Скоротлива активність міометрію за умов впливу прозапальних цитокінів та при експериментальному імунному ушкодженні яєчників у мишей

Исследования проведены на 109 небеременных (8 недель, 16-18 г.) и 27 беременных самках мышей линии СВА с соблюдением всех требований относительно работы с лабораторными животными (Международная конвенция, Страсбург, 1986). Для анализа спонтанной сократительной активности яйцеводов и полосок миометрия применяли метод фазно- графического анализа.

Определяли максимальную амплитуду сокращения относительно базального тонуса (мН); продолжительность сокращения при 50%- ной амплитуде (сек); максимальную скорость сокращения (положительный пик первой производной сокращения, мН/с); максимальную скорость расслабления (отрицательный пик первой производной сокращения, мН/с). Экспериментальное иммунное повреждение яичников вызывали, иммунизируя мышей линии СВА введением белкового экстракта гомогенизированных яичников белых беспородных мышей. Для исследования мейотического созревание ооцитов из яичников мышей неферментативно (механически) выделяли ооциты, морфологически определяли состояние зачаточного пузырька; перивителинового пространства; цитоплазмы (плотность, степень гранулированости, признаки фрагментации и дегенерации). Для оценки морфологических особенностей ядерного матрикса, присущих апоптозу использовали флюоресцентные красители Хехст 33422 и пропидиум йодид. Вычисляли показатели пре- и постимплантационой гибели. Стадии развития пре- и постимплантационных эмбрионов определяли за (Манк А., 1990).

Установлено, что ФНОб, ИЛ-2 и ЕМАР ІІе уменьшают сонтанную сократительную активность миометрия. Так, в условиях действия ФНПб уменьшались величины амплитуды фазных сокращений в среднем на 18,89% (р<0,01), скорости сокращения 17,02% (р<0,05) и индекса сократительности на 29,85% (р<0,01). При действии ИЛ-2 уменьшались амплитуда сокращения на 16,65% (р<0,01), скорость сокращения на 18,65% (р<0,05) и индекс сократительности на 22,66% (р<0,05). При действии ЕМАР ІІе уменьшались амплитуда сокращения на 15,14 % (р<0,01), скорость сокращения и расслабления на 19,25% и 13,90 %, соответственно (р<0,05), индекс сократительности на 13,90%, (р<0,05).

Такой токолитический эффект обусловлен изменением системы L-аргинин - оксид азота (ферментов NO синтазы и аргиназы) и функционального состояния митохондрий, в частности аспартатного переносчика и мембранного потенциала. При этом ФНПб не вызывает изменения мембранного потенциала митохондрий; IЛ-2 и EMAP II вызывают снижение уровня мембранного потенциала митохондрий, что приводит к NO-зависимому открыванию поры неспецифической проводимости.

Показано, что сократительность миометрия в условиях изменения функционального состояния митохондрий уменьшается, а работа аспартатного переносчика в миометрии, в свою очередь, не зависит от входа кальция через Са унипортер в митохондрии, однако зависит от мембранного потенциала митохондрий, оксида азота и эстрадиола.

Установлено, что при экспериментальном повреждении яичников у мышей ухудшается функциональное состояние органов репродуктивной системы: нарушается мейотическое созревание ооцитов, увеличивается количество ооцитов с атипичной морфологией, изменяется спонтанная сократительная активность яйцеводов и миометрия, возрастают показатели смертности и задерживается развитие пре- и постимплантационных эмбрионов.

Полученные экспериментальные результаты и их анализ, а также данные литературы свидетельствуют о том, что иммунизация мышей аллогенным яичником является причиной активации иммунной системы, возникновения генерализированного воспаления, опосредствованного медиаторами воспаления, в частности каскадом цитокинов и монооксидом азота. Последние, в свою очередь, приводят к развитию синдрома системной реакции на воспаление, который и является причиной возникновения дисфункции органов репродуктивной системы, что проявляется в нарушении оогенеза, дисрегуляции сократительной функции яйцеводов и миометрия, а также угнетении развития эмбрионов и увеличении показателей эмбриональной смертности.

В диссертационной работе согласно поставленной цели исследования приведено теоретическое обобщение и представлено новое решение научного задания в раскрытии особенностей сократительной активности гладких мышц матки в условиях действия провоспалительных цитокинов, используя метод фазно- графического анализа. А также выяснены особенности процессов формирования гамет, сократительной активности яйцеводов и миометрия, развития эмбрионов в условиях экспериментального иммунного повреждения яичников у мышей, что является основой для аргументации роли исследуемых цитокинов в физиологии и патологии репродуктивной системы.

Ключевые слова: сократительная активность миометрия, цитокины, оксид азота, митохондрии, экспериментальное иммунное повреждение яичников, ооциты, яйцеводы, эмбрионы.

Annotation

Serdyuk O.M. Mice myometrial contractility under the condition оf influence proinflammatory cytokine and experimental immune ovarian failure. - Manuscript.

The dissertation on obtaining of scientific degree of a candidate biological sciences by speciality 03.00.13 - human and animals physiology. O.O.Bogomolets Institute of Physiology, NAS of Ukraine, Kyiv, 2011.

Dissertation is devoted to the study mice myometrial contractility by a method of phase-plot analysis under the condition оf influence proinflammatory recombinant cytokine: tumor necrosis factor alpha (TNF б), interleukin-2 (IL-2), cytokine-like endothelial monocyte-activating polypeptide II (EMAP IIе) and also at experimental immune ovarian failure. It was established, that stated above substances decreased of myometrial contractility. Such tocolytic effect is caused by change of system L-аrginin - oxide nitrogen (enzymes NO synthase and arginase) and a functional condition of mitochondrions, in particular aspartat carrier and membrane potential.

It was shown that myometrial contractility decreased under the condition оf change of a functional condition of mitochondrions, and function of aspartat carrier in myometrium, in turn, does not depend on a calcium input through Са uniport in mitochondrion, however depends from membrane potential of mitochondrion, oxide nitrogen and estradiol. It was established, that at experimental immune ovarian failure at mice the functional condition of organs of reproductive system worsens: it was disturb meiotic maturing of oocyte, the quantity oocyte with atypical morphology increases, alter spontaneous myometrial and oviduct contractility, increase of pre - and postimplantation embryos mortality indices and impeed of pre- and postimplantation embryos development.

Keywords: myometrial contractility, cytokine, oxide nitrogen, mitochondrions, experimental immune ovarian failure, oocyte, oviduct, embryos.

Размещено на Allbest.ru