных элементов, чем в створке клапана. Кроме того, в этой области были обнаружены одиночные миоциты в интраорганных лимфангионах и множественные - в экстраорганных, ориентированные по ходу прикрепления клапана.

На некоторых препаратах из эфферентных лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных зрелого возраста была обнаружена мышца лимфатического клапана, представляющая собой окружные пучки миоцитов, залегающие непосредственно в клапанном валике. Данные пучки имели поперечную и косо-поперечную ориентацию. Среди этих пучков встречались одиночные радиально расположенные миоциты.

В постнатальном онтогенезе происходит изменение толщины стенки лимфангионов на различных ее участках. Наибольшая толщина стенки отмечается в области мышечной манжетки эфферентных лимфангионов мочевого пузыря собак среднего возраста. В области клапанного синуса стенки всех лимфангионов значительно утончаются, в основном за счет уменьшения содержания миоцитов в средней оболочке.

Содержание миоцитов в стенке лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных увеличивается по направлению лимфотока и прямо пропорционально возрасту животного (рис. 2) (высокая степень достоверности (Р?0,001)). Данная закономерность была отмечена у животных от рождения до достижения ими периода физиологической зрелости. С наступлением периода выраженных старческих изменений содержание миоцитов в стенке лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных достоверно снижается. Лимфангионы мочевого пузыря собак содержат больше миоцитов по сравнению с таковыми у кошек.

Архитектоника соединительнотканного каркаса лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных также имеет возрастные и локальные особенности. Так, в лимфангионах мочевого пузыря новорожденных щенков и котят определяется минимальное количество тонких соединительнотканных волокон, а их коллагеновые волокна обладают максимальным количеством запасных складок. С увеличением возраста животных в стенке как интра- , так и экстраорганных лимфангионов отмечается усложнение их соединительнотканной стромы. Происходит увеличение числа и утолщение эластических и коллагеновых волокон, причем в последних наблюдается уменьшение запасных складок. У собак и кошек периода выраженных старческих изменений отмечаются фиброзные изменения стенки лимфангионов мочевого пузыря. При этом коллагеновые и эластические волокна значительно утолщаются, «запасные» складки в коллагеновых волокнах практически отсутствуют на всем протяжении лимфангиона. Отмечается разволокнение и разрыв некоторых эластических волокон.

3.4 Морфологические особенности лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных при уролитиазе и его клинические проявления

В зависимости от присутствующего симптомокомплекса принято различать уролитиаз, протекающий с полной обструкцией уретры, характеризующийся острой задержкой мочи в мочевом пузыре со значительным перерастяжением его стенки и нарастающими признаками уремии, а также уролитиаз, протекающий без полной обструкции уретры, при котором отток мочи частично сохранен и стенка мочевого пузыря не испытывает столь значительного напряжения. Однако необходимо отметить, что при обеих формах клинического проявления уролитиаза стенка мочевого пузыря подвергается также и длительному механическому раздражению инородными телами, находящимися в его полости (цистоуролитами), что не позволяет рассматривать уролитиаз и связанные с ним структурные изменения мочевого пузыря как результат простого механического растяжения органа скопившейся мочой.

3.4.1 Клинический статус и морфология лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных в условиях уролитиаза с полной обструкцией уретры

В ходе исследования было установлено, что полная непроходимость уретры возникает в результате вколачивания в ее просвет обтурирующего конкремента или уретральных пробок, образованных большим количеством органического матрикса с примесью кристаллов неорганических солей.

Необходимо отметить, что полная обструкция уретры встречалась нами преимущественно у самцов домашних плотоядных (97,20% у кобелей и 96,85% у котов), что обусловлено анатомическими особенностями строения мочевыводящих путей. У самок домашних плотоядных полная обструкция уретры встречалась в 2,80% случаев у сук и 3,15% - у кошек и продолжалась не более одних суток. Проходимость уретры у них восстанавливалась в результате выведения конкремента самопроизвольно или при назначении спазмолитиков.

При исследовании гистологических и полутонких срезов из стенки мочевых пузырей, полученных от домашних плотоядных с полной обструкцией мочевыводящих путей выявляли лейкоцитарную инфильтрацию собственной пластинки слизистой оболочки, в большинстве случаев представленную нейтрофильными лейкоцитами, что по нашему мнению объясняется обострением хронического цистита в результате внутрипузырной локализации конкрементов и подтверждается результатами клинического анализа крови. Кроме того отмечали очаговое отслоение верхних эпителиальных слоев и участки с очаговыми подэпителиальными микрокровоизлияниями, что обусловливает изменение состава мочи (гиперстенурия, протеинурия, микрогематурия и наличие уротелия в мочевом осадке) в этот период. В собственной пластинке слизистой оболочки и подслизистой основе мочевого пузыря у собак и кошек в этот период наблюдали утолщение и набухание коллагеновых волокон, а также расширение кровеносных сосудов.

Кроме того, было выявлено разрежение петель лимфокапиллярных сетей и увеличение морфометрических показателей всех элементов интраорганного лимфатического русла в результате растяжения стенки органа, а также увеличение количества ранее спавшихся лимфатических анастомозов и коллатералей в связи с активизацией процессов по устранению воспалительного отека стенки органа. Анализ электронограмм стенки всех элементов лимфатического русла органа также свидетельствовал о повышенной компенсаторной активности всех клеточных элементов их стенки, что проявлялось усиленным краевым микропиноцитозом, увеличением количества цитоплазматических выростов эндотелия, а также сократительных (миофиламенты) и энергетических (митохондрии) элементов гладких миоцитов.

При анализе тотальных препаратов из стенки интра- и экстраорганных лимфангионов было отмечено некоторое относительное снижение числа миоцитов в стенке, наряду с возрастающими линейными и объемными показателями лимфангионов, что может быть объяснимо растяжением стенки лимфангионов в результате значительно возросшей дренажной активности лимфатического русла по устранению воспалительного отека стенки органа (рис. 3, 4).

Наблюдаемая в этот период типичная клиническая картина, по нашему мнению, обусловлена в первую очередь болевой реакцией, в ответ на раздражение детрузора в результате превышения физиологического уровня наполнения мочевого пузыря.

В случае острой непроходимости уретры в течение двух суток у собак и котов с уролитиазом наряду с симптомокомплексом выраженного болевого синдрома, выявлялись признаки ярко выраженной интоксикации на фоне уремии. Также отмечались признаки нарушения выделительной и фильтрационной функций почек, проявляющиеся выраженной креатининемией, повышением уровня мочевины в крови, протеинурией, а в некоторых случаях уробилинурией и глюкозурией.

В результате значительного растяжения стенки органа, в этот период выявлялись многочисленные кровоизлияния, а также воспалительная инфильтрация преимущественно зрелыми нейтрофилами, ярко выраженный отек, фрагментация волокон соединительной ткани, гиперемия, стазы и тромбозы кровеносных капилляров всех слоев стенки мочевого пузыря.

В результате сильного растяжения стенки органа выявляли возрастание линейных показателей и уменьшение извилистости всех элементов интраорганного лимфатического русла, а также расширение петель лимфокапиллярных сетей.

При анализе электронограмм из стенки лимфатических капилляров и посткапилляров, выявлялись признаки их декомпенсации и деструкции, выражающиеся значительным интрацеллюлярным и периваскулярным отеком. Некоторые немногочисленные эндотелиоциты лимфатических капилляров и посткапилляров в этот период сохраняли и даже усиливали свою функциональную активность, что выражалось возрастанием числа цитоплазматических микропиноцитозных везикул, свидетельствующих об усилении везикулярного транспорта продуктов воспаления и отечной жидкости в просвет капилляра. Расстояние между смежными эндотелиоцитами лимфокапиллярной стенки значительно увеличивалось, что обусловливало проникновение эритроцитов в просвет.

В структуре интраорганных лимфангионов мочевого пузыря собак и кошек при острой обструкции уретры в течение двух суток отмечались признаки, свидетельствующие о значительном нарушении их емкостной (утолщение и разрыхление коллагеновых волокон стенки) и моторной (утрата спиральной ориентации и исчезновение пучков миоцитов, признаки интрацеллюлярного и экстрацеллюлярного отека) функций. В некоторых случаях в цитоплазме эндотелиоцитов и миоцитов интраорганных лимфангионов выявлялись овальные осмиофильные тельца, окруженные однослойной мембраной и локализованные в непосредственной близости с митохондриями. По свидетельствам В.А. Шахламова (2007) подобные тельца следует рассматривать как юные новообразованные митохондрии, а факт их наличия - компенсаторной реакцией клетки в ответ на тканевую гипоксию. Кроме того, в цитоплазме практически всех клеточных элементов стенки интраорганных лимфангионов были обнаружены многочисленные микропиноцитозные везикулы, что, по всей видимости, свидетельствует о компенсаторной реакции клеток по устранению интра- и экстрацеллюлярного отека.

Ультраструктурные изменения экстраорганных лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных с острой непроходимостью уретры в течение двух суток свидетельствовали об усилении компенсаторных реакций эндотелия и сократительной способности миоцитов их стенки, что проявлялось нарастанием количества митохондрий и усилением микропиноцитоза цитоплазмы.

В случае обращения владельцев животных с уролитиазом на третьи сутки острой задержки мочи состояние большинства животных расценивалось как критическое. Наряду с симптомами поражения органов мочевыделения, отмечались признаки поражения других организменных систем на фоне значительно выраженной интоксикации.

При гистологическом исследовании стенки мочевого пузыря домашних плотоядных в этот период выявляли массивную лейкоцитарную инфильтрацию зрелыми нейтрофилами всех слоев стенки, что свидетельствует о выраженном воспалении. Также отмечали переполнение кровью, стаз и тромбозы кровеносных капилляров подслизистой и мышечной оболочек органа, что, несомненно, приводило к значительным нарушениям процессов микроциркуляции и соответственно оксигенации. Выявленные разрыв и разволокнение коллагеновых волокон и выраженный отек стромы всех оболочек свидетельствует о значительном снижении эластичности и превышении порога внутрипузырного давления и емкостной функции органа, что приводит к полному перекрытию капиллярного кровотока и развитию ишемической гипоксии детрузора. В некоторых случаях, особенно в мочевом пузыре у собак, выявляли наличие участков некроза и десквамации уротелия слизистой оболочки мочевого пузыря, что способно привести к полной утрате способности стенки мочевого пузыря преграждать обратное всасывание мочи.

Очень сильным изменениям подвергалась и структура лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных в этот период. Так, обращало на себя внимание значительное разрежение лимфокапиллярных сетей и возрастание размеров их петель во всех оболочках стенки органа, а также значительное растяжение и полная утрата характерной четковидности и извилистости интраорганных лимфатических сосудов. В результате перерастяжения стенки лимфатических капилляров значительно снижалась плотность межэндотелиальных контактов. В некоторых случаях отмечали отслоение эндотелиоцитов лимфатических капилляров от подлежащих тканей в результате разрыва «стропных» филаментов, и выбухание их ядер в просвет. В результате этого, в просвете практически всех лимфатических капилляров и посткапилляров, наряду с лимфоцитами, обнаруживались множественные эритроциты и клетки воспалительного инфильтрата (нейтрофилы и моноциты), проникающие в полость через зияющие межэндотелиальные контакты, а при внутритканевой инъекции лимфатического русла отмечалось дифундирование красителя через стенки лимфатических капилляров и сосудов и пропитывание им всех слоев стенки органа. В некоторых эндотелиоцитах интраорганных лимфангионов сохранялись признаки повышенной функциональной активности, что проявлялось наличием цитоплазматических выростов базальной и люминальной поверхностей их цитоплазмы, а также большого количества микропиноцитозных везикул и других цитоплазматических органелл. Обращало на себя внимание увеличение количества и размеров митохондрий эндотелиоцитов, а также наличие большого числа электронноплотных осмиофильных телец. Не смотря на выявленные на субмикроскопическом уровне признаки сохраняющейся функциональной активности миоцитов стенки, общая сократительная и депонирующая способность интраорганных лимфангионов снижалась, что подтверждалось утратой спирального расположения миоцитов по отношению к продольной оси сосуда, снижением их числа на единицу площади сосудистой стенки за счет ее значительного растяжения а также значительным утолщением и разволокнением коллагеновых волокон стенки.

При анализе ультраструктуры стенки экстраорганных лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных при уролитиазе на третьи сутки острой задержки мочи, наряду с признаками нарастания функциональной активности миоцитов (увеличение числа митохондрий, электронноплотных осмиофильных телец и микропиноцитозных везикул), характерных для острой задержки мочи менее трех суток, отмечали нарастающие признаки их деструкции, проявляющиеся значительной вакуолизацией и снижением электронной плотности цитоплазмы, отеком и уменьшением количества митохондрий и миофиламентов.

На момент поступления для исследования домашних плотоядных с острой обструкцией уретры в течение четырех суток все животные находились в крайне тяжелом шоковом состоянии. Клинические и лабораторные исследования свидетельствовали о развитии необратимой уремии и глубоких поражениях мочевыводящей, сердечнососудистой и пищеварительной систем.

При патологоанатомическом вскрытии животных павших или подвергнутых эвтаназии на четвертые сутки полной обструкции уретры отмечалось значительное увеличение мочевого пузыря в объеме (до 6-10 раз). Орган занимал практически всю брюшную полость, значительно сдавливая и смещая дорсально и краниально окружающие его органы, что, несомненно, способствовало развитию их ишемии и гипоксии. Было отмечено наличие массивных участков некроза слизистой оболочки и диффузное слущивания уротелия, а также значительно выраженные венозная гиперемия, массовые обширные кровоизлияния, воспалительная инфильтрация и отек стромы всех слоев стенки органа.

Макроскопическая картина изменений лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных при острой непроходимости уретры в течение четырех суток примерно соответствовала таковой при задержке мочеиспускания в течение трех суток и отличалась в основном дальнейшим возрастанием морфометрических показателей всех его элементов в связи с дальнейшим растяжением стенки органа скопившейся мочой.

При электронной микроскопии, наряду с отслоением эндотелиоцитов лимфатических капилляров, отмечали разрыв их цитоплазматической мембраны и значительную деформацию и гидратацию их ядер. Контуры уцелевших эндотелиоцитов обладали значительным полиморфизмом и имели полипообразные выпячивания цитоплазмы. Всю цитоплазму занимали вакуоли различных размеров и формы. Также отмечали значительные разрывы и разволокнения подлежащих коллагеновых и эластических волокон. Все вышеописанное, несомненно приводило к полной и необратимой утрате лимфатическими капиллярами их дренажной функции, что значительно усугубляло патологический процесс в стенке мочевого пузыря.

Коллагеновые волокна всех слоев стенки интраорганных лимфангионов мочевого пузыря собак и кошек в этот период были сильно утолщены, между ними выявлялись щелевидные пространства, заполненные коллоидом, что свидетельствовало о значительном экстрацеллюлярном отеке. Интрацеллюлярные изменения эндотелиоцитов включали признаки ядерной и цитоплазматической гипергидратации и сильно выраженную вакуолизацию цитоплазмы. Так же отмечали расширение межэндотелиальных стыков и разрыв цитоплазматической мембраны некоторых эндотелиоцитов. Миоциты интраорганных лимфангионов находились на значительном расстоянии друг от друга и имели просветленную цитоплазму с содержанием большого количества вакуолей.

В стенке всех экстраорганных лимфангионов отмечали снижение содержания миоцитов на тотальных препаратах. В связи с тем, что данное изменение происходило одновременно с возрастанием линейных и объемных показателей лимфангионов, мы расцениваем это как следствие растяжения их стенки скопившейся лимфой в ответ на нарушение моторной функции лимфангионов.

Ультраструктурные изменения стенки экстраорганных лимфангионов характеризовались признаками гидратации эндотелиоцитов, проявляющимися увеличением размеров и снижением электронной плотности их ядер, а также вакуолизацией цитоплазмы. Ультрастуктурные изменения миоцитов стенки экстраорганных лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных в этот период также свидетельствовали о внутриклеточном отеке и значительном снижении их функциональной активности. Также, присутствовали признаки значительной гидратации межклеточного вещества всех слоев стенки экстраорганных лимфангионов, что выражалось расширением межклеточных пространств, разволокнением и разрежением коллагеновых фибрилл и снижением их электронной плотности.

Кроме того было установлено, что при острой обструкции уретры при уролитиазе на любом сроке возникает значительное увеличение количества тучных клеток в стенке мочевого пузыря, что усугубляет вызванные микроциркуляторными и гипоксическими расстройствами структурные и клинические нарушения в результате высвобождения содержащихся в них биологически активных веществ.

3.4.2 Клинические проявления и морфология лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных при хроническом течении уролитиаза с частичной обструкцией уретры

При уролитиазе, протекающем с неполной обструкцией уретры, у домашних плотоядных, были выявлены две формы патоморфологических изменений: хронический цистит (преобладают признаки воспалительной лейкоцитарной инфильтрации) и цистопатия (преобладают явления дистрофических и атрофических процессов уротелия, кровеносных и лимфатических сосудов без выраженной лейкоцитарной инфильтрации стенки органа).

Структурные особенности лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных и клинические симптомы при уролитиазе, сопровождающемся хроническим циститом. Признаки хронического цистита в большинстве случаев сопровождали оксалатный, уратный и струвитный уролитиаз у собак, реже уратный и оксалатный уролитиаз у кошек. При этом лабораторные анализы мочи и крови у таких животных свидетельствовали о наличии инфекционного процесса в органах мочевыделения, возникающего, по нашему мнению, вторично на фоне повреждения уротелия и нарушения нормального пассажа мочи.

В случае развития структурных изменений стенки мочевого пузыря по типу хронического цистита выявлялись клинические и гистологические изменения, в основе которых лежат процессы нарушения проницаемости уротелия, расстройства микроциркуляторного русла, а также повышения активности тучных клеток. При этом в стенке мочевого пузыря, наряду со значительными гипертрофическими процессами в уротелии, обнаруживались диффузная лейкоцитарная инфильтрация, пролиферация фибробластов во все слои, а также полнокровие, кровоизлияния, а в некоторых случаях склеротизирование микроциркуляторных сосудов слизистой оболочки. Периодические случаи нарушения нормального пассажа мочи способствовали возрастанию внутриполостного и, как следствие - гидростатического давления в интерстиции, что приводило к значительному межклеточному отеку всех слоев стенки мочевого пузыря.

Сети лимфатических капилляров мочевого пузыря у домашних плотоядных сгущались, петли этих сетей уменьшались в размерах, что, по всей видимости, являлось следствием включения в лимфоток коллатералей и анастомозов для устранения присутствующего отека интерстиция и гипоксии тканей на его фоне. Этот факт подтверждался также и выявленным возрастанием линейных и объемных показателей всех элементов как интраорганного, так и экстраорганного лимфатического русла. Во всех оболочках органа лимфатические капилляры, посткапилляры и интраорганные лимфатические сосуды приобретали более извилистый ход по сравнению с нормой и неравномерность стенки, выражающуюся в появлении утолщений, перетяжек и варикозных выпячиваний, что вероятно связано с процессами периваскулярного склероза, выявляемого на субмикроскопическом уровне.

В цитоплазме некоторых эндотелиоцитов лимфатических капилляров, посткапилляров и интраорганных лимфангионов встречались многочисленные аутофагосомы, которые по сведениям В А. Шахламова (2007) являются признаком повреждения мембранных структур свободными радикалами и показателем метаболических сдвигов, возникающих в результате гипоксии. В некоторых частях сосуда отмечали участки стенки, лишенные эндотелия в результате его отслоения. Наряду с этим обнаруживали прерывистость и расслоение базальной мембраны интраорганных лимфангионов, а также значительное расширение межэндотеиальных стыков, что являлось морфологическим подтверждением компенсации нарушенной дренажной функции лимфатических капилляров в результате трансцеллюлярного дренажа интерстиция через стенку сосуда. Определенные изменения были выявлены и в структуре клапанов интраорганных лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных при уролитиазе, сопровождающемся хроническим циститом. Так встречались участки клапанов, лишенные на некотором протяжении эндотелиальной выстилки. Коллагеновые фибриллы створок клапанов располагались беспорядочно. Обращало на себя внимание практически полное отсутствие миоцитов в клапанном валике. Некоторые эндотелиоциты клапанов формировали значительные выросты и выпячивания люминальной поверхности цитоплазмы, способные перекрывать просвет сосуда, что вероятно в какой-то мере компенсировало утраченную клапанами функцию.

Мышечная оболочка лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных при хроническом цистите имела неоднородную структуру. Так, наряду с миоцитами, имеющими признаки повышенной функциональной активности (большое количество митохондрий, миофиламентов и микропиноцитозных везикул), встречались гладкомышечные клетки с нарушенной структурой митохондрий, слабой электронной плотностью цитоплазмы и наличием большого количества аутофагосом. Во всех слоях стенки интраорганных лимфангионов отмечали большое количество разрозненных соединительнотканных волокон, зачастую расположенных беспорядочно и не формирующих пучки, в результате чего снижалось количество миоэндотелиоцитарных контактов. При анализе тотальных препаратов из лимфангионов отмечалось увеличение количества миоцитов на единицу площади их стенки, что несколько компенсировало снижение сократительных функций на фоне периваскулярного склероза. Особенно хорошо данная закономерность прослеживалась в стенке интраорганных лимфангионов (рис. 6).

Наряду с деструктивными изменениями интраорганных лимфатических сосудов мочевого пузыря домашних плотоядных при уролитиазе, сопровождающемся хроническим циститом, были отмечены признаки повышения функциональной активности большинства клеточных компонентов экстраорганных лимфангионов, свидетельствующие об увеличении их сократительной способности, что в какой-то степени компенсировало нарушенный лимфоток в органе.

Клинический статус и архитектоника лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных при уролитиазе, сопровождающемся цистопатией. Структурные изменения мочевого пузыря по типу цистопатии в большинстве случаев сопровождали струвитный и уратный уролитиаз у кошек, реже у собак. При этом наряду с некоторой схожестью картины, наблюдаемой нами при уролитиазе, сопровождающемся хроническим циститом (поллакиурия, дизурия, ишурия), выявлялись клинические и патоморфологические признаки, не укладывающиеся в понятие хронического воспалительного процесса. Так, например, при лабораторных анализах в моче животных с цистопатией практически не содержалось лейкоцитов и микрофлоры, отсутствовал лейкоцитоз. При пальпации мочевой пузырь в основном был безболезненным и атоничным.

При исследовании гистологических срезов из стенки мочевого пузыря домашних плотоядных с цистопатией были обнаружены значительные структурные изменения уротелия. Поверхностные слои уротелия, в большинстве случаев подвергались дистрофии и атрофии с последующей десквамацией, в результате чего отмечалось обнажение базального слоя эпителиального пласта. В некоторых участках отмечали пролиферацию уротелия в подлежащую соединительную ткань. Характерным было практически полное отсутствие подэпителиальной воспалительно-клеточной инфильтрации, характерной для острого и хронического цистита. Отмечали значительную деформацию и редукцию кровеносных капилляров слизистой и мышечной оболочек и подслизистого слоя, что несомненно неблагоприятно сказывалось на их оксигенации. Кроме того отмечали значительный отек и склеротизирование всех слоев стенки органа, что по нашему мнению и является причиной утраты его сократительной функции.

При анализе ультраструктуры кровеносных капилляров мочевого пузыря домашних плотоядных при цистопатии выявляли признаки, свидетельствующие о значительном снижении их функциональной активности и деструкции в результате тканевой гипоксии.

Достаточно сильно изменялась и структура лимфатического русла мочевого пузыря у домашних плотоядных при цистопатии. Обращало на себя внимание разрежение и деформация петель сетей лимфатических капилляров и утрата их длинниками типичной ориентации, особенно в слизистой оболочке и подслизистой основе органа. Поверхность лимфатических капилляров выглядела неровной и формировала варикозные выпячивания. Вероятно, данные изменения были обусловлены сдавливанием лимфатических капилляров гипертрофированной соединительной тканью, пронизывающей все слои органа, а также растяжением стенки мочевого пузыря на фоне его длительной атонии.

Диаметр лимфатических капилляров слизистой оболочки мочевого пузыря у домашних плотоядных при уролитиазе с цистопатией становился неоднородным. Встречались необычно мелкие, вероятно, спадающиеся лимфатические капилляры, что свидетельствовало о значительном локальном снижении дренажной функции обменных лимфатических сосудов и подтверждалось значительным нарушением их структуры на субмикроскопическом уровне.

Так люминальная поверхность эндотелиоцитов лимфатических капилляров была сглаженной или имела небольшие протрузии. Микропиноцитозная активность эндотелиоцитов лимфатических капилляров слизистой оболочки практически не прослеживалась, что свидетельствовало о нарушении трансэндотелиоцитарной филитрации лимфы. В некоторых эндотелиоцитах выявлялись крупные полиморфные вакуоли и многочисленные аутофагосомы в цитоплазме, являющиеся показателями их глубокой деструкции. В субэндотелиальном пространстве залегали разрозненные коллагеновые фибриллы, а также гомогенный материал со средней электронной плотностью, что свидетельствовало об экстрацеллюлярном отеке.

Из-за разрежения сетей лимфатических капилляров и коллагенизации стромы органа значительно возрастало наружное давление на стенки интраорганных лимфатических сосудов, что в результате приводило к их декомпенсации и значительным структурным изменениям. Так стенка интраорганных лимфатических сосудов имела многочисленные варикозные выпячивания в области клапанных синусов, что свидетельствовала о хроническом внутрисосудистом застое лимфы. Многие мелкие интраорганные лимфатические сосуды были облитерированы и утрачивали характерный для лимфатических сосудов вид четок в результате сглаживания перехватов сосудов в местах расположения клапанов. Не смотря на то, что морфометрические показатели интраорганных лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных при цистопатии в целом несколько возрастали, общее количество функционирующих сосудов в органе значительно уменьшалось, в результате чего нарушенное лимфообращение в органе не могло быть компенсировано. При электронной микроскопии выявляли значительный фиброз стенок интраорганных лимфангионов, истончение базальной мембраны и локальную диэндотелизацию. В результате значительного снижения оксигенации стенки лимфангионов, страдали наиболее чувствительные к недостатку кислорода гладкие миоциты. При электронной микроскопии выявлялись миоциты с истонченной базальной мембраной, гладким слабоосмиофильным ядром и цитоплазмой с низким содержанием микропиноцитозных везикул, миофиламентов и отечных митохондрий, а также обилием вакуолей и аутофагосом. Некоторые миоциты имели пикнотичные ядра и обилие аутофагосом в цитоплазме, что свидетельствовало об их аутолизе. Обращали внимание скопления утолщенных разрозненных коллагеновых волокон, окружающих миоциты, в результате чего значительно снижались количество и плотность мио-миоцитарных контактов, что негативно отражалось на сократительной способности лимфангионов. Данный факт подтверждался значительным снижением количества миоцитов на единицу площади стенки лимфангиона на тотальных препаратах.

Значительные ультраструктурные изменения были выявлены нами и в стенке экстраорганных лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных при цистопатии. Отмечали повреждение сосудистой интимы, проявляющееся утолщением базальной мембраны и отслоением эндотелия. Цитоплазма эндотелиоцитов в большинстве случаев имела повышенную электронную плотность и содержала небольшое количество микропиноцитозных везикул, что свидетельствовало о снижении трансцеллюлярного транспорта. Отмечали значительный фиброз стенки лимфангионов, проявляющийся разростом коллагеновых волокон, которые разделяли мышечную оболочку на отдельные фрагменты, а в некоторых случаях сдавливали миоциты или даже замещали их. Некоторые миоциты имели пикнотичные ядра и цитоплазму с низким содержанием митохондрий и миофиламентов, а также с высоким содержанием аутофагосом и вакуолей.

Описанные структурные изменения лимфатического русла свидетельствуют о глубоких, порой необратимых функциональных нарушениях лимфангионов, заключающихся в значительном снижении их сократительной и депонирующей способностей, что значительно усугубляет патологический процесс в органе.

3.5 Лимфотропная антибиотикотерапия при уролитиазе у домашних плотоядных

Закупорка мочеиспускательного канала, повреждение его слизистой оболочки и застой мочи приводят в совокупности к развитию вторичной восходящей инфекции мочевых путей. Этому также способствует высокая осмолярность кошачьей мочи. В связи с вышеизложенным, антимикробная терапия является обязательной при любом виде и локализации конкрементов, а также при проведении любых манипуляций на органах мочевыделения (катетеризация, цистоцентез, уретростомия и др.) в качестве профилактики бактериальной инфекции. На наш взгляд наиболее оправдано при уролитиазе у домашних плотоядных лимфотропное введение антибиотиков.

Разработанная нами методика непрямой (лимфотропной) антибиотикотерапии при уролитиазе у домашних плотоядных достаточно проста, безопасна, не требует общей анестезии пациента при ее выполнении и включает следующие этапы:

1) за 15-20 минут до выполнения лимфотропного введения антибиотиков, пациенту внутримышечно вводится фуросемид в дозе 0,5-1 мл на голову (в зависимости от живой массы);

2) через 15-20 мин после этого животному лимфотропно в подкожную клетчатку отступив 1-2 см вправо или влево от шва промежности инъецируется смесь, состоящая из 10 ЕД лидазы и 1мл 1%-го раствора лидокаина;

3) затем, через 2 минуты, в то же место, не вынимая иглы, вводят половинную суточную дозу антибиотика, растворенного в необходимом количестве 0,9% раствора хлорида натрия.

При выполнении процедуры все растворы необходимо вводить очень медленно (в течение 3-5 мин), при минимальном давлении на поршень шприца. При этом используются инсулиновые шприцы и иглы. Лимфотропные инъекции антибиотиков выполняют каждые 24 часа в течение 3-5 дней. Во всех случаях выбор антибиотика должен обусловливаться чувствительностью к нему микроорганизмов, его переносимостью животным и отсутствием местно-раздражающего действия. В нашем случае использовали цефалоспорин III поколения - цефатоксим.

При лимфотропном введении в подкожную клетчатку в области промежности препараты быстро проникают в лимфатические капилляры, а затем по лимфатическим сосудам достигают лимфатических узлов тазовой полости и избирательно накапливаются в них. Далее лекарства ретроградно распространяются по органам малого таза, создавая в интерстиции их оптимальную концентрацию на протяжении длительного времени. Вводимый предварительно в организм животного фуросемид обеспечивает усиление лимфомикроциркуляции в тканях и облегчает поступление вводимых впоследствии препаратов в лимфатические капилляры. Инъецируемая предварительно в ткани лидаза вызывает местное воздействие на лимфатические сосуды, увеличение частоты и амплитуды пульсации лимфангионов, способствуя усилению лимфатического дренажа и всасыванию вводимого впоследствии антибиотика в лимфатическое русло.

3.6 Особенности течения уролитиаза у домашних плотоядных на фоне применения классической и лимфотропной антибактериальной терапии

Динамика клинических и лабораторных показателей у домашних плотоядных с уролитиазом на фоне применения различных методов лечения. В ходе исследования было установлено, что на фоне проведения регионарной лимфотропной антибактериальной терапии основные клинические проявления при уролитиазе у домашних плотоядных купировались в более ранние сроки, чем при применении стандартной схемы, включающей внутримышечное введение антибиотиков.

После 5 дней лимфотропной антибиотикотерапии авторским способом отмечалась полная нормализация всех гематологических показателей по сравнению с исходным состоянием у всех собак и кошек опытных групп (р?0,05). Также в этот период отмечалось полное восстановление химического и морфологического состава мочи у всех пациентов опытных групп и нормализация клинического состояния, проявляющаяся восстановлением мочеиспускания, хорошим аппетитом и бодрым состоянием.

При традиционном способе антибиотикотерапии клиническое состояние пациентов, а также их гематологические и урологические показатели улучшались лишь на 7-е и 10-е сутки (Р?0,05), однако, даже при столь длительном времени лечения, эти показатели не во всех случаях достигали нормы. Полная оптимизация клинического состояния и лабораторных показателей у всех животных контрольных групп наблюдалась только на 10-е сутки общепринятой терапии.

При долгосрочных обследованиях пациентов опытных и контрольных групп в течение 12 месяцев, рецидивы уролитиаза и бактериальных инфекций органов мочевыделения были отмечены у 12,50% кошек и 4,17% собак, получавших лимфотропную антибиотикотерапию. После курса общепринятого способа антибиотикотерапии эти показатели были значительно выше и составляли 25,0% у кошек и 16,0% у собак.

Морфологические особенности лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных с уролитиазом при различных способах терапии. При анализе цитологических биоптатов из стенки мочевого пузыря домашних плотоядных опытных групп уже на 5-е сутки лимфотропной антибиотикотерапии отмечались признаки значительного снижения интенсивности воспалительной инфильтрации и межклеточного отека всех оболочек мочевого пузыря. В собственной пластинке слизистой и подслизистом слое выявлялись макрофаги, а также одиночные фибробласты. Также практически не прослеживались признаки периваскулярного отека в области кровеносных и лимфатических капилляров, выявленные на момент начала эксперимента. При анализе электронограмм было обнаружено наличие большого количество открытых межэндотелиальных стыков, а так же многочисленных выростов базальной и люминальной поверхностей эндотелиоцитов лимфатических капилляров. В их цитоплазме выявлялись многочисленные митохондрии и обилие микропиноцитозных везикул, что является морфологическим подтверждением усиления их резорбционной и транспортной функции. При анализе тотальных препаратов из стенки интраорганных лимфатических сосудов мочевого пузыря отмечали возрастание количества гладких миоцитов (рис. 6), а также хорошо выраженную их спиральную ориентацию по отношению к продольной оси сосуда, что в целом свидетельствовало о возрастании сократительной способности лимфангионов.

У животных контрольных групп на 5-е сутки лечения степень воспалительной инфильтрации слизистой оболочки мочевого пузыря снижалась незначительно. В инфильтрате преобладали нейтрофилы, а также встречались одиночные макрофаги и эритроциты. Сохранялись признаки периваскулярного отека, а также отека цитоплазмы эндотелия кровеносных и лимфатических капилляров. Количество миоцитов на тотальных препаратах из стенки лимфангионов мочевого пузыря животных контрольных групп возрастало незначительно.

В результате заметно сниженной функциональной активности всех структурных компонентов лимфатического русла мочевого пузыря домашних плотоядных на фоне традиционного введения антибиотика даже через 30 дней после проведенного курса терапии у животных контрольных групп были отмечены некоторые изменения ультраструктуры стенки мочевого пузыря и элементов кровеносного и лимфатического русла. Так, отмечалось утолщение соединительнотканных волокон в периваскулярном пространстве кровеносных и лимфатических капилляров слизистой оболочки органа, а также снижение микропиноцитоза, количества цитоплазматических выростов и митохондрий в цитоплазме эндотелиоцитов и миоцитов стенки сосудов. Число миоцитов на тотальных препаратах из интраорганных лимфангионов мочевого пузыря собак и кошек контрольных групп через 30 дней от начала традиционной терапии продолжало несколько увеличиваться, однако так и не достигало такового у здоровых животных (рис. 6).

Структура стенки мочевого пузыря и его лимфатического русла у собак и кошек, получавших антибиотики лимфотропно, на 30-е сутки от начала терапии при комплексном исследовании практически не отличалась от таковой у здоровых животных.

ВЫВОДЫ

1. Интраорганное лимфатическое русло мочевого пузыря домашних плотоядных состоит из сообщающихся между собой лимфатических капилляров, посткапилляров и интраорганных лимфатических сосудов трех порядков, формирующих единую дренажную систему органа. Лимфатические капилляры, посткапилляры и сосуды первого порядка залегают во всех оболочках органа и в пределах каждой из них формируют сети, архитектоника которых обусловлена органной структурой, а также функциональной активностью участка органа и степенью его наполнения.

2. Стенка лимфатических капилляров мочевого пузыря не имеет базальной мембраны и представлена одним слоем эндотелиальных клеток со «стропными» филаментами. Стенка лимфатических посткапилляров мочевого пузыря домашних плотоядных морфологически практически идентична со стенкой лимфатических капилляров. От последних лимфатические посткапилляры отличаются более прямолинейным ходом, иногда большим диаметром и наличием клапанов. Характерной отличительной особенностью всех лимфатических сосудов мочевого пузыря домашних плотоядных является наличие клапанов и миоцитов в стенке.

3. Экстраорганное лимфатическое русло мочевого пузыря домашних плотоядных представлено афферентными лимфатическими сосудами, регионарными лимфатическими узлами и эфферентными лимфатическими сосудами. Количество афферентных лимфатических сосудов, впадающих в какой-либо лимфоузел, всегда преобладает над таковым эфферентных лимфососудов, выносящих лимфу из него.

4. Регионарными лимфатическими узлами первого этапа для мочевого пузыря у домашних плотоядных являются: 1) правый и левый медиальные подвздошные, 2) правый и левый латеральные подвздошные , 3) подчревные и 4) каудальные поясничные. Кроме того, медиальные и латеральные подвздошные лимфатические узлы в некоторых случаях являются также и лимфоузлами второго этапа.

5. Структурно и функционально строму регионарных лимфатических узлов мочевого пузыря домашних плотоядных можно представить как сложный многоклапанный лимфангион, содержащий в своем составе лимфоидные структуры и имеющий три зоны: 1) периферическую коллекторную, расположенную в месте впадения афферентных лимфангионов и соответствующую проксимальному клапану; 2) промежуточную или распределительную, окружающую корковое вещество узла и соответствующую мышечной манжетке и 3) центральную коллекторную, представляющую собой стенку воротного синуса и соответствующую дистальному клапану. Миоциты в капсуле узла распределены неравномерно: наибольшее их количество отмечается в зоне расположения трабекул, наименьшее - в области прилегания лимфатических фолликулов.

6. Структурно-функциональной единицей всех лимфатических сосудов мочевого пузыря домашних плотоядных является лимфангион, принимающий непосредственное активное участие в лимфотоке, благодаря наличию в его стенке миоцитов. Морфометрические показатели, а также структура стенки лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных обладают видовой, возрастной и локальной вариабельностью. Для гладкомышечных клеток и их пучков в стенке лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных характерен спиральный тип ориентации, что способствует экономии энергии и обеспечивает дополнительную прочность при сокращении. Количество миоцитов в мышечной манжетке лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных всегда преобладает над таковым в стенке клапанного синуса и возрастает по направлению лимфотока от интраорганных лимфангионов к экстраорганным. Структурно и функционально миоциты лимфангионов мочевого пузыря домашних плотоядных тесно связаны с коллагеновыми и эластическими волокнами и образуют единый мышечно-соединительнотканный каркас их стенки.

7. В постнатальном онтогенезе домашних плотоядных происходит возрастание сократительной и депонирующей способности лимфатического русла мочевого пузыря, что выражается увеличением содержания гладких миоцитов в стенке лимфатических сосудов и капсуле регионарных лимфоузлов, а также возрастанием объема лимфангионов вплоть до достижения животными зрелого возраста. С наступлением периода выраженных старческих изменений эти показатели начинают уменьшаться, что обусловлено возрастной инволюцией гладкомышечного аппарата и фиброзом стенки лимфангионов и капсулы лимфатических узлов.