Лікарські макроміцети у поверхневій та глибинній культурі

Ломберг М.Л. Лекарственные макромицеты в поверхностной и глубинной культуре. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.21 - микология. Институт ботаники им. М.Г. Холодного НАН Украины. Киев, 2005.

Диссертация посвящена исследованию биологических свойств культур макромицетов, известных своими лекарственными свойствами. Исследования роста вегетативного мицелия 52 видов (147 штаммов) лекарственных базидиомицетов в поверхностной и глубинной культуре, определение морфологических, культуральних, физиологических и молекулярно-биологических признаков вегетативного мицелия и условий воспроизведения стадии телеоморфы в чистой культуре, позволили получить новые для науки сведения о биологии отдельных видов и создать существенную базу данных для дальнейшего развития новых грибных биотехнологий в Украине.

Впервые количественно охарактеризована скорость радиального роста вегетативного мицелия 49 видов (136 штаммов), которые относятся к 27 родам отдела Basidiomycota, установлена зависимость скорости роста культур от состава агаризованных питательных сред и температуры инкубации, определена их жизнеспособность при критически низких (+4єС) и высоких (+37єС) температурах. Для большинства исследованных штаммов определены наиболее благоприятные питательные среды и диапазон температур, которые обеспечивают максимальную скорость роста вегетативного мицелия.

Получены новые сведения о культурально-морфологических и молекулярно-биологических маркерных признаках отдельных ранее не исследованных видов и штаммов (Auricularia spp., Ganoderma lucidum, Hypsizygus marmoreus и др.). Новыми для науки являются данные скорости роста вегетативного мицелия (от 1,2 до 4 мм/сут или 0,05-0,17 мм/час), оптимальное значение кислотности среды (рН 7,2), микроморфологические (наличие хламидоспор и артроконидий на дикариотическом мицелии) и молекулярно-биологические характеристики малоисследованного и критического в таксономическом аспекте вида Hypsizygus marmoreus. По результатам проведенных исследований, включая характеристику нуклеотидних последовательностей ITS регионов рибосомальной ДНК, установлена принадлежность трех штаммов H. marmoreus (южноазиатского происхождения) и штамма H. tessulatus (северноамериканского происхождения) к одному и тому же виду - Hypsizygus marmoreus. Исследования культур вида G. lucidum разного географического происхождения показали, что несмотря на различные культуральные и физиологические характеристики (скорость роста, окраска колоний и их реверзума и др.), штамм европейського происхождения и штамм из Кореи по результатам молекулярно-биологических исследований относятся к одному виду - Ganoderma lucidum.

Охарактеризован рост и выход мицелиальной биомассы по источнику углеродного питания 19 видов (33 штаммов) лекарственных грибов на жидких средах з глюкозой и определены состав и кислотность сред, благоприятные для роста в глубинной культуре ряда перспективных для биотехнологии видов. Сведения относительно оптимальных значений рН среды для роста вегетативного мицелия культур видов Agrocybe aegerita (рН 6,3), Hypsizygus marmoreus (рН 7,2) та Grifola frondosa (рН 5,0_5,5 та 6,7) получены впервые.

Созданы научные основы технологии получения посевного мицелия и плодовых тел ряда новых для грибоводства Украины видов съедобных и лекарственных грибов. Отобраны наиболее перспективные штаммы таких ценных видов, как Agrocybe aegerita, Auricularia auricula-judae та A. polytricha, Flammulina velutipes, Ganoderma lucidum, Hericium erinaceus, Hypsizygus marmoreus, Lentinula edodes и др., установлены оптимальные условия получения физиологически-активного жидкого и субстратного посевного материала. Для селектированных штаммов определены наиболее благоприятные для роста мицелия температура инкубации, рН и состав агаризованных и жидких сред из числа таких, которые могут быть использованы в практике работ отечественных лабораторий. Показана эффективность применения жидкого посевного материала для сокращения (на 30-50%) времени производства посевного мицелия 10 видов лекарственных грибов. Подобраны простые и доступные субстраты для культивирования отобранных штаммов на отходах растениеводства Украины. Впервые показана возможность использования лузги семян подсолнечника в качестве универсального альтернативного субстрата для плодоношения видов, которые промышленно культивируют в мире на других лигноцелюллюлозных субстратах.

Полученные данные скорости роста вегетативного мицелия базидиальных грибов на агаризованных средах разного состава, благоприятным и критическим для роста значениям температуры и рН сред, а также культурально-морфологическим особенностям исследованных штаммов, хранящихся в Колекции культур шляпочных грибов Института ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины, используются при их паспортизации. Учитывая результаты лабораторных исследований и промышленных испытаний, разработаны и составлены "Методические рекомендации по культивированию лекарственного съедобного гриба Hypsizygus marmoreus (Peck) H.E. Bigelow интенсивным методом".

Lomberh M.L. Medicinal mushrooms in surface and submerged culture. - Manuscript.

Thesis for a candidate degree, speciality 03.00.21 - mycology. - M.G. Kholodny Institute of Botany, National Academy of Sciences of Ukraine. Kyiv, 2005.

The biological properties of vegetatives cultures of 52 species, 147 strains, of higher Basidiomycоtа with known medicinal properties are investigated. The growth rate of vegetative mycelium of 49 species, 136 strains, on a range of agar media at different temperatures is quantitatively characterized and the viability of these cultures at critical temperatures determined. On the basis of cultural, morphological and molecular-biological descriptions of some species certain marker characters were indicated |appearances|, important for identification and purity control of the cultures, and in particular|including| for consideration of critical questions regarding the taxonomy| of Hypsizygus marmoreus and Ganoderma lucidum species. For the first time the optimal pH of liquid nutrient media for mycelial growth of the important medicinal fungi|height| Agrocybe aegerita, Grifola frondosa and Hypsizygus marmoreus has been determined. The production of mycelial biomass for| 19 species, 33 strains, in submerged culture are described. The modification of synthetic liquid media with glucose and the conditions required to obtain physiologically active liquid inoculum for 10 practically important species are identified. Validity of the selection the strains with biotechnological potential has been proven by the results of comparative research of fructification, in particular of various cultures of Hypsizygus marmoreus and Ganoderma lucidum under commercial conditions at “Weser-Champignon” (Germany). The husk of sunflower seed was identified as a suitable alternative to traditional sawdust substrate for cultivation of investigated wood-inhabiting mushroom species.

Размещено на Allbest.ru