Оценка степени инвазированности метацеркариями описторхид рыб

Размещено на http://www.allbest.ru/50

Реферат

Курсовая работа - 39 страниц, 6 таблиц , 6 рисунков, 27 источников.

Ключевые слова: Орisthorchis felineus, биототоп, численность, партениты, экстенсивность инвазии, индекс обилия, интенсивность инвазии.

Объект исследования: метацеркарий описторхид рыб семейства карповых на территории города Гомеля и Гомельского района.

Предмет исследования: интенсивность и экстенсивность инвазии описторхид рыб семейства карповых.

Методы исследования: паразитологическое исследование проводилось компрессорным методом.

Цель курсовой работы: выявление степени заражённости метацеркариями описторхид дополнительных хозяев - рыб семейства карповых в водоемах и реках на территории города Гомеля и Гомельского района Республики Беларусь.

Задачей курсовой работы является: определение интенсивности инвазии метацеркариями Орisthorchis felineus рыб семейства карповых в водоемах и реках на территории города Гомеля и Гомельского района Республики Беларусь.

Выводы: в результате гельмитологических исследований было выявлено, что личинками описторхид в большей или меньшей степени поражены рыбы из всех точек отбора, а по виду рыб семейства карповых наибольшую зараженность метацеркариями Орisthorchis felineus имеет рыба плотва.

Практическое значение данной работы: значимость выполненной работы состоит в том, что установление степени заражённости позволяет дать оценку эпизоотической значимости описторхоза на территории города Гомеля, Гомельского района и послужить для анализа паразитоценозов дефинитивных хозяев - хищных животных и человека.



Содержание

метацеркарий рыба карповый водоем трематодоз

Введение

1. Обзор литературы

1.1 Краткий исторический обзор

1.2 Общая характеристика возбудителей трематодозов

1.3 Исследование рыбы на зараженность метацеркариями О. feliпeus

1.3.1 Компрессорный метод исследование рыбы на зараженность

1.3.2 Упрощенный способ определения интенсивности инвазии язей промысловых размеров

1.4 Определение метацеркарий и их описание

1.4.1 Метацеркария О. feliпeus

2. Объект, программа и методика исследований

2.1 Отлов и исследование рыб семейства карповых на предмет наличия трематод

3. Результаты исследований и их обсуждение

3.1 Анализ мест обитания рыб семейства карповых на территории г. Гомеля и Гомельского района

3.2 Гельминтологические исследования

Рекомендации

Заключение

Список использованных источников



Введение

Актуальность темы и её научная новизна. Рыба, являясь ценным пищевым продуктом, может стать причиной заболевания человека серьезными гельминтозами. На территории республики Беларусь в последнее время регистрируется целый ряд паразитарных болезней, возбудители которых передаются человеку через рыбу, ракообразных, моллюсков и продукты их переработки. Наиболее тяжелым гельминтозом из числа трематодозов, распространенных на территории Беларуссии, является описторхоз. Описторхоз - пероральный биогельминтоз, вызываемый трематодой семейства Opisthorhidae (Opisthorchis felineus и Opisthorchis viverrini). Он относится к природно-очаговым инвазиям. Заражение человека, кошек, собак, лисиц, песцов, свиней и некоторых других плотоядных животных (окончательных хозяев данного паразита) происходит при употреблении в пищу инвазированной личинками описторхисов рыбы семейства карповых (карп, карась, пескарь, жерех, плотва, сазан, красноперка, язь, елец, чебак, вобла, линь, лещ, и др.). При попадании в желудочно-кишечный тракт личинки (называемые матацеркариями) эксцистируются в двенадцатиперстной кишке и мигрируют через желчный пузырь во внутрипеченочные желчные протоки. У инвазированных лиц в 20-40% случаев описторхисы также обнаруживаются в протоках поджелудочной железы и желчном пузыре [3,6,16].

В течение 3-4 недель с момента попадания в организм хозяина гельминты достигают половой зрелости и начинают откладывать яйца. Каждый гельминт в организме инвазированного человека за это время может секретировать много миллионов яиц, размер яйца около 0,025 мм в диаметре. Взрослый описторхис имеет размеры 5-10x1-2 мм, основой для его питания служит гликоген, а источником кислорода - кровь хозяина. Этот паразит не может завершить свой жизненный цикл в одном организме, ему необходим выход во внешнюю среду и дальнейшее развитие в другом хозяине.

Важным звеном цикла развития O.felineus является попадание выделенных с фекалиями больных животных и человека яиц гельминта в пресные водоемы, в которых имеются заглатывающие их переднежаберные моллюски рода Bithynia. В организме этих промежуточных хозяев из яиц появляются личинки гельминта мирацидии (первая личиночная стадия), которые за 2 месяца проходят несколько стадий развития, включающих размножение, и превращаются в церкарии. Церкарии, имеющие в качестве органа передвижения хвост, выходят в воду и активно внедряются в тело пресноводных карповых рыб. В мышцах этого дополнительного хозяина церкарии превращаются в следующие личинки метацеркарии, покрытые защитной оболочкой.

Таким образом, описторхоз - гельминтоз (гельминтозы - это распространенные паразитарные заболевания человека, вызываемые различными представителями низших червей - гельминтов), поражающий преимущественно гепатобилиарную систему и поджелудочную железу, отличается длительным течением, протекает с частыми обострениями, способствует возникновению первичного рака печени и опухолей поджелудочной железы. Описторхоз является одним из наиболее трудноподдающихся лечению паразитарных инвазий. Возбудитель описторхоза - описторхис, двуустка сибирская, или кошачья (Opisthorchis felineus), паразитирует у человека, кошек, собак в печени, желчном пузыре, желчевыводящих путях, поджелудочной железе [22]. Заражение человека происходит при употреблении сырой, недостаточно прожаренной и слабо просоленной рыбы семейства карповых, инвазированной личинками гельминта. Описторхоз вызывается трематодой Opisthorchis felineus. Инвазия описторхисами оказывает существенное влияние на здоровье детского населения. Описторхоз у детей мало изучен и недостаточно известен врачам, в связи, с чем нередко допускаются диагностические и лечебные ошибки.

Описторхоз является эндемичным, но довольно распространенным заболеванием. В последнее время наблюдается значительное расширение ареала распространения этого гельминтоза. Раньше он был распространен преимущественно в России на территориях бассейнов рек Оби, Иртыша, Волги, Камы, Днепра, но сейчас имеются данные о наличие очагов низкой интенсивности на притоках рек Енисея, в бассейне рек Урала, Северной Двины, а также в странах Восточно-Азиатского региона (КНР, Таиланд, Южная Корея, Лаос, Вьетнам и др.) и об обнаружениях в неэндемичных регионах, включающих Северную Америку и Западную Европу.

Обусловлено это возросшей массовой миграцией населения, ростом удельного веса рыбы в рационе населения, оттоком людей, занятых на вахтовой и экспедиционно-вахтовой работе на эндемичных по описторхозу территориях, недостаточным контролем за переработкой рыбы. В результате происходит вывоз на другие территории инвазии и "северных" способов приготовления рыбных блюд (кулинарной обработки), ее употреблением в пищу на значительном удалении от очага заражения.

Следует отметить, что зараженность личинками О. felineus рыбы в некоторых водоемах и реках Обь-Иртышского бассейна по данным исследований составляет для язя - до 100%, чебака и леща - 70%, линя 45%.

Инвазия человека описторхисами приводит к различным нарушениям здоровья человека - развитию ангихолита, холецестита, панкреатита, цирроза печени, анемии. Она также способствует проникновению вирусной и бактериальной инфекций в билиарную систему, возникновению восходящего гепатита, камней в желчевыводящих протоках и протоках поджелудочной железы. У инвазированных лиц в 3 раза чаще наблюдается тяжелое течение бронхиальной астмы, в 4 раза - сахарного диабета, выявлена также связь описторхоза с возникновением опухолей гепатобилиарной системы. Международным агенством по исследованию рака возбудитель описторхоза отнесен к канцерогенам человека первой группы. Российскими исследователями установлено, что распространенность холангиокарциномы в 10-15 раз выше в тех районах Западной Сибири, где наибольший процент населения страдает от этого гельминтоза [22].

Актуальность проблемы описторхоза определила его включение во Всесоюзные программы "Здоровье человека в Сибири" и "С-16" в качестве одного из ведущих направлений научно-практических исследований XII пятилетки. Первые сообщения об описторхозе на территории Беларуси относятся к 1960 году. Описторхоз среди людей, проживающих на территории республики Беларусь, выявляется преимущественно в населённых пунктах, расположенных в бассейнах рек Сожа, Припяти, Днепра, Березины, Западной Двины. На этих же территориях выявляется наибольшая поражённость личинками описторхисов моллюсков рода Bithynia - промежуточные хозяева и пресноводных семейства карповых рыб - дополнительные хозяева. Так как личинки паразитов находятся непосредственно в мышцах речной рыбы, то заражение окончательных хозяев - человека и млекопитающих - происходит при употреблении в пищу сырой, малосоленой, вяленой или недостаточно термически обработанной рыбы, содержащей инвазионные личинки, а также при ее разделке (в случае использования ножа, тарелки, разделочной доски для других целей) происходит загрязнение разделочного инвентаря и обсеменение других продуктов.

Основной источник описторхоза - больной человек и животные, с калом которых яйца паразитов попадают в воду, где их заглатывают улитки, в которых происходит размножение личинок паразита, заканчивающееся выходом в воду личинок-церкариев. Церкарии проникают в карповых рыб (карп, карась, пескарь, жерех, красноперка, сазан, язь, елец, плотва, уклейка, лещ, линь, толстолобик, чебак). Причиняемый данным гельминтозом в различных регионах социально-экономический ущерб от года в год возрастает, что не может не отразиться на общем уровне здоровья местного населения. Известно, что в любой паразитарной системе необходимо предотвратить инвазию окончательного хозяина. В случае описторхидозов необходим контроль степени инвазированности дополнительных хозяев рыб семейства карповых: язь, елец, чебак, плотва европейская, вобла, линь, краснопёрка, сазан, лещ, жерех, усач, подуст, уклейка, карась и др.

Актуальность проблемы описторхоза взрослых и детей определяется широтой распространенности инвазии, тяжестью вызываемой патологии, и ее хроническим течением. Распространенность инвазии, продолжительность жизненного цикла паразитов (30 лет и более) в организме хозяина, многообразие вызываемых ими клинических проявлений, серьёзность осложнений определяют актуальность и важность данной проблемы, необходимость поиска путей её решения.

Целью настоящей работы явилось в сравнительном аспекте определить степени инвазированности метацеркариями описторхид рыб семейства карповых в водоемах и реках на территории города Гомеля и Гомельского района.

Практическая необходимость и ценность данной работы состоит в том, что, так как из-за отсутствия надлежащего медико-санитарного и ветеринарного контроля в водоемы и реки попадает значительное количество инвазионного материала, то важно выяснить интенсивность инвазии дополнительных хозяев описторхид в условиях человеческой деятельности и на основании проведенных исследований подготовить предложения по улучшению проведения ветеринарно-санитарной экспертизы и оценки рыб семейства карповых в данных биотопах.



1. Обзор литературы

1.1 Краткий исторический обзор

Сегодня существует большое количество инфекционных болезней - обширная группа заболеваний человека, вызванных патогенными вирусами, бактериями (в том числе риккетсиями и хламидиями) и простейшими. Ежегодно от заразных (инфекционных и инвазионных) болезней в мире умирает свыше 17 млн. человек. Это побудило политиков и особенно организаторов здравоохранения осознать, переосмыслить и изменить отношение к инфекционной и инвазионной патологии. Переосмысливание этой проблемы началось с публикации всемирного банка «Инвестиции в здравоохранение», указавшей доминирующее положение диареи, туберкулеза, ишемической болезни сердца, кишечных гельминтозов в этиологической структуре ущерба здоровью людей, а также существенное отличие этих показателей от расхожих сообщений на страницах популярных и медицинских изданий.

В последней четверти XX и начале XXI века медицинская и биологическая науки зарегистрировали более 30 новых болезней людей, причиной которых оказались живые возбудители. Ряд из этих болезней не абсолютно новы для медицины, т.к. они ранее считались незаразными, а в настоящий период при них удалось установить специфических возбудителей. В эту группу болезней отнесены язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, цирроз печени, короносклеоз. Отдельные, ранее значившиеся не инфекционными, болезни в современных условиях связывают с возбудителями паразитозов.

Сущность инфекционных болезней состоит в том, что они развиваются вследствие взаимодействия двух самостоятельных биосистем - макроорганизма и микроорганизма, каждый из которых обладает собственной биологической активностью. Инфекционные болезни сопровождают человека с момента его становления как вида. По мере возникновения общества и развития социального образа жизни человека многие инфекции получили массовое распространение.

Международное агентство по исследованию рака к первой группе канцерогенов человека относят возбудителя описторхоза - Opistorchis viverini. Установлены онкогенные свойства и у Opisthorchis felineus в зоне гиперэндемии описторхоза.

Всемирная Организация Здравоохранения сообщает, что по массовости проявления третье и четвертое место занимают паразитарные болезни и особенно кишечные гельминтозы. Гельминтозы (helminthoses) - группа болезней, вызываемых паразитическими червями - гельминтами (от греч. helmins, helminthos - паразитические черви). Паразитические черви, или гельминты, чрезвычайно распространены в природе и могут вызывать у человека и животных тяжелые заболевания. В организме человека паразитирует более 250 видов гельминтов. Они могут встречаться практически в любых органах: пищеварительном тракте, легких, мышцах, мочеполовой системе, кровеносных сосудах, головном мозгу, глазном яблоке и даже в полостях трубчатых костей. Глистные инвазии нередко приводят к серьезным нарушениям функций организма, патологическим изменениям органов, сильной интоксикации. Возникшие патологические процессы могут оказаться необратимыми и привести к смертельному исходу.

Гельминтологическая наука зародилась в странах Западной Европы, где среди населения были широко распространены глистные инвазии. Особенно часто встречались заболевания, заражение которыми происходило при употреблении в пищу блюд из полусырых рыбных или мясных продуктов. Этому способствовали традиции национальной кухни (жарка говяжьих и свиных туш на вертеле, приготовление ростбифа «с кровью» и т.п.).

У ведущих западноевропейских гельминтологов (Брауна, Фурмана, Райе и др.) в 1912-1914-х годах стажировался основоположник отечественной гельминтологии Константин Иванович Скрябин (1878-1972). После окончания в 1905 г. Ветеринарного института в Юрьеве (Дерпт, ныне - Тарту) он работал ветеринарным врачом в Чимкенте, а затем в Аулие-Ата (современный Джамбул). Тогда и определился окончательно его интерес к изучению паразитических червей. Собрав богатейшую коллекцию гельминтов сельскохозяйственных животных, Константин Иванович сначала получил прикомандирование к ветеринарной лаборатории в Петербурге. Затем он на два года был направлен на стажировку к профессорам-гельминтологам в Германию, Францию и Швейцарию. Всю свою долгую жизнь Константин Иванович отдал любимому делу - становлению и развитию гельминтологии в нашей стране.

Гельминтология (от греч. Helmins-паразитический червь и logos-слово, наука), наука, изучающая мир паразитических червей и вызываемые ими заболевания человека, животных или растений. Гельминтология в одной своей части является отраслью зоологии; с другой стороны, изучая болезненные процессы, которые разыгрываются в организме хозяина под влиянием глистной инвазии. Являясь частью комплекса паразитологических наук, гельминтология тесно связана одновременно с многими другими биологическими науками (прежде всего с зоологией), медициной, ветеринарией и фитопатологией. Гельминтология решает различные проблемы как теоретические, так и прикладного характера. К основным теоретическим проблемам относятся: выяснение путей происхождения паразитизма у гельминтов, изучение их исторического развития и познание закономерностей взаимоотношений гельминтов с организмом хозяина, в котором они паразитируют [2].

Водная среда города Гомеля и Гомельского района представлена многочисленными озерами и прудами, экологическое состояние которых регулярно отслеживается. Однако в системе экологического мониторинга за водоемами отсутствует контроль за паразитологической ситуацией в них.

Многочисленные водоемы города Гомеля и района изобилуют рыбами семейства Cyprinidae, которые являются источником инвазии для птиц и млекопитающих. Именно эти озера и пруды служат местом любительского лова рыбы и имеют важное эпидемиологическое значение.

Таким образом, исследование гельминтологической ситуации в городских и районных водоемах имеет очень важное значение, так как паразиты рыб нередко наносят вред своим хозяевам. Они приводят к замедлению роста, снижают вес, ухудшают вкусовые качества рыбы, а также вызывают ее гибель. Кроме того, рыба, являясь не только ценным пищевым продуктом питания, но в ряде случаев она может служить и служит источником заражения человека, птиц и плотоядных животных такими паразитарными заболеваниями как описторхоз, меторхоз. Среди тремато-дозов человека наиболее часто регистрируется описторхоз - тяжелое заболе-вание печени и желчных протоков. А чтобы не допускать или, по крайней мере, снизить риск заражения человека и животных, требуется знать особенности биологии паразитов, циклы их развития. Немаловажную роль играет грамотность населения в вопросах гельминтологии. Какие бы усилия в борьбе с глистными инвазиями ни предпринимали специалисты, они не дадут желаемого результата, если широкий круг людей будет оставаться невежественным в этой области.

Подавляющее же большинство населения по существу почти ничего не знает о том, какую серьезную опасность представляют паразитические черви и насколько реален риск заражения ими. Широкая реклама лекарств, в том числе и зарубежных глистогонных препаратов, создает иллюзию, будто каждый способен самостоятельно избавиться от глистных инвазий. Некоторые люди без консультации с врачом начинают принимать такие препараты даже с целью профилактики. Между тем, универсальных глистогонных средств быть не может. Прежде чем приступить к изгнанию паразита необходимо правильно его определить и в зависимости от этого назначить лечение. Поставить диагноз может только специалист. Неправильное применение глистогонных препаратов нередко наносит непоправимый ущерб организму и подрывает иммунную систему. Наконец, в ряде случаев глистные инвазии не могут быть излечимы терапевтическими методами и требуют хирургического вмешательства.

Важнейшим звеном в борьбе с гельминтозами и их профилактике должна стать пропаганда гельминтологических знаний. Для этого нужны грамотные специалисты в данной области. Наряду с медиками, учеными-гельминтологами, большая роль отводится учителям биологии средних школ. Пока, к сожалению, в школах нередко относятся к биологии как к второстепенному предмету. Проводимые на базе педагогического института городские школьные олимпиады по биологии показали, что большинство участников имеет смутное представление о паразитических червях. На изучение гельминтологического материала в школах нужно обратить самое серьезное внимание.

Впервые в 1891 году профессор Томского университета Виноградов К.Н. назвал этого паразита Disttomum sibiricum Vinogradov, 1891 [6]. В дальнейшем эта трематод была отнесена к роду семейства Opisthorchidae Braun и получила название O. felineus, 1901 [6]. Описторхоз (болезнь Виноградова) - пероральный биогельминтоз, природно-очаговая инвазия. Окончательные хозяева паразитов и источники возбудителей - человек, кошки, лисы, собаки, песцы, выделяющие с фекалиями яйца гельминтов. Промежуточные хозяева - пресноводные моллюски - Bithynia laechi, дополнительные хозяева - карповые рыбы. Человек заражается описторхозом при употреблении в пищу сырой (строганина), малосоленой или слабопровяленной рыбы, содержащей живые личинки гельминта ~ метацеркарии.

Трематодозами называются гельминтозы, вызываемые паразитически-ми червями, относящимися к классу Trematoda (сосальщики): двуусткой кошачьей, или описторхом - описторхоз, двуусткой китайской - клонорхоз, двуусткой печеночной - фасциолез, двуусткой легочной - парагонимоз, двуустками кровяными, или шистосомами - шистосоматозы и другими сосальщиками - прочие трематодозы.

Возбудители трематодозов - плоские черви из класса сосальщиков (Trematoda) имеют листовидную или ланцетовидную форму тела, которое покрыто кутикулой. Органами прикрепления служат мускульные присоски. Одна из них располагается на переднем конце тела (ротовая присоска). На ней открывается ротовое отверстие. Вторая присоска, лежащая на брюшной стороне, служит только для фиксации.

Все трематоды, кроме представителей семейства Schistosomatidae, - гермафродиты. Промежуточными хозяевами для всех трематод являются различные виды моллюсков (1-й промежуточный хозяин), а для некоторых также рыбы или крабы (2-й промежуточный хозяин). В промежуточных хозяевах развиваются личиночные стадии паразитов. При наличии одного промежуточного хозяина (Fasciola hepatica) из моллюска выходят личинки -

церкарии, которые инцистируются на растениях, растущих в воде. При заглатывании таких цист (адолескариев) травоядные животные, а иногда и человек, заражаются фасциолезом. Церкарии шистосом активно внедряются в тело человека через кожные покровы и слизистые оболочки. При наличии двух промежуточных хозяев (Орisthorchis felineus) церкарии проникают во второго промежуточного хозяина (рыбу) и инцистируются в его теле (метацеркарии).

Современные ареалы видов этого семейства образуют почти непрерывный шлейф в Европе, Западной и Восточной Сибири, на Дальнем Востоке и в Юго-Восточной Азии [5]. Наиболее интенсивные очаги описторхоза в России существуют в бассейнах рек Иртыша, Оби, Камы, Волги, Дона, а также в районах Западной Сибири, Казахстане.

Все виды, входящие в этот класс (cосальщики или трематоды) являются паразитическими организмами, которые поселяются во внутренних органах беспозвоночных и позвоночных животных, в том числе в организме человека. Заражение основного хозяина происходит при поедании им травы с заливных лугов (для животных), немытой зелени и овощей (для человека). Обычно человек заражается при поедании щавеля и кресс-салата. На зеленых растениях располагаются адолескарии - инцистированные на листьях церкарии.

После попадания в кишечник окончательного хозяина личинка освобождается от оболочек, пробуравливает стенку кишки и проникает в кровеносную систему, оттуда - в ткань печени. С помощью присосок и шипиков, фасциола разрушает клетки печени, что вызывает кровотечение и формирование цирроза в исходе заболевания. Печень увеличивается в размерах. Из печеночной ткани паразит может проникать в желчные ходы и вызывать их закупорку, появляется желтуха. Паразит достигает половой зрелости через 3-4 месяца после заражения и начинает откладывать яйца, находясь в желчных ходах. В состав класс входит около 4000 видов [3].

Некоторые районы мира отличаются преимущественным распространением характерных именно для них паразитических организмов. Речь идет о природно-очаговых болезнях, в число которых входят и гельминтозы, вызываемые представителями всех классов паразитических червей. Так лентец широкий (класс Ленточные), заражение которым происходит через полусырую рыбу, особенно часто регистрируется в Карелии (63% от общего числа обнаруженных глистных инвазий) и вовсе не встречается вне озерных и речных районов. То же можно сказать и о трематодозах [5,7].

На Дальнем Востоке в бассейнах рек Амура, Уссури и других постоянно встречаются трематодозы печени, вызываемые двуусткой китайской (Clonorchis sinensis).Эта же инвазия получила чрезвычайно широкое распространение в странах Юго-Восточной Азии. В южном Приморье России, в Японии и некоторых других регионах распространен парагонимоз (Paragonimus westermani). Список этот можно продолжить [7].



1.2 Общая характеристика возбудителей трематодозов

Для трематод характерно развитие с превращением (имеются личиночные стадии) и сменой хозяев. Паразитируют во внутренних органах животных и человека, личинки - обычно в органах различных беспозвоночных, в особенности моллюсков. Подавляющее большинство трематод имеют две присоски - ротовую и брюшную. Ротовая служит для фиксации паразита в органах хозяина и потребления пищи, брюшная - только для фиксации. Раньше считали, что брюшная присоска тоже участвует в поглощении пищи, поэтому у данного класса есть второе название - двуустки (двуротые). Тело двуустки плоское, суженное спереди. Длина 8-14 мм, ширина 1,2-3,5 мм, гермафродит. Яйца семечковидной сильно варьирующей формы, асимметричные бледно-желтого цвета, слегка сужены на одном из полюсов. На суженом полюсе находится крышечка, на другом конце яйца имеется бугорок (прилож. 2). Размер яйца 0,021-0,035 x 0,012-0,019 мм. Половая система у большинства гермафродитна, плодовитость чрезвычайно высока.

Прежде чем перейти к изучению биологии паразитических червей, рассмотрим ряд основных понятий. В паразитологии принято организм, за счет которого существует паразит, называть хозяином. Название паразитарных болезней образуется от слов, означающих родовую принадлежность паразита, с добавлением суффикса «оз» (например, описторхоз - от Opisthorchis).

Окончательным, или дефинитивным хозяином является тот организм, в котором обитает половозрелый паразит.

Организмы, в которых обитают личинки паразитов, служат промежуточными хозяевами.

Если имеется два промежуточных хозяина, то второго обычно называют дополнительным.

Развитие от момента зарождения до достижения половой зрелости представляет собой биологический цикл. В циклы развития некоторых паразитических червей вклиниваются резервуарные хозяева. В отличие от окончательных и промежуточных, они не являются обязательным звеном в жизненном цикле и развитие может осуществляться без их участия.

Одна из биологических особенностей трематод - чередование поколений. У этих организмов размножаются не только половозрелые формы, но и личинки. Размножение личинок во много раз увеличивает численность паразита. Наиболее обычный цикл развития трематод представлен на рисунке 1.

Половозрелые трематоды, или мариты, обитают в различных органах позвоночных животных, но чаще всего в пищеварительном тракте и связанных с ним железах. Тело половозрелых трематод (марит) в большинстве случаев сплющено в дорзо-вентральном направлении, имеет листовидную, ланцетовидную, иногда округлую форму. Длина их колеблется от одного миллиметра до нескольких сантиметров. Органы фиксации представлены присосками, обычно их две, что и послужило основанием для другого названия сосальщиков - двуустки. Тело покрыто кутикулой. Под ней расположены мышцы. Таким образом, у сосальщиков имеется выраженный кожно-мускульный мешок, внутри которого расположены все внутренние органы [10].

Полости тела между внутренними органами и кутикулой нет: все пространство заполнено рыхлыми паренхиматозными клетками. Пищеварительная система неполная. Есть два отдела пищеварения: передняя и средняя кишка. Передняя начинается ротовой присоской, задняя заканчивается слепо. Таким образом, через ротовое отверстие пища поступает в организм, через него же происходит удаление непереваренных остатков.

Вторая присоска к органам пищеварения отношения не имеет. Она является лишь органом фиксации.



Рисунок 1 - Треххозяинный цикл развития трематод

Чаще всего (за исключением шистосом) сосальщики являются гермафродитами. Мужской половой аппарат представлен парой семенников. От каждого из них отходит по одному семяпроводу, которые, сливаясь, образуют непарный канал. Конечная часть этого канала в особый мышечный орган, открывающийся на поверхности тела. Во время совокупления этот орган (циррус) выпячивается и внедряется в матку другой особи: т.о. оплодотворение у них перекрестное. Женский половой аппарат имеет более сложное строение. В его центральную камеру - оотип открываются яичники, семяприемник, желточники и тельца Мелиса. Секрет последних облегчает продвижение яиц к половому отверстию. От оотипа отходит непарная матка, открывающаяся наружу рядом с отверстием мужской половой системы. Матка выполняет двоякую функцию. Она выполняет функции влагалища, она же служит для хранения и выделения зрелых яиц наружу.

Другие внутренние органы в процессе становления паразитического способа существования подверглись редукции. Паразит «передоверил» почти все функции своему хозяину. Лишь функция размножения им осуществляется в полной мере, о чем свидетельствует и сложность строения половой системы. То, что сосальщики сохранили сравнительно примитивную пищеварительную систему, свидетельствует о том, что к паразитированию, как способу существования, они перешли сравнительно недавно.

Яйца трематод имеют плотную оболочку. Величина их различна: от 27-35 х 11-19 ммк у кошачьей и китайской двуусток до 130-145 х 70-80 ммк у печеночной двуустки. На одном из полюсов яйца имеется крышечка, на другом - утолщение оболочки: называемое шипиком. Шипик может занимать на полюсе центральной место, но может быть и смещен в сторону. Такое строение яиц насколько типично для сосальщиков, что сходные с ними яйца лентецов обозначаются, как «яйца трематодного типа».

Как видно, трематоды развиваются с одним или двумя промежуточными хозяевами. Первым промежуточным хозяином всегда является моллюск, вторым - разные виды позвоночных и беспозвоночных животных. У всех сосальщиков на первом этапе - после выделения из организма окончательного хозяина яйцо обязательно должно попасть в воду. Только там возможен контакт с моллюсками. Уже при выделении из матки сосальщика яйцо содержит зародыш, покрытый ресничками - мирацидий. Это молодая личинка. После раскрытия крышечки мирацидий покидает яйцевые оболочки и попадает в воду. Затем он активно внедряется в тело промежуточного хозяина - моллюска. Может мирацидий попасть в тело моллюска и пассивно, через его пищеварительный тракт. В теле моллюска мирацидий сбрасывает реснички и превращается в следующую личиночную стадию - спороцисту. В спороцисте образуются редии. В них происходит бесполое размножение и формируются наиболее зрелые личинки - церкарии. Последние по многим чертам строения (присоски, пищеварительный тракт) напоминают половозрелых сосальщиков. Церкарии всех видов сосальщиков имеют хвостовой придаток. Они активно покидают тело моллюска и попадают в воду. Церкарии некоторое время плавают в воде. После этого они либо проникают в тело дополнительного или окончательного хозяина, либо прикрепляются к растениям.

Дальше пути развития у различных видов трематод идут в разных направлениях. Церкарии одних видов могут активно проникнуть в тело окончательного хозяина и превратиться в половозрелых особей (шистосомы). Другие теряют хвост, инцистируются и превращаются в адолескариев. Проглоченные дефинитивным хозяином, они превращаются в половозрелых паразитов. Такой цикл проходит печеночная двуустка.

Иной путь: церкарии попадают в тело второго промежуточного хозяина и в организме дополнительного хозяина церкарии превращаются в следующую личиночную стадию - метацеркарии. Вторыми (дополнительными) промежуточными хозяевами являются различные виды рыб и ракообразных и нападают на рыб, преимущественно карповых (лещ, плотва, карп, красноперка и др.). Через кожные покровы церкарии активно внедряются в мышечную и соединительную ткани рыб, инцистируются (покрываются оболочкой) и превращаются в метацеркарии. Вместе с их тканями метацеркарии попадают в организм окончательного хозяина и там достигают половой зрелости (двуустки кошачья, китайская, легочная). Метацеркарии в сущности представляют собой недоразвитию мариту и уже характеризуются многими чертами строения, свойственными данному виду [12].

Таким образом, адолескарии и метацеркарий, попадая в организм окончательного хозяина через рот. Церкарии это активно внедряются через кожу и слизистые. В этом случае отсутствует дальнейший личиночный метаморфоз.

Описторхоз у человека может протекать очень тяжело. Поражается печень, а из-за нарушения ее функции и весь организм. Человек заражается, употребляя в пищу плохо проваренную или не прожаренную рыбу. Заболевание было очень распространено в Сибири, где бытует традиция употреблять в пищу строганину - сырую замороженную рыбу. В 1929 г. гельминтологическая экспедиция под руководством К.И. Скрябина обнаружила почти стопроцентное заражение населения Тобольского севера. Описторхоз был выявлен даже у детей, не достигших годовалого возраста.

Врач Н.Н. Плотников, вскрыв труп северянина, погибшего от описторхоза, насчитал в его печени свыше 25 тысяч паразитов. В то время еще не был полностью расшифрован цикл развития паразита, были известны только дополнительный и окончательные хозяева. Не были также разработаны и методы лечения описторхоза. Н.Н. Плотников серьезно занялся терапией данного заболевания. На протяжении почти 35 лет он вел большую экспериментальную работу, и его труды увенчались полным успехом.

Заболевания, вызываемые трематодами, называются трематодозами. Многие из них представляют серьезную опасность для животных и человека, но описторхоз теперь излечим. Знание общих закономерностей биологического цикла развития трематод и путей их проникновения в организм окончательного хозяина в значительной степени обеспечивает научный подход к планированию профилактических мероприятий и разработке новых эффективных методов лечения.

1.3 Исследование рыбы на зараженность метацеркариями О. feliпeus

Методика работы с метацеркариями трематод не имеет принципиальных отличий от методики изучения их половозрелых форм - марит [12]. Сходны методы фиксации, приготовления постоянных и временных препаратов, применения витальных красителей. К специфике работы с метацеркариями можно пожалуй отнести только методы эсцистирования (выделения метацеркарий из цист). Общий порядок работ с метацеркариями, включая фиксаторы, красители, среды для эксцистирования, приводятся в недавно опубликованной монографии В.Е. Сударикова [12].

Метацеркарии описторхид, как уже было отмечено, обнаруживаются только в рыбах семейства карповых. Но и для них характерна весьма различная восприимчивость к заражению. Эту особенность следует учитывать при отборе рыб для исследования. Наилучшим индикатором неблагополучия водоема относительно описторхозной инвазии служит язь. Затем по убывающей располагаются елец, линь, красноперка, плотва, лещ и др. Карп и сазан (казалось бы, наиболее "карповые из карповых") не заражаются O.feliпeиs, что связано с некоторыми их биохимическими особенностями. Естественно, что для полной характеристики ситуации в отношение необходимы сведения о пораженности всех дополнительных хозяев возбудителя описторхоза на исследуемой территории. Однако в первую очередь необходимо исследовать рыб - наиболее вероятных носителей метацеркарий О. feliпeus. Предпочтение при исследовании на наличие метацеркарий Opisthorchis felineus целесообразнее отдавать рыбам старших возрастных групп, так как личинки паразитов живут несколько лет, и их число увеличивается с возрастом рыб.

Для получения объективной характеристики водоема по фактору инвазированности второго промежyточноro хозяина, необходимо исследовать 5-10 и более экземпляров каждого вида рыб промыслового размера. При исследовании молоди эта цифра должна быть увеличена в 2-3 раза. Если обследуется небольшая речка или озеро, полученные результаты можно экстраполировать на весь водоем. Для характеристики больших озер, озерной системы или рек протяженностью в несколько сотен и более километров, исследование рыб должно быть проведено в нескольких пунктах. Опыт подобных работ на многих реках, показал, что такие пункты должны отстоять один от другого примерно на 70-100 км.

Сохранять свежевыловленную рыбу до исследования следует в охлажденном состоянии (в холодильнике), не допуская кристаллизации, либо в слегка подвяленном на воздухе виде не более 3-5 дней. Замороженная рыбопродукция (сырье, полуфабрикаты и готовые изделия) до исследования хранится при температуре и в условиях согласно нормативно-технической документации на нее.

Непосредственно перед исследованием мороженую рыбную продукцию размораживают до температуры не ниже 0 град. C в толще тела рыбы. При исследовании вяленой, соленой и копченой рыбы ее предварительно вымачивают в течение суток до размягчения мышц, меняя воду каждые 4-6 ч.

Метацеркарии трематод не видны невооруженным глазом, поэтому выявление личинок производят с использованием оптических средств путем исследования органов и тканей рыб - мест наиболее вероятной их локализации. Личинки описторхисов чаще всего инцистируются в подкожной клетчатке и верхнем слое мышечной ткани (2-4 мм) в области спины рыбы, реже в плавниках, на жабрах, в чешуе. Уточнение видовой принадлежности личинок гельминтов ведется с применением световых микроскопов типа МБС, Биолам или других.

Для выявления зараженности рыбы метацеркариями описторхид применяют компрессорный метод или переваривание мышц в искусственном желудочном соке. Первый метод более удобен в полевых условиях или когда необходимо просмотреть большое количество рыбы, второй - при необходимости сбора в лабораторных условиях большого числа метацеркарий (например, для экспериментов но последующему заражению дефинитивных хозяев).

1.3.1 Компрессорный метод исследование рыбы на зараженность

Основным местом локализации метацеркарий описторхов служит подкожный слой мышц, в котором обычно размещается 80-95% всех имеющихся в рыбе личинок. Распределение личинок и по длине тела неравномерно (рис. 2).

У молодых рыб (до 1 года) метацеркарии концентрируются в хвостовом стебле. У старших возрастов - в передней и средней третях спины: соответственно 27 и 32%. Используя эту особенность топографии метацеркарий О. feliпeus, можно исследовать не все мышцы рыб, а лишь только участки с максимальным содержанием личинок. Это даст значительную экономию времени. Просмотр таким методом большого количества рыб промыслового размера позволит получить за короткое время более точную картину зараженности их личинками возбудителя, чем просмотр всех мышц, но меньшего количества рыб.

Подлежащую исследованию рыбу определяют до вида, измеряют ее длину от конца рыла до начала лучей хвостового плавника и устанавливают

возраст по чешуе (либо берут пробу чешуи для определения возраста в лаборатории). Все данные заносят в специальный журнал, где отмечаются также дата и место добычи рыбы. Затем, освободив от чешуи среднюю часть

тела рыбы, ланцетом надрезают кожу по средней линии спины, а двумя вертикальными надрезами от первого разреза до боковой линии оконтуривают участок средней трети спины. Удалив с него кожу, острым ланцетом срезают слой мышц толщиной 2-3 мм и просматривают в комприссории с помощью микроскопа "МБС" или препаровальной лупы. Вполне достаточно увеличение 15-20x. Более сильные оптические системы дают малое поле зрения, затрудняющее просмотр мышц.

Использование стандартных компрессорных стекол с винтовыми зажимами нецелесообразно, поскольку отнимает много времени и затрудняет извлечение из среза найденных метацеркарий. Наиболее удобны компрессорные стекла из обычного оконного стекла. Нижнее - размером примерно 10x15 см, верхнее - чуть больше стандартного предметного.

Приготовленный срез помещают в верхней части нижнего стекла в каплю воды.

Углом стекла отсекают от него небольшие кусочки мышц и, плотно сдавив их между стеклами, микроскопируют. При подсыхании их следует увлажнять водой из пипетки. Для манипуляций с живыми личинками нужны тонкие препаровальные иглы, которые легко изготовить из самых тонких энтомологических булавок, дополнительно заостренных на мелкозернистом бруске.

А Б

Рисунок 2 - Количество метацеркарий О. feliпeus в различных участках тела рыбы: А - примерное соотношение (в %) обнаруживаемых метацеркарий: 1 - 45 %; 2 - 20 %; 3 - 10 %; 4 - 5% (по С.А. Беэру, неопубликованные данные); Б - участки тела рыбы, содержащие различное число метацеркарий, от максимального (1) до минимального (3) (по В.В. Звягиной, 1995).

Такими булавками нетрудно разорвать оболочку цисты и извлечь из нее личинку. Выбирать метацеркарий удобней не совсем изолированных, а с маленькими кусочками мышц, что облегчит дальнейшую работу с ними.

В случае отсутствия личинок трематод в первом срезе следует просмотреть мышцы с аналогичного участка другой стороны тела, при отрицательном результате - подкожные мышцы спины с участка, расположенного ближе к голове.

При исследовании молоди рыб длиной до 20-25 мм их компрессуют целиком. Более крупных сеголеток распластывают на две половинки и просматривают в компрессории со стороны разреза, не снимая кожи и не освобождая от чешуи. Подсыхающие срезы, препараты увлажняют водой или физиологическим раствором из пипетки.



1.3.2 Упрощенный способ определения интенсивности инвазии язей промысловых размеров

Данный способ предложен В.В. Звягиной. Для изучения локализации метацеркарий в средней трети спины исследуемой рыбы делали вырезку толщиной 3-4 мм. Вырезку разделяли в продольном направлении на три равных участка: верхний, средний и нижний (рисунок 2, Б). Определяем процентное соотношение распределения метацеркарий по выделенным участкам к количеству их в средней трети спины и к общему количеству личинок в рыбе, определяемого по общепринятой методике.

Таблица 1- Распределение метацеркарий по участкам тела рыбы

№ п/п	Локализация метацеркарий	Процентное соотношение к числу личинок в средней трети спины	Процентное соотношение к общему числу метацеркарий в рыбе
1	Верхний участок	66,1 ± 9,2	10,5 ± 1,6
2	Средний участок	13,5 ± 5,2	2,2 ± 0,9
3	Нижний участок	21,2 ± 6,4	3,4 ± 1,0

Полученные результаты показали неравномерное распределение метацеркарий по участкам средней трети спины язей промысловых размеров. Основная масса личинок сосредоточена в верхнем участке от общего числа метацеркарий в тканях рыбы и это количество составило 10,5% (таблица 1).

1.4 Определение метацеркарий и их описание

Состав метацеркарий, паразитирующих в мышцах рыб, довольно разнообразен. Помимо описторхид нередко, (особенно на озерах, где живет много рыбоядных птиц), встречаются представители семейств Shigeidae, Diрlоstошаtidае, Cyathocotylidae, Clinostomatidae, Echinostomatidae, Heterophyidae. Если работа проводится с "эпидемиологическим акцентом", не лишне подчеркнуть, что метацеркарии перечисленных семейств безопасны для человека.

Все паразитирующие в мышцах рыб метацеркарии имеют шарообразную форму и окружены прозрачными или полупрозрачными оболочками. Характерным признаком метацеркарий описторхид служит наличие овального экскреторного пузыря. В компрессории, при микроскопировании в проходящих лучах света, он виден черным пятном, занимающим заднюю часть тела личинки. При пользовании искусственным источником освещения экскреторный пузырь приобретает золотистый цвет и виден хуже, чем при естественном освещении.

1.4.1 Метацеркария О. feliпeus

Определение трематод до вида по строению цисты возможно только при достаточном навыке исследователя. В противном случае для уточнения видовой принадлежности трематод целесообразно извлечь метацеркарию из цисты.

Тщательно отделенную от окружающих тканей цисту помещают на стекло в каплю воды или физиологического раствора. Оболочку ее разрывают тонкими иглами (лучше энтомологическими булавками N 00) или легким надавливанием покровного стекла. Если при этом личинка сама не выходит из цисты, то ее вымывают водой из пипетки. Выход метацеркарий из цист можно стимулировать, воздействуя дуоденальным содержимым человека или животных или трипсином.

При обнаружении личинок описторхисов в рыбной продукции, в т.ч. при оценке эффективности ее обеззараживания, необходимо определить их жизнеспособность, т.к. потенциальную опасность для здоровья человека представляют только живые личинки гельминтов.

В первую очередь можно ориентироваться на морфологические признаки и двигательную активность. Метацеркарий описторхисов, выделенных из тканей рыбы с помощью препаровальной иглы, помещают в каплю теплой воды или физиологического раствора (37-40 град. C) на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют под малым и большим увеличением микроскопа. Явное нарушение целостности оболочек цист, грубые изменения внутреннего строения личинки, распад ее содержимого, разрушение экскреторного пузыря являются признаками гибели метацеркарий. Наличие даже самых слабых самостоятельных движений личинки свидетельствует о ее жизнеспособности. Отсутствие движения еще не свидетельствует о гибели. Движение можно стимулировать слабым придавливанием метацеркарий покровным стеклом.

В компрессории личинка имеет круглую или слегка овальную форму. Ее размеры варьируют от 0,17 х 0,21 до 0,34 х 0,43 мм и зависят, видимо, как от возраста личинки, так и от интенсивности заражения рыбы. Две тонкие оболочки, окружающие метацеркарию, прозрачны, и через них личинка хорошо просматривается в компрессории. Длина самой личинки значительно больше диаметра цисты, поэтому она помещается в цисте только в изогнутом положении, которое постоянно меняется благодаря почти непрестанному движению личинки. Активность ее резко возрастает с повышением температуры (например, при легком подогреве компрессория).

Извлеченная из цисты личинка ланцетовидной формы. Поверхность передней ее части до заднего края брюшной присоски порыта тонкими шипиками. Вероятно, они легко выпадают, поскольку увидеть их удается лишь у живой, только что извлечений из цисты личинки. Длина метацеркарии в покое 0,22-0,62, ширина 0,12-0,27 мм. В расправленном состоянии она может достигать 1мм. Задняя часть тела почти целиком занята экскреторым пузырем. От переднего его края отходят два тонких экскреорных канальца, видимых до уровня глотки.

Ротовая присоска диаметром 0,071- 0,12 мм находится на переднем конце тела и несколько направлена на брюшную сторону. К заднему краю ротовой присоски примыкает глотка (0,025х0,046 мм). Хорошо выраженный пищевод раздваивается под острым углом на две ветви кишечника на середине расстояния между присосками либо чуть ближе к ротовой присоске. Обе ветви доходят до заднего конца тела.

Брюшная присоска (0,088х0,139 мм) больше ротовой. Расположена в задней половине тела, разделяя его в соотношении 1:0,5 - 1:0,7. При окраске личинок кармином можно увидеть зачатки половых желез в виде групп клеток, примыкающих с обеих сторон экскреторного пузыря к его стенкам. Наискось один к другому лежат семенники. У передней стенки экскреторного пузыря находится еще одна группа клеток - яичник и семенник. Вперед от них идут зачатки матки и семяизвергательного канала.

Как уже отмечалось, в качестве дефинитивного хозяина О. feliпeus зарегистрировано 33 вида млекопитающих 7 отрядов. Гельминты паразитируют у них в желчном пузыре и протоках печени, реже - в поджелудочной железе. Помимо О. felineиs в мышцах рыб встречаются метацеркарии еще нескольких видов семейства Opisthorchidae, паразитирующих в фазе мариты у млекопитиющих, хищных и водных птиц.

Metorchis bilis (= albidus) (рисунок 3, 2) - вид, морфологически наиболее близкий личинкам О. feliпeиs. Средняя величина цист несколько меньше, чем у предыдущего вида (от 0,13х0,19 до 0,16х0,23). Но, поскольку максимальные размеры цист одного вида совпадают с минимальными размерами другого, этот признак не может считаться надежным при их дифференциации. Тонкие оболочки прозрачны, между ними часто остается промежуток, что хорошо видно в компрессории. Подвижность личинки в цисте хорошо выражена, но все же менее чем у О. jeliпeиs. Треугольной формы шипики, ясно различимые при микроскопировании, покрывают переднюю часть тела до заднего края брюшной присоски. Экскреторный пузырь занимает не более 1/4 объема задней части тела. Извлеченная из цис-ты личинка достигает в длину 0,4-0,5 мм при ширине около 0,12 мм. Ротовая присоска (0,09 мм) крупнее брюшной (0,06 мм), расположенной немного сзади от середины тела и разделяющей его в соотношении 1:0,6 - 1:0,3. Мариты живут в различных млекопитающих (хищные и околоводные грызу-ны) и хищных птиц (канюки, луни).

...